JPH0570792B2

JPH0570792B2 -

Info

Publication number: JPH0570792B2
Application number: JP30975486A
Authority: JP
Inventors: Makoto Hara; Shu Sato
Original assignee: Fuji Photo Film Co Ltd
Current assignee: Fujifilm Holdings Corp
Priority date: 1986-12-27
Filing date: 1986-12-27
Publication date: 1993-10-05
Also published as: US4939667A; JPS63167290A

Description

【発明の詳細な説明】［発明の分野］本発明は、オートラジオグラフ解析のための信
号処理方法に関するものである。

［発明の背景］支持媒体上において少なくとも一次元的方向に
分布して分布列を形成している放射性標識物質の
位置情報を得るための方法としてオートラジオグ
ラフイーが知られている。

たとえば、蛋白質、核酸などのような生物体由
来の高分子物質に放射性標識を付与し、その放射
性標識高分子物質、その誘導体、あるいはその分
解物またはその合成物などをゲル電気泳動などの
分離操作にかけてゲル状支持媒体において分離展
開し、そのゲル状支持媒体と高感度Ｘ線フイルム
とを一定時間重ね合わせることにより、該フイル
ムを感光させ、その感光部位から得られる該ゲル
状支持媒体上における放射性標識物質の位置情報
を基にして、その高分子物質の分離、同定、ある
いは高分子物質の分子量、特性の評価などを行な
う方法も開発され、実際に利用されている。

特に近年においては、オートラジオグラフイー
は、DNA，RNAなどの核酸の塩基配列決定に有
効に利用されている。また、サザン・ブロツテイ
ング、ノーザン・ブロツテイング、コロニー・ハ
イブリダイゼーシヨンなどハリブリダイゼーシヨ
ン法を利用する遺伝子のスクリーニングにおいて
も不可欠の手段となつている。

本出願人は、オートラジオグラフイーにおいて
上記放射線フイルムを用いる従来の放射線写真法
の代りに、蓄積性蛍光体シートを用いる放射線像
変換方法を利用する方法について既に特許出願し
ている（特開昭59−83057号、特開昭60−10174
号、特開昭60−66998号）。ここで、蓄積性蛍光体
シートは輝尽性蛍光体からなるものであり、放射
線エネルギーを該蛍光体シートの輝尽性蛍光体に
吸収させたのち、可視乃至赤外領域の電磁波（励
起光）で励起することにより、放射線エネルギー
を蛍光として放出させることができるものであ
る。この方法によれば、露光時間を大幅に短縮化
することができ、また従来より問題となつていた
化学カブリ等が発生することがない。さらに、放
射性標識物質のオートラジオグラフは、一旦放射
線エネルギーとして蛍光体シートに蓄積されたの
ち輝尽光として光電的に読み出されるから、直接
にデジタル信号（デジタル画像データ）として得
たのち適当な記録媒体に保存することができる。

従来より、オートラジオグラフの解析は、可視
化されたオートラジオグラフについて放射性標識
物質の分離展開位置（バンド）を視覚的に判断す
ることにより行なわれており、これにより放射性
標識が付与された特定物質についての位置情報
（およびそれに基づいた各種の情報、すなわち高
分子物質の同定、その分子量、特性の評価など）
の知見が得られている。たとえば、DNA，RNA
などの核酸の塩基配列は、放射性標識が付与され
た核酸の塩基特異的断片物の混合物のバンドの位
置を目視により相互に比較することにより決定さ
れている。よつて、オートラジオグラフの解析に
は多大な時間と労力が費されている。

