JPH04231866A - イオン測定用試験担体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、特に水性液体中、特に
好ましくは血液、血漿、血清または尿のような体液中の
イオンの測定用試験担体に関する。

【従来の技術】

【０００２】液体中のイオン、特にアルカリ金属および
アルカリ土類金属イオンの測定は、非常に重要なことで
ある。ここでは、水の硬度の測定、流出液の分析および
それに類するものだけに注意が引かれる。

【０００３】特に体液中におけるアルカリおよびアルカ
リ土類イオンの測定は、医学的診断において重要な役割
をする。すなわち、臨床学的および救急検査室における
カリウムおよびナトリウム測定は、心臓血管疾患、筋肉
疾患、腎臓疾患、様々な原因によるショック状態および
それに類するものの診断およびモニターリングに必要で
ある。カルシウムの測定は、骨疾患の診断に関して重要
である。リチウム測定は、リチウムを含む抗抑制薬の治
療学的モニターリングに必要である。

【０００４】イオン測定は、主として、特に臨床検査室
において、炎光光度分析およびイオン選択電極によって
行われる。

【０００５】これらとは別に、イオンの光度分析を可能
にする、すなわち、分析反応によって色を変化させる多
くの方法が公知である。アナリティカル・ケミストリー
（Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）におけ
るエム・コルソフ（Ｍ．Ｋｏｌｔｈｏｆｆ）の“アプリ
ケイション・オブ・マクロサイクリック・コンパウンズ
・イン・ケミカル・アナリシス（Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏ
ｎ　ｏｆ　ｍａｃｒｏｃｙｃｌｉｃ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ
ｓｉｎ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎａｌｙｓｉｓ）”、１
９７９年、１Ｒ〜２２Ｒ、特に１６Ｒ〜１８Ｒ頁および
そこに挙げられた引用文献においてこのような方法が吟
味されている。

【０００６】これらの方法は、いわゆる抽出分析に基づ
いている。この方法では、測定しようとするイオンのタ
イプに関して選択的である錯化剤（イオノフォア）を、
水と不混和性の有機（疎水性）液体に溶解する。この試
験システムは、水性試料液体（例えば、血液、血清）と
激しく接触させる（通常、強く撹拌する）。この工程に
おいて、イオンが錯体形成し、その結果、有機相中に進
む。

【０００７】この工程に関する多くの色試験方法、例え
ば、特に分析物イオンと一緒に有機相中に進む着色対イ
オン物質の使用、イオノフォアに共有結合した色素（全
体としてクロモイオノフォアとも称する）の使用、また
は分析物イオンが水と不混和性である液体に入り込む場
合に電荷のバランスをとるために水性試料液体中にプロ
トンを放出し、その結果、その色が変化する、有機相中
に固定されたｐＨ指示薬の使用が公知である。後者の方
法は、不均一ｐＨ反応と称される。

【０００８】近年、迅速診断装置およびアングロ−サク
ソン文献における“分析試験担体”または“固体状態分
析装置”とも称されるいわゆる試験担体による分析は、
重要さが増大している。これらは、分析に必要な全ての
試薬が吸収担体もしくはフィルムまたは膨潤可能な担体
もしくはフィルムの上あるいは中に存在しており、装置
、いわゆる、使用するのが簡単である試験ストリップま
たはスライドのような試験担体の形態で設置されている
分析形態である。それらを体液のような試料によって湿
潤させると、試験反応が進む。次に、測定しようとする
分析物の量に関する尺度である形成された色を、色比較
パネルまたは簡単な反射率光度計によって評価すること
ができる。

【０００９】迅速診断装置の特徴は、その取扱いの簡単
さである。結果として、あまりよく熟練していない研究
員または患者によって使用される場合でさえ、最高精度
の結果が得られる。

【００１０】これらの長所に関して、イオンの分析のた
めの迅速診断装置が開発される試みの欠如はなく、これ
によって、この場合、典型的な試験管分析によって知ら
れているアプローチも用いられている。

【００１１】イオン選択電極の原理に基づいている試験
担体は、例えば、米国特許第４，１７１，２４６号から
公知である。しかしながら、これらの構造は比較的複雑
であり、それらの取扱いは、特に、試験担体の適切な位
置に、試料液に加えて参照液を正しく適用することの必
要性によって特に難しくなっている。

【００１２】試験担体への抽出分析の適用は、米国特許
第３，６３５，６７９号に開示されており、２価の金属
イオンによって実証されている。この方法では、疎水性
ポリマー（特にポリ塩化ビニル）を基材とするフィルム
層（分析フィルム）が使用され、これは、付加的フィル
ム形成成分として、通常プラスチックホイルに関する可
塑剤として使用される疎水性有機液体を含有している。 欧州特許出願公告ＥＰ−Ｂ−００４１１７５は、アルカ
リ金属に関する同一反応の原理の適用に関するものであ
る。

【００１３】大体において、該フィルム形成成分を有す
る分析フィルムの使用は、迅速診断装置によるイオンの
分析を可能にする。しかしながら、実際は、非常に困難
が生じ、これは、おそらく、主として、水性試料液と疎
水性分析フィルムとの間の遅い交換の結果である。特に
、色の形成は充分に強くなく、比較的に小さい信号振幅
が得られるだけであり、結果として、分析の精度が比較
的乏しくなる。さらに、一定の最終値を有する定義され
た色変化は、終点測定法を使用する分析に関して望まし
い範囲で観察されない。

【００１４】したがって、既に、この点において改良す
べく、非常に多くの特定の試験層構造物が提案されてき
た。

【００１５】作業設計は、欧州特許出願公開ＥＰ−Ａ−
０１２５５５５に開示されており、これには、イオノフ
ォアおよび指示薬を溶解している可塑化された無極性非
孔質プラスチックフィルムとして有機相が存在する。試
験反応が停止せず、したがってイオンの測定が動力学的
測定によってのみ可能であることが実施例から明らかで
ある。これは、迅速な診断装置に関して一般的である標
準を使用せずに測定しようとする場合に特に不都合であ
る。動力学的測定は、診断薬の老化に非常に影響され易
い。さらに、該実施例には、単に、血清の分析に関して
診断学的に不適切であり、試料の希釈を必要とする３ミ
リモル　カリウム／リットルまでの上限濃度を有する水
溶液に関する試験が開示されている。健康な個体の血清
は、約３．５〜５．５ミリモル／リットルのカリウム濃
度を有する。

【００１６】用途設計は、欧州特許出願公開ＥＰ−Ａ−
０１２５５５４に開示されており、これには、親水性マ
トリックス中に疎水性層が小さい液体粒子の形態で埋込
まれている。しかしながら、開示されている２分以上の
反応時間は、迅速診断装置に関しては比較的長い。さら
に、経験的に、このようなエマルションは再現可能に製
造するのが困難であり、特に長時間にわたって乾燥状態
に維持するのも困難であるのが分かる。また、この場合
、実施例によると、カリウムの分析は予備希釈を必要と
する。

【００１７】欧州特許出願公開ＥＰ−Ａ−０１４１６４
７には、高分子結合剤によって一緒に保持されている隙
間体積を有していない反射粒子を含有している、特に液
体中のイオン分析物の測定に関する試験装置が開示され
ている。 分析物に関する抽出剤および検出剤、例えばクロモイオ
ノフォアは、該粒子の表面上に固定される。高分子結合
剤自体が、分析物または分析物の反応生成物に対して透
過性でなければならない。実施例に示されるように、こ
のタイプの試験装置は、約５分の反応時間を必要とする
。このような時間は、迅速診断装置に関して長すぎる。

【００１８】欧州特許出願公開ＥＰ−Ａ−０１５３６４
１には、クロモフォアおよびイオノフォアを含有してい
る有機疎水性相を含浸している多孔性担体マトリックス
が開示されている。好ましい担体マトリックスとして紙
が開示されている。しかしながら、経験的に、紙は、比
較的不均質な組成を有しており、必然的に、特にカリウ
ム測定に関して、必要な正確さが常に得られるわけでは
ないことが分かる。したがって、該出願には４％までの
変動係数が得られることが開示されている。

【００１９】欧州特許出願公開ＥＰ−Ａ−０１７５９９
０において、疎水性フィルム形成性水不溶性ポリマーか
らなる有機相中に、適切な有機ポリマーの親水性、好ま
しくは水溶性粒子が埋込まれている。

【００２０】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、迅速
反応および強い色形成ならびにそれに応じて増大した分
析の精度を特徴とするイオン測定用迅速試験を提供する
ことである。

【００２１】

【課題を解決するための手段】この目的は、特許請求の
範囲において特徴付けられた発明によって達成される。

【００２２】本発明は、イオン測定用試験担体を提供す
るものである。液体耐性有機相を有し、次に、水と不混
和性である揮発困難性液体と均一に混合する疎水性ポリ
マーを含有する試験層を含有している。さらにまた、該
試験担体は、イオノフォアおよび測定しようとするイオ
ンの存在下でその色が変化する色原体を含有する。本発
明の試験担体は、試験層が吸油価８０〜２００、好まし
くは１００〜１７０の粒子を含有しており、イオノフォ
アが疎水性有機相中に均一に分散していることを特徴と
する。

