JPH06263797A

JPH06263797A - 生物活性環化ポリペプチド

Info

Publication number: JPH06263797A
Application number: JP4304347A
Authority: JP
Inventors: Chaim Gilon; ギロンチェイム; Zvi Zelinger; ゼリンガーズビ; Gerardo Byk; バイクゲラルド
Original assignee: Yissum Research Development Co of Hebrew University of Jerusalem
Current assignee: Yissum Research Development Co of Hebrew University of Jerusalem
Priority date: 1991-10-02
Filing date: 1992-10-02
Publication date: 1994-09-20
Anticipated expiration: 2019-03-22
Also published as: US5723575A; DE69230610T2; EP0564739B1; ATE189228T1; IL99628A0; JP3509029B2; EP0564739A2; EP0564739A3; DE69230610D1; IL99628A

Abstract

(57)【要約】（修正有）【構成】下記式（Ｉ）または（II）で表される環状の
バックボーンを有する生物活性ポリペプチド：［式中ｎは１〜１０、ｍは０〜１０の整数、〔ＡＡ〕，
〔Ａ′Ａ′〕は天然または合成アミノ酸残量、Ｒは天然
または合成アミノ酸鎖、Ｅは水酸基またはペプチド合成
において標準的なカルボキシル保護基を表し、半円を描
いている基はスペーサー基］【効果】代謝的に安定なＮＫ−１受容体選択性タキキ
ニン作用薬として、疼痛、炎症、アルツハイマー症等の
治療に使用できる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、生物学的に活性な、バ
ックボーン環状ペプチド、それらの製造方法、及びそれ
らを含む薬剤組成物に関する。さらに詳しくは、本発明
のペプチドは一般式（Ｉ）と（ＩＩ）：

【化３９】〔式中、置換基と半円を描いているラインは以下で説明
する〕によって示される。

【０００２】

【従来の技術】グラミシジンＳに関するＲ．Ｓｃｈｗｙ
ｚｅｒの先駆的研究〔Ｌｕｄｅｃｈｅｒ，Ｕ．等，Ｈｅ
ｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ．５４，１６３７（１９７
１）〕後に、中範囲と長範囲の環化によるペプチドの環
化によるペプチドの配座制限は広く用いられている。他
の形式の配座制限、例えばアミノ酸の配置及び構造の変
化、局部バックボーン変化、短い範囲の環化等の配座制
限の他に、中範囲と長範囲の環化〔Ｈｒｕｂｙ，Ｖ．
Ｊ．，ＬｉｆｅＳｃｉ．３１，１８９（１９８２）；
Ｋｅｓｓｌｅｒ，Ｈ．Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．
Ｅｄ．Ｅｒｇ．，２１，５１２（１９８２）；Ｓｃｈｉ
ｌｌｅｒ，Ｐ．Ｗ．，“Ｐｅｐｔｉｄｅｓ”Ｕｄｅｎｆ
ｒｉｅｎｄ，Ｓ．，とＭｅｉｅｎｈｏｆｅｒ，Ｊ．編
集，６巻，２５４頁（１９８４）；Ｖｅｂｅｒ，Ｄ．
Ｆ．とＦｒｅｉｄｉｎｇｅｒ，Ｒ．Ｍ．，Ｔｒｅｎｄｓ
ｉｎＮｅｕｒｏｓｃｉ．８，３９２（１９８５）；
Ｍｉｌｎｅｒ−Ｗｈｉｔｅ，Ｅ．Ｊ．，Ｔｒｅｎｄｓ
ｉｎＰｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１０，７０（１９８９）〕
は、下記の目的のために用いられている：生物学的に活
性なペプチドは代謝安定性を得るため、効力を高めるた
め、受容体選択性を与える又は改良するため、及びバイ
オアベイラビリティを制御するために環化される。これ
らの重要な薬理学的特性を直鎖状ペプチドの環化によっ
て制御する可能性は、中範囲と長範囲の環化の利用を刺
激して、天然のバイオアクチィブペプチドをペプチドミ
メティック（Ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃ）薬物に転
化させている。環化はまた構造上の制約をもたらし、配
座均質性を強化し、配座分析を促進する〔Ｋｅｓｓｌｅ
ｒ，Ｈ．，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎ
ｇ．，２１，５１２（１９８２）〕。さらに、構造硬直
性（ｒｉｇｉｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ）−活性関係の研究
と配座分析との組合せは、直鎖状ペプチドの生物学的に
活性な配座の見通しを与える。

【０００３】鋳型結合合成蛋白質〔Ｍｕｔｔｅｒ，
Ｍ．，とＶｕｉｌｌｅｕｍｉｅｒ，Ｓ．，Ａｎｇｅｗ．
Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇ．，１０１，５５１
（１９８２）〕のような、他の制御方法の他に、中範囲
と長範囲の環化は蛋白質の二次構造及び三次構造の安定
化制御のためにも用いられている。

【０００４】小さい、生物学的に活性な直鎖状ペプチド
は溶液中で互換性配座の迅速な平衡に達する〔Ｋｅｓｓ
ｌｅｒ，Ｈ．，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．
Ｅｎｇ．，２１，５１２（１９８２）〕、これは受容体
選択性と代謝感受性との欠損をもたらすと考えられてい
る〔Ｖｅｂｅｒ，Ｄ．Ｆ．とＦｒｅｉｄｉｎｇｅｒ，
Ｒ．Ｍ．，ＴｒｅｎｄｓｉｎＮｅｕｒｏｓｃｉ．
８，３９２（１９８５）〕。さらに、この迅速な平衡は
生物学的に活けな配座をも含めて、溶液中のそれらの配
座を測定しようとする試みも妨げる。例えば、ある一定
の直鎖状ペプチドは溶液中で、受容体Ａを活性化する配
座異性体Ａと、受容体Ｂを活性化する配座異性体Ｂと、
分解酵素の活性部位に嵌合する、長い配座Ｃと迅速に平
衡に達成する。この迅速な平衡を緩慢化し、配座スペー
スを減ずる構造変化は直鎖状ペプチドに配座制約を与え
る〔Ｋｅｓｓｌｅｒ，Ｈ．，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉ
ｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇ．，２１，５１２（１９８２）〕。

【０００５】生物学的見地から理想的な最も良い変化
は、ペプチドが受容体Ａとのみ相互作用し、受容体Ｂを
活性化する配座又は長い分解性配座Ｃのいずれにも達し
ないような程度に、平衡を緩慢化し、配座スペースを減
ずることである。活性配座を決定しようと試みる場合に
は、さらに制限が必要である。上記理論の有効性の実験
による証拠は、エンケファリン、ソマトスタチン、ゴナ
ドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）、コレシストキニ
ン（ＣＣＫ）、メラノサイト刺激ホルモン（αＭＳＨ）
及び、環化が受容体選択性と代謝安定性とを生ずる、他
の多くのペプチドの場合に〔Ｈｒｕｂｙ，Ｖ．Ｊ．，Ｌ
ｉｆｅＳｃｉ．３１，１８９（１９８２）；Ｋｅｓｓ
ｌｅｒ，Ｈ．，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．
Ｅｎｇ．２１，５１２（１９８２）；Ｓｃｈｉｌｌｅ
ｒ，Ｐ．Ｗ．，“Ｐｅｐｔｉｄｅｓ”，Ｕｄｅｎｆｒｉ
ｅｎｄ，Ｓ．，とＭｅｉｅｎｈｏｆｅｒ，Ｊ．編集，６
巻，２５４頁（１９８４）；Ｖｅｂｅｒ，Ｄ．Ｆ．とＦ
ｒｅｉｄｉｎｇｅｒ，Ｒ．Ｍ．，Ｔｒｅｎｄｓｉｎ
Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．８，３９２（１９８５）；Ｍｉｌｎ
ｅｒ−Ｗｈｉｔｅ，Ｅ．Ｊ．，ＴｒｅｎｄｓｉｎＰ
ｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１０，７０（１９８９）；Ａｌ−Ｏ
ｆｆｅｉｄｉ，Ｆ．等，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，３
２，２５５５（１９８９）；Ｃｈａｒｐｅｎｔｉｅｎ，
Ｂ．等，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，３２，１１８４（１
９８９）；Ｒｉｖｉｅｒ，Ｊ．Ｅ．等“ｐｅｐｔｉｄｅ
ｓ”，Ｒｉｖｉｅｒ，Ｊ．Ｅ．とＭａｒｓｈａｌｌ，
Ｇ．Ｒ．編集，３３頁（１９９０）〕又は生物活性な配
座の配座分析を可能にしたごく稀な場合に〔Ｋｅｓｓｌ
ｅｒ，Ｈ．，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．２５，９９７（１
９８６）〕見い出すことができる。

【０００６】中範囲と長範囲の環化を含む、配座制限さ
れたペプチドは主として、ホモデチック及びヘテロデチ
ック天然ペプチドの同じ形式の環化に従って製造されて
いる。これらには、（ａ）側鎖対側鎖環化（通常は、生
（ｎａｔｉｖｅ）の配列中に既に存在する官能基の環化
による、又はＧｌｕ及びＬｙｓ又はＣｙｓのそれぞれに
よる他のアミノ酸の置換による、ラクタム環及び／又は
Ｓ−Ｓ結合の形成）；（ｂ）末端対末端環化（以前に
は、バックボーン対バックボーン環化と呼ばれる）〔Ｍ
ａｎｅｓｉｓ，Ｎ．Ｊ．とＧｏｏｄｍａｎ，Ｍ．，Ｏｒ
ｇ．Ｃｈｅｍ．，５２，５３３１（１９８７）〕及び
（ｃ）側鎖対末端環化がある。最後に挙げた形式の環化
は側鎖対アミノ末端と側鎖対カルボキシル末端とを含
む。最大の選択性と活性とを得るための環の正確な位
置、種類及びサイズ（“スペーサー”によって制御する
こともできる〔Ｍａｎｅｓｉｓ，Ｎ．Ｊ．とＧｏｏｄｍ
ａｎ，Ｍ．，Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，５２，５３３１（１
９８７）〕）は主として、配座分析と共に構造−活性−
関係（ＳＡＲ）の考察によって決定される。

【発明が解決しようとする課題】

【０００７】環状ペプチドによる今までに達せられた印
象的な成功にも拘らず、上記形式による環化は、特に生
物活性ペプチドの“活性領域”で実施した場合に、生物
学的活性の若干な損失を生じた。典型的な例は物質Ｐ
（ＳＰ）とその関連ペプチド、哺乳動物タキキニン、ノ
イロキニンＡ（ＮＫＡ）及びノイロキニンＢ（ＮＫＢ）
の場合である。タキキニンは共通のカルボキシル末端配
列Ｐｈｅ−Ｘ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ_２（Ｘ＝
Ｐｈｅ又はＶａｌ）を共有する短い直鎖状ペプチド（１
０〜１１アミノ酸残基）である。物質Ｐのアミノ酸配列
を下記に示す：

【化４０】（ＳＰ中のアミノ酸残基の位置を以下の説明と実施例中
に用いる）。

【０００８】ＳＰと他のタキキニンは疼痛刺激の伝達、
腺分泌、腸運動性、血管拡張、炎症性疼痛反応及び非常
に多様な挙動効果を含めた、種々な生理的機能に関与し
ている。タキキニンは３種の受容体ＮＫ−１，ＮＫ−
２，ＮＫ−３を活性化する〔ＴｒｅｎｄｓＰｈａｒ
ｍ．Ｓｃｉ．ＲｅｃｅｐｔｏｒＮｏｍｅｎｃｌａｔｕ
ｒｅＳｕｐｐｌｅｍｅｎｔ２５頁（１９９０）〕。
哺乳動物タキキニンはそれらの各々が２種以上の受容体
を活性化するという意味で選択的ではない。従って、例
えばＮＫＢは匹敵しうる効力（それぞれ４．２と１．３
のＥＣ_５０（ｎＭ）〔Ｐａｐｉｒ−Ｋｒｉｃｈｅｌｉ，
Ｄ．等，Ｐａｉｎ，３１，２６３（１９８７）〕）を有
するＮＫ−１とＮＫ−３とを活性化する。哺乳動物タキ
キニンは、それらの選択的欠損の他に、特にｉｎｖｉ
ｖｏ分析では迅速に分解する〔Ｗｏｒｍｓｅｒ，Ｕ，
等，“Ｐｅｐｔｉｄｅｓ１９８４”Ｒａｇｎａｒｓｓ
ｏｎ，Ｕ．編集，３５９頁（１９８５）〕。