また、人間の目に依存しているため、オートラ
ジオグラフを解析して得られる位置情報が解析者
によつて異なるなど情報の精度には限界がある。

そこで、本出願人は、上記オートラジオグラフ
をデジタル信号として得た後このデジタル信号に
適当な信号処理を施すことにより、放射性標識物
質の位置情報を記号および／または数値として自
動的に得る方法についても既に特許出願している
（特開昭59−126527号、特開昭60−233557号、特
願昭60−226091号、（特開昭62−85861号）、特願
昭60−226092号（特開昭62−85862号）等）。オー
トラジオグラフに対応するデジタル信号は、従来
の放射線フイルムを利用する場合には一旦オート
ラジオグラフを該フイルム上に可視画像化したの
ち、反射光または透過光を利用して光電的に読み
取ることにより得られる。また、蓄積性蛍光体シ
ートを用いる場合には、オートラジオグラフが蓄
積記録された蛍光体シートを直接に読み出すこと
により得られる。

実際に、放射性標識物質を電気泳動法などによ
り支持媒体上に分離展開させて得られるパターン
のオートラジオグラフには種々のノイズが含まれ
ており、デジタル信号処理による自動解析を行な
う場合のみならず、可視画像化して視覚的判断を
行なう場合にもそのオートラジオグラフを一旦デ
ジタル画像データとして得たのち階調処理、拡大
処理などの画像処理を施すことが望まれている。

通常、放射線フイルムもしくは蓄積性蛍光体シ
ートから得られる画像データは、分離展開パター
ンだけではなくフイルムもしくは蛍光体シート全
面についての画像情報を含んでおり、画像領域
（パターン領域）以外の余分な部分のデジタルデ
ータを含んでいる。従つて、上記可視画像化のた
めの画像処理および自動解析のための信号処理に
おいては、これらの処理の質的向上および処理効
率の向上を図るために、まず得られたデジタル画
像データから画像領域に対応する画像データのみ
を検出し、信号処理にかけることが望まれる。

［発明の要旨］本発明者は、放射性標識物質の一次元的もしく
は二次元的な位置情報を有するオートラジオグラ
フを解析するに際して、分離展開パターンのオー
トラジオグラフを包含するデジタル画像データを
好適に信号処理することにより、簡易でかつ精度
の高いオートラジオグラフ解析を実現した。

すなわち、本発明は、放射性標識物質が支持媒
体上に一次元的方向に分離展開されて形成された
分離展開パターンのオートラジオグラフを包含す
るデジタル画像データについてデジタル信号処理
を行なうことにより、放射性標識物質の位置情報
を記号および／または数値として得ることからな
るオートラジオグラフ解析のための信号処理方法
において、［］１）デジタル画像データを、分離展開
方向に垂直な方向に沿つて少なくとも二つの
ブロツクに分割する工程、２）各ブロツクについて、分離展開方向に沿
つて画像データを加算して、分離展開方向に
垂直な方向に沿つた位置と信号のレベルとか
らなる一次元波形を得る工程、３）ブロツクごとに、その一次元波形に基づ
いて分離展開パターン領域の境界検出する工
程、および４）各ブロツクにおける分離展開パターン領
域の境界を補間して、デジタル画像データ上
で全体に渡る分離展開パターン領域の境界を
決定する工程、を含むことを特徴とするオートラジオグラフ解析
のための信号処理方法；および［］１）デジタル画像データを、分離展開
方向に垂直な方向に沿つて少なくとも二つの
ブロツクに分割する工程、２）各ブロツクについて、分離展開方向に沿
つて画像データを加算して、分離展開方向に
垂直な方向に沿つた位置と信号のレベルとか
らなる一次元波形を得る工程、３）ブロツクごとに、その一次元波形に基づ
いて分離展開パターン領域の境界検出する工
程、４）ブロツクごとに、その一次元波形に基づ
いて各分離展開列の境界を検出する工程、および５）各ブロツクにおける分離展開パターン領
域の境界をおよび分離展開列の境界をそれぞ
れ補間して、デジタル画像データ上で全体に
渡る各分離展開列の境界を決定する工程、を含むことを特徴とするオートラジオグラフ解析
のための信号処理方法；を提供するものである。

