JPH06269663A - Ｃｄ４陽性細胞捕集材 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 血液の体外循環療法などに適用することによ
り、何らかの原因でその割合が過剰になったＣＤ４陽性
細胞を捕集することが可能な、ＣＤ４陽性細胞との結合
性を有するペプチドまたは修飾ペプチドを不織布に固定
化して成るＣＤ４陽性細胞捕集材を提供する。 【構成】 式：−ＣＯ−（ＣＨ₂ ）_n −Ｘ（ＸはＣｌ，
Ｂｒ，Ｉいずれかの原子，ｎは１ないし１０の整数）で
示されるような官能基を有した平均繊維径が１ないし３
０μｍの不織布に、ＣＤ４陽性細胞との結合性を有する
ペプチドまたは修飾ペプチドを固定化したことを特徴と
するＣＤ４陽性細胞捕集材。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は特定のアミノ酸配列を有
したペプチドまたはそのペプチド領域を含有する修飾ペ
プチドを固定化した不織布を提供して、その充填カラム
により血液の体外循環を行なうことにより、ＣＤ４抗原
をマーカーとして細胞表面に有する主としてヘルパーＴ
細胞の捕集を目的とするＣＤ４陽性（以下ＣＤ４＋と言
う）細胞の捕集材に関するものである。本発明は何らか
の原因により生体内における免疫系のバランスに支障が
生ずることにより、ＣＤ４＋細胞の生体内における割合
が過大になり免疫反応が過剰に起こるような種々の自己
免疫疾患などの治療において非常に有用なものである。

【０００２】

【従来の技術】ＣＤ４分子はヘルパー細胞や一部の単
球，マクロファージの細胞膜表面に分布している分子量
約５５キロダルトンの糖タンパク質であり、胸腺細胞の
約５０％，末梢Ｔ細胞の約７０％に分布する。また成人
Ｔ細胞型白血病細胞や皮膚Ｔ細胞性リンパ腫などにも発
現されている。ヘルパー細胞上のＣＤ４抗原はＴ細胞が
細胞レセプターによりマクロファージから提示された抗
原に結合する際、マクロファージ上の主要組織適合抗原
（以下ＭＨＣと言う）と結合してＴ細胞，抗原，マクロ
ファージ間の会合を安定化する役割をもつ。Ｔ細胞のＣ
Ｄ４分子には非受容体型チロシンキナーゼ分子ｐ５６
^lckが連結し、ＣＤ４の情報伝達分子として機能してい
る。マクロファージ，単球の表面に分布するＣＤ４の生
理的役割に関しては明らかではない。

【０００３】免疫系においてヘルパー細胞は抗原が適切
に応答するのに不可欠であり、Ｂ細胞のほとんどの抗体
応答に必須のものである。ヘルパー細胞は主として抗原
提示細胞の表面に結合した非自己抗原を認識した場合自
身が活性化され、インターロイキン２を分泌してＴ細胞
の増殖を刺激してこれがＢ細胞の活性化を補助してお
り、さらには抗体の産生を促している。またリンパ球を
補助するだけでなくγインターフェロンを分泌すること
によりマクロファージを活性化するヘルパー細胞も存在
する。

【０００４】ヘルパーＴ細胞の他にＴ細胞の亜集団とし
て細胞障害性Ｔ細胞あるいはサプレッサーＴ細胞などが
存在し、その表面マーカーとしてＣＤ８という糖タンパ
ク質が存在する。細胞障害性Ｔ細胞はウイルスに感染し
た細胞を直接破壊し、サプレッサーＴ細胞は主にヘルパ
ーＴ細胞の応答を抑制している。免疫応答の調整に主と
して関与しているのはＣＤ４＋細胞であるヘルパーＴ細
胞とＣＤ８陽性細胞（以下ＣＤ８＋細胞と言う）である
サプレッサーＴ細胞の２つである。正常人ではこれらＣ
Ｄ４＋細胞とＣＤ８＋細胞の両者がバランスよく制御さ
れることで、生体内における免疫反応が適当な状態に調
節されている。何らかの原因により両者の数の比率に大
きな変動が生ずると、生体内の免疫系制御システムに異
常が発生し様々な悪影響を及ぼすことになる。

【０００５】エイズ患者においてはレトロウイルスの一
種であるヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）によりヘルパ
ーＴ細胞が破壊され免疫系が正常に機能しなくなってい
る。したがって通常であれば発症しないような微生物感
染においても、生体が対応できなくなるものである。こ
の場合の多くはＣＤ４＋／ＣＤ８＋の値が正常人と比べ
て大きく低下している。

【０００６】逆にＣＤ４＋／ＣＤ８＋の値が大きくなる
ものとして、４型アレルギーに属する遅延型過敏症に関
わる疾患がある。遅延型過敏症を誘導するＴ細胞はヘル
パーＴ細胞とは別のものであるが、これもＣＤ４分子を
有している。これに関する疾患としては細胞内寄生性細
菌や真菌などの感染症や、植物，薬剤などによる皮膚炎
の他に、自己抗体が生ずる全身性エリテマトーデスやリ
ウマチ様関節炎などの種々の自己免疫疾患においてもこ
の種のアレルギー機序とＴ細胞により生体内の細胞が障
害され病変が惹起されていると考えられている。

【０００７】種々ある自己免疫疾患の治療方法として
は、その症状の程度に応じて副腎皮質ホルモン剤の投
与，脾臓の摘出，免疫抑制剤の投与などが適用される。
しかしこうした薬物療法や摘脾手術を行なってもは効果
的には回復しないような症例も多く存在している。自己
免疫疾患の発生に関するメカニズムはまだ十分には解明
されておらず、こうした患者に対する治療方法について
も絶対的なものは確立されていないのが現状であり対策
が急がれている。

