JPH04117396A - ピログルタミン酸残基を有するトリペプチド誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は新規なピログルタミン酸残基を有するトリペプ
チド誘導体に関し、更に詳しくは蛋白分解酵素阻害能を
有するピログルタミン酸残基を有するトリペプチド誘導
体又はその薬学的に許容し得る塩及びそれらを有効成分
とする蛋白分解酵素阻害剤に関する。

〔従来の技術〕

生体内には種々の蛋白分解酵素が存在していることは周
知の通りであり、例えばプラスミン、トリプシン　カリ
クレイン、トロンビン、ウロキナーゼなどのトリプシン
様酵素や、あるいはキモトリプシン様酵素、ペプシン様
酵素などが知られている。これらの蛋白分解酵素は何ら
かの理由により異常に活性化されると種々の疾患をひき
おこすことが知られている。

従って、これらの蛋白分解酵素に対して阻害活性を示す
物質は何らかの臨床治療薬として有用である。例えば抗
プラスミン剤は止血剤、抗炎症剤抗アレルギー剤として
有用であり、抗トロンビン剤は血栓の治療に有用であり
、抗トリプシン剤は膵炎の治療に有用であり、抗カリク
レイン剤は炎症、潰瘍の治療剤として有用であり、抗ウ
ロキナーゼ剤はウロキナーゼによる血栓溶解療法の際の
出血症状を抑制するのに有用である。

従来からこのような作用を有する蛋白分解酵素阻害剤の
開発が進められているが、それらの蛋白分解酵素阻害活
性は低く、医薬品として実用に供するには十分ではない
。また、複数のいくつかの蛋白分解酵素に対して十分な
阻害活性を有する蛋白分解酵素阻害剤の開発もいまだな
されていない。

例えば、ある種のアルギニナールを含むトリペプチド誘
導体が、蛋白分解酵素阻害剤として広く知られている。

即ち、アセチル−し−ロイシルト−ロイシル−アルギニ
ナール（ロイペプチン）は、ある種の微生物が産生ずる
アルギニナールを含むトリペプチド誘導体の１つである
（例えば、Ｊ、　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　（Ｔｏｋｙ
ｏ）　１９６９年２２巻２８３頁参照）が、その阻害活
性は低い（例えば、代謝１９７７年１４巻６号１０８７
頁参照）。Ｄ−フェニルアラニル−し−プロリル−し−
アルギニナールは、トロンビン阻害剤として知られてい
る（例えば、ＳｙｍｐｏｓｉａＢｉｏｌｏｇｉｃａ　）
Ｉｕｎｇａｒｉｃａ　１９８４年２５巻２７７頁）が、
他の類似のトリプシン様酵素への阻害能力は弱い。

悔涙らは、ロイペプチンの誘導体を数多く合成している
が、そのいずれもトリプシン様酵素に対する阻害活性は
小さい（Ｊ、　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　（Ｔｏｋｙｏ
　）。

１９８８年４１巻２号、２２０頁参照）。

（発明が解決しようとする課題］ 本発明はかかる従来技術の問題点を解決して実用上十分
な阻害活性を有し、しかも複数のいくつかの蛋白分解酵
素に対しても十分な阻害活性を有する化合物及びそれを
有効成分とする蛋白分解酵素阻害剤を開発することを目
的とする。

〔課題を解決するための手段〕

本発明者は、従来の蛋白分解酵素阻害剤より強力かつ広
範な阻害活性を有する化合物の探索に鋭意努力を重ねた
。その結果Ｌ−１もしくはＤ−ピログルタミン酸または
そのＮ末端にある種の官能基が結合したし−もしくはＤ
−ピログルタミン酸、次いでグリシン、Ｌ−アラニン、
Ｌ−バリン、Ｌ−ロイシン（ただしＬ−ピログルタミン
酸残基に続く場合を餘＜）、Ｌ−イソロイシン、Ｌ−セ
リン、Ｌ−スレオニン、Ｌ−リシン、Ｌ−プロリン。

Ｌ−ピペコリンもしくはＬ−フェニルアラニン、次いで
Ｌ−１Ｄ−もしくはＤＬ−アルギニンというアミノ酸配
列を有するトリペプチド誘導体及びその酸付加塩がすぐ
れた蛋白分解酵素阻害能を有することを見い出し本発明
を完成した。

すなわち本発明は、次の一般式（Ｉ） Ｘ　　Ａｔ　　Ａｍ　　Ａ３　　Ｈ（Ｉ）〔式中、Ｘは
、ＡＩの第２級アミノ基に結合する水素原子、アレーン
スルホニル基（アルキル基、又はアルキルオキシ基を置
換基として有するものも含む）、アルカンスルホニル基
（アリール基を置換基として有するものも含む）、アロ
イル基（アルキル基、ハロゲン原子、アミン誘導体基ア
ルキルオキシ基を置換基として有するものも含む）、ア
シル基（アリール基を置換基として有するものも含む）
、またはアルキルオキシカルボニル基（アリール基を置
換基として有するものも含む）を表わし、Ａ、は、Ａ２
の第１級アミノ基に結合するし−またはＤ−ピログルタ
ミン酸残基を表わし、Ａ２は、Ａ３の第１級アミノ基に
結合するグリシン残基、Ｌ−アラニン残基、Ｌ−バリン
残基、Ｌ−ロイシン残基（ただし、Ａ、がＬ−ピログル
タミン酸残基の場合を除く）、Ｌ−イソロイシン残基、
Ｌ−セリン残基、Ｌ−スレオニン残基、Ｌ−リシン残基
、Ｌ−プロリン残基、Ｌ−ピペコリン酸残基またはＬ−
フェニルアラニン残基を表わし、Ａ３はＬ−１Ｄ−また
はＤＬ−アルギニン残基を表わす］で表わされるトリペ
プチド誘導体または薬学的に許容し得るその酸付加塩、
並びにそのトリペプチド誘導体またはその酸付加塩を有
効成分とする蛋白分解酵素阻害側を要旨とするものであ
る。　上記の本発明の化合物は、種々の蛋白分解酵素を
強力に阻害する。