なお、本発明において〓位置情報〓とは、試料
中における放射性標識物質もしくはその集合体の
位置を中心とする各種の情報、たとえば、支持媒
体上に存在する放射性標識物質の集合体の存在位
置、濃度、分布、およびこれらに基づく放射性標
識物質の同定、試料の同定などからなる情報の一
つもしくは任意の組合せとして得られる各種の情
報を意味する。

本発明によれば、簡易かつ高精度で、分離展開
パターンおよびそれ以外の領域に渡つてオートラ
ジオグラフの画像情報を有するデジタル画像デー
タから、パターン領域の画像データのみを抽出す
ること（いわゆる〓画像領域の切出し〓）ができ
る。さらに、パターンが複数の分離展開列からな
る場合には分離展開列ごとに画像データを抽出す
ることができる。

また、本発明によれば、分離展開パターンおよ
び分離展開列が曲がつていたり傾いていたりして
も、正確にその領域に対応する画像データを抽出
することができる。

従つて、以降のオートラジオグラフ解析をこの
抽出された画像データに基づいて行ないうるか
ら、解析に適した画像を得るための画像処理ある
いは自動解析のための信号処理を精度高くかつ効
率良く実施することが可能となる。

［発明の構成］本発明において用いられる試料としては、たと
えば放射性標識を有する蛋白質、核酸、それらの
誘導体、それらの分解物、合成物のような生物体
由来の高分子物質を挙げることができる。

その代表的な例として、放射性標識が付与され
たDNA，RNA等の核酸の塩基特異的断片物の混
合物が挙げられる。ここで、核酸の断片物とは長
鎖状の分子の一部分を意味する。たとえば、塩基
特異的DNA断片物混合物の一種である塩基特異
的DNA切断分解物混合物は、マキサム・ギルバ
ート法に従つて、放射性標識が付与されたDNA
を塩基特異的に切断分解することにより得られ
る。また、塩基特異的DNA合成物混合物はサン
ガー・クールソン法に従つて、DNAをテンプレ
ート（鋳型）として、放射性標識が付与されたデ
オキシヌクレオシドトリフオスフエートとDNA
合成酵素とを用いて合成することにより得られ
る。さらに、塩基特異的RNA断片物の混合物も
同様の方法により、切断分解物混合物または合成
物混合物として得ることができる。なお、DNA
はその構成単位としてアデニン、グアニン、チミ
ン、シトシンの四種類の塩基からなるが、一方
RNAはアデニン、グアニン、ウラシル、シトシ
ンの四種類の塩基からなる。

放射性標識は、これらの物質に適当な方法で
³²P，¹⁴C，³⁵S，³H，¹²⁵Iなどの放射性同位元素を保
持させることによつて付与される。

試料である放射性標識物質はゲル状支持媒体な
ど公知の各種の支持媒体を用いて、電気泳動法、
薄層クロマトグラフイー、カラムクロマトグラフ
イー、ペーパークロマトグラフイーなど種々の分
離展開方法により支持媒体上に分離展開される。

次に、放射性標識物質が分離展開された支持媒
体について、従来の写真感光材料を用いる放射線
写真法により、あるいは蓄積性蛍光体シートを用
いる放射線像変換方法によりそのオートラジオグ
ラフが得られ、次いで適当な読取り（読出し）系
を介して放射性標識物質のオートラジオグラフを
包含するデジタル画像データで得られる。

前者の放射線写真法を利用する場合には、まず
支持媒体とＸ線フイルム等の写真感光材料とを低
温もしくは常温で長時間（数時間〜数十時間）重
ね合わせて放射線フイルムを感光させたのち、現
像して放射性標識物質のオートラジオグラフを放
射線フイルム上に可視画像化する。次いで、画像
読取装置を用いて放射線フイルム上に可視化され
たオートラジオグラフを読み取る。たとえば、放
射線フイルム全面に亘つて光ビームを照射してそ
の透過光または反射光を光電的に検出することに
より、オートラジオグラフは電気信号として得ら
れる。さらに、この電気信号をＡ／Ｄ変換するこ
とにより、オートラジオグラフを包含するデジタ
ル画像データを得ることができる。

