JPH0586932B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、悪性腫瘍の増殖抑制に利用される抗
腫瘍剤に関する。

技術的背景 本発明者らは、乳から分離されるラクトフエリ
ンの生理的活性について研究している過程で、ラ
クトフエリンに第２鉄イオンをキレート結合させ
た鉄結合型ラクトフエリンが造血作用のほかに、
抗腫瘍活性を有することの知見を得た。

発明が解決しようとする課題 したがつて、本発明は鉄結合型ラクトフエリン
を有効成分とする抗腫瘍剤を提供することを課題
とする。

本発明者らは、乳から分離して得られるラクト
フエリンに第２鉄イオンをキレート結合させた鉄
結合型ラクトフエリンが、そのラクトフエリンに
結合している鉄が第２鉄（Fe³⁺）であり、かつ
非ヘム形態の鉄であるにもかかわらず、有意に体
内に吸収されて腫瘍の抑制作用を示すことを見出
し、本発明をなすに至つた。

因に、〔Morck T.A.and Cook J.D.、「シリア
ル フード ワールド」（Cereal Foods Wold）、
26、667〜672、1981〕の研究報告によると、食物
中に含まれる鉄は、ヘム鉄と非ヘム鉄に分けられ
れ、ヘム鉄はその吸収率が良好である（吸収率15
〜35％）反面、食物中の含有量が少なく、それを
食品に添加して補給すると味が血生臭くなる欠点
があり、一方、非ヘム鉄は食物中の鉄の主成分で
はあるが、その存在状態が吸収性に可成り影響を
及ぼすとされる。例えば、非ヘム鉄はアスコルビ
ン酸や葉酸などとの共存下では吸収性が良いもの
の、卵、大豆、米、茶などと共に摂取した場合に
は吸収が著しく阻害される。

また、鉄の吸収性に関する多くの研究報告によ
ると、一般に、経口摂取される鉄は、消化管内で
可溶性である第１鉄（Fe²⁺）の方が、PH３以上
で不溶化になる第２鉄（Fe³⁺）より、吸収率が
高いと言われている。すなわち、鉄が主として吸
収される小腸上部の内容物のPH５〜６の範囲では
第１鉄はヘム鉄と同様に溶解性が良いため吸収率
も高い。

以下本発明を詳しく説明する。

発明の構成 本発明の構成上の特徴は、乳から分離したラク
トフエリンに第２鉄イオンをキレート結合させた
鉄結合型（鉄飽和）ラクトフエリンを有効成分と
する抗腫瘍剤にある。

課題を解決するための手段 本発明に係る抗腫瘍剤に用いられるラクトフエ
リンは、乳から公知の分離方法により得られる。
例えば、イオン交換樹脂を用いて乳からラクトフ
エリン濃度を高めた画分を分離する方法（特開昭
58−28233号）などを適用し得るが、ラクトフエ
リンのタンパク質当りの鉄結合量を高めるには、
一そう純度の高い、かつ変性のないラクトフエリ
ンを用いることが望ましく、そのためには抗ラク
トフエリンモノクローナル抗体を固定化したアフ
イニテイカラムを利用して分離する方法（川上
ら、「日本農芸化学会講演要旨集」）を適用すると
よい。また、本発明において用いる第２鉄イオン
としては塩化第２鉄、硫酸第２鉄などの食品衛生
上無害な第２鉄化合物が適している。

上記ラクトフエリンに第２鉄イオンをキレート
結合させるには、ラクトフエリンと第２鉄化合物
を、クエン酸ナトリウムもしくは重炭酸ナトリウ
ムの存在下で混合させることにより行い得る。

すなわち、ラクトフエリンをクエン酸ナトリウ
ム又は重炭酸ナトリウムの溶液に溶解し、これに
塩化第２鉄や硫酸第２鉄を添加して溶解し、常温
下に１時間程度撹拌を行つてラクトフエリンに第
２鉄イオンをキレート結合させる。上記キレート
結合におけるラクトフエリンに対する第２鉄の混
合割合は、ラクトフエリン（変性していないも
の）１分子に対して第２鉄は２分子まで結合する
ことが知られていることから、２：１のモル比で
混合することが好ましい。

次に、上述のごとくして得られた鉄結合型ラク
トフエリンは脱塩処理及び限外濾過処理を行つた
後、溶液形態のままで抗腫瘍剤として用いてもよ
いが、通常、該溶液を濃縮後凍結乾燥などにより
乾燥して粉末形態で用いる。また、本発明に係る
抗腫瘍剤は、糖衣錠やタブレツトもしくはカプセ
ル等の製剤として用いることもでき、さらには、
胃潰瘍などにより、胃壁から多量の出血がある場
合や、その他の疾病で胃が極度に弱つている場合
には、経腸投与する輸液形態の栄養剤に配合して
用いることもできる。

なお、本抗腫瘍剤の構成成分であるラクトフエ
リンは元来乳中に存在する乳タンパク質の一種で
ある糖タンパク質であるから、人体に対する悪影
響は何らみられず、その摂取量についても特に制
限的でない。しかし、実際上抗腫瘍剤として利用
する場合は、20〜200mg／日／Kg程度が適当であ
る。

本発明に係る抗腫瘍剤の有効成分である鉄結合
型ラクトフエリンにおける第２鉄イオンはラクト
フエリンにキレート結合されているので酸性下で
も遊離せず、したがつて、人体に投与した場合結
合状態のままで腸管に達し吸収され得る。

以下に実施例を示して本発明及びその効果を具
体的に説明する。

実施例 １ 本抗腫瘍剤の有効成分である鉄結合型（鉄飽
和）ラクトフエリンの調製： 抗ウシラクトフエリンモノクローナル抗体を固
定化したアフイニテイカラムに生脱脂乳100Kgを
通液して、ラクトフエリン12gを得た。

ついで、上記ラクトフエリンを0.015モルのク
エン酸ナトリウム溶液1200mlに溶解した後これに
塩化２鉄120mgを添加、溶解した。得られた混合
溶液を室温下に１時間撹拌を行つた後、脱塩し、
限外濾過濃縮後、凍結乾燥して目的の鉄結合型ラ
クトフエリン11.8gを得た。ラクトフエリン1g当
り1.4mgの鉄が含まれていた。

実施例 ２ 本例は、本発明による抗腫瘍剤の下記投与試験
による腫瘍抑制効果を示したものである。

試験方法 BACB／ｃのマウス雌（DW）10匹から成る試
験区を用い、各マウスに上記鉄結合型ラクトフエ
リンを１日当り20mg／Kg１週間並びに２週間の期
間標準飼料CE−７と共にそれぞれ投与した後、
がん細胞MethA（吉富製薬k.k）１×10⁶／０／１
ml皮下接種を行い、更に１週間づつ上記ラクトフ
エリンを投与した後、上記がん細胞の接種による
腫瘍の大きさ（長径×短径）を測定した。

なお、対照として上記鉄結合型ラクトフエリン
を投与することなく標準飼料CE−７のみを与え
ることを除いては上記と同様の手順で処置して腫
瘍の大きさを測定した。

試験結果 本発明による鉄結合型ラクトフエリンを投与し
た試験区のマウスの平均サイズは事前に１週間投
与した区では20mm²であり、２週間投与した区では
５mm²であつた。

これに対し、対照区の平均サイズは、１週間飼
料のみを与えた区では31mm²であり、２週間飼料の
みを与えた区では35mm²であつた。

上記試験結果から、本発明による鉄結合型ラク
トフエリンを投与することによる抗腫瘍活性が認
められる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 乳から分離したラクトフエリンに第２鉄イオ
   ンをキレート結合させて成る鉄結合型ラクトフエ
   リンを有効成分とする抗腫瘍剤。 ２ ラクトフエリン１分子当り、１〜２分子の鉄
   をキレート結合させている特許請求の範囲第１項
   記載の抗腫瘍剤。 ３ 経口投与に適した糖衣錠、タブレツトもしく
   はカプセルの形態にした特許請求の範囲第１項記
   載の抗腫瘍剤。 ４ 輸液中に配合して経腸投与に適した形態にし
   た特許請求の範囲第１項記載の抗腫瘍剤。 ５ 飲料もしくはゼリー形態にした特許請求の範
   囲第１項記載の抗腫瘍剤。