式（１）におけるＸは、Ａ、のＬ−またはＤ−ピログル
タミン酸残基中の第２級アミノ基に置換する置換基であ
る。Ｘのアレーンスルホニル基としては、ベンゼンスル
ホニル、ナフタレンスルホニル；あるいはｐ−）ルエン
スルホニル、メシチレンスルホニルなどのＣ，−６アル
キル置換ベンゼンスルホニルもしくはＣＩ−６アルキル
置換ナフタレンスルホニル基；ｐ−メトキシベンゼンス
ルホニルなどの０１−６アルコキシ置換ベンゼンスルホ
ニルもしくはＣｌ−６アルコキシ置換ナフタレンスルホ
ニル基が好ましい。

アルカンスルホニル基としては、例えばメタンスルホニ
ル、エタンスルホニル、ブタンスルホニルなどのＣＩ−
６アルカンスルホニル基；あるいはフェニルメタンスル
ホニルなどのフェニル置換ＣＩ−６アルカンスルホニル
基が好ましい。

アロイル基としては、例えば、ベンゾイル、ナフトイル
；あるいはトルオイル、ｐ−エチルベンゾイルなどのＣ
Ｉ−６アルキル置換ベンゾイルもしくはＣ１−６アルキ
ル置換ナフトイル基；ｐ−クロロベンゾイルなどのハロ
ゲン置換ベンゾイルもしくはハロゲン置換ナフトイル基
；ｐ−アミノメチルベンゾイルなどのアミノＣｌ−６ア
ルキル置換ベンゾイルもしくはアミノＣ１−６アルキル
置換ナフトイル基；ｐ−メトキシベンゾイル、ｐ−エト
キシベンゾイルなどのＣＩ−６アルキルオキシ置換ベン
ゾイルもしくはＣ１−６アルキルオキシ置換ナフトイル
が好ましい。

アシル基としては、アセチル、プロピオニル。

オクタノイルなどのｃｚ−ｔｏアシル基；あるいはフェ
ニルアラニンなどのフェニル置換Ｃ２−１゜アシル基が
好ましい。

アルキルオキシカルボニル基としては、例えば、メトキ
シカルボニル、エトキシカルボニル　イソブトキシカル
ボニル、ペントキシカルボニル、ヘキソキシカルボニル
などのＣＩ−６アルキルオキシカルボニル基；あるいは
ベンジルオキシカルボニルなどのフェニル置換Ｃ１−６
アルキルオキシカルボニル基が好ましい。

Ｘとしては、水素原子およびフェニル置換Ｃｌ−６アル
キルオキシカルボニル基が好ましく、特に水素原子およ
びベンジルオキシカルボニル基が好ましい。

式（１）におけるＡ、としてはＬ−ピログルタミン酸残
基、Ａ２としてはＬ−プロリン残基、Ｌアラニン残基、
Ｌ−フェニルアラニン残基およびＬ−ロイシン残基、Ａ
３としてはＬ−アルギニン残基が特に好ましい。

本発明の化合物並びに医薬として許容されるそれらの酸
付加塩は、種々の方法によって製造することができる。

以下に、一般式（１）中の置換基Ｘがベンジルオキシカ
ルボニル基であり、酸付加酸が塩酸あるいは硫酸である
場合を例にしてそれらの方法を説明するが、本発明のト
リペプチド誘導体及びそれらの酸付加塩の合成法は、こ
の記載の方法のみに限定されるものではない。

式（１）においてＸが水素原子またはベンジルオキシカ
ルボニル（Ｚ）基であるトリペプチド誘導体の塩酸塩お
よび硫酸塩は、以下に示す反応スキーム１）〜５）の方
法によって合成することができる。

（１””） ＮＨ （ＣＨ２）３ マ 八ｒｇ−）１　　・　（ＯＢｕ）２−−ＮＣＨ−ＣＨ（
ＯＢｕ）２ｚ＝ベンジルオキシカルボニル ０Ｓｕ＝Ｎ−ヒドロキシスクシンイミ ドエステル 以下に上記の反応スキームに基いて合成法を説明する。

１）　　Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログル
タミル−Ａ、−Ｌ−アルギニナール塩酸塩（■′）は、
対応するＮ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログル
タミル−Ａ、−Ｌ−アルギニナールジブチルアセタール
塩酸塩（Ｉ［）を希塩酸水溶液アセトニトリル中、加水
分解する事により得られる。

化合物（Ｉ［）はＬ−アルギニナールジブチルアセター
ル塩酸塩（■）（特開平１−８９６３参照）を出発原料
として、通常のペプチド合成法（例えば、泉屋信夫ら著
、「ペプチド合成の基礎と実験」、丸善株式会社を参照
）により調製できる。例えば化合物（ｎ）は化合物（Ｉ
ＩＩ）とＮ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログル
タミル−Ａ、−ＯＨの活性エステル（例えば、Ｎ−ヒド
ロキシスクシンイミドエステル）との適当な溶媒（例え
ば、塩化メチレン）中での縮合反応によって得られる。

２）化合物（Ｉ［）は次のようにして合成することもで
きる。化合物（Ｉ［［）とＺ−Ａｍ　−ＯＨの活性エス
テル（例えば、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル
）を適当な溶媒（例えば、塩化メチレン）中で縮合反応
させることによってＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ａ
、−Ｌ−アルギニナールジブチルアセタール塩酸塩（Ｉ
Ｖ）を得、化合物（ＩＶ）を触媒（例えば、パラジウム
黒）存在下、適当な溶媒（例えば、メタノール）中、接
触還元し、Ｈ−Ａｔ　−Ｌ−アルギニナールジブチルア
セタール（Ｖ）を得、化合物（Ｖ）とベンジルオキシカ
ルボニル−し−ピログルタミン酸の活性エステル（例え
ば、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）を適当な
溶媒（例えば、塩化メチレン）中、縮合反応して、目的
の化合物（ｎ）を得る。

