JPH06217767A - 風疹ウイルスの精製および濃縮方法 - Google Patents
風疹ウイルスの精製および濃縮方法Info
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- JPH06217767A JPH06217767A JP32073593A JP32073593A JPH06217767A JP H06217767 A JPH06217767 A JP H06217767A JP 32073593 A JP32073593 A JP 32073593A JP 32073593 A JP32073593 A JP 32073593A JP H06217767 A JPH06217767 A JP H06217767A
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- Japan
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- rubella virus
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/36011—Togaviridae
- C12N2770/36211—Rubivirus, e.g. rubella virus
- C12N2770/36251—Methods of production or purification of viral material
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 風疹ウイルスに対する受容体をもつ天然また
は合成粒子への可逆的結合により、ウイルスを懸濁液か
ら単離し、粒子から脱着させ、ついで単離する風疹ウイ
ルスの精製および濃縮方法であって、ウイルスの結合は
２価に荷電したイオンの存在下に行い、放出は２価に荷
電したイオンに対するキレート剤の存在下に行う方法。 【効果】 診断および治療目的で使用される風疹ウイル
スを、改善された収率で、不純物が最小限となる単純な
方法で得ることができる。
は合成粒子への可逆的結合により、ウイルスを懸濁液か
ら単離し、粒子から脱着させ、ついで単離する風疹ウイ
ルスの精製および濃縮方法であって、ウイルスの結合は
２価に荷電したイオンの存在下に行い、放出は２価に荷
電したイオンに対するキレート剤の存在下に行う方法。 【効果】 診断および治療目的で使用される風疹ウイル
スを、改善された収率で、不純物が最小限となる単純な
方法で得ることができる。
Description
【０００１】本発明は、風疹ウイルスに対する受容体を
もつ天然または合成粒子への可逆的結合により、診断お
よび治療の目的で、風疹ウイルスを精製および濃縮する
方法に関する。
もつ天然または合成粒子への可逆的結合により、診断お
よび治療の目的で、風疹ウイルスを精製および濃縮する
方法に関する。
【０００２】たとえば、感染動物細胞の上清からの風疹
ウイルス抗原の単離、たとえばペレット化または濃縮勾
配を用いる分画遠心分離として行う超遠心分離により単
離する方法は既に開示されている（A. Paris-Hamelin
ら、 J. Virol. Meth. １０, １９８５, ３５５〜３６
１）。他の方法では、異なる分離性を有するフィルター
領域による限外濾過または、たとえばポリエチレングリ
コール（ＰＥＧ）を用いる沈殿法が使用される（D.S. B
owdenら、J. Gen. Virol. ６５，１９８４，９３３〜９
４３）。赤血球を用いてインフルエンザウイルスを濃縮
および精製する方法も開示されている（B. Giesendorf
ら、 Virus Research １，１９８４，６５５〜６６
７）。この場合、放出はノイラミニダーゼの補助により
酸素的に行われる。
ウイルス抗原の単離、たとえばペレット化または濃縮勾
配を用いる分画遠心分離として行う超遠心分離により単
離する方法は既に開示されている（A. Paris-Hamelin
ら、 J. Virol. Meth. １０, １９８５, ３５５〜３６
１）。他の方法では、異なる分離性を有するフィルター
