JPH06103317B2 - プレラベル法分析装置 - Google Patents
プレラベル法分析装置Info
- Publication number
- JPH06103317B2 JPH06103317B2 JP58241487A JP24148783A JPH06103317B2 JP H06103317 B2 JPH06103317 B2 JP H06103317B2 JP 58241487 A JP58241487 A JP 58241487A JP 24148783 A JP24148783 A JP 24148783A JP H06103317 B2 JPH06103317 B2 JP H06103317B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- reaction
- suction
- mobile phase
- container
- way valve
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/06—Preparation
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Automatic Analysis And Handling Materials Therefor (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 (イ)産業上の利用分野 この発明は分析対象とする化合物を反応試薬と反応させ
て発蛍光物質に変換した後、これを高速液体クロマトグ
ラフィに付して分離し蛍光分析するプレラベル法による
自動分析装置に関する。
て発蛍光物質に変換した後、これを高速液体クロマトグ
ラフィに付して分離し蛍光分析するプレラベル法による
自動分析装置に関する。
(ロ)従来技術 従来血漿、尿などの生体試料などに含まれる化合物のプ
レラベル法による自動分析装置としては、アミノ酸など
のアミンをｏ−フタルアルデヒドと反応させて発蛍光物
質に変換してから、この生成物質を高速液体クロマトグ
ラフィに付して分離し蛍光物析する装置が知られてい
る。しかし、この場合試料と反応試薬のｏ−フタルアル
デヒドとの混合が不充分で分析再現性に劣り、また、せ
いぜい２液混合反応系にしか用いることができないとい
う問題点がある。
レラベル法による自動分析装置としては、アミノ酸など
のアミンをｏ−フタルアルデヒドと反応させて発蛍光物
質に変換してから、この生成物質を高速液体クロマトグ
ラフィに付して分離し蛍光物析する装置が知られてい
る。しかし、この場合試料と反応試薬のｏ−フタルアル
デヒドとの混合が不充分で分析再現性に劣り、また、せ
いぜい２液混合反応系にしか用いることができないとい
う問題点がある。
一方、多数液混合反応系を利用して生体試料などに含ま
れる化合物を自動分析する装置としては、カテコールア
ミン類を高速液体クロマトグラフィで分離してから３種
の反応試薬と反応させてトリヒドロキシインドール（TH
I）に変換してこれを蛍光分析するポストカラム法によ
る装置が知られている。しかし、この装置は高速液体ク
ロマトグラフィの溶出液と反応試薬との混合によって希
釈されて分析感度が低下するとか、各反応試薬送液用ポ
ンプの脈動によるノイルレベルを低下させるために高価
なポンプを用いねばならないという問題点がある。ま
た、このような多反応系を利用したプレラベル法による
分析装置は知られていない。
れる化合物を自動分析する装置としては、カテコールア
ミン類を高速液体クロマトグラフィで分離してから３種
の反応試薬と反応させてトリヒドロキシインドール（TH
I）に変換してこれを蛍光分析するポストカラム法によ
る装置が知られている。しかし、この装置は高速液体ク
ロマトグラフィの溶出液と反応試薬との混合によって希
釈されて分析感度が低下するとか、各反応試薬送液用ポ
ンプの脈動によるノイルレベルを低下させるために高価
なポンプを用いねばならないという問題点がある。ま
た、このような多反応系を利用したプレラベル法による
分析装置は知られていない。
(ハ)目 的 この発明は上記のような問題点を改善するためになされ
たもので、プレラベル法による安価で分析再現性と感度
の良好な自動分析装置を提供することを目的とするもの
である。
たもので、プレラベル法による安価で分析再現性と感度
の良好な自動分析装置を提供することを目的とするもの
である。
(ニ)構 成 この発明は、試料と反応試薬と反応容器で反応させて発
蛍光物質に変換し、得られた反応液をカラム前段に配置
される反応液注入部から注入し、移動相送液ポンプで送
液される移動相によりカラムに導いて分析するプレラベ
ル法分析装置であって、反応容器を兼ねる試料容器と１
以上の反応試薬の容器とを有するターンテーブルを備え
ると共に、（Ａ）移動相送液ポンプに接続された管路と
カラムに接続された管路との連通、試料容器または反応
試薬容器に挿入されるノズル部を先端に有する管路とト
ラップ部の一端との連通、吸引放出手段または洗浄液供