【００２３】本発明の試験担体の試験層は、高多孔質構
造を有する。欧州特許出願公開ＥＰ−Ａ−０１５３６４
１に対照して、担体マトリックスが必要ではないので、
光学的評価において、該マトリックス材料の構造によっ
て生じる問題が回避される。さらに、本発明の試験層は
、比較的容易に製造することができ、その結果、経済的
に優れている。

【００２４】本発明の試験層を使用することによって、
非常に短い反応時間を必要とするだけである。色形成は
、約６０秒後に既に完了しており、その結果、実用的見
地から終点測定が容易に行われ得る。

【００２５】高分子物質中に埋込まれた有機または無機
粒子を含む試験層は公知である。すなわち、例えば、米
国特許明細書３，９９２，１５８には、多孔質塗布層を
得るための様々な粒子の使用が開示されている。欧州特
許出願公告ＥＰ−Ｂ−００１６３８７には、特定の大き
さおよび濃度範囲の無機または有機粒子がフィルムオー
プナーとして使用される分析層が開示されている。欧州
特許出願公告ＥＰ−Ｂ−００１３１５６には、有機高分
子粒子が少量の結合剤によって結合して開孔複合構造を
形成する粒子複合構造が開示されている。しかしながら
、これらの刊行物には、長年、専門家集団において試み
られている課題であるイオンの分析における特別な問題
の解決について開示されていない。

【００２６】フィルム層と記載することもできる本発明
の試験層は、疎水性ポリマーから形成される液体耐性フ
ィルムおよびそこに分散された粒子が含まれている。該
疎水性ポリマーは、試験しようとする液体および測定し
ようとするイオンに対して不浸透性である。粒子は、試
料液体を試験層中に浸透させ得るものである。全体とし
て試験層は、試験しようとする液体に対して不浸透性で
ある。単に、ある程度の量が吸収されるだけである。特
に、酢酸ビニルのコポリマーは疎水性ポリマーとして使
用するのに好都合であることが分かった。酢酸ビニルと
ラウリン酸ビニルまたはマレイン酸ジブチルエステルと
のコポリマーが特に好都合である。

【００２７】粒子としては、試験しようとする液体に不
溶性であり、吸油価８０〜２００、好ましくは１００〜
１７０を有する固体の不溶性不活性無機または有機粒子
が使用され得る。とりわけ、未焼成または天然の多孔質
珪藻土、か焼または焼成の多孔質珪藻土、流動焼成また
は活性化多孔質珪藻土のような様々なタイプの珪藻土が
本発明のフィルム層に関して好都合であることが分かっ
た。

【００２８】吸油価は、例えば充填剤として使用される
粒子に関するペイントおよびコーティングの技術分野に
おいて周知のパラメータである。粒子とそれらが分散さ
れている媒質との間の相互関係に関する尺度である。吸
油価は簡単に測定することができる。該測定は、ＤＩＮ
（ジャーマン・インダストリアル・スタンダード（Ｇｅ
ｒｍａｎ　Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ　Ｓｔａｎｄａｒｄ）
）５３１９９に従って行われる。この規準によって、吸
油価は、問題の粒子１００ｇを凝集性パテ状塊に加工処
理するために必要とされるアマニ油の量をグラムで示す
。これに関して、粒子（重量ａ（グラム））をガラスプ
レート上に置く。ビュレットによって、アマニ油の必要
とされる量の２／３を添加する。混合物が均一になるま
でスパチュラで強くこすることによって、加圧下、油お
よび粒子を処理する。次に、再度、油を滴下し、そのた
びごとに、ガラスプレート上に塗布されない凝集性パテ
状混合物が形成されるまで同様な方法で処理する。これ
において消費された油の量ｂ（ｍｌ）は、０．０１ｍｌ
まで測定される。次に、下記式から吸油価を算出する。

【００２９】

【数１】

【００３０】ここで、アマニ油の密度は０．９３ｇ／ｍ
ｌである。

【００３１】結果として、使用した粒子は、不均一な形
状を有する。それらの粒度は、通常０．１〜２００μｍ
であり、好ましくは０．２〜３０μｍである。本発明で
使用する粒子の特徴は、それらが気体および湿潤液体を
浸透させることができるキャビティを有することである
。この特性は、特に、５０〜２５０、好ましくは８０〜
１８０ｇ／リットルの低い嵩密度で表される。

【００３２】粒子に対する疎水性ポリマーの重量比約５
：１〜１：１０は、本発明のフィルム層に有用である。 該重量比は、好ましくは、約１：１〜約１：３である。 粒子に対する疎水性ポリマーの最適な重量比は、各々の
場合、使用されたポリマーおよび粒子の性質に依存する
。疎水性ポリマーが酢酸ビニルとラウリン酸ビニルおよ
び／またはマレイン酸ジブチルエステルとのコポリマー
であり、粒子が珪藻土である場合、最適な重量比は、１
：１．５〜１：２．５である。

【００３３】さらに、本発明のフィルム層の必要な成分
は、水と不混和性である揮発困難性液体およびイオノフ
ォアである。これらの成分を疎水性ポリマー中に均一に
分散させる。

【００３４】水と不混和性である揮発困難性液体は、プ
ラスチックに関する可塑剤として認識されている。ポリ
マーと一緒に、イオンの測定方法に関する有機相として
の役割をする。全ての可能な市販のタイプの可塑剤、好
ましくは、セバシン酸、アクリル酸、フタル酸およびリ
ン酸のエステルならびにシリコーンが挙げられる。特に
該方法に関する技術的理由に関して、非常に揮発困難な
ユビヌル（ＵｖｉｎｕｌＲ）Ｎ５３９（２，２−ジフェ
ニル−１−シアノ−アクリル酸エチルヘキシルエステル
）が好ましい。

【００３５】試験層における揮発困難性疎水性有機液体
に対する疎水性ポリマーの重量比は、約５：１〜約１：
５、特に約２：１〜約１：２であり得る。

【００３６】測定しようとするイオンに関して特異的で
あり、かつ非水性相に充分に溶解する、イオンと錯体形
成し得る物質の全てをイオノフォアとして使用し得る。 これに関して、クラウンエーテル、クリプタンド、ポダ
ンドおよび対応する環式または非環式のペプチドが挙げ
られる。２，３−ナフトール−１５−クラウン−５は、
カリウムの測定に関して特に好都合であることが分かっ
た。天然のイオノフォアバリノマイシンが特に好ましい
。ナトリウムの測定に関しては、例えば、Ｎ，Ｎ’−ジ
ベンジル−Ｎ，Ｎ’−ジフェニル−１，２−フェニレン
−ジオキシジアセトアミドが挙げられ、リチウムに関し
ては、Ｎ，Ｎ’−ジヘプチル−５，５−ジメチル−Ｎ，
Ｎ’−ジ（３−オキサペンチル）−３，７−ジオキサノ
ナン−ジアミドが挙げられ、カルシウムに関しては、ジ
エチル−Ｎ，Ｎ’−［（４Ｒ，５Ｒ）−４，５−ジメチ
ル−１，８−ジオキソ−３，６−ジオキサ−オクタメチ
レン］−ビス−（１２−メチルアミノドデカノエート）
が挙げられる。

【００３７】本発明の試験担体は、必須成分として、測
定しようとするイオンの存在下でその色が変化する物質
を含有している。可能な適切な物質は、すでに始めに記
載した。このような物質は、大体において、本発明の試
験層または第２の試験層中に存在させることができる。 しかしながら、第２の場合、液体の交換が可能であるよ
うに２つの層をお互いに直接または間接接触させること
が可能でなければならない。対イオン染料は、本発明の
試験層中ではなく、別の層に一体化されているのが好ま
しいが、クロモイオノフォアは、本発明の試験層中に存
在させることもできる。ｐＨ指示薬は、本発明の試験層
中に存在する。イオノフォアとしてそれらが疎水性有機
相中に均一に分散されるのが好ましい。本発明において
、不均一ｐＨ反応の原理によるｐＨ指示薬の使用が特に
好ましい。この原理は、以下に図式的に示すことができ
る。

【００３８】

【化２】

【００３９】すでに上記したように、イオノフォアは、
該原理に関して水と不混和性である有機物質に溶解しな
ければならないイオンに関する錯化剤である。通常の有
機可溶性ｐＨ指示薬は、Ｈ指示薬として考慮される。イ
オノフォアおよびｐＨ指示薬は共有結合して、いわゆる
クロモイオノフォアとしても存在し得る。原理的機能は
以下のとおりである：イオノフォアを用いて、試験しよ
うとする水性相からのイオンを水と不混和性の有機相中
に引き入れる。電荷のバランスをとるために、水性相中
にプロトンを放出しなければならない。このプロトンは
、ｐＨ指示薬から取り出され、その結果として着色アニ
オンを形成する。

【００４０】この原理は、最初に、イー・エス・ハイマ
ン（Ｅ．Ｓ．Ｈｙｍａｎ）、バイオフィジカル・ソサイ
エティ・アブストラクツ（Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ　Ｓ
ｏｃｉｅｔｙ　Ａｂｓｔｒａｃｔｓ）、１９７１、７２
ａによって開示されており、すなわち、イオノフォアと
してバリノマイシンを、そしてｐＨ指示薬としてテトラ
ブロモフェノールフタレインエチルエステルを使用する
。クロモイオノフォアに関する開示は、例えば、ケイ・
ウエノ（Ｋ．Ｕｅｎｏ）およびエム・タガキ（Ｍ．Ｔａ
ｇａｋｉ）、スタディズ・イン・フィジカル・アンド・
セオレティカル・ケミストリー（Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｉｎ
　Ｐｈｙｓｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ
　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）　２７、２７９−２９３（１９
８２）ならびにエイチ・ナカムラ（Ｈ．Ｎａｋａｍｕｒ
ａ）ら、ブンセキ・カガク（Ｂｕｎｓｅｋｉ　Ｋａｇａ
ｋｕ）　３１、Ｅ１３１−Ｅ１３４（１９８２）におい
て見られる。