領域による限外濾過または、たとえばポリエチレングリ
コール（ＰＥＧ）を用いる沈殿法が使用される（D.S. B
owdenら、J. Gen. Virol. ６５，１９８４，９３３〜９
４３）。赤血球を用いてインフルエンザウイルスを濃縮
および精製する方法も開示されている（B. Giesendorf
ら、 Virus Research １，１９８４，６５５〜６６
７）。この場合、放出はノイラミニダーゼの補助により
酸素的に行われる。
【０００３】しかしながら、風疹ウイルス抗原の精製に
ついて既知の解決法では、とくに、この方法で得られた
ウイルス抗原が、その程度に差はあっても、細胞蛋白質
および／または他の細胞構成成分を夾雑するという欠点
がある。しかも、細胞培養に用いられる胎児ウシ血清
（ＦＣＳ）の成分が、しばしば夾雑物として存在する。
したがって、本発明の目的は、収率が改善され、不純物
が最小限となる、単純な方法を見出すことができる。
ついて既知の解決法では、とくに、この方法で得られた
ウイルス抗原が、その程度に差はあっても、細胞蛋白質
および／または他の細胞構成成分を夾雑するという欠点
がある。しかも、細胞培養に用いられる胎児ウシ血清
（ＦＣＳ）の成分が、しばしば夾雑物として存在する。
したがって、本発明の目的は、収率が改善され、不純物
が最小限となる、単純な方法を見出すことができる。
【０００４】ヒトまたは動物の赤血球（ウイルスとはそ
の密度および大きさが著しく異なる）または、驚くべき
ことに、ある種の条件下には、風疹ウイルスを可逆的に
結合し、得られた細胞とウイルスの複合体はついで適当
な方法によって、ウイルスが複製されたメジウムから容
易に除去され、つしでウイルスは本発明による条件下に
赤血球から放出させ、必要に応じてさらに濃縮できるこ
とが見出されたのである。
の密度および大きさが著しく異なる）または、驚くべき
ことに、ある種の条件下には、風疹ウイルスを可逆的に
結合し、得られた細胞とウイルスの複合体はついで適当
な方法によって、ウイルスが複製されたメジウムから容
易に除去され、つしでウイルスは本発明による条件下に
赤血球から放出させ、必要に応じてさらに濃縮できるこ
とが見出されたのである。
【０００５】本発明の方法は、本発明による条件下に赤
血球に可逆的に結合するウイルス構成成分の精製および
濃縮にも使用できる。本発明の目的においてウイルスの
語には、ウイルスの構成成分も包含される。したがって
本発明は、風疹ウイルスに対する受容体をもつ天然ま
たは合成粒子への可逆的結合により、ウイルス粒子を懸
濁液から単離し、ウイルスを粒子から脱着させ、ついで
単離する風疹ウイルスおよびウイルス粒子の精製および
濃縮方法において、ウイルスの結合は２価に荷電したイ
オンの存在下に行い、放出は２価に荷電したイオンに対
するキレート剤の存在下に行う方法に関する。
血球に可逆的に結合するウイルス構成成分の精製および
濃縮にも使用できる。本発明の目的においてウイルスの
語には、ウイルスの構成成分も包含される。したがって
本発明は、風疹ウイルスに対する受容体をもつ天然ま
たは合成粒子への可逆的結合により、ウイルス粒子を懸
濁液から単離し、ウイルスを粒子から脱着させ、ついで
単離する風疹ウイルスおよびウイルス粒子の精製および
濃縮方法において、ウイルスの結合は２価に荷電したイ
オンの存在下に行い、放出は２価に荷電したイオンに対
するキレート剤の存在下に行う方法に関する。
【０００６】この場合の好ましい方法においては、２価
に荷電したイオンはＭｇ2+および／またはＣａ2+であ
る。また、好ましい方法においては、キレート剤はＥＤ
ＴＡである。有利な方法においては、粒子は赤血球であ
る。この場合の精製および濃縮には、たとえば、感染細
胞からのウイルス含有上清のpHを４〜１０、好ましくは
６〜８、とくに好ましくは約７に調整する。このための
適当な方法は、熟練した研究者にはよく知られている。
この間の温度は、０〜３０℃、好ましくは０〜１０℃、
とくに好ましくは約４℃とする。
に荷電したイオンはＭｇ2+および／またはＣａ2+であ
る。また、好ましい方法においては、キレート剤はＥＤ
ＴＡである。有利な方法においては、粒子は赤血球であ
