JPH06183982A - 抗ウイルス剤 - Google Patents
抗ウイルス剤Info
- Publication number
- JPH06183982A JPH06183982A JP4356165A JP35616592A JPH06183982A JP H06183982 A JPH06183982 A JP H06183982A JP 4356165 A JP4356165 A JP 4356165A JP 35616592 A JP35616592 A JP 35616592A JP H06183982 A JPH06183982 A JP H06183982A
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- Japan
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- antiviral agent
- supernatant
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- water extract
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 本発明は、抗ウイルス剤に関し、さらに詳し
くは、天然麝香の水抽出物を有効成分とする毒性のない
安全性に優れた抗ウイルス剤を提供する。 【構成】 天然麝香に水を加え、攪拌後遠心分離して得
られる上清、あるいはさらにこの上清を例えばミリポア
フィルターで濾過滅菌するなどの滅菌処理をして天然麝
香の水抽出物を得、これを抗ウイルス剤として用いる。
くは、天然麝香の水抽出物を有効成分とする毒性のない
安全性に優れた抗ウイルス剤を提供する。 【構成】 天然麝香に水を加え、攪拌後遠心分離して得
られる上清、あるいはさらにこの上清を例えばミリポア
フィルターで濾過滅菌するなどの滅菌処理をして天然麝
香の水抽出物を得、これを抗ウイルス剤として用いる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、抗ウイルス剤に関し、
さらに詳しくは、天然麝香の水抽出物を有効成分とする
毒性のない安全性に優れた抗ウイルス剤に関する。
さらに詳しくは、天然麝香の水抽出物を有効成分とする
毒性のない安全性に優れた抗ウイルス剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】天然麝香は、ジャコウジカの雄の麝香嚢
より分泌される分泌物から得られる毒性がなく安全性に
優れた生薬であり、強心剤や抗炎症剤として用いられて
いる。また、天然麝香にはβ−アドレナリン作働薬の作
用を増強する成分も見いだされている（特開平３−２９
４２５９号公報）。しかし、天然麝香そのものやそれか
らの抽出物に抗ウイルス作用があることは知られていな
かった。
より分泌される分泌物から得られる毒性がなく安全性に
優れた生薬であり、強心剤や抗炎症剤として用いられて
いる。また、天然麝香にはβ−アドレナリン作働薬の作
用を増強する成分も見いだされている（特開平３−２９
４２５９号公報）。しかし、天然麝香そのものやそれか
らの抽出物に抗ウイルス作用があることは知られていな
かった。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、新たな
安全性に優れた抗ウイルス性物質を見いだすべく鋭意研
究した結果、天然麝香の水抽出物に抗ウイルス作用を有
する物質が存在することを見いだし、本発明を完成する
に到った。
安全性に優れた抗ウイルス性物質を見いだすべく鋭意研
究した結果、天然麝香の水抽出物に抗ウイルス作用を有
する物質が存在することを見いだし、本発明を完成する
に到った。
【０００４】
【課題を解決するための手段】かくして本発明によれ
ば、天然麝香の水抽出物を有効成分として含有すること
を特徴とする抗ウイルス剤を提供される。
ば、天然麝香の水抽出物を有効成分として含有すること
を特徴とする抗ウイルス剤を提供される。
【０００５】本発明における有効成分は、天然麝香の水
抽出物、すなわち天然麝香と水を混合した際に水相中に
抽出される成分であり、好ましくは分子量５０００以上
の画分である。抗ウイルス作用はこのような水抽出物に
特有のものであり、水で抽出されない成分やエタノー
ル、酢酸エチルなどの有機溶媒抽出物は抗ウイルス作用
を奏さない。有効成分を抽出する方法は、天然麝香に適
量の水を加え、通常１時間から３６時間攪拌後、水不溶
物を除去し、水を除去すればよい。不溶物の除去方法と
しては、遠心分離や濾過などが挙げられ、水の除去方法
としては、凍結乾燥法、真空乾燥法などが挙げられる。
また、分子量５０００以上の画分を得るには、水不溶物
の除去後、例えば限外濾過等の処理をすればよい。得ら
れた水抽出物を医薬として投与することから、滅菌処理
をすることが好ましく、滅菌処理の方法としては、例え