後者の放射線像変換方法を利用する場合には、
まず、支持媒体と蓄積性蛍光体シートとを常温で
短時間（数秒〜数十分間）重ね合わせて蛍光体シ
ートに放射性標識物質から放出される放射線エネ
ルギーを蓄積させることにより、そのオートラジ
オグラフを蛍光体シートに一種の潜像として記録
する。ここで、蓄積性蛍光体シートは、たとえば
プラスチツクフイルムからなる支持体、二価ユー
ロピウム賦活弗化臭化バリウム（BaFBr：Eu²⁺）
等の輝尽性蛍光体からなる蛍光体層、および透明
な保護膜がこの順に積層されたものである。蓄積
性蛍光体シートに含有されている輝尽性蛍光体
は、Ｘ線等の放射線が照射されるとその放射線エ
ネルギーを吸収して蓄積し、そののち可視乃至赤
外領域の光で励起すると蓄積していた放射線エネ
ルギーを輝尽光として放出するという特性を有す
る。

次いで、読出装置を用いて蓄積性蛍光体シート
に蓄積記録されたオートラジオグラフを読み出
す。具体的には、たとえば蛍光体シートを全面に
亘つてレーザー光で走査して放射線エネルギーを
輝尽光として放出させ、この輝尽光を光電的に検
出することにより、放射性標識物質のオートラジ
オグラフは可視画像化することなく直接に電気信
号として得られる。さらに、この電気信号をＡ／
Ｄ変換することにより、オートラジオグラフを包
含するデジタル画像データを得ることができる。

上述のオートラジオグラフ測定操作およびオー
トラジオグラフを包含するデジタル画像データを
得る方法の詳細については、前記特開昭59−
83057号、特開昭59−126527号、特開昭59−
126278号等の各公報に記載されている。

なお、上記においては、支持媒体上に分離展開
された放射性標識物質のオートラジオグラフを包
含するデジタル画像データを得る方法として、従
来の放射線写真法および放射線像変換方法を利用
する方法について述べたが、これらの方法に限定
されるものではなく、それ以外の如何なる方法に
より得られたデジタル画像データであつても放射
性標識物質のオートラジオグラフを包含するもの
である限り、本発明の信号処理方法を適用するこ
とが可能である。

得られたデジタル画像データは、放射線フイル
ム（または蛍光体シート）に固定された座標系で
表わされた座標（ｘ，ｙ）とその座標における信
号のレベル（ｚ）とからなるデジタル信号D_xyの
集合であり、一つの信号は一つの画素に対応して
いる。信号のレベルはその座標における画像濃
度、すなわち放射性標識物質の量を表わしてい
る。従つて、デジタル画像データは放射性標識物
質の二次元的な位置情報を有している。

このようにして得られた支持媒体上の放射性標
識物質のオートラジオグラフを包含するデジタル
画像データには、以下に述べるような本発明の方
法により信号処理が施されて、オートラジオグラ
フの解析に付される。

本発明の信号処理方法の実施の態様を、次の四
種類の放射性標識が付与された塩基特異的DNA
断片物の組合せからなる二組の試料が電気泳動に
より支持媒体上に形成された泳動列（分離展開）
からなる泳動パターンを例にとつて説明する。

１）グアニン特異的DNA断片物２）アデニン(A)特異的DNA断片物３）チミン(T)特異的DNA断片物４）シトシン(C)特異的DNA断片物ここで、各塩基特異的DNA断片物は、塩基特
異的に切断分解もしくは合成された、すなわち末
端の塩基を同じくする種々の長さのDNA断片物
からなる。

これらの塩基特異的DNA断片物のオートラジ
オグラフを包含するデジタル画像データは、信号
処理回路において一旦メモリ（バツフアーメモ
リ、または磁気デイスク等の不揮発性メモリ）に
記憶される。