る。この場合の精製および濃縮には、たとえば、感染細
胞からのウイルス含有上清のpHを４〜１０、好ましくは
６〜８、とくに好ましくは約７に調整する。このための
適当な方法は、熟練した研究者にはよく知られている。
この間の温度は、０〜３０℃、好ましくは０〜１０℃、
とくに好ましくは約４℃とする。
【０００７】ウイルスを含有する溶液中の塩濃度はさら
に、ウイルスの赤血球への結合の時点で、Ｍｇ2+に関し
ては４×１０-4〜０.４、好ましくは１０-3〜１０-2、
とくに好ましくは３〜５×１０-3mol／リットル、Ｃａ
2+に関しては３×１０-4〜０.４、好ましくは１０-3〜
１０-2、とくに好ましくは２〜４×１０-3mol／リット
ルとなるように調整する。化合物としては、塩化物の使
用が好ましい。
に、ウイルスの赤血球への結合の時点で、Ｍｇ2+に関し
ては４×１０-4〜０.４、好ましくは１０-3〜１０-2、
とくに好ましくは３〜５×１０-3mol／リットル、Ｃａ
2+に関しては３×１０-4〜０.４、好ましくは１０-3〜
１０-2、とくに好ましくは２〜４×１０-3mol／リット
ルとなるように調整する。化合物としては、塩化物の使
用が好ましい。
【０００８】本発明の方法は、各場合につき１種類のイ
オンを用いて実施することができる。両イオンを使用す
ることが好ましく、これらをほぼ等しいモル濃度で使用
することが極めて好ましい。風疹ウイルスを結合できる
赤血球は上述の溶液に添加される。ヒト、モルモット、
ハト、去勢雄ヒツジ、ヒツジ、ウサギまたはウマからの
赤血球が有利に使用される。この場合の赤血球の濃度は
０.０４〜４容量％、好ましくは約０.４容量％である。
インキュベーションは１分〜４８時間、好ましくは２０
分〜４時間、とくに好ましくは約１時間実施される。有
利な方法においてはまた、作業の経済性の理由から、イ
ンキュベーションは「夜通し」で行われる。
オンを用いて実施することができる。両イオンを使用す
ることが好ましく、これらをほぼ等しいモル濃度で使用
することが極めて好ましい。風疹ウイルスを結合できる
赤血球は上述の溶液に添加される。ヒト、モルモット、
ハト、去勢雄ヒツジ、ヒツジ、ウサギまたはウマからの
赤血球が有利に使用される。この場合の赤血球の濃度は
０.０４〜４容量％、好ましくは約０.４容量％である。
インキュベーションは１分〜４８時間、好ましくは２０
分〜４時間、とくに好ましくは約１時間実施される。有
利な方法においてはまた、作業の経済性の理由から、イ
ンキュベーションは「夜通し」で行われる。
【０００９】ウイルスと細胞の複合体は適当な方法で分
離できる。熟練した研究者にはそれ自体よく知られた遠
心分離および濾過方法は、この場合とくに有利である。
ウイルスを放出させるには、２価に荷電した陽イオンを
錯化する錯化剤を添加する。この種の錯化剤は、熟練し
た研究者にはそれ自体知られていて、ＥＤＴＡのほか
に、たとえばＥＰ ０ ４８８ １６８号に開示されてい
る生物分解性錯化剤の使用が好ましい。その排除に必要
な錯化剤濃度としては約３×１０-2〜３×１０-3mol／
リットルが有利であり、約７×１０-3mol／リットルが
とくに有利である。放出および溶出はpH６〜１２、とく
に好ましくはpH約９で行われる。
離できる。熟練した研究者にはそれ自体よく知られた遠
心分離および濾過方法は、この場合とくに有利である。
ウイルスを放出させるには、２価に荷電した陽イオンを
錯化する錯化剤を添加する。この種の錯化剤は、熟練し
た研究者にはそれ自体知られていて、ＥＤＴＡのほか
に、たとえばＥＰ ０ ４８８ １６８号に開示されてい
る生物分解性錯化剤の使用が好ましい。その排除に必要
な錯化剤濃度としては約３×１０-2〜３×１０-3mol／
リットルが有利であり、約７×１０-3mol／リットルが
とくに有利である。放出および溶出はpH６〜１２、とく
に好ましくはpH約９で行われる。
【００１０】赤血球とウイルスはその大きさおよび密度
が著しく異なるので、それらはついで、熟練した研究者
にはそれ自体知られた適当な方法で互いに分解すること
が可能で、この分離は低速遠心分離で有利に行われる。
この場合、赤血球は沈降し、ウイルスは上清中に残留す
