JPH01285186A - 氷核形成活性をもつ微生物の回収方法 - Google Patents
氷核形成活性をもつ微生物の回収方法Info
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- JPH01285186A JPH01285186A JP1053066A JP5306689A JPH01285186A JP H01285186 A JPH01285186 A JP H01285186A JP 1053066 A JP1053066 A JP 1053066A JP 5306689 A JP5306689 A JP 5306689A JP H01285186 A JPH01285186 A JP H01285186A
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/02—Separating microorganisms from their culture media
-
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/04—Preserving or maintaining viable microorganisms
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、氷核形成活性（ｉｃｅ ｎｕｃｌｅａｔｉｎ
ｇ ａｃ−ｔｉｖｉｔｙ： ＩＮＡ）をもつ微生物を、
その微生物を含有する培地から、乾燥形態で回収する方
法に関する。
ｇ ａｃ−ｔｉｖｉｔｙ： ＩＮＡ）をもつ微生物を、
その微生物を含有する培地から、乾燥形態で回収する方
法に関する。
米国特許筒４．２００．２２８号明細書には雪を製造す
る方法が開示されており、この方法によれば空気中に噴
霧される小滴中に微生物が含まれている。
る方法が開示されており、この方法によれば空気中に噴
霧される小滴中に微生物が含まれている。
使用されている微生物は氷核形成を促進することが知ら
れている種類のものである。その結果、通常の温度より
可成り高い温度で雪を製造することができる。このプロ
セスに有用な代表的な微生物である。
れている種類のものである。その結果、通常の温度より
可成り高い温度で雪を製造することができる。このプロ
セスに有用な代表的な微生物である。
このプロセスをいかなる規模でも使用しようとすると、
多量の微生物を必要とすることは明白である。更に、微
生物は、その貯蔵、取扱及び運搬輸送を容易にするため
に、乾燥形態で得るのが望ましい。
多量の微生物を必要とすることは明白である。更に、微
生物は、その貯蔵、取扱及び運搬輸送を容易にするため
に、乾燥形態で得るのが望ましい。
氷核形成活性をもつ微生物の生長条件は当業界で知られ
ている０例えばＭａｋ ｉ及びＷｉｌｌｏｕｇｈｂｙの
Ｂａｃｔｅｒｉａ ａｓ Ｂｉｏｇｅｎｉｃ ５ｏｕｒ
ｃｅｓ ｏｆ ＦｒｅｅｚｉｎｇＮｕｃｌｅｉ、 ｊ、
Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍｅｔｅｏｒｇｙ １７＋ １０４
９〜１０５３頁には、シュードモナス・シマン°のよう
な微生物を２０℃より低い温度、即ち５℃でＫｏｓｅｒ
クエン酸液体培地（ｃｉｔｒａｔｅ ｂｒｏｔｈ）で生
長させることが記載されている。更に、２０″Ｃより高
い温度で培養すると、生成される氷核は非常に少な（な
る。
ている０例えばＭａｋ ｉ及びＷｉｌｌｏｕｇｈｂｙの
Ｂａｃｔｅｒｉａ ａｓ Ｂｉｏｇｅｎｉｃ ５ｏｕｒ
ｃｅｓ ｏｆ ＦｒｅｅｚｉｎｇＮｕｃｌｅｉ、 ｊ、
Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍｅｔｅｏｒｇｙ １７＋ １０４
９〜１０５３頁には、シュードモナス・シマン°のよう
な微生物を２０℃より低い温度、即ち５℃でＫｏｓｅｒ
クエン酸液体培地（ｃｉｔｒａｔｅ ｂｒｏｔｈ）で生
長させることが記載されている。更に、２０″Ｃより高
い温度で培養すると、生成される氷核は非常に少な（な
る。
前記の文献は、回収方法に関する限り、ホルマリンで処