第１図は、得られたデジタル画像データをその
まま画像化した場合のオートラジオグラフ像の例
であり、二つの泳動パターンを含んでいる。各泳
動パターンは上記試料に対応した四つの泳動列
（レーン）からなる。

まず第一に、第１図に示した画像情報を有する
デジタル画像データを泳動方向に垂直な方向に沿
つて二つ以上のブロツクに分割する。ここで、泳
動方向とは、実際に泳動された厳密な方向を意味
するものではなく、泳動しようとした方向であつ
て支持媒体（すなわち放射線フイルムもしくは蓄
積性蛍光体シート）の長軸方向（ｙ方向）を意味
する。

画像データの分割によつて得られるブロツクの
数はパターンの形状、分離されたバンドの数、デ
ータ量などによつても異なるが、通常好ましくは
５〜６個である。画像データを泳動方向に垂直な
方向（ｘ方向）に複数のブロツクに分けて以下の
演算処理を行なうことにより、泳動パターンおよ
び／またはレーンが曲がつていたり傾いていたり
しても、精確にパターンの切出し、更にはレーン
の切出しを行なうことができる。

第１図においては、画像データはａ〜ｆの六個
のブロツクに分割される。

第二に、各ブロツクについて、ｙ方向に沿つて
画像データを加算することにより、ｘ方向に沿つ
た位置と信号のレベルとからなる一次元波形を作
成する。

第２図に、この一次元波形を作成する操作の例
を概略的に示す。

たとえば、画像データを第１図のａブロツクに
おけるα−β線に沿つて抽出すると、第２図の上
段に示すようなｘ方向に沿つた位置と信号のレベ
ル(z)とからなる一次元波形が得られる。この一次
元波形はα−β線に沿つた断面像を表わしてい
る。ａブロツクに含まれる全ての画像データをこ
のような一次元波形の形で抽出し、ｙ方向に足し
合わせると、第２図の最下段に示すような統合さ
れた一次元波形（これを〓射影〓と呼ぶ）が得ら
れる。

すなわち、四種類の塩基特異的DNA断片物の
組合せが互いに排他的であるために、一つ一つの
一次元波形（断面像）には八個のレーンの一部、
すなわち一乃至二個のレーンの断面像しか現われ
ないが、統合した一次元波形（射影）には八個の
レーン全部の断面像が明確に現われる。

画像データの加算は、上記のように全ての画素
に対応する信号を足し合わせてもよいし、あるい
は、加算処理を簡素化する目的で一部の画素に対
応する信号を足し合わせてもよい。全画像データ
の加算は、たとえばｙ方向に約2000個の画素が並
んでいる場合には五乃至六分割によつてブロツク
ごとに300〜400個の信号をｙ方向に足し合わせる
ことになる。また、画像データの部分的な加算は
たとえば、ｙ方向に沿つて一定間隔で信号を抽出
し、足し合わせることにより行なうことができ、
全画像データの10〜50％の範囲まで減らすことが
できる。

また、画像データを足し合わせて射影を求める
に先立つて、各一次元波形（第２図α−β）に微
分処理などの適当な演算処理を施してもよい。た
とえば微分処理を施した場合には、各レーンの断
面像のエツジはプラスのピークとマイナスのピー
クとなつて現われ、明確化することができる。

第三に、得られた一次元波形（射影）に基づい
て泳動パターン領域の境界を検出する。

泳動パターン領域の境界は、たとえば、一次元
波形の信号レベル(z)の平均値を算出した後、この
平均値に適当な係数に乗じて閾値（Za）を定め、
一次元波形がこの閾値を横切る点を求めることに
より検出することができる。

第３図は、一次元波形および該波形上で検出さ
れた泳動パターン領域の境界の例を示す図であ
る。

第３図において、矢印（↑）１，５，６および
１０はそれぞれ泳動パターン領域の境界を表わし
ている。すなわち、矢印１と５に挟まれた領域、
および矢印６と１０に挟まれた領域がそれぞれ泳
動パターン領域である。