る。至適な遠心分離条件は、必要に応じて実験的に、容
易に決定できる。カラム操作による方法を用いることも
有利である。この方法には以下の工程が包含される。す
なわち、 ａ） 適当な赤血球によるカラムの調製、 ｂ） 要求されるイオン条件を考慮したウイルス含有溶
液の添加、これにより赤血球への結合が起こる、 ｃ） カラムの洗浄、ついで ｄ） 溶出緩衝液の添加によるウイルスまたはウイルス
構成成分の溶出 である。
が著しく異なるので、それらはついで、熟練した研究者
にはそれ自体知られた適当な方法で互いに分解すること
が可能で、この分離は低速遠心分離で有利に行われる。
この場合、赤血球は沈降し、ウイルスは上清中に残留す
る。至適な遠心分離条件は、必要に応じて実験的に、容
易に決定できる。カラム操作による方法を用いることも
有利である。この方法には以下の工程が包含される。す
なわち、 ａ） 適当な赤血球によるカラムの調製、 ｂ） 要求されるイオン条件を考慮したウイルス含有溶
液の添加、これにより赤血球への結合が起こる、 ｃ） カラムの洗浄、ついで ｄ） 溶出緩衝液の添加によるウイルスまたはウイルス
構成成分の溶出 である。
【００１１】本発明の方法の開示後には、熟練した研究
者であれば、この種類のカラム操作を至適化することは
容易である。上記工程に対しては、本発明の原理に由来
する様々な変更が考えられる。すなわち、たとえば細胞
のウイルス受容体を、たとえば赤血球から単離後に使用
することができる。この場合、ウイルス受容体は沈降性
プラスティック粒子または電磁性担体にカップリングさ
せることができる。この種のウイルス受容体はまた別法
で、たとえば遺伝子操作によって、調製することができ
る。本方法の利点は、ウイルスが濃縮されると同時に、
望ましくない夾雑物が単純な手段で除去されることであ
る。以下の実施例は本発明の例示を意図するものであっ
て、それを限定するものではない。
者であれば、この種類のカラム操作を至適化することは
容易である。上記工程に対しては、本発明の原理に由来
する様々な変更が考えられる。すなわち、たとえば細胞
のウイルス受容体を、たとえば赤血球から単離後に使用
することができる。この場合、ウイルス受容体は沈降性
プラスティック粒子または電磁性担体にカップリングさ
せることができる。この種のウイルス受容体はまた別法
で、たとえば遺伝子操作によって、調製することができ
る。本方法の利点は、ウイルスが濃縮されると同時に、
望ましくない夾雑物が単純な手段で除去されることであ
る。以下の実施例は本発明の例示を意図するものであっ
て、それを限定するものではない。
【００１２】実施例： 必要な材料 − 粗風疹ウイルス懸濁液１０Ｌ − 固定化された去勢雄ヒツジ赤血球 − ２Ｎ ＨＣｌ − ２ＬのＰＢＳ、pH７.０、０.１ｇ／Ｌ ＭｇＣｌ2×
６Ｈ2Ｏおよび０.１３２ｇ／Ｌ ＣａＣｌ2×２Ｈ2Ｏ含
有 − ０.２Ｌ ＰＢＳ、pH７.５ − ０.５ｇ ＥＤＴＡ
６Ｈ2Ｏおよび０.１３２ｇ／Ｌ ＣａＣｌ2×２Ｈ2Ｏ含
有 − ０.２Ｌ ＰＢＳ、pH７.５ − ０.５ｇ ＥＤＴＡ
【００１３】吸着 粗風疹ウイルス懸濁液１０Ｌを４℃に冷却し、２Ｎ Ｈ
ＣｌでpHを７に調整した。１６０mLの赤血球懸濁液（２
５容量％）を加えた。これは最終濃度０.４容量％に相
当する。混合物を撹拌器により、４℃において１〜１６
時間撹拌した。懸濁液を１Ｌの遠沈カップ中、Cryofuge
８０００（Heraeus, Germany）により、４℃、２７０
０rpmにおいて１０分間遠心分離した。遠心分離後、赤
血球ペレットを１００mLのＰＢＳ、pH７.０に再懸濁し
た。２回目の遠心分離を上述の条件下に行い、上清を傾
瀉して捨てた。
ＣｌでpHを７に調整した。１６０mLの赤血球懸濁液（２
５容量％）を加えた。これは最終濃度０.４容量％に相
当する。混合物を撹拌器により、４℃において１〜１６
時間撹拌した。懸濁液を１Ｌの遠沈カップ中、Cryofuge
８０００（Heraeus, Germany）により、４℃、２７０
０rpmにおいて１０分間遠心分離した。遠心分離後、赤
血球ペレットを１００mLのＰＢＳ、pH７.０に再懸濁し
た。２回目の遠心分離を上述の条件下に行い、上清を傾
