JPS63167290A - オ−トラジオグラフ解析のための信号処理方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［発明の分野］ 本発明は、オートラジオグラフ解析のための信号処理方
法に関するものである。

［発明の背景］ 支持媒体上において少なくとも一次元的方向に分布して
分布列を形成している放射性標識物質の位置情報を得る
ための方法としてオートラジオグラフィーか既に知られ
ている。

たとえば、蛋白質、核酸などのような生物体由来の高分
子物質に放射性標識を付与し、その放射性標識高分子物
質、その誘導体、あるいはその分解物またはその合成物
などをゲル電気泳動などの分離操作にかけてゲル状支持
媒体において分離展開し、そのゲル状支持媒体と高感度
Ｘ線フィルムとを一定時間重ね合わせることにより、該
フィルムを感光させ、その感光部位から得られる該ゲル
状支持媒体上における放射性標識物質の位置情報を基に
して、その高分子物質の分離、同定、あるいは高分子物
質の分子量、特性の評価などを行なう方法も開発され、
実際に利用されている。

特に近年においては、オートラジオグラフィーは、ＤＮ
Ａ、ＲＮＡなとの核酸の塩基配列決定に有効に利用され
ている。また、サザン・プロッティング、ノーザン・プ
ロッティング、コロニー・ハイブリダイゼーションなど
ハイブリダイゼーション法を利用する遺伝子のスクリー
ニングにおいても不可欠の手段となっている。

本出願人は、オートラジオグラフィーにおいて上記放射
線フィルムを用いる従来の放射線写真法の代りに、蓄積
性蛍光体シートを用いる放射線像変換方法を利用する方
法について既に特許出願している（特開昭５９−８３０
５７号、特開昭６０−１０１７４号、特開昭６０−６６
９９８号）。

ここで、蓄積性蛍光体シートは輝尽性蛍光体からなるも
のであり、放射線エネルギーを該蛍光体シートの輝尽性
蛍光体に吸収させたのち、可視乃至赤外領域の電磁波（
励起光）で励起することにより、放射線エネルギーを蛍
光として放出させることができるものである。この方法
によれば、露光時間を大幅に短縮化することかでき、ま
た従来より問題となっていた化学カブリ等か発生するこ
とかない。さらに、放射性標識′ｊＩＩＩ質のオートラ
ジオグラフは、−置数射線エネルギーとして蛍光体シー
トに蓄積されたのち輝尽光として光電的に読み出される
から、直接にデジタル信号（デジタル画像データ）とし
て得たのち適当な記録媒体に保存することがてきる。

従来より、オートラジオグラフの解析は、可視化された
オートラジオグラフについて放射性標識物質の分１ｌｌ
Ｉ展開位置（バンド）を視覚的に判断することにより行
なわれており、これにより放射性標識が付与された特定
物質についての位置情報（およびそれに基づいた各種の
情報、すなわち高分子物質の同定、その分子量、特性の
評価など）の知見が得られている。たとえば、ＤＮＡ、
ＲＮＡなとの核酸の塩基配列は、放射性標識が付与され
た核酸の塩基特異的断片物の混合物のハントの位置を目
視により相互に比較することにより決定されている。よ
って、オートラジオグラフの解析には多大な時間と労力
が費されている。

また、人間の目に依存しているため、オートラジオグラ
フを解析して得られる位置情報が解析者によって異なる
など情報の精度には限界がある。

そこて、本出願人は、上記オートラジオグラフをデジタ
ル信号として得た後このデジタル信号に適当な信号処理
を施すことにより、放射性標識物質の位置情報を記号お
よび／または数値として自動的に得る方法についても既
に特許出願している（特開昭５９−１２６５２７号、特
開昭６０−２３３５５７号、特願昭６０−２２６０９１
号、特願昭６０−２２６０９２号等）。オートラジオグ
ラフに対応するデジタル信号は、従来の放射線フィルム
を利用する場合には−Ｈオートラジオグラフを該フィル
ム上に可視画像化したのち、反射光または透過光を利用
して光電的に読み取ることにより得られる。また、蓄積
性蛍光体シートを用いる場合には、オートラジオグラフ
が蓄積記録された蛍光体シートを直接に読み出すことに
より得られる。