第四にさらに、一次元波形（射影）に基づいて
各レーンの境界を検出する。

レーンの境界は、すでに泳動パターンの領域が
求められているから、該泳動パターン領域内で信
号レベルが極小となる点を求めることにより検出
することができる。極小点は信号レベルの差分の
符号が反転する点を探せばよい。

第４図は、一次元波形および該波形上で検出さ
れたレーンの境界の例を示す図である。

第４図において、矢印（↑）２，３，４，７，
８および９がそれぞれ、上記操作によつて検出さ
れたレーンの境界を表わしている。すなわち、左
側の泳動パターンにおける四個のレーンの境界は
矢印１〜５で表わされ、右側の泳動パターンにお
ける四個のレーンの境界は矢印６〜１０で表わさ
れている。

このようにして、ａブロツクにおける二個の泳
動パターン領域の境界および八個のレーンの境界
を全て検出することができる。同様にして、残り
のｂ〜ｆの五個のブロツクについても泳動パター
ン領域の境界、更には各レーンの境界を検出す
る。

なお、射影を求める前に上記のように微分処理
を施した場合には、各レーンの境界はプラス側の
ピークとマイナス側のピークを交互に見つけるこ
とにより検出することができる。

第五に、ブロツクごとに検出された泳動パター
ン領域の境界およびレーンの境界をそれぞれ補間
して、全体に渡るパターンおよびレーンの境界を
決定する。

たとえば、第４図において矢印１〜１０で表わ
された泳動パターンおよびレーンの境界点を、第
５図に示すようにａブロツクをｘ方向に沿つて二
分する中央線上に固定する。

第５図は、泳動パターンおよびレーン全体の境
界を決定する操作の例を概略的に示す図である。

同様にして、残りのブロツクについてもその中
央線上に検出済の各境界点を定め、各ブロツク間
で対応する境界点を順に連結することにより、二
個の泳動パターンを境界線１，５および６，１
０；並びに八個のレーンの境界線１，２，３，
４，５および６，７，８，９，１０が得られる。

たとえば、泳動パターン領域のみを切り出す場
合には、境界線１と５および６と１０でそれぞれ
挟まれた領域に対応する画像データを抽出すれば
よい。また、レーンごとに切り出す場合には、た
とえば左側のパターンの左端のレーンであれば境
界線１と２で挟まれた領域に対応する画像データ
を抽出すればよい。

なお、泳動パターンのオートラジオグラフを包
含するデジタル画像データについて、幅方向（ｘ
方向）のみならず長さ方向（ｙ方向）にも切り出
すことが可能であり、たとえば上述した操作と同
様の操作を長さ方向に対して行なうことにより、
あるいは長さ方向にはパターンのゆらぎは少ない
から上述の操作を更に簡便化した操作を行なうこ
とにより、長さ方向にも画像領域のみを切り出す
ことができる。

上述の信号処理により決定された泳動パターン
領域および各レーンの領域に対応するデジタル画
像データは、信号処理回路から出力されたのち直
接的に、もしくは必要により磁気デイスクや磁気
テープなどの記憶保存手段を介して別の信号処理
回路に伝送される。

得られた画像領域に対応するデジタル画像デー
タには、階調処理、空間周波数処理、拡大処理、
縮小処理、加算平均処理など公知の各種の画像処
理を効率良く施すことができ、これにより従来よ
りも画質の向上した解析に適した画像を得ること
ができる。

また、信号処理によりオートラジオグラフを自
動的に解析する場合には、泳動パターンあるいは
レーンに対応した画像データにそれぞれ個別に信
号処理を施すことにより、泳動パターンごとにあ
るいはレーンごとに好適な信号処理を行なうこと
ができ、処理効率が向上するのみならず塩基配列
情報など得られる位置情報の精度を高めることが
できる。