理された濃厚培養体を凍結乾燥することが記載されてい
るが、詳細は記載されていない。
理された濃厚培養体を凍結乾燥することが記載されてい
るが、詳細は記載されていない。
別の文献、即ちＫｏｘｌｏｆｆ、 ５ｃｈｏｆｉｅｌｄ
及びＬｕ ｔｅのＩｃｅ Ｎｕｃｌｅａｔｉｎｇ Ａｃ
ｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｐｓｅｕｄｏａ＋ｏｎａｓｓｙｒ
ｉｎｇａｅ ａｎｄ Ｅｒｗｉｎｉａ ｈｅｒｂｉｃｏ
ｌａ、 、ｙ、 Ｂａｃｔｅｒ。
及びＬｕ ｔｅのＩｃｅ Ｎｕｃｌｅａｔｉｎｇ Ａｃ
ｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｐｓｅｕｄｏａ＋ｏｎａｓｓｙｒ
ｉｎｇａｅ ａｎｄ Ｅｒｗｉｎｉａ ｈｅｒｂｉｃｏ
ｌａ、 、ｙ、 Ｂａｃｔｅｒ。
■ムク２２〜２３１頁（１９８３）には、ｐＨが約７．
０のトリプトン−酵母エキス−グリセロール培地上で微
生物を生長させている。この文献では、微生物は乾燥状
態でｉよ回収されておらず、懸濁液の状態で直接、活性
のテストをしている。この氷核形成活性は懸濁液中では
安定でなく、−夜で活性が低下することが認められてい
る。
０のトリプトン−酵母エキス−グリセロール培地上で微
生物を生長させている。この文献では、微生物は乾燥状
態でｉよ回収されておらず、懸濁液の状態で直接、活性
のテストをしている。この氷核形成活性は懸濁液中では
安定でなく、−夜で活性が低下することが認められてい
る。
前記微生物の大量生産に前記した公知の方法を用いた場
合には所望の氷核形成活性のものは得られない０発酵に
よって発酵懸濁液中に高活性を生成しても、大量の材料
を乾燥する間に活性の大半が失われてしまう、この結果
は、前記方法が商業的な量の微生物を妥当なコストで製
造することのできないプロセスであることを示している
。
合には所望の氷核形成活性のものは得られない０発酵に
よって発酵懸濁液中に高活性を生成しても、大量の材料
を乾燥する間に活性の大半が失われてしまう、この結果
は、前記方法が商業的な量の微生物を妥当なコストで製
造することのできないプロセスであることを示している
。
前記の需要に応えるために、氷核形成活性（ＩＮＡ）の
大部分を保存する、氷核形成微生物の回収方法が提供さ
れた。この方法は米国特許第４．７０６，４６３号明細
書（１９８７年１１月１７日発行）に記載されている。
大部分を保存する、氷核形成微生物の回収方法が提供さ
れた。この方法は米国特許第４．７０６，４６３号明細
書（１９８７年１１月１７日発行）に記載されている。
前記の方法では、最初に培地を冷却し、そして濃縮する
。１縮した後、濃縮体を寒剤液体中へ運ぶことによって
培地を凍結させる０次に、こうして得られるペレットを
凍結乾燥する。
。１縮した後、濃縮体を寒剤液体中へ運ぶことによって
培地を凍結させる０次に、こうして得られるペレットを
凍結乾燥する。
前記の米国特許明細書に記載の方法は、その運転が非常
に高価である。大量の高価な寒剤液体を必要とする。更
に、凍結乾燥工程は、望ましい水準よりも高価になる。
に高価である。大量の高価な寒剤液体を必要とする。更
に、凍結乾燥工程は、望ましい水準よりも高価になる。
従って、本発明の目的は、従来公知の寒剤液体−凍結乾
燥方法に代わる方法として、より安価な物を提供するこ
とにある。
燥方法に代わる方法として、より安価な物を提供するこ
とにある。
本発明は、氷核形成活性をもつ微生物を発酵培地から回
収する方法を提供する０本発明方法は、従来法と同じ冷
却工程と濃縮工程とを含んでいるが、続いて濃厚体を成
る条件下で噴霧乾燥する。
収する方法を提供する０本発明方法は、従来法と同じ冷
却工程と濃縮工程とを含んでいるが、続いて濃厚体を成
る条件下で噴霧乾燥する。
すなわち、本発明によれば、本発明方法は（ａ） 前
記の培地を１５℃以下の温度にする工程、（ｂ） 温
度を１５℃以下に維持しながら前記微生物の濃厚体（好
ましくは水分含有量１５〜２７χ）を形成する工程、及
び （ｃ） 生成物の温度を５０℃未満に維持しながら前