瀉して捨てた。
【００１４】溶出緩衝液の調製 ０.２３％のＥＤＴＡ（Ｃ10Ｈ14Ｎ2Ｏ8Ｎａ2・２Ｈ
2Ｏ；Serva、注文番号１１２８０）を、Ｍｇ2+／Ｃａ2+
を含まないＰＢＳ、pH７.５に加え、完全に溶解させ
た。ついで、溶液を２Ｎ ＮａＯＨでpH９に滴定し、冷
室で４℃に冷却した。溶出緩衝液は各場合、できる限り
新たに調製する。
2Ｏ；Serva、注文番号１１２８０）を、Ｍｇ2+／Ｃａ2+
を含まないＰＢＳ、pH７.５に加え、完全に溶解させ
た。ついで、溶液を２Ｎ ＮａＯＨでpH９に滴定し、冷
室で４℃に冷却した。溶出緩衝液は各場合、できる限り
新たに調製する。
【００１５】上述の方法で得られた赤血球ペレットを注
意深く、溶出緩衝液中の使用した粗ウイルス緩衝液１／
１００容量に懸濁し（１０Ｌ→１００mL）、４℃におい
て１５分間、穏やかに撹拌した。この緩衝液をCryofuge
８０００により、４℃、３０００rpmにおいて１０分間
遠心分離した。上清は使用したウイルスの大部分を含
み、これを「溶出液１」とした。溶出液１をもう一度遠
心分離して（４℃、３０００rpm、１０分間）、残って
いる赤血球を除去した。赤血球ペレットを、同一の条件
下にもう一度溶出し、「溶出液２」を得た。この溶出液
はプールしてもよく、また別個にさらに処理してもよ
い。
意深く、溶出緩衝液中の使用した粗ウイルス緩衝液１／
１００容量に懸濁し（１０Ｌ→１００mL）、４℃におい
て１５分間、穏やかに撹拌した。この緩衝液をCryofuge
８０００により、４℃、３０００rpmにおいて１０分間
遠心分離した。上清は使用したウイルスの大部分を含
み、これを「溶出液１」とした。溶出液１をもう一度遠
心分離して（４℃、３０００rpm、１０分間）、残って
いる赤血球を除去した。赤血球ペレットを、同一の条件
下にもう一度溶出し、「溶出液２」を得た。この溶出液
はプールしてもよく、また別個にさらに処理してもよ
い。
【００１６】精製はとくに、イムノブロット定量を用い
てチェックした。これには、蛋白質の還元ＳＤＳポリア
クリルアミドゲルによる分画化（Laemmli, U.K. Nature
２２７, １９７０，６８０〜６８５）、蛋白質のニト
ロセルロースへの移送（Bowcn, B.ら、Nucl. Acids Re
s，８，１９８０，１〜２０）、および蛋白質バンド
の、熟練した研究者にはそれ自体よく知られた以下の検
出系による。すなわち、風疹ウイルス免疫グロブリン、
ビオチン化抗−ヒト免疫グロブリンおよびペルオキシダ
ーゼ標識ストレプトアビジンを用いる検出を伴った。
てチェックした。これには、蛋白質の還元ＳＤＳポリア
クリルアミドゲルによる分画化（Laemmli, U.K. Nature
２２７, １９７０，６８０〜６８５）、蛋白質のニト
ロセルロースへの移送（Bowcn, B.ら、Nucl. Acids Re
s，８，１９８０，１〜２０）、および蛋白質バンド
の、熟練した研究者にはそれ自体よく知られた以下の検
出系による。すなわち、風疹ウイルス免疫グロブリン、
ビオチン化抗−ヒト免疫グロブリンおよびペルオキシダ
ーゼ標識ストレプトアビジンを用いる検出を伴った。
【００１７】スキャナーを用いたこの種のイムノブロッ
トの定量を図１および図２に示す。図中、Ｅ１、Ｅ２お
よびＣは、風疹ウイルスの構造蛋白質と同定される。Ｐ
ＥＧＡｇ（図１）は先行技術（Bowdenら、１９８４）に
よって処理された物質であり、ＥｒｙＡｇ（図２）は本
発明の方法によって精製された物質である。スキャニン
グには２Ｄ〜１Ｄビデオデンシトメーター（Biotech／F
ischerソフトウエア）使用した（ピーク高：５、集積分
解能：１００％、ピーク幅：２、グラフ長：１５）。
トの定量を図１および図２に示す。図中、Ｅ１、Ｅ２お
よびＣは、風疹ウイルスの構造蛋白質と同定される。Ｐ
ＥＧＡｇ（図１）は先行技術（Bowdenら、１９８４）に
よって処理された物質であり、ＥｒｙＡｇ（図２）は本
発明の方法によって精製された物質である。スキャニン
グには２Ｄ〜１Ｄビデオデンシトメーター（Biotech／F
ischerソフトウエア）使用した（ピーク高：５、集積分