上記においては、二個のパターンと八個のレー
ンからなる例を挙げて説明したが本発明はこの態
様に限定されるものではなく、パターンは一個で
あつてもあるいは三個以上であつてもよく、また
レーンの数はパターン当り一個でもあるいはそれ
以上であつてもよい。また、複数個のレーンから
なる場合に、試料である塩基特異的DNA断片物
の組合せは上記の排他的な組合せに限定されるも
のではない。さらに、本発明は、試料が塩基特異
的DNA断片物に限定されるものではなく、種々
の分離展開手段により支持媒体上で一次元的方向
に分離展開された放射性標識物質の分離展開パタ
ーンに適用することができる。特に、蛋白質の微
量分析および遺伝子のスクリーニング等に好適に
利用することができる。

【図面の簡単な説明】

第１図は、泳動パターンのオートラジオグラフ
を包含するデジタル画像データに基づいた画像の
例を示す図である。第２図は、一つのブロツクの
射影を求める操作を概略的に示す図である。第３
図は、一次元波形および泳動パターン領域の境界
の例を示す図である。第４図は、一次元波形およ
びレーンの境界の例を示す図である。第５図は、
泳動パターンおよびレーン全体の境界を決定する
操作を概略的に示す図である。

Claims

【特許請求の範囲】１放射性標識物質が支持媒体上に一次元的方向
に分離展開されて形成された分離展開パターンの
オートラジオグラフを包含するデジタル画像デー
タについてデジタル信号処理を行なうことによ
り、放射性標識物質の位置情報を記号および／ま
たは数値として得ることからなるオートラジオグ
ラフ解析のための信号処理方法において、１）デジタル画像データを、分離展開方向に垂
直な方向に沿つて少なくとも二つのブロツクに
分割する工程、２）各ブロツクについて、分離展開方向に沿つ
て画像データを加算して、分離展開方向に垂直
な方向に沿つた位置と信号のレベルとからなる
一次元波形を得る工程、３）ブロツクごとに、その一次元波形に基づい
て分離展開パターン領域の境界を検出する工
程、および４）各ブロツクにおける分離展開パターン領域
の境界を補間して、デジタル画像データ上で全
体に渡る分離展開パターン領域の境界を決定す
る工程、を含むことを特徴とするオートラジオグラフ解析
のための信号処理方法。２上記第二工程において、分離展開方向に沿つ
て全画像データを加算することを特徴とする特許
請求の範囲第１項記載の信号処理方法。３上記第二工程において、分離展開方向に沿つ
て一定間隔で画像データを抽出し加算することを
特徴とする特許請求の範囲第１項記載の信号処理
方法。４上記第三工程において、一次元波形の平均信
号レベルを算出した後この平均信号レベルに基づ
いて閾値を決定し、一次元波形上で閾値をとる点
をパターン領域の境界とすることを特徴とする特
許請求の範囲第１項記載の信号処理方法。５上記第四工程において、各ブロツクにおける
分離展開パターン領域の境界を該ブロツクの分離
展開方向に垂直な方向に沿つた中央線上に定め、
各ブロツク間で対応する境界点を順に結ぶことに
より、分離展開パターン領域全体の境界を決定す
ることを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の
信号処理方法。６上記オートラジオグラフを包含するデジタル
画像データが、支持媒体と輝尽性蛍光体を含有す
る蓄積性蛍光体シートとを重ね合わせて、支持媒
体上の放射性標識物質のオートラジオグラフを該
蛍光体シートに蓄積記録したのち、該蛍光体シー
トに励起光を照射して該オートラジオグラフを輝
尽光として光電的に読み出すことにより得られた
ものであることを特徴とする特許請求の範囲第１
項記載の信号処理方法。７上記オートラジオグラフを包含するデジタル
画像データが、支持媒体と写真感光材料とを重ね
合わせて、支持媒体上の放射性標識物質のオート