記の濃厚体を噴霧乾燥する工程 からなる。
記の培地を１５℃以下の温度にする工程、（ｂ） 温
度を１５℃以下に維持しながら前記微生物の濃厚体（好
ましくは水分含有量１５〜２７χ）を形成する工程、及
び （ｃ） 生成物の温度を５０℃未満に維持しながら前
記の濃厚体を噴霧乾燥する工程 からなる。
本発明方法は、微生物を含有する任意の懸濁液を乾燥し
た後で、氷核形成活性（ＩＮＡ）を保持することができ
る。前記のとおり、これらの微生物の発酵方法は当業界
において周知である。
た後で、氷核形成活性（ＩＮＡ）を保持することができ
る。前記のとおり、これらの微生物の発酵方法は当業界
において周知である。
特に好ましい方法は、特開昭６３−１０２６７２号公報
に記載されている。更に、この型の微生物の発酵方法の
改良は特願昭６２−３２３０６３号及び欧州特許出願第
６３−４９９１３号に記載されている。
に記載されている。更に、この型の微生物の発酵方法の
改良は特願昭６２−３２３０６３号及び欧州特許出願第
６３−４９９１３号に記載されている。
本発明によって、氷核形成活性を有する任意の微生物を
回収することができる。適当な微生物としては、シュー
ドモナス例えばシュードモナス・シリンゲ、シェードモ
ナス・フルオルセンス（Ｐ。
回収することができる。適当な微生物としては、シュー
ドモナス例えばシュードモナス・シリンゲ、シェードモ
ナス・フルオルセンス（Ｐ。
ｆｌｕｏｒｓｃｅｎｓ） 、シュードモナス・コロナフ
ァシェンス（Ｐ、 ｃｏｒｏｎａｆａｃｉｅｎｓ）、及
びシュードモナス０ビシ（Ｐ、 ｐｉｓｉ）を挙げるこ
とができる。本発明で有用な他の微生物としては、エル
ウィニア・ヘルビコラ（Ｂｒｗｉｎｉａ ｈｅｒｂｉｃ
ｏｌａ）を挙げることができる。現在のところ好ましい
微生物はシュードモナス・シリンゲＡＴＣＣ５３，５４
３（米国メリーランドのＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ
Ｃｕ１ｔｕｒｅ Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎにブタペスト条
約に従って１９８６年９月２３日から寄託されている）
である。
ァシェンス（Ｐ、 ｃｏｒｏｎａｆａｃｉｅｎｓ）、及
びシュードモナス０ビシ（Ｐ、 ｐｉｓｉ）を挙げるこ
とができる。本発明で有用な他の微生物としては、エル
ウィニア・ヘルビコラ（Ｂｒｗｉｎｉａ ｈｅｒｂｉｃ
ｏｌａ）を挙げることができる。現在のところ好ましい
微生物はシュードモナス・シリンゲＡＴＣＣ５３，５４
３（米国メリーランドのＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ
Ｃｕ１ｔｕｒｅ Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎにブタペスト条
約に従って１９８６年９月２３日から寄託されている）
である。
本発明による微生物の回収方法によれば、高価でな（、
操作の容易な方法が提供されると同時に、乾燥によるＩ
ＮＡの欠損は許容できる程度である。
操作の容易な方法が提供されると同時に、乾燥によるＩ
ＮＡの欠損は許容できる程度である。
本発明方法によれば、微生物の温度は、工程の間に実用
的である範囲に低（維持することが重要である。現在の
ところ好ましい方法は、発酵培地温度をまず１５℃未満
に降下させることである。次に、温度を１５℃未満に維
持しながら、重！濃度好ましくは１５〜２７％、より好
ましくは２２％の乾燥固体に濃縮する。
的である範囲に低（維持することが重要である。現在の
ところ好ましい方法は、発酵培地温度をまず１５℃未満
に降下させることである。次に、温度を１５℃未満に維
持しながら、重！濃度好ましくは１５〜２７％、より好
ましくは２２％の乾燥固体に濃縮する。
噴霧乾燥の前の培地の濃縮は任意の通常の方法例えば濾
過又は遠心で行うことができる。固体ボウル遠心又は円
板ボウル連続遠心を用いることができる。
過又は遠心で行うことができる。固体ボウル遠心又は円
板ボウル連続遠心を用いることができる。
本発明によれば、生成物の温度が５０℃を越えないよう