給手段に３方バルブを介して接続された管路とトラップ
部の他端との連通、をそれぞれ可能にする第１の流路接
続構成と、（Ｂ）移動相送液ポンプに接続された管路と
トラップ部の他端との連通、トラップ部の一部とカラム
に接続された管路との連通、試料容器または反応容器に
挿入されるノズル部を先端に有する管路と吸引放出手段
または洗浄液供給手段に３方バルブを介して接続された
管路との連通、をそれぞれ可能にする第２の流路接続構
成と、に切換える切換えバルブを反応液注入部に設けて
なるプレラベル法分析装置を提供するものである。
蛍光物質に変換し、得られた反応液をカラム前段に配置
される反応液注入部から注入し、移動相送液ポンプで送
液される移動相によりカラムに導いて分析するプレラベ
ル法分析装置であって、反応容器を兼ねる試料容器と１
以上の反応試薬の容器とを有するターンテーブルを備え
ると共に、（Ａ）移動相送液ポンプに接続された管路と
カラムに接続された管路との連通、試料容器または反応
試薬容器に挿入されるノズル部を先端に有する管路とト
ラップ部の一端との連通、吸引放出手段または洗浄液供
給手段に３方バルブを介して接続された管路とトラップ
部の他端との連通、をそれぞれ可能にする第１の流路接
続構成と、（Ｂ）移動相送液ポンプに接続された管路と
トラップ部の他端との連通、トラップ部の一部とカラム
に接続された管路との連通、試料容器または反応容器に
挿入されるノズル部を先端に有する管路と吸引放出手段
または洗浄液供給手段に３方バルブを介して接続された
管路との連通、をそれぞれ可能にする第２の流路接続構
成と、に切換える切換えバルブを反応液注入部に設けて
なるプレラベル法分析装置を提供するものである。
この発明のプレラベル法分析装置は、特に反応液注入部
が上記の構成を有するので、上記切換えバルブの第１の
流路接続構成（Ａ）において、３方バルブを吸引放出手
段側に切換えてターンテーブル上の試薬容器から所要量
の反応試薬を吸引して試料の入っている試料容器（反応
容器）へ吐出し、続いて３方バルブを洗浄液供給側に切
換えてトラップ部及びこれに連通される両管路の洗浄を
行い、これら試料容器への反応試薬の吸引吐出と管路洗
浄を順次繰り返しながら試料と反応試料薬との反応によ
り発蛍光物質に変換された反応液を、３方バルブを吸引
放出手段に切換えてトラップ部に吸引保持した上で、上
記切換えバルブを第２の流路接続構成（Ｂ）に切換え
て、トラップ部に吸引保持した反応液を移動相送液ポン
プで送液される移動相により次段のカラムに送るもので
ある。
が上記の構成を有するので、上記切換えバルブの第１の
流路接続構成（Ａ）において、３方バルブを吸引放出手
段側に切換えてターンテーブル上の試薬容器から所要量
の反応試薬を吸引して試料の入っている試料容器（反応
容器）へ吐出し、続いて３方バルブを洗浄液供給側に切
換えてトラップ部及びこれに連通される両管路の洗浄を
行い、これら試料容器への反応試薬の吸引吐出と管路洗
浄を順次繰り返しながら試料と反応試料薬との反応によ
り発蛍光物質に変換された反応液を、３方バルブを吸引
放出手段に切換えてトラップ部に吸引保持した上で、上
記切換えバルブを第２の流路接続構成（Ｂ）に切換え
て、トラップ部に吸引保持した反応液を移動相送液ポン
プで送液される移動相により次段のカラムに送るもので
ある。
従って、このプレラベル法分析装置によれば、試料と反
応試薬とを充分混合して反応させることができるので分
析の再現性が良好であり、反応試薬は所要量しか用いな
いので希釈による感度の低下が少なく、またポストカラ
ム法のように高価な反応試薬用ポンプを使用しなくても
よい。
応試薬とを充分混合して反応させることができるので分
析の再現性が良好であり、反応試薬は所要量しか用いな
いので希釈による感度の低下が少なく、またポストカラ
ム法のように高価な反応試薬用ポンプを使用しなくても
よい。
(ホ)実施例 第１図はこの発明の分析装置の一実施例の系統図であ
り、第２図は第１図の装置の反応液注入部３の系統図で
ある。この装置によって血漿や尿などの生体試料中のカ
テーコールアミン類を分析する場合について説明する。
第１図と第２図において、反応液注入部３のターンテー
ブル10の容器Ａ、Ｂ、Ｃ及びＤにそれぞれ、試料、第１
反応試薬のフェリシアン化カリウム緩衝液、第２反応薬
のアスコルビン酸水溶液又はエチレンジアミン四酢酸含
有のアスコルビン酸水溶液、及び第３反応試薬の水酸化
ナトリウム溶液を入れておく。
り、第２図は第１図の装置の反応液注入部３の系統図で
ある。この装置によって血漿や尿などの生体試料中のカ
テーコールアミン類を分析する場合について説明する。
第１図と第２図において、反応液注入部３のターンテー
ブル10の容器Ａ、Ｂ、Ｃ及びＤにそれぞれ、試料、第１
反応試薬のフェリシアン化カリウム緩衝液、第２反応薬
のアスコルビン酸水溶液又はエチレンジアミン四酢酸含
有のアスコルビン酸水溶液、及び第３反応試薬の水酸化
ナトリウム溶液を入れておく。
一方、６方バルブ11を実線流路（第１の入路接続構成）
にしておいて、移動相のクエン酸ナトリウム水溶液とメ
