JPH04200392A - 酵素による光学分割法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は酵素を利用した光学分割法に関し、更に詳細に
は合成抗癌剤として有用であるカンプトテシン誘導体の
重要な合成中間体である次式（１）Ｃ で表わされる（Ｓ）−４−アシルオキシ−４−エチル−
６，６−（エチレンジオキシ）〜７．８−ジヒドローＩ
Ｈ−ピラノ　［３，４−ｆｌインドリジン−３，１０（
４Ｈ）−ジオンを酵素を利用した光学分割により製造す
る方法に関する。

〔従来の技術及び発明が解決しようとする課題〕従来、
次の式（３〕 で表わされるカンプトテシン誘導体は、合成抗癌剤とし
て有用であり、その合成中間体として下記化合物（４）
が重要であることが知られている（特開昭６３−１５２
３８２号公報）。

ｔｉｌｌ　　　　　Ｎ かかる化合物（４）の製造法としては、当該化合物（４
）のラセミ体をジアステレオマーに誘導後分別結晶化合
物による光学分割法（特開昭６３−１５２３８２号公報
）等が知られている。

しかしながら、これら従来の光学分割法は操作が煩雑で
ある、生成物の収率が低い等の欠点を有し、工業的な製
法としては充分満足できるものではなかった。

〔課題を解決するための手段〕

かかる実状において、本発明者らは酵素を利用して化合
物（４）のみを選択的に得るべく種々探索したところ、
動物又は植物由来のＳＨ酵素はラセミ体である下記化合
物（２）のＲ体にのみ作用してアシル基を除去し、８体
には作用しないため、化合物（４）へ容易に導くことの
できる化合物（１）が選択的に得られることを見出し、
本発明を完成するに到った。

本発明は次の反応式によって示される。

＋Ｉ　　　　０ （式中、Ｒはアルキル基を示す） すなわち、一般式（２）で表わされる４−アシルオキシ
−４−エチル−６，６−（エチレンジオキシン−７，８
−ジヒドロ−ＩＨ−ピラノ　〔３，４−ｆ〕インドリジ
ン−３，１０（４Ｈ）−ジオンのラセミ体に、動物又は
植物由来のＳＨ酵素を作用させることを特徴とする化合
物（１）の製造法である。

本発明方法の原料化合物を表わす上記一般式（２）中、
Ｒで示されるアルキル基としてはメチル基、エチル基、
ｎ−プロピル基等の低級アルキル基が好ましい。

かかる化合物（２）のラセミ体（以下、単に化合物（２
）という）は、例えば特開昭６３−１５２３８２号記載
の方法に従って得られた４−エチル−６，６−（エチレ
ンジオキシ）−７，８−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−Ｉ
Ｈ−ピラノ　［３，４−ｆ：］］インドリジンー３．１
０４Ｈ）−ジオンに、鮨肪酸無水物、脂肪酸ハライド等
の脂肪酸の反応性誘導体を反応させることにより製造さ
れる。

本発明方法を実施するには、まず化合物（２）を水又は
水と酢酸エチル、イソプロピルエーテル、ｎ−ヘキサン
、ベンゼン、トルエンの如き有機溶媒との混合溶媒に懸
濁し、次いで動物又は植物由来のＳＨ酵素を静かに加え
攪拌すればよい。

用いられるＳＨ酵素としては、活性中心に−ＳＨ基を有
する酵素であれば特に制限されないが、植物由来の酵素
が望ましく、その中でも特にパパイン、フィシンの如き
酵素が望ましい。反応は、通常５〜６０℃、好ましくは
３０〜５０℃、ｐＨ４〜９好ましくは、６〜７で１０〜
４８時間程度行われる。反応に使用する化合物（２）の
濃度は、０．１〜５重量％の間で可能であるが通常０．
５〜２重量％程度で行うのが望ましい。ＳＨ酵素の使用
量は特に限定されないが、化合物（２）に対し１重量倍
から１０重量倍用いるのが適当である。反応終了後、反
応液を濾過、減圧濃縮、カラムクロマトグラフィー等の
手段を用いて化合物（１）を単離することかできる。

得られた化合物（１）は、親子シル化して化合物（４）
へと導き、次いで例えば特開昭６３−１５２３８２号公
報記載の方法により前記カンプトテシン誘導体（３）、
その他の合成抗癌剤に導くことができる。

〔発明の効果〕

本発明の製造法は温和な条件下で反応を行うことができ
、反応における副反応がほとんど無いため目的の化合物
（１）を高純度に製造することができる。従って本発明
の製造法は、化合物（１）の工業的製造方法として優れ
たものである。

〔実施例〕

以下、本発明を更に実施例により説明するが、本発明は
これにより限定されるものではない。

参考例１ 一ジオン ４−エチル−６，６−（エチレンジオキシ）−７，８−
ジヒドロ−４−ヒドロキシ−ＩＨ−ピラノ　［３，４−
ｆｌインドリジン−３，１０（４Ｈ）−ジオン３．０７
ｇを塩化メチレン１０−に懸濁し水冷攪拌下、ジメチル
アミノピリジン１２４■、無水酢酸１．１３＋ｎｐ、を
加え室温で４時間放置した。ＨＰＬＣで反応の終了を確
認後、反応液を減圧下濃縮した。残渣ヲイソブロビルア
ルコール２０ｍｆから結晶化し濾過した。結晶を冷イソ
プロピルアルコールで洗浄後乾燥し標記化合物３．４１
ｇを得た。

ＩＲｖ□ＸＣｍ−’　　１７４０．１６６０．１６１０
（Ｃ＝Ｏ）ＦＴ−ＮＭＲ（ＣＤＣｆｆ　３中のδ値ｐｐ
ｍ）０、８７　（３８，ｔ、　Ｊ＝７）１ｚ）２、０７
　（２Ｈ，ｔ、　Ｊ＝７Ｈｚ）２、１１　（３Ｈ，ｓ） ２、４２　（２）１．　ｔ、　Ｊ＝７Ｈｚ）４、０〜４
．３　（６Ｈ，ｍ） ５、３６　（２ｆｌ、　ＡＢｑｕａｒｔｅｔ、　Ｊ＝１
７Ｈｚ、　４５）１ｚ）６、０７　（ＩＨ，ｓ） 実施例１ ４−アセトキシ−４−エチル−６，６−（エチレンジオ
キシ）−７，８−ジヒドロ−ＩＨ−ピラノ［３，４−ｆ
）インドリジン−３，１０（４Ｈ）−ジオン１．５０ｇ
を水：酢酸エチル（９０：　１０）の混合溶媒（含０．
ＩＭリン酸緩衝液ｐＨ６，０）　１５０−に懸濁し、次
いでパパイン（メルク社製）７．５ｇ、２−メルカプト
エタノール０．６ｍｊ！を加え４０℃で２４時間攪拌し
た。ＨＰＬＣで反応の終了を確認後、反応液を分液（水
−クロロホルム）し生成物を抽出した（５〇−×３）。

有機層を水で洗浄後乾燥し濃縮した。

残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム−
アセトン）で精製し、７０５ｍｇの標題化合物と５９４
ｍｇの（Ｒ）−４−ｍチル−６，６−（ｆｆ−チレンジ
オキシ）−７，８−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−ＩＨ−
ピラノ　［３，４−ｆ〕インドリジン−３，１０（４Ｈ
）−ジオンを回収した。

得られた目的化合物の機器分析値は別途合成のそれと完
全に一致し光学純度は、光学異性体分離カラムによる分
析により９９％ｅ、　ｅ、以上であった。

ＩＲｖ、、Ｘｃｍ−’　　１７４０．１６６０．１６１
０（Ｃ＝０）ＦＴ−ＮＭＲ（ＣＤＣｆ、中のδ値ｐｐｍ
）０、８７　（３Ｈ，ｔ、　Ｊ＝７ｆｌｚ）２、０７　
（２８，ｔ、　Ｊ＝７Ｈｚ）２．１１　（３Ｈ，ｓ） ２、４２　（２Ｈ，ｔ、　Ｊ＝７Ｈｚ）４、０〜４．３
　（６Ｈ，ｍ） ５．３６　（２Ｈ，八Ｂｑｕａｒｔｅｔ、Ｊ４７ｔｌｚ
、４５Ｈｚ）６、０７　（ＩＨ，５） ＨＰＬＣ条件 カラＡ　：　ＵＬＴＲＯＮ　ＢＳ−ＣＩＶＭ（信和化工
社！Ｉり移動相：２．５％エタノール （含２０ｍＭリン酸緩衝液ｐＨ６、０）流　速：　１．
　Ｏｍｆ！　／　ｍｉｎ波　　長：２５４０ｍ 実施例２ ４−アセトキシ−４−エチル−６，６−（エチレンジオ
キシ）−７，８−ジヒドロ−ＩＨ−ピラノ［３，４−ｆ
〕インドリジン−３，１０（４Ｈ）−ジオン７５０■を
０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６，０）　１５０献に懸濁
し、次いでフィシン（長瀬産業株式会社製）　７．５ｇ
、　２−メルカプトエタノール０．６ｍｊ’を加え４０
℃で４８時間攪拌した。ＨＰＬＣで反応の終了を確認後
、反応液を分液（水−クロロホルム）し生成物を抽出し
た（２５−Ｘ３）。有機層を水で洗浄後乾燥し濃縮した
後、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホル
ム−アセトン）で精製し、３６０　ｍｇの標題化合物と
２９０　ｍｇの（Ｒ）−４−エチル−６，６−（エチレ
ンジオキシ）−７，８−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−Ｉ
Ｈ−ピラノ　〔３，４−ｆ〕インドリジン−３，１０（
４Ｈ）−ジオンを回収した。

得られた目的化合物の光学純度は、光学異性体分離カラ
ムによる分析により９６％ｅ、　ｅ、であった。

以上

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、一般式（２） ▲数式、化学式、表等があります▼（２） （式中、Ｒはアルキル基を示す） で表わされる４−アシルオキシ−４−エチル−６，６−
   （エチレンジオキシ）−７，８−ジヒドロ−１Ｈ−ピラ
   ノ〔３，４−ｆ〕インドリジン−３，１０（４Ｈ）−ジ
   オンのラセミ体に、動物又は植物由来のＳＨ酵素を作用
   させることを特徴とする、次式（１） ▲数式、化学式、表等があります▼（１） で表わされる（Ｓ）−４−アシルオキシ−４−エチル−
   ６，６−（エチレンジオキシ）−７，８−ジヒドロ−１
   Ｈ−ピラノ〔３，４−ｆ〕インドリジン−３，１０（４
   Ｈ）−ジオンの製造法。