JPH05507722A

JPH05507722A - エルゴリン―誘導体の製法

Info

Publication number: JPH05507722A
Application number: JP92503914A
Authority: JP
Inventors: フンメル―マクヴァルト，ハイディ; ケンネッケ，マリオ; ヴェーバー，アルフレート; ニキッシュ，クラウス; ハファー，グレゴール
Original assignee: シエーリング　アクチエンゲゼルシヤフト
Priority date: 1991-02-08
Filing date: 1992-02-06
Publication date: 1993-11-04
Also published as: SK279827B6; EP0525145A1; CS35592A3; US5371000A; AU1226192A; FI102546B; FI924504A; FI924504A0; CA2080119A1; FI102546B1; HUT65671A; CZ283099B6; HU212766B; WO1992013857A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】エルゴリン−誘導体の製法本発明は、一般式Ｉ：［式中、結合１１．は、２個の単結合又は１個の二重結合と１個の単結合を表わし、Ｒ１は、水素原子又は炭素原子１〜６個を有するアルキル基を表わし、Ｒ２は、水素原子又は炭素原子１〜６個を有するアルキル基を表わし、Ｒ，は、カルボキシル基又は式：　−ＣＯＮＲ。

Ｒ，又は−ＮＨＣＱＮＲ，Ｒ，の基を表わし、ここで、Ｒ４及びＲ。

は、水素又は場合によりヒドロキシ基で置換された炭素原子１〜６個を有するアルキル基を表わし、並びにＲ，及びＲ７は、炭素原子１〜４個を有するアルキル基を表わし、かつＱは、酸素原子又は硫黄原子を表わす］特表千５−５０’７７２２　（２）〔式中１．、、、Ｒ，、Ｒ２、Ｒ３は、前記のものを表わすコのエルゴリン−誘導体をストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属の細菌培養を用いて発酵させることにより製造する方法に関する。

式Ｉのエルゴリン−誘導体は、例えば、薬剤学的に効果的な一般式ＩＩＩ　：［式中１．、、、Ｒ，、Ｒ１及びＲ３は、−前記のものを表わし、かつＲ４は、炭素原子２〜６個を有するアルキル基を表わす］のエルゴリン−誘導体の合成に使用できる公知の有益な中間体である（欧州特許（ＥＰ−Ｂ）第００２１２０６号明細書：欧州特許（ＥＰ−Ａ）第０３５１３５２号明細書及びＪ、Ｍｅｄ、Ｃｈｅｍ、　２８．１９８５゜１２５２−１２５５）。

本発明方法は、慣例の方法を用いて可能であるよりも（Ｊ、Ｍｅｄ、Ｃｈｅ＋＋＋、　、　２８．１９８５）、一般式■のエルゴリン−誘導体を、実質的により筒車な方法で、かつ非常に多くの、環境に、より寛容な条件下で実施することが可能である。

本発明の方法を、ストレプトマイセス属の細菌培養を用いて実施することは、既に記載した。従来実施された実験で、微生物ストレプトマイセス・プルプラスセンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｐｕｒｐｕｒａｓｃｅｎｓ）（ＤＳＭ４０３１０）又はストレプトマイセス・ロセオクロモゲネス（Ｓｔｒａｐｔ。

ｍｙｃｅｓ　ｒｏｓａｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ）（ＩＦＯ３３６３及びＩＦＯ３４１１）が有用なものであることが明らかにされた：しかじながら、本発明方法の実施に使用するのが適当である、ストレプトマイセス属の数多くの他の培養が見つけられる可能性も非常にある。

本発明方法は、細菌培養を用いる公知の微生物的な、基質の変換において使用されるのと同じ発酵条件下で実施される。

細菌培養、殊にストレプトマイセス属の細菌培養のために通常使用される培養条件下で、適当な培養基中で、通気下に、液内培養を育成する９次いで、培養に基質（適当な溶剤中に溶かされているか、又は乳化された形の）を加え、かつ最大基質変換が達成されるまで発酵させる。

適当な基質溶剤は、例えば次のものである；メタノール、エタノール、グリコールモノメチルエーテル、ジメチルホルムアミド又はジメチルスルホキシド又は水性鉱酸、例えば燐酸又は硫酸、基質の乳化は、例えば、これらがマイクロ化された形で、又は水と混合可能な溶剤（例えばメタノール、エタノール、アセトン、グリコールモノメチルエーテル、ジメチルホルムアミド又はジメチルスルホキシド）中に溶かされて、激しい渦巻き下に、慣例の乳化助剤を含有する水（特に石灰分を抜いた）中で作用しうる。適当な乳化助剤は、非イオン乳化剤、例えばポリグリコールのエチレンオキシ付加物又は脂肪酸エステルである。適当な乳化剤として、重版の湿潤剤、テギン（Ｔｅｇｉｎ）［Ｆ］、トウィーン（Ｔｗｅｅｎ）＠及びスパン（Ｓｐａｎ）［Ｆ］が例として挙げられる。