３）　　Ｌ−ピログルタミル−Ａ、−Ｌ−アルギニナー
ル塩酸塩（■＃）は、適当な触媒（例えば、パラジウム
黒）存在下、適当な溶媒（例えば、メタノール）中、対
応するＮ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログルタ
ミル−Ａ２　　Ｌ−アルギニナール塩酸塩（Ｉ′）を接
触還元して得られる。

４）　　Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログル
タミル−Ａ、−Ｌ−アルギニナール１　／　２　硫酸塩
（Ｉ”）は、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピロ
グルタミル−Ａｚ　　Ｌ−アルギニナールジブチルアセ
タール塩酸塩（Ｉ［）をクロロホルムに溶解し、５％硫
酸を含む飽和硫酸ナトリウム水溶液で洗浄する事により
、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログルタミル
−Ａ２　　Ｌ−アルギニナールジブチルアセタール硫酸
塩（Ｖｌ）を得、化合物（Ｖｌ）希硫酸−アセトニトリ
ルの混合溶媒で加水分解する事により、得られる。

５）　　Ｌ−ピログルタミル−Ａ、−Ｌ−アルギニナ−
ル１／２硫酸塩（Ｉ″″）は対応するＮ−ヘンシルオキ
シカルボニル−し−ピログルタミル−Ａ２上−アルギニ
ナール１／２硫酸塩（Ｉ′）を触媒（例えば、パラジウ
ム黒）存在下、適当な溶媒（例えば、水含有メタノール
中、接触還元する事により得られる。

置換基Ｘがベンジルオキシカルボニル基でなく、アレー
ンスルホニル基（アルキル基又はアルキルオキシ基を置
換基として有するものも含む）、アルカンスルホニル基
（アリール基を置換基として有するものも含む）、アロ
イル基（アルキル基。

ハロゲン原子、アミン誘導体基、アルキルオキシ基を置
換基として有するものも含む）、アシル基（アリール基
を置換基として有するものも含む）又はアルキルオキシ
カルボニル基（アリール基を置換基として有するものも
含む）の場合も、以上に示した１）、２）または４）と
同様の方法でトリペプチド誘導体及びその酸付加塩を合
成できる。

なお、Ａ、のピログルタミン酸残基がＤ型の場合、ある
いはＡ３のアルギニン残基がＤ−またはＤＬ−の場合も
上記の合成法を同様に用いて本発明の化合物が得られる
。

上記方法においてＬ−アルギニン残基を有する化合物を
用いて合成を行った場合に得られるトリペプチド誘導体
の生成物は、Ｄ配置を有するアルギニン残基を含むある
程度の量の生成物を含有することもあるが、しかしなが
らこのことはそれらの治療的適用に影響を与えない。

一般式（１）のトリペプチド誘導体の酸付加塩は、トリ
ペプチド誘導体と同様に医薬品として治療目的に用いる
ことができ、薬理的及び医薬的に好ましく許容できる。

しかしながら、その活性の根拠は塩基部分であるトリペ
プチド誘導体自体に存し、酸は余り重要でない。ただし
、酸の違いは、化合物の単離のしやすさ安定性及び溶解
性の違いをもたらす。一般式（１）のトリペプチド誘導
体の適当な酸付加塩には、塩酸塩、臭化水素酸塩硫酸塩
などの無機酸塩；酢酸塩、蓚酸塩、コハク酸塩、リンゴ
酸塩、クエン酸塩、乳酸塩などの有機カルボン酸塩；ベ
ンゼンスルホン酸塩、パラトルエンスルホン酸塩、メタ
ンスルホン酸塩などの有機スルホン酸塩等が含まれる。

薬学的に許容しがたい塩（たとえばフッ化水素酸及び過
塩素酸）及び薬学的に許容できない塩も、薬学的に許容
できる塩の単離や塩基の精製に利用することができ、あ
るいは当業者に周知な方法により薬学的に許容できる塩
を製造するに当って有用であり価値を有する。複数の遊
離アミノ基を有するトリペプチド誘導体の場合にはモノ
−もしくはポリ酸付加塩の形態で、又は複数種類の酸の
混合酸付加塩の形態で用いることができる。

本発明のトリペプチド誘導体及びその酸付加塩をプラス
ミン、トロンビン、トリプシン、カリクレイン、ファク
ターＸ１．ウロキナーゼ等のトリプシン様セリンプロテ
アーゼと共存させて、それら蛋白分解酵素の活性を測定
すると、本発明の化合物はいずれも、それぞれの酵素に
対して高い阻害能を有することが確認された。

従って、一般式（１）で表わされるトリペプチド誘導体
または薬学的に許容し得るその酸付加塩を有効成分とす
る蛋白分解酵素阻害剤は、トリプシン様セリンプロテア
ーゼが関連する疾患、例えば、炎症、出血、アレルギー
、膵炎、潰瘍の治療に有効である。

本発明の化合物を医薬として用いる場合その投与方法に
ついては必ずしも制限はなく、薬学上慣用の製剤方法に
よって適当な製剤とし、静脈注射。

筋肉内注射、静脈内点滴、経ロ投与等の方法で使用され
る。その投与用量は１日、１人当り、１■〜１０００■
が適当である。但し、必要に応じて適宜増減し得ること
は言うまでもない。

