JPH05508619A - ヒト結腸直腸癌の有効な抑制剤であるカンプトセシンアナローグ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ヒト結腸直腸癌の有効な抑制剤である カンブトセシンアナローグ Ｍ連出願 本出願は、１９８９年１０月２３日に出願された米国特許出願第０７７４２４、 ９１０号の一部継続出願であり、該米国特許出願は、１９８７年３月３１日に出 願された米国特許出願第０７／［１３２，４４９号、（現米国特許４．８９４． ４５６）の一部継続出願であり、本出願には、これら両出願の全体に引用され包 含される。

技術分野 本発明は、Ｐ−３８８及びＬ−１２１０のような種々の白血病組織における延命 効果；　Ｂ−１６メラノーマのような動物Ｍ瘍の抑制を示し、トポイソメラーゼ Ｉの強い阻害剤であるカンブトセシン及びそのアナローブ（顕似体）、並びに新 規なヒドロキシル基含有三環式中間体から該化合物を合成する方法に関する。ま た、本発明は、トポイソメラーゼＩの阻害方法及び結腸直腸癌の治療方法に関す る。

背景技術 カンブトセシンは、ウオールらにより最初にカンプトセヵ・ア牛ユミナタ（Ｃａ ｍｐｔｏｔｈｅｃａ　ａｃｕｍｉｎａｔａ）の木部及び樹皮から単離された三環 式アルカロイトチあ６　（Ｍ、Ｅ、Ｗａｌｌ、　Ｍ、Ｃ，Ｗａｎｉ、　Ｃ。

Ｅ、Ｃｏｏｋ、　Ｋ、Ｈ，Ｐａ１ａｅｒ、　Ａ、Ｔ、ＭｃＰｈａｉｌ、　ａｎｄ 　Ｇ、Ａ、Ｓｉｍ、　Ｊ、　Ａｍ。

Ｃｈｅｔ　Ｓａｃ、、　９４．３８８　（１９６６））。

カンブトセシンは、高度に生物学的に活性であり、核酸の生合成に対して強い阻 害活性を発揮する。更に、カンブトセシンは、マウスの白血病Ｌ−１２１０又は ラットのウォーカー２５６腫瘍のような実験的に移植された癌に対して強い抗腫 瘍活性を示す。

カンブトセシン及びカンブトセシンアナローグの合成方法はいくつか知られてい る。これらの合成方法には、（ｉ）天然カンブトセシンを合成的に修飾して多数 のアナローブを生成する方法及び（ｉｉ）完全に合成による方法が含まれている 。

ヨーロッパ特許出１］！ｉ　００７４２５６のほか、米国特許４．６０４．４６ ３．４、５４５．８８０及び４．４７３．６９２も、前者型の合成法による例で ある。

かかる合成方針の別の例が日本特許８４／４６．２８４．８４１５１．２８７及 び８２／１１６．０１５に見い出される。これらの方法は、単離が困難である天 然カンブトセシンを必要とし、そのためこれらの方法は、カンブトセシン又はそ のアナローブの大量生産には適していない。

カンブトセシン及びカンブトセシンアナローグの種々の完全に合成的なルートの 例は、以下に示す参考文献に見い出される＝Ｓｃｉ、　Ｓｉｎ、　（Ｅｎｇｌ、 　Ｅｄ）、　２１（１）、８７−９８　（１９７８）；　Ｆｉｔｏｔｅｒｐａｐ ｉａ。

４５（３）、　８７−１０１　（１９７４）；薬学雑誌、　９２（６）、　７４ ３−６　（１９７２）；ユ。

虹り匹展り、　４０（１４）、　２１４Ｇ−１（１９７５）；　Ｈｕａ　Ｈｓｕ ｅｈ　Ｈｓｕｃｈ　Ｐａｏ。

３．９（２）、　１７１−８　（１９８１）；　Ｊ、　Ｃｈｅａｐ、　Ｓｏｃ、 、　Ｐｅｒｋｉｎ　Ｔｒａｎｓ　１．　（５）。

１５６３−８　（１９８１）：Ｉｔｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ、　１４（７）、　 ９５１−３　（１９８０）；　Ｊ、　Ａｍｅｒ。

４０４　（１９７０）及び米国特許４．０３１．０９８である。

Ｗａｎｉ　ｅｔ　ａｌ、　Ｊ、　Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｗ、、　２３．５５４　（１ ９８Ｇ）には、下記の反応式１に示したように、三環式化合物と適当に置換した オルトアミノアルデヒドとを反応させてデソキシカンブトセシンを得るという反 応を伴うカンブトセシン及びカンブトセシンアナローグの合成が開示されている 。

次に、デソキシカンブトセシンを酸素で処理することにより、カンブトセシンア ナローグが得られる。この操作の重大な不都合は、デソキシカンブトセシン及び そのアナローブの不溶性であり、そのため、最終工程において大量の溶媒を必要 とする。

その結果、これらの条件下では得られる酸素化生成物が低収率となる。

上記の理由により、事前の天然カンブトセシンの単離を必要とせず、カンブトセ シン及びカンブトセシンアｔローグを高収率で、効率よ（得ることができる合成 方法がめられている。

また、中間体化合物の不溶性という問題及びその結果として低収率になるという 欠点をもたないカンブトセシン及びカンブトセシンアナローグの合成方法がめら れている。

更に、効率よく高収率で合成することができ、すぐれた生物活性を示す新規なカ ンブトセシンアナローグがめられている。

発明の開示 従って、本発明の目的は、完全に合成的な方法において、高収率でカンブトセシ ン及びカンブトセシンアナローグを合成する方法を提供することにある。

また、本発明の別の目的は、中間体化合物の不溶性と関連した問題をもたないカ ンブトセシン及びカンブトセシンアナローグを合成する方法を提供することにあ る。

更に、本発明のさらに別の目的は、容易に修飾して種々の構造のアナローブを製 造することができるカンブトセシン及びカンブトセシンアナローグの調製方法を 提供することにある。

更に、本発明のさらに別の目的は、すぐれた抗腫瘍活性及びその他の好ましい生 物活性を示すカンブトセシンアナローグを提供することにある。

更に、本発明のさらに別の目的は、抗腫瘍又は抗癌量のカンブトセシン化合物を 投与することにより結腸直腸癌を治療する方法を提供することにある。

以下の説明により明確になる本発明のこれらの目的及びそれ以外の目的は、本発 明のカンブトセシン及びカンプトセシンアナローグの合成方法により達成された 。該合成方法には、次の工程か含まれる： 〔式中のＸは、酸で処理することによりカルボニル基に転化される有機基である 。〕 で表される化合物を環化して、下記式：で表されるラクトンを生成し； 該ラクトンを脱保護し、下記式： で表されるヒドロキシル基含有三環式化合物を生成し：該ヒドロキシル基含有三 環式化合物と式：〔式中のｎは、１〜２であり、Ｒは、それぞれシアノ、メチレ ンジオキシ、ホルミル、ヒドロキシ、Ｃ１−、のアルコキシ、ニトロ、アミノ、 クロロ、ブロモ、ヨード、フルオロ、ＣＩ−＊のアルキル、トリフルオロメチル 、アミノメチル、アジド、アミド及びヒドラジノ基からなる群から選ばれる基で あり；Ｒ１は、Ｈｌ又はＣ，アルキル基であり；そしてＲ３は２０種の天然アミ ノ酸の中のいずれかの側鎖である。〕で表される置換基を有するオルト−アミノ 化合物とを反応させる。

図面の簡単な説明 図１ａ及び！ｂは、本発明による、ヒドロキシル基含有三環式化合物１１の合成 を図解したものである。

本発明を実行するための最良の実施態様本発明のカンブトセシンアナローグは、 下記に示したようにＡ環が置換された基本的なカンプトセシン化学構造骨格を有 す本発明の範囲内である置換基としては、アミノ性窒素原子を介して芳香環に結 合したアミノ酸からなる基のほか、ヒドロキシ、ニトロ、アミノ、クロロ、ブロ モ、ヨード、フルオロ、Ｃ１−、アルキル、Ｃ３１アルコキシ、トリフルオロメ チル、アミノメチル、アミド、ヒドラジノ、アジド、ホルミル、及びシアノ基も 挙げられる。好ましいアルキル基には、メチル、エチル、プロピル、ブチル、イ ソプロピル、イソブチル及びＳｅｅ　−ブチル基が含まれる−０好ましいアルコ キ、シ基には、メトキシ、エトキシ、プロポキシ及びイソプロポキシ基が含まれ る。

前記の好ましいアミノ酸基は、（Ｌ）立体配置の２０種の天然アミノ酸である。

これらのアミノ酸は、当業者にはよく知られている。

更に、Ａ環上の２個の置換基が、互いに結合してメチレンジオキシ基のような二 官能性置換基を形成していてもよい。メチレンジオキシ置換基は、Ａ環の二つの 隣接した位置ならばどごでも結合していてよく、例えば、９．１０位、１０．１ １位又は１１゜１２位に結合していればよい。

好ましい置換基には、ヒドロキシ、アミノ、シアノ及びメチレンジオキシ置換基 が含まれる。特に好ましい置換基は、メチレンジオキシ基である。

本発明の発明の範囲内の特に好ましい化合物には、１１−メトキシ−２０（ＲＳ ）−カンブトセシン、１１−メトキシ−２０（Ｓ）−カンブトセシン、１１−ヒ ドロキシ−２０（ＲＳ）カンブトセシン、１１−ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カン ブトセシン、ｌＯ−ヒドロキシ−２０（ＲＳ）カンブトセシン、■０−ヒドロキ シー２０（Ｓ）−カンブトセシン、９−メトキシ−２０（ＲＳ）−カンブトセシ ン、９−メトキシ−２０（Ｓ）−カンブトセシン、９−ヒドロキシ−２０−（Ｒ Ｓ）−カンプトセシン、９−ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カンブトセシン、ｌＯ− 二トロー２０（ＲＳ）−カンブトセシン、ｌＯ−ニトロ−２０（Ｓ）−カンブト セシン、ｌＯ−アミノ−２０（ＲＳ）−カンブトセシン、ｌＯ−アミノ−２０（ Ｓ）−カンブトセシン、９−ニトロ−２０（ＲＳ）−カンブトセシン、９−ニト ロ−２０（Ｓ）−カンブトセシン、９−アミノ−２０（ＲＳ）−カンブトセシン 、９−アミノ−２０（Ｓ）−カンプトセシン、１１−二トロー２０（Ｒ３）−カ ンブトセシン、１１−ニトロ−２０（Ｓ）−カンブトセシン、１１−アミノ−２ ０（Ｒ３）−カンブトセシン、１１−アミノ−２０（Ｓ）−カンブトセシン、　 １０．１１−ジヒドロキシ−２０（Ｒ３）−カンブトセシン、　１０．１１−ジ ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カンブトセシン、１０−クロロ−２０（ＲＳ）−カン ブトセシン、ＩＯ−クロロ−２０（Ｓ）−カンブトセシン、ＩＯ−メチル−２０ （ＲＳ）−カンブトセシン、ＩＯ−メチル−２０（Ｓ）−カンブトセシン、１１ −ホルミル−２０（Ｒ３）−カンブトセシン、１１−ホルミル−２０（Ｓ）−カ ンブトセシン、１１−シアノ−２０（Ｒ３）−カンブトセシン、１１−シアノ− ２０（Ｓ）−カンブトセシン及び１０．１１−メチレンジオキシ−２０（ＲＳ） −カンブトセシン並びに１０．１１−メチレンジオキシ−２０（Ｓ）−カンブト セシンが含まれる。