【００４１】本発明において、非水性媒質に溶解し、分
析条件下で有機相から水性相中に抽出されないほど疎水
性であるこれらｐＨ指示薬を使用することができる。イ
オンの測定に関して示された原理に従って、ｐＫ値は、
測定しようとするイオンの存在下、分析条件下で、指示
薬物質がプロトンを放出することができ、結果としてそ
の着色状態を変化させるようにするべきである。例えば
、イー・エス・ハイマン（Ｅ．Ｓ．Ｈｙｍａｎ）、バイ
オフィジカル・ソサイエティ・アブストラクツ（Ｂｉｏ
ｐｈｙｓｉｃａｌ　Ｓｏｃｉｅｔｙ　Ａｂｓｔｒａｃｔ
ｓ）、１９７１、７２ａに開示されているようなテトラ
ブロモフェノールフタレインエステル、または欧州特許
出願公開ＥＰ−Ａ−０１２８３１７およびＥＰ−Ａ−０
１２８３１８に開示されているようなアルキルインドナ
フトールが使用され得る。

【００４２】イオノフォアおよびｐＨ指示薬の共有結合
物として存在するクロモイオノフォアを使用することも
できる。カリウムの測定に関して、例えば、４’−（２
”，４”−ジニトロ−６”−トリフルオロフェニルメチ
ル）−アミノ−ベンゾ−１８−クラウン−６が好都合で
あることが分かった。対応する１５−クラウン−５化合
物は、ナトリウムの測定のために使用することができる
。

【００４３】ｐＨ指示薬としては、一般式（Ｉ）：

【化
３】 ［式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、同一または異なって
おり、各々、水素原子、アルキル基またはアルコキシ基
であり、これらのうち少なくとも１つの基が（Ｃ８〜Ｃ
３０）−アルキルまたはアルコキシ基であり、Ｒ４は、
水素原子またはアルキル基であり、Ｒ５は、ニトロ基、
ハロゲン原子によって置換されているアルキル基、シア
ノ基、スルホンアミド基またはアルキルスルホニル基で
あり、Ｘは、窒素原子または基ＣＲ６であり、そして、
Ｙは、硫黄原子または基ＣＲ７＝ＣＲ８であり、Ｒ６、
Ｒ７およびＲ８は、同一または異なっており、水素原子
、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、アルキル基もし
くはハロゲン原子によって置換されているアルキル基ま
たはアルキルスルホニル基である］で示されるナフトー
ル誘導体が好ましい。このような物質はドイツ特許出願
公開ＤＥ−Ａ−４０１５５９１．９に開示されている。

【００４４】基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７お
よびＲ８の定義中のアルキル基は、１〜３０個の炭素原
子を有するアルキル基と解される。特に、基Ｒ４、Ｒ６
、Ｒ７およびＲ８は、好ましくは１〜４個の炭素原子、
特に好ましくは１〜２個の炭素原子を有するアルキル基
が好ましい。基Ｒ１、Ｒ２およびＲ３に関して、これら
の基の１つだけが、好ましくは８〜３０個、より好まし
くは１０〜２０個の炭素原子を有するアルキル基である
。このグループにおける他の基もアルキル基である場合
、これらは、好ましくは１〜４個、より好ましくは１〜
２個の炭素原子を有するアルキル基である。２個以上の
炭素原子を有するアルキル基は、直鎖状または分枝鎖状
のいずれであってもよい。さらに、該アルキル基は、部
分的に不飽和であってもよい。

【００４５】Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８の定義中のハ
ロゲン原子によって置換されているアルキル基は、フッ
素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子によって
置換されている１〜４個の炭素原子を有するアルキル基
と解される。フッ素原子によって置換されている１〜２
個の炭素原子を有するアルキル基が好ましい。トリフル
オロメチル基が特に好ましい。

【００４６】基Ｒ１、Ｒ２およびＲ３における定義中の
アルコキシ基は、８〜３０個、好ましくは１０〜２０個
の炭素原子を有するアルコキシ基である。該アルコキシ
基は、直鎖状または分枝鎖状、飽和または部分的に不飽
和であってもよい。

【００４７】基Ｒ６、Ｒ７およびＲ８の定義中のハロゲ
ン原子は、フッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ
素原子が挙げられ、好ましくは塩素原子および臭素原子
である。

【００４８】基Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８の定義中の
アルキルスルホニル基は、基アルキル−ＳＯ２−を意味
する。これに関して、アルキル基は、１〜４個、好まし
くは１〜２個の炭素原子を有するアルキル基を表す。メ
チルスルホニル基が特に好ましい。

【００４９】基Ｒ５の定義中のスルホンアミドは、非置
換アミン（−ＳＯ２ＮＨ２）または第１級もしくは第２
級アミンのアミド（−ＳＯ２ＮＨＲまたは−ＳＯ２ＮＲ
２）と解される。アミドの置換基（Ｒ）はアルキル、ア
リールまたはアラルキル基であり得る。第２級アミンの
アミドの場合、置換基（Ｒ）は、同一または異なってい
てよい。これに関するアルキル基は、１〜４個の炭素原
子を有する基と解される。アリール基は、６〜１０個の
炭素原子を有する芳香族残基を意味する。好ましいアリ
ール基は、フェニルまたはナフチル基である。アラルキ
ル基は、アリール部分が６〜１０個の炭素原子を有する
芳香族残基であり、アルキル部分が１〜４個の炭素原子
を有する基である基である。好ましいアラルキル基は、
ベンジル基である。本発明に関して、非置換スルホアミ
ド基（−ＳＯ２ＮＨ２）が特に好ましい。

【００５０】一般式（Ｉ）で示される特に好ましいナフ
トール誘導体は、基Ｒ１、Ｒ２およびＲ３のうち１つが
８〜３０個、好ましくは１０〜２０個の炭素原子を有す
るアルキルまたはアルコキシ基を表し、上記グループの
他の基が、水素原子または１〜４個、好ましくは１〜２
個の炭素原子を有するアルキル基であるものである。

【００５１】特に好ましいナフトール誘導体は、Ｒ１が
１０〜２０個の炭素原子を有するアルコキシ基を表し、
Ｒ２およびＲ３が水素原子を表し、他の基が一般式（Ｉ
）について定義された意味を有するものである。

【００５２】一般式（Ｉ）で示されるナフトール誘導体
の製造方法のいくつかの変形が可能である。まず、一般
式（ＩＩ）：

【化４】 ［式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は一般式（Ｉ）において
定義された意味を有する］で示されるナフトキノンを、
一般式（ＩＩＩ）：

【化５】 ［式中、Ｒ４、Ｒ５、ＸおよびＹは一般式（Ｉ）におい
て定義された意味を有する］で示されるヒドラジンと反
応させる。この反応は、ヒドラゾンの形成に関する通常
の条件下で起こり得る。好ましくは、該反応は、酸性条
件下で起こる。ヒドラゾン自体は、不安定であり、転位
して、一般式（Ｉ）で示される所望のナフトールを形成
する。

【００５３】一般式（Ｉ）で示されるナフトール誘導体
の別の製造方法は、一般式（ＩＶ）：

【化６】 ［式中、Ｒ４、Ｒ５、ＸおよびＹは一般式（Ｉ）におい
て定義された意味を有する］で示されるアミンによって
開始される。これらのアミンをジアゾ化し、得られたジ
アゾニウム塩を一般式（Ｖ）：

【化７】 ［式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は一般式（Ｉ）において
定義された意味を有する］で示されるナフトールとアゾ
カップリング反応で反応させる。

【００５４】一般式（ＩＶ）で示されるアミンのジアゾ
化は、通常の方法で起こり得る。亜硝酸塩、好ましくは
亜硝酸ナトリウムと一緒に、濃鉱酸、例えば、濃硫酸を
調製し、次いで、室温に冷却しながら一般式（ＩＶ）で
示されるアミンを添加するのが好都合であるのが分かっ
た。亜硝酸ナトリウムおよび濃硫酸の他に氷酢酸も含有
しているジアゾ化混合物が特に好都合であることが分か
った。 硫酸および氷酢酸の好ましい容量比は、１：１〜２：１
である。亜硝酸塩および一般式（ＩＶ）で示されるジア
ゾ化されるアミンの比は、通常、等モルである。

【００５５】ジアゾ化反応の完了後、該反応混合物を水
性処理する。このために、該反応混合物を氷冷水に注ぐ
のが好ましい。ジアゾニウム塩自体は、単離されないが
、水性処理溶液中で一般式（Ｖ）で示されるナフトール
とアゾ結合する。これは、弱酸性条件下で行うのが好ま
しい。一般式（Ｖ）で示されるナフトールは、水溶液中
の溶解性が非常に乏しい。したがって、これらは有機溶
媒中で適用される。クロロホルムは、例えば、有機溶媒
としてよく適している。この方法で、水性処理後に存在
するジアゾニウム塩溶液を、クロロホルムおよび氷酢酸
に一般式（Ｖ）で示されるナフトールを入れた溶液に添
加することができ、酢酸塩を添加して、該反応媒質のｐ
Ｈ値を緩衝化することができる。ほとんどの場合、該反
応混合物から、一般式（Ｉ）で示されるナフトール誘導
体が晶出される。次いで、該生成物を再結晶させるかま
たはクロマトグラフィーによる精製することができる。