【課題を解決するための手段】

【０００９】本発明者は、Ｎ−アルキル化アミノ酸を含
む、ＳＰのカルボキシル末端配列の２種の配座制約のあ
る直鎖状ヘキサペプチド類似体を製造した、これは受容
体選択性を示した。ＮＫ−３選択性類似体センクチド
〔Ｌａｕｆｅｒ，Ｒ．等，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，
２２，１０２５７（１９８６）〕（Ｓｕｃｃ〔Ａｓ
ｐ^６，Ｎ−ＭｅＰｈｅ^８〕ＳＰ_６−１１，ＥＣ
_５０（ｎＭ）ＮＫ−３：０．５，ＮＫ−２：＞２００，
０００，ＮＫ−１：３５，０００）及びＮＫ−１選択性
類似体ＷＳセプチド〔Ｐａｐｉｒ−Ｋｒｉｃｈｅｌｉ，
Ｄ．等，Ｐａｉｎ，３１，２６３（１９８７）（Ａｃ
〔Ａｒｇ^６，Ｐｒｏ^９〕ＳＰ_６−１１，ＥＣ_５０（ｎ
Ｍ）ＮＫ−１：３．０，ＮＫ−２：＞２００，０００，
ＮＫ−３：＞１００，０００）。センクチドは試験した
全ての組織中で代謝安定性であったが、ＷＳセプチドは
代謝不安定性であった（肝臓、腎臓及び耳下腺スライス
では数分間の半減期）。

【００１０】本発明者はＮＫ−３とＮＫ−１受容体のそ
れぞれの配座要件を解明するために２種の選択的な類似
体センクチドとＷＳセプチドを用いることを試みてい
る。この目的のために、彼らはＮＭＲ研究に基づいてセ
ンクチドとＷＳセプチドの試験的分子モデルを作成した
〔Ｌｅｖｉａｎ−Ｔｅｉｔｅｌｂａｕｍ，Ｄ．等，Ｂｉ
ｏｐｏｌｙｍｅｒｓ，２８，５１（１９８９）〕。セン
クチドとＷＳセプチドとの分子モデルを生物活性配座に
関連づけるために、例えば環化のような、付加的な配座
制約を負わせることができる。これらのより硬い類似体
がそれらの生物活性と選択性とを維持するならば、これ
らの類似体に対してさらに配座分析を実施することがで
きた。ＳＰの活性領域、すなわちＣ−末端ヘキサペプチ
ドを環化する試みにより、生物学的に不活性な化合物を
生じた〔Ｎｅｕｂｅｒｔ，Ｋ．等，Ｐｈａｒｍａｚｉｅ
４０，６１７（１９８５）；Ｃｈａｓｓｓｉｎｇ，
Ｇ．等，“ｐｅｐｔｉｄｅｓ１９８４”，Ｒａｇｎａ
ｒｓｓｏｎ，Ｕ．編集，３４５頁（１９８５）；Ｓａｎ
ｄｂｅｒｇ，Ｂ．Ｅ．Ｂ．等，“ｐｅｐｔｉｄｅｓ１
９８４”，Ｒａｇｎａｒｓｓｏｎ，Ｕ．編集，３６９頁
（１９８５）；Ｔｈｅｏｄｏｒｏｐｏｕｌｏｓ，Ｄ．
等，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ，２８，１５３６（１９８
５）；Ｄｒｍｅｎ，Ｐ．Ｓ．等，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉ
ｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１２７，６５６
（１９８５）；Ｍｕｔｕｌｉｓ，Ｆ．等，Ｂｉｏｏｒ
ｇ，Ｃｈｉｍ．，１１，１２７６（１９８５）〕。

【００１１】理論的な論文〔Ｇｉｌｏｎ，Ｃ．等，Ｂｉ
ｏｐｏｌｙｍｅｒｓ，３１，７４５（１９９１）〕で
は、発明者はＷＳセプチドをモデルペプチドとして用い
て、環化の新しい概念を述べている。提案された新しい
環化方法は“バックボーン環化”と名づけられ、前記論
文中で詳述されている。本発明の環化ペプチド主題の若
干は前記文献中で一般的に開示されているが、この論文
は本発明の化合物の製造方法を提案していない。

【００１２】本発明者のグループによる次の研究は本発
明の新規な環化ペプチドの製造をもたらした。環化によ
って達成すべき目的が良好に定義されているという事実
にも拘らず、又理論的ＳＡＲ考察を考慮に入れたが、新
規な生物学的に活性かつ選択的なペプチドを得るには非
常に努力を要した。以下で特に例示するＳＰ類似体は、
開示する一般的な環化方法及びそれによって製造される
環化ペプチドのモデルと見なすべきである。

【００１３】ノイロペプチドは広範囲な内分泌活性、運
動活性及び挙動活性を制御する〔Ｋｒｉｅｇｅｒ，Ｄ．
Ｔ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ２２２，９７５−９７８（１
９８３）；Ｓｎｙｄｅｒ，Ｓ．Ｈ．Ｓｃｉｅｎｃｅ２
０９，９７６（１９８０）〕。これらの物質は痛覚脱
失、食欲調節、渇き、体温、気分、学習、神経的挙動、
疼痛及び免疫反応の調整を含めた、多様な生理的機能を
仲介する。従って、アゴニスト又はアンタゴニストの両
方としての、天然に生成するノイロペプチドの誘導体は
多くの神経的及び挙動的障害の予防と治療とに大きな可
能性を有する。

【００１４】しかし、多くの試みにも拘らず、治療に用
いられる配位子はごく僅かに存在するにすぎない。先行
技術の試みは主として、天然生成ペプチドの生物学的活
性の模倣を目的としていた。前記活性を制御及び／又は
調節する治療剤を設計し、合成するためには、多くの要
素を考慮に入れるべきである。ペプチドの生物活性配座
に関する情報は重要である。ペプチドは種々な配座で生
じることができ、各配座は種々の受容体に対して特異的
である。望ましい生物学的活性の他に、配座安定性の欠
損は好ましくない受容体及び好ましくない副作用との関
連を生じる。多くの公知のノイロペプチドの中のごく僅
かなノイロペプチドの生物活性配座が今までに確立され
ているにすぎない。

【００１５】ノイロペプチドは胃腸管、血液及び他の組
織中において迅速な蛋白質分解を受ける。シナプスにお
けるノイロペプチドのファーマコキネティクスは治療用
ペプチドのものとは全く異なる。シナプスにおいては、
ノイロペプチドがその機能を発揮するのに要する時間
は、関与する距離が短いために非常に短い。ある種のノ
イロペプチドの活性を停止する原因となる内因性プロテ
アーゼは、近隣に存在するプロテアーゼのみであり、そ
れらはその機能を完成した直後にペプチドを分解する。
“治療用ペプチド”を創案するためには、その構造が分
解の原因となるプロテアーゼに対して並びにＧＩ管、血
液及び他の組織に存在する他のプロテアーゼに対して安
定であるべきである。

【００１６】天然ペプチドは、ＧＩ／血液及び血液／脳
関門を容易には通過しない。この問題は、代謝安定性の
問題と引き離すことはできない。ＧＩ／血液と、血液／
脳関門の両方を通過することは、ペプチドを薬物として
の利用を考える場合に重要な段階である。いくらかのペ
プチドは分解に対して上首尾に安定化されているが、そ
のバイオアベイラビィリティ、すなわち血液／脳関門通
過は不明のままである。さらに、異なる受容体は異なる
生理活性を誘発し、従ってペプチドによる好ましくない
受容体の誘発は好ましくない副作用を生じさせる。一般
的な仮説によると、直鎖状ペプチドが多くの配座と迅速
な平衡状態にあり、これらの配座のいくつかは好ましく
ない受容体を活性化するということである。また、ペプ
チドは酵素分解を受けるために、正しい配座でなければ
ならない。生物活性配座と称される好ましい配座のみが
好ましい受容体を活性化し、望まれる特異な生物活性の
みを生じる。

【００１７】天然生成ペプチド（例えばノイロペプチ
ド）のこれらの問題は、ペプチドを薬物として適用する
際、並びにペプチドとその受容体との薬理学的及び分子
的相互作用を理解する際に非常に重要であり、大きな問
題となる。

【００１８】有望な先行技術の結果（例えば、内因性エ
ンケファリンの“模倣”である鎮痛性ペプチドミメティ
ック麻酔剤）は、合理的に計画されたというよりもラン
ダムに計画された研究を通して成し遂げられたものであ
り、上記のすべての要因を考慮したわけではなかった。

【００１９】本発明は、以下の一般式で表される環状の
バックボーンを有する生物活性ポリペプチドである。

【化４１】（式中、ｎは１ないし１０の整数を表し、ｍは０または
１ないし１０の整数を表し、〔ＡＡ〕は天然又は合成ア
ミノ酸残基であって、ｎが１より大きい場合には該アミ
ノ酸残基は同一であってもよく異なっていてもよく、
〔Ａ^１Ａ^１〕は天然又は合成アミノ酸残基であって、ｍ
が１より大きい場合には該アミノ酸残基は同一であって
もよく異なっていてもよく、Ｒは天然又は合成アミノ酸
側鎖を表し、Ｅは水酸基、またはペプチド合成において
普通に用いられているカルボキシル保護基であって、
（たとえばＳｃｈｒｏｅｄｅｒ等，“ＴｈｅＰｅｐｔ
ｉｄｅｓ”，第１巻，ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ
社，１９６５年，Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ，“Ｐｒｉｎｃｉ
ｐｌｅｓｏｆＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉ
ｓ”，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ社，１９８４
年，Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ等，“ｔｈｅＰｒａｃｔｉｃ
ｅｏｆＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｓ
ｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ社，１９８４年，ＭｃＯ
ｍｉｅ（編）“ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓ
ｉｎＯｒｇａｎｉｃＣｈｅｍｉｓｔｒｙ”，Ｐｌｅ
ｎｕｍＰｒｅｓｓ社，１９７３年、Ｇｒｅｅｎｅ，
“ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇ
ａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔ
ｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社，１９８１年、または、Ｂａｒａ
ｎｙａｎｄＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，“ＴｈｅＰｅｐ
ｔｉｄｅｓ：Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ
ａｎｄＢｉｏ１ｏｇｙ”，第２巻，第１章，Ａｃａｄ
ｅｍｉｃＰｒｅｓｓ社，１９８０年）、好ましくはアル
コキシ、置換アルコキシまたはアリールオキシから選択
されるもの、または上記カルボキシル基と同一であって
もよくアミノ基もしくは置換アミノ基であってもよいブ
ロック基（ここで上記カルボキシル保護基またはブロッ
ク基は不溶性の高分子担体に共有結合していてもよ
い）、半円を描いている線は下記式のスペーサー基、

【化４２】（式中、Ｍは−Ｓ−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＨ−及び−Ｓ−か
らなる群より選択され、ｐ及びｑは、同一であってもよ
く異なっていてもよく、それぞれ２ないし１０の整数を
表す）を表わす）

【００２０】また、本発明は以下の一般式で表わされる
バックボーンが環化した生物活性ポリペプチドである。

【化４３】（式中、ｄは０または１ないし１０の整数を表し、ｅは
１ないし１０の整数を表し、〔ＡＡ〕は天然又は合成ア
ミノ酸残基であって、ｅが１より大きい場合には該アミ
ノ酸残基は同一であってもよく異なっていてもよく、
〔Ａ^１Ａ^１〕は天然又は合成アミノ酸残基であって、ｄ
が１より大きい場合には該アミノ酸残基は同一であって
もよく異なっていてもよく、Ｒは天然又は合成アミノ酸
側鎖を表し、Ｅは水酸基、またはペプチド合成において
普通に用いられているカルボキシル保護基であって好ま
しくはアルコキシ、置換アルコキシまたはアリールオキ
シから選択されるもの、または上記カルボキシル基と同
一であってもよくアミノ基もしくは置換アミノ基であっ
てもよいブロック基（ここで上記カルボキシル保護基ま
たはブロック基は不溶性の高分子担体に共有結合してい
てもよい）、半円を描いている線は下記式のスペーサー
基、

【化４４】（式中、ｐは上記と同一の意味を表し、Ｍはアミノ基、
カルボキシル基またはイオウ原子を表し、ｘは０または
１を表し、Ｙはバックボーンアミノ酸の側鎖を表す）を
表わす）

【００２１】式Ｉで示される化合物において、式ＩＩＩ
において定義したＭは、好ましくはアミドまたは−Ｓ−
Ｓ−基である。式ＩＩで示される化合物において、式Ｉ
Ｖにおいて定義したＹは、好ましくはホモシステイン側
鎖であり、同じく式ＩＶにおいて定義したｘは、好まし
くは０であり、およびｘが１である場合は、Ｍは好まし
くはイオウ原子である。