【０００８】自己免疫疾患の他の治療方法として、免疫
吸着カラムを用いた血液の体外循環による自己抗体の吸
着除去も種々試みられている。たとえば免疫グロブリン
と結合性を有するプロテインＡを担体に固定化したカラ
ムの適用も検討されている。しかしプロテインＡは高価
であり、吸着特異性の点でもあまり優れず、さらには副
作用の生じた症例も報告されており、こうした医用機材
に利用するには種々の問題点が残されている。また除去
対象物質に対する抗体の固定化カラムも種々検討されて
いるが、安全性，保存安定性の問題，抗体が有効に反応
できるような固定化が困難なこと，滅菌方法が限定され
るなどの理由から医用機材として用いるには多くの課題
がある。

【０００９】

【発明が解決しようとする課題】本発明は血液細胞表面
に存在するのＣＤ４を認識して結合性を有するようなペ
プチドあるいはその修飾ペプチドを固定化した不織布を
用いて、特にこれを充填したカラムにより血液の体外循
環を行なうことで、ＣＤ４＋細胞を特異的に結合させ捕
集することにより生体内の免疫系バランスを制御して様
々な疾患を治療しようとするものである。

【００１０】

【課題を解決するための手段】上記目的を達成した本発
明は、抗ＣＤ４抗体の相補性決定領域となりうるアミノ
酸配列を含有しているペプチドあるいは修飾ペプチドを
固定化した不織布を提供することによるＣＤ４＋細胞の
捕集を要旨とするものである。

【００１１】本発明は抗ＣＤ４抗体における可変領域を
構成している部分において、特定のアミノ酸配列を有す
るペプチド断片を利用してＣＤ４＋細胞を捕集しようと
するものである。抗体分子の構成している重鎖，軽鎖と
もにＮ末端より約１１０個のアミノ酸残基より成る部分
に可変領域と呼ばれる領域が存在しており、抗体分子に
よりアミノ酸配列が異なっている部分である。さらにこ
の可変領域の中でも分子ごとにアミノ酸配列が比較的類
似している部分と、分子ごとにアミノ酸配列が大きく異
なっている超可変領域と呼ばれる部分とがある。抗原抗
体反応の際の結合特異性はこの超可変領域により決定さ
れている。

【００１２】超可変領域は重鎖および軽鎖ともに３ヵ所
ずつ存在しており、２０ないし３０個のアミノ酸残基数
から成る。抗体が抗原と結合する部位である相補性決定
領域と呼ばれる部分はこの超可変領域と一致しており、
この中でも実際に結合に関与している部位は５ないし１
０個のアミノ酸残基から構成される断片として存在して
いる。

【００１３】重鎖ではＮ端より３１ないし３５，５０な
いし６５および９５ないし１０２番目が、軽鎖ではＮ端
より２４ないし３４，５０ないし５６および８９ないし
９７番目が相補性決定領域に相当する断片である。これ
ら合せて６つの領域はそれぞれにループを形成してお
り、これらが１ヵ所にまとまることにより抗原結合部位
を形成しているものである。すなわち抗原結合部位の多
様性はこれらの領域におけるループの長さとアミノ酸配
列のわずかな変化だけで生ずるものである。なおこれ以
外の抗体の機能を果たすのに必要な分子全体の高次構造
は乱されることなく保たれている。

【００１４】抗ＣＤ４抗体としてはＯＫＴ４（オルソ
社），Ｌｅｕ３ａ（ベクトンディキンソン社），Ｔ４
（コールター社）などがある。ＣＤ４は白血球分化抗原
の中では比較的よく研究されており、可変領域の一次構
造が決定されて報告されているものもある。可変領域の
一次構造が既知であれば、これより上記の相補性決定領
域に相当する部位を含有するペプチドを合成することに
よりＣＤ４分子と結合させることが可能である。たとえ
ばＬｅｕ３ａ抗体に関する軽鎖における可変領域のアミ
ノ酸配列（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６６，１４６
１１，１９９１）を例にすると、Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｓｅ
ｒ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ａｓｐ
−Ｇｌｙ−Ａｓｐ，Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−
Ａｌａ−Ａｌａ−Ｓｅｒ，Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｃ
ｙｓ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕの３つ
が相補性決定領域に相当する。

【００１５】上記に例示した領域はＣＤ４分子との結合
に最小限必要な領域であると考えられる。実際にこうし
たペプチドを用いてＣＤ４＋細胞を捕集する場合には、
血液中でのＣＤ４分子との反応様式に近い状態を再現す
る必要がある。また血液中に存在する場合の構造の安定
性や、あるいは担体に固定化する場合には水系溶媒に対
する溶解性を大きくしたりすることを考慮する必要があ
ることが多い。

【００１６】そこで上記に示したペプチド領域の一方の
末端または両末端の領域を各タンパク質のアミノ酸配列
に従って領域を延長したり、たとえばリジンのような水
溶性を大きくするようなアミノ酸を数個末端に結合させ
たり、システインのようなアミノ酸を末端に結合させて
担体に固定化しやすくするなどすることが好ましい。実
際に用いるペプチドまたは修飾ペプチドの全アミノ酸残
基数としては７０個以内であることが好ましいが、合成
の困難さやコスト，安定性などを考慮すると３０個以内
がより好ましい。さらに免疫原性を発現するのに要する
高次構造の形成しやすさなども考慮すると１０ないし２
５個が最適であると言える。