本出願中に示される全ての構造式は、その化学構造を有する限り、可能な異性体 の全てを表すと解される。そのため、上記したカンブトセシン構造は、ラクトン 環の２０位において２０（Ｓ）、　２０（Ｒ）及び２０（ＲＳ）の立体配置をも つ複数の化合物を表している。そのような異性体及び置換基Ｒ内の立体化学的配 置から生じる異性体の全てが、本発明の範囲内であると考えられる。

本発明の２０（ＲＳ）−カンブトセシン化合物は、公知の分割方法を用いて２０ （Ｒ）と２０（Ｓ）のエナンチオマーに分離することにより分割される。例えば 、２０（ＲＳ）−力ンブトセシン誘導体は、米国特許出願第０７１５１１．９５ ３号（本願明細書に引用されて含まれる）に開示された方法により、Ｒ−（＋） −α−メチルベンジルアミン又は５−（−）−α−メチルベンジルアミンのよう な適当なキラルなアミンと反応させて対応するジアステレオマーアミドを形成す ることにより分割される。ジアステレオマーアミドの分離後、該アミドを、酸で 処理することにより完全なカンブトセシン環構造に再生される。

また、本発明の範囲には、カンブトセシン構造のＡ環を修飾してヘテロ原子を含 有させた化合物も含まれる。修飾された構造は、５又は６の原子を含有するＡ環 を有することも可能であり、ヘテロ原子としては、窒素原子、硫黄原子又は酸素 原子が可能である。これらの化合物は、Ａ環がへテロ原子Ｘを含有する芳香性の ５又は６員環である下記に示す一般構造式により表される。

修飾されたＡ環構造を有する好ましい化合物には、Ａ環が窒素原子を含有する６ 員環の芳香環である化合物及びＡ環が硫黄原子を含有する５員環の芳香環である 化合物が含まれる。特に好ましい化合物は、１０−アザ−２０（ＲＳ）−及び１ ０−アザ−２０（Ｓ）−カンプトセシン並びにＡ−ツアー９−チア−２０（ＲＳ ）−及びＡ−ツアー９−チア−２０（Ｓ）−カンブトセシンである。

上記したカンブトセシンアナローグは、本発明の方法によれば、２０−ヒドロキ シル基を含有する三環式化合物を適当に置換したオルト−アミノ芳香族アルデヒ ド又はケトンと反応させることにより合成することができる。Ｃ１にアルキル置 換基を有するカンプトセシンアナローグは、適当なオルト−アミノケトンを用い ることにより製造される。

本発明の方法における重要な工程は、下記式：で表されるヒドロキシル基含有三 環式化合物の合成である。式中、ＲＩはヒドロキシル基である。

本発明者らによって、以前開発された合成方法（Ｊ、　Ｍｅｄ。

Ｃｈｅｍ、、　２３．５５４　（１９８０）　）は、関連はあるが、構造的に異 なる三環式化合物（式１、Ｒ’　＝Ｈ）を利用していた。その方法では、該三環 式化合物を、アルカリ性又は酸性条件下で適当なすルトアミノアルデヒドと反応 させることによりデソキシカンプトセシンを得ていた。次に、該デソキシカンブ トセシンを酸素と反応させて、ＲがＯＨであるカンプトセシンアナローグを得て いた。この操作の重大な不都合はデソキシカンブトセシン及びそのアナローブの 不溶性であり、そのため最終工程において大量の溶媒が必要であり、酸素化生成 物の低収率をもたらしていた。

これと異なり、本発明の方法は、図１によれば鍵となる三環式中間体（１１）を 合成する。化合物１〜９の合成は、Ｗａｎｉ　ｅｔａｔ、　Ｊ、　Ｍｅｄ、　Ｃ ｈｅｍ、、　２３．５５４　（１９８０）に開示されている。更に以前の合成と 異なり、本発明の方法は、合成過程のより早い時期に２０−ヒドロキシル基を導 入しており、その後に、ラクトン環を形成することにより化合物ＩＯを得ている 。カルボニル基の脱保護後、鍵となるヒドロキシル基含有三環式化合物１１が得 られる。

化合物３のカルボニル基の保護は、酸処理によりはずしたり、カルボニル基に変 換させたりすることができる適当な有機保護基を使用することにより行うことが できる。こうして、カルボニル基は“脱保護′される。これらの保護基は、合成 化学に通じた人にはよく知られていて、アセタール、ケタール、チオアセタール 、チオケタール等が含まれる。好ましい保護基は、炭素原子数２〜６のものであ る。特に好ましい保護基は、三環式化合物１１に先にヒドロキシル基を導入した 結果、所望の三環式アナローグは、適当なオルト−アミノカルボニル化合物との 反応により一工程で還元される。三環式生成物は不溶であるが、化合物１１もそ れに対応するケトン性シントンも有機溶媒に非常によく溶ける。そのため、酸素 化工程、即ち、ヒドロキシル基の導入は、不溶性の三環式デオキシアナローグに 行うよりもむしろ三環式段階で都合よく行うことができる。

次に、三環式化合物１１を適当に置換されたオルト−アミノアルデヒド又はケト ンと反応させることにより、カンブトセシンアナローグが得られる。本発明の範 囲内の置換されたオルト−アミノアルデヒド及びケトンには、芳香環上に少なく とも一つの別の置換基を有するオルト−アミノアルデヒド及びケトンか含まれる 。この置換基は、下記に示したように、最終的なカンブトセシン構造のＡ環の９ ．１０．１１又は１２位に相当する位置の一つ或いはそれ以上に存在することが できる。

好ましい置換されたオルト−アミノアルデヒド及びケトンは、対応する９、１０ 又は１１位に置換基を育する。

置換されたオルト−アミノアルデヒド又はケトン上の置換基には、アミノ性窒素 原子を介して芳香環に結合したアミノ酸からなる基のほかに、ヒドロキシ、ニト ロ、アミノ、Ｃ１４アルキル、クロロ、ブロモ、ヨード、フルオロ、メチレンジ オキシ（−０−ＣＨ，Ｏ−）　、Ｃ，、アルコキシ、トリフルオロメチル、アミ ノメチル、アミド、ヒドラジノ、アジド、ホルミル、及びシアノ基も含まれる。

好ましい例には、ヒドロキシ、アミノ、シアノ及びメチレンジオキシ置換基が含 まれる。特に好ましい置換基は、メチレンジオキシ基である。

オルト−アミノケトンを三環式化合物１１と反応させると、Ｃ７にアルキル置換 基を有するカンブトセシンアナローグが生成する。好ましいオルト−アミノケト ンは、Ｒ１が炭素原子数１〜８のアルキル基のものである。特に好ましいオルト −アミノケトンは、オルト−アミノアセトフェノン及びオルト−アミノプロピオ フェノンである。

前記のオルト−アミノアルデヒド及びケトンは、式：％式％ 〔式中、Ｒ３は、２０個の天然アミノ酸の中の一つの側鎖である。〕 て表される基で置換されていてもよい。アミノ酸置換基は、窒素原子を介して芳 香環に結合していて、最終的なカンプトセシン構造のＡ環の９．１０．１１又は １２位に相当する芳香環上のどの位置に結合していてもよい。

前記のすルトーアミノアルデヒド及びケトンは、フリーのカルボニルの形、又は 該アルデヒド又はケトンのカルボニルを標準的な保護基で保護した形であっても よい。これらの保護基は、当業者にはよく知られている。フリーカルボニル形及 び保護カルボニル形のどちらのすルトーアミノアルデヒド及びケトンも、本発明 の範囲内であると考えられ、本発明の方法の使用に適している。

ヒドロキシ基を三環式中間体化合物に導入する反応、即ち、環化工程は、化合物 ９自身の分解のような重大な副反応を引き起こさずに化合物９の適当な位置にヒ ドロキシ基を導入することかできる適切な反応により成し遂げられる。

前記反応は、好ましくは、塩基性触媒存在下で行われる。適当な塩基性触媒には 、無機塩基のものも有機塩基のものも含まれる。好ましい無機塩基には、例えば 、ナトリウム及びカリウムの炭酸塩並びにナトリウム及びカリウムの炭酸水素塩 が含まれる。好ましい有機塩基には、トリエチルアミン及びジイソプロピルアミ ンのようなヒンダード塩基が含まれる。特に好ましい塩基性触媒は、炭酸カリウ ムである。

ヒドロキシル基を導入する上記の反応は、反応物か適度に溶解して反応するよう な極性又は無極性溶媒中で行うことができる。好ましいものは、メタノール、エ タノール、プロパツール、ブタノール及びジメチルホルムアミドのような極性有 機溶媒である。クラウンエーテルその他のエーテル溶媒も使用可能である。

ヒドロキシル基の酸素原子は、一般的に、反応溶液に吹き込まれた分子状酸素か ら誘導される。酸素の使用が好ましいが、空気のようなその他の酸素の供給源も 使用可能である。また、過酸化水素、四酢酸鉛及び二酸化セレンのようなその池 の酸化剤も使用可能である。

具体的な反応温度は、その特定の反応条件及び使用する反応物に依存するが、該 反応は、好ましくは室温で行われる。

化合物ｌＯのカルボニル基の脱保護は、酸で処理することにより達成される。適 当な酸には、炭素原子数１〜１０のアルカン酸のような有機酸、好ましくは、酢 酸、及びＣ＋−＋ｔのアリールスルホン酸、特に好ましくはｐ−トルエンスルホ ン酸のほか、ＨＣｌ５ＨＩＳＯ，、ＨＮＯ２及びＨ，ＰＯ，のような鉱酸も含ま れる。このような方法によるカルボニル基の脱保護は、当業者にはよく知られて いる。

次に、三環式化合物１１を酸又は塩基性触媒の存在下で置換されたオルト−アミ ノアルデヒド又はケトンと反応させる。塩基性触媒は、好ましくは、化合物９を 環化して化合物！０を生成する、即ち、三環式化合物１１にヒドロキシル基を導 入する際に使用する上述した塩基性触媒を使用する。酸性触媒は、好ましくは、 例えば、ＨＣＩ　、　Ｈ，ＳＯ，、ＨＮＯ３及びＨ，ＰＯ４のような鉱酸又はＣ Ｉ−１アルカン酸及びＣＩ−１□のアリールスルホン酸のような有機酸を使用し 、特に好ましくは、ｐ−トルエンスルホン酸を使まで又は極性若しくは無極性溶 媒存在下で行われる。好ましい極性溶媒は、ＣＩ−＠のアルコール、エーテル及 びジメチルホルムアミドである。好ましい無極性溶媒は、分岐状もしくは直鎖状 のアルキルの炭化水素で炭素原子数４〜ＩＯのもの及び炭素原子数６〜２０の芳 香族炭化水素である。特に好ましい溶媒は、トルエンである。

ヒドロキシル基含有三環式化合物と置換されていてもよいオルト−アミノ化合物 との反応は、一般に、加熱、還流下で行われる。反応時間は、個々の反応物によ り変化するが、一般的には約１０分から２４時間の範囲である。好ましい反応時 間は、２〜１０時間である。

また、本発明の範囲内には、上記したように調製したカンブトセシンアナローグ のラクトン環をアルカリ水溶液を用いて加水分解することにより、ラクトン環が 開環して対応するヒドロキシル基とカルボン酸塩官能基とを形成しているカンブ トセシンアナローグのアルカリ金属塩を生成させて得られたカンブトセシンアナ ローグも含まれる。前記加水分解は、典型的には、アルカリ金属の水酸化物の１ 当量を用いて水溶液中で行われる。