【００２２】両一般式Ｉ及びＩＩの化合物において、Ｅ
は好ましくはアミノ基である。本明細書全体を通して基

【化４５】はアミノ酸残基を示し、ｙが１以上の場合は、ペプチド
鎖においてＮＨはＮ末端を、ＣＯはＣ末端を構成する。
ｙがゼロである場合は、ＮＨ−〔ＡＡ〕−ＣＯ基全体が
存在しないと理解すべきである。好ましい具体的な環化
ペプチドは、本発明のシクロペプチドとその調製方法の
ためのモデルとしてここでは役立つものであるが、これ
らはノイロペプチド、より具体的には物質Ｐのホモロー
グである。式Ｉによる好ましいペプチドは、

【００２３】

【化４６】Ｒ＝（ＣＨ_２）_３ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ_２；ｎ＝２；
〔ＡＡ〕_ｎ＝Ｐｈｅ−Ｐｈｅ；ｍ＝２；〔Ａ’Ａ’〕_ｍ
＝Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ_２；円を描く線＝ＣＯ−（ＣＨ
_２）_４−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ_２）_３・

【化４７】Ｒ＝（ＣＨ_２）_３ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ_２；ｎ＝２；
〔ＡＡ〕_ｎ＝Ｐｈｅ−Ｐｈｅ；ｍ＝２；〔Ａ’Ａ’〕_ｍ
＝Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ_２；円を描く線＝ＣＯ−（ＣＨ
_２）_４＝ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ_２）_３・

【化４８】Ｒ＝ＣＨ_２−ＣＯＯＨ；ｎ＝２；〔ＡＡ〕_ｎ＝Ｐｈｅ−
Ｐｈｅ；ｍ＝２；〔Ａ’Ａ’〕_ｍ＝Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｎ
Ｈ_２；円を描く線＝ＣＯ−（ＣＨ_２）_４−ＣＯ−ＮＨ−
（ＣＨ_２）_３・

【化４９】Ｒ＝（ＣＨ_２）_３ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ_２；ｎ＝２；
〔ＡＡ〕_ｎ＝Ｐｈｅ−Ｐｈｅ；ｍ＝２；〔Ａ’Ａ’〕_ｍ
＝Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−ＮＨ_２；円を描く線＝ＣＯ−（ＣＨ
_２）_４−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ_２）_３・

【００２４】式ＩＩによる好ましいペプチドは以下の通
りである。

【化５０】ｄ＝３；〔ＡＡ〕_ｄ＝Ａｃ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ；
Ｒ＝Ｈ；ｅ＝１；〔Ａ^１Ａ^１〕_ｅ＝Ｌｅｕ；Ｘ＝ＮＨ_２
円を描く線＝（ＣＨ_２）_３−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ_２−Ｓ
−（ＣＨ_２）_２・

【００２５】本発明によるバックボーンの環化はペプチ
ドバックボーンにおけるＮαおよび／またはＣα原子の
結合を含む。Ｎ−バックボーン環化の概念は図１に示さ
れている。たとえば、Ｎ−バックボーン環化を行うため
に、ペプチド結合の水素をω−官能化アルキレンで置き
換え、次にこれを側鎖又は末端に結合させるか、あるい
はインター結合させて望ましい環状ペプチドを形成する
ことができる。かくして、本発明はまた、以下のスキー
ムに従った一般式Ｉおよび／またはＩＩの環状ペプチド
の調製方法にも関する。

【００２６】一般式Ｉで示される化合物は、以下のステ
ップを含む方法で調製される。スキーム１（ａ）下式

【化５１】（式中、ｑは２ないし１０の整数、ＧおよびＬは、同一
もしくは異なって、ペプチド合成において通常用いられ
る保護基（たとえばＳｃｈｒｏｅｄｅｒ等，“Ｔｈｅ
Ｐｅｐｔｉｄｅｓ”，第１巻，ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒ
ｅｓｓ社，１９６５年，Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ，“Ｐｒｉ
ｎｃｉｐ１ｅｓｏｆＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓ
ｉｓ”，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ社，１９８４
年，Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ等，“ｔｈｅＰｒａｃｔｉｃ
ｅｏｆＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｓ
ｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ社，１９８４年，ＭｃＯ
ｍｉｅ（編）“ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓ
ｉｎＯｒｇａｎｉｃＣｈｅｍｉｓｔｒｙ”，Ｐｌｅｎ
ｕｍＰｒｅｓｓ社，１９７３年、Ｇｒｅｅｎｅ，“Ｐ
ｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎ
ｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒ
ｓｃｉｅｎｃｅ社，１９８１年、または、Ｂａｒａｎｙ
ａｎｄＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，“ＴｈｅＰｅｐｔ
ｉｄｅｓ：Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓａ
ｎｄＢｉｏｌｏｇｙ”，第２巻，第１章，Ａｃａｄｅ
ｍｉｃＰｒｅｓｓ社，１９８０年）で示される化合物
と、

【００２７】アミノ酸または式Ｈ_２Ｎ−〔Ａ^１Ａ^１〕_ｍ
−ＣＯ−Ｅ，で示されるポリペプチド（式中、ｍは１な
いし１０の整数、Ａ^１Ａ^１は天然または合成アミノ酸残
基を示す。ｍが１より大きい場合には該アミノ酸残基
は、同一であっても異なっていてもよい。Ｅは水酸基、
またはペプチド合成において普通に用いられているカル
ボキシル保護基であって好ましくはアルコキシ、置換ア
ルコキシもしくはアリールオキシから選択されるもの、
または、上記カルボキシル基と同一であってもよく、ア
ミノ基もしくは置換アミフ基であってもよいブロック基
を示す。ここで上記カルボキシル保護基またはブロック
基は任意に不溶性の高分子担体に共有結合していてもよ
い）とを反応させ、下式で示される化合物を得る。

【化５２】

【００２８】（ｂ）式ＶＩａで示される化合物から、
選択的にＬで示される保護基を脱離し、下式に示される
化合物を得る。

【化５３】

【００２９】（ｃ）式ＶＩＩａで示される化合物と、
アミノ酸または下式で示されるペプチド

【化５４】（式中、ｎは１ないし１０の整数、〔ＡＡ〕は天然又は
合成アミノ酸残基を示し、ｎが１より大きい場合には、
該アミノ酸残基は同一であっても異なっていてもよい。
Ｊはペプチド合成において普通に用いられている保護基
を示す）とを反応させ、下式で示される化合物を得る。

【化５５】

【００３０】（ｄ）式ＩＸａで示される化合物から、
選択的にＪで示される保護基を脱離し、式Ｘａに示され
る化合物を得る。

【化５６】

【００３１】（ｅ）式Ｘａで示される化合物と、下式
で示される化合物

【化５７】（式中、ｐは先に定義した通り）とを反応させ、下式に
示される化合物を得る。

【化５８】

【００３２】（ｆ）式ＸＩＩａで示される化合物か
ら、選択的にＧで示される保護基を脱離し、下式で示さ
れる化合物を得る。

【化５９】

【００３３】（ｇ）式ＸＩＩＩａで示される化合物
を、適当なカップリング剤を用いて、ペプチド合成にお
いて普通に用いられている方法で反応させ、他の側鎖保
護基を除去し、一般式Ｉ（式中、ｍは１ないし１０の整
数）で示される化合物を得る。

【００３４】スキーム２（ａ）下式で示される化合物

【化６０】（式中、ｑは２ないし１０の整数、ＧおよびＬは同一も
しくは異なって、それぞれ水素原子および／またはペプ
チド合成において普通に用いられている保護基を示す。
Ｅは水酸基、またはペプチド合成において普通に用いら
れているカルボキシル保護基であって、好ましくはアル
コキシ、置換アルコキシもしくはアリールオキシから選
択されるもの、または、上記カルボキシル基と同一であ
ってもよく、アミノ基もしくは置換アミノ基であっても
よいブロック基を示す。ここで上記カルボキシル保護基
またはブロック基は任意に不溶性の高分子担体に共有結
合していてもよい）から、選択的にＬで示される保護基
を脱離し、下式で示される化合物を得る。

【化６１】

【００３５】（ｂ）式ＶＩｂで示される化合物と、ア
ミノ酸または下式で示されるペプチド

【化６２】（式中、ｎは１ないし１０の整数、〔ＡＡ〕は天然又は
合成アミノ酸残基を示し、ｎが１より大きい場合には、
該アミノ酸残基は同一であっても異なっていてもよい。
Ｊはペプチド合成において普通に用いられている保護基
を示す）とを反応させ、下式で示される化合物を得る。

【化６３】

【００３６】（ｃ）選択的にＪで示される保護基を脱
離し、下式で示される化合物を得る。

【化６４】

【００３７】（ｄ）式ＩＸｂで示される化合物と、式
ＸＩで示される化合物とを反応させ、下式で示される化
合物を得る。

【化６５】

【００３８】（ｅ）式Ｘｂで示される化合物から、選
択的にＧで示される保護基を脱離し、下式で示される化
合物を得る。

【化６６】

【００３９】（ｆ）式ＸＩｂで示される化合物を、上
記（ｇ）に記載したカップリング剤を用いて反応させ、
一般式Ｉ（式中、ｍ＝０）で示される化合物を得る。

【００４０】一般式ＩＩで示される化合物は、以下のス
テップを含む方法で調製される。（ａ）下式

【化６７】（式中、Ｅおよびｅは先に定義した通りであり、〔Ａ^１
Ａ^１〕は、天然又は合成アミノ酸残基を示す。Ｙは、天
然又は合成アミノ酸の側鎖を示し、Ｑはペプチド合成に
おいて普通に用いられている保護基を示す）で示される
化合物と、式Ｖａで示される化合物とを反応させ、下式
で示される化合物を得る。

【化６８】

【００４１】（ｂ）式ＸＶで示される化合物から、選
択的にＬで示される保護基を除去し、下式で示される化
合物を得る。

【化６９】

【００４２】（ｃ）式ＸＶＩで示される化合物と、ア
ミノ酸または下式で示されるペプチド

【化７０】（式中、ｎは１ないし１０の整数、〔ＡＡ〕は天然又は
合成アミノ酸残基を示し、ｄが１より大きい場合には、
該アミノ酸残基は同一であっても異なっていてもよい。
Ｐはペプチド合成において普通に用いられている保護基
を示す）とを反応させ、下式で示される化合物を得る。

【化７１】

【００４３】（ｄ）（ｉ）Ｙがカルボキシル含有側
鎖である場合は、式ＸＶＩＩＩで示される化合物から、
選択的にＧおよひＱで示される保護基を除去し、下式で
示される化合物を得る。

【化７２】式ＸＩＸで示される化合物を、前記ステップ（ｇ）に記
載した方法を用いて環化し、Ｐで示される保護基および
他の側鎖保護基を脱離し、一般式ＩＩで示される化合物
を得る。または、

【００４４】（ｉｉ）Ｙがカルボキシル以外の求核官
能基を含有する側鎖である場合は、Ｇで示される保護基
を脱離し、次いでこの化合物と、下式で示される化合物

【化７３】（式中、Ｚは１ないし１０の整数、Ｗは官能基を含有す
る基を示す）とを反応させ、下式に示す化合物を得る。

【化７４】式ＸＸＩで示される化合物から選択的にＱで示される保
護基を除去し、環化し、次いでＰで示される保護基およ
び他の側鎖保護基を脱離して、一般式ＩＩで示される化
合物を得る。

【００４５】本発明は、また一般式ＶａおよびＶｂで示
される化合物にも関する。

【化７５】

【化７６】（上記一般式ＶａおよびＶｂ中、置換基は先に定義した
通りである。）これらの化合物は、本発明の環化ポリペ
プチドの調製方法における中間生成物である。本発明
は、また一般式ＶａおよびＶｂで示される化合物の製造
方法にも関する。

【００４６】本発明の一実施態様によれば、一般式Ｖａ
で示される化合物は以下のようにして調製される。

【００４７】（ａ）下式で示されるα−ハロカルボン
酸

【化７７】（式中、Ｒは先に定義した通りであり、Ｈａｌは塩素、
臭素またはヨウ素を示す）と、下式で示されるアルキレ
ンジアミン

【化７８】（式中、ｑは先に定義した通り）とを反応させ、下式で
示される化合物を得る。

【化７９】

【００４８】（ｂ）（ｉ）式ＸＸＩＶで示される化
合物と、Ｇで示される基を含む適当な試薬（ここでＧは
先に定義した通り）とを、ペプチド合成において通常用
いられる方法を用いて反応させ、下式に示される化合物
を得る。

【化８０】次いで、式ＸＸＶＩで示される化合物と、Ｌを含む適当
な試薬（ここでＬは先に定義した通り）とを、ペプチド
合成において通常用いられる方法を用いて反応させ、式
Ｖａに示される化合物を得る、または

【００４９】（ｉｉ）式ＸＸＩＶで示される化合物
と、Ｇを含む適当な試薬（ここでＧは先に定義した通
り）とを、ペプチド合成において通常用いられる方法を
用いて反応させ、下式で示される化合物を得る。