タノールとの混合液１を移動相送液ポンプ２によって送
液し、移動相を管路12、６方バルブ11及び管路13を経て
化学結合型逆相カラム〔例えばゾルバックスODS（デュ
ポン社製）、Shodex RS pak DF613（昭和電工製）〕４
と蛍光検出器５を通過させて排液管路７から排出する。
次いでターンテーブル10を移動させて試薬容器Ｂから第
１反応試薬を、先端にノズル部（図示せず）を有する管
路19、６方バルブ11、トラップ部15、６方バルブ11、管
路20、３方バルブ16を介して吸引放出手段14で吸引して
トラップ部15に所要の第１反応試薬を採取し、再度ター
ンテーブル10を移動させて吸引放出手段14により試料の
入った試料容器Ａに急速注入する。従って、ここでは試
料容器Ａが反応容器を兼ねる。次いで、３方バルブ16を
洗浄液送液ポンプ17側に切換えて同ポンプ17によって送
液される洗浄液18で６方バルブ11やトラップ部15、及び
同トラップ部15それぞれ連通される両管路20、19を洗浄
する。同様にして第２反応試薬と第３反応試薬とを純に
試料容器Ａに注入して反応させる。このようにして試料
中のカテコールアミン類をTHIに変換して得られた反応
液を、管路19、６方バルブ11、トラップ部15、６方バル
ブ11、管路20、３方バルブ16を介して吸引放出手段14で
吸引しトラップ部15にトラップしておく。
にしておいて、移動相のクエン酸ナトリウム水溶液とメ
タノールとの混合液１を移動相送液ポンプ２によって送
液し、移動相を管路12、６方バルブ11及び管路13を経て
化学結合型逆相カラム〔例えばゾルバックスODS（デュ
ポン社製）、Shodex RS pak DF613（昭和電工製）〕４
と蛍光検出器５を通過させて排液管路７から排出する。
次いでターンテーブル10を移動させて試薬容器Ｂから第
１反応試薬を、先端にノズル部（図示せず）を有する管
路19、６方バルブ11、トラップ部15、６方バルブ11、管
路20、３方バルブ16を介して吸引放出手段14で吸引して
トラップ部15に所要の第１反応試薬を採取し、再度ター
ンテーブル10を移動させて吸引放出手段14により試料の
入った試料容器Ａに急速注入する。従って、ここでは試
料容器Ａが反応容器を兼ねる。次いで、３方バルブ16を
洗浄液送液ポンプ17側に切換えて同ポンプ17によって送
液される洗浄液18で６方バルブ11やトラップ部15、及び
同トラップ部15それぞれ連通される両管路20、19を洗浄
する。同様にして第２反応試薬と第３反応試薬とを純に
試料容器Ａに注入して反応させる。このようにして試料
中のカテコールアミン類をTHIに変換して得られた反応
液を、管路19、６方バルブ11、トラップ部15、６方バル
ブ11、管路20、３方バルブ16を介して吸引放出手段14で
吸引しトラップ部15にトラップしておく。
次いで、６方バルブ11を切換えて破線流路（第２の流路
接続構成）にし、移動相送液ポンプ２によって送液され
る移動相が管路12から６方バルブ11を介してトラップ部
15に導かれ、同トラップ部15にトラップされた反応液が
追い出されて６方バルブ11を介して管路13から化学結合
型逆相カラム４に送られ、THIが分離されて蛍光検出器
５で分析される。この分析結果は、分析データ処理器６
で処理される。そして上記のような操作は自動制御シス
テム８によって制御されて行われる。
接続構成）にし、移動相送液ポンプ２によって送液され
る移動相が管路12から６方バルブ11を介してトラップ部
15に導かれ、同トラップ部15にトラップされた反応液が
追い出されて６方バルブ11を介して管路13から化学結合
型逆相カラム４に送られ、THIが分離されて蛍光検出器
５で分析される。この分析結果は、分析データ処理器６
で処理される。そして上記のような操作は自動制御シス
テム８によって制御されて行われる。
(ヘ)効 果 この発明の装置によれば、試料と反応試薬との混合反応
が充分に行われるので分析の再現性が良好であり、反応
試薬は所要量しか用いないので希釈による感度の低下が
少なく、また各反応試薬用のポンプを要せず装置が安価
であるという利点がある。
が充分に行われるので分析の再現性が良好であり、反応
試薬は所要量しか用いないので希釈による感度の低下が
少なく、また各反応試薬用のポンプを要せず装置が安価
であるという利点がある。
第１図はこの発明の一実施例の分析装置の系統図、第２
図は第１図における反応液注入部３の系統図である。 １……移動相、２……移動相送液ポンプ ３……反応液注入部、４……化学結合型逆相カラム ５……蛍光検出器、６……分析データ処理器 ７……排液管路、10……ターンテーブル 11……６方バルブ、12、13……管路 14……吸引放出手段、15……トラップ部 16……洗浄液送液ポンプ、18……洗浄液 Ａ……試料容器、及び、Ｂ、Ｃ、Ｄ……反応試薬容器
図は第１図における反応液注入部３の系統図である。 １……移動相、２……移動相送液ポンプ ３……反応液注入部、４……化学結合型逆相カラム ５……蛍光検出器、６……分析データ処理器 ７……排液管路、10……ターンテーブル 11……６方バルブ、12、13……管路 14……吸引放出手段、15……トラップ部 16……洗浄液送液ポンプ、18……洗浄液 Ａ……試料容器、及び、Ｂ、Ｃ、Ｄ……反応試薬容器