に、濃縮培地を噴霧乾燥する。生成物の温度をそれより
も高く維持すると、後述する比較例４に示すように、は
とんどの発酵ＩＮＡが失われる。生成物を維持する温度
を下げると、生成物の乾燥がより遅くなり、従って、噴
霧乾燥装置の処理量が低下する。従って、好ましい温度
範囲は３０℃〜５０℃である。
に、濃縮培地を噴霧乾燥する。生成物の温度をそれより
も高く維持すると、後述する比較例４に示すように、は
とんどの発酵ＩＮＡが失われる。生成物を維持する温度
を下げると、生成物の乾燥がより遅くなり、従って、噴
霧乾燥装置の処理量が低下する。従って、好ましい温度
範囲は３０℃〜５０℃である。
この温度に感受性の生成物を噴霧乾燥するのに成功した
ことは驚くべきことである。従来法の凍結乾燥実験では
、生成物の温度を２５℃未満、より好ましくは１５℃未
満に維持すべきことが分かっていた。噴霧乾燥装置で生
成物の温度をこのように低温に維持すると、乾燥の生産
性が低すぎて魅力がなくなる。この生成物を３０℃〜５
０℃の乾燥温度にさらしてもＩＮＡを維持することは特
に驚くべきことである。
ことは驚くべきことである。従来法の凍結乾燥実験では
、生成物の温度を２５℃未満、より好ましくは１５℃未
満に維持すべきことが分かっていた。噴霧乾燥装置で生
成物の温度をこのように低温に維持すると、乾燥の生産
性が低すぎて魅力がなくなる。この生成物を３０℃〜５
０℃の乾燥温度にさらしてもＩＮＡを維持することは特
に驚くべきことである。
任意の通常の噴霧乾燥装置を用いて本発明を実施するこ
とができる。代表的な噴霧乾燥装置では、大量のガスを
含む部屋の中で、乾燥すべき生成物を小滴の形で噴霧す
る。ガスの入口温度及び乾燥すべき生成物の流速をコン
トロールして、すでに確立した方法を用いて望ましい生
成物温度を提供する。
とができる。代表的な噴霧乾燥装置では、大量のガスを
含む部屋の中で、乾燥すべき生成物を小滴の形で噴霧す
る。ガスの入口温度及び乾燥すべき生成物の流速をコン
トロールして、すでに確立した方法を用いて望ましい生
成物温度を提供する。
濃縮した培地は、通常の方法を用いて、噴霧乾燥品中に
噴霧（アトマイズ）する。例えば、圧力ノズル、２つの
流体ノズル及び遠心円板を用いることができる。部屋内
のガスは便利には空気であることができるが、その他の
別のガス例えば窒素であることができる。生成物は、公
知の方法例えばサイクロンコレクターを用いて集めるこ
とができる。噴霧乾燥の詳細については、Ｐｅｒｒｙ及
びＣｈｌｌｔｏｎ ４５、 Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅ
ｎｇｉｎｅｅｒｓ’ Ｈａｎｄｂｏｏｋ＋第５版、２
８〜５０頁以降（ＭｃＧｒａ−旧１１ Ｂｏｏｋ社、１
９７３年）を参照されたい。
噴霧（アトマイズ）する。例えば、圧力ノズル、２つの
流体ノズル及び遠心円板を用いることができる。部屋内
のガスは便利には空気であることができるが、その他の
別のガス例えば窒素であることができる。生成物は、公
知の方法例えばサイクロンコレクターを用いて集めるこ
とができる。噴霧乾燥の詳細については、Ｐｅｒｒｙ及
びＣｈｌｌｔｏｎ ４５、 Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅ
ｎｇｉｎｅｅｒｓ’ Ｈａｎｄｂｏｏｋ＋第５版、２
８〜５０頁以降（ＭｃＧｒａ−旧１１ Ｂｏｏｋ社、１
９７３年）を参照されたい。
以下の実施例において、ＩＮＡは通常の技術で計算した
。ＩＮＡの測定は、パラフィン被覆アルミニウムホイル
上に複数の微生物含有水液滴（１０μｌ）を置き、この
ホイルを定温浴中に置いて一５℃に維持して行った。こ
の操作の詳細は、例えばＶａｌｉ、 Ｑｕａｎｔｉｔａ
ｔｉｖｅ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆＥｘｐｅｒｉａ
＋ｅｎｔａｌ Ｒｅ５ｕｌｔｓ ｏｎ ｔｈｅ Ｈｅｔ
ｅｒｏｇｅｎｏｕｓＦｒｅｅｚｉｎｇ ｏｆ ５ｙｐｅ
ｒｃｏｏｌｅｄ Ｌｉｑｕｉｄｓ、 ｊ、 Ａｔｏｍｓ
Ｓｃｉ、＋訃、４０２〜４０９ （１９７１）に記載