【００１７】また固定化反応や安定性などを考慮して、
たとえばＮ末端をアミド化したり、末端に適当な官能基
を導入したりして上記ペプチドを修飾した有機化合物を
用いることも好ましい。また複数のペプチドを−Ａ−
（ＣＨ₂ ）_n −Ｂ−（Ａ，ＢはＮＨまたはＣＯを示す）
で示されるような側鎖を用いて結合させたものもＣＤ４
＋細胞との結合性をより高めることが可能である。この
場合のｎの値は１ないし２０が好ましく３ないし１０が
より好ましい。

【００１８】ペプチドの合成の方法については特に限定
されないが、液相合成法よりも固相合成法を適用する方
が操作が簡単である。この場合有機溶媒に不溶性である
支持体に合成するペプチドのＣ末端に対応するアミノ酸
を結合させ、Ｎ末端方向にαカルボキシル基以外のαア
ミノ基などの官能基を保護した対応するアミノ酸を順に
縮合反応により結合させた後、結合した後その保護基を
脱離させる反応を交互に繰返すことによりペプチド鎖を
延長させる。

【００１９】ペプチド合成反応を終了した後、ペプチド
鎖を支持体から切断および脱保護基を行なう。これには
フッ化水素がしばしば用いられるが、安全性，取扱いや
すさの点からトリフルオロメタンスルホン酸（以下ＴＦ
ＭＳＡと言う）を用いるのが適当である。チオアニソー
ル，１，２−エタンジチオールとＴＦＭＳＡ中で反応さ
せ脱保護基を行なった後、トリフルオロ酢酸（以下ＴＦ
Ａと言う）により支持体からの切断を行ないペプチドを
回収する。これを凍結乾燥することによりクルードペプ
チドが得られる。

【００２０】上記クルードペプチドは逆相系カラムを用
いた高速液体クロマトグラフィ（以下ＨＰＬＣと言う）
に供することにより分取，精製を行なう。ＨＰＬＣ条件
は通常タンパク質の精製に用いる系を基本として最適化
を行なうのがよい。得られたクロマトピークに相当する
画分を分取しこれを凍結乾燥する。得られた精製ペプチ
ド画分についてマススペクトル分析による分子量解析，
アミノ酸組成分析あるいはアミノ酸配列解析などにより
同定を行なう。

【００２１】上記ペプチドあるいは修飾ペプチドを固定
化する場合に用いる不織布の種類は特に限定されるもの
ではないが、血液浄化に用いる場合には血液中成分と接
触した際の補体系や凝固系などへの影響を考慮する必要
性があることから、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥ
Ｔ），ポリプロピレン（ＰＰ），ポリエチレン（Ｐ
Ｅ），ポリアミド，セルロース（綿）およびレーヨンな
どが挙げられるが、改質の容易さや改質後の強度保持性
を考慮すると、ＰＥＴ，ＰＥ，綿またはレーヨンが好ま
しい。

【００２２】不織布に特許請求の範囲に示したような、
化学式：−ＣＯ−（ＣＨ₂ ）_n −Ｘ（ＸはＣｌ，Ｂｒ，
Ｉいずれかの原子，ｎは１ないし１０の整数を表わす；
以下官能基１と言う）で示されるような官能基を導入す
る方法は種々のものが挙げられる。たとえばＰＰ，ＰＥ
の場合には、あらかじめ脱ハロゲン化水素反応が可能な
アミノ基，イミノ基，水酸基，ヒドラジド基などのビニ
ル官能基を有する化合物をＸ−ＣＯ−（ＣＨ₂ ）_n −Ｘ
（以下化合物１と言う）で示されるような化合物と反応
させ、得られたビニル化合物を共重合して不織布を製造
する方法がある。この場合の脱ハロゲン化水素反応させ
る官能基としては、反応の容易さの点からアミノ基が最
も好ましい。

【００２３】不織布にアミノ基を導入するには種々のも
のが挙げられるが、たとえばＰＰ，ＰＥの場合には、あ
らかじめアミノ基を有するビニル化合物たとえば化１お
よび化２で表わされるような化合物を共重合して不織布
を製造する方法がある。またこれらの素材に電子線，紫
外線またはオゾンを照射してラジカルやイオンを発生さ
せ、化１または化２のようなアミノ基を有するビニル化
合物をグラフト重合させる方法がある。この場合他のビ
ニルモノマーを共存させてもよい。

【００２４】

【化１】

【００２５】

【化２】 化１、化２においてＲ¹ は水素原子またはメチル基を、
Ｒ²,Ｒ³ は水素原子またはメチル基であり、少なくとも
一方が水素原子であることを示し、ｎは１ないし５の数
である。

【００２６】上記のようにして得たアミノ基を含有する
不織布を上記化合物１と適当な溶媒中で反応させること
により上記官能基１の導入が可能である。ここでハロゲ
ン原子Ｘはいずれでも可能であるが、反応効率や副反応
の少なさなどを考慮するとＢｒ，Ｉが好ましく、Ｂｒが
より好ましい。同様にｎの値は１ないし１０が適当であ
るが、１ないし５がより好ましい。

【００２７】綿やレーヨンの場合には過ヨウ素酸により
酸化してそのグリコール部位を開裂させてアルデヒド基
を導入して、さらにアンモニア，エチレンジアミン，ヘ
キサメチレンジアミン，ポリエチレンイミンのような少
なくとも一級のアミノ基を１個以上有する化合物を反応
させてシッフ塩基を形成し、これを還元してアミノ基を
導入した後、化合物１と適当な溶媒中で反応させること
により官能基１を導入するのがよい。なおポリエチレン
イミンを用いる場合の分子量は１００ないし１００万が
好ましく、２００ないし１０万がより好ましい。