実際に、放射性標識物質を電気泳動法などにより支持媒
体上に分離展開させて得られたパターンのオートラジオ
グラフには種々のノイズか含まれており、デジタル信号
処理による自動解析を行なう場合のみならず、可視画像
化して視覚的判断を行なう場合にもそのオートラジオグ
ラフを一旦デジタル画像データとして得たのち階調処理
、拡大処理などの画像処理を施すことが望まれている。

通常、放射線フィルムもしくは蓄積性蛍光体シートから
得られる画像データは、分離展開パターンだけではなく
フィルムもしくは蛍光体シート全面についての画像情報
を含んでおり、画像領域（パターン領域）以外の余分な
部分のデジタルデータな含んでいる。従って、上記可視
画像化のための画像処理および自動解析のための信号処
理においては、これらの処理の質的向上および処理効率
の向上を図るために、まず得られたデジタル画像データ
から画像領域に対応する画像データのみを検出し、信号
処理にかけることが望まれる。

［発明の要旨］ 本発明者は、放射性標識物質の一次元的もしくは二次元
的な位置情報を有するオートラジオグラフを解析するに
際して１分離展開パターンのオートラジオグラフを包含
するデジタル画像データを好適に信号処理することによ
り、簡易でかつ精度の高いオートラジオグラフ解析を実
現した。

すなわち１本発明は、放射性標識物質が支持媒体上に一
次元的方向に分離展開されて形成された分ｌｌｌ＆展開
パターンのオートラジオグラフを包含するデジタル画像
データについてデジタル信号処理を行なうことにより、
放射性標識物質の位置情報を記号および／または数値と
して得ることからなるオートラジオグラフ解析のための
信号処理方法において、 ［１１１）デジタル画像データを、分離展開方向に垂直
な方向に沿って少なくとも二つのブロックに分割する工
程、 ２）各ブロックについて、分離展開方向に沿って画像デ
ータを加算して、分離展開方向に垂直な方向に沿った位
置と信号のレベルとからなる一次元波形を得る工程、 ３）ブロックごとに、その一次元波形に基づいて分離展
開パターン領域の境界を検出する工程、および ４）各ブロックにおける分＃展開パターン領域の境界を
補間して、デジタル画像データ上で全体に渡る分＃展開
パターン領域の境界を決定する工程、 を含むことを特徴とするオートラジオグラフ解析のため
の信号処理方法：および ［ｎｌ　１）デジタル画像データを、分離展開方向に垂
直な方向に沿って少なくとも二つのブロックに分割する
工程、 ２）各ブロックについて１分離展開方向に沿って画像デ
ータを加算して、分離展開方向に垂直な方向に沿った位
置と信号のレベルとからなる一次元波形を得る工程、 ３）ブロックごとに、その一次元波形に基づいて分離展
開パターン領域の境界を検出する工程。

４）ブロックごとに、その一次元波形に基づいて各分離
展開列の境界を検出する工程、および５）各プロ・ンク
における分離展開パターン領域の境界および分離展開列
の境界をそれぞれ補間して、デジタル画像データ上で全
体に渡る各分離展開列の境界を決定する工程、 を含むことを特徴とするオートラジオグラフ解析のため
の信号処理方法： を提供するものである。

なお１本発明において「位置情報」とは、試料中におけ
る放射性標識物質もしくはその集合体の位置を中心とす
る各種の情報、たとえば、支持媒体上に存在する放射性
標識物質の集合体の存在位置、濃度、分布、およびこれ
らに基づく放射性標識物質の同定、試料の同定などから
なる情報の一つもしくは任意の組合せとして得られる各
種の情報を意味する。

本発明によれば、簡易かつ高精度で、分離展開パターン
およびそれ以外の領域に渡ってオートラジオグラフの画
像情報を有するデジタル画像データから、パターン領域
の画像データのみを抽出すること（いわゆる１画像領域
の切出し」）かできる。さらに、パターンか複数の分離
展開列からなる場合には分ｇＩ展開列ごとに画像データ
を抽出することかできる。

また、本発明によれば、分離展開パターンおよび分離展
開列か曲かっていたり傾いていたりしても、正確にその
領域に対応する画像データを抽出することができる。

従って、以降のオートラジオグラフ解析をこの抽出され
た画像データに基づいて行ないつるから、解析に適した
画像を得るための画像処理あるいは自動解析のための信
号処理を精度高くかつ効率良〈実施することか可能とな
る。

［発明の構成］ 本発明において用いられる試料としては、たとえば放射
性標識を有する蛋白質、核酸、それらの誘導体、それら
の分解物、合成物のような生物体由来の高分子物質を挙
げることができる。

その代表的な例として、放射性標識が付与されたＤＮＡ
、ＲＮＡ等の核酸の塩基特異的断片物の混合物か挙げら
れる。ここで、核酸の断片物とは長鎖状の分子の一部分
を意味する。たとえば、塩基特異的ＤＮＡ断片物混合物
の一種である塩基特異的ＤＮＡ切断分解物混合物は、マ
キサム・ギルバート法に従って、放射性標識が付与され
たＤＮＡを塩基特異的に切断分解することにより得られ
る。また、塩基特異的ＤＮＡ合成物混合物はサンガー・
クールフン法に従って、ＤＮＡをテンプレート（鋳型）
として、放射性標識か付与されたデオキシヌクレオシド
トリフオスフェートとＤＮＡ合成酵素とを用いて合成す
ることにより得られる。さらに、塩基特異的ＲＮＡ断片
物の混合物も同様の方法により、切断分解物混合物また
は合成物混合物として得ることができる。なお、ＤＮＡ
はその構成単位としてアデニン、グアニン、チミン、シ
トシンの四種類の塩基からなるが、一方ＲＮＡはアデニ
ン、グアニン、ウラシル、シトシンの四種類の塩基から
なる。

放射性標識は、これらの物質に適当な方法て３ｚｐ、＋
ａｃ、　３ｓＳ、３Ｈ，”’Ｉ　なと（Ｄ放射性同位元
素を保持させることによって付４される。

試料である放射性標識物質はゲル状支持媒体など公知の
各種の支持媒体を用いて、電気泳動法、薄層クロマトグ
ラフィー、カラムクロマトグラフィー、ペーパークロマ
トグラフィーなど種々の分離展開方法により支持媒体上
に分離展開される。

次に、放射性標識物質が分離展開された支持媒体につい
て、従来の写真感光材料を用いる放射線写真法により、
あるいは蓄積性蛍光体シートを用いる放射線像交換力法
によりそのオートラジオグラフが得られ、次いて適当な
読取り（読出し）系を介して放射性標識物質のオートラ
ジオグラフを包含するデジタル画像データが得られる。

前者の放射線写真法を利用する場合には、まず支持媒体
とＸ線フィルム等の写真感光材料とを低温もしくは常温
で長時間（数時間〜数十時間）重ね合わせて放射線フィ
ルムを感光させたのち、現像して放射性標識物質のオー
トラジオグラフを放射線フィルム上に可視画像化する。

次いで、画像読取装置を用いて放射線フィルム上に可視
化されたオートラジオグラフを読み取る。たとえば、放
射線フィルム全面に亘って光ビームを照射してその透過
光または反射光な光電的に検出することにより、オート
ラジオグラフは電気信号として得られる。さらに、この
電気信号をＡ／Ｄ変換することにより、オートラジオグ
ラフを包含するデジタル画像データを得ることができる
。

後者の放射線像変換方法を利用する場合には、まず、支
持媒体と蓄積性蛍光体シートとを常温で短時間（数秒〜
数十分間）重ね合わせて蛍光体シートに放射性標識物質
から放出される放射線エネルギーを蓄積させることによ
り、そのオートラジオグラフを蛍光体シートに一種の潜
像として記録する。ここで、蓄積性蛍光体シートは、た
とえばプラスチックフィルムからなる支持体、二価ユー
ロピウム賦活弗化臭化バリウム（ＢａＦＢｒ：Ｅ　ｕ　
”　）等の輝尽性蛍光体からなる蛍光体層、および透明
な保護膜がこの順に積層されたものである。蓄積性蛍光
体シートに含有されている輝尽性蛍光体は、Ｘ線等の放
射線か照射されるとその放射線エネルギーを吸収して蓄
積し、そののら可視乃至赤外領域の光で励起すると蓄積
していた放射線エネルギーを輝尽光として放出するとい
う特性を有する。

次いて、読出装置を用いて蓄積性蛍光体シートに蓄積記
録されたオートラジオグラフを読み出す。ＪＬ体的には
、たとえば蛍光体シートを全面に狂ってレーザー光で走
査して放射線エネルギーな輝尽光として放出させ、この
輝尽光を光電的に検出することにより、放射性標識物質
のオートラジオグラフは可視画像化することなく直接に
電気信号として得られる。さらに、この電気信号なＡ／
Ｄ変換することにより、オートラジオグラフを包含する
デジタル画像データを得ることかできる。

上述のオートラジオグラフ測定操作およびオートラジオ
グラフを包含するデジタル画像データを得る方法の詳細
については、前記特開昭５９−８３０５７号、特開昭５
９−１２６５２７号、特開昭５９−１２６２７８号等の
各公報に記載されている。

なお、上記においては、支持媒体上に分離展開された放
射性標識物質のオートラジオグラフを包含するデジタル
画像データを得る方法として、従来の放射線写真法およ
び放射線像変換方法を利用する方法について述べたが、
これらの方法に限定されるものではなく、それ以外の如
何なる方法により得られたデジタル画像データであって
も放射性標識物質のオートラジオグラフを包含するもの
である限り、本発明の信号処理方法を適用することが可
渣である。

得られたデジタル画像データは、放射線フィルム（また
は蛍光体シート）に固定された座標系で表わされた座標
（ｘ、ｙ）とその座標における信号のレベル（２）とか
らなるデジタル信号Ｄｘツの集合であり、一つの信号は
一つの画素に対応している。信号のレベルはその座標に
おける画像濃度、すなわち放射性標識物質の量を表わし
ている。従って、デジタル画像データは放射性標識物質
の二次元的な位置情報を有している。

このようにして得られた支持媒体上の放射性標識物質の
オートラジオグラフを包含するデジタル画像データには
、以下に述べるような本発明の方法により信号処理か施
されて、オートラジオグラフの解析に付される。

本発明の信号処理方法の実施の態様を、次の四種類の放
射性標識が付与された塩基特異的ＤＮＡ断片物の組合せ
からなる二組の試料が電気泳動により支持媒体上に形成
された泳動列（分離展開列）からなる泳動パターンを例
にとって説明する。

１）グアニン（Ｇ）特異的ＤＮＡ断片物２）アデニン（
Ａ）特異的ＤＮＡ断片物３）チミン（Ｔ）特異的ＤＮＡ
断片物 ４）シトシン（Ｃ）特異的ＤＮＡ断片物ここて、各塩基
特異的ＤＮＡ断片物は、塩基特異的に切断分解もしくは
合成された、すなわち末端の塩基を同じくする種々の長
さのＤＮＡ断片物からなる。

これらのｔ１１基特異的ＤＮＡ断片物のオートラジオグ
ラフを包含するデジタル画像データは、信号処理回路に
おいて一部メモリ（バッファーメモリ、または磁気ディ
スク等の不揮発性メモリ）に記憶される。

第１図は、得られたデジタル画像データをそのまま画像
化した場合のオートラジオグラフ像の例てあり、二つの
泳動パターンを含んでいる。各泳動パターンは上記試料
に対応した四つの泳動列（レーン）からなる。

まず第一に、第１図に示した画像情報を有するデジタル
画像データを泳動方向に垂直な方向に沿って二つ以上の
ブロックに分割する。ここで、泳動方向とは、実際に泳
動された厳密な方向を意味するものてはなく、泳動しよ
うとした方向であって支持媒体（すなわち放射線フィル
ムもしくは蓄積性蛍光体シート）の長袖方向（ｙ方向）
を意味する。

画像データの分割によって得られるブロックの数はパタ
ーンの形状、分離されたバンドの数、データ量などによ
っても異なるが、通常好ましくは５〜６個である。画像
データな泳動方向に垂直な方向（Ｘ方向）に複数のブロ
ックに分けて以ｆの演算処理を行なうことにより、泳動
パターンおよび／またはレーンか曲かっていたり傾いて
いたりしても、精確にパターンの切出し、更にはレーン
の切出しを行なうことかできる。

第１図においては、画像データはａ　−ｆの六個のブロ
ックに分割される。

第二に、各ブロックについて、ｙ方向に沿って画像デー
タを加算することにより、Ｘ方向に沿った位置と信号の
レベルとからなる一次元波形を作成する。

第２図に、この一次元波形を作成する操作の例を概略的
に示す。

たとえば、画像データを第１図のａブロックにおけるα
−β線に沿って抽出すると、第２図の上段に示すような
Ｘ方向に沿った位ごと信号のレベル（２）とからなる一
次元波形か得られる。この一次元波形はα−β線に沿っ
た断面像を表わしている。ａブロックに含まれる全ての
画像データをこのような一次元波形の形で抽出し、ｙ方
向に足し合わせると、第２図の最下段に示すような統合
された一次元波形（これをｒ射影」と呼、ぶ）か得られ
る。

すなわち、四種類の塩基特異的ＤＮＡ１片物の組合せが
互いに排他的であるために、一つ一つの一次元波形（Ｉ
！ＩＴ面像）には八個のレーンの一部、すなわち−乃至
二個のレーンの断面像しか現われないか、統合した一次
元波形（射影）には八個のレーン全部の断面像が明確に
現われる。

画像データの加算は、上記のように全ての画素に対応す
る信号を足し合わせてもよいし、あるいは、加算忽理を
簡素化する目的で一部の画素に対応する信号を足し合わ
せてもよい。全画像データの加算は、たとえばｙ方向に
約２０００個の画素が並んでいる場合には五乃至六分割
によってブロックごとに３００〜４００個の信号なｙ方
向に足し合わせることになる。また、画像データの部分
的な加算はたとえば、ｙ方向に沿って一定間隔で信号を
抽出し、足し合わせることにより行なうことかでき、全
画像データの１０〜５０％の範囲まで減らすことかでき
る。

また、画像データを足し合わせて射影を求めるに先立っ
て、各一次元波形（第２図α−β）に微分処理などの適
当な演算処理を施してもよい。たとえば微分処理を施し
た場合には、各レーンの断面像のエツジはプラスのピー
クとマイナスのピークとなって現われ、明確化すること
かできる。

第三に、得られた一次元波形（射影）に基づいて泳動パ
ターン領域の境界を検出する。

泳動パターン領域の境界は、たとえば、一次元波形の信
号レベル（ｚ）のモ均値を算出した後、このモ均値に適
当な係数を乗して閾値（ｚａ）を定め、一次元波形がこ
の閾値を横切る点を求めることにより検出することがで
きる。

第３図は、一次元波形および該波形上て検出された泳動
パターン領域の境界の例を示す図である。

第３図において、矢印（↑）１．５．６および１０はそ
れぞれ泳動パターン領域の境界を表わしている。すなわ
ち、矢印ｌと５に挟まれた領域、および矢印６と１０に
挟まれた領域かそれぞれ泳動パターン領域である。

第四にさらに、一次元波形（射影）に基づいて各レーン
の境界を検出する。

レーンの境界は、すてに泳動パターンの領域が求められ
ているから、該泳動パターン領域内で信号レベルか極小
となる点を求めることにより検出することかできる。極
小点は信号レベルの差分の符号が反転する点を探せばよ
い。

第４図は、一次元波形および該波形上で検出されたレー
ンの境界の例を示す図である。

第４図において、矢印（↑）２，３．４．７゜８および
９かそれぞれ、上記操作によって検出されたレーンの境
界を表わしている。すなわち、左側の泳動パターンにお
ける四個のレーンの境界は矢印１〜５で表わされ、右側
の泳動パターンにおける四個のレーンの境界は矢印６〜
１０て表わされている。

このようにして、ａブロックにおける二個の泳動パター
ン領域の境界および八個のレーンの境界を全て検出する
ことができる。同様にして、残りのｂ〜ｆの五個のブロ
ックについても泳動パターン領域の境界、更には各レー
ンの境界を検出する。

なお、射影を求める前に上記のように微分処理を施した
場合には、各レーンの境界はプラス側のピークとマイナ
ス側のピークを交互に見つけることにより検出すること
がてきる。

第五に、ブロックごとに検出された泳動パターン領域の
境界およびレーンの境界をそれぞれ補間して、全体に渡
るパターンおよびレーンの境界を決定する。

たとえば、第４図において矢印ｌ〜ｌＯて表わされた泳
動パターンおよびレーンの境界点を、第５図に示すよう
にａブロックなＸ方向に沿って二分する中央線上に固定
する。

第５図は、泳動パターンおよびレーン全体の境界を決定
する操作の例を概略的に示す図である。

同様にして、残りのブロックについてもその中央線上に
検出済の各境界点を定め、各ブロック間て対応する境界
点を順に連結することにより、二個の泳動パターンの境
界線（１）　、　（５）および（６）　、　（１０）；
並びに八個のレーンの境界線（１）（２）　、　（３）
　、　（４）　、　（５）および（６）　、　（７）　
、　（８）（９）　、　（１０）が得られる。

たとえば、泳動パターン領域のみを切り出す場合には、
境界線（１）と（５）および（６）と（ｌＯ）でそれぞ
れ挟まれた領域に対応する画像データを抽出すればよい
。また、レーンごとに切り出す場合には、たとえば左側
のパターンの左端のレーンてあれば境界線（１）と（２
）で挟まれた領域に対応する画像データを抽出すればよ
い。

なお、泳動パターンのオートラジオグラフを包含するデ
ジタル画像データについて、幅方向（Ｘ方向）のみなら
ず長さ方向（ｙ方向）にも切り出すことが可能であり、
たとえば上述した操作と同様の操作を長さ方向に対して
行なうことにより、あるいは長さ方向にはパターンのゆ
らぎは少ないから上述の操作を更に簡便化した操作を行
なうことにより、長さ方向にも画像領域のみを切り出す
ことかできる。

上述の信号処理により決定された泳動パターン領域およ
び各レーンの領域に対応するデジタル画像データは、信
号処理回路から出力されたのち直接的に、もしくは必要
により磁気ディスクや磁気テープなどの記憶保存手段を
介して別の信号処理回路に伝送される。

得られた画像領域に対応するデジタル画像データには、
階調処理、空間周波数処理、拡大処理。

縮小処理、加算平均処理など公知の各種の画像処理を効
率良く施すことができ、これにより従来よりも画質の向
上した解析に適した画像を得ることができる。

また、信号処理によりオートラジオグラフを自動的に解
析する場合には、泳動パターンあるいはレーンに対応し
た画像データにそれぞれ個別に信号処理を施すことによ
り、泳動パターンごとにあるいはレーンごとに好適な信
号処理を行なうことができ、処理効率が向ヒするのみな
らず塩基配列情報など得られる位置情報の精度を高める
ことができる。

上記においては、二個のパターンと八個のレーンからな
る例を挙げて説明したが本発明はこの態様に限定される
ものてはなく、パターンは一個であってもあるいは三個
以上であってもよく、またレーンの数はパターン九り一
個でもあるいはそれ以上てあってもよい。また、複数個
のレーンからなる場合に、試料である塩基特異的ＤＮＡ
断片物の組合せは上記の排他的な組合せに限定されるも
のではない。さらに、本発明は、試料が塩基特異的ＤＮ
Ａ断片物に限定されるものではなく、種々の分離展開手
段により支持媒体上で一次元的方向に分離展開された放
射性標識物質の分離展開パターンに適用することができ
る。特に、蛋白質の微量分析および遺伝子のスクリーニ
ング等に好適に利用することができる。

【図面の簡単な説明】

第１図は、泳動パターンのオートラジオグラフを包含す
るデジタル画像データに基づいた画像の例を示す図であ
る。 第２図は、一つのブロックの射影を求める操作を概略的
に示す図である。 第３図は、一次元波形および泳動パターン領域の境界の
例を示す図である。 第４図は、一次元波形およびレーンの境界の例を示す図
である。 第５図は、泳動パターンおよびレーン全体の境界を決定
する操作を概略的に示す図である。 特許出願人　　富士写真フィルム株式会社代　　理　　
人　　　弁理士　　　柳　　川　　泰　　実弟！図 夕１手 Ｍ２図 １・ 第３図 第４図