解能：１００％、ピーク幅：２、グラフ長：１５）。
【図１】ＰＥＧ沈殿によって得られた風疹ウイルス抗原
のイムノブロット定量を示す図。
のイムノブロット定量を示す図。
【図２】本発明の方法によって単離された風疹ウイルス
抗原のイムノブロット定量を示す図。
抗原のイムノブロット定量を示す図。
Ｅ１、Ｅ２、Ｃ：風疹ウイルスの構造蛋白質
Claims (5)
- 【請求項１】 風疹ウイルスに対する受容体をもつ天然
または合成粒子への可逆的結合により、ウイルスを懸濁
液から単離し、粒子から脱着させ、ついで単離する風疹
ウイルスの精製および濃縮方法において、ウイルスの結
合は２価に荷電したイオンの存在下に行い、放出は２価
に荷電したイオンに対するキレート剤の存在下に行う方
法。 - 【請求項２】 ２価に荷電したイオンは、Ｍｇ2+および
／またはＣａ2+である請求項１に記載の方法。 - 【請求項３】 キレート剤はＥＤＴＡである請求項１ま
たは２に記載の方法。 - 【請求項４】 粒子は赤血球である請求項１に記載の方
法。 - 【請求項５】 粒子は単離されたウイルス受容体が結合
した合成粒子である請求項１に記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19924243491 DE4243491A1 (de) | 1992-12-22 | 1992-12-22 | Verfahren zur Reinigung und Anreicherung von Rubella-Virus |
| DE4243491:2 | 1992-12-22 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06217767A true JPH06217767A (ja) | 1994-08-09 |
Family
ID=6476127
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP32073593A Pending JPH06217767A (ja) | 1992-12-22 | 1993-12-21 | 風疹ウイルスの精製および濃縮方法 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0603615A3 (ja) |
| JP (1) | JPH06217767A (ja) |
| AU (1) | AU678404B2 (ja) |
| CA (1) | CA2111998A1 (ja) |
| DE (1) | DE4243491A1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006204201A (ja) * | 2005-01-28 | 2006-08-10 | Nippon Sekijiyuujishiya | ウイルスの分離・濃縮回収・試料調製方法 |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1010981A1 (de) * | 1998-12-18 | 2000-06-21 | Diagor GmbH | Konjugate zum Nachweis von Viren und deren Verwendung |
| CA2406283A1 (en) * | 2000-04-18 | 2001-10-25 | Christopher Paul Hughes | Materials and methods relating to increasing viral titre |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| US3316153A (en) * | 1965-03-29 | 1967-04-25 | Lilly Co Eli | Virus purification |
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Also Published As
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