好ましいアルカリ金属の水酸化物は、水酸化カリウム及び水酸化ナトリウムであ り、特に好ましいのは、水酸化ナトリウムである。

上記の加水分解反応は、出発原料の分解を防げるのに十分に低い温度て有る限り 、カンブトセシンアナローグと水性のアルカリ金属の水酸化物を十分に反応させ ることができるいずれの温度でも行うことができる。適切な温度は、約５〜５０ ℃であり、好ましい温度は、はぼ室温である。加水分解後、カンブトセシンアナ ローグの金属塩を単離して、一般的な再結晶又はクロマトグラフィー操作により 精製する。特に好ましい塩は、　１０．１１−メチレンジオキシ−２０（ＲＳ） −カンブトセシン及び１０．１１−メチレンジオキシ−２０（Ｓ）−カンブトセ シンのナトリウム塩である。

上記の本発明のカンブトセシンアナローグは、すぐれた生物活性を育する。ここ で使用される“生物活性”は、トポイソメラーゼ酵素、特にトポイソメラーゼ■ を阻害するカンブトセシンアナローグの能力、及び抗白血病活性を発揮する該ア ナローブの能力を意味している。抗白血病活性は、各化合物のＬ−１２１０マウ ス白血病細胞を阻害する能力により測定することができる。

抗白血病活性は、Ｌ−１２１０マウス白血病細胞に対する個々の化合物の活性に よって表１〜３に実証されている。その他の公知の抗白血病及び抗腫瘍のインビ トロ及びインビボのモデル、例えば表４に示した開裂性複合体検定（ｔｈｅ　ｃ ｌｅａｖａｂｌｅ　ｃｏｍｐｌｅｘ−ａｓｓａｙ　）も抗白血病活性を測定する ことに使用可能である。

カンブトセシンアナローグ、特に、２０（ＲＳ）及び２０（Ｓ）立体配置の両方 を有する９−アミノ−１１０−アミノ−１１０，１１−メチレンジオキシ−及び １０．１１−メチレンジオキシーカンブトセシンナトリウム塩は、インビトロの 検定においても、ヒト結腸直腸異種移植片ｌ１ｉ４ｆｔＩｊ系のようなインビボ の腫瘍モデルにおいても示されるように、トポイソメラーゼＩの阻害剤として高 度に活性である。これらのカンブトセシンアナローグは、ヒト結腸癌ＩＴ−２９ 、結腸癌ＣＡＳＥ及び５Ｗ４８腫瘍のようなヒト結腸直腸異種移植片系において 腫瘍の寛解を引き起こすことが示された。Ｂ、　Ｃ。

Ｇｉｖａｎｅｌｌａ、　、１．Ｓ、　５ｔｅｈｌｉｎ、　Ｍ、Ｅ、　Ｗａｌｌ、 　Ｍ、Ｃ，Ｗａｎｉ、　Ａ、Ｗ。

Ｎ１ｃｈｏｌａｓ、　Ｌ、Ｆ、　Ｌｉｕ、　Ｒ，５ｉｌｂｅｒ及びＭ、Ｐｏｔｍ ｅｓｉｌ、　ＨｉｇｈｌｙＥｆｆｅｃｔｉｖｅ　ＤＮＡ　Ｔｏｐｏｉｓｏｍｅｒ ａｓｅ−Ｉ　Ｔａｒｇｅｔｅｄ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ　ｏｆＨｕｍａｎ　 Ｃｏ１ｏｎ　Ｃａｎｃｅｒ　ｉｎ　Ｘｅｎｏｇｒａｆｔｓ、　５ｃｉｅｎｃｅ、 　ｖａｔ　２４６゜ｐａｇｅｓ　１０４６−１０４８　（１９８９）を参照。更 に、ヒト肝臓及び肺の異種移植片は、これらのアナローブによって強く抑制され る。

それゆえ、本発明のカンブトセシンアナローグ、及び特に９−アミノ−２０（Ｓ ）−１ｌＯ−アミノ−２０（Ｓ）−１１０，＋１−メチレンジオキシ−２０（Ｓ ）−及び１０．１１−メチレンジオキシ−２０（Ｓ）−カンブトセシンのナトリ ウム塩は、トポイソメラーゼＩを阻害する方法及び哺乳類、特にヒトの患者に、 抗腫瘍有効量の上記カンブトセシンアナローグを投与することにより結腸直腸癌 を治療する方法を提供する。こ・れらのカンプトセシンアナローグの高い抗トポ イソメラーゼ■活性は、哺乳類の結腸及び直腸のアデノカルチノーマの治療を可 能にする。同様に、これらの化合物は、肝臓及び肺の腫瘍の治療にも有効である 可能性がある。

種々の環Ａを酸素処理したカンブトセシンアナローグのマウスの抗白血病活性を 表■に示す。窒素アナローブ及び項八が修飾されたアナローブの同様のデータを それぞれ表■及び表■に示す。はとんどの場合、カンブトセシン又は明確に定義 された活性を有するアナローブも、正のコントロールとして同時に検定し、該デ ータを表の脚注に示す。このようにして、種々の化′　合物の相対的な抗白血病 活性を比較することができる。追加したカンブトセシンアナローグの生物活性は 、Ｊ、　Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｍ、。

２３、５５４−５６０頁（１９８０）に記載されている。

トポイソメラーゼ■を阻害するカンブトセシンの能力は、判明している。、１． ８ｉｏ１．　Ｃｈｅｍ、、　２６０．１４８７３−７３　（１９８５）参照。

下記の表■に、本発明のカンブトセシンアナローグは驚くべきトポイソメラーゼ Ｉ阻害活性が示されている。開裂性錯体検定法（ｔｈｅ　ｃｌｅａｖａｂｌｅ　 ｃｏｍｐｌｅｘ　ａｓｓａｙ　）は、Ｈｓｉａｎｇ、　Ｙ−Ｈほか。

Ｊ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ、、　２６０　：　１４８７３−１４８７８　（ｔ ９８５）に記載された方法により行った。

開裂性複合体検定法は、動物モデルにおけるカンブトセシンアナローグのインビ ボでの抗腫瘍活性と良（相関している。

外科手術又はバイオプシーにより得られたヒト癌を用いた腫瘍組織培養の研究が 、下記の表■に示されている。腫瘍細胞増殖の抑制は、ＶａｓｃｊｏほかＰｒｏ ｃ、　Ｎａｔ’１．　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ、　８４：５０２９−５０ ３３　（１９８７）に記載されている、外科手術又はバイオプシーから得られる ヒト結腸腫瘍についてインビトロで行われた。

ただし、次のような改変により行った：即ち、腫瘍に薬物を付与する前に１日間 培養して；腫瘍を２４時間化合物にさらし、洗浄し、次に３日間２［旧チミジン にさらした。

表■に示した腫瘍組織培養の研究において、本発明の化合物は、すぐれた活性を 証明している。該活性は本発明の化合物での処理中における腫瘍細胞増殖の抑制 として測定されたものである。本願明細書で使用される、“癌（ｃａｎｃｅｒ） ”という用語は、“悪性＠＠　（ｍａｌｉｇｎａｎｔ　ｔｕｍｏｒ）”、更に一 般的に、°腫瘍（ｔｕｍｏｒ）”という詔と同義である。表Ｖに示したデータは 、ヒト結腸癌に対する本発明の化合物の活性を証明していて、該ヒト結腸癌は、 化学療法にかなり耐性のある癌であることが知られている。参照：　Ｈ，Ｌ−Ｄ ａｖｉｓ、　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ　ｏｆ　Ｌａｒｇｅ　ＢｏｗｅｌＣａｎ ｃｅｒ、　Ｃａｎｃｅｒ　（Ｐｈｉｌａ、）　５０：　２６３８−２６４６　（ １９８２）；　Ｊ、Ｒ。

ＮｅｃｆｅおよびＰ、Ｓ、　５ｃｈｅｉｎ、　Ｃｈａｐｔｅｒ　４３：　Ｔｈｅ 　Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ　ｏｆＤｉｓｓｅｍｉｎａｔｅｄ　Ｌａｒｇｅ−Ｂｏｗ ｅｌ　Ｃａｎｃｅｒ　ｉｎ　Ｐｒ１ｎｃｉｐａｌｓ　ｏｆ　ＣａｎｃｅｒＴｒｅ ａｔｍｅｎｔ、　４０２頁、Ｓ、に、Ｃａｒｔｅｒ、　Ｅ、Ｇｌａｔｓｔｅｉｎ 及びＲ−Ｂ。

Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎ纒集、　ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ　Ｃｏ、、　１９８２； 　Ｋ、　Ｍｅｋｈａｉｌ−１ｓｈａｋ。

Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ、　４９：　４８６６−４８６９　（１９８９ ）、並びにＰ、　Ｊ。

Ｆｅｒｇｕｓｏｎ及びＹ、Ｃ，Ｃｈｅｎｇ、　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ 、　４９：　１１４８−１１５３（＋９８９）。

本発明の化合物は、ヒト結腸癌に対して抗腫瘍活性を示すが、二のヒト結腸癌は 新規の薬物に耐性を示し、そのため化学療法的に治療することが困難であること が知られている。従って、本発明の化合物は、口腔及び咽頭（唇、舌、口、咽頭 ）、食道、胃、小腸、大腸、直腸、肝臓及びＩＱ管、膵臓、喉頭、肺、骨、結合 組織、皮膚、胸、子宮頚、子宮内膜、卵巣、前立腺、精巣、膀胱、腎臓及びその 他の泌尿組織、眼、脳及び中枢神経系、甲状及びその他の内分泌腺の癌、白血病 （リンパ球性、顆粒球性、卓球性）、ホジキン病、非ホジキン性リンパ腫、多発 性骨髄腫等の広範囲に渡る哺乳類（ヒトを含む）の癌に対して活性であると考え られる。本発明の化合物は、具体的に名を挙げない他の癌であっても、本発明の 化合物による抗腫瘍活性がその特定の癌において証明される限り、治療に使用可 能であることは明らかである。

本発明の新規なカンプトセシンアナローグを含有する薬学的組成物も、本発明の 範囲内である。これらの薬学的組成物は、インビトロ又はインビボにおけるトポ イソメラーゼＩの阻害あるいはインビボにおける抗白血病活性の発揮に有効な量 ならいかなる量のカンブトセシンアナローグを含有していてもよい。

動物及びヒトのような哺乳類は、上記の本発明の組成物で治療可能である。本発 明の範囲内の典型的なインビボの投与量は、患者−人当たり一日にカンブトセシ ン約０．１−１００　ｍｇである。

特に好ましくは、１〜４０ｍｇ／　ｋｇである。

また、上記の組成物の一部として、薬学的に適合性のある結着剤、及び／又はア ジュバント物質を含んでいてもよい。前記の活性物質は、更に、所望される作用 を損なわず、及び／又は所望される作用を補うようなその他の活性物質を混合す ることも可能である。本発明による活性物質は、どのような方法でも投与するこ とができ、例えば、経口、非経口、静脈、皮肉、皮下又は局所的に液状又は固体 状で投与することができる。

本発明の化合物の投与方法の一つに経口投与法がある。経口用あ組成物は、一般 的に、不活性な賦形剤又は食用の担体を含有する。前記の組成物は、ゼラチンカ プセル中に封じ込めるか、又は錠剤中に圧縮することも可能である。治療掌上の 経口投与を目的として、前記の化合物に、賦形剤を混合してもよく、錠剤、トロ ーチ剤、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、カシェ剤、チューイ ンガム等の剤形で使用することができる。これらの製剤は、少なくとも０．１％ の活性化合物を含有すべきであるが、個々の剤形により変化してもよい。