Claims (1)
- 【請求項１】試料と反応試薬を反応容器で反応させて発
蛍光物質に変換し、得られた反応液をカラム前段に配置
される反応液注入部から注入し、移動相送液ポンプで送
液される移動相によりカラムに導いて分析するプレラベ
ル法分析装置であって、 前記反応容器を兼ねる試料容器と１以上の反応試薬の容
器とを有するターンテーブルを備えると共に、 (A)前記移動相送液ポンプに接続された管路と前記カラ
ムに接続された管路との連通、 前記試料容器または反応試薬容器に挿入されるノズル部
を先端に有する管路とトラップ部の一端との連通、 吸引放出手段または洗浄液供給手段に３方バルブを介し
て接続された管路とトラップ部の他端との連通、 をそれぞれ可能にする第１の流路接続構成と、 (B)前記移動相送液ポンプに接続された管路とトラップ
部の他端との連通、 トラップ部の一端と前記カラムに接続された管路との連
通、 前記試料容器または反応試薬容器に挿入されるノズル部
を先端に有する管路と吸引放出手段または洗浄液供給手
段に３方バルブを介して接続された管路との連通、 をそれぞれ可能にする第２の流路接続構成と、 に切換える切換えバルブを前記反応液注入部に設けてな
り、 前記切換えバルブの第１の流路接続構成（Ａ）におい
て、前記３方バルブを前記吸引放出手段側に切換えて反
応容器を兼ねる前記試料容器への反応試薬の吸引吐出を
行い、続いて前記３方バルブを前記洗浄液供給側に切換
えて前記トラップ部及びこれに連通される前記両管路の
洗浄を行い、これら前記試料容器への反応試薬の吸引吐
出と管路洗浄を順次繰り返しながら試料と反応試薬との
反応により発蛍光物質に変換された反応液を、前記３方
バルブを前記吸引放出手段側に切換えて前記トラップ部
に吸引保持し、 前記切換えバルブを第２の流路接続構成（Ｂ）に切換え
て、前記トラップ部に吸引保持した反応液を前記移動相
送液ポンプで送液される移動相により前記カラムに送る
ようにしたことを特徴とするプレラベル法分析装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58241487A JPH06103317B2 (ja) | 1983-12-20 | 1983-12-20 | プレラベル法分析装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58241487A JPH06103317B2 (ja) | 1983-12-20 | 1983-12-20 | プレラベル法分析装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60131464A JPS60131464A (ja) | 1985-07-13 |
| JPH06103317B2 true JPH06103317B2 (ja) | 1994-12-14 |
Family
ID=17075043
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58241487A Expired - Lifetime JPH06103317B2 (ja) | 1983-12-20 | 1983-12-20 | プレラベル法分析装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06103317B2 (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62231166A (ja) * | 1986-03-31 | 1987-10-09 | Shimadzu Corp | クロマトグラフイによる物質定性方法 |
| JPH0820426B2 (ja) * | 1989-10-20 | 1996-03-04 | 株式会社日立製作所 | 液体クロマトグラフ分析計およびプレラベル反応処理方法 |
| JP3399061B2 (ja) * | 1993-12-22 | 2003-04-21 | トヨタ自動車株式会社 | 車両用ステアリング装置 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5850510B2 (ja) * | 1978-07-10 | 1983-11-10 | 株式会社日立製作所 | コアレスモ−トルの製造方法 |
| JPS57175059U (ja) * | 1981-04-30 | 1982-11-05 |
-
1983
- 1983-12-20 JP JP58241487A patent/JPH06103317B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS60131464A (ja) | 1985-07-13 |
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