されている。以下の実施例で報告したＩＮＡは、乾燥微
生物１ｇ当りの氷核形成部位の数である。本発明の目的
に対して、乾燥することなく発酵器から直接サンプリン
グしたサンプルを用いてＩＮＡを測定した。従って、こ
れを「発酵器Ｉ ＮＡＪと称する。回収された乾燥生成
物のＩＮＡは「回収Ｉ ＮＡ、と称する。
。ＩＮＡの測定は、パラフィン被覆アルミニウムホイル
上に複数の微生物含有水液滴（１０μｌ）を置き、この
ホイルを定温浴中に置いて一５℃に維持して行った。こ
の操作の詳細は、例えばＶａｌｉ、 Ｑｕａｎｔｉｔａ
ｔｉｖｅ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆＥｘｐｅｒｉａ
＋ｅｎｔａｌ Ｒｅ５ｕｌｔｓ ｏｎ ｔｈｅ Ｈｅｔ
ｅｒｏｇｅｎｏｕｓＦｒｅｅｚｉｎｇ ｏｆ ５ｙｐｅ
ｒｃｏｏｌｅｄ Ｌｉｑｕｉｄｓ、 ｊ、 Ａｔｏｍｓ
Ｓｃｉ、＋訃、４０２〜４０９ （１９７１）に記載
されている。以下の実施例で報告したＩＮＡは、乾燥微
生物１ｇ当りの氷核形成部位の数である。本発明の目的
に対して、乾燥することなく発酵器から直接サンプリン
グしたサンプルを用いてＩＮＡを測定した。従って、こ
れを「発酵器Ｉ ＮＡＪと称する。回収された乾燥生成
物のＩＮＡは「回収Ｉ ＮＡ、と称する。
以下、実施例によって本発明を具体的に説明する。
劃」−
マンニトールと酵母エキスと硫酸マグネシウムとを含む
栄養培地を含有する寒天板上にシュードモナス・シリン
ゲ（Ｐ、 ｓｙｒｉｎｇａｅ）＾ＴＣＣＮα５３５４３
を筋状に塗布した。２６℃で４８時間後、５つの板を用
い、同じ培地を含むＩＯ１発酵発酵器種した。
栄養培地を含有する寒天板上にシュードモナス・シリン
ゲ（Ｐ、 ｓｙｒｉｎｇａｅ）＾ＴＣＣＮα５３５４３
を筋状に塗布した。２６℃で４８時間後、５つの板を用
い、同じ培地を含むＩＯ１発酵発酵器種した。
２６℃で１２時間後、この液体種を用い、下記の第１表
に記載のように、１００１’発酵培地を播種した。
に記載のように、１００１’発酵培地を播種した。
マンニトール ８０ｇ／ｌ
酵母エキス ２０ｇ／ｌ
硫酸マグネシウム １８／１
発酵温度を２１℃にコントロールした。発酵の際に、４
Ｎ硫酸及び２Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨをコントロール
した。ｐＨが６．６に近づいた場合には酸を添加し、ｐ
ｏが５．６に近づいた場合には塩基を加えた。溶解酸素
は、３０％飽和よりも高く維持した０発泡の制御に必要
なので、発泡防止剤を加えた。
Ｎ硫酸及び２Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨをコントロール
した。ｐＨが６．６に近づいた場合には酸を添加し、ｐ
ｏが５．６に近づいた場合には塩基を加えた。溶解酸素
は、３０％飽和よりも高く維持した０発泡の制御に必要
なので、発泡防止剤を加えた。
２４時間後に、細胞重量は１８ｇ乾燥細胞／ｌに達した
０発酵器ＩＮＡは１．５１ Ｘ １０’であった。
０発酵器ＩＮＡは１．５１ Ｘ １０’であった。
発酵液を５℃に冷却し、その温度を５℃に維持しながら
遠心分離した。固体を集め、リン酸バッファー（ｐＨ７
，０）中で固体含量２０％に懸濁した。
遠心分離した。固体を集め、リン酸バッファー（ｐＨ７
，０）中で固体含量２０％に懸濁した。
窒素を用い、１１８℃で、実験室規模の噴霧乾燥器（米
国メリーランド州コロンビア、Ｎ１ｒｏ製）の中へスラ
リーをポンプで送った。ポンプ速度は３０ＩＪ１／ｌ１
ｉＩＩであり、出口温度及び従って生成物温度は５０℃
であった。回収ＩＮＡは０．５７ Ｘ １０’であった
。
国メリーランド州コロンビア、Ｎ１ｒｏ製）の中へスラ
リーをポンプで送った。ポンプ速度は３０ＩＪ１／ｌ１
ｉＩＩであり、出口温度及び従って生成物温度は５０℃
であった。回収ＩＮＡは０．５７ Ｘ １０’であった
。
■又
噴霧乾燥の際の最大生成物温度を約４１℃とすること以
外は前記例１の操作を繰返した。これは、ガス温度を８
０℃とし、ポンプ速度を２０１ｎ１／ｍｉｍとすること
によって達成した。回収ＩＮＡは１．２９×１０＃であ