〔実施例〕

以下に本発明を具体的な実施例を用いて説明する。なお
、次に示すような慣用略号を用いるものとする。

Ｍ＝モル濃度、Ｎ＝規定濃度、ｇ＝ダラム、■＝ミリグ
ラム、戚＝ミリリットル、ｓｍｏｌ＝ミリモル量、ｍｐ
＝融点、ｄｅｃ＝分解、ｍＭ＝ミリモル濃度、Ｒｆ＝薄
層クロマトグラフィーにおける相対的移動度、ＤＭＦ＝
ジメチルホルムアミド、ＣＨＡ＝３−カルボキシ−４−
ヒドロキシアニリド、ＰＮＡ＝バラニトロアニリド、Ｍ
Ｓ−質量分析、ｍ／ｚ＝賞量／を両数、ＭＨ”　＝　（
分子量子１）の値、ＰＨ＝ピーエイチ。

ＴＬＣはシリカゲルＦ！Ｓ−（メルク社製）プレートを
使用し、溶媒は以下に示したものを用いた。

Ｒｆ、＝クロロホルム：メタノール：酢酸：水（４０：
１０：１：１） Ｒｆ　ｔ　”　１−ブタノール：酢酸：水（４：１：１
） Ｒｆ３＝１−ブタノール：酢酸ｎ−ブチル：酢酸：水（
２：１：１：１） Ｒｆ、−クロロホルム：メタノール：酢酸（４０：１０
：５） Ｒｆｓ＝酢酸エチル：ピリジン：酢酸：水（３０：２０
：６：１１） 実施例１ １１ＢＥ弐 ａ）　　Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログＬ
−アルギニナールジブチルアセクール塩酸塩（０，６５
ｇ、２．０　ｄ、特開平１−８９６３参照）の塩化メチ
レン（２０ｍ）懸濁液に、トリエチルアミン（０，２Ｂ
　１ｔｄｌ、　２．０ｍｍｏｌ）　、次いで、Ｎ−ベン
ジルオキシカルボニル−し−ピログルタミル−Ｌプロリ
ン−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（１，０７
ｇ、２．４　ｍｍｏｌ　）を、室温にて加える。

反応混合物を室温にて一夜、攪拌する。反応終了後、反
応混合液を飽和食塩水にて洗浄し、濃縮する。残渣（１
，３２ｇ）をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付
し、クロロホルム：メタノール：酢酸（９０：１０：５
、次いで５０：１０：５）で溶出することにより、０．
９１ｇ（６８％）のＮ−ペンジルオキシカルボニル−し
一ピログルタミルーし一プロリルーし一アルギニナール
ジブチルアセタール塩酸塩を、オイルとして得る。

ＴＬＣ：　Ｒｆ、　＝０．２７−０．３６ｂ）　　Ｎ−
ベンジルオキシカルボニル−し−ピロＮ−ベンジルオキ
シカルボニル−し−ピログルタミル−し−プロリル−し
−アルギニナールジブチルアセクール塩酸塩（０，４０
ｇ、　０．６０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（６０ｄ）
溶液に、ＩＮ塩酸水溶液（３０ｄ）を加え、３６℃で１
時間、攪拌下に反応する。反応終了後、反応混合液を、
ＩＮ水酸化ナトリウム水溶液で、ｐ　Ｈ４，８にする。

溶媒を減圧下に留去し、残渣にクロロホルムを加え、不
溶な部分をろ過して取り除く。炉液を濃縮した後、残渣
を、クロロホルム−ヘキサンで再結晶し、０．２６ｇ（
８０％）のＮ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログ
ルタミル〜Ｌ−プロリル−Ｌ−アルギニナール塩酸塩を
得る。

ｓｐ　−８５°Ｃ（ｄｅｃ、）。　Ｒｆｚ＝　０．１３
　０．３３゜〔α〕＝−４８＠（ｃ＝０．Ｌ　ＤＭＦ　
）。

Ｃ！４Ｈ３３Ｎ６０６Ｃｊ！・Ｈｇｏに対する元素分析
値理論値：　Ｃ５１，９４％、　Ｈ６，３６％、　Ｎ　
１５．１４％実測値：　Ｃ５１，５４％ 実施例２ ６．１６％。

１４．９８％ Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログルタミル−
し−プロリン−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル
の代わりに、ベンジルオキシカルボニル−し−アラニン
−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（０，４９ｇ
、　１．５ｍｍｏｌ）を用い、これに、Ｎ−アルギニナ
ールジブチルアセタール塩酸塩（０，４９ｇ、　１．５
０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１５ｄ）懸濁液、トリエ
チルアミン（０，２１戚、１、５０　ｍｍｏｌ　）を実
施例１ａに従い反応させ、０．４８ｇ（８０％）のＮ−
ベンジルオキシカルボニルし一アラニルーＬ−アルギニ
ナールジブチルアセクール塩酸塩をオイルとして得る。

ＴＬＣ：　　Ｒｆ、　　＝０．３４−０．４　１Ｎ−ベ
ンジルオキシカルボニル−し−アラニルし一アルギニナ
ールジブチルアセタール塩酸塩（０，４５ｇ、　０．８
５ｍｍｏｌ）をメタノール（２５ｍ）に溶解し、パラジ
ウム黒（１ｇ）を加え、水素気流中にて、２時間、室温
で攪拌する。反応終了後、触媒をろ去し、ろ液を濃縮し
、０．３３ｇ（９７％）のし−アラニル−し−アルギニ
ナールジブチルアセタール塩酸塩をオイルとして得る。