【００５６】特に、ｐＨ指示薬を使用する場合、ｐＨ変
化に対して天然の感受性が高いので、本発明のフィルム
層において緩衝液を一体化させることも特に好都合であ
る。前述の不均一ｐＨ反応に基づいているイオン測定方
法において、緩衝液のｐＨは、非水性相から水性相中へ
のプロトンの移動を制御する。したがって、使用したｐ
Ｈ指示薬のｐＫ値に依存する。体液中のイオンの測定用
診断薬において、緩衝物質は、ｐＨを５〜１０、好まし
くは７〜８の値に調節することができるように選択する
のが好ましい。大体において、これに関して、通常の緩
衝液全てが考慮され、それらが水溶性であり、試験反応
を妨害するイオンを含まないことが分かった。例えば、
Ｎ，Ｎ−ビス−（ヒドロキシエチル）−アミノエタンス
ルホン酸（ＢＥＳ）、３−［Ｎ−トリスヒドロキシメチ
ル］−メチルアミノヒドロキシプロパン−スルホン酸（
ＴＡＰＳＯ）またはＮ−ヒドロキシエチルピペラジン−
Ｎ−プロパンスルホン酸（ＨＥＰＰＳ）のようないわゆ
るグッド緩衝液（Ｇｏｏｄ　ｂｕｆｆｅｒ）シリーズか
らのものである緩衝液が好適であるのが分かった。

【００５７】測定しようとするイオンに関して充分には
選択性がないイオノフォアを使用する場合、妨害イオン
を隠蔽する水溶性錯化剤を添加することができる。すな
わち、例えば、カルシウムによるナトリウム試験の起こ
り得る妨害は、四酢酸エチレンジアミン（ＥＤＴＡ）に
よって防止される。

【００５８】さらに、湿潤剤を使用して、フィルムの製
造または試験しようとする試料によるフィルムのぬれを
改良することができる。これに関して、試験反応を妨害
しないこれらの試薬だけを使用することができる。これ
らは、特に、非イオン性および両性イオン性化合物であ
る。非イオン性湿潤剤のうち、例えば、ポリエチレング
リコールエーテルまたはエステル、好ましくは、トリト
ン（ＴｒｉｔｏｎＲ）　Ｘ１００が好都合であることが
分かった。両性イオン性湿潤剤としては、ｎ−デシル−
Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アンモニオ−１−プロパンスル
ホネート（ツヴィッタージェント（Ｚｗｉｔｔｅｒｇｅ
ｎｔＲ）３−１０）が好都合に使用され得る。

【００５９】本発明のフィルム層のコンシステンシーを
改良するために、増粘剤をさらに使用することができる
。これに関して、エチルセルロースが特に好都合である
ことが分かった。これに加えて、例えばヒドロキシエチ
ル−またはヒドロキシプロピルセルロースのような親水
性増粘剤を、分析しようとする水性液体で本発明のフィ
ルム層を湿潤させた後に存在する水性相に関する本発明
の試験層に添加することができる。

【００６０】本発明のフィルム層を製造するために、水
性液体中、特に血液、血漿、血清または尿のような体液
中のイオンの測定のためにフィルム層を使用する場合に
水性相に吸収されるべきではなく、むしろ有機相、すな
わちフィルム層中に残存するべきである全成分（疎水性
ポリマー；水と不混和性である揮発困難性液体；イオノ
フォア；所望によりｐＨ指示薬としての色原体、および
所望によりフィルム層のコンシステンシーを改良する増
粘剤）を非常に高い揮発性から中程度の揮発性の有機溶
媒に溶解する。この溶液中に粒子を撹拌し、均一に分散
させる。ドクターブレードを用いて、該ペーストを支持
体上に塗り、乾燥させる。もちろん、ロールコーティン
グ、フィルムキャスティングまたはそれに類する方法の
ような他の好適な塗布方法を使用することもできる。乾
燥フィルム層は２０〜５００、好ましくは２０〜１５０
μｍの厚さを有する。

【００６１】本発明のフィルム層に水性試料液を適用す
る場合、水性相中に吸収される成分（緩衝液；所望によ
り錯化剤；所望により湿潤剤；所望により水性相のコン
システンシーを変えるための増粘剤）を一体化する種々
の方法がある。１つの可能性は、成分の水溶液と一緒に
粒子を蒸発、スプレイ乾燥、または凍結乾燥させること
によって前記成分で粒子を被覆することである。次いで
、この方法で塗布された粒子を、上記のような有機溶媒
中に撹拌する。他の可能性は、まず、未処理粒子を用い
てフィルム層を製造し、次いで、上記成分の水溶液を再
塗布し、最後に乾燥させることである。

【００６２】フィルム層は、担体として基板と一緒に使
用するのが好ましい。特に、本発明のフィルム層は、迅
速診断装置に関して何回も記載したような公知の適用形
態に加工処理することができる。それらは、例えば、試
験フィルムが例えばプスチックの幅狭く硬いストリップ
の端部に接着されているような簡単な試験担体である。

【００６３】本発明の試験層の他に１つまたはいくつか
の別の層も含む試験担体に関して、本発明のフィルム層
中に、測定反応の間に水性相中に吸収され得るこれらの
成分を置かずに、むしろ、該成分を該フィルム層から完
全に分離するのが好都合であり得る。その結果、例えば
、これらの成分を別の担体層、例えば紙層またはネット
に適用することができる。

【００６４】本発明の試験担体を使用する試験の評価は
、可視的、および公知の方法で反射率測光法によって行
うことができる。

【００６５】フィルム層が非水媒質に容易に溶解する有
機酸を含む場合、特に反射率測光法による評価の精度に
関して特に好都合であることが分かった。このような方
法は、ドイツ特許出願公開ＤＥ−Ａ−４０１５５９２．
７に開示されている。高硝酸化アルキルフェノールまた
は高硝酸化アルコキシナフトールまたはカルボニルジシ
アニドフェニルヒドラゾンが非常に優れていることが分
かった。このような物質は、測定しようとするイオンの
適切な濃度範囲に最高の測定感受性の範囲を適合し得る
。ビス−（２−ヒドロキシ−３，５，６−トリクロロフ
ェニル）メタン（ヘキサクロロフェン）、３−ペンタデ
シル−２，４，６−トリニトロフェノールおよび２，４
，６，８−テトラニトロ−５−オクタデシルオキシナフ
トール−１ならびに［（２，４−ジニトロフェニル）ヒ
ドラゾノ］プロパンジニトリル（メソシュウ酸−ジニト
リル−２，４−ジニトロフェニル−ヒドラゾン）がこれ
に関して特に価値があることが分かった。

【００６６】本発明の試験層の成分の好都合な、および
好ましい重量割合（％）を下記表１に示す。

【００６７】

【表１】 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　フィルム層の含有量（重量％）　　　
　　　　　フィルム層の成分　　　　　　　　　　　　
好都合　　　　　　　　　　　好ましい　　　　　　　
　ポリマー　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
５〜６０　　　　　　　　２０〜４０　　　　　　水と
不混和性である 　　　　　　揮発困難性液体　　　　　　　　　　　　
　　５〜７０　　　　　　　　２０〜４０　　　　　　
粒子　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１
５〜８０　　　　　　　　３０〜５０　　　　　　イオ
ノフォア　　　　　　　　　　　０．０５〜５．０　　
　　　　０．２〜１．０

【００６８】本発明のフィルム
層の中または上に緩衝物質を適用する場合、これは、緩
衝液を５〜３０、好ましくは１０〜２０重量％含む。本
発明の試験層が例えばｐＨ指示薬のような色原体を含む
場合、約０．０５〜５．０、好ましくは０．２〜０．７
重量％の量が存在する。錯化剤、湿潤剤もしくは増粘剤
または感受性を増すための酸のような所望により使用す
ることができる物質は、本発明のフィルム層の中または
上に適用する場合、本発明のフィルム層の０．００５〜
５、好ましくは０．０２〜２重量％の量である。

【００６９】本発明のフィルム層を含む、液体中のイオ
ン測定のための本発明の試験担体の特に好都合な形状を
図１および図２に示す。

【００７０】図１は、本発明のフィルム層を有する特に
好ましい試験担体を示す。

【００７１】図２は、本発明のフィルム層を有するさら
に特に好ましい試験担体を示す。

【００７２】図１および図２において、血液中のイオン
の測定に適している２つの試験担体を立体的に示す。そ
れらは、全血から血清または血漿を単離し、この方法で
得られる液体において関心のあるイオンを測定する。該
試験担体は、主に、試験担体内の緩衝物質の位置におい
て異なる。該装置の組成の詳細は以下のとおりである。