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、放射性標識物質が支持媒体上に一次元的方向に分離
   展開されて形成された分離展開パターンのオートラジオ
   グラフを包含するデジタル画像データについてデジタル
   信号処理を行なうことにより、放射性標識物質の位置情
   報を記号および／または数値として得ることからなるオ
   ートラジオグラフ解析のための信号処理方法において、 １）デジタル画像データを、分離展開方向に垂直な方向
   に沿って少なくとも二つのブロックに分割する工程、 ２）各ブロックについて、分離展開方向に沿って画像デ
   ータを加算して、分離展開方向に垂直な方向に沿った位
   置と信号のレベルとからなる一次元波形を得る工程、 ３）ブロックごとに、その一次元波形に基づいて分離展
   開パターン領域の境界を検出する工程、および ４）各ブロックにおける分離展開パターン領域の境界を
   補間して、デジタル画像データ上で全体に渡る分離展開
   パターン領域の境界を決定する工程、 を含むことを特徴とするオートラジオグラフ解析のため
   の信号処理方法。 ２、上記第二工程において、分離展開方向に沿って全画
   像データを加算することを特徴とする特許請求の範囲第
   １項記載の信号処理方法。 ３、上記第二工程において、分離展開方向に沿って一定
   間隔で画像データを抽出し加算することを特徴とする特
   許請求の範囲第１項記載の信号処理方法。 ４、上記第三工程において、一次元波形の平均信号レベ
   ルを算出した後この平均信号レベルに基づいて閾値を決
   定し、一次元波形上で閾値をとる点をパターン領域の境
   界とすることを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の
   信号処理方法。 ５、上記第四工程において、各ブロックにおける分離展
   開パターン領域の境界を該ブロックの分離展開方向に垂
   直な方向に沿った中央線上に定め、各ブロック間で対応
   する境界点を順に結ぶことにより、分離展開パターン領
   域全体の境界を決定することを特徴とする特許請求の範
   囲第１項記載の信号処理方法。 ６、上記オートラジオグラフを包含するデジタル画像デ
   ータが、支持媒体と輝尽性蛍光体を含有する蓄積性蛍光
   体シートとを重ね合わせて、支持媒体上の放射性標識物
   質のオートラジオグラフを該蛍光体シートに蓄積記録し
   たのち、該蛍光体シートに励起光を照射して該オートラ
   ジオグラフを輝尽光として光電的に読み出すことにより
   得られたものであることを特徴とする特許請求の範囲第
   １項記載の信号処理方法。 ７、上記オートラジオグラフを包含するデジタル画像デ
   ータが、支持媒体と写真感光材料とを重ね合わせて、支
   持媒体上の放射性標識物質のオートラジオグラフを該感
   光材料に感光記録したのち、該感光材料上に可視化され
   たオートラジオグラフを光電的に読み取ることにより得
   られたものであることを特徴とする特許請求の範囲第１
   項記載の信号処理方法。 ８、上記放射性標識物質が核酸、その誘導体、もしくは
   それらの分解物またはそれらの合成物であり、信号処理
   により得られる位置情報がそれらの塩基配列情報である
   ことを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の信号処理
   方法。 ９、放射性標識物質が支持媒体上に一次元的方向に分離
   展開されて形成された分離展開パターンのオートラジオ
   グラフを包含するデジタル画像データについてデジタル
   信号処理を行なうことにより、放射性標識物質の位置情
   報を記号および／または数値として得ることからなるオ
   ートラジオグラフ解析のための信号処理方法において、 １）デジタル画像データを、分離展開方向に垂直な方向
   に沿って少なくとも二つのブロックに分割する工程、 ２）各ブロックについて、分離展開方向に沿って画像デ
   ータを加算して、分離展開方向に垂直な方向に沿った位
   置と信号のレベルとからなる一次元波形を得る工程、 ３）ブロックごとに、その一次元波形に基づいて分離展
   開パターン領域の境界を検出する工程、４）ブロックご
   とに、その一次元波形に基づいて各分離展開列の境界を
   検出する工程、および５）各ブロックにおける分離展開
   パターン領域の境界および分離展開列の境界をそれぞれ
   補間して、デジタル画像データ上で全体に渡る各分離展
   開列の境界を決定する工程、 を含むことを特徴とするオートラジオグラフ解析のため
   の信号処理方法。 １０、上記第二工程において、分離展開方向に沿って全
   画像データを加算することを特徴とする特許請求の範囲
   第９項記載の信号処理方法。 １１、上記第二工程において、分離展開方向に沿って一
   定間隔で画像データを抽出し加算することを特徴とする
   特許請求の範囲第９項記載の信号処理方法。 １２、上記第三工程において、一次元波形の平均信号レ
   ベルを算出した後この平均信号レベルに基づいて閾値を
   決定し、一次元波形上で閾値をとる点をパターン領域の
   境界とすることを特徴とする特許請求の範囲第９項記載
   の信号処理方法。 １３、上記第四工程において、一次元波形上のパターン
   領域内で信号レベルが極小となる点を分離展開列の境界
   とすることを特徴とする特許請求の範囲第９項記載の信
   号処理方法。 １４、上記第五工程において、各ブロックにおける分離
   展開パターン領域および分離展開列の境界を該ブロック
   の分離展開方向に垂直な方向に沿った中央線上に定め、
   各ブロック間で対応する境界点を順に結ぶことにより、
   各分離展開列全体の境界を決定することを特徴とする特
   許請求の範囲第９項記載の信号処理方法。 １５、上記オートラジオグラフを包含するデジタル画像
   データが、支持媒体と輝尽性蛍光体を含有する蓄積性蛍
   光体シートとを重ね合わせて、支持媒体上の放射性標識
   物質のオートラジオグラフを該蛍光体シートに蓄積記録
   したのち、該蛍光体シートに励起光を照射して該オート
   ラジオグラフを輝尽光として光電的に読み出すことによ
   り得られたものであることを特徴とする特許請求の範囲
   第９項記載の信号処理方法。 １６、上記オートラジオグラフを包含するデジタル画像
   データが、支持媒体と写真感光材料とを重ね合わせて、
   支持媒体上の放射性標識物質のオートラジオグラフを該
   感光材料に感光記録したのち、該感光材料上に可視化さ
   れたオートラジオグラフを光電的に読み取ることにより
   得られたものであることを特徴とする特許請求の範囲第
   ９項記載の信号処理方法。 １７、上記放射性標識物質が核酸、その誘導体、もしく
   はそれらの分解物またはそれらの合成物であり、信号処
   理により得られる位置情報がそれらの塩基配列情報であ
   ることを特徴とする特許請求の範囲第９項記載の信号処
   理方法。