ば、上記の操作で水不溶物を除去した後、あるいは水を
除去した水抽出物を適当な溶剤に溶解させた後、ミリポ
アフィルターを用い濾過滅菌する方法が挙げられる。
抽出物、すなわち天然麝香と水を混合した際に水相中に
抽出される成分であり、好ましくは分子量５０００以上
の画分である。抗ウイルス作用はこのような水抽出物に
特有のものであり、水で抽出されない成分やエタノー
ル、酢酸エチルなどの有機溶媒抽出物は抗ウイルス作用
を奏さない。有効成分を抽出する方法は、天然麝香に適
量の水を加え、通常１時間から３６時間攪拌後、水不溶
物を除去し、水を除去すればよい。不溶物の除去方法と
しては、遠心分離や濾過などが挙げられ、水の除去方法
としては、凍結乾燥法、真空乾燥法などが挙げられる。
また、分子量５０００以上の画分を得るには、水不溶物
の除去後、例えば限外濾過等の処理をすればよい。得ら
れた水抽出物を医薬として投与することから、滅菌処理
をすることが好ましく、滅菌処理の方法としては、例え
ば、上記の操作で水不溶物を除去した後、あるいは水を
除去した水抽出物を適当な溶剤に溶解させた後、ミリポ
アフィルターを用い濾過滅菌する方法が挙げられる。
【０００６】このようにして得られる水抽出物は、通常
ｐＨが低いので、ｐＨ５〜９に調整することが好まし
い。またなるべく不当な熱履歴や化学変性を避けるため
に室温以下、好ましくは１５℃以下で行うとよい。本発
明においては、遠心分離して得られる水抽出物を含む上
清をそのまま、あるいは例えば牛乳、脱脂乳その他のコ
ロイド状タンパク質含有物や甘味料などを通常、配合し
て経口投与することもできるが、品質一定で且つ安定性
のよい乾燥粉末を利用するのが好ましい。
ｐＨが低いので、ｐＨ５〜９に調整することが好まし
い。またなるべく不当な熱履歴や化学変性を避けるため
に室温以下、好ましくは１５℃以下で行うとよい。本発
明においては、遠心分離して得られる水抽出物を含む上
清をそのまま、あるいは例えば牛乳、脱脂乳その他のコ
ロイド状タンパク質含有物や甘味料などを通常、配合し
て経口投与することもできるが、品質一定で且つ安定性
のよい乾燥粉末を利用するのが好ましい。
【０００７】本発明の抗ウイルス剤は、所望により、各
種の添加剤が配合されていてもよく、またその剤形も種
々の剤形であることができる。かかる添加剤としては、
乾燥に際しての添加剤のほかに所望の剤形を形成するた
めに必要な調剤用添加剤類を挙げることができる。これ
らの添加剤類の例としては、例えばアスコルビン酸、ビ
オチン、パントテン酸塩、カロチン、ナイアシン、塩酸
ピリドキシン、リボフラビン、塩酸チアミン、トコフェ
ロールなどのビタミン類；ソルビン酸塩、安息香酸誘導
体、安息香酸塩などの保存剤；アラビアゴム、トラガン
ト、メチルセルロース、アルギン酸塩や乳糖などの糖類
などの添加剤・賦形剤等が挙げられる。
種の添加剤が配合されていてもよく、またその剤形も種
々の剤形であることができる。かかる添加剤としては、
乾燥に際しての添加剤のほかに所望の剤形を形成するた
めに必要な調剤用添加剤類を挙げることができる。これ
らの添加剤類の例としては、例えばアスコルビン酸、ビ
オチン、パントテン酸塩、カロチン、ナイアシン、塩酸
ピリドキシン、リボフラビン、塩酸チアミン、トコフェ
ロールなどのビタミン類；ソルビン酸塩、安息香酸誘導
体、安息香酸塩などの保存剤；アラビアゴム、トラガン
ト、メチルセルロース、アルギン酸塩や乳糖などの糖類
などの添加剤・賦形剤等が挙げられる。
【０００８】本発明の抗ウイルス剤は経口または非経口
投与することができ、投与経路に適した剤の形、例えば
錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤、坐剤、
注射剤、点眼剤などに製剤化することができる。また、
その投与量は、対象とするウイルスの種類、患者の症状
の程度、性別、年齢、体重等に応じて広い範囲でかえる
ことができるが、一般に、天然麝香の水抽出物として約
０．１〜５ｍｇ／Ｋｇ体重／日の範囲とすることができ
る。
投与することができ、投与経路に適した剤の形、例えば
錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤、坐剤、
注射剤、点眼剤などに製剤化することができる。また、
その投与量は、対象とするウイルスの種類、患者の症状
の程度、性別、年齢、体重等に応じて広い範囲でかえる
ことができるが、一般に、天然麝香の水抽出物として約
０．１〜５ｍｇ／Ｋｇ体重／日の範囲とすることができ
る。
【０００９】本発明の抗ウイルス剤は、ウイルスの増殖
を抑制する作用を有し、例えば、レトロウイルス属、ヘ
ルペスウイルス属、フラビウイルス属等のウイルスによ
る感染症の処置、治療のために効果的に使用することが
でき、特にレトロウイルス属に属するウイルス、とりわ
けヒト免疫不全症ウイルス（以下、ＨＩＶという）に効
果的である。
を抑制する作用を有し、例えば、レトロウイルス属、ヘ