前記の錠剤、火剤、カプセル剤、トローチ剤等は、以下に示す成分を含有しても よい：即ち、微品質のセルロース、トラガカントガム又はゼラチンのような結着 剤：スターチ、ラクトースのような賦形剤、アルギン酸、ブリモーゲル（Ｐｒｉ ｍｏｇｅｌ）、コーンスターチ等のような崩壊剤ニステアリン酸マグネシウム又 はステロテス（Ｓｔｅｒｏｔｅｓ）のような滑沢剤；コロイド状二酸化ケイ素の ような“ｇｌｉｄａｎｔ″　ニスクロース又はサッカリンのような甘味剤、又は ペパーミント、サリチル酸メチル、若しくはオレンジ香味料のような矯臭（味） 剤が添加されてもよい。

前記の投薬単位剤形がカプセル剤の場合、上記した型の物質に加えて脂肪油のよ うな液状の担体を含有してもよい。その他の投薬単位剤形の場合、投薬単位の物 理的な形態を改質するその他の種々の物質、例えば、被覆剤を含有してもよい。

即ち、錠剤又は火剤は、砂糖、セラック又はその他の腸溶性の被覆剤で被覆され ていてもよい。シロップ剤は、上記の活性化合物に加えて、甘味剤としてスクロ ース及び一定の保存剤、染料並びに色素及び着香剤を含有してもよい。これらの 種々の組成物を調剤するのに使用される物質は、使用したとしても薬学的に純粋 であり、使用される量において無毒である必要がある。

非経口的な治療的投与を目的として、前記の活性成分は、溶液又は懸濁液中に混 合することも可能である。該溶液又は懸濁液は、また、下記の成分を含有してい てもよい：注射用の水、塩水、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、 プロピレングリコール又はその他の合成の溶媒のような無菌の希釈剤：ベンジル アルコール、又はメチルパラベンのような抗菌剤：アスコルビン酸又は重亜硫酸 ナトリウムのような酸化防止剤；エチレンジアミン四酢酸のようなキレート剤： 酢酸塩、クエン酸塩又はリン酸塩のような緩衝溶液及び塩化ナトリウム又はブド ウ糖のような張度調整のための試薬を含有してもよい。上記の非経口製剤は、ガ ラス又はプラスチック製のアンプル、ディスポーザブルシリンジ又は多用量用バ イアルに封じ込めることも可能である。

当業界で公知のように、投与量は、治療に供する特定の癌、腫瘍の進行段階、腫 瘍の位置、治療される患者の体重及び体調等により様々である。ここに記載され た化合物を、前動な経口、非経口又は静脈内の投薬として治療の必要がある被検 者に投与すると良好な結果が得られるであろう。どんな特定の被検者に対しても 、具体的な投薬計画は、個々の必要性及び前記の化合物の投与を行う人又は投与 を指示する人の専門的な判断に従うべきことは理解されなければならない。更に 、ここに記載の投与量は、単なる例示であり、本発明の範囲又は実施を制限する ものでもないことも理解すべきである。上で述べた範囲を超える又は範囲より少 ない投与量も、本発明の範囲内であり、個々の患者にとり望ましく、必要があれ ば投与してもよい。投薬は、一度で行ってもよく、又は少量ずつ多数の用量に分 割して、種々に時間をおいて行ってもよい。

本発明には、また、本発明のカンブトセシン化合物に標準的な薬学的に許容でき る酸及び塩基を付加した塩も含まれる。適当な酸付加塩は、）ＩｃＩＳＩ（＄Ｐ Ｏ，、ＨｔＳＱ、等、又はリンゴ酸、マレイン酸又は酒石酸のような有機酸を付 加することにより得られる。適当な塩基付加塩は、アミンを付加することにより 得られ、即ち、アンモニウム塩及びアミンの窒素原子が１．２又は４の低級アル キル基又は置換低級アルキル基を育する第１ｍ、第２級及び第３級アミンとで形 成された第四アンモニウム塩である。

１個又はそれ以上のヒドロキシ基を含有する置換低級アルキル基が好ましい。明 らかに、本発明は、上記の酸及び塩基付加塩の例に限定されず、本発明のカンブ トセシン化合物を用いて調製され、薬学的に許容できる全ての酸及び塩基付加塩 を含む。

本発明の別の特徴は、本発明の説明のために掲げ、それに限定するつもりはない 以下の具体的な実施態様により明らかになるであろう。

実　施　例 Ｏｒｇ、　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ、　Ｃｏ１１．　Ｖｏｌ、　１．２３８　（夏９ ５８）の記載に従って、アセトピルビン酸エチルをアセトン及びシュウ酸エチル から調製した。更に、エタノール中でオルトギ酸トリエチル及び塩化アンモニウ ムと反応させて、公知のエノールエーテルｌを得た（　Ｌ、　Ｃ１ａｉｓｅｎ、 　ＣｈｅｒＩｉ、　Ｂｅｒ、、　４０．３９０３　（１９０７）参照）。

ＫｚＣ（ｈ　（７９，０４ｇ、　０．５７３ｍｏｌ）及びシアノアセトアミド（ ４８−４６ｇ、０．５７７ｍｏｌ）をＤＭＦ　（９６０ｍｌ）に加えた混合物を 予熱（４５）し、機械的に攪拌しておき、これにエチル（２−エトキシ−４−オ キソ）−ベント−２−エノエー）−（１’）　（１００，０１ｇ、　０．５３８ ｍｏｌ　）を徐々に添加した。該混合物を４５゛Ｃで１８時間保持した後、その 濁った赤色のスラリーに、新たに蒸留したアクリル酸メチル（３６０ｍ１．３４ ３ｇ、３．９９ｍｏｌ　）を滴下して処理した。４５°で７２時間後、赤色の懸 濁物を濾過して、水５リットルに溶解し、濃ＨＣＩを用いてｐＨ１，５の酸性に した。濾過により、桃色の固体状の粗二環式エステル２　（１２７，９８ｇ）を 得た。更なる処理は行わずに、化合物２を濃ＨＣＩ　（８００１１１１）及び氷 ＨＯＡｃ　（８００ｍｌ）の溶液中で２時間還流した。真空下で溶媒を除去して 、二環式ピリドン３　（３９，６６ｇ、化合物上に対して収率３９％）を得た。

攪拌しながら、窒素下でエチレングリコール（６，８５ｍ１．７．６３ｇ。

０．１２３　ｍｏｌ　）及びＭｅｓＳｉＣＬ　（３１，３０ａｔｌ、２６．８９ ｇ、０．２４７ｔｎｏｌ　）で室温で処理して、周囲温度（２０℃）で６５時間 放置した。前記溶液を濾過して黒色の懸濁物を除去後、該溶液をＩ　ＭＮａＯＨ 水溶液で洗浄した。前記の有機相を食塩水で洗浄して、セライトを通して濾過後 、蒸発させて、桃色の固体状のエチレンケタール６−ジアツー１．１−（エチレ ンジオキシ）−７−［（エトキシカルボニル）メチル］−５−オキソ−Δ“１ｍ ゝｍチーラヒドロインドリジン０、０６８ｍｏｌ）のトルエン（４０ｍｌ）懸濁 液中で１０分間還流した。炭酸ジエチル（６，７９ｇ、０．０５８ｍｏｌ）及び 触媒量の無水エタノール（０，３１ｇ、６．７ｍｍｏｌ）を添加して、３時間還 流を続けた。黒っぽい固体を粉砕して、濾過することにより生じた５の懸濁塩を 集めた。核塩に冷酢酸水溶液を注意深（添加することにより中和した。水を添加 して、該生成物をＣＬＣｂ中に抽出した。食塩水で洗浄した後、乾燥（ＮａｚＳ Ｏ４）　Ｌ／て、ＣＨ２Ｃｌ、を蒸発させて粗化合物５を得た。シリカゲルクロ マトグラフィー（２％ＭｅＯＨを含むＣＩ（Ｃ１，溶液）及び再結晶（ＭｅＯＨ ）により精製物５　（４，９７ｇ、７６％）を得た。

６−ジアツー１．１−（エチレンジオキシ）−７−［１’　（エトキシカルボニ ル）−プロピル１−５−オキソ−Δ″″″−テトラヒドロインドリエステル５４ ．０１ｇ、　０．０１３２　ｍｏｌ）の無水ＤＭＥ　（７０ｍｌ）溶液を一７８ ℃で攪拌しながら、カリウム−ｔｅｒｔ−ブトキシド（１５７ｇ、　１５ｍｍｏ ｌ）で処理した。５分後、Ｅｔｌ　（８，２４ｇ、　０．０５３　ｍｏｌ）を５ 分間かけて添加した。−７８℃で１．５時間攪拌した後、該混合物を一晩放置し て室温まで温めた。水を添加して、生成物をＣＨ，Ｃ１！中に抽出した。食塩水 で洗浄して、乾燥（Ｎａ２ＳＯ２）後、ＣＬＣｔ！を蒸発させて、エステル６（ ４，３ｇ、９８％）を得た。

６−（アセトアミドメチル）−１，１−（エチレンジオキシ）−７−［１’−（ エトキシカルボニル）プロピル】−５−オキソΔ１ｓ′テトラヒトｍｌ）及びＨ ＯＡｃ　（１０ｍｌ）溶液を、ラネーニッケル（３ｇ、酢酸で洗浄したもの）存 在下、５０　ｐｓｉ、　４５℃で６時間水素化した。前記の触媒を濾過により除 去し、溶媒を真空下で除去して油状の７　（２，３ｇ、　１００％）を得た。シ リカゲルカラムのクロマトグラフィー（２％ＭｅＯＨを含むＣＨＣｌ、溶液）に より精製して、油状の７を得た。

６−（アセトキシメチル）−１，１−（エチレンジオキシ）−７−［１’−（エ トキシカルボニル）プロピル１−５−オキソ−Δ６０′−テトラｍｌ）に加えた 冷却溶液を、ＮａＮ０ｔ　（１，８ｇ、２６ｍｍｏｌ）で処理して、該反応混合 物を０℃で２時間攪拌した。無機塩を濾過により除去して、室温、真空下で溶媒 を除去後、油状のＮ−ニトロソ中間体８を得た。化合物８を四塩化炭素中で一晩 還流することにより、直接、上記表題のアセトキシ化合物且に転化させた。前記 の溶液を水で洗浄して、乾燥（ＮａｔＳＯ４）後、溶媒を真空下で除去して油状 の９　（２，３ｇ５１００％）を得た。

１．１’エチレンジオキシ−５−オキソ−（５′−エチル−５′−ヒドロキシ− ２’　Ｈ，５’　Ｈ，６’　Ｈ−６−オキツビラノ）−［３’　、４’　−ｆｌ −Δ１１１′−テトラヒドロインドリジン（化合物１０）６−（アセトキシメチ ル）−１，１−（エチレンジオキシ）−７−［１’　−エトキシカルボニル）− プロピル］−５−オキソ−Δ″）テトラヒドロインドリジン（化合物９，４０５ ｍｇ、　１．０７ｍｍｏｌ）　、無水に、ＣＯｔ（１４８ｍｇ　、　１．０７ｍ ｍｏｌ）及びメタノール（７，５ｍ１）の混合物に酸素を２４時間通気した。該 溶液を水浴で冷却して、ｔ　Ｎ　ＨｔＳＯａの添加により酸性（９８２〜４）に した。メタノールの大部分を室温真空下で除去して、水（２０ｍｌ）を添加した 。該水性溶液をＣ）ｆｔｃＩｚ　（３Ｘ２０ｍ１）で抽出後、乾燥ＣＮａｔＳ０ ４）　シて、蒸発させて固形物を得、次にこれをＣＬＣ＋、−へキサンから結晶 化させて籾を２８０ｍｇ　（８５％）得た。融点１７９−１８１℃；　シｍ−ｗ 　（ＣＨＣｌｔ）＋７４０．１６６０　ｃｒ’　：　’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＣＣ１ｉ ）δ０．９１　（ｔ、　３．　Ｊ＝７　）１ｚ。

Ｃ，Ｈ２ＣＯ２）、　１．７５　（ｑ、　２．　Ｊ＝７　Ｈｚ、　ＣＨｔＣｌｔ ）、　２．３５　（ｔ、　２．　Ｊ＝６．５Ｈｚ、　Ｃ）（、ａ　ｔｏ　ｋｅｔ ａｌ）、　４．１　（ｍ、　６．０ＣＨｔＣ）ｌｔｏ及びＣＨｔＮ）。

５．３０　（ｍ、　２．　ＡｒＣＨ＊Ｏ）、　６．８７　（ｓ、　１．　ピリド ン）。元素分析、Ｃ＋５Ｈ１７ＮＯ，として計算値：　Ｃ，５８，６３；　Ｈ， ５，５４；　Ｎ、　４．５６、測定値：　Ｃ，５８，７２；　Ｈ，５，６８；　 Ｎ、　４．５７゜５’　Ｒ５−１，５−ジオキソ−（５′−エチル−５′−ヒド ロキシ−２’　Ｈ，５’　Ｈ，６’　Ｈ−６−オキツビラノ）−［３’　４’　 、ｆｌ−Δ１０）テトラヒドロインドリジン（化合物１１）１０　（３，８８ｇ 、　１２．６ｍｍｏｌ）の２　Ｎ　ＨｔＳＯａ　（５０ｍｌ）及びＤＭＥ（５０ ｍｌ）中溶液を窒素下で２４時間加熱した。該反応混合物を真空下で体積が半分 になるまで濃縮して、）ＩｔＯ（１００ｍ１）で希釈してＣＨｔＣｌｔ　（５ｘ ５０ｍｌ）で抽出した。有機相を乾燥（ＮａｔＳＯ４）　して、固形物を得、こ れをＣＩ（ｔｃｌｔ−へキサンから結晶化させて明褐色の固体状（７）１１を２ ．６８ｇ　（８０％）得た。融点１８５−１８７℃ニジ、、、　（Ｃ）ｔｃｌｔ ）　１７５０　（肩、ケトン）　、１７４５　（ラクトン’）　、１６６０ｃｍ −’　（ピリドン）　；　ＩＨ−ＮＭＲ（ＣＤＣｂ）　δ０．９１　（ｔ、　３ ．　Ｊ＝７　Ｈｚ。

ＣＨＩＣＨｌ）、　１．８０　（Ｑ、　２．　Ｊ＝７　Ｈｚ、　ＣＨｔＣＨｌ） 、　２．９３　（ｔ、　２．　Ｊ＝６．５Ｈｚ、　ＣＨｚＣ＝０）、　４．３０ 　（ｔ、　２．　Ｊ＝６．５　Ｈｚ、　ＣＨｔＮ）、　５．３５　（ｍ、　２゜ ＡｒＣ）ｌｚＯ）、　７．１７　（Ｓ、　１．芳香環のＨ）。元素分析、Ｃ＋５ Ｈ１７ＮＯｓとして計算値：　Ｃ，５９，３２；　Ｈ，４，９４；　Ｎ、　５． ３２、測定値：Ｃ。

５９．１２　：　Ｈ，４，９１；　Ｎ、５．１６゜カンブトセシンアナローグの 合成 １１−ヒドロキシ−２０（Ｒ３）−カンブトセシン及び１１−ヒドロキシ−２０ （Ｓ）−カンブトセシンの合成１１−ヒドロキシ−２０（ＲＳ）−カンプトセシ ン及び１１−ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カンブトセシンは、１１−メトキシ−２ ０（１？ｓ）−及び１１−メトキシ−２０（Ｓ）−カンプトセシンを下記のよう に臭化水素酸で脱メチル化することにより調製される：１■−メトキシー２０　 （ＲＳ）−カンブトセシン及び１１−メトキシ４−メトキシ−２−アミノベンズ アルデヒド（１８０ｍｇ、　１．１９１１０１０１）及び三環式ケトン１１　（ ３００ｍｇ、　１．１４ｍｍｏｌ）の混合物のトルエン（１８ｍｌ）溶液をディ ーンスターク型トラップ管を接続したフラスコ中で、窒素下で加熱した。ｐ−） ルエンスルホン酸（５ｍｇ）を還流下で添加して、得られた赤褐色の溶液を更に ２時間加熱した。トルエンを減圧下で除去して褐色の固体を得、これを水（１０ ｍｌ）及びクロロホルム（２０ｍｌ）で処理した。水相を更にクロロホルム（３ Ｘ２０ｍｌ）で抽出し、抽出物を合わせて乾燥（Ｎａ、ＳＯ，）　した。蒸発し て得られた褐色の固体をメタノール−クロロホルムから再結晶して黄褐色の固体 状の化合物を２１６ｍｇ　（５０９６）得た。２７５−２７９℃；マススペクト ル（を子衝撃）。

１１１／Ｚ　３７８．１２１９　Ｍ”　：　Ｃｔ＋）Ｉ＋５ＮｚＯｓは３７８． １２１４を要する；　ｌ’　１１１１＋１（ＫＢｒ）　３４８０　（ＯＨ）、１ ７４５　（ラクトン）、１６６０　（ピリドン）、１６２２゜１２３６及び１１ ５２　ｃｍ−’　；　’Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄａ）δ０．８７　（ｔ、　３ ．　Ｊ＝７Ｈｚ、　Ｈ−１８）、　１．８５　（ｍ、　２．　Ｈ−１９）、　３ ．９５　（ｓ、　３．１ｌ−ＱＣ）ｉｓ）、　５．２４（Ｓ、　２．８−５）、 　５．４２　（Ｓ、　２．８−１７）、　７．３２　（Ｓ、　１．　Ｈ−１４） 、　７．３７（ｄｄ、　１．　Ｊ＝９．２．５　Ｈｚ、　Ｈ−１ｏ）、　７．５ ６　（ｄ、　１．　Ｊ＝２．５　Ｈｚ、　Ｈ−１２）。

８．０２　（ｄ、　１．　Ｊ＝９　Ｈｚ、　Ｈ−９）、　８．６０　（ｓ、　１ ．８−７）。

１１−メトキシ−２０（ＲＳ）−又は１１−メトキシ−２０ＣＳ’）−カンブト セシン（７５ｍｇ）を４８％Ｉ（Ｂｒ水溶液（２，５ｍ１）に混合して、６時間 加熱還流した。得られた赤褐色の混合物の溶媒を高真空下でストリッピングした 。残留物をシリカゲル（１５ｇ）（７％ＭｅＯＨ−ＣＨＣ１，）のクロマトグラ フィーにかけたところ１１−ヒドロキシ化合物（３３ｍｇ、　４５％）が得られ 、次にこれを更に１３％ＭｅＯＨを含むＣＨＣｌ　ａ溶液で再結晶することによ り精製した。融点３２３−３２６℃；マススペクトル（電子衝撃）、　ｍ／ｚ　 ３６４．１０５４　Ｍ”　；　Ｃｚ。

ＨｌｓＮｔＯｓは３６４．１０５９を要する；　ｖ−、、（ＫＢｒ）　３４５０ ．１？４２゜１６５４、１６１３．１５９２．１５７０．１２４５　ａｍ　”　 ：　ｖ、、、（ＥｔＯＨ）、　２２４（ｌｏｇε４．５ｇ）、　２５９．　（４ ，３９）、　３５３　（４，１６）、　３７１　（４，１９）、　３８７（４， ２０）　；　’Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄｓ）　：　δ０．８８　（ｔ、　３． 　Ｊ＝７　Ｈｚ、　Ｈ−１８）。

１．８５　（ｍ、　２．８−１９）、　５．２０　（Ｓ、　２．　）Ｉ−５）、 　５−４１　（Ｓ、　２．　Ｈ−１７）。

６．５１　（ｂｒ　ｓ、　１．０Ｈ−２０）、　７．２６　（ｄｄ、　１．４＝ ９．２．５　Ｈｚ、　Ｈ−ｔｏ）。

７．２８　（Ｓ、　１．　）ｌ−１４）。

これらの化合物は、上記の１１−ヒドロキシカンブトセシンの合成と類似した方 法で、５−メトキシ−２−アミノベンズアルデヒドを三環式ケトン１１とｐ−ト ルエンスルホン酸存在下で反応させることにより調製される。生成物は１０−メ トキシ−２０（ＲＳ）−又は１０−メトキシ−２０（Ｓ）−カンブトセシンであ り、これらは上記の１１−ヒドロキシーカンブトセシンについて述べたように臭 化水素酸で還流処理すると、ｌＯ−ヒドロキシ−２０（ＲＳ）−及びｌＯ−ヒド ロキシ−２０（Ｓ）−カンブトセシンが得られる。

上記の１１−メトキシ−２０（ＲＳ）−及び１１−メトキシ−２０Ｃ３）−カン ブトセシンの合成方法と類似した方法で、６−メドキシー２−アミノベンズアル デヒドを三環式旦ケトンでｐ−トルエンスルホン酸存在下で処理して、９−メト キシ−２０（Ｒ３）−及び９−メトキシ−２０（Ｓ）−カンブトセシンを得た。

臭化水素酸で脱メチル化することにより９−ヒドロキシ−２０（ＲＳ）−及び９ −ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カンブトセシンを得た。

２−アミノ−５−ニトロベンズアルデヒド（９５ｍｇ、　０．５７ｍｍｏｌ）及 び三環式ケトン１１　（１５０ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）の混合物を、　１２０ ℃で１０分間加熱した。温度を１６０℃に上げ、その黒ずんだ溶融状態のかたま りを、時々攪拌しながらその温度のままで１．５時間保持した。残留物を０．５ ％メタノールを含むＣ）ＩＣＩ、溶液を用いるシリカゲル（２０ｇ）のクロマト グラフィーにかけ、黄色の固体状の上記表題の化合物（１０８ｇ）を得た。融点 ２９７−３００°Ｃ（分解）；マススペクトル（電子衝撃）　、　ｔｔｒ／ｚ　 ３９３−０９６５　Ｍ”：ＣｔａＨ＋−ＮｘＯ−は３９３．０９６０を要する； 　ｖ、、、　（ＫＢｒ）　３４５０　（ＯＨ）。

１７４５　（ラクトン）、　４６６０　（ピリドン）、　１６２０．１３５０及 び１１６０ｃｍ”　；　’）ｌ−ＮＭＲ（ＴＦＡ−ｄ）δ１．１４　ｃｔ、　３ ．　Ｊ＝７　Ｈｌ、　Ｈ−１８）、　２．１５（ｍ、　２．　Ｈ−１９）、　５ ．８８　（ｓ、　２．８−５）、　５．６８　（Ａｂｑ、　２．　Ｊ＝１７　Ｈ ｚ。

Δｙ□８５　Ｈｚ、　）ｌ−１７）、　８．４３　（ｓ、　１．　Ｈ−１４）、 　８．７０　（ｄ、　２．　Ｊ＝８　Ｈｚ。

Ｈ−１２）、　９．０５　（ｄ、　２．　Ｊ＝８　Ｈｚ、　Ｈ−１１）、　９． ３５　（ｓ、　１．　Ｈ−９）、　９．６０（Ｓ、　１．　Ｈ−７）。

ｌＯ−アミノ−２０−（ＲＳ）−及びＩＯ−アミノ−２０（Ｓ）−カンブトＩＯ −二トロー２０（ＲＳ）−又はｌＯ−二トロー２０　（Ｓ）−カンブトセシン（ １００ｍｇ）と１０％Ｐｄ／Ｃ（４０ｍｇ）との無水ＥｔＯＨ（４０ｍｌ）中懸 濁液を水素雰囲気下、室温で３０分間攪拌した。セライトを通して濾過して、減 圧下で溶媒を除去したところ、黄褐色の固体（８６ｍｇ粗生成物）を得た。１３ ％ＭｅＯ）（／ＣＨＣｌ＊で再結晶して淡黄緑色の固体状の純粋な生成物（３０ ｍｇ）を得た。融点、１３５℃で軟化し、さらに加熱するとしだいに黒化した； マススペクトル（を子衝撃）　、　ｍ／ｚ　３６３．１１６　Ｍ”　；　Ｃｔｏ Ｈ＋ｔＮｓＯａは３６３．１２１８を要する；ν、、、　（ＫＢｒ）　３４４０ 　（０１（、Ｎｕ）　１７５０　（ラクトン）、　１６６０（ピリドン）　ｃｍ −’、’Ｈ−ＮＭＲ（ＴＦＡ−ｄ）δ　１．０６　（ｔ、　３．　Ｊ＝７　Ｈｚ 。

Ｈ−１８）、　２．０８　（ｄ、　Ｊ・７　Ｈｚ、　Ｈ−１７）、　５．８９　 （ｓ、　２．　）ｌ−５）、　５．７０（Ａｂｑ、　２．　Ｊ＝１７　Ｈｚ、Δ ７＝８５　Ｈｚ、　Ｈ−１７）、　８．３４　（ｄ、　Ｊ＝９　Ｈｚ、　Ｈ−１ ２）、　８．６４　（ｄ、　Ｊ＝９　Ｈｚ、　）ｌ−１１）、　９．２６　（ｓ 、　１．　Ｈ−（）、　９．４３　（ｓ。

１、８−７）。

２−アミノ−６−ニトロベンズアルデヒドの混合物を上記の１０−二トロ化合物 について説明したのと同様の方法で三環式ケトン１１で処理して、９−ニトロ− ２０（ＲＳ）−及び９−ニトロ−２０（Ｓ）−カンブトセシンを得る。この化合 物から、パラジウム／炭素で還元した後、９−アミノ−２０（ＲＳ）−及び９− アミノ−′２０（Ｓ）−カンブトセシンを得た。前記の方法の代わりに、２．６ −ジアミノベンズアルデヒドとケトン１１とを反応させることにより１工程で９ −アミノ化合物を得ることもできる。

１１−ニトロ−２０（ＲＳ）−及び１１−ニトロ−２０Ｃ５’）−カンプトセシ ン；１１−アミノ−２０（ＲＳ）−及び１１−了ミノー２０　（Ｓ）−カンブト セシン 上記の１０−二トロー２０（ＲＳ）−及びｌＯ−二トロー２０　（Ｓ）−カンプ トセシンについて説明のと同様の方法で、２−アミノ−４−二トロベンズアルデ ヒドの混合物を三環式ケトン１１で処理して、ｌ！−二トロー２０（１？Ｓ）− 及びＩＩ−二トロー２０　（Ｓ）−カンブトセシンを得た後、パラジウム／炭素 で還元して、１１−アミノ化合物カンブトセシンが得られる。前記の方法の代わ りに、２，４−ジアミノベンズアルデヒドとケトン１１とを反応させることによ り１■−アミノ−２０（ＲＳ）−又は１１−アミノ−２０（Ｓ）−カンブトセシ ンが得られる。

１０．１１−ジヒドロキシ−２０−（ＲＳ）−及び１０．１！−ジヒドロキシ＝ ２０　（Ｓ）−カンブトセシン 粗ベンゾイルオキシアミノアセタール（４００ｍｇ）及び三環式ケトン１１　（ １３２ｍｇ、０．５ｎｏｎｏｌ）のトルエン（６０ｍｌ）溶液を８時間還流した 。熱濾過して、冷却して純粋なジベンジルエーテル゛を採取した（　２００ｍｇ 、　８１％ン。融点２７６°Ｃ，ν、、、　（ＫＢｒ）　３４４０゜１？４０． 　＋６５０．１５９０．１４９０．１４４０．１３８０．１２５０．１１４０． １１００　ａｍ−’：　２５０　ＭＨｚ　’Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ、）δ０ ．８８　（ｔ、　３．　Ｊ＝７　Ｈｚ、　）ｔ−１８）。

１．８６　（ｍ、　２．　Ｈ−１９）、　５．２２　（ｓ、　２．８−１７）、 　５．３４　（ｓ、　２．１Ｏ−ＨＣｌ２（ｓ、１．　０Ｈ）、７．２５　（ｓ 、１．　Ｈ−１４）　７．３５−７．６５　（ｍ、１２．　Ｈ−９，１２゜−Ｏ ＣＨｇ−ＣＪｓ）、　８．４４　（ｓ、　１．　Ｈ−７）、元素分析、Ｃ−ａＨ ｔａＮｘＯ−として計算値：　Ｃ，７２，８４、Ｈ，５，０３、Ｎ、　５．００ 　、測定値：Ｃ９７２，９１；　Ｈ，５，０９；　Ｎ、４．９６゜得られたジベ ンジルエーテル（１３０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を２４％ＨＢｒ　（５０ｍｌ ）中で穏やかに２時間還流した。核酸を除去後、残留物を熱メタノール（５０ｍ ｌ）に溶解した。エーテル（５０＋ｎｌ）を室温で添加して、黄色の粉末状のジ ヒドロキシカンブトセシン臭化水素塩を収集した（　１２２ｍｇ、７７％）；融 点〉３００℃。ν１．１（ＫＢｒ）　３４００　（ｂ）、　１７４０．１６５５ ．１５８５．１５４５．１５１０．１３９５．１３００゜１２７０、１２００． １１６０　ａｍ　”　；　’Ｉ（−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ，ｄｉ）　：　δ０．８８ 　（ｔ。

３、　Ｊ＝７　Ｈｚ、　Ｈ−１８）、　１．８５　（ｍ、　２．　Ｈ−１９）、 　５．２０　（ｓ、　２．　Ｈ−１７）。

５．４２　（Ｓ、　２．　Ｈ−５＞、　７．３１　（Ｓ、　２．　Ｈ−９，８− １４）、　７．４０　（Ｓ、　ｌ、　Ｈ−１２）、　８．４５　（ｓ、　１．　 ）ｌ−７）　、元素分析、ＣｔＪ＋ＪｒＮｚＯｓ　・０．５ＨｔＯとして計算値 ：　Ｃ，５１，０８；　Ｈ，３，８６；　Ｎ、　５．９５　；　３ｒ、　１６． ９９、測定値：　Ｃ，５１，０９；　Ｈ，４，０４；　Ｎ、　５．７８３ｒ、　 １６Ｊ３゜ジヒドロキシ臭化水素塩を（１１０ｍｇ、０．２３ｍｍｏυを水（ｆ ＯＩＩＩｌ）に懸濁した。水酸化ナトリウム（０，ＩＮ　、７．２　ａｌｌ）を 添加して、該混合物を攪拌した。得られた透明な溶液を５ＮＨＣ１で酸性にした ＝１時間後、該試料を遠心分離機にかけて、上澄み液をデカンデージョンにより 流し出して、水（２０ｍｌ）を添加して同様の操作を繰り返した。得られた残留 物を乾燥した（７８ｍｇ、７４％）。

融点〉３００℃。ｖ、、、　（ＫＢｒ）　３４９０．３０００　（ｂ）、　１７ ４０．１６４５゜１５９０、１４６０．１３８５．１２６５．１１９０．１１５ ０　ｃｍ　−＋、’Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ。

ｄ、）：　δ０．８８　（ｔ、　３．　Ｊ＝７　Ｈｚ、　ｆ（−１８）、　１． ８７　（ｑ、　２．　）ｆ−１９）。

５．２０　（Ｓ、　２．　Ｈ−１７）、　５．４２　（Ｓ、　２．８−５）、　 ７．３５　（Ｓ、　１．８−１４）。

７．４４　（ｓ、１．　Ｈ−９）、　７．５２　（ｓ、１．　Ｈ−１２）、　８ ．５１　（ｓ、１．　Ｈ−７）。

元素分析、Ｃ１゜Ｈ３ｓＮｚＯｓ・ｏ、　７５ＨｔＯとして計算値：　Ｃ，６１ ，０６；Ｈ，４，４４；　Ｎ、　７．１２　、測定値：　Ｃ，６１，１２；　Ｈ ，４，４４、Ｎ。

７．０９゜ １０−クロロ−２０−（ＲＳ）−及びｌＯ−クロロ−２０（Ｓ’）−カンブト竺 乞２ これらの化合物は、５−クロロ−２−アミノベンズアルデヒドを三環式ケトン１ １で処理することにより調製された。

５−クロロ−２−アミノベンズアルデヒド（８０ｍｇ、０．５Ｉ鮒ｏｆ）及び三 環式ケトン１１　（１００ｎ＋１．０．３＆＋＋＋ｍｏｌ）のトルエン（６０ｍ ｌ）溶液を１５分間還流した。次に、ｐ−トルエンスルホン酸（１０＋＋＋ｇ） を添加して、更に５時間還流を続けた。溶媒を真空下で除去した後、残留物をク ロマトグラフィーにかけた（シリカゲル６０．２％ＭｅＯＨ／　ＣＨＣｌ５　） 　。得られた生成物をＣＨＣＩｓ−ＭｅＯＨ−ＥｔＯＡｃで再結晶した：融点２ ７０℃、６０ｍｇ　（４１％）　０　！／＋ｍａｘ　（ＫＢｒ）、　３４３０゜ １？４５．１６５５．１６００．１４９５．１２３０．１１６０　ｃｍ　”。２ ５０　ＭＨｚ　’Ｈ−ＮＭＲ（ＴＦＡ−ｃＬ）δ１．１５　ｃｔ、　３．　Ｊ＝ ７　Ｈｚ、　Ｈ−１８）、　２．１６　（＋ｏ、　２．８−１９）。

５．７３　（ＡＢＱ、　２．　Ｊ＝１７　Ｈｚ、△γ１１８５　Ｈｚ、　Ｈ−１ ７）、　５．８４　（ｓ、　２．　Ｈ−５）。

８．２９　（ｄ、　１．　Ｊ＝９　Ｈｚ、　Ｈ−１１）、　８．３５　（ｓ、　 １．　）ｌ−１４）、　８．４０　（ｓ、　１゜Ｈ−９）、　８．４５　（ｄ、 　１．　Ｊ＝９　Ｈｚ、　Ｈ−１２）、　９．３１　（ｓ、　１．　Ｈ−７）　 、元素分析、Ｃ２゜Ｈ，５ｅｔＮ、Ｃ４・０．５Ｈ，０として計算値：　Ｃ，６ １，４７；　Ｈ。

４．１２　、　Ｎ、　７，１７７　Ｃ１，９，０７、測定値：　Ｃ，６１，４１ ；　Ｈ，４，１２；　Ｎ、　７．１２　、　Ｃ１，９，１１０１０−メチル−２ ０−（ＲＳ）−及びｌＯ−メチル−２０（Ｓ）−カンブト竺２乞 ５−メチル−２−アミノベンズアルデヒドを三環式ケトンＵで処理することによ り上記の表題の化合物が得られた。

三環式ケトン１１　（１３０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）及び５−メチル−２−アミ ノベンズアルデヒド（５６０ｍｇ）のトルエン（６０ｍｌ）溶液を０．５時間還 流した。酢酸（１ｍｌ）及びｐ−トルエンスルホン酸（３５ｍｇ）を添加して、 更に５時間還流を続けた。溶媒を真空下で除去した後、残留物を温エタノール（ ３０ｍｌ）を用いて粉砕した。生成物をクロロホルム−メタノール−エーテルで 再結晶して、純粋な化合物を得た（　１０２ｍｇ、　５７％）。融点２７８−２ ８０℃。

λ””　（ＫＢｒ）　３４６０．２９８０．１？４０．１６５５．１５９０．１ ５５０．１４７０゜１４５０、１３７０．１２６０．１２４０．１１６０．１０ ５０　ＣＱＩ−’。２５０　ＭＨｚ　’Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ＠）δ０．８ ９　（ｔ、　３．　Ｊ＝７　Ｒ２，Ｈ−１８）、　１．８７　（ｑ、　２．　Ｈ −１９）。

２．５４　（ｓ、　３．１０−　ＣＨｓ）、　５．２４　（ｓ、　２．　Ｈ−１ ７）、　５．４２　（ｓ、　１．　Ｈ−５）。

７．３１　（Ｓ、　１．　Ｈ−１４）、　７．６９　（ｄ、　１．　Ｊ＝８．６ 　Ｈｚ、　）Ｉ−１１）、　７．８６　（Ｓ。

１、　Ｈ−９）、　８．０５　（ｄ、　１．　Ｊ＝８．６　Ｈｚ：　）ｌ−１２ ）、　８．５５　（ｓ、　１．　Ｈ−７）。

元素分析、ＣｔｒＨｌ−ＮｘＯａ・０．２５ＨｔＯとして計算値：　Ｃ，６８− ７５。

Ｈ，５，０８；　Ｎ、　７．６４　、測定値：　Ｃ，６Ｂ、７４　；　Ｈ，５， ０８；　Ｎ。

７．６４゜ １１−ホルミル−２０（Ｒ３）−及び１１−ホルミル−２０（Ｓ）−カンブトセ シン ２−ニトロテレフタルジカルボキシアルデヒドを通常の方法でエチレンジアセタ ールに転化させて、ＮａｔＳを用いて還元した。

該ニトロジアセタール（４，１ｇ、　１７．５ｍｎｏｌ）　、ＮａｔＳ　（１４ ｇ）を８０％エタノール（１５ｍｌ）に溶かした溶液を１時間還流した。工タノ ールを真空下で除去した後、該反応混合物を水（１０ｍｌ）で希釈して、水相を ＣＨｚＣ１＊　（４Ｘ５０１１１１）で抽出した。有機相を水で洗浄後、乾燥（ ＭｇＳＯ４）して、蒸発させてアミノジアセタールを得、これをエチルアセテー ト−ヘキサンで再結晶した（２．８ｇ１７８％）。融点７６℃。ν１１、（ＫＢ ｒ）　３４８０．３３９５．３０００゜２９６０、２９００．１６２５．１４４ ５．１３９５．１０８５．９５０　ｃｔａ−’。６０　ＭＨｚ’）ｌ−ＮＭＲ（ ＣＤＣＩ−−ＤｔＯ）δ４．０　（ｍ、　８．−０ＣｊｊｚＣ！１ｔＯ−）、　 ５．６　（ｓ、！。

−０−Ｃ！１ｔ−０−、Ｃ−４）、　５．７　（ｓ、　１．−０−Ｃ１ｊｔ−０ −、Ｃ−１）、　６．６　（ｓ、　１゜Ｈ−３）、　６．６５　（ｄ、　ｌ、　 Ｊ＝８　Ｈｚ、　Ｃ−５）、　７．２　（ｄ、　１．　Ｊ・８　Ｈｚ、　）（− ６）。

元素分析、Ｃ＋　ｔＨ＋　５Ｎ０４として計算値：　Ｃ，６０，６６；　Ｈ，６ ，３６。

Ｎ、　５．９０　、測定値：　Ｃ，６０，７９；　Ｈ，６，４１、Ｎ、　５．８ ４゜三環式ケトン１１　（２６５ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）　、アミノジアセター ル（５００ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ、最初に３００ｍｇ、５時間後、１０時間後に それぞれ１００ｍｇを添加）のトルエン（７０ｍｌ）溶液を０．５時間還流した 。酢酸（２ｍｌ）を添加して、１８時間還流を続けた。前記の溶媒を真空下で蒸 発させて、残留物を７５％メタノール（２５０ｍｌ）中に集めた。濃ＦＩＣＩ　 （３ｍｌ）を添加して、該反応混合物を５０〜６０°Ｃで２４時間加熱した。該 混合物を濾過後、残留物を水で洗浄して、ＣＨＣｌ、　−ＭｅＯＨ−ＥｔＯＡｃ で再結晶した。融点：　２７６−２７９°Ｃ（１７５ｍｇ、　４５％）。ν、、 、　（ＫＢｒ）　３４６０．１７４５．１６９０．１６５５゜＋６００．１２０ ０．１１５０．　ｔ１３５　ｃｍ　”。２５０　ＭＨｚ　’Ｈ−ＮＭＲ（ＴＦＡ −ｄυ。

δｆ、１６　ｃｔ、　３．　Ｊ＝７　Ｈｚ、　Ｈ−１８）　２．１６　（Ｑ、　 ２．　Ｊ＝７　Ｈｚ、　Ｈ−１９）。

５．７８　（ＡＢｑ、　２．　Ｊ＝１８　Ｈｚ、Δ７＝８５　Ｈｚ、　Ｈ−１７ ）、　５．８９　（ｓ、　２．　Ｈ−５）。

８．４３　（ｓ、　１．　Ｈ−１４）、　８．６６　（ｄ、　１．　Ｊ＝８．５ 　Ｈｚ、　Ｈ−１０）、　８．６０　（ｄ。

１、　Ｊ＝８．５　Ｈｚ、　Ｈ−９）、　９．１２　（ｓ、　１．１（−１２） 、　９．４９　（ｓ、　１．　ｆ（−７）。

値：　Ｃ，６４，０１；　Ｈ，４，５６；　Ｎ、　７．１１　、測定値：　Ｃ， ６４，０８；Ｈ，４，２１、Ｎ、６．８４゜ １１−ホルミル−２０（ＲＳ）−又は１１−ホルミル−２０（Ｓ）−カンブトセ シン（２２５ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）　、塩酸ヒドロキシルアミン（５０ｍｇ、 　０．７２ｍｍｏｌ）　、ギ酸ナトリウム（９０ｍｇ、１．３ｉｍｏｌ）　、及 びギ酸（６ｍｌ）の混合物を１．５時間還流した。前記の混合物を真空下で蒸発 乾固させた後、残留物を水で洗浄して乾燥し、クロマトグラフィーにかけ（シリ カゲル６０．　０．５％ＭｅＯＨ−ＣＨＣＩｓ　）、ＣＨＣｌ＊　ＥｔＯＡｃで 再結晶して１１−シアノ化合物を得た（６５ｍｇ。

２９％）。融点２８８℃、　ｖ、、ｌｌ（ＫＢｒ）　３４００．２２３５．１７ ３５．１６５５゜ｆ５９０．１４５０．１４００．１２３０．１１５０．１１１ ０．１０４５　ｃｍ−’。２５０　ＭＨｚ’Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄａ）　： δ０．８８　（ｔ、　３．　Ｊ＝７　Ｈｚ、　Ｈ−１８）、　１．８８　（ｍ。

２、　Ｈ−１９）、　５．３２　（ｓ、　２．　Ｈ−１７）、　５．４４　（ｓ 、　２．　Ｈ−５）、　７．３７　（ｓ。

１、　Ｈ−１４）、　７．９８　（ｄ、　１．　Ｊ＝８．５　Ｈｚ、　Ｈ−１０ ）、　８．３２　（ｄ、　１．　Ｊ＝８．５Ｈｚ、　Ｈ−９）、　８．７４　（ ｓ、　１．　Ｈ−１２）、　８．８０　（ｓ、　１．　Ｈ−７）　、元素分析、 Ｃｔ＋ＨＩ＊Ｎ５Ｏａ・１．５Ｈ１Ｏとして計算値：　Ｃ，６２，９９、Ｈ，４ ，５２。

Ｎ、　１０．４９、測定値：　Ｃ，６２，９９；　Ｈ，３，９５；　Ｎ、　１０ ．２０゜上記の方法の代わりに、５−シアノ−２−アミノベンズアル化合物を調 製することもできる。

三環式ケトン１１と、置換されたオルト−アミノベンズアルデヒド以外の適切な 前駆体との反応は、これらに限定されるものではないが、下記の実施例に例示の 活性のある新規なカンブトセシンアナローグを得るのに利用することができる。

１０−アザ−２０（ＲＳ）−及びｌＯ−アザ−２０（Ｓ）−カンブトセシ乞 ４−アミノニコチンアルデヒド（２４，２ｍｇ、　０．１９８　＋ｎ＋ｎｏｌ） 　、三環式ケトン１１　（５３，５ｍｇ、０．２０３ｍｍｏｌ）及びｐ　ＴｓＯ Ｈ−ＨＪ　（２ｍｇ）のトルエン（２５ｍｌ）溶液をディーンスタークトラップ 管を用いて４日間還流した。溶媒を減圧下で除去゛して、残留物をＣＨＣｌ、− アセトン−Ｍｅａｌ（（５：　１　：　１）を用いるシリカゲル（２０ｇ）のク ロマトグラフィーにかけた。前記の生成物を１３％ＭｅＯＨを含むＣＨＣｌ　ｓ 及びＥｔＯＡｃの溶液で再結晶した。融点２８９−２９２℃；マススペクトル（ Ｋ子衝撃）　、　ｍ／ｚ　３４９．１０６１　Ｍ”　；Ｃ＋、Ｈ＋５ＮｚＯ−は ３４９．１０６６を要する；ν１８、（ＫＢｒ）　３３２０　（ＯＨ）。

１７３０　（ラクトン）、１６５０　（ピリドン）、　１６００　（芳香環）　 ｃｍ−’　；’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣ１ｉ）δ１．０５　（ｔ、　３．　Ｊ＝７． ３　Ｈｚ、　Ｈ−１８）、　１．９２　（ｍ、　２゜Ｈ−１９）、　５．３５　 （ｓ、　２．　Ｈ−５）、　５．５２　（ＡＢｑ、　２．　Ｊ＝１８　Ｈｚ、Δ γ＝８５Ｈｚ、　Ｈ−１７）、７．７４　（ｓ、　１．　Ｈ−１４）、　８．０ ４　（ｄ、　１．　Ｊ＝５．５　Ｈｚ、　Ｈ−１２）。

８．５３　（ｓ、１．８−７）、　８．８４　（ｄ、　に５．５　Ｈｚ、　Ｈ− １１）、　９．４　（ｓ、　１゜Ｈ−９）。

Ａ−ツアー９−チア−２０（ＲＳ）−及びＡ−ツアー９−チア−２０（Ｓ）−カ ンブトセシン これらの硫黄原子を含有するカンブトセシンアナローグは、３−アミノ−２−ホ ルミルチオフェンと三環式ケトン旦との反応により調製される。

３−アミノ−２−ホルミルチオフェン（７９ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）及　。

び三環式ケトン１１　（９６ｍｇ、　０．３７ｍｍｏｌ）のトルエン（１，５ｍ １）溶液を還流に供し、次に冷却して、ｐ−トルエンスルホン酸の結晶を添加し た。前記の混合物を窒素下で２．５時間還流し、冷却して得られた沈澱物を濾過 した。得られた粗生成物をシリカゲル（２０ｇ　”）のクロマトグラフィーにか け、２％ＭｅＯＨを含むＣＨＣｌ。

溶液で溶出した。１３％ＭｅＯＨ−ＣＨＣＩ　ｓ及びＥｔＯＡｃから生成物を結 晶化させ、黄色の固体状の上記表題の化合物を得た（１９ｍｇ、　１５％）。

融点２９７−２９８℃ニジ、、ｗ１７４０　（ラクトン）＋　１６５５　Ｃｍ− ’（ピリドン’）　；　’Ｈ−ＮＭＲ（ＴＦＡ−ｄ、）　：　δ　１．０５　（ ｔ、　３．　Ｊ＝７　Ｈｚ、　Ｈ−１８）。

２．０７　（ｑ、　２．　、Ｉ＝７　Ｈｚ、　Ｈ−１９）、　５．６０　（ｍ、 　２．　Ｈ−１７）、　５．６５　（ｓ、　２゜８−５）、　７．８９　（ｄ、 　Ｊ＝６　Ｈｚ、　Ｈ−１１）、　８．０５　（ｓ、　ｌ、　Ｈ−１４）、　８ ．５７　（ｄ。

Ｊ＝６　）１ｚ、　［（−１０）、　９．２３　（Ｓ、　１．８−７）。元素分 析、（Ｃ＋−１４＋４ＮｔＯａＳ）、計算値：　Ｃ，６１，０２；　Ｈ，３，９ ５；　Ｎ、　７．９１　、測定値二　Ｃ９６０，６５；　Ｈ，４，０１；　Ｎ、 ７，７８゜必要となるオルト−アミノアルデヒドは、２−ニトロピベロナールを 還元することにより調製された。この化合物（６０ｍｇ。

０、３６ａ＋ｍｏｌ）及び三環式ケトン１１　（５３ｍｇ、　０．２０ｍｍｏｌ ）をｐ−ＴｓＯＨ・Ｈｌｏ　（８ｍｇ）を含有するトルエン（３０ａ＋１）中で ８時間還流した。

溶媒を真空下で除去して、赤色の残留物をセライト（Ｉｇ）上に吸着させ、３％ ＭｅＯＨを含むＣＨＣｌ５溶液を用いるシリカゲル（１０ｇ）のクロマトグラフ ィーにかけた。適当な分画を採取することにより淡黄褐色の固体状のｉｏ、ｔｉ −メチレンジオキシ化合物（３６ｍｇ　、４５％）を得た。この生成物をＣＨＣ ｌ、で結晶化させて、黄みを帯びた白色の固体状の分析用の試料を得た。融点〉 ２５０’Ｃ（分解）　；　ｖ−、、（ＫＢｒ）　１７５０　（ラクトン）、＋６ ５５（ピリドン）。

１５８５　ｃｍ　−’　（芳香環）　；　’Ｈ−ＮＭＲ（ＴＦＡ−ｄ、）δ１． １５　ｃｔ、　３．　Ｊ＝７ｔ（ｚ、　Ｈ−１８）、　２．１６　（ｑ、　２． 　Ｊ＝７　Ｈｚ、　Ｈ−１９）、　５．７６　（ＡＢｑ、　２．　Ｊ＝１７Ｈ２ ，△７＝８５　Ｈｚ、　Ｈ−１７）、　５．７３　（ｓ、　２．８−５）、　６ ．４４　（ｓ、　２゜０ＣＲ２０）、　７．５５　（ｓ、　１．　Ｈ−１４）、 　７．６９　（ｓ、　１．８−９）、　８．１６　（ｓ、　Ｉ。

Ｈ−１２）、　９．０５　（Ｓ、　Ｉ、　Ｈ−７）　、元素分析、Ｃ２１Ｈ３− Ｎ２０ａとして計算値：　３９２．１００８　、測定値：　３９２．１００９　 （Ｃ，、Ｈ，、Ｎ、０．・１．０　）１２０）。

１０ｉ１−メチレンジオキシ−２０（ＲＳ）−及び１０．　ＩＩ−メチレンジオ キシ−２０（Ｓ）−カンブトセシンナトリウム塩上記表題の化合物は、　ＩＱ、 １１−メチレンジオキシ−２０（ＲＳ）　−カンブトセシン（参照：　Ｗａｎｉ 　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、　Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｍ、　２９゜２３５８　（１９８６ ））から水酸化ナトリウムの加水分解作用により調製した。即ち、　１０．１１ −メチレンジオキシ−２０（ＲＳ）〜又は１０．１１−メチレンジオキシ−２０ （Ｓ）−カンブトセシン（７７ｍｇ、０．１９４ｍｍｏ１）を９０％メタノール 水溶液（３０ｍｌ）に懸濁し、０．ＩＮ水酸化ナトリウム水溶液（１，９４ｍ１ ．０．１９４ｍｍｏｌ）で処理した。窒素下で、５０〜６０°Ｃて１時間加熱し て透明な溶液を得た後、周囲温度に冷却して、蒸発乾固させた。残留物を蒸留水 （２ｍｌ）に溶解し、濾過（０，４５ミクロンの膜）して、得られた溶液を蒸発 させた。残留物をエタノール／エーテル溶液で再結晶させて、淡黄色の固体を得 た（５３ｍｇ、６５％）；融点〉３００°Ｃ；　ＩＲνｌ１ａｘ（ＫＢｒ）　３ ４００．　（ｂｒ）、２９７０．　２９２０．　１６４０．　１６１０．　１５ ６０−１５８０゜１４９７、　１４６６、　１３７０．　１２４６．　１２２５ ．　１１８３．　１０３０．　１０００．　９４７．　８５５゜８１０、７６１ ．７０８　及び５６０−５８０　；　’Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄｓ）６０．８ ５ｃｔ、３．　Ｊ＝７　Ｈｚ、Ｈ−１８）、２．０９　（ｍ、２．　Ｈ−１９） 、４．７４　（ＡＢｑ、２゜Δ７＝６８　Ｈｚ、Ｊ＝１２．　４　Ｈｚ、Ｈ−１ ７）、５．１２　（ｓ、２．　Ｈ−５）、５．６４（ｄｄ、１．　Ｊ　４．　７ 　Ｈｚ、１７−０Ｈ）、６．１７　（ｓ、１．２Ｏ−ＯＨ）、７．４７　（ｓ。

１、Ｈ−１４）、７．５４　（ｓ、１．　Ｈ−９）、７．６２　（ｓ、Ｉ、Ｈ− １２）、８．４１　（ｓ。

１、　８−７）。

上述した教示に鑑みて、本発明の多数の改作及び様々な変形が可能であることは 明らかである。それゆえ、添付の請求の範囲内で、ここで具体的に記載した以外 の態様でも本発明を実施することができるということが理解される。

ノーｒｃ、グＡ　（ｃｔ） ＦＩＣ：、ｊＡ（ｂ） ＦＩＣ：、グＢ 国際調査報告 °＋″＋−°′″′″””−”’−’　ｏ、ｅ＝／ｎｃＯｎ／ｎ弓ＯＲ＜

Claims (17)

【特許請求の範囲】
1. １．酵素トポイソメラーゼＩを抑制する方法であって、該酵素に９−アミノ２０ （ＲＳ）−カンプトセシン、９−アミノ−２０（Ｓ）、１０−アミノ−２０（Ｒ Ｓ）−カンプトセシン、１０，１１−メチレンジオキシ−２０（ＲＳ）−カンプ トセシン、１０，１１−７メチレンジオキシ−２０（ＲＳ）カンプトセシンナト リウム塩及びそれらの混合物からなる群から選ばれるカンプトセシンの抑制量を 接触させることを含む方法。
2. ２．請求項１の方法であって、前記のカンプトセシンが９−アミノ−２０（ＲＳ ）−カンプトセシンである方法。
3. ３．請求項１の方法であって、前記のカンプトセシンが１０−アミノ−２０（Ｒ Ｓ）−カンプトセシンである方法。
4. ４．請求項１の方法であって、前記のカンプトセシンが１０，１１−メチレンジ オキシ−２０（ＲＳ）カンプトセシンである方法。
5. ５．請求項１の方法であって、前記のカンプトセシンが１０，１１−メチレンジ オキシ−２０（ＲＳ）カンプトセシンナトリウム塩である方法。
6. ６．結腸又は直腸腫瘍を治療する治療学的な方法であって、少なくとも１つの該 腫瘍を有する哺乳類に、９−アミノ−２０（ＲＳ）−カンプトセシン、１０−ア ミノ−２０（ＲＳ）−カンプトセシン、１０，１１−メチレンジオキシ−２０（ ＲＳ）カンプトセシン、１０，１１−メチレンジオキシ−２０（ＲＳ）−カンプ トセシンナトリウム塩及びそれらの混合物からなる群から選ばれるカンプトセシ ンの抗腫瘍有効量を投与することを含む方法。
7. ７．請求項６の方法であって、前記のカンプトセシンが９−アミノ−２０（ＲＳ ）−カンプトセシンである方法。
8. ８．請求項６の方法であって、前記のカンプトセシンが１０−アミノ−２０（Ｒ Ｓ）−カンプトセシンである方法。
9. ９．請求項６の方法であって、前記のカンプトセシンが１０，１１−メチレンジ オキシ−２０（ＲＳ）カンプトセシンである方法。
10. １０．請求項６の方法であって、前記のカンプトセシンが１０，１１−メチレン ジオキシ−２０（ＲＳ）カンプトセシンナトリウム塩である方法。
11. １１．哺乳類において酵素トポイソメラーゼＩを阻害する方法であって： 該哺乳類に、９−アミノ−２０（ＲＳ）−カンプトセシン、１０−アミノ−２０ （ＲＳ）−カンプトセシン、１０，１１−メチレンジオキシ−２０（ＲＳ）−カ ンプトセシン、１０，１１−メチレンジオキシ−２０（ＲＳ）−カンプトセシン ナトリウム塩及びそれらの混合物からなる群から選ばれるカンプトセシンのトポ イソメラーゼＩ阻害量を投与することを含む方法。
12. １２．請求項１１の方法であって、前記のカンプトセシンが９−アミノ−２０（ ＲＳ）−カンプトセシンである方法。
13. １３．請求項１１の方法であって、前記のカンプトセシンが１０−アミノ−２０ （ＲＳ）−カンプトセシンである方法。
14. １４．請求項１１の方法であって、前記のカンプトセシンが１０，１１−メチレ ンジオキシ−２０（ＲＳ）カンプトセシンである方法。
15. １５．請求項１１の方法であって、前記のカンプトセシンが１０，１１−メチレ ンジオキシ−２０（ＲＳ）カンプトセシンナトリウム塩である方法。
16. １６．酵素トポイソメラーゼＩを阻害する方法であって、該酵素に、式： ▲数式、化学式、表等があります▼，▲数式、化学式、表等があります▼，▲数 式、化学式、表等があります▼又は▲数式、化学式、表等があります▼で表され るカンプトセシンの阻害量を接触させることを含む方法。
17. １７．結腸又は直腸腫瘍を治療する治療学的な方法であって、少なくとも一つの 前記の腫瘍を有する哺乳類に、式：▲数式、化学式、表等があります▼，▲数式 、化学式、表等があります▼，▲数式、化学式、表等があります▼又は▲数式、 化学式、表等があります▼で表されるカンプトセシンの抗腫瘍有効量を投与する ことを含む方法。