【００７３】図１：試料適用域（７）から試験域（８）
中に試料液を移動させる移動層（２）は、不活性担体ホ
イル（５）、例えばプラスチックホイルに固定される。 大体において、移動層（２）としては、試験しようとす
る液体を試料適用域（７）から試験域（８）中に移動さ
せることができ、この工程において、分析を害するよう
な方法でそれを変えない如何なる物質も適している。移
動層（２）としてガラス繊維フリースを使用するのが特
に好ましい。試料液から微小体成分を分離するための層
（３）は、移動層（２）に接着されており、それを部分
的に覆っている。基本的には、このために、試料液から
微小体成分を、特に血液から血球およびとりわけ赤血球
を分離することができ、それらが試験反応において妨害
を生じないために実質的な量を試験域（８）に到達させ
ない如何なる物質も使用することができる。さらに、分
離層（３）は、測定しようとするイオンの濃度を変化さ
せ、したがって結果を誤まらせるので、試料液中で変化
させないようにすべきである。例えば欧州特許出願公告
ＥＰ−Ｂ−００４５４７６に開示されているようなガラ
ス繊維フリースは、分離層（３）に特に適していること
が分かった。保護層（４）は、分離層（３）の上に設置
されており、例えばピペットで、試料適用の間に分離層
（３）の損傷を防止しようとする。不活性物質の、例え
ばプラスチックのネットがこのために価値があることが
分かった。保護層（４）および分離層（３）は、不活性
担体ホイル（５）上に固定されている。これは、例えば
、熱溶融型接着剤のストリップ（６）によって行われ得
る。本発明の試験層を有する透明なプラスチックからな
る担体ホイル（１）は、移動層（２）の片側に接着され
ている。これは、好ましくは、接着部（９）、例えば熱
溶融型接着剤のストリップによって行われる。フィルム
層（１）は、不活性担体ホイル（５）に向かって透明担
体ホイルを押すことによって液体移動が可能になるよう
な方法で移動層（２）と接触させることができるように
位置決定される。

【００７４】図２は、測定反応の間に水性相中に吸収さ
れる物質を含む層（１１）が、同様に例えば熱溶融型接
着剤のストリップである接着部（９）を介して、フィル
ム層（１０）と移動層（２）の間に設置されている点で
図１とは異なる。このような物質は、特に、緩衝物質で
ある。しかし、図１の試験担体の本発明のフィルム層（
１）または図２の試験担体のフィルム層（１０）の代わ
りに、図２の試験担体の付加層（１１）中に、錯化剤、
湿潤剤または水性相のコンシステンシーを変えるための
増粘剤を一体化させることができる。接触させると別の
層に液体を移動させることができる付加層（１１）に関
する物質として、吸収性物質を考慮することができる。 これに関して紙を特に好都合に使用し得るが、プラスチ
ックのような不活性物質から製造されたネットまたは織
物も可能である。

【００７５】図１および図２において示されている試験
担体のうちの１つによって血液中のイオンの測定を行う
ために、試料を保護層（４）に適用する。血液が分離層
（３）中に浸透し、血球が血漿または血清から分離され
る。この方法で得られた液体は、毛管力によって試験域
（８）中に吸収される。移動層（２）における水性相は
、本発明のフィルム層（１）または（１０）を有する担
体ホイル上の押圧によってフィルム層と接触させられ、
液体はフィルム層中に浸透し、測定反応を起こす。該反
応によって得られたフィルム層中で形成された色は、フ
ィルム層（１）または（１０）の担体ホイルを介して可
視的に観察されるか、または反射率測光法によって測定
される。

【００７６】以下の実施例において、本発明をさらに説
明する。

【００７７】

【実施例１】本発明のフィルム層を有する試験担体の製
造に関する一般的な指示　　図１の試験担体の製造に関
して、透明なポリエステルホイル（厚さ２００μｍ）に
以下の実施例に記載の混合物を塗布し、乾燥させる。被
覆したホイルを幅１５ｍｍのストリップに切断し、幅１
５０ｍｍの白色ポリエステルホイル（５）に、長手方向
に熱溶融型接着剤で層（１）として接着する。移動層（
２）として面積重量３０ｇ／ｍ２のガラス繊維フリース
、分離層（３）として面積重量６０ｇ／ｍ２のガラス繊
維フリース、および保護層（４）としてポリアミド織物
の各ストリップもこの白色ポリエステルホイルに長手方
向に接着し、横に切断した後、図１の幅６ｍｍの試験ス
トリップを形成する。

【００７８】図２の試験担体は、同様に製造される。層
（１１）は、緩衝物質を含浸させた濾紙からなる。

【００７９】本発明のフィルム層または試験担体は、試
験しようとする試料３０μｌをポリアミド織物（４）に
適用するような方法で使用され、該試験担体を市販の反
射率光度計リフロトロン（ＲｅｆｌｏｔｒｏｎＲ）（ベ
ーリンガー・マンハイム・ゲゼルシャフト・ミット・ベ
シュレンクテル・ハフツング（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ　
Ｍａｎｎｈｅｉｍ　ＧｍｂＨ）、ドイツ連邦共和国マン
ハイム）中に挿入する。該液体は、ガラス繊維フリース
（３）中に浸透し、全血の場合に血球が分離され、移動
層として作用するガラス繊維域（２）に到達する。反射
率光度計において、フラップの下のフィルム（１）また
は（１０）を、フラップ上の押圧によって移動層（２）
中の液体と接触させ、６４２ｎｍ、３７℃で反射率測光
法によって測定する。

【００８０】

【実施例２】本発明のフィルム層 　　以下の組成からなる混合物を製造し、透明ポリエス
テルホイルに湿フィルム厚３００μｍで塗布し、乾燥さ
せる。

【００８１】 　　２，２−ジフェニル−１−シアノ−アクリル酸−エ
チルヘキシルエステル　　（ユビヌル（ＵｖｉｎｕｌＲ
）Ｎ５３９、ビーエイエスエフ（ＢＡＳＦ）、　　ドイ
ツ国ルドヴィークシャフェン）　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　６．４２
ｇ　　４−（２，６−ジブロモ−４−ニトロ−フェニル
アゾ−）−２−オクタデシル−　　オキシナフトール−
１（実施例５ａ〜ｃ）　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　０．６９ｇ　　バリノマ
イシン　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　０．１０７ｇ　　珪藻土（セラトム（Ｃｅｌａｔｏ
ｍＲ）ＭＷ　２５、イーグル−ピッチャー　　（Ｅａｇ
ｌｅ−Ｐｉｃｈｅｒ）、アメリカ合衆国シンシナティ）
　　　　　　　　　　　　　　　　　１０．０５ｇ　　
メチルエチルケトン　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　１８．１ｇ　　酢酸ビニル−ラウリン酸ビニルコ
ポリマー（ビナパス（ＶｉｎｎａｐａｓＲ）　　Ｂ　５
００／２０　ＶＬ、ヴァッカー・シェミィ（Ｗａｃｋｅ
ｒ　Ｃｈｅｍｉｅ）、　　ドイツ国ムニッヒ）　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　５．２４ｇ

【００８２】同様の方法で、湿フィルム厚１５０μｍを
有する、以下の組成からなる第２の層をこれらの層に塗
布し、乾燥させる。

【００８３】 　　Ｎ，Ｎ−ビス−（ヒドロキシエチル）−アミノエタ
ンスルホン酸　　　　　　　　　　　　　８１．１３ｇ
　　ヒドロキシエチルセルロース（ナトロソル（Ｎａｔ
ｒｏｓｏｌＲ）２５０Ｇ、　　ハーキュリーズ・インコ
ーポレイテッド（Ｈｅｒｃｕｌｅｓ　Ｉｎｃ．）、　　
アメリカ合衆国デラウエア州ウィルミントン）　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　４．８１ｇ　
　水　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　２３６ｇ　　エタノール　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
３３４ｇ　　ＬｉＯＨでｐＨ７．５に調節

【００８４】実施例１に記載のように塗布したホイルか
ら図１の試験担体を製造して、測定する。測定は、１リ
ットル当たり５．０６ミリモルのカリウムを有する血清
を用いて、該試料を本発明のフィルム層に接触させた後
、４秒毎に行う。

【００８５】

【表２】 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　秒　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　反射率（％）　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　４　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　２４．８　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　８　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　２１．７　　　　　　　　
　　　　　　　　　　１２　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　２０．０　　　　　　　　　　　　
　　　　　　１６　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　１９．２　　　　　　　　　　　　　　　　
　　２０　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　１８．６　　　　　　　　　　　　　　　　　　２４
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１８．
２　　　　　　　　　　　　　　　　　　２８　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　１７．９　　　
　　　　　　　　　　　　　　　３２　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　１７．７　　　　　　　
　　　　　　　　　　　３６　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　１７．５　　　　　　　　　　　
　　　　　　　４０　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　１７．４　　　　　　　　　　　　　　　
　　　４４　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　１７．２　　　　　　　　　　　　　　　　　　４
８　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１７
．１　　　　　　　　　　　　　　　　　　５２　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１７．０　　
　　　　　　　　　　　　　　　　５６　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　１６．９　　　　　　
　　　　　　　　　　　　６０　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　１６．９　　　　　　　　　　
　　　　　　　　６４　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　１６．８　　　　　　　　　　　　　　
　　　　６８　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　１６．８

【００８６】充分な色濃度を有する適当
な色不変性が６０秒後に達成されることを見ることがで
きる。

【００８７】

【実施例３】図１のカリウム測定用試験担体ａ）以下の
組成からなる混合物を製造し、透明ポリエステルホイル
に湿フィルム厚３００μｍで塗布し、乾燥させる。

【００８８】 　　酢酸ビニル−ラウリン酸ビニルコポリマー（ビナパ
ス（ＶｉｎｎａｐａｓＲ）　　Ｂ　５００／２０　ＶＬ
、ヴァッカー・シェミィ（Ｗａｃｋｅｒ　Ｃｈｅｍｉｅ
）、　　ドイツ国ムニッヒ）　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　１３．１１ｇ　　２，２−ジフェニル−
１−シアノ−アクリル酸−エチルヘキシルエステル　　
（ユビヌル（ＵｖｉｎｕｌＲ）Ｎ５３９、ビーエイエス
エフ（ＢＡＳＦ）、　　ドイツ国ルドヴィークシャフェ
ン）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　１６．０４ｇ　　４−（２，６−ジブロ
モ−４−ニトロ−フェニルアゾ−）−２−オクタデシル
−　　オキシ−ナフトール−１（実施例５ａ〜ｃ）　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
０．１７３ｇ　　２，４，６，８−テトラニトロ−５−
オクタデシルオキシ−ナフトール−１　　（実施例６）
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　０．０４５６ｇ　　バリノマイシン　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　０．２６７３ｇ　　
珪藻土（セラトム（ＣｅｌａｔｏｍＲ）　ＭＷ　２５、
イーグル−ピッチャー　　（Ｅａｇｌｅ−Ｐｉｃｈｅｒ
）、アメリカ合衆国シンシナティ）　　　　　　　　　
　　　　　　　２５．１３ｇ　　酢酸ブチル　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　４５．１
７ｇ

【００８９】同一の方法で、湿フィルム厚１５０μｍを
有する以下の組成による第２の層をこの層に適用し、乾
燥させる。

【００９０】 　　Ｎ，Ｎ−ビス−（ヒドロキシエチル）−アミノエタ
ンスルホン酸　　　　　　　　　　　　８１．１３ｇ　
　ヒドロキシエチルセルロース（ナトロソル（Ｎａｔｒ
ｏｓｏｌＲ）２５０Ｇ、　　ハーキュリーズ・インコー
ポレイテッド（Ｈｅｒｃｕｌｅｓ　Ｉｎｃ．）、　　ア
メリカ合衆国デラウエア州ウィルミントン）　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　４．８１ｇ　　水
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　２３６ｇ　　エタノール　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　３３４ｇ
　　ＬｉＯＨでｐＨ７．５に調節

【００９１】実施例１および２に記載のように、塗布し
たホイルから図１の試験担体を製造し、測定する。測定
は、試料を本発明のフィルム層に接触させて、６０秒後
に行う。

【００９２】様々な含有量のカリウムを有する血清を使
用すると、以下のカリウム含有量による反射率（％Ｒ）
の依存性が分かる。

【００９３】

【表３】

【００９４】測定を数回行い、検量線によって％Ｒ値を
濃度に変換すると、約１〜２％の変動係数が得られる。

【００９５】ｂ）以下の組成からなる混合物を製造し、
透明ポリエステルホイルに湿フィルム厚３００μｍで塗
布し、乾燥させる。

【００９６】 　　酢酸ビニル−マレイン酸ジブチルエステルコポリマ
ー（モヴォリス　　（ＭｏｗｏｌｉｔｈＲ）３５／７３
、ヘキスト・アクチエン・ゲゼルシャフト　　（Ｈｏｅ
ｃｈｓｔ　ＡＧ）、ドイツ国フランクフルト）　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　１４．７ｇ　　
２，２−ジフェニル−１−シアノ−アクリル酸−エチル
ヘキシルエステル　　（ユビヌル（ＵｖｉｎｕｌＲ）Ｎ
５３９、ビーエイエスエフ（ＢＡＳＦ）、　　ドイツ国
ルドヴィークシャフェン）　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　１８．４ｇ　　
４−（２，６−ジブロモ−４−ニトロ−フェニルアゾ−
）−２−オクタデシル−　　オキシ−ナフトール−１（
実施例５ａ〜ｃ）　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　０．１３０ｇ　　バリノマイシ
ン　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　０．６００ｇ 　　珪藻土（セラトム（ＣｅｌａｔｏｍＲ）ＭＷ　２５
、イーグル−ピッチャー　　（Ｅａｇｌｅ−Ｐｉｃｈｅ
ｒ）、アメリカ合衆国シンシナティ）　　　　　　　　
　　　　　　　　　２８．２ｇ　　酢酸ブチル　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　５０
．７ｇ

【００９７】同一の方法で、湿フィルム厚１５０μｍを
有する以下の組成からなる第２の層をこの層に塗布し、
乾燥させる。

【００９８】 　　水に入れたヒドロキシエチルセルロース（ナトロソ
ル（ＮａｔｒｏｓｏｌＲ）　　２５０Ｇ、ハーキュリー
ズ・インコーポレイテッド（Ｈｅｒｃｕｌｅｓ　　　Ｉ
ｎｃ．）、アメリカ合衆国デラウエア州ウィルミントン
）　　　　　　　　　　　　　４１．５ｇ　　Ｎ，Ｎ−
ビス−（ヒドロキシエチル）−アミノエタンスルホン酸
　　　　　　　　　　　　　８．５ｇ　　エタノール　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　６４ｍｌ　　ＬｉＯＨでｐＨ７．８に調節

【００９９】実施例１、２および３ａ）に記載の塗布し
たホイルから、図１の試験担体を製造し、測定する。該
測定は、試料を本発明のフィルム層に接触させて６０秒
後に行われる。

【０１００】様々な含有量のカリウムを有する血清を使
用すると、以下のカリウム含有量による反射率（％Ｒ）
の依存性が分かる。

【０１０１】

【表４】

【０１０２】

【実施例４】図２のカリウムの測定用試験担体　　以下
の組成からなる混合物を製造し、透明ポリエステルホイ
ルに湿フィルム厚３００μｍで塗布し、乾燥させる。

【０１０３】 　　酢酸ビニル−ラウリン酸ビニルコポリマー（ビナパ
ス（ＶｉｎｎａｐａｓＲ）　　Ｂ５００／２０　ＶＬ、
ヴァッカー・シェミィ（Ｗａｃｋｅｒ　Ｃｈｅｍｉｅ）
、　　ドイツ国ムニッヒ）　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　１９．６ｇ　　２，２−ジフェニル−１
−シアノ−アクリル酸−エチルヘキシルエステル　　（
ユビヌル（ＵｖｉｎｕｌＲ）Ｎ５３９、ビーエイエスエ
フ（ＢＡＳＦ）、　　ドイツ国ルドヴィークシャフェン
）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　２４．０ｇ　　４−（２−ブロモ−４−
ニトロ−６−トリフルオロメチルフェニルアゾ−）−２
−　　オクタデシルオキシ−ナフトール−１（実施例５
ｄ）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．０
７１ｇ　　メソシュウ酸−ジニトリル−２，４−ジニト
ロフェニルヒドラゾン　　（実施例８）　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．０５
２ｇ　　バリノマイシン　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　０．３０ｇ　　珪藻土（セラトム
（ＣｅｌａｔｏｍＲ）ＭＷ　２５、イーグル−ピッチャ
ー　　（Ｅａｇｌｅ−Ｐｉｃｈｅｒ）、アメリカ合衆国
シンシナティ）　　　　　　　　　　　　　　　　　３
７．５ｇ　　ｍ−キシロール　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　６７．４ｇ

【０１０４】長繊維紙６７７６（シェーラー・アンド・
ヘェーシュ（Ｓｃｈｏｅｌｌｅｒ　ａｎｄ　Ｈｏｅｓｃ
ｈ）、ドイツ連邦共和国ゲルンスバッハ）に以下の溶液
を含浸させ、乾燥させる。

【０１０５】 　　Ｎ，Ｎ−ビス−（ヒドロキシエチル）−アミノエタ
ンスルホン酸　　　　　　　　　　　　　８．５ｇ　　
ｎ−オクチルグルコシド　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　０．１ｇ 　　蒸留水　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　９１．５ｍｌ 　　ＬｉＯＨでｐＨ７．５に調節

【０１０６】実施例１に記載したように、塗布したホイ
ル（１０）および含浸紙（１１）から図２の試験担体を
製造し、測定する。該測定は、試料をフィルム層に接触
させて６０秒後に行われる。

【０１０７】様々な含有量のカリウムを有する血清を使
用すると、以下のカリウム含有量による反射率（％Ｒ）
の依存性が分かる。

【０１０８】

【表５】

【０１０９】

【実施例５】４−［（２，６−ジブロモ−４−ニトロフ
ェニル）アゾ］−２−オクタデシルオキシ−１−ナフト
ールａ）２−オクタデシルオキシナフタレン撹拌器、冷
却器および温度計を装着した４リットルの３つ口フラス
コ中、エタノール１リットルに水酸化ナトリウム（９９
％）４８ｇ（１．２モル）を入れた溶液に２−ナフトー
ル（９８％）１７２．８ｇ（１．２モル）を添加し、溶
解した後、臭化ｎ−オクタデシル４１７ｇ（１．２５モ
ル）を添加し、反応混合物を還流下で１４時間加熱する
。さらにエタノール１リットルを添加した後、熱溶液を
サイツ（Ｓｅｉｔｚ）濾過器上で吸引して、無機物質を
除去し、弱いピンク色の濾液を氷浴中に３０分間放置し
て結晶化させる。ほとんど無色の結晶を吸引した後、濾
過ケーキをエタノール約７００ｍｌで一度に洗浄し、五
酸化二リンによって乾燥させた後、２−ナフチル−オク
タデシル−エーテル３７１．９ｇ（理論収率９３．７％
）を無色結晶として得る。Ｆｐ　６４〜６８℃。ＴＬＣ
：シリカゲル６０（メルク（Ｍｅｒｃｋ））、移動溶媒
：ｎ−ヘプタン／メチルエチルケトン　２：１、Ｒｆ＝
０．３４。