ラジオグラフを該感光材料に感光記録したのち、
該感光材料上に可視化されたオートラジオグラフ
を光電的に読み取ることにより得られたものであ
ることを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の
信号処理方法。８上記放射性標識物質が核酸、その誘導体、も
しくはそれらの分解物またはそれらの合成物であ
り、信号処理により得られる位置情報がそれらの
塩基配列情報であることを特徴とする特許請求の
範囲第１項記載の信号処理方法。９放射性標識物質が支持媒体上に一次元的方向
に分離展開されて形成された分離展開パターンの
オートラジオグラフを包含するデジタル画像デー
タについてデジタル信号処理を行なうことによ
り、放射性標識物質の位置情報を記号および／ま
たは数値として得ることからなるオートラジオグ
ラフ解析のための信号処理方法において、１）デジタル画像データを、分離展開方向に垂
直な方向に沿つて少なくとも二つのブロツクに
分割する工程、２）各ブロツクについて、分離展開方向に沿つ
て画像データを加算して、分離展開方向に垂直
な方向に沿つた位置と信号のレベルとからなる
一次元波形を得る工程、３）ブロツクごとに、その一次元波形に基づい
て分離展開パターン領域の境界を検出する工
程、４）ブロツクごとに、その一次元波形に基づい
て各分離展開列の境界を検出する工程、および５）各ブロツクにおける分離展開パターン領域
の境界および分離展開列の境界をそれぞれ補間
して、デジタル画像データ上で全体に渡る各分
離展開列の境界を決定する工程、を含むことを特徴とするオートラジオグラフ解析
のための信号処理方法。１０上記第二工程において、分離展開方向に沿
つて全画像データを加算することを特徴とする特
許請求の範囲第９項記載の信号処理方法。１１上記第二工程において、分離展開方向に沿
つて一定間隔で画像データを抽出し加算すること
を特徴とする特許請求の範囲第９項記載の信号処
理方法。１２上記第三工程において、一次元波形の平均
信号レベルを算出した後この平均信号レベルに基
づいて閾値を決定し、一次元波形上で閾値をとる
点をパターン領域の境界とすることを特徴とする
特許請求の範囲第９項記載の信号処理方法。１３上記第四工程において、一次元波形上のパ
ターン領域内で信号レベルが極小となる点を分離
展開列の境界とすることを特徴とする特許請求の
範囲第９項記載の信号処理方法。１４上記第五工程において、各ブロツクにおけ
る分離展開パターン領域および分離展開列の境界
を該ブロツクの分離展開方向に垂直な方向に沿つ
た中央線上に定め、各ブロツク間で対応する境界
点を順に結ぶことにより、各分離展開列全体の境
界を決定することを特徴とする特許請求の範囲第
９項記載の信号処理方法。１５上記オートラジオグラフを包含するデジタ
ル画像データが、支持媒体と輝尽性蛍光体を含有
する蓄積性蛍光体シートとを重ね合わせて、支持
媒体上の放射性標識物質のオートラジオグラフを
該蛍光体シートに蓄積記録したのち、該蛍光体シ
ートに励起光を照射して該オートラジオグラフを
輝尽光として光電的に読み出すことにより得られ
たものであることを特徴とする特許請求の範囲第
９項記載の信号処理方法。１６上記オートラジオグラフを包含するデジタ
ル画像データが、支持媒体と写真感光材料とを重
ね合わせて、支持媒体上の放射性標識物質のオー
トラジオグラフを該感光材料に感光記録したの
ち、該感光材料上に可視化されたオートラジオグ
ラフを光電的に読み取ることにより得られたもの
であることを特徴とする特許請求の範囲第９項記
載の信号処理方法。１７上記放射性標識物質が核酸、その誘導体、
もしくはそれらの分解物またはそれらの合成物で
あり、信号処理により得られる位置情報がそれら
の塩基配列情報であることを特徴とする特許請求
の範囲第９項記載の信号処理方法。