【化８１】次いで、第２級アミノ基からＧで示される保護基を選択
的に脱離し、一般式ＸＸＶＩで示される化合物を得る。

【００５０】一般式Ｖｂで示される化合物は以下のよう
にして調製される。（ｉ）上記のようにして得た式Ｖａで示される遊離酸
と、Ｅで示される基を含む適当な試薬（ここでＥは先に
定義した通り）とを、ペプチド合成において普通に用い
られている方法を用いて反応させ、エステル、アミド、
または高分子担体との共有結合を得る、または、（ｉ
ｉ）式ＶＩｂで示される遊離酸と、Ｌで示される基を
含む適当な試薬（ここでＬは先に定義した通り）とを、
ペプチド合成において普通に用いられている方法を用い
て反応させ、エステル、アミド、または高分子担体との
共有結合を得る。式ＶＩｂで示される化合物は、式ＸＸ
ＶＩで示される化合物の遊離酸とＥで示される基を含む
適当な試薬（ここでＥは先に定義した通り）とを反応さ
せ、エステル、アミドまたは高分子担体との共有結合を
得る。

【００５１】上記した式Ｖ〜ＸＸＶＩＩＩで示される化
合物において、保護基であるＧ、Ｌ、またはＪは、好ま
しくはＢｏｃ、ＦｍｏｃまたはＺであり、保護基Ｑは、
好ましくは上記に加えてＢｚｌ、ＡＣＭ、またはｔ−ブ
チルである。

【００５２】上記した方法において、カップリング剤
は、好ましくはジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣ
Ｃ）、ビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホス
フィニッククロリド（ＢＯＰ−Ｃｌ）、ベンゾトリアゾ
リル−Ｎ−オキシトリジメチルアミノホスホニウム・ヘ
キサフルオロ・フォスフェート（ＢＯＰ）、１−オキソ
−１−クロロホスホラン（Ｃｐｔ−Ｃｌ）、ならびにＤ
ＣＣおよびヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）
の混合物である。

【００５３】本発明は、また、本発明の環状ポリペプチ
ドを活性成分として含む薬理組成物に関し、選択的な生
化学的反応が必要な場合に使用できる。本発明の環状ポ
リペプチドは、天然ポリペプチド、たとえばヒトタキキ
ニンなどのニューロポリペプチドの、安定しかつ選択的
なアゴニストとして使用できる。本発明の薬理組成物
は、タキキニンの影響による種々の疾病に使用できる。
たとえば種々の疼痛、炎症、乾癬、慢性関節リウマチ、
および家族性自律神経失調症、パーキンソン病、アルツ
ハイマー症などの神経症、およびリターディブ・ディス
キニシア（ＲｅｔａｒｄｉｖｅＤｉｓｋｉｎｅｓｉ
ａ）に使用できる。

【００５４】本発明の新規な組成物は、上記の活性成分
の他に、通常用いられる薬理的に許容される担体、希釈
剤などを含んでよい。錠剤、ピル、カプセルなどの経口
投与用の固体の組成物は、活性成分と通常用いられてい
る薬理的に許容できる成分、たとえばコーンスターチ、
ラクトース、サクロース、ソルビトール、タルク、ステ
アリン酸、マグネシウムステアレート、ジカルシウムフ
ォスフェートなどの成分と、ガムとを薬理的に許容でき
る希釈剤と共に混合して調製される。錠剤またはピル
に、当該技術分野で知られている薬理的に許容できる材
料を被覆または調合して、服用の延長効果や徐放性効果
が得られるようにすることができる。他の固体状の組成
物としては直腸投与用に座薬として調製することができ
る。

【００５５】経口投与またはインジェクション用に液体
状に調製してもよい。インジェクション投与という語に
は、皮下投与、経十二指腸投与、静脈内投与、髄腔内注
入などの投与が含まれる。液状の組成物は、他の薬や類
似の薬理物と同様に、水溶液、香料シロップ、水性もし
くは油性の懸濁液、食用油による香料エマルジョンを含
んでよい。さらに本発明の組成物を鼻内上顎等の投与用
にエアゾールとしてもよい。ヒトへの有効投与量は、一
般に０．０５−５０ｍｇ／ｋｇ重であり、１日１〜４回
服用する。しかしながら、１日おきに服用したり、さら
に間をあけて服用することも可能である。特定の投与量
は、治療にあたっている医者によって、投与の方法、患
者の年齢、体重、カウンターインディケーション等を考
慮して定められる。

【００５６】

【実施例】

合成法一般的な材料および方法アルキレンジアミンは、ＭｅｒｃｈＳｃｈｕｃｈａｔ
ｄｔ社の製品を購入し、これをさらに精製することなく
使用した。α−クロロカルボン酸は、相当するアミノ酸
から合成した〔Ｋｏｐｅｐｅｎｈｏｅｆｅｒ，Ｂ；Ｓｃ
ｈｕｒｉｇ，Ｖ，．ＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉ
ｓ，６６，１５１（１９８７），Ｈｅａｔｈｃｏｃｋ，
Ｃ．Ｈ．Ｅｄ；ＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｙｅｓｉｓ
Ｉｎｃ．ＵＳＡ〕。α−ブロモカルボン酸は、以下の文
献に記載の方法を変形して合成した〔Ｋｏｐｅｐｅｎｈ
ｏｅｆｅｒ，Ｂ；Ｓｃｈｕｒｉｇ，Ｖ，．Ｏｒｇａｎｉ
ｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓ，６６，１５１（１９８７），
Ｈｅａｔｈｃｏｃｋ，Ｃ．Ｈ．Ｅｄ；Ｏｒｇａｎｉｃ
ＳｙｎｔｙｅｓｉｓＩｎｃ．ＵＳＡ〕。すなわち、５
ＮのＨＣｌの代わりに５ＮのＨＢｒを使用した。ベンジ
ルｐ−ニトロフェニルカルボネートとＢＯＰ−Ｃｌは、
Ａｒｄｒｉｃｈ社から購入した。ＢＯＰ−Ｃｌは公知の
方法に従い精製した〔ＶａｎＤｅｒＡｗｅｒｓ，Ｃ．
ａｎｄＡｎｔｅｕｍｉｓ，Ｍ．Ｊ．Ｏ．Ｉｎｔ．Ｊ．
ＰｅｐｔｉｄｅＰｒｏｔｅｉｎＲｅｓ．２９，５７
４（１９８７）〕。ＢＯＰはＲｉｃｈｅｌｉｅｕＣａ
ｎａｄａ社から購入した。チオニルクロライドは、フラ
ックスオイル上還流、蒸留した。溶媒は、全て分析的に
精製されており、さらに精製することなく使用した。

【００５７】高速液体クロマトグラフィーは、ＬＣ−５
０００グラディエントポンプおよび変調波長を２２０ｎ
ｍとしたＵＶ−ＶＩＳ検出器を備えたＭｅｒｃｋＨｉ
ｔａｃｈｉ６５５Ａを使用して行なった。フロウは１
ｍｌ／分に固定し、溶離液としては、水（＋０．０５％
ＴＦＡ）、ＭｅＯＨおよびＭｅＣＮを使用した。カラム
はＭｅｒｃｋ社のＬｉｃｈｒｏｓｐｈｅｒｅＲＰ−１
８またはＲＰ−８１５ｃｍ×４．２ｍｍＩＤを使用
した。光学純度は、Ｍｅｒｃｋ社のＣｈｉｒａＳｐｈｅ
ｒ^Ｒカラム（５μ，２５ｃｍ×４ｍｍＩＤ）．を用い
てチェックした。フロウは１ｍｌ／分に固定し、溶離液
としては、ｎ−ヘキサン−ジオキサン−ｉ−プロパノー
ルをそれぞれ５０／４４／５で使用した。検出器は波長
を２５４ｎｍとした。融点は、ＴｈｏｍａｓＨｏｏｖ
ｅｒＣａｐｉｌｌａｒｙｍａｃｈｉｎｅを使用して
測定した。光学活性は、１０ｃｍのセルを用い、Ｐｅｒ
ｋｉｎＥｌｍｅｒ−１４１Ｐｏｌａｒｉｍｅｔｅｒ
を使用し、２５℃、ナトリウムランプで測定した。元素
分析は、ＴｈｅＨｅｂｒｅｗＵｎｉｖｅｒｓｉｔ
ｙ，Ｊｅｒｕｓａｌｅｍのｔｈｅｍｉｃｒｏａｎａｌ
ｙｔｉｃａｌｄｅｐａｒｔｍｅｎｔで行なわれた。

【００５８】構成単位およびジペプチドの^１Ｈ−ＮＭＲ
スペクトルは、ＢｒｕｋｅｒＷＰ−２００ｐｕｌｓ
ｅｄＦＴｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒによって記録し
た。サンプルはＣＤＣｌ_３に溶解させた。ケミカルシフ
トは、ＴＭＳ内部標準に関連してｐｐｍ内である。ペプ
チドＩｂの^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、５００および６
００ＭＨｚのｐｒｏｔｏｎｒｅｓｏｎａｎｃｅｆｒ
ｅｑｕｅｎｃｉｅｓを使用し、ＢｒｕｋｅｒＡＭＸ−
５００および６００ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒｓによっ
て記録した。データはＵＸＮＭＲプログラムを使用し、
ＢｒｕｋｅｒＸ３２ワークステーションで解析した。３
１ｍｇのポリペプチドをＡｌｄｒｉｃｈ社のＤＭＳＯ−
ｄ_６に溶解し、５ｍｍのＮＭＲ−チューブに入れた。ス
ペクトルは３０３Ｋで記録した。プロトンレゾナンスの
割り当ては、ｈｏｍｏｎｕｃｌｅａｒＮＯＥＳＹ，Ｒ
ＯＥＳＹ，ＴＯＣＳＹおよびＥ．ＣＯＳＹ手法を使用
し、以下の標準的方法に従った〔Ｗｕｔｒｉｃｈ，
Ｋ．，ＮＭＲｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓａｎｄＮｕ
ｃｌｅｉｃＡｃｉｄｓ，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ，Ｎ
Ｙ，１９８６〕。ＦＡＢ−ＭＡＳは、ＺＡＢ−３ＨＦ
ＦＡＢ／ｔａｎｄｅｍｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅ
ｔｅｒまたはＡＰＩＩＩＩＬＣ／ＭＳ／ＭＳ．を使用
して決定した。

【００５９】構成ユニットとジペプチドの合成方法ＡＮ−（ω−アミノアルキレン）アミノ酸の調製適当なアルキレンジアミン（１５．８モル）を４℃で急
速に攪拌し（アルキレンジアミンが固体の場合には５０
０ｍｌのＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解する）、同時にα−ハロゲ
ン化カルボン酸（１．６モル）を何回かに分けて、その
各々が溶解するように添加した。次に反応液を２５℃で
４８時間攪拌し、減圧濃縮した（６０℃）。得られたペ
ーストに、ＤＭＳＯ／エーテル／エタノール（３：１：
１）５００ｍｌの溶液を添加し、その混合物を冷凍庫で
一晩放置した。沈澱した両性イオンを焼結ガラス上に濾
過によって集め、エタノールとエーテルで洗浄した。生
成物が両性イオンよりも二塩酸塩として得られた場合も
ある（構造と化学データは表１参照のこと）。化合物６
と７の光学的純度を、それらの十分に保護された誘導体
１４と１５についてチェックした（方法Ｃと表２参
照）。

【００６０】方法ＢＮ−（ω−アミノアルキレン）ア
ミノ酸の選択的保護ベンジルｐ−ニトロフェニルカーボネート（０．６０５
モル）のジオキサン溶液（１．３リットル）を、Ｎ−
（ω−アミノアルキレン）アミノ酸（０．４モル）を５
０％ジオキサン水溶液（２．６リットル）中に溶かした
攪拌溶液に滴下した。混合物をｐＨ＝１１に維持した
（自動滴定装置で２ＮＮａＯＨを使用）。室温で２４
時間攪拌後、混合物を蒸発乾固させ、Ｈ_２Ｏ（１．２リ
ットル）に溶解し、濾過した。濾液をＥｔＯＡｃ（２×
１リットル）で抽出し、水層を氷水浴で冷やし、６Ｎ
ＨＣｌで酸性としｐＨ＝５．５とした。エーテル（２×
１リットル）で抽出後、水層を酸性にし（濃ＨＣｌでｐ
Ｈ＝１）、蒸発乾固させｉ−ＰｒＯＨから再濃縮した。
ある場合（表１の出発物質１）には、ｉ−ＰｒＯＨから
再結晶することにより、酸８（表ＩＩ）が得られた。こ
の手法を物質２〜７に適用したところ、生成物は油状
か、または収率が低かった。これらの場合には、未精製
のモノ保護されたＮ−（Ｚ−ω−アミノアルキレン）ア
ミノ酸を後述の方法Ｃに従ってエステル化した。この手
法によればジ保護されたＮ−（ω−アミノアルキレン）
アミノ酸の全体の収率がかなり増大した。あるいは、未
精製のモノ保護されたＮ−（ω−アミノアルキレン）ア
ミノ酸は、Ｂｏｃ（後述の方法Ｈ）でそのＮαを保護す
ることかでき、次いでＮω−Ｚを解裂し（後述の方法
Ｋ）、ＮωをＦｍｏｃ（方法Ｊ）で保護することもでき
る（構造と化学データは表２参照）。