【００２８】さらに電子線照射により官能基１を導入す
る方法としては、化合物１をあらかじめ上記のような一
級のアミノ基を含有する化合物と反応させて得られた化
合物を化３に示すようなビニル化合物を直接または適当
な溶媒に溶解した後乾燥させ電子線を照射する方法があ
る。この際にビニル化合物の沸点が低いと乾燥条件で蒸
発しグラフト量の制御が困難であり、この場合には高沸
点化合物と混合して塗布し蒸発を抑えることが好まし
い。混合する高沸点溶媒としてはエチレングリコール，
ジエチレングリコール，重合度１０以下のポリエチレン
グリコール，グリセリンなどの多価アルコール類が特に
好ましい。

【００２９】

【化３】 化３において、Ｒ¹,Ｒ²,Ｒ³ は水素原子またはメチル基
を示し、ｎは１ないし３００の整数である。

【００３０】またグラフト効率を向上させるために、多
官能性の架橋性ビニル化合物と混合して用いることが好
ましい。これらの架橋性ビニル化合物としては、メチレ
ンビスアクリルアミド，トリメチロールプロパンジアク
リレート，トリメチロールプロパントリアクリレート，
テトラメチロールメタンテトラアクリレート，トリアリ
ルイソシアヌレートまたは化３のようなビニル基を複数
個有するモノマーが挙げられる。架橋性ビニル化合物の
うち化３を用いた場合グラフト効率が高く、またスペー
サー効果もあり特に好ましい。化３におけるｎの値は１
ないし１５０であることが好ましく、５ないし５０であ
ることがより好ましい。

【００３１】またグラフト効率を向上させるために、多
官能性の架橋性ビニル化合物と混合して用いることが好
ましい。これらの架橋性ビニル化合物としては、メチレ
ンビスアクリルアミド，トリメチロールプロパンジアク
リレート，トリメチロールプロパントリアクリレート，
テトラメチロールメタンテトラアクリレート，トリアリ
ルイソシアヌレートのようなビニル基を複数個有するモ
ノマーが挙げられる。

【００３２】これらの化合物を塗布するのに用いる溶媒
は架橋性化合物と目的の官能基を有する化合物の両方を
溶解するものであればすべて使用できるが、水，メタノ
ール，エタノール，塩化メチレン，クロロホルム，アセ
トン，ジオキサン，テトラヒドロフランまたはこれらの
混合溶媒を用いることが可能である。上記官能基を有す
る化合物と架橋性化合物との混合比は５０：１ないし
１：５０、好ましくは３０：１ないし１：３０である。
この場合に用いられる不織布の素材としてはＰＥＴ，Ｐ
Ｅ，レーヨンおよび綿が好ましく、特にＰＥＴが好まし
い。照射線量は１ないし２０Ｍｒａｄが好ましく、２な
いし１０Ｍｒａｄがさらに好ましい。

【００３３】このようにして導入される官能基１の含量
は１μｅｑ／ｇないし５ｍｅｑ／ｇ、好ましくは１０μ
ｅｑ／ｇないし３ｍｅｑ／ｇ、さらに好ましくは３０μ
ｅｑ／ｇないし２ｍｅｑ／ｇである。こうして導入され
た官能基１のペプチド固定化後の残存量は、血小板のよ
うな血球成分の粘着を抑えるためには０．１μｅｑ／ｇ
ないし１ｍｅｑ／ｇであり、好ましくは０．５μｅｑ／
ｇないし０．５ｍｅｑ／ｇ、さらに好ましくは１μｅｑ
／ｇないし０．３ｍｅｑ／ｇである。

【００３４】こうして得られた不織布は血小板，白血球
などの粘着が少なく、血液の補体活性や凝固因子活性も
抑制されている。したがって抗血小板抗体の吸着除去に
際し血漿と血球成分とを分離した後血漿から抗体を吸着
して血漿と血球成分を再混合して患者に返す必要がなく
全血処理により一段階で抗体を吸着することができる。
この際の不織布の充填密度は０．６ｇ／ｍｌ以下が好ま
しく、０．４ｇ／ｍｌ以下がより好ましい。

【００３５】上記官能基の導入された不織布への抗血小
板抗体との結合性を有する上記のようなペプチド類の固
定化については、ｐＨ８ないし１０の緩衝液中で反応さ
せることにより容易に行なうことができる。この場合リ
ガンドに用いるペプチドや修飾ペプチドは比較的安定で
低分子量の物質であり、たとえば酵素や抗体のような高
分子量のタンパク質を固定化する場合と比較してその固
定化反応条件は制約が少なくなることも有利な要因の一
つである。

【００３６】通常は立体障害を小さくすることにより抗
体の吸着効率，結合性を向上させ、また非特異的吸着を
抑えることを目的として、親水性スペーサーを導入し
て、その末端にペプチド類を固定化するのが好ましい。
親水性スペーサーとしては導入した官能基を利用できる
ものが好ましく、両末端にアミノ基またはカルボキシル
基を有するポリエチレングリコールを用いることが好ま
しいが、反応収率やその条件のマイルドな点からアミノ
基の方がより好ましい。この場合のポリエチレングリコ
ールの分子量は１００ないし２００００、好ましくは２
００ないし１００００、さらに好ましくは５００ないし
５０００である。

【００３７】両末端にアミノ基あるいはカルボキシル基
を有するポリエチレングリコール（以下それぞれＰＥＯ
アミンおよびＰＥＯ酸と言う）を用いる場合、まず不織
布の官能基と適当な溶媒中にて反応させることにより結
合させ、次にもう一方のアミノ基あるいはカルボキシル
基とペプチドのカルボキシル基またはアミノ基末端を縮
合剤の存在下に縮合させてアミド基を介した固定化を行
なう。

【００３８】しかし上記のようにして得た不織布におい
ては、グラフトされたこれらの誘導体ポリマー自体が親
水性スペーサーの役割を果たしており、このことからも
好ましいものである。すなわちグラフトされたこれらの
誘導体ポリマーのハロアルキル基とペプチドのアミノ基
末端を上記の方法により脱ハロゲン化水素させることに
よる固定化が他の方法と比較して有利である。

【００３９】

【実施例】本発明におけるペプチド類の目的の官能基を
導入した不織布への導入方法は上記に述べたものを基本
とすれば特に限定されるものではない。以下に実施例を
用いて本発明を説明する。

【００４０】＜実施例１＞ Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−
Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｖ
ａｌ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅ
ｒ−Ｔｙｒ−Ｍｅｔ−Ａｓｎの不織布への固定化 （１）ペプチドの合成 抗Ｌｅｕ３抗体の軽鎖の可変領域における２０ないし３
８番目までに相当する領域であるＴｈｒ−Ｉｌｅ−Ｓｅ
ｒ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ
−Ｖａｌ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−
Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｍｅｔ−Ａｓｎの配列を有するペプチ
ドの合成をペプチドシンセサイザーＭｏｄｅｌ４３０Ａ
（アプライドバイオシステムズ社製）を用いて固相合成
法により行なった。Ｃ末端のアスパラギンの結合した支
持体であるＰＡＭアスパラギン（ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ａｓ
ｎ）０．５ｍｍｏｌ（アプライドバイオシステムズ社
製）を用いて、Ｎ末端の方向に順に上記ペプチドシンセ
サイザーに掲載されている合成プログラムにより脱保護
基反応および縮合反応を繰返してペプチド鎖を延長し
た。すなわちＴＦＡおよびジクロロメタン（以下ＤＣＭ
と言う）により保護基であるｔ−ブトキシカルボニル基
の除去を行ない、ＤＣＭで洗浄し、ジイソプロピルエチ
ルアミンおよびＤＣＭで中和した後、ジメチルホルムア
ミド（以下ＤＭＦと言う）で洗浄しＤＣＣで縮合反応を
行ない、ＤＣＭで洗浄する操作を繰返した。アミノ酸は
ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ），ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−
Ｉｌｅ・１／２Ｈ₂ Ｏ，ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｓｅｒ（Ｂｚ
ｌ），ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ（Ｃｌ−Ｚ），ｔ−Ｂｏ
ｃ−Ｌ−Ａｌａ，ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｇｌｎ，ｔ−Ｂｏｃ
−Ｌ−Ｖａｌ，ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ），
ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｔｙｒ（Ｂｒ−Ｚ），ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ
−Ｇｌｙ，ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｍｅｔ（いずれもアプライ
ドバイオシステムズ社製）の２．０ｍｍｏｌのカートリ
ッジを用いた。

【００４１】（２）脱保護基，ペプチド鎖の切断 上記の反応が終了した支持体１ｇにチオアニソール１ｍ
ｌ，１，２−エタンジチオール０．５ｍｌを加えて１０
分間攪拌した後、氷水で冷やしながらＴＦＡ１０ｍｌを
加えて１０分間攪拌した。さらにＴＦＭＳＡ１ｍｌを加
えて室温で３０分間攪拌した。これにあらかじめ冷やし
ておいたジエチルエーテルを沈殿が現れなくなるまで加
えて攪拌し、ミディアム孔のガラスフィルターを用いて
ジエチルエーテルで共洗いしながら濾過し、ＴＦＡを加
えてペプチドを溶解してエーテル中に捕集した。エーテ
ル中のペプチドをファイン孔のガラスフィルターで濾過
し、ガラスフィルター上のペプチドを２Ｎ酢酸に溶解し
て、凍結乾燥を行ないクルードペプチドを得た。

【００４２】（３）ペプチドの精製 上記クルードペプチドを再度２Ｎ酢酸に溶解して、０．
２μｍのメンブレンフィルターで濾過した溶液をＨＰＬ
Ｃに供した。ＨＰＬＣはＭｏｄｅｌ１３０Ａシステム
（アプライドバイオシステムズ社製）を用い、カラムは
逆相系のＡｑｕａｐｏｒｅ Ｐｒｅｐ−１０，Ｃ８（ア
プライドバイオシステムズ社製）を用いた。移動相は
０．１％ＴＦＡを含む水をＡ液，０．１％ＴＦＡを含む
７０％アセトニトリル／水（ｖ／ｖ）をＢ液として、Ａ
液からＢ液への濃度直線勾配により溶出した。クロマト
ピークはほぼ単一なものが得られ、相当画分を分取し
た。分取を数回繰返し、これを凍結乾燥することにより
精製ペプチドを得た。得られたペプチドはＢＩＯＩＯＮ
２０マスアナライザー（アプライドバイオシステムズ社
製）により解析して目的ペプチドが得られていることを
確認した。

【００４３】（４）不織布の改質 テトラエチレンペンタミン３．８ｇをジオキサン１００
ｍｌに溶解し、窒素気流下攪拌しながら氷冷した。一方
化合物１におけるＸがＢｒでありｎが１であるブロモア
セチルブロミド２０．１ｇをジオキサン３０ｍｌに溶解
し２０分間で滴下して、氷冷下２０分間反応し、４０℃
で１時間、６０℃で２時間反応させた後、生成した沈殿
を濾過した。さらにこの沈殿物をジオキサンで洗浄した
後、減圧乾燥した（得られた沈殿物を化合物２とす
る）。

【００４４】化３においてＲ₁,Ｒ₂,Ｒ₃ が水素原子であ
りｎの値が９であるポリエチレンジアクリレート（ＣＨ
₂ ＝ＣＨ−ＣＯＯ−（ＣＨ₂ ＣＨ₂ Ｏ）₉ −ＯＣ−ＣＨ
₂ ＝ＣＨ₂ ）１ｇを５００ｍｇの上記化合物２とともに
２００ｍｌのメタノールに溶解し、１５ｃｍ平方の大き
さに切断した繊維径３．５μｍのＰＥＴ製不織布をこの
溶液に浸した後、５Ｍｒａｄずつ合わせて１０Ｍｒａｄ
の電子線を不織布の両面に照射した。電子線照射の終了
した不織布を水およびメタノールで３回ずつ洗浄を行な
い風乾した。得られた不織布の官能基１の含量は元素分
析によりＢｒ含量を求めることにより算出したところ
０．１３ｍｅｑ／ｇであった。

【００４５】（５）ペプチドの不織布への導入 （３）で得た精製ペプチド２５ｍｇをｐＨ８．５のリン
酸緩衝液に溶解した後、上記の改質した不織布を加え
て、室温で２４時間振盪して反応させた。反応の終了し
た不織布を水で３回洗浄して、目的である捕集材を得
た。ペプチドの固定化率は反応残液中の窒素含量をマイ
クロケルダール法により定量して算出し７１％が導入さ
れていた。

【００４６】（６）ペプチド固定化捕集材の性能評価 上記捕集材のＣＤ４＋細胞との結合性をヒト血液を用い
て評価した。一辺７ｃｍの菱形のポリカーボネート製モ
ジュールケースの形状およびその大きさに切断した上記
捕集材を２０枚充填したカラムを組立て、１００Ｕ／ｍ
ｌのヘパリンを含む生理食塩水１００ｍｌ、次いで１Ｕ
／ｍｌのヘパリンを含む生理食塩水１００ｍｌでカラム
内および血液回路内を洗浄した。一方クエン酸を添加し
たヒト血液１００ｍｌをビーカーに取り、カラムを通し
て再びビーカーに戻すような血液回路を組み、この装置
を用いて血液流量３０ｍｌ／分で１時間連続して潅流実
験を行なった。

【００４７】本処理を行なう前後の血清中のＣＤ４＋細
胞およびＣＤ８＋細胞数の変化をフローサイトメトリー
法により定量した。細胞はＦｉｃｏｌｌ−Ｃｏｎｒａｙ
法により調製を行ない、フルオレセインイソチオシアネ
ートで標識したＬｅｕ３ａおよびＬｅｕ２ａ抗体を用い
て実施した。またフローサイトメトリーはＥＰＩＣＳ−
ＰＲＯＦＩＬＥ２（コールター社製）を用いた。結果は
表１に示す通りであり、本処理を行なう前と比較した各
細胞数の減少率［％］で示した。またアルブミンの非特
異的吸着に関しても、アルブミンＢーテストワコー（和
光純薬工業製）を用いて定量した。結果は表１に示す通
りであり吸着率［％］で示した。また血小板の粘着性に
ついても本処理を行なう前後の血小板数をコールターカ
ウンターＺＭ型（コールターエレクトロニクス社製）を
用いて定量することにより調べた。結果は表１に示す通
りであり血小板数の減少率［％］で示した。

【００４８】

【表１】

【００４９】＜実施例２＞ Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−
Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ａ
ｌａ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒの不織
布への固定化 抗Ｌｅｕ３抗体の軽鎖の可変領域における４６ないし６
０番目までに相当する領域であるＧｌｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒ
ｏ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ａｌａ
−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒの
配列を有するペプチドの合成に関してもＰＡＭセリン
（ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ））（アプライドバ
イオシステムズ社製）およびｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｇｌｎ，
ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ，ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ（Ｃ
ｌ−Ｚ），ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｌｅｕ・Ｈ₂ Ｏ，ｔ−Ｂｏ
ｃ−Ｌ−Ｉｌｅ・１／２Ｈ₂ Ｏ，ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｔｙ
ｒ（Ｂｒ−Ｚ），ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ａｌａ，ｔ−Ｂｏｃ
−Ｌ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ），ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ（Ｏ
Ｂｚｌ）（いずれもアプライドバイオシステムズ社製）
を用いて実施例１と同様にして実施した。合成の終了し
た支持体の脱保護基，ペプチド鎖の切断，逆相系ＨＰＬ
Ｃによる精製および同定についても実施例１と同様にし
て行なった。

【００５０】実施例１と同じ方法により官能基１を導入
した不織布（導入量０．１１ｍｅｑ／ｇ）に上記ペプチ
ドの固定化を実施例１と同様にして行ない、目的である
捕集材を得た。ペプチドの固定化率は反応残液中の窒素
含量をマイクロケルダール法により定量して算出し７０
％が導入されていた。得られた捕集材の性能評価を実施
例１と同様にして、カラムを組立てた後ヒト血液を用い
た潅流実験により行なった。処理後の血清中のＣＤ４＋
細胞，ＣＤ８＋細胞の量およびアルブミン量を実施例１
と同様にして定量した。結果を表１に減少率［％］で示
した。血小板粘着性についても実施例１と同様に検討し
た結果を表１に血小板数の減少率［％］で示した。

【００５１】＜実施例３＞ Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−
Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｎ−Ｇ
ｌｎ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｐｒ
ｏ−Ｔｈｒの不織布への固定化 抗Ｌｅｕ３抗体の軽鎖の可変領域における８５ないし１
０１番目までに相当する領域であるＧｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔ
ｈｒ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌ
ｎ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ
−Ｐｒｏ−Ｔｈｒの配列を有するペプチドの合成に関し
てもＰＡＭトレオニン（ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｔｈｒ（Ｂｚ
ｌ））（アプライドバイオシステムズ社製）およびｔ−
Ｂｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ），ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｇ
ｌｙ，ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ），ｔ−Ｂｏｃ
−Ｌ−Ａｌａ，ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｔｙｒ（Ｂｒ−Ｚ），
ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｃｙｓ（４ＣＨ₃ Ｂｚｌ），ｔ−Ｂｏ
ｃ−Ｌ−Ｇｌｎ，ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ），
ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ），ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ
−Ｐｒｏ（いずれもアプライドバイオシステムズ社製）
を用いて実施例１と同様にして実施した。合成の終了し
た支持体の脱保護基，ペプチド鎖の切断，逆相系ＨＰＬ
Ｃによる精製および同定についても実施例１と同様にし
て行なった。

【００５２】化３においてＲ₁,Ｒ₂,Ｒ₃ が水素原子であ
りｎの値が９であるポリエチレンジアクリレート（ＣＨ
₂ ＝ＣＨ−ＣＯＯ−（ＣＨ₂ ＣＨ₂ Ｏ）₉ −ＯＣ−ＣＨ
₂ ＝ＣＨ₂ ）６００ｍｇおよび分子量１００００のポリ
エチレンイミン５００ｍｇを２００ｍｌのメタノールに
溶解し、１５ｃｍ平方の大きさに切断した繊維径３．５
μｍのＰＥＴ製不織布をこの溶液に浸した後、５Ｍｒａ
ｄずつ合わせて１０Ｍｒａｄの電子線を不織布の両面に
照射した。電子線照射の終了した不織布を水およびメタ
ノールで３回ずつ洗浄を行ない風乾した。得られた不織
布のアミノ基含量の定量は塩酸による電位差滴定をＣＯ
ＭＴＩＴＥ１０１（平沼産業製）を用いて行ない０．２
８ｍｅｑ／ｇであった。

【００５３】さらにブロモアセチルブロミド３．０ｇを
無水ジオキサン１００ｍｌに溶解し、改質不織布３０枚
を加えて室温で振盪させることにより２４時間反応させ
た。反応終了後不織布を水およびメタノールで３回洗浄
を行ない風乾した。得られた不織布の官能基１の含量は
元素分析によりＢｒ含量を求めることにより算出したと
ころ０．１４ｍｅｑ／ｇであった。

【００５４】上記ペプチド２５ｍｇを実施例１と同様に
して固定化を行ない、目的である捕集材を得た。ペプチ
ドの固定化率は反応残液中の窒素含量をマイクロケルダ
ール法により定量して算出し７２％が導入されていた。
得られた捕集材の性能評価を実施例１と同様にして、カ
ラムを組立てた後ヒト血液を用いた潅流実験により行な
った。処理後の血清中のＣＤ４＋細胞，ＣＤ８＋細胞の
量およびアルブミン量を実施例１と同様にして定量し
た。結果を表１に減少率［％］で示した。血小板粘着性
についても実施例１と同様に検討した結果を表１に血小
板数の減少率［％］で示した。

【００５５】＜実施例４＞ Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−
Ａｌａ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｔ
ｈｒの不織布への固定化 抗Ｌｅｕ３抗体の重鎖の可変領域における９４ないし１
０３番目までに相当する領域であるＴｙｒ−Ｐｈｅ−Ｃ
ｙｓ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌ
ｙ−Ｔｈｒの配列を有するペプチドの合成に関してもＰ
ＡＭトレオニン（ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ））
（アプライドバイオシステムズ社製）およびｔ−Ｂｏｃ
−Ｌ−Ｔｙｒ（Ｂｒ−Ｚ），ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｐｈｅ，
ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｃｙｓ（４ＣＨ₃ Ｂｚｌ），ｔ−Ｂｏ
ｃ−Ｌ−Ａｌａ，ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ），
ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｇｌｙ，ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ（Ｃ
ｌ−Ｚ），（いずれもアプライドバイオシステムズ社
製）を用いて実施例１と同様にして実施した。合成の終
了した支持体の脱保護基，ペプチド鎖の切断，逆相系Ｈ
ＰＬＣによる精製および同定についても実施例１と同様
にして行なった。

【００５６】実施例３と同じ方法により官能基１を導入
した不織布（導入量０．１５ｍｅｑ／ｇ）に上記ペプチ
ドの固定化を実施例１と同様にして行ない、目的である
捕集材を得た。ペプチドの固定化率は反応残液中の窒素
含量をマイクロケルダール法により定量して算出し７１
％が導入されていた。得られた捕集材の性能評価を実施
例１と同様にして、カラムを組立てた後ヒト血液を用い
た潅流実験により行なった。処理後の血清中のＣＤ４＋
細胞，ＣＤ８＋細胞の量およびアルブミン量を実施例１
と同様にして定量した。結果を表１に減少率［％］で示
した。血小板粘着性についても実施例１と同様に検討し
た結果を表１に血小板数の減少率［％］で示した。