ＴＬＣ＝Ｒｆ３＝０．４３−０．５４ Ｌ−アラニル−Ｌ−アルギニナールジブチルアセタール
塩酸塩（０，３２ｇ、０．８０　ｍｍｏｌ　）の塩化メ
チレン（８ｄ）溶液に、トリエチルアミン（０，１１蔵
、０．８０ｍｍｏｌ）　、次いで、ベンジルオキシカル
ボニル−し−ピログルタミン酸−Ｎ−ヒドロキシスクシ
ンイミドエステル（０，３２ｇ、０．８８　ｍｍｏｌ　
）を室温にて加える。反応混合物を室温にて一夜撹拌す
る。反応終了後、反応混合液を飽和食塩水にて洗浄し、
濃縮する。残渣（０，４７ｇ）をシリカゲルカラムクロ
マトグラフィーに付し、クロロホルム：メタノール：酢
酸（７０：１０：５）で溶出し、０．２４ｇ（４７％）
のＮ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログルタミル
−し−アラニルし一アルギニナールジブチルアセタール
塩酸塩をオイルとして得る。

ＴＬＣ：　Ｒｆ、　＝０．２８−０．３８敷１゜ Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−ピログルタミル−
し−アラニル−し−アルギニナールジブチルアセクール
塩酸塩（０，２２ｇ、０．３５　ｍｍｏｌ　）のアセト
ニトリル（３５ＩＲ１）溶液に、ＩＮ塩酸水溶液（１７
，５１ｄ）を加え、３６°Ｃで１．５時間、攪拌下に反
応する。反応終了後、反応混合液を、１Ｎ水酸化ナトリ
ウム水溶液で、ｐ　Ｈ４，８にする。

溶媒を減圧下に留去し、残渣にクロロホルム−メタノー
ル（２０：１）を加え、不溶な部分をろ過して取り除く
。炉液を濃縮した後、残渣を、クロロホルム−ヘキサン
で再結晶し、０．１０ｇ（５７％〕のＮ−ベンジルオキ
シカルボニル−し−ピログルタミル−し−アラニル−し
−アルギニナール塩酸塩を得る。

ＴＬＣ：Ｒｆｚ＝０．３６　０．５５　　　ｍｐ＝１０
５°Ｃ（ｄｅｃ、）（α）　　＝　−２０’　（ｃ＝０
．５．　ＤＭＦ　）Ｃ２□Ｈ３，Ｎ、０．Ｃｆ・２Ｈ２
０に対する元素分析値理論値：　Ｃ４８，３１％、　　
Ｈ６，４５％、　Ｎ　１５．３６％。

実測値：　Ｃ４８，７０％、　　Ｈ６，１４％、　Ｎ　
１４．９５％。

実施例３ ：Ｊ」１１１ Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログルタミル−
し−プロリン−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル
の代わりに、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−フェ
ニルアラニン−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル
（１，３１ｇ、３．３ｍｍｏｌ）を用い、これに、Ｌ−
アルギニナールジブチルアセタール塩酸塩（０，９８ｇ
、３．　Ｏｍｍｏｌ　）の塩化メチレン（３０ｄ）懸濁
液、トリエチルアミン（０，４２戚、３．　Ｏｍｍｏｌ
　）を実施例１ａに従い反応させ、１．３１ｇ（７２％
）のＮ−ベンジルオキシカルボニル−し−アラニル−し
−アルギニナールジブチルアセタール塩酸塩をオイルと
して得る。

ＴＬＣ：　Ｒｆ　Ｉ＝０．４７　０．５５ベンジルオキ
シカルボニル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−アルギニナ
ールジブチルアセクール塩酸塩（１，２４ｇ、２．０５
　ｍｍｏｌ　）をメタノール（１００ｄ）に溶解し、パ
ラジウム黒（１ｇ）を加え、水素気流中にて、２時間、
室温で攪拌する。反応終了後、触媒をろ去し、ろ液を濃
縮し、０．９３　ｇ（９６％）のし−フェニルアラニル
−し−アルギニナールジブチルアセクール塩酸塩をオイ
ルとして得る。

ＴＬＣ：Ｒｆ３＝０．５２−０．５８ Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−アルギニナールジブチルア
セクール塩酸塩（０；４５ｇ、０．９５　ｍｍｏｌ　）
の塩化メチレン（９，５ＩＩＴＩｌ）溶液に、トリエチ
ルアミン（０，１３ｄ、０．９５ｍｍｏｌ）　、次いで
、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログルタミン
酸−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（０，３８
ｇ、１．０５　ｍｍｏｌ　）を室温にて加える。反応混
合物を室温にて一夜攪拌する。反応終了後、反応混合液
を飽和食塩水にて洗浄し、濃縮する。残渣（０，６４ｇ
）をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、クロ
ロホルム：メタノール：酢酸（１００：１０：、５次い
で７０：１０：５）で溶出し、０．３７ｇ（５５％）の
Ｎ−ヘンシルオキシカルボニル−し−ピログルタミル−
し−アラニル−し−アルギニナールジブチルアセクール
塩酸塩をオイルとして得る。

ＴＬＣ：　Ｒｆ、　＝０．２７−０．３１Ｎ−ベンジル
オキシカルボニル−し−ピログルタミル−し−フェニル
アラニル−Ｌ−アルギニナールジブチルアセクール塩酸
塩（７２■、０．１０ｍ鎖ｏ１）のアセトニトリル（１
０ｄ）溶液に、ＩＮ塩酸水溶液（５ｄ）を加え、３６°
Ｃで１．５時間、攪拌下に反応する。反応終了後、反応
混合液を、ＩＮ水酸化ナトリウム水溶液で、Ｐ　Ｈ４，
８にする。

溶媒を減圧下に留去し、残渣にクロロホルムを加え、不
溶な部分をろ過して取り除く。炉液を濃縮した後、残渣
を、クロロホルム−ヘキサンで再結晶し、３６■（６１
％）のＮ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログルタ
ミル−し−フェニルアラニル−し−アルギニナール塩酸
塩を得る。