ルペスウイルス属、フラビウイルス属等のウイルスによ
る感染症の処置、治療のために効果的に使用することが
でき、特にレトロウイルス属に属するウイルス、とりわ
けヒト免疫不全症ウイルス（以下、ＨＩＶという）に効
果的である。
【００１０】
【発明の効果】本発明によれば、高活性で毒性のない安
全性に優れた抗ウイルス剤が得られる。
全性に優れた抗ウイルス剤が得られる。
【００１１】
【実施例】以下に実施例を挙げて本発明をさらに具体的
に説明する。 （実施例） 天然麝香水抽出物の調製 天然麝香０．９６ｇに水４０ｍｌを加え、４℃で１２時
間攪拌した。次いでこの液を遠心分離（１０，０００×
ｇ）し、上清を分取した。得られた上清を限外濾過し
て、分子量５０００以上の画分を得、これを凍結乾燥
し、０．５５ｇの粉末を得た。
に説明する。 （実施例） 天然麝香水抽出物の調製 天然麝香０．９６ｇに水４０ｍｌを加え、４℃で１２時
間攪拌した。次いでこの液を遠心分離（１０，０００×
ｇ）し、上清を分取した。得られた上清を限外濾過し
て、分子量５０００以上の画分を得、これを凍結乾燥
し、０．５５ｇの粉末を得た。
【００１２】（試験例） 抗ＨＩＶ作用の検討 （１）薬液の調製 実施例で得られた天然麝香の水抽出物の粉末をＲＰＭ１
１６４０培地（日水製薬社製）０．５５ｍｌに溶解させ
たのち、ポアサイズ０．２２μｍのミリポアフィルター
で濾過滅菌した。さらに濾液に５規定水酸化ナトリウム
水溶液を加えてｐＨ７．４に調節し、天然麝香水抽出物
の乾燥重量基準で１ｍｇ／ｍｌの薬液を調製した。
１６４０培地（日水製薬社製）０．５５ｍｌに溶解させ
たのち、ポアサイズ０．２２μｍのミリポアフィルター
で濾過滅菌した。さらに濾液に５規定水酸化ナトリウム
水溶液を加えてｐＨ７．４に調節し、天然麝香水抽出物
の乾燥重量基準で１ｍｇ／ｍｌの薬液を調製した。
【００１３】（２）ウイルスストック液の調製 ＨＩＶ持続感染Ｈ９細胞（京都大学ウイルス研究室より
入手）と非感染Ｈ９細胞（京都大学ウイルス研究室より
入手）を１：１の割合で混合し、１０％牛胎児血清（Ｇ
ＩＢＣＯ社製）を含むＲＰＭＩ１６４０培地（日水製薬
社製）で３７℃、４日間培養後、培養液を遠心分離
（２，０００×ｇ）し上清を回収した。この上清をポア
サイズ０．４７μｍのミリポアフィルターで濾過した
後、０．５ｍｌづつセラムチューブに分注し、−７０℃
で保存し、ウイルスストック液とした。
入手）と非感染Ｈ９細胞（京都大学ウイルス研究室より
入手）を１：１の割合で混合し、１０％牛胎児血清（Ｇ
ＩＢＣＯ社製）を含むＲＰＭＩ１６４０培地（日水製薬
社製）で３７℃、４日間培養後、培養液を遠心分離
（２，０００×ｇ）し上清を回収した。この上清をポア
サイズ０．４７μｍのミリポアフィルターで濾過した
後、０．５ｍｌづつセラムチューブに分注し、−７０℃
で保存し、ウイルスストック液とした。
【００１４】（３）ＭＴＴ法による抗ＨＩＶ活性の測定 天然麝香の水抽出物の抗ウイルス活性をＭＴＴ法（Ｊ．
Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ、６５、５５、（１９
８３））により調べた。具体的な手順は、次の通りであ
る。対数増殖期にある非感染ＭＴ−４細胞（京都大学ウ
イルス研究室より入手）６×１０6個を１０％牛胎児血
清（ＧＩＢＣＯ社製）を含むＲＰＭＩ１６４０培地（日
水製薬社製）に懸濁させ、その浮遊液を２等分し、それ
ぞれ遠心分離（２，０００×ｇ）し、上清を捨て、一方
の沈渣には、上記ウイルスストック液を加え、３７℃で
１時間インキュベートし、ウイルスを吸着させ、他方の
沈渣には、同量の同じ培地を加え、同様の条件でインキ
ュベートした。これら二つの細胞液を遠心分離（２，０
００×ｇ）した後、上清をできるだけ除き、沈渣をそれ
ぞれ２．５ｍｌの培地に再び懸濁した。前記（１）で得
られた天然麝香の水抽出物からなる薬液に１０％牛胎児
血清（ＧＩＢＣＯ社製）を含むＲＰＭＩ１６４０培地
（日水製薬社製）を加え、天然麝香水抽出物の乾燥重量
基準で２００μｇ／ｍｌの濃度に調整した。これを９段
階に２倍希釈して各濃度（単位はすべてμｇ／ｍｌ）を
２００．０、１００．０、５０．０、２５．０、１２．
５、６．２５、３．１２５、１．５６、０．７８、０．
３９に調整したもの、およびコントロールとして天然麝
香水抽出物を全く含まない同培地を２００μｌづつ９６
穴培養ディッシュの外周辺部を除いた６０穴に加え、外
周辺部はリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）２００μｌで満た
した。
Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ、６５、５５、（１９
８３））により調べた。具体的な手順は、次の通りであ
る。対数増殖期にある非感染ＭＴ−４細胞（京都大学ウ
イルス研究室より入手）６×１０6個を１０％牛胎児血
清（ＧＩＢＣＯ社製）を含むＲＰＭＩ１６４０培地（日
水製薬社製）に懸濁させ、その浮遊液を２等分し、それ
ぞれ遠心分離（２，０００×ｇ）し、上清を捨て、一方
の沈渣には、上記ウイルスストック液を加え、３７℃で
１時間インキュベートし、ウイルスを吸着させ、他方の
沈渣には、同量の同じ培地を加え、同様の条件でインキ
ュベートした。これら二つの細胞液を遠心分離（２，０
００×ｇ）した後、上清をできるだけ除き、沈渣をそれ
ぞれ２．５ｍｌの培地に再び懸濁した。前記（１）で得
られた天然麝香の水抽出物からなる薬液に１０％牛胎児
血清（ＧＩＢＣＯ社製）を含むＲＰＭＩ１６４０培地
（日水製薬社製）を加え、天然麝香水抽出物の乾燥重量
基準で２００μｇ／ｍｌの濃度に調整した。これを９段
階に２倍希釈して各濃度（単位はすべてμｇ／ｍｌ）を
２００．０、１００．０、５０．０、２５．０、１２．
５、６．２５、３．１２５、１．５６、０．７８、０．
３９に調整したもの、およびコントロールとして天然麝
香水抽出物を全く含まない同培地を２００μｌづつ９６
穴培養ディッシュの外周辺部を除いた６０穴に加え、外
周辺部はリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）２００μｌで満た
した。
【００１５】つぎに一穴当りの細胞が３×１０4個とな
るように、先に調製したウイルス感染細胞懸濁液とウイ
ルス非感染細胞懸濁液をそれぞれ３０穴づつに加え、３
７℃で５日間培養した。培養後、４，５−ジメチルテト
ラゾリウムブロマイド（ＳＩＧＭＡ社製）をリン酸緩衝
液（ｐＨ７．４）に溶解させ、これをポアサイズ０．２
２μｍのミリポアフィルターで濾過滅菌し、ＭＴＴ溶液
（５ｍｇ／ｍｌ）を調製した。このＭＴＴ溶液を、先の
培養液に１５μｌづつ加え、さらに３７℃で４時間培養
した。ここにイソプロピルアルコールに塩酸を加え最終
濃度が０．０４Ｍとなるように調製した酸性イソプロピ
ルアルコール１００μｌを加え、混合したときの呈色を
５７０ｎｍの吸光度（対照波長６３０ｎｍ）で測定し
た。なお、同様の操作を３回繰り返した。
るように、先に調製したウイルス感染細胞懸濁液とウイ
ルス非感染細胞懸濁液をそれぞれ３０穴づつに加え、３
７℃で５日間培養した。培養後、４，５−ジメチルテト
ラゾリウムブロマイド（ＳＩＧＭＡ社製）をリン酸緩衝
液（ｐＨ７．４）に溶解させ、これをポアサイズ０．２
２μｍのミリポアフィルターで濾過滅菌し、ＭＴＴ溶液
（５ｍｇ／ｍｌ）を調製した。このＭＴＴ溶液を、先の
培養液に１５μｌづつ加え、さらに３７℃で４時間培養
した。ここにイソプロピルアルコールに塩酸を加え最終
濃度が０．０４Ｍとなるように調製した酸性イソプロピ
ルアルコール１００μｌを加え、混合したときの呈色を
５７０ｎｍの吸光度（対照波長６３０ｎｍ）で測定し
た。なお、同様の操作を３回繰り返した。
【００１６】上記ＭＴＴ法により測定された各濃度の吸
光度の平均値と天然麝香水抽出物の乾燥重量から生存細
胞数を求めるグラフを作成し、このグラフから天然麝香
水抽出物の５０％有効濃度（ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｃｏ
ｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ；以下、ＥＣ50値という）と５
０％毒性濃度（ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆｃｙ
ｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ；以下、ＣＣ50値という）を求め
た。その結果、天然麝香水抽出物の乾燥重量基準でＥＣ
50値は０．１μｇ／ｍｌ、ＣＣ50値は≧１００μｇ／ｍ
ｌであった。また、選択指数（ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｉ
ｎｄｅｘ；以下、ＳＩ値という）は、≧１０００である
と計算された。ＳＩ値は、ＣＣ50値÷ＥＣ50値の計算式
から求められ、この値が高い薬物ほど、効果的かつ安全
に投与できる量の上限と下限の幅が広く好ましいとされ
ている。ちなみに、現在抗ＨＩＶ薬として用いられてい
るアジドチミジンのＥＣ50値は０．０５μＭ、ＣＣ50値
は５μＭであり、これから計算されるＳＩ値は１００で
ある（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、８
２、７０９６−７１００（１９８５））。以上のことか
ら、天然麝香水抽出物は安全であり、かつ高い抗ＨＩＶ
効果があることがわかった。
光度の平均値と天然麝香水抽出物の乾燥重量から生存細
胞数を求めるグラフを作成し、このグラフから天然麝香
水抽出物の５０％有効濃度（ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｃｏ
ｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ；以下、ＥＣ50値という）と５
０％毒性濃度（ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆｃｙ
ｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ；以下、ＣＣ50値という）を求め
た。その結果、天然麝香水抽出物の乾燥重量基準でＥＣ
50値は０．１μｇ／ｍｌ、ＣＣ50値は≧１００μｇ／ｍ
ｌであった。また、選択指数（ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｉ
ｎｄｅｘ；以下、ＳＩ値という）は、≧１０００である
と計算された。ＳＩ値は、ＣＣ50値÷ＥＣ50値の計算式
から求められ、この値が高い薬物ほど、効果的かつ安全
に投与できる量の上限と下限の幅が広く好ましいとされ
ている。ちなみに、現在抗ＨＩＶ薬として用いられてい
るアジドチミジンのＥＣ50値は０．０５μＭ、ＣＣ50値
は５μＭであり、これから計算されるＳＩ値は１００で
ある（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、８
２、７０９６−７１００（１９８５））。以上のことか
ら、天然麝香水抽出物は安全であり、かつ高い抗ＨＩＶ
効果があることがわかった。
Claims (1)
- 【請求項１】 天然麝香の水抽出物を有効成分として含
有することを特徴とする抗ウイルス剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4356165A JPH06183982A (ja) | 1992-12-18 | 1992-12-18 | 抗ウイルス剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4356165A JPH06183982A (ja) | 1992-12-18 | 1992-12-18 | 抗ウイルス剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06183982A true JPH06183982A (ja) | 1994-07-05 |
Family
ID=18447663
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4356165A Pending JPH06183982A (ja) | 1992-12-18 | 1992-12-18 | 抗ウイルス剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06183982A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008075863A1 (en) * | 2006-12-16 | 2008-06-26 | Pusan National University Industry-University Cooperation Foundation | Antibiotic and insect composition including antibiotics as effective components extracted from muskrat excrement |
| US20110123639A1 (en) * | 2009-11-26 | 2011-05-26 | Chan Agnes Sui-Yin | Compound for improving brain functioning and/or treatment of brain disorders |
-
1992
- 1992-12-18 JP JP4356165A patent/JPH06183982A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008075863A1 (en) * | 2006-12-16 | 2008-06-26 | Pusan National University Industry-University Cooperation Foundation | Antibiotic and insect composition including antibiotics as effective components extracted from muskrat excrement |
| US20110123639A1 (en) * | 2009-11-26 | 2011-05-26 | Chan Agnes Sui-Yin | Compound for improving brain functioning and/or treatment of brain disorders |
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