【００５７】

【比較例】

＜比較例１＞ Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｌｙ
ｓ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ａｓｐ
−Ｔｙｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−
Ｍｅｔ−Ａｓｎの不織布への固定化 実施例１で得たＴｈｒ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｌｙ
ｓ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ａｓｐ
−Ｔｙｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−
Ｍｅｔ−Ａｓｎの綿不織布への導入を次のようにして実
施した。１５ｃｍ平方の大きさに切断した繊維径１２μ
ｍの綿不織布３０枚に、１ｗｔ％濃度の過ヨウ素酸ナト
リウムを１Ｎ硫酸に溶解した溶液５００ｍｌ中に加えて
振盪により２２時間反応させた。反応終了後不織布を水
で３回洗浄してアルデヒド基を導入した。アルデヒド含
量はオキシム法により定量を行ない０．５０ｍｅｑ／ｇ
であった。

【００５８】上記ペプチド２５ｍｇをｐＨ９．５の炭酸
緩衝液２００ｍｌに溶解して上記不織布を加え振盪によ
り２４時間反応させた。反応終了後不織布を水で３回洗
浄した後ｐＨ９．０の炭酸緩衝液２００ｍｌ中に加え、
さらに水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＢＨ₄ ）１ｇを加
えて振盪により２０時間反応させた。反応終了後不織布
を水で３回洗浄して目的である捕集材を得た。ペプチド
の固定化率は反応残液中の窒素含量をマイクロケルダー
ル法により定量して算出し７５％が導入されていた。得
られた捕集材の性能評価を実施例１と同様にして、カラ
ムを組立てた後ヒト血液を用いた潅流実験により行なっ
た。処理後の血清中のＣＤ４＋細胞，ＣＤ８＋細胞の量
およびアルブミン量を実施例１と同様にして定量した。
結果を表１に減少率［％］で示した。血小板粘着性につ
いても実施例１と同様に検討した結果を表１に血小板数
の減少率［％］で示した。

【００５９】＜比較例２＞ Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−
Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａ
ｌａ−Ｔｈｒの不織布への固定化 抗Ｌｅｕ３抗体の軽鎖の可変領域における１０ないし２
０番目までに相当する領域であるＳｅｒ−Ｌｅｕ−Ａｌ
ａ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ
−Ａｌａ−Ｔｈｒの配列を有するペプチドの合成に関し
て、ＰＡＭトレオニン（ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｔｈｒ（Ｂｚ
ｌ））（アプライドバイオシステムズ社製）およびｔ−
Ｂｏｃ−Ｌ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ），ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｌｅ
ｕ・Ｈ₂Ｏ，ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ａｌａ，ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ
−Ｖａｌ，ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｇｌｙ，ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−
Ｇｌｎ，ｔ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）（いずれも
アプライドバイオシステムズ社製）を用いて実施例１と
同様にして実施した。このペプチド領域も親水性の比較
的大きな領域である。合成の終了した支持体の脱保護
基，ペプチド鎖の切断，逆相系ＨＰＬＣによる精製およ
び同定についても実施例１と同様にして行なった。

【００６０】比較例１と同様の方法により、綿不織布に
上記ペプチドの導入を行なった。ペプチドの固定化率は
実施例１と同様にして求め７２％が導入されていた。得
られた捕集材の性能評価を実施例１と同様にして、カラ
ムを組立てた後ヒト血液を用いた潅流実験により行なっ
た。処理後の血清中のＣＤ４＋細胞，ＣＤ８＋細胞の量
およびアルブミン量を実施例１と同様にして定量した。
結果を表１に減少率［％］で示した。血小板粘着性につ
いても実施例１と同様に検討した結果を表１に血小板数
の減少率［％］で示した。

【００６１】

【発明の効果】本発明により血液中のＣＤ４＋細胞と効
果的に結合させることが可能であり、体外循環療法など
により生体内の免疫系バランスを制御することにより種
々の自己免疫疾患の治療へ適用することが可能である。
本発明におけるＣＤ４＋細胞捕集材を用いた血液浄化療
法は他と比較しても副作用もなく安全であり、保存によ
る安定性の面でも非常に優れている。不織布を利用する
ことにより従来のような血漿分離を必要としない全血処
理による体外循環が可能であることも大きな特徴であ
る。またエポキシ基が存在することによりリガンドであ
るペプチド類の導入も容易である。さらにはオートクレ
ーブ処理による蒸気滅菌を行なってもリガンドとしての
活性の低下がほとんどない点でも医療機材として有利で
ある。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 田中 昌和 滋賀県大津市堅田二丁目１番１号 東洋紡 績株式会社総合研究所内

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 表面に式：−ＣＯ−（ＣＨ₂ ）_n −Ｘ
   （ＸはＣｌ，Ｂｒ，Ｉいずれかの原子，ｎは１ないし１
   ０の整数を表わす）で示されるような官能基の導入され
   た、平均繊維径が１ないし３０μｍである不織布に、抗
   ＣＤ４抗体における重鎖または軽鎖の可変領域を構成し
   ているアミノ酸配列中の相補性決定領域を形成しうるア
   ミノ酸配列のペプチドまたはその修飾ペプチドを固定化
   したことを特徴とするＣＤ４陽性細胞捕集材。
2. 【請求項２】 請求項第１項記載の修飾ペプチドが、抗
   ＣＤ４抗体の重鎖または軽鎖の可変領域を構成するアミ
   ノ酸配列において相補性決定領域を形成している領域の
   うちの少なくとも１つを含んでおり、その両端または片
   端がアミノ酸，ペプチドまたは−Ａ−（ＣＨ₂ ）_n −Ｂ
   −（Ａ，ＢはＮＨまたはＣＯ，ｎは１ないし２０の整
   数）で示されるもののいずれかがペプチド結合により結
   合しているもので、全アミノ酸残基数が７０個以内であ
   ることを特徴とするＣＤ４陽性細胞捕集材。