最適な基質濃度、基質添加時間及び発酵時間は、使用基質及び微生物の種票及び発酵条件に左右される。

微生物学的基質変換の際に、一般的に必要なこれらの程度は、個々に、専門家によく知られている前実験により確かめられるべきである。

一般式ＩＩのエルゴリン誘導体が本発明の条件下に、Ｎ−６−位で選択的に脱メチル化されることは、専門家にとって意外なことであった。それというのも、専門家は、これらの基質の８−位に常置の置換基が離脱されることも予期していなかったからである。

Ｓ、ヤマトダニ等（タケダ研究所年報２１　、８８〜９４；参照：　Ｃ，Ａ、　１９６３．３０９９ｃ　）の実験から、エルゴリン誘導体がＮ−６−位で脱メチル化できることが原則的には知られている。しかしながら、この試験は、８−位に離脱可能な基を有していないエルゴリン誘導体（アグロクラビン及びエリモクラビン）を用いて実施し、この試験中で使用された基質濃度は、非常に僅かである。

更に、この反応の際に、副反応、例えば８−位でのヒドロキシル化が観察されるので、この方法は、工業的使用には不適当であると思われる。

次の記載例を用いて本発明方法を詳述する。

例１ａ）ストレプトマイセス・プルプラスセンスＤＳＭ４０３１０の胞子を次の組成：澱粉２％酵母抽出物０．４％寒天２％の、ｐＨ７，２に調節した寒天板上に施与し、かつ３０℃で７日間インキュベートする。この菌株は、赤から紫色の基質ミセル及び白色の胞子を形成する。

ｂ）胞子を生理学的ＮａＣ１−溶液１ｍｌで板から洗い流し、かつそれを、次の組成：大豆粉０．７５％ＮａＣｌ０．１％溶解性澱粉０．５％トリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン０．６５％に、ＨＰＯ，０，２％の、ｐＨ６，２に調節した培地１００を有する５００ｍ１エーレンマイヤーフラスコに、接種する。育成フラスコを３０℃で４８時間、及び毎分１８０回転でインキュベートする。

Ｃ）基質の製造：リゼルグ酸アミド／イソリゼルグ酸アミドＬｏｇ及びトウイーン（Ｔｗｅｅｎ）　８０　０　、５　ｇを、脱イオン水５００ｍ１中で、コランダム球（直径０゜５〜１ｍｍ）を有するボールミル中で、１時間水冷却下に粉砕する。

ｄ）発酵を、そらせ板（Ｓｃｈｉｋａｎｅｎ）　２個及び次の組成：大豆粉０．７５％ＮａＣ１０，１％溶解性澱粉０．５％トリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン０．６５％に！）ＩＰＯ，０，２％のｐＨ６，２に調節した培地５００ｍ１を有する２１フラスコ中で行なった。

フラスコに、育成フラスコからの培＠　５０　ｍ　ｌを接種する６次いで、リゼルグ酸アミド／イソリゼルグ酸。

アミド０．５ｇを加え、かつフラスコを３０℃及び毎分１８０回転で、５日間にわたってインキュベートすｅ）生成物の抽出のために、培養液（Ｋｕｌ　ｔｕｒｂｒｕｅｈｅ）に２゜１％ＮａＮａＯＨ５Ｏ０及び２３％ＮａＮａＣ１５Ｏ０を加え、かつクロロホルム１１で振出した。クロロホルム相を回転蒸発機で濃縮し、かつ引き続きシリカゲルカラム（容量５００ｍ１）上で分級する。展開剤として、エチレンクロリド：エタノール：ジエチルアミンを７５：２５：Ｏ，ｌの比で使用する。所望の生成物を含有するフラクションを集め、蒸発乾固し、かつデヒドロ−エルゴリニル−８α−カルボン酸アミド０゜２５ｇが得られる。構造をＮＭＲ−及びＩＲ−分光分析により確認する。

例２リゼルグ酸アミド／イソリゼルグ酸アミドのＮ−６脱メチル化を、ストレプトマイセス・ロセオクロモゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｒｏｓｅｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ）ＩＦＯ３３６３を用いて実施する。育成、基質形成、発酵及び後処理を例１中に記載したのと同様にして行なう、収率は、０．３ｇである。

例３リゼルグ酸アミド／イソリゼルグ酸アミドのＮ−６脱メチル化を、ストレプトマイセス・ロセオクロモゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｒｏｓｅｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ）ＩＦＱ３４１１を用いて実施する。育成、基質形成、発酵及び後処理を例１中に記載したのと同様にして行なう、収量は、０．３ｇである。

例４リスリド（Ｌｉｓｕｒｉｄ）のＮ−６脱メチル化を、ストレプトマイセス・プルプラスセンスＤＳＭ４０３１０を用いて行なう０発酵及び後処理を例１中に記載したのと同様にして行なう。

基質の製造：リスリドＩｇをｌＯ％ＨｓＰＯ−５０ｍ　ｌ中に溶かし、かつ滅菌濾過する。

反応は、Ｄ−３−（９，１０−ジデヒドロ−８α−エルゴリニル）−１，１−ジエチル−尿素０．４ｇの収量を達成する。構造をＮＭＲ−及びＩＲ分光分析を用いて確かめる。

例５リスリドのＮ−６脱メチル化を、ストレプトマイセス・ロセオクロモゲネスＩＦＯ３３６３を用いて実施する。育成、発酵及び後処理を例１中に記載したのと同様にして行なう、基質製造は５例４中に記載したのと同様にして実施する；収量は、０．４５ｇである。

例６テルグリドのＮ−６脱メチル化を、ストレプトマイセス・プルプラスセンスＤＳＭ４０３１０を月いて実、施する。育成、発酵及び後処理を例１中に記載したのと同様にして実施する。基質製造は、テルグリド１ｇを１０％Ｈ＋ＰＯ４５０ｍ　ｌ中に溶かし、かつ滅菌濾過す１．１−ジエチル−３−（８α−エルゴニル） −コ素０．３ｇが得られる。構造をＮＭＲ−又はＩＲ−デ光分析により確がめる。

例７テルグリドのＮ−６脱メチル化を、ストレプトマイセス・ロセオクロモゲネスエＦＯ３４１１を用いて揖施する。育成、発酵及び後処理を例１中に記載したＣと同様にして実施する。基質製造は、例Ｇ中に記載したのと同様にして実施する。

収率は、理論量の約８０％である。

要　約　書尿分　一般式Ｉ・イ更りし〔式中、結合１１．は、２個の単結合又は１個の二重結合と１個の単結合を表わし、Ｒ８は、水素原子又は炭素原子１〜６個を有するアルキル基を表わし、Ｒ２は、水素原子又は炭素原子１〜６＠を有するアルキル基を表わし、Ｒ１は、カルボキシル基又は式：　−ＣＯＮＲ。

Ｒ，又は−ＮＨＣＱＮＲ，Ｒ，の基を表わし、ここで、Ｒ１及びＲ１は、水素又は場合によりヒドロキシ基で置換されたにＲ６及びＲ１は、炭素原子１〜４個を有するアルキル基を表わし、かつＱは、酸素原子又は硫黄原子を表わすコのエルゴリン−誘導体の製法を記載する。

国際調査報告１ｍ−−−ｍ、　ＰＣＴ／ＤＥ　９２１０００ＢＢ

Claims

【特許請求の範囲】

１．一般式Ｉ： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）［式中、結合・・・は、２個の単結合又は１個の二重結合と１個の単結合を表わし、Ｒ１は、水素原子又は炭素原子１〜６個を有するアルキル基を表わし、Ｒ２は、水素原子又は炭素原子１〜６個を有するアルキル基を表わし、Ｒ３は、カルボキシル基又は式：−ＣＯＮＲ４Ｒ５又は−ＮＨＣＱＮＲ６Ｒ７の基を表わし、ここで、Ｒ４及びＲ５は、水素又は場合によりヒドロキシ基で置換された炭素原子１〜６個を有するアルキル基を表わし、並びにＲ６及びＲ７は、炭素原子１〜４個を有するアルキル基を表わし、かつＱは、酸素原子又は硫黄原子を表わす］のエルゴリン−誘導体の製法において、一般式ＩＩ：▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩ）［式中、・・・、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は、前記のものを表わす］のニルゴリン−誘導体をストレプトマイセス属の細菌培養を用いて発酵させることを特徴とする、エルゴリン誘導体の製法。
２．一般式ＩＩのエルゴリン−誘導体を、ストレプトマイセス・ブルプラスセンス又はストレプトマイセス・ロセオクロモゲネス種の細菌培養を用いて発酵させる、請求項１記載のエルゴリン−誘導体の製法。