ＴＬＣ：Ｒｆｚ＝０．３１　０．４５　　　ｍｐ＝９０
°Ｃ（ｄｅｃ、）ＭＳ：ｍ／ｚ　　５５３　　（門１（
”　　）実施例４ 皿 塩 Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログルタミル−
し−プロリン−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル
の代わりに、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−グリシン
−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（１，２９ｇ
、　４．２０ｍｍｏｌ）を用い、これに、Ｌ−アルギニ
ナールジブチルアセクール塩酸塩（１，１４ｇ、　３．
５０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（３５戚）懸濁液、トリ
エチルアミン（０，４９紙、３．５０りを実施例１ａに
従い反応させ、１．６９ｇ（９３％）のＮ−ベンジルオ
キシカルボニル−グリシル−し−アルギニナールジブチ
ルアセクール塩酸塩をオイルとして得る。

ＴＬＣ：Ｒｆ４＝ｏ。３７−０．４８ Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−グリシル−しアルギニ
ナールジブチルアセクール塩酸塩（１，６０ｇ、３．１
０　ｍｍｏｌ　）をメタノール（２５０戚）に溶解し、
パラジウム黒（１ｇ）を加え、水素気流中にて、２時間
、室温で攪拌する。反応終了後、触媒をろ去し、ろ液を
濃縮し、１．２０　ｇ（１００％）のグリシル−し−ア
ルギニナールジブチルアセタール塩酸塩をオイルとして
得る。

ＴＬＣ：Ｒｆ３＝０．２４　０．４１ グリシル−し−アルギニナールジブチルアセクール塩酸
塩（０，１２ｇ　、　０．３０ｍｍｏｌ）の塩化メチレ
ン（３ｄ）溶液に、トリエチルアミン（０，０４２戚、
０．３０ｍｍｏｌ）　、次いで、Ｎ−ベンジルオキシカ
ルボニル−Ｌ−ピログルタミン酸−Ｎ−ヒドロキシスク
シンイミドエステル（０，１１ｇ、　０．３６ｍｍｏｌ
）を室温にて加える。反応混合物を室温にて一夜撹拌す
る。反応終了後、反応混合液を飽和食塩水にて洗浄し、
濃縮する。残渣（０，１５ｇ）を遠心液々分配クロマト
グラフィー（三鬼エンジニアリング社、ブタノール−水
、下鋒法）で精製し、０．０３ｇ（１６％）のＮ−ベン
ジルオキシカルボニル−し−ピログルタミル−グリシル
−し−アルギニナール塩酸塩を得る。

ＴＬＣ：　Ｒｆ、　＝０．１７−０．２２Ｎ−ベンジル
オキシカルボニル−し−ピログルタミル−グリシル−し
−アルギニナールジブチルアセタール塩酸塩（３０■、
０．０４８矩ｍｏｌ）のアセトニトリル（４，８ｄ）溶
液に、ＩＮ塩酸水溶液（２，４ｔｄ）を加え、３６°Ｃ
で１時間、攪拌下に反応する。反応終了後、反応混合液
を、ＩＮ水酸化ナトリウム水溶液で、ｐ　Ｈ４，８にす
る。溶媒を減圧下に留去し、残渣にクロロホルムを加え
、不溶な部分をろ過して取り除く。炉液を濃縮した後、
残渣を、クロロホルム−ヘキサンで再結晶し、１５．７
■（６６％）のＮ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピ
ログルタミル−グリシル−Ｌ−アルギニナール塩酸塩を
得る。

ＴＬＣ：Ｒｆ２＝０．２１　０．３４　　　ｍｐ＝８５
°Ｃ（ｄｅｃ、）ＭＳ：ｍ／ｚ　４６１　（ＭＨ”″） 実施例５ Ｌ−アルギニナールジブチルアセタール塩酸塩（０，１
６ｇ、０．５０　ｍｍｏｌ　）の塩化メチレン（５ｄ）
懸濁液に、トリエチルアミン（０，０７ｄ、０．５＋＋
ｕｎｏｌ）　、次いで、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル
Ｌ−ピログルタミル−し−ビイコリルーＮ−ヒドロキシ
スクシンイミドエステル（０，２６ｇ、０、５５　ｍｍ
ｏｌ　）を、室温にて加える。反応混合物を室温にて一
夜、攪拌する。反応終了後、反応混合液を飽和食塩水に
て洗浄し、濃縮する。残渣（０，２４ｇ）をシリカゲル
（１２ｇ）カラムクロマトグラフィーに付し、クロロホ
ルム：メタノール：酢酸：（９０：１０：５、次いで７
０：１０：５）で溶出することにより、０．１５ｇ（４
３％）のＮ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログル
タミル−し−ビベコリルーし一アルギニナールジブチル
アセクール塩酸塩を、オイルとして得る。

ＴＬＣ：　Ｒｆ、　＝０．３０−０．３６Ｎ−ベンジル
オキシカルボニル−し−ピログルタミル−し−ビペコリ
ルーし一アルギニナールジブチルアセタール塩酸塩（３
５■、０．０５　ｍｍｏｌ　）のアセトニトリル（５ｄ
）溶液に、ＩＮ塩酸水溶液（２，５ｄ）を加え、３６“
Ｃで１．５時間、攪拌下に反応する。反応終了後、反応
混合液を、ＩＮ水酸化ナトリウム水溶液で、ｐ　Ｈ４，
８にする。溶媒を減圧下に留去し、残渣にクロロホルム
を加え、不溶な部分をろ過して取り除く。炉液を濃縮し
た後、残渣を、り四ロホルムーヘキサンで再結晶し、２
１■（７６％）のＮ−ベンジルオキシカルボニル−し−
ピログルタミル−し−ピペコリルーし一アルギニナール
塩酸塩を得る。