【０１１０】ｂ）２−オクタデシルオキシ−１−ナフト
ール 塩化カルシウム管と一緒に撹拌器、クライゼン付属物、
温度計および冷却器を有する１０リットルの３つ口フラ
スコ中、氷酢酸３リットルおよび無水酢酸６００ｍｌか
らなる混合物に、２−オクタデシルオキシナフタレン５
９４ｇ（１．５モル）および四酢酸鉛３９７ｇ（０．７
５モル）を添加し、５５℃に加熱する。４日間にわたっ
て、撹拌しながら、さらに四酢酸鉛４００ｇを、２４時
間毎に分けて（各１００ｇ）添加する。その後、形成さ
れた黄色溶液を室温に冷却し、水１．５リットルを添加
した後、再度、３０分間撹拌し、形成された結晶スラリ
ーを吸引し、水２リットルで幾度か洗浄する。湿った粗
生成物をトルオール４リットルに溶解し、水１リットル
と一緒に３回、飽和炭酸水素ナトリウム１リットルと一
緒に３回、次いで再度、水１リットルと一緒に３回振盪
する。 硫酸ナトリウムによるトルオール相の乾燥、吸引および
蒸発による濃縮の後、茶色の粗生成物６３５ｇを得て、
これを、以下のようにクロマトグラフィーによって精製
する；得られた結晶を、トルオール／イソヘキサン（５
：２）１．３リットルの混合物に溶解し、該溶液を、内
径１１．５ｃｍ、充填高１．２ｍのシリカゲル６０（メ
ルク（Ｍｅｒｃｋ））カラムに適用する。移動溶媒とし
て、トルオール／イソヘキサン（５：２）を用いて、約
３００ｍｌの画分を取得する。画分９〜５２を合わせて
、重量が一定になるまで蒸発させて濃縮する。酢酸２−
オクタデシルオキシ−１−ナフトール３２４．２ｇを得
る。Ｆｐ　６７〜６８℃。これをさらに精製せずに、加
熱しながらメタノール１．８リットルに溶解し、２０℃
に冷却する。冷却せずに撹拌しながら形成した懸濁液に
濃硫酸９３ｍｌを１５分以内で滴下する。ここで温度は
３５℃に上昇する。 次に、還流下で２時間加熱し、次いで、氷浴で冷却し、
氷上で冷却しながらさらに３０分間撹拌する。形成した
結晶を吸引し、氷冷メタノール１５０ｍｌで洗浄し、五
酸化二リンによって、乾燥棚中、３５℃で乾燥させる。 無色の結晶、２−オクタデシルオキシ−１−ナフトール
２９４．４ｇ（理論収率４７．５％）を得る。Ｆｐ５８
〜５９℃。

【０１１１】ｃ）４−［（２，６−ジブロモ−４−ニト
ロフェニル）アゾ］−２−オクタデシルオキシ−１−ナ
フトール 撹拌器、クライゼン付属物および温度計を装着した２リ
ットルの３つ口フラスコ中、撹拌しながら１０〜１５分
間、濃硫酸３００ｍｌに亜硝酸ナトリウム２２．７ｇ（
０．３３モル）を供給する。ここで反応溶液の温度は３
５℃に上昇する。次いで、２０℃に冷却し、氷上で冷却
しながら、温度を２０〜２５℃に維持するような方法で
、約１５〜２０分内に氷酢酸２３０ｍｌを滴下する。そ
の後、場合によって冷却しながら１０分間、２，６−ジ
ブロモ−４−ニトロアニリン（リーデル・デ・ヘーン（
Ｒｉｅｄｅｌ　ｄｅ　Ｈａｅｎ）［９９％ＧＣ］）９７
．６ｍｌ（０．３３モル）を分けて添加する。ここで温
度は１９〜２１℃に維持される。そして、さらに３時間
、再度、撹拌する。その後、氷冷水３．５リットル上に
注ぎ、形成されたジアゾニウム塩溶液を、酢酸ナトリウ
ム・三水和物１８０ｇ（１．３３モル）を添加した氷酢
酸３リットルおよびクロロホルム３００ｍｌの混合物に
２−オクタデシルオキシ−１−ナフトール１２４ｇ（０
．３モル）を入れた溶液に、素早く添加する（ナフトー
ルエーテルの溶液の製造においては、酢酸ナトリウムを
添加した氷酢酸／クロロホルム中に供給した後、温度を
約４５℃に上昇させた後に２０℃まで再度冷却すること
に注意しなければならない）。氷浴中で３時間撹拌した
後、製造された結晶を吸引し、残渣を毎回水５００ｍｌ
で３回洗浄し、４０℃の乾燥棚で乾燥させる。 粗生成物　−　淡茶色の結晶２９５．５ｇ　−　をクロ
マトグラフィーによって精製する。アゾ化合物はトルオ
ール／塩化メチレン（２：５）１リットルに溶解し、内
径１１．５ｃｍ、充填高１．２ｍのシリカゲル６０（メ
ルク（Ｍｅｒｃｋ））カラムに適用し、トルオール／塩
化メチレン（２：５）で溶離する。画分約７０ｍｌを得
る。画分５７〜１７３を合わせて、蒸発によって濃縮す
る。茶色の結晶１３４．２ｇが得られる。これらを８０
℃でトルオール４８０ｍｌに溶解し、６５℃に冷却し、
強く撹拌しながらイソヘキサン８００ｍｌを添加する。 撹拌しながら２０℃に冷却させ、冷蔵室中に一晩放置し
、形成した結晶を吸引し、濾過ケーキを氷冷トルオール
／イソヘキサン（１：１．３）３００ｍｌで２回洗浄し
、次いで、イソヘキサン３００ｍｌで洗浄する。その後
、重量が一定になるまで、五酸化二リンによって４０℃
で乾燥棚中で乾燥させる。アゾ化合物の淡茶色の結晶１
１９．９ｇ（理論収率５５．５％）が得られる。Ｆｐ１
０２〜１０３℃。

【０１１２】以下の物質は、実施例５ａ）〜ｃ）と同様
に製造することができる。

【０１１３】ｄ）２−ブロモ−４−ニトロ−６−トリフ
ルオロメチルアニリン（エム・ハウプツシァイン（Ｍ．
Ｈａｕｐｔｓｃｈｅｉｎ）ら、ジャーナル・オブ・アメ
リカン・ケミカル・ソサイエティ（Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈ
ｅｍ．Ｓｏｃ．）７６、１０５１（１９５４））から４
−［（２−ブロモ−４−ニトロ−６−トリフルオロメチ
ルフェニル）アゾ］−２−オクタデシルオキシ−１−ナ
フトール、Ｆｐ８４℃。

【０１１４】

【実施例６】２，４，６，８−テトラニトロ−５−オク
タデシルオキシ−１−ナフトール ａ）５−オクタデシルオキシ−１−ナフトールクライゼ
ン付属物、温度計、塩化カルシウム管および滴下漏斗を
装着した２リットルの３つ口フラスコ中、１，５−ジヒ
ドロキシナフタレン（ヤンセン（Ｊａｎｓｓｅｎ）９９
％）４０ｇ（０．２５モル）を、新しく蒸留したジメチ
ルホルムアミド４００ｍｌに懸濁させ、９７％水素化ナ
トリウム６ｇ（０．２５モル）を少量ずつに分けて４０
分以内で添加する。この工程において、溶解して青色に
なり、さらに、水素が形成され、温度が３６℃に上昇す
る。さらに３０分間撹拌し、３５℃の温かい溶液に９６
％臭化１−オクタデシル８３．３ｇ（０．２５モル）を
１０分以内で滴下する。その後、室温で２４時間、再度
、撹拌する。形成された粗生成物を強く吸引し、残渣を
水６００ｍｌと一緒に１５分間撹拌する。この方法を再
度繰り返し、濾液が無色になるまで濾過残渣を水（約８
００ｍｌ）で非常に長く洗浄する。その後、濾過ケーキ
を五酸化二リンによって乾燥棚中で４０℃で乾燥させる
。融点７６〜７８℃の淡ベージュ色結晶９８．６ｇが得
られる。

【０１１５】さらに精製するために、該生成物を毎回酢
酸エチル７５０ｍｌと一緒に３回撹拌し、淡ベージュ色
結晶の未溶解成分（４０．８ｇ）を濾去し、母液を木炭
で２回処理し、真空濃縮する。融点９０〜９２℃のベー
ジュ色の結晶５３．２ｇ（理論収率５１．９％）が得ら
れる。四硝化化合物を製造するために、この生成物を直
接使用する。ＴＬＣ、シリカゲル６０（メルク（Ｍｅｒ
ｃｋ））、移動溶媒：トルオール／メタノール＝５０：
１、Ｒｆ＝０．３６。

【０１１６】ｂ）２，４，６，８−テトラニトロ−５−
オクタデシルオキシ−１−ナフトール 大きい撹拌器および温度計を装着した２リットルの３つ
口フラスコに濃硫酸１．２リットルを入れ、４０℃に加
熱し、強く撹拌しながら、できる限り迅速に５−オクタ
デシルオキシ−１−ナフトール４９．５２ｇ（０．１２
モル）を添加する。５〜１０分後、粘性の結晶パルプが
形成され、温度が２〜３℃だけ上昇する。次いで、加熱
せずにさらに２０分間撹拌し、次に、約０℃に冷却し、
３０分以内で０〜５℃で、硝化酸（撹拌および冷却しな
がら、約１０〜２０℃で約１５分以内で硝酸（６５％）
３４．９ｍｌを濃Ｈ２ＳＯ４　７０ｍｌに添加して製造
した）を滴下する。この工程において、反応混合物は、
灰−茶色から赤−茶色になる。５〜１０℃でさらに４時
間撹拌した後、約５ｋｇの氷の上に注ぎ、粗生成物を酢
酸エチル２リットルで３回抽出する。その後、酢酸エチ
ル相を合わせて、毎回水１リットルで２回洗浄し、酢酸
エチル相を硫酸ナトリウムによって乾燥させ、吸引し、
蒸発によって濃縮する。濃茶色の樹脂質残留物約８０ｇ
が得られる。 これをカラムクロマトグラフィーによって精製する。内
径７．５ｃｍ、充填高約１１０ｃｍ、充填剤：シリカゲ
ル６０（メルク（Ｍｅｒｃｋ））のカラムを使用する。 移動溶媒：トルオール／アセトン（５：２）。主な画分
Ｒｆ＝０．２４。

【０１１７】この粗物質を移動溶媒約４００ｍｌと再度
混合し、もし全てが溶解されない場合は、吸引し（残渣
がカラムをブロックし得る）、濾液をカラムに適用し、
画分中に溶出させる。各８０ｍｌの画分が得られる。前
留分（無色の溶出液）は、約２リットルである。物質を
含んでいる画分（３０〜１４０）を蒸発によって濃縮す
る。赤−茶色の粘性のペースト２１ｇが得られ、これは
長時間放置すると、結晶化する。この生成物をアセトン
４２ｍｌに溶解し、最終生成物を、室温で、５倍の量の
イソヘキサンをゆっくりと添加することよって沈殿させ
る。５時間撹拌した後、吸引し、濾過ケーキをイソヘキ
サンで洗浄し、室温で五酸化二リンおよびモレキュラー
シーブによって真空乾燥させる。所望のテトラニトロ−
オクタデシルオキシナフトール１４．９ｇ（理論収率２
１％）が得られる。Ｆｐ２３６〜２３８℃（分解）。Ｔ
ＬＣ：シリカゲル６０（メルク（Ｍｅｒｃｋ））、移動
溶媒：塩化メチレン／メタノール（８：１）；Ｒｆ＝０
．２７。

【０１１８】

【実施例７】３−ペンタデシル−２，４，６−トリニト
ロフェノール ５００ｍｌのエーレンマイヤーフラスコ中、撹拌しなが
ら、濃硫酸１００ｍｌにペンタデシルフェノール（９０
％）６７．５ｇ（０．２モル）を添加し、９０℃に加熱
する。ここで、撹拌が困難である濃茶色の高いビスコー
スペーストが形成され、これを９０℃で１時間保持する
。１リットルの分離３つ口フラスコ中、氷浴によって、
６５％硝酸７０ｍｌ（約１モル）を１０℃に冷却する。 温度が２５℃以上にならないような方法で氷浴で冷却し
ながら、該硝酸に、予め得られた高い粘性のスルホン化
生成物を少量ずつに分けて約２時間添加し（ここで粘性
ペーストはヘアードライヤーで液体に維持する）、この
工程で、撹拌するのが困難であるベージュ色のペースト
が得られ、これを室温でさらに１時間撹拌する。その後
、氷５００ｇの上に注ぎ、そのようにしつつ、微細な沈
殿物を形成する。この方法で得られた粗生成物は、困難
性を伴って吸引できるだけであり、これが、全調製物を
遠心分離するのが好ましい理由である。上澄み液をデカ
ントして除き、付着する酸を除去するために毎回水を添
加した後に、この方法を２回繰り返す；得られた沈殿物
をエタノール５００ｍｌでフラスコ中に洗い入れ、５０
℃まで加熱することによって（水浴中で）溶解し、氷浴
中にそれを放置することによって結晶化させる。生成物
を強く吸引した後、エタノールで湿っている弱いベージ
ュ色の３−ペンタデシル−２，４，６−トリニトロフェ
ノール３７．５ｇ（理論収率４２．６％）が得られる。 融点５３〜５６℃。 ＴＬＣ：シリカゲル６０、移動溶媒：酢酸エチル／メタ
ノール／氷酢酸（９０：５：５）、Ｒｆ＝０．８。

【０１１９】五酸化二リンによって物質を乾燥させた後
、３−ペンタデシル−２，４，６−トリニトロフェノー
ル３５．７５ｇ（理論収率４０．１％）が得られる。Ｆ
ｐ５９〜６１℃。

【０１２０】

【実施例８】［（２，４−ジニトロフェニル）ヒドラゾ
ノ］プロパンジニトリル 亜硝酸ナトリウム２．１ｇ（０．０３モル）を濃硫酸３
０ｍｌに溶解する。この間に、温度が５０℃まで上昇す
る。２０℃に冷却し、１５〜２０℃で氷酢酸２０ｍｌを
滴下し、２，４−ジニトロアニリン（ＮＬ−Ａ−６４１
１１８９）５．５ｇ（０．０３モル）を幾度かに分けて
添加し、２０℃でさらに１時間、再度撹拌する。

【０１２１】マロジニトリル１．９８ｇをエタノール７
５ｍｌに溶解し、水３５ｍｌに酢酸ナトリウム・三水和
物７４ｇを入れた溶液を添加し、１９℃で撹拌しながら
、上記で製造したジアゾニウム塩溶液を滴下する。

【０１２２】１時間後、反応混合物を塩化メチレン／メ
タノール＝９８：２と一緒にシリカゲル６０（メルク（
Ｍｅｒｃｋ））上でクロマトグラフィーによって精製し
、Ｒｆ＝０．２８を有する生成物を得る。

【図面の簡単な説明】

【図１】　　本発明のフィルム層を有する特に好ましい
試験担体の斜視図である。

【図２】　　本発明のフィルム層を有するさらに特に好
ましい試験担体の斜視図である。

【符号の説明】

１・・・フィルム層 ２・・・移動層 ３・・・分離層 ４・・・保護層 ５・・・不活性担体ホイル ６・・・熱溶融型接着剤のストリップ ７・・・試料適用域 ８・・・試験域 ９・・・接着部 １０・・・フィルム層 １１・・・付加層

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】　　揮発困難性の疎水性有機液体およびイ
   オノフォアと均一に混合した疎水性ポリマーを含む液体
   耐性有機相ならびに測定しようとするイオンの存在下で
   その色が変化する物質を有する試験層を含有し、該試験
   層が吸油価８０〜２００の粒子を含有し、イオノフォア
   が疎水性有機相中に均一に分散されていることを特徴と
   するイオン測定用試験担体。
2. 【請求項２】　　疎水性ポリマーが酢酸ビニルのコポリ
   マーである請求項１記載の試験担体。
3. 【請求項３】　　試験層における粒子に対する疎水性ポ
   リマーの重量比が約５：１〜約１：１０、特に約１：１
   〜約１：３である請求項１または２記載の試験担体。
4. 【請求項４】　　試験層における揮発困難性の疎水性有
   機液体に対する疎水性ポリマーの重量比が約５：１〜約
   １：５、特に約２：１〜約１：２である請求項１〜３の
   いずれか１項記載試験担体。
5. 【請求項５】　　色が変化する物質として、一般式（Ｉ
   ）：【化１】 ［式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、同一または異なって
   おり、各々、水素原子、アルキル基またはアルコキシ基
   であり、これらのうち少なくとも１つの基が（Ｃ８〜Ｃ
   ３０）−アルキルまたはアルコキシ基であり、Ｒ４は、
   水素原子またはアルキル基であり、Ｒ５は、ニトロ基、
   ハロゲン原子によって置換されているアルキル基、シア
   ノ基、スルホンアミド基またはアルキルスルホニル基で
   あり、Ｘは、窒素原子または基ＣＲ６であり、Ｙは、硫
   黄原子または基ＣＲ７＝ＣＲ８であり、Ｒ６、Ｒ７およ
   びＲ８は、同一または異なっており、水素原子、ハロゲ
   ン原子、ニトロ基、シアノ基、アルキル基もしくはハロ
   ゲン原子によって置換されているアルキル基またはアル
   キルスルホニル基である］で示される化合物を使用する
   請求項１〜４のいずれか１項記載の試験担体。
6. 【請求項６】　　色が変化する物質および液体耐性有機
   相が、直接または間接的に相互接触させることができ、
   液体交換を可能にする２つの層中に含まれる請求項１〜
   ５のいずれか１項記載の試験担体。