【００６１】方法Ｃモノ保護されたＮ−（ω−アミノ
アルキレン）アミノ酸のエステル化未精製のＮ−（Ｚ−ω−アミノアルキレン）アミノ酸
（４０ミリモル）を無水メタノール（６００ミリリット
ル）中に懸濁、攪拌し、乾燥ＨＣｌ（硫酸トラップ）で
１時間バブリングした。室温で１時間攪拌し、メタノー
ルを減圧留去した。未精製の生成物を水（５００ミリリ
ットル）に溶かし、ＥｔＯＡｃ（２×５００ミリリット
ル）で洗浄した。水のｐＨは８にまで上昇させ（飽和Ｎ
ａＨＣＯ_３）、ＥｔＯＡｃ（３×３００ミリリットル）
で抽出した。有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥し真空で蒸発乾
固させた（構造と化学データは表２と表３を参照）。２
つのエナンチオマー１４と１５の光学的純度をＣｈｉｒ
ａＳｐｈｅｒ（登録商標）カラムでチェックした。各化
合物は異なるｋ′値でただ一つのピークを与えたが、混
合物は純品のｋ′値に対応する同じｋ値を有する２つの
ピークを与えた。

【００６２】方法ＤＮ−（ω−Ｂｏｃ−アミノアルキ
レン）Ｇｌｙの調製１．Ｂｏｃ−アルキレンジアミンの調製適当なアルキレンジアミン（１モル）をＣＨＣｌ_３（１
リットル）に溶かした。攪拌した溶液を氷浴で冷やし、
（Ｂｏｃ）_２Ｏ（０．５リットルのＣＨＣｌ_３中０．１
モル）を滴下した。溶液をさらに２４時間室温で攪拌
し、溶媒を真空で蒸留乾固した。得られた油をエーテル
（０．５リットル）に溶かし、食塩水（６×２００ミリ
リットル）で洗浄した。エーテル層をＭｇＳＯ_４で乾燥
し、真空で蒸発乾固させた。得られた油を真空でＰ_２Ｏ
_５で乾燥した。

【００６３】２．適当なモノＢｏｃ−アルキレンジア
ミン（１モル）を０℃で急速に攪拌し、同時にα−クロ
ロ酢酸（０．１モル）を何回かに分けて、その各々が溶
解するように添加した。混合物を室温で一晩放置し、次
いでエーテルを加え（５０ミリリットル）、沈澱を濾過
により集め、エーテルで洗浄し（３×５０ミリリット
ル）、Ｐ_２Ｏ_５で乾燥した。固形物を水（ｐＨ＝１０）
に溶かし、凍結乾燥した。固形物を水（８０ミリリット
ル）に溶かし、ＮαをＦｍｏｃ（方法Ｊ）で保護して、
生成物１６と１７を得た（表２と表３参照）。

【００６４】方法ＥＺ−Ｎ−（Ｚ−ω−アミノアルキ
レン）アミノ酸の選択的脱保護Ｎ−（ω−アミノアルキレン）アミノ酸を方法Ｌに従っ
て２当量のＺ−Ｃｌと反応させた。ジＺ生成物（３０ミ
リモル）をＳＯＣｌ_２（５０ミリリットル）そのものに
溶かし、６０℃で０．５時間加温した。溶液を真空濃縮
し、得られたペーストに２ＮＨＣｌ（１００ミリリッ
トル）を添加した。混合物を３時間攪拌し、エーテルで
洗浄した（３×１００ミリリットル）。溶液のｐＨを９
に調整し、Ｎαアミノ基をＢｏｃでそのまま保護した
（方法Ｈ）。ＮωＺ−保護基を接触水素添加により除去
し（方法Ｋ）、Ｆｍｏｃで再保護した（方法Ｊ）（表２
と表３参照）。あるいは、ＨＣｌの代わりにメタノール
を上記ペーストに添加し、真空濃縮の後、エステル９〜
１５を得た（スキーム２及び表２）。

【００６５】方法ＦＢＯＰ−ＣｌとのカップリングＢＯＰ−Ｃｌ（１．１ミリモル）をジ保護されたＮ−
（ω−アミノアルキレン）アミノ酸（１ミリモル）の攪
拌溶液に添加し、次いで１０ミリリットルのＭｅＣＮ中
１．２ミリモルのＤＩＥＡを添加した。溶液を−１５℃
で２０分間攪拌し、アミノ酸エステル塩（１ミリモル）
を、１．１ミリモルのＤＩＥＡ含有２１０ミリリットル
のＭｅＣＮに添加した。攪拌を０℃で一晩続けた。溶媒
を真空蒸留し、未精製生成物をＥｔＯＡｃに溶かし、Ｋ
ＨＳＯ_４（２×３００ミリリットル）、ＮａＨＣＯ
_３（２×３００ミリリットル）及び食塩水（２×３００
ミリリットル）の飽和溶液で洗浄した。有機相をＭｇＳ
Ｏ_４で乾燥し、真空で蒸発乾固させた（表４参照）。

【００６６】方法ＧＢＯＰとのカップリングＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ミリリットル）中アミノ酸エステル
成分（１ミリモル）の攪拌溶液に、ＢＯＰ試薬（１．１
ミリモル）とジ保護されたＮ−（ω−アミノアルキレ
ン）アミノ酸（１．１ミリモル）とＤＩＥＡ（３ミリモ
ル）とを室温で添加した。

【００６７】方法ＨＢＯＣ−アミノ酸の調製〔Ｎａｇ
ａｓａｗａら，Ｂｕｌｌ，Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｊａ
ｐ．，４６，１２６９（１９７３）〕アミノ酸（０．１モル）をＮａＯＨ（１Ｎ，２００ミリ
リットル）に溶かし、ジオキサン（２００ミリリット
ル）を添加した。混合物を氷浴中で攪拌し、（Ｂｏｃ）
_２Ｏ（０．１４モル）のジオキサン（２００ミリリット
ル）中溶液を、ｐＨを９に維持しながら滴下した。混合
物を室温で一晩攪拌しておいた。ジオキサンを真空蒸留
し、水溶液をエーテルで洗浄し（３×１５０ミリリット
ル）、冷却し、飽和ＫＨＳＯ_４溶液でｐＨ３にまで酸性
にした。沈澱を濾過により集め、冷水で洗浄し、真空中
で一定重量になるまでＰ_２Ｏ_５で乾燥した。酸性化に際
し、油が形成されたときは、ＥｔＯＡｃ（３×１５０ミ
リリットル）で抽出し、これを飽和ＮａＣｌで洗浄し、
ＭｇＳＯ_４で乾燥し、蒸発乾固させた。Ｐ_２Ｏ_５で乾燥
後、残渣をＥｔＯＡｃ／石油エーテルから結晶化させ
た。

【００６８】方法ＪＦｍｏｃ−アミノ酸の調製〔Ｓｉ
ｖａｎａｎｄａｉａｈ，Ｋ．Ｍ．；Ｒａｎｇａｒａｇ
ｎ，Ｍ．Ｓ．，Ｉｎｄ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．，２５（Ｂ），
１０４５（１９８６）〕Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ（０．０２４モル）のＭｅＣＮ（２５
ミリリットル）溶液を、ＴＥＡでｐＨ９に調整したアミ
ノ酸（０．０２５モル）の攪拌水溶液に一度に添加し
た。ｐＨをＴＥＡで８．５〜９に維持した。１５分後に
ｐＨが安定となり、さらに１５分反応混合物を放置し
た。ＭｅＣＮを真空蒸留し、飽和ＫＨＳＯ_４でｐＨを３
に調整した。沈澱を濾過で集め、冷水で洗浄し、Ｐ_２Ｏ
_５で一定重量になるまで乾燥した。酸性化に際して油が
形成されたときは、方法Ｈのように処理した。

【００６９】方法ＫＺ保護基の除去〔Ａｎｗｅｒ，
Ｍ．Ｋ．；Ｓｐａｔｏｌａ，Ａ．Ｆ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉ
ｓ，９２９（１９８０）〕メタノール（５ミリリットル）に溶かしたＺ−アミノ酸
（１グラム）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ１０％（０．１グラ
ム）とギ酸アンモニウム（１グラム）を攪拌しながら添
加した。反応の進行をＨＰＬＣで追跡した。反応完了後
（〜２時間）、触媒を濾過により除去し、濾液を真空で
蒸発乾固させた。残渣を水に溶かし、凍結乾燥した方法ＬＺ−アミノ酸の調製〔Ｂｅｒｇｍａｎ，Ｍ．，
Ｚｅｒｖａｓ，Ｌ．，Ｂｅｒ．６５，１１９２（１９３
２）Ｚ−Ｃｌを（Ｂｏｃ）_２Ｏの代わりに用いるほかは、方
法Ｈに従ってＺ−アミノ酸を調製した。

【００７０】表１構造（Ｖａ）の化合物に関するデー
タ〔Ｇ＝Ｈ；Ｌ＝Ｈ〕

【化８２】

【表１】

【００７１】（ａ）二塩酸塩として（ｂ）Ｄエナンチ
オマー、Ｃ０．３，６ＮＨＣｌ（ｃ）Ｌエナンチオマー、Ｃ０．３２，６ＮＨＣｌ（ｄ）Ｃ，Ｈ，Ｎは実験値が計算値と０．３％の誤差範
囲内で一致することを示している。

【００７２】表２構造（Ｖｂ）の化合物に関するデー
タ

【化８３】

【表２】

【００７３】（ａ）ＲＰ−１８カラム、７０％メタノー
ル、（ｂ）ｃｌ，メタノール、（ｃ）塩酸塩として、
（ｄ）１／３Ｈ_２Ｏを含む、（ｅ）Ｄエナンチオマー、
（ｆ）Ｌエナンチオマー、（ｇ）Ｃ，Ｈ，Ｎは実験値が
計算値と０．３％の誤差範囲内で一致することを示して
いる。

【００７４】表３化合物９〜２１の^１ＨＮＭＲデー
タ

【表３】

【００７５】表４構造ＶＩＩＩｂ〔Ｅ＝ＯＭｅ；ｎ＝
１；Ｇ＝Ｚ；Ｊ＝Ｂｏｃ〕の化合物に関するデータ

【化８４】

【表４】

【００７６】（ａ）ＲＰ−１８カラム、８０％メタノー
ル、（ｂ）ｃｌ，メタノール、（ｃ）ＲＰ−１８カラ
ム、７５％メタノール

【００７７】ペプチド合成本発明のペプチドの好ましい調製方法は、ＢｏｃとＦｍ
ｏｃ化学を組成せて使用する固相ペプチド合成方法に従
っている〔たとえば、Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ，“Ｐｒｉｎ
ｃｉｐｌｅｓｏｆＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓ
ｉｓ”，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，１９８４；
又はＢｏｄａｎｓｚｋｙら、“ｔｈｅＰｒａｃｔｉｃ
ｅｏｆＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｓｐ
ｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，１９８４；又はＢａｒａ
ｎｙとＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，ｉｎ“ＴｈｅＰｅｐｔ
ｉｄｅｓ：Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓａ
ｎｄＢｉｏ１ｏｇｙ”，Ｖｏｌ．２，Ｃｈａｐｔｅｒ
１，ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ，１９８０；又は
ＡｔｈｅｒｔｏｎらＢｉｏｏｒｇ，Ｃｈｅｍ，８，１
９７９〕。本発明の方法においては、好ましいｐ−メチ
ルベンズヒドリルアミンポリスチレン１％ジビニルベン
ゼンポリマー（ＭＢＨＡ樹脂、置換度０．９ｅｑ．ＮＨ
_２／グラム、１グラム（０．９ミリモル））を２．４ミ
リモルのＢｏｃ−Ｍｅｔとカップルさせた。カッブリン
グはＤＭＦ中でＢＯＰ（２．４ミリモル）とＤＩＥＡ
（５．６ミリモル）を用いて行った。３時間後、樹脂を
Ａｃ_２Ｏ（８ミリモル）及びＤＭＡＰ（０．５ミリモ
ル）と３時間反応させ、ＤＣＭで５回洗浄した。

【００７８】方法ＭＢｏｃ固相合成各合成サイクルは以下の工程からなる：（ｉ）ＴＦＡ：ＤＣＭ（１：２）で１分次いで２０分脱
保護する、（ｉｉ）ＤＣＭで５回洗浄する、（ｉｉｉ）ＤＭＦ中５％ＤＩＥＡで２×５分中和する、（ｉｖ）ＤＭＦで５回洗浄する（ｖ）ＤＭＦ中ＢＯＰ（２．４ミリモル）及びＤＩＥＡ
（５．６ミリモル）を用いて２．４ミリモルのＢｏｃ−
ＡＡで６０分カップリングする、（ｖｉ）カイザーテスト〔Ｋａｉｓｅｒ，Ｅ，ら、Ａｎ
ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，３４，５９５（１９７０）〕
で完了をチェックする、（ｖｉｉ）ＤＣＭで５回洗浄する。

【００７９】方法ＮＦｍｏｃ固相合成各合成サイクルは以下の工程からなる：（ｉ）ＤＭＦ中２０％ピペリジンで１７分脱保護する、
（ｉｉ）ＤＭＦで６回洗浄する、（ｉｉｉ）ＤＭＦ中Ｂ
ＯＰ（２．４ミリモル）及びＤＩＥＡ（５．６ミリモ
ル）を用いて２．４ミリモルＦｍｏｃ−ＡＡで６０分カ
ップリングする、（ｉｖ）ＤＭＦで６回洗浄する、
（ｖ）カイザーテストを行う。側鎖保護：Ａｒｇ（Ｔｏｓ）；Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）；Ｎ
（メルカプトプロピレン）Ｇｌｙ（ＳＢｚｌ）；５−メ
ルカプト吉草酸（ＳＢｚ１）；Ｎ（γ−Ｂｏｃアミノプ
ロピレン）Ｇｌｙ。

【００８０】方法Ｐ樹脂からのペプチドの除去及びこ
れに続く保護基の除去Ｋｅ１−Ｆ容器中に１グラムの樹脂、マグネチックスタ
ーラー及ひ２ミリリットルのアニソールを入れた。容器
をＨＦレクター（ＨＦｒｅｃｔｏｒ）〔ペプチド協会
（ｔｈｅＰｅｐｔｉｄｅＩｎｓｔｉｔｕｔｅＩｎ
ｃ．）（大阪、日本）製のタイプＩ〕に取り付けた。空
気を排気した後、反応容器を液体窒素で凍結させ、２０
ミリリットルの液体ＨＦを充填した。容器を攪拌しなが
ら、−７℃に１．５時間保った。ＨＦを蒸発させて乾燥
し、ヘキサン（５０ミリリットル）を反応容器に添加し
た。混合後、ヘキサンをデカントし、反応混合物をエー
テル（３×５０ミリリットル）で洗浄し、デカントし
た。混合物を３０％ＡｃＯＨで処理し（３×５０ミリリ
ットル）、焼結ガラスろうとで濾過した。溶媒を凍結乾
燥した。未精製ペプチドの収率は５０〜８０％であっ
た。

【００８１】方法Ｑ樹脂上でのペプチドＩａ〜ＩＣの
環化主鎖を合成した後、Ｂｏｃ保護基をＴＦＡによりＮ（γ
−アミノプロピレン）Ｇｌｙから除去し、Ｂｏｃ固相合
成（ｉ）〜（ｉｖ）で記載したように樹脂を洗浄し、中
性化した。環化をＢＯＰ（２．４ミリモル）及びＤＩＥ
Ａ（３．６ミリモル）で２４時間行った〔Ｆｅｌｉｘ，
Ａ．Ｍ．ら、“Ｐｅｐｔｉｄｅｓ”Ｍａｒｓｈａｌｌ，
Ｇ．Ｂ．，Ｅｄ．ｐ．４６５（１９８８）〕。２４時間
後、カイザーテストが陰性の場合は、樹脂をメタノール
で洗浄し、Ｐ_２Ｏ_５で真空乾燥した。カイザーテストが
陽性の場合は、ＢＯＰ（１．２ミリモル）とＤＩＥＡ
（１．８ミリモル）をさらに追加した。環化後、ペプチ
ドを上述のように樹脂から除去した。

【００８２】ペプチドＩｃの合成ペプチドＩｃを一般的な方法Ｍ，Ｎ，Ｐ及びＱを用いて
以下のスキームに従い合成した。

【化８５】

【００８３】未精製ペプチドをＡ＝Ｈ_２Ｏ（０．１％Ｔ
ＦＡ）；Ｂ＝ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）の勾配をつけ
たＨＩＢＡＲＲＰ−８カラムで半調製用ＨＰＬＣによ
り精製した。（ｔ＝０，Ａ＝７０，Ｂ＝３０；ｔ＝１
０，Ａ＝７０，Ｂ＝３０；ｔ＝５０，Ａ＝２０，Ｂ＝８
０；ｔ＝６０，Ａ＝０，Ｂ＝１００；Ｒ_ｔ＝２０．３
分）。ＭＷ＝８８０．０６；ＦＡＢ−ＭＳ結果〔ＭＨ〕^＋＝８
８１．１４；ＡＰＩ−ＭＳ結果〔ＭＨ〕^＋＝８８１．６
０；ＡＡＡ結果Ａｓｐ＝０．９；Ｐｈｅ＝１．９５；Ｍ
ｅｔ＝０．９５；Ｌｅｎ＝１．０．

【００８４】ヘプチドＩａの合成ペプチドＩａを一般的方法Ｍ，Ｎ，Ｐ及びＱを用いて上
述のペプチドＩｃのスキームに従って合成した。Ｆｍｏ
ｃ−Ａｃｐ（ＯＢｚｌ）の代わりに、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ
（Ｔｏｓ）をカップルし、無水グルタル酸の代わりにペ
プチドをアジピン酸と反応させた。未精製ペプチドをＡ
＝Ｈ_２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）；Ｂ＝ＭｅＣＮ（０．１％
ＴＦＡ）の勾配をつけたＨＩＢＡＲＲＰ−８カラムで
半調製用ＨＰＬＣにより精製した。ｔ＝０，Ａ＝７０，
Ｂ＝３０；ｔ＝５，Ａ＝７０，Ｂ＝３０；ｔ＝３０，Ａ
＝０，Ｂ＝１００；Ｒ_ｔ＝２３．９ｍｉｎ．ＭＷ＝９３６．１；ＦＡＢ−ＭＳ結果〔ＭＨ〕^＋＝９３
７；ＡＰＩ−ＭＳ結果〔ＭＨ〕^＋＝９３７．１；ＡＡＡ
Ａｒｇ＝０．８；Ｐｈｅ＝１．９５；Ｍｅｔ＝０．９
５；Ｌｅｕ＝１．０．

【００８５】ペプチドＩｂペプチドＩｂを一般的方法Ｍ，Ｎ，Ｐ及びＱを用いて上
述のペプチドＩｃのスキームに従って合成した。Ｆｍｏ
ｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）の代わりに、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ
（Ｔｏｓ）をカップルした。未精製ペプチドをＡ＝Ｈ_２
Ｏ（０．１％ＴＦＡ）；Ｂ＝ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦ
Ａ）の勾配をつけたＨＩＢＡＲＲＰ−８カラムで半調
製用ＨＰＬＣにより精製した。ｔ＝０，Ａ＝６０，Ｂ＝
４０；ｔ＝１０，Ａ＝６０，Ｂ＝４０；ｔ＝４０，Ａ＝
２０，Ｂ＝８０；ｔ＝５０，Ａ＝０，Ｂ＝１００；Ｒ_ｔ
＝２４ｍｉｎ．ＭＷ＝９６２．２５；ＦＡＢ−ＭＳ結果〔ＭＨ〕^＋＝９
６３．１；ＡＰＩ−ＭＳ結果〔ＭＨ〕^＋＝９６３．２；
ＡＡＡ結果Ａｒｇ＝０．９；Ｐｈｅ＝２．０５；Ｍｅｔ
＝０．８５；Ｌｅｕ＝０．９５．プロトンＮＭＲピークの帰属は表５に示してある。

【００８６】ペプチドＩｄの合成ペプチドＩｄを一般的方法Ｍ，Ｎ，Ｐ及びＱを用いて上
述のペプチドＩｃのスキームに従って合成した。Ｆｍｏ
ｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）の代わりに、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ
（Ｔｏｓ）をカップルした。Ｆｍｏｃ−Ｎ（γ−Ｂｏｃ
−アミノプロピレン）Ｇｌｙの代わりに、Ｆｍｏｃ−Ｎ
（γ−メルカプト（ＳＢｚｌ）プロピレン）Ｇｌｙを用
い、無水グルタル酸の代わりに、δ−メルカプト（ＳＢ
ｚｌ）吉草酸を用いた。

【００８７】ペプチドＩｄの環化ペプチドＩｄをＨＦにより樹脂から除去して還元体を得
た。凍結乾燥後、未精製ペプチドをメタノール（１リッ
トル）に溶かし、Ｉ_２（０．８ミリモル）を添加した。
溶液を攪拌しながら室温で７２時間保った。酸化反応の
進行をＨＰＬＣにより追跡した。残りのＳＨ基をエルマ
ンテストにより調べた〔Ｅｌｌｍａｎ，Ｇ．Ｌ，，Ｂｉ
ｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．８２，７０（１９５
９）〕。反応完了後、溶媒を真空留去し、調製用ＨＰＬ
Ｃでペプチドを精製した。

【００８８】表５ＤＭＳＯ中３０３Ｋ^ａ）におけるペ
プチドＩｂのプロトン化学シフト

【表５】

【００８９】ａ）Ｐｈｅ^３−ＮＧｌｙ^４ペプチド結合の
シス配置をもったマイナーな異性体（１８％の割合を占
める）の化学シフトはカッコに示してある。Ｐｈｅ残基
のβプロトンのプロキラルに帰属される。

【００９０】ペプチドＩＩａの合成一般的方法Ｍ，Ｎ，Ｐ及びＱを用いて上述のペプチドＩ
ｃのスキームに従ってペプチドＩＩａを合成した。Ｂｏ
ｃ−Ｍｅｔの代わりに、Ｂｏｃ−Ｈｃｙｓ（ＳＢｚｌ）
をＰＭＢＨＡ樹脂にカップルした。Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ
（ＯＢｚｌ）の代わりに、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）
をカップルし、無水グルタル酸の代わりに、ペプチドを
無水酢酸と反応させた。ペプチドＩＩａの環化ペプチドＩＩａを還元体で樹脂から除去した。凍結乾燥
後、未精製ペプチドを０℃で飽和ＮＨ_３／メタノール溶
液（１リットル）に溶かした。溶液を攪拌しながら室温
で７２時間保った。反応の進行をＨＰＬＣにより追跡し
た。残りのＳＨ基をエルマンテストで調べた〔Ｅｌｌｍ
ａｎ，Ｇ．Ｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．８
２，７０（１９５９）〕。反応完了後、溶媒を真空で蒸
発させ、ペプチドをＡ＝Ｈ_２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）；Ｂ
＝ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）の勾配をつけたＲＰ−１
８ＨＩＢＡＲカラムで半調製用ＨＰＬＣにより精製し
た。ｔ＝０，Ａ＝６０，Ｂ＝４０；ｔ＝１０，Ａ＝６
０，Ｂ＝４０；ｔ＝４０，Ａ＝２０，Ｂ＝８０；ｔ＝５
０，Ａ＝０，Ｂ＝１００；Ｒ，＝２５ｍｉｎ．ＭＷ＝８９３．７；ＦＡＢ−ＭＳ結果〔ＭＨ〕^＋＝８９
４，９；ＡＰＩ−ＭＳ結果〔ＭＨ〕^＋＝８９４．８；Ａ
ＡＡ結果Ａｒｇ＝０．９；Ｐｈｅ＝１．９５；Ｈｃｙｓ
＝０．７５；Ｌｅｕ＝１．０

【００９１】ペプチドＩＩＩｂの合成ペプチドＩＩＩｂを一般的方法Ｍ，Ｎ，及びＰを用いて
以下のスキームに従って合成した。未精製ペプチドをＡ
＝Ｈ_２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）；Ｂ＝ＭｅＣＮ（０．１％
ＴＦＡ）の勾配をつけたＨＩＢＡＲＲＰ−８カラムで
半調製用ＨＰＬＣにより精製した。ｔ＝０，Ａ＝７０，
Ｂ＝３０；ｔ＝５，Ａ＝７０，Ｂ＝３０；ｔ＝４０，Ａ
＝２０，Ｂ＝８０；ｔ＝５０，Ａ＝０，Ｂ＝１００；Ｒ
_ｔ＝２２．７ｍｉｎ．ＭＷ＝９９５．３；ＦＡＢ−ＭＳ結果〔Ｍ〕^＋＝９９
５．４；ＡＰＩ−ＭＳ結果〔ＭＨ〕^＋＝９９６．０；Ａ
ＡＡ結果Ａｒｇ＝１．０；Ｐｈｅ＝２．０；Ｍｅｔ＝
０．８；Ｌｅｕ＝０．９５．

【００９２】

【化８６】

【００９３】ペプチドＩＩＩａの合成ペプチドＩＩＩａを一般的方法Ｍ，Ｎ及びＰを用いて上
述のペプチドＩＩＩｂのスキームに従って合成した。無
水グルタル酸の代わりに、ペプチドを無水酢酸と反応さ
せた。アセチル化の後、ヘプチドをＨＦにより樹脂から
除去した。未精製ペプチドをＡ＝Ｈ_２Ｏ（０．１％ＴＦ
Ａ）；Ｂ＝メタノール（０．１％ＴＦＡ）の勾配をつけ
たＨＩＢＡＲＲＰ−１８カラムで半調製用ＨＰＬＣに
より精製した。ｔ＝０，Ａ＝６０，Ｂ＝４０；ｔ＝３
０，Ａ：０，Ｂ＝１００；Ｒ_ｔ＝２４ｍｉｎ．ＭＷ＝８５４，５；ＦＡＢ−ＭＳ結果〔ＭＨ〕^＋＝８５
５．６；ＡＰＩ−ＭＳ結果〔ＭＨ〕^＋＝８５５．６；Ａ
ＡＡ結果Ａｒｇ＝０．８；Ｐｈｅ＝１．９５；Ｍｅｔ＝
０．８５；Ｌｅｕ＝０．９５

【００９４】生物活性実施例概説環状（及び比較的直線状の）ペプチドの生物活性を様々
な平滑筋系で検定した：バスデフェレンス（ＶａｓＤ
ｅｆｅｒｅｎｓ）ラット（ＲＶＤ）、ギニアピックイレ
ウム（ＧｕｉｎｅａＰｉｇＩｌｅｕｍ）（ＧＰＩ）
及びラットの門脈静脈（ＲＰＶ）。これらの系における
様々なアナログの活性の検定により、これらの組織に存
在するタキキニン受容体、すなわちＧＰＩにおけるＮＫ
−１及びＮＫ−３受容体、ＲＰＶにおけるＮＫ−３受容
体及びＲＶＤにおけるＮＫ−２受容体に対するアナログ
の選択性を決定することができる。ＧＰＩ系に２つのタ
キキニン受容体が存在すると、各々の直接かつ選択的な
検定を別々に行うことができなくなる。それ故、第２の
受容体に対するアナログの活性を検定するときには、一
方の受容体はブロックしておかなければならなかった。
アトロピンでアセチルコリン受容体を遮断してＧＰＩ系
のＮＫ−３受容体をブロックすることにより、ＮＫ−１
受容体を別個に検定することが可能だったのである。

【００９５】方法プロテアーゼによる消化に対するアナログヘプチドの抵
抗性の検定を、脳、肝臓、腎臓、耳下腺等のような様々
な組織のスライス、ホモジェネート又は膜とともにペプ
チドをインキュベートし、インキュベート後ＧＰＩ検定
により残りの活性を検定することにより行った。（ａ）ギニアピッグイレウム検定（ＧＰＩ）検定はＷｏｒｍｓｅｒ，Ｕ．ら，ＥＭＢＯＪ，５，
２８０５（１９８６）に記載された手法に従って行っ
た。（ｂ）ラットバスデフェレンス（ＲａｔＶａｓＤｅ
ｆｅｒｅｎｓ）検定（ＲＶＤ）検定はＣｈｏｒｅｖら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏ
ｌ．，１２７，１８７（１９８６）に記載された手法に
従って行った。

【００９６】（ｃ）ラット門脈静脈検定（ＲＰＶ）ラットを断頭により殺し、腹部を切開して、全内部器官
をわきに移動した。門脈静脈の両端をラットの内部で結
び、周囲の全組織を取り除き、清浄な組織を得た。清浄
な組織をチロード（Ｔｉｒｏｄｅ）溶液を含有する浴に
浸し、ＣＯ_２：Ｏ_２（９５：５％）の混合気体を通し
た。結んだ端の一つをガラスのフックに取り付け、他端
をトランスデューサーのレバーに取り付けて、収縮を測
定した。張力は約０．５ｇであった。組織を３７℃で１
時間浴に残し、次にペプチドを２０分間隔で添加して受
容体の脱感受性を防いだ。

【００９７】（ｄ）プロテアーゼによる消化に対する抵
抗Ｃｈｏｒａら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，，１
２７，１８７（１９８６）に記載された手法に従って検
定を行った。以下の具体的な例は、ペプチドＩａ，Ｉ
ｂ，Ｉｃ，Ｉｄ及びＩＩａの活性を示しており、そのい
くつかを従来技術である直線状ＷＳセプチドと比較して
いる。Ａ．環化ペプチドの生物活性

【表６】

【００９８】全アナログは従来技術の直線状アナログＷ
Ｓセプチドと同様ＮＫ−１サブ受容体に対して高度に選
択的であった。図３はＷＳセプチドとペプチドＩａの用
量−応答曲線を示す。ペプチドの環化から実際に由来す
る高度な生物活性及び選択性を証明するために直線状ア
ナログＩＩＩａとＩＩＩｂを調製した。アナログＩＩＩ
ａはＮ−（β−アミノエチル）グリシン^９（物質Ｐの９
位）を含み、βアミン機能は遊離していた。アナログＩ
ＩＩｂはペプチドＩａに最も近似した直線状の凝似体で
あって、ＣＨ_３−ＮＨ−Ｇｌｕｒ−Ａｒｇ^６（物質Ｐの
６位）及びＡｃ−ＮＨ−〔（ＣＨ_２）_３〕，Ｇｌｙ
^９（物質Ｐの９位）基を含んでいる。活性に対する荷電
の影響を避けるために、Ｎ末端をアシル化によりブロッ
クし、グルタル末端はＮ−メチル化によりブロックし
た。ペプチドＩａから由来する直線状ペプチドの低活性
及び選択性の欠落は、活性と選択性の増大のために必要
な配座の制限を達成するにあたり環化が重要であること
を証明している。

【００９９】

【表７】

【０１００】Ｂ．プロテアーゼに対する抵抗性図２は耳下腺組織におけるＷＳセプチド（直線状）及び
ペプチドＩａの分解を示している。直線状ＷＳセプチド
はＮＫ−１受容体に対して高度に活性かつ選択性である
が、代謝的には不安定であり、数分後には活性はすでに
失われた（半減期＝６分）。ペプチドＩａは耳下腺スラ
イスとのインキュベーションの１２０分後であっても８
０％の活性を維持している。同様の挙動パターンが肝ス
ライスとのインキュベートでも見られた。ペプチドＩａ
の生物活性の５０％が組織とのインキュベーションの３
０分後でも維持された。

【図面の簡単な説明】

【図１】バックボーン環化の概念を説明する；

【図２】耳下腺スライスによるＷＳセプチド（先行技
術）及びペプチドＩａの分解を示す。

【図３】ＷＳセプチド（先行技術）及びペプチドＩａの
用量反応曲線を示す。

─────────────────────────────────────────────────────

【手続補正書】

【提出日】平成４年１２月１５日

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】請求項３１

【補正方法】変更

【補正内容】

【手続補正２】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００５０

【補正方法】変更

【補正内容】

【００５０】一般式Ｖｂで示される化合物は以下のよう
にして調製される。（ｉ）上記のようにして得た式Ｖａで示される遊離酸
と、Ｅで示される基を含む適当な試薬（ここでＥは先に
定義した通り）とを、ペプチド合成において普通に用い
られている方法を用いて反応させ、エステル、アミド、
または高分子担体との共有結合を得る、または、（ｉ
ｉ）式ＶＩｂで示される遊離アミンと、Ｌで示される
基を含む適当な試薬（ここでＬは先に定義した通り）と
を、ペプチド合成において普通に用いられている方法を
用いて反応させ、エステル、アミド、または高分子担体
との共有結合を得る。式ＶＩｂで示される化合物は、式
ＸＸＶＩで示される化合物のアミノ酸とＥで示される基
を含む適当な試薬（ここでＥは先に定義した通り）及び
Ｌで示される基を含む適当な試薬（ここでＬは先に定義
した通り）とを反応させ、エステル、アミドまたは高分
子担体との共有結合を得る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者ゲラルドバイクイスラエル国イエルサレム，ホルカニア 16−３

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記一般式の環状のバックボーンを有す
る生物活性ポリペプチド、【化１】式中、ｎは１ないし１０の整数を表し、ｍは０または１ないし１０の整数を表し、〔ＡＡ〕は天然又は合成アミノ酸残基であって、ｎが１
より大きい場合には該アミノ酸残基は同一であってもよ
く異なっていてもよいものを表し、〔Ａ^１Ａ^１〕は天然または合成アミノ酸残基であって、
ｍが１より大きい場合には該アミノ酸残基は同一であ
ってもよく異なっていてもよいものを表し、Ｒは天然又は合成アミノ酸側鎖を表し、Ｅは水酸基、またはペプチド合成において標準的なカル
ボキシル保護基であって、好ましくはアルコキシ、置換
アルコキシまたはアリールオキシから選択されるもの、
または上記カルボキシル基と同一であってもよくアミノ
基もしくは置換アミノ基であってもよいブロック基（こ
こで上記カルボキシル保護基またはブロック基は不溶性
の高分子担体に共有結合していてもよい）を表し、半円を描いている線は下記式のスペーサー基、【化２】式中、Ｍは−Ｓ−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＨ−及び−Ｓ−から
なる群より選択され、ｐ及びｑは、同一であってもよく
異なっていてもよく、それぞれ２ないし１０の整数を表
す、を表す、または下記式のバックボーンが環化した生
物活性ポリペプチド、【化３】式中、ｄは０または１ないし１０の整数を表し、ｅは１ないし１０の整数を表し、〔ＡＡ〕は天然又は合成アミノ酸残基であって、ｅが１
より大きい場合には該アミノ酸残基は同一であってもよ
く異なっていてもよいものを表し、〔Ａ^１Ａ^１〕は天然又は合成アミノ酸残基であって、ｄ
が１より大きい場合には該アミノ酸残基は同一であっ
てもよく異なっていてもよいものを表し、Ｒは天然又は合成アミノ酸側鎖を表し、Ｅは水酸基、またはペプチド合成において標準的なカル
ボキシル保護基であって、好ましくはアルコキシ、置換
アルコキシまたはアリールオキシから選択されるもの、
または上記カルボキシル基と同一であってもよくアミノ
基もしくは置換アミノ基であってもよいブロック基（こ
こで上記カルボキシル保護基またはブロック基は不溶性
の高分子担体に共有結合していてもよい）を表し、半円を描いている線は下記式のスペーサー基、【化４】式中、ｐは上記と同一の意味を表し、Ｍはアミノ基、カルボキシル基またはイオウ原子を表
し、ｘは０または１を表し、Ｙはバックボーンアミノ酸の側鎖を表す、を表す。
【請求項２】Ｍがアミド基である特許請求の範囲第１
項に規定した式（Ｉ）または式（ＩＩ）の環状生物活性
ポリペプチド。
【請求項３】下記式を有する特許請求の範囲第２項の
式（Ｉ）の環状生物活性ポリペプチド。【化５】
【請求項４】下記式を有する特許請求の範囲第２項の
式（Ｉ）の環状生物活性ポリペプチド。【化６】
【請求項５】下記式を有する特許請求の範囲第２項の
式（Ｉ）の環状生物活性ポリペプチド。【化７】
【請求項６】Ｍが−Ｓ−Ｓ−基である特許請求の範囲
第１項の式（Ｉ）の環状生物活性ポリペプチド。
【請求項７】下記式を有する特許請求の範囲第６項の
式（Ｉ）の環状生物活性ポリペプチド。【化８】
【請求項８】下記式を有する特許請求の範囲第１項の
式（ＩＩ）の環状生物活性ポリペプチド。【化９】
【請求項９】（ａ）下記式の化合物、【化１０】式中、ｑは２ないし１０の整数を表し、Ｇ及びＬは同一
であってもよく異なっていてもよく、それぞれペプチド
合成において慣用されている保護基を表す、をアミノ酸
または式、Ｈ_２Ｎ−〔Ａ’Ａ’〕_ｍ−ＣＯ−Ｅ、式中、ｍは１ないし１０の整数を表し、Ａ’Ａ’は天然又は合成アミノ酸残基であって、ｍが１
より大きい場合には該アミノ酸残基は同一であってもよ
く異なっていてもよいものを表し、Ｅはアルコキシ、置換アルコキシまたはアリールオキシ
から選択されるカルボキシル保護基、または上記カルボ
キシル基と同一であってもよくアミノ基もしくは置換ア
ミノ基であってもよいブロック基（ここで上記カルボキ
シル保護基またはブロック基は不溶性の高分子担体に共
有結合していてもよい）を表す、のポリペプチドと反応
させ、下記式の化合物を得る工程、【化１１】（ｂ）式（ＶＩａ）の化合物から選択的に保護基Ｌを脱
離し、下記式の化合物、【化１２】を得る工程、（ｃ）式（ＶＩＩａ）の化合物をアミノ酸
または下記式、【化１３】式中、ｎは１ないし１０の整数を表し、〔ＡＡ〕は天然又は合成アミノ酸残基であって、ｎが１
より大きい場合には該アミノ酸残基は同一であってもよ
く異なっていてもよいものを表し、Ｊはペプチド合成において慣用されている保護基を表
す、のペプチドと反応させ、下記式の化合物を得る工
程、【化１４】（ｄ）保護基Ｊを選択的に脱離して、下記式の化合物【化１５】を得る工程、（ｅ）式（Ｘａ）の化合物を下記式、【化１６】式中、ｐは上記と同一の意味を表す、の化合物と反応さ
せて下記式【化１７】の化合物を得る工程、（ｆ）式（ＸＩＩａ）の化合物か
ら選択的に保護基Ｇを脱離して、下記式、【化１８】の化合物を得る工程、及び（ｇ）式（ＸＩＩＩａ）の化
合物を、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、
ビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィニ
ッククロリド（ＢＯＰ−Ｃｌ）、ベンゾトリアゾリル−
Ｎ−オキシトリスジメチルアミノホスホニウム・ヘキサ
フルオロ・ホスフェート（ＢＯＰ）、１−オキソ−１−
クロロホスホラン（Ｃｐｔ−Ｃｌ）及びＤＣＣとヒドロ
キシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）との混合物からな
る群より選択されるカップリング剤と反応させ、他の側
鎖保護基を脱離して、ｍが１ないし１０の整数である一
般式（Ｉ）の化合物を得る工程、を含む、置換基が特許
請求の範囲第１項に規定された一般式（Ｉ）の環状生物
活性ポリペプチドの製造方法。
【請求項１０】工程（ａ）において、ＧがＺ（グルタ
ミン酸またはグルタミン）、Ｂｏｃ及びＦｍｏｃからな
る群より選択される特許請求の範囲第９項の方法。
【請求項１１】工程（ａ）において、ＬがＺ（グルタ
ミン酸またはグルタミン）、Ｂｏｃ及ひＦｍｏｃからな
る群より選択される特許請求の範囲第９項の方法。
【請求項１２】ＧがＢｏｃであり、ＬがＦｍｏｃであ
る特許請求の範囲第１０項及び第１１項の方法。
【請求項１３】ＧがＦｍｏｃ、ＬがＢｏｃである特許
請求の範囲第１０項及び第１１項の方法。
【請求項１４】（ａ）下記式の化合物、【化１９】式中、ｑは２ないし１０の整数を表し、Ｇ及びＬは同一であってもよく異なっていてもよく、そ
れぞれ水素及び／またはペプチド合成において慣用され
ている保護基を表し、Ｅは水酸基、または好ましくはアルコキシ、置換アルコ
キシまたはアリールオキシから選択されるペプチド合成
において標準的なカルボキシル保護基、または上記カル
ボキシル基と同一であってもよくアミノ基もしくは置換
アミノ基であってもよいブロック基（ここで上記カルボ
キシル保護基またはブロック基は不溶性の高分子担体に
共有結合していてもよい）を表す、から保護基Ｌを選択
的に脱離して、下記式の化合物を得る工程、【化２０】（ｂ）式（ＶＩｂ）の化合物をアミノ酸または下記式、【化２１】式中、ｎは１ないし１０の整数を表し、〔ＡＡ〕は天然又は合成アミノ酸残基であって、ｎが１
より大きい場合には該アミノ酸残基は同一であってもよ
く異なっていてもよいものを表し、Ｊはペプチド合成において慣用されている保護基を表
す、のペプチドと反応させ、下記式の化合物を得る工
程、【化２２】（ｃ）保護基Ｊを選択的に脱離して、下記式の化合物、【化２３】を得る工程、（ｄ）式（ＩＸｂ）の化合物を式（Ｘ
Ｉ）の化合物と反応させ、下記式の化合物、【化２４】を得る工程、（ｅ）式（Ｘｂ）の化合物から保護基Ｇ
を選択的に脱離して、下記式の化合物、【化２５】を得る工程、及び（ｆ）式（ＸＩｂ）の化合物を、特
許請求の範囲第９項の工程（ｇ）中に規定するカップリ
ング剤と反応させ、ｍが０である一般式（Ｉ）の化合物
を得る工程、を含む、ｍが０であり、置換基が特許請求
の範囲第１項に規定された一般式（Ｉ）の環状生物活性
ポリペプチドの製造方法。
【請求項１５】工程（ａ）において、Ｇ及びＬが水素
であり、Ｅが水酸基である特許請求の範囲第１４項の方
法。
【請求項１６】工程（ａ）において、Ｅがメトキシ基
及び水素からなる群より選択される特許請求の範囲第１
４項の方法。
【請求項１７】工程（ａ）において、ＧがＺ（グルタ
ミン酸またはグルタミン）、Ｂｏｃ及ひＦｍｏｃからな
る群より選択される特許請求の範囲第１４項の方法。
【請求項１８】工程（ａ）において、Ｌが水素、Ｂｏ
ｃ及びＦｍｏｃからなる群より選択される特許請求の範
囲第１４項の方法。
【請求項１９】（ａ）下記式の化合物、【化２６】式中、Ｅ及びｅは上記と同一の意味を表し、〔Ａ’Ａ’〕は天然又は合成アミノ酸残基を表し、Ｙは天然又は合成アミノ酸の側鎖を表し、Ｑはペプチド合成において慣用されている保護基を表
す、を式（Ｖａ）の化合物と反応させ、下記式の化合
物、【化２７】を得る工程、（ｂ）式（ＸＶ）の化合物から選択的に
保護基Ｌを脱離し、下記式の化合物、【化２８】を得る工程、（ｃ）式（ＸＶＩ）の化合物をアミノ酸
または下記式、【化２９】式中、ｄは１ないし１０の整数を表し、〔ＡＡ〕は天然又は合成アミノ酸残基であって、ｄが１
より大きい場合には該アミノ酸残基は同一であってもよ
く異なっていてもよいものを表し、Ｐはペプチド合成において慣用されている保護基を表
す、のペプチドと反応させ、下記式の化合物を得る工
程、【化３０】（ｄ）（ｉ）Ｙがカルボキシル基を有する側鎖であ
る場合には、保護基Ｇ及びＱを式（ＸＶＩＩＩ）の化合
物から選択的に脱離して下記式の化合物、【化３１】を得、式（ＸＩＸ）の化合物を特許請求の範囲第９項の
工程（ｇ）に記載されているように環化し、保護基Ｐと
他の側鎖保護基とを脱離して、一般式（ＩＩ）の化合物
を得るか、または、（ｉｉ）Ｙがカルボキシル基以外
の求核官能基を有する側鎖である場合には、保護基Ｇを
選択的に脱離し、保護基Ｇを脱離した後の化合物を下記
式の化合物、【化３２】式中、ｚは１ないし１０の整数を表し、Ｗは官能基を表す、と反応させ、下記式の化合物、【化３３】を得、保護基Ｑを選択的に脱離して環化反応を起こさ
せ、保護基Ｐと他の側鎖保護基とを式（ＸＸＩ）の化合
物から脱離して、一般式（ＩＩ）の化合物を得る工程、
を含む、置換基が特許請求の範囲第１項に規定された一
般式（ＩＩ）の生物活性環状ポリペプチドの製造方法。
【請求項２０】Ｙがホモシステインまたはシステイン
の側鎖を表し、Ｑがベンジル基であり、Ｅがアミドであ
る特許請求の範囲第１９項の方法。
【請求項２１】ＧがＺ（グルタミン酸またはグルタミ
ン）、Ｂｏｃ及ひＦｍｏｃからなる群より選択される特
許請求の範囲第１９項または第２０項の方法。
【請求項２２】ＬがＺ（グルタミン酸またはグルタミ
ン）、Ｂｏｃ及ひＦｍｏｃからなる群より選択される特
許請求の範囲第１９項または第２０項の方法。
【請求項２３】ＧがＢｏｃであり、ＬがＦｍｏｃであ
る特許請求の範囲第２２項の方法。
【請求項２４】工程（ｃ）において、Ｐがアセチルで
ある特許請求の範囲第１９ないし２３項のいずれかに記
載の方法。
【請求項２５】Ｅがアミド基である特許請求の範囲第
１９ないし２３項のいずれかに記載の方法。
【請求項２６】工程（ｄ）（ｉｉ）において、Ｗがハ
ロゲン原子、Ｏ−ｐ−トルエンスルフォニル、Ｏ−メタ
ンスルフォニル及びＯ−トリフルオロメタンスルフォニ
ルからなる群より選択される特許請求の範囲第１９ない
し２４項のいずれかに記載の方法。
【請求項２７】特許請求の範囲第９項または第１４項
の方法によって製造された一般式（Ｉ）のペプチド。
【請求項２８】特許請求の範囲第１９項の方法によっ
て製造された一般式（ＩＩ）のペプチド。
【請求項２９】Ｒ、ｑ、Ｇ及ひＬが上記に規定されて
いる一般式（Ｖａ）及び（Ｖｂ）の化合物。
【請求項３０】（ａ）下記式、【化３４】Ｒは上記と同一の意味を表し、Ｈａｌは塩素、臭素また
はヨウ素を表す、のα−ハロカルボン酸を下記式、【化３５】ｑは上記と同一の意味を表す、のアルキレンジアミンと
反応させ、下記式の化合物、【化３６】を得る工程、（ｂ）（ｉ）式（ＸＸＩＶ）の化合物
を上記に規定するＧ基を有する適当な試薬とペプチド合
成の標準的な方法で反応させ、下記式の化合物、【化３７】を得、式（ＸＸＶＩ）の化合物を上記に規定するＬ基を
有する試薬とペプチド合成における標準的な方法で反応
させて式（Ｖａ）の化合物を得るか、または、（ｉｉ）
式（ＸＸＩＶ）の化合物を上記に規定するＧ基を有す
る適当な試薬とペプチド合成の標準的な方法で反応さ
せ、下記式の化合物、【化３８】を得、二級アミノ官能基から保護基Ｇを選択的に脱離し
て、一般式（ＸＸＶＩ）の化合物を得る工程、を含む、
一般式（Ｖａ）の化合物の製造方法。
【請求項３１】（ｉ）遊離酸である式（Ｖａ）の化
合物を上記に規定するＥ基を有する適当な試薬と反応さ
せ、そのエステル、アミドとし、または高分子担体との
共有結合させることによる、式（Ｖａ）の化合物から
の、または（ｉｉ）遊離酸である式（ＸＸＶＩ）の化
合物を上記に規定するＥ基を有する適当な試薬と反応さ
せ、そのエステル、アミドとし、または高分子担体との
共有結合させることによって式（ＸＸＶＩ）の化合物か
ら式（ＶＩｂ）の化合物を得、式（ＶＩｂ）の化合物を
上記に規定するＬ基を有する適当な試薬と反応させるこ
とによる、式（ＶＩｂ）の化合物からの、一般式（Ｖ
ｂ）の化合物の製造方法。
【請求項３２】Ｒ、ｑ、Ｇ、Ｅ、Ｊ及びＬが上記に規
定する意味を有する一般式（ＶＩＩＩｂ）の化合物。
【請求項３３】有効成分として、一般式（Ｉ）及び／
または一般式（ＩＩ）のポリペプチドを含む、疼痛、炎
症、アルツハイマー病、家族性自律神経失調症、パーキ
ンソン病またはリターディブ・ディスキニシア（Ｒｅｔ
ａｒｄｉｖｅＤｉｓｋｉｎｅｓｉａ）の治療用の薬剤。
【請求項３４】一般式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物
である代謝的に安定なＮＫ−１選択性タキキニン作用
薬。
【請求項３５】特許請求の範囲第３〜８項のいずれか
に記載された化合物である特許請求の範囲第３３項の作
用薬。