ＴＬＣ：　Ｒｒ２＝０．３６−０．５３ＭＳ：ｍ／ｚ　
　５１５　　（ＭＨ”）実施例６ Ｌ−アルギニナールジブチルアセクール塩酸塩（０，６
５ｇ、　２．０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（２０ｄ）懸
濁液に、トリエチルアミン（０，２８ｄ、２．Ｏｎ＋ｍ
ｏｌ）　、次いで、Ｎ−ベンジルオキシカルボニルＤ−
ピログルタミル−し−プロリル−Ｎ−ヒドロキシスクシ
ンイミドエステル（１，０７ｇ、２．４ｍｍｏｌ）を、
室温にて加える。反応混合物を室温にて一夜、攪拌する
。反応終了後、反応混合液を飽和食塩水にて洗浄し、濃
縮する。残渣（１，３２ｇ）をシリカゲル（６６ｇ）カ
ラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルム：メタノ
ール：酢酸（９０：１０二５、次いで５０：１０：５）
で溶出することにより、０．８１ｇ（６１％）のＮ−ベ
ンジルオキシカルボニル−Ｄ−ピログルタミルＬ−プロ
リル−し一アルギニナールジブチルアセクール塩酸塩を
、オイルとして得る。

ＴＬＣ：Ｒｆ、＝０．３１−０．３７ 鼠塩 Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−ピログルタミル−
し−プロリル−し−アルギニナールジブチルアセタール
塩酸塩（０，４０ｇ　、　０．６０ｍｍｏｌ）のアセト
ニトリル（６０ｄ）溶液に、ＩＮ塩酸水溶液（３０ｄ）
を加え、３６°Ｃで１．５時間、攪拌下に反応する。反
応終了後、反応混合液を、ＩＮ水酸化ナトリウム水溶液
で、ｐ　Ｈ４，８にする。溶媒を減圧下に留去し、残渣
にクロロホルムを加え、不溶な部分をろ過して取り除く
。炉液を濃縮した後、残渣を、クロロホルム−ヘキサン
で再結晶し、０．３３ｇ（１００％）のＮ−ベンジルオ
キシカルボニル−Ｄ−ピログルタミル−し−プロリル−
Ｌ−アルギニナール塩酸塩を得る。

Ｒｆｚ＝０．１９　０．３２　　　ｍｐ＝８５°Ｃ（ｄ
ｅｃ、）（α）　　＝−４０°（ｃ　＝０．５　、　Ｄ
ＭＦ）ＣｚＪｓＪ６０６Ｃｊ２　・３／２　ＨｚＯ・２
１５ＮａＣｊ２対する元素分析値 理論値：　Ｃ４９，０７％　Ｈ６，１８％　Ｎ　１４．
３０％計算値：　Ｃ４９，５０％、　　Ｈ６，０８％、
　Ｎ　１３．７４％。

実施例７ Ｎ　−ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−ピログルミル−
し−ロイシル−し−アルギニ　−ル塩ｊ口１に 塩 Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログルタミル−
し−プロリル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル
の代わりに、ベンジルオキシカルボニル−し−ロイシル
−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（０，３２ｇ
、　２．３ｍｍｏｌ）を用い、また、Ｎ−アルギニナー
ルジブチルアセタール塩酸塩（０，７５ｇ、　２．３＋
ｍｏｌ）の塩化メチレン（２３ｙｄ＞懸濁液、トリエチ
ルアミン（０，３２蔵、２．３ｍｍｏｌ）を実施例１ａ
に従がい反応させ、０．９９　ｇ（７５％）のＮ−ベン
ジルオキシカルボニル−し−ロイシル−し−アルギニナ
ールジブチルアセタール塩酸塩をオイルとして得る。

ＴＬＣ：　Ｒｆ、　＝０．４２−０．５２Ｎ−ベンジル
オキシカルボニル−し−ロイシル−Ｌ−アルギニナール
ジブチルアセタール塩酸塩（０，９２ｇ、１．６０　ｍ
ｍｏｌ　）をメタノール（１００戚）に溶解し、パラジ
ウム黒（ｌ　ｇ）を加え、水蒸気流中にて、２時間、室
温で攪拌する。反応終了後、触媒をろ去し、ろ液を濃縮
し、０．５６　ｇ（８０％）のし−ロイシル−し−アル
ギニナールジブチルアセタール塩酸塩をオイルとして得
る。

ＴＬＣ：　Ｒｆ、　＝０．４３−０．５４Ｌ−ロイシル
−し−アルギニナールジブチルアセタール塩酸塩（０，
２５ｇ、０．５７　ｍｍｏｌ　）の塩化メチレン（５，
７ｍ）溶液に、トリエチルアミン（０，０８ｍ、０．５
７　ｍｍｏｌ）　、次いで、Ｎ−ベンジルオキシカルボ
ニル−Ｄ−ピログルタミルＭ−Ｎヒドロキシスクシンイ
ミドエステル（０２３ｇ。

０、６３　ｍｍｏｌ　）を室温にて加える。反応混合物
を室温にて一夜攪拌する。反応終了後、反応混合液を飽
和食塩水にて洗浄し、濃縮する。残渣（０，３７ｇ）を
シリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、クロロホ
ルム；メタノール：酢酸（９０：　１０　：：５）で溶
出し、０．２３ｇ（５９％）のＮ−ヘンシルオキシカル
ボニル−Ｄ−ピログルタミル−し−ロイシル−し−アル
ギニナールジブチルアセクール塩酸塩を、オイルとして
得る。

ＴＬＣ：　Ｒｆ、　＝０．３４−０．４１皿塩 Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−ピログルタミル−
し−ロイシル−し−アルギニナールジブチルアセタール
塩酸塩（０，２１ｇ、０．３０　ｍｍｏｌ　）のアセト
ニトリル（３０ｄ）溶液に、ＩＮ塩酸水溶液（１５ｄ）
を加え、３６°Ｃで２時間、攪拌下に反応する。反応終
了後、反応混合液を、ＩＮ水酸化ナトリウム水溶液で、
ｐ　Ｈ４，８にする。溶媒を減圧下に留去し、残渣にク
ロロホルムを加え、不溶な部分をろ過して取り除く。炉
液を濃縮した後、残渣を、クロロホルム−ヘキサンで再
結晶し、０．１４ｇ（８３％）のＮ−ヘンシルオキシカ
ルボニル−Ｄ−ピログルタミル−し−ロイシル−しアル
ギニナール塩酸塩を得る。