った。
外は前記例１の操作を繰返した。これは、ガス温度を８
０℃とし、ポンプ速度を２０１ｎ１／ｍｉｍとすること
によって達成した。回収ＩＮＡは１．２９×１０＃であ
った。
貫主
噴霧乾燥の際の最大生成物温度を約３６℃とすること以
外は前記例１の操作を繰返した。これは、ガス温度を８
０℃とし、ポンプ速度を２５１ｄ／ｍｉｍとすることに
よって達成した。回収ＩＮＡは１．５１×１０′であっ
た０発酵器ＩＳＡも同じであった。
外は前記例１の操作を繰返した。これは、ガス温度を８
０℃とし、ポンプ速度を２５１ｄ／ｍｉｍとすることに
よって達成した。回収ＩＮＡは１．５１×１０′であっ
た０発酵器ＩＳＡも同じであった。
■土
本例は比較例である。
噴霧乾燥の際の最大生成物温度を約６８℃とすること以
外は前記例１の操作を繰返した。これは、ガス温度を１
１８℃とし、ポンプ速度を７ＩＩＩ！ｌ／ｌｌｌ１１１
１とすることによって達成した。回収ＩＮＡは０．１３
Ｘ１０＃であった。これは発酵器ＩＮＡの１０％に足り
ない。
外は前記例１の操作を繰返した。これは、ガス温度を１
１８℃とし、ポンプ速度を７ＩＩＩ！ｌ／ｌｌｌ１１１
１とすることによって達成した。回収ＩＮＡは０．１３
Ｘ１０＃であった。これは発酵器ＩＮＡの１０％に足り
ない。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、氷核形成活性をもつ微生物を発酵培地から回収する
方法であって、 （ａ）前記の培地を１５℃以下の温度にする工程、 （ｂ）温度を１５℃以下に維持しながら前記微生物の濃
厚体を形成する工程、及び （ｃ）生成物の温度を５０℃未満に維持しながら前記の
濃厚体を噴霧乾燥する工程 を含んでなる、前記の回収方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US16459188A | 1988-03-07 | 1988-03-07 | |
| US164591 | 1988-03-07 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01285186A true JPH01285186A (ja) | 1989-11-16 |
| JPH0630568B2 JPH0630568B2 (ja) | 1994-04-27 |
Family
ID=22595179
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1053066A Expired - Lifetime JPH0630568B2 (ja) | 1988-03-07 | 1989-03-07 | 氷核形成活性をもつ微生物の回収方法 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0332023B1 (ja) |
| JP (1) | JPH0630568B2 (ja) |
| KR (1) | KR890014726A (ja) |
| AT (1) | ATE92520T1 (ja) |
| AU (1) | AU608419B2 (ja) |
| CA (1) | CA1297824C (ja) |
| DE (1) | DE68907954T2 (ja) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5153134A (en) * | 1987-03-05 | 1992-10-06 | Genencor International, Inc. | Fermentation of microorganisms having ice nucleation activity using a temperature change |
| US5223412A (en) * | 1991-02-21 | 1993-06-29 | Genencor International, Inc. | Cell-free and whole cell ice nucleators and process for their production |
| AU659645B2 (en) * | 1991-06-26 | 1995-05-25 | Inhale Therapeutic Systems | Storage of materials |
| KR960014623B1 (ko) * | 1993-07-27 | 1996-10-19 | 주식회사 태평양 | 신규의 빙핵형성 미생물 변이주 및 이를 이용한 눈 또는 얼음의 제조방법 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4706463A (en) * | 1986-09-23 | 1987-11-17 | Eastman Kodak Company | Recovery of microorganism having ice nucleating activity |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0063438A1 (en) * | 1981-04-11 | 1982-10-27 | The Scottish Milk Marketing Board | Production of powder containing bacteria and product thereof |
-
1988
- 1988-08-18 CA CA000575118A patent/CA1297824C/en not_active Expired - Lifetime
-
1989
- 1989-02-28 EP EP89103483A patent/EP0332023B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-02-28 DE DE89103483T patent/DE68907954T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1989-02-28 AT AT89103483T patent/ATE92520T1/de not_active IP Right Cessation
- 1989-03-07 AU AU31061/89A patent/AU608419B2/en not_active Ceased
- 1989-03-07 KR KR1019890002767A patent/KR890014726A/ko not_active Application Discontinuation
- 1989-03-07 JP JP1053066A patent/JPH0630568B2/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4706463A (en) * | 1986-09-23 | 1987-11-17 | Eastman Kodak Company | Recovery of microorganism having ice nucleating activity |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR890014726A (ko) | 1989-10-25 |
| EP0332023B1 (en) | 1993-08-04 |
| EP0332023A2 (en) | 1989-09-13 |
| AU608419B2 (en) | 1991-03-28 |
| DE68907954T2 (de) | 1994-04-07 |
| JPH0630568B2 (ja) | 1994-04-27 |
| ATE92520T1 (de) | 1993-08-15 |
| DE68907954D1 (de) | 1993-09-09 |
| AU3106189A (en) | 1989-09-07 |
| CA1297824C (en) | 1992-03-24 |
| EP0332023A3 (en) | 1989-10-11 |
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