ＴＬＣ：Ｒｆｚ＝０．５５−０．６９゜　ｍｐ＝１１８
°Ｃ（ｄｅｃ、）（α）　　＝−１３°（ｃ＝０．１　
、　ＤＭＦ）Ｃ２５Ｈ３？Ｎ６０６Ｃｌ・２Ｈ２０に対
する元素分析値理論値：　Ｃ５０，９７％、　　８７．
０２％、　Ｎ　１４．２７％実測値：　Ｃ５１，３４％
、　Ｈ６，６５％、　Ｎ　１４．００％。

実施例８ Ｌ−アラニル−し−アルギニナールジブチルアセタール
塩酸塩（０，３６ｇ、０．９０　ｍｍｏｌ　）の塩化メ
チレン（９ｄ）’を容液に、トリエチルアミン（０，１
３ｒａｉｌ、　０．９０　ｍｍｏｌ）　、次いで、Ｎ−
ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−ピログルタミン酸−Ｎ
−ヒドロキシスクシンイミドエステル（０，３６ｇ、０
、９９　ｍｍｏｌ　）を室温にて加える。反応混合物を
室温にて一夜攪拌する。反応終了後、反応混合液を飽和
食塩水にて洗浄し、濃縮する。残渣（０，５５ｇ）をシ
リカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、クロロホル
ム：メタノール：酢酸（９０：　１０　：５、次いで７
０：１０：５）で溶出し、０．２９　ｇ（５０％）のＮ
−ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−ピログルタミル−し
−アラニル−し−アルギニナールジブチルアセタール塩
酸塩をオイルとして得る。

’ｒｔ、ｃ　：　ＲｒＩ＝０．２９−０．３５敢塩 Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−ピログルタミル−
し−アラニル−し−アルギニナールジブチルアセタール
塩酸塩（０，２８ｇ、０．４４　ｍｍｏｌ　）のアセト
ニトリル（４４ａｄ）ｉ液に、ＩＮ塩酸水溶液（２２ｄ
）を加え、３６°Ｃで１．５時間、攪拌下に反応する。

反応終了後、反応混合液を、ＩＮ水酸化ナトリウム水溶
液で、ｐＨ４，８にする。溶媒を減圧下に留去し、残渣
にクロロホルムを加え、不溶な部分をろ過して取り除く
。炉液を濃縮した後、残渣を、クロロホルム−ヘキサン
で再結晶し、０．１９ｇ（８６％）のＮ−ベンジルオキ
シカルボニル−Ｄ−ピログルタミル−し−アラニル−し
アルギニナール塩酸塩を得る。

ＴＬＣ：Ｒｆｚ＝０．５５−０．６１　　ｍｐ＝８５°
Ｃ（ｄｅｃ、）〔α）　　＝−１６°（ｃ＝０．２　、
　ＤＭＦ）ＣｚＪｚ＋Ｎ６０６Ｃｆ　・３／２　Ｈ２Ｏ
・１１５Ｎａｃｆに対する元素分析値 理論値：　Ｃ４８，０７％、　　Ｈ６，２３％、　Ｎ　
１５．２８％実測値：　Ｃ４８，０３％、　　Ｈ５，９
２％、　Ｎ　１５．２０％。

実施例９ ル ミルーＬ−フェニルアーニル アルギニ −ルジブチルアセ　−ル Ｌ−フェニルアラニル−し−アルギニナールジブチルア
セタール塩酸塩（０，４５ｇ、０．９５　ｍｍｏｌ　）
の塩化メチレン（９，５ｄ）溶液に、トリエチルアミン
（０，１３ｄ、０．９５　ｍｍｏｌ）　、次いで、ヘン
シルオキシカルボニル−Ｄ−ピログルタミン酸−Ｎヒド
ロキシスクシンイミドエステル（０，３８ｇ、１、０５
　ｍｍｏｌ　）を室温にて加える。反応混合物を室温に
て一夜攪拌する。反応終了後、反応混合液を飽和食塩水
にて洗浄し、濃縮する。残渣（０，５０ｇ）をシリカゲ
ルカラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルム：メ
タノール：酢酸：（１１０：１０：５、次いで８０：１
０：５）で溶出し、０．２６ｇ（３９％）のＮ−ベンジ
ルオキシカルボニル−ピログルタミル−し−アラニル−
し−アルギニナールジブチルアセクール塩酸塩をオイル
として得る。

ＴＬＣ：　Ｒｆ、　＝０．３５−０．４７ｂ）　　Ｎ−
ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−ピログル　ミル−し一
フェニルアーニルーＬ−アルギニ土：」４ＪＩＩ Ｎ−ヘンシルオキシカルボニル−Ｄ−ピログルタミル−
し−フェニルアラニル−Ｌ−アルギニナールジブチルア
セタール塩酸塩（７２■、０．１０闘０１）のアセトニ
トリル（１０ｄ）溶液に、ＩＮ塩酸水溶液（５戚）を加
え、３６°Ｃで１゜５時間、攪拌下に反応する。反応終
了後、反応混合液を、ＩＮ水酸化ナトリウム水溶液で、
ｐ　Ｈ４，８にする。

溶媒を減圧下に留去し、残渣にクロロホルムを加え、不
溶な部分をろ過して取り除く。が液をｆｉ縮した後、残
渣を、クロロホルム−ヘキサンで再結晶し、４４■（７
５％）のベンジルオキシカルボニル−Ｄ−ピログルタミ
ル−し−フェニルアラニル−Ｌ−アルギニナール塩酸塩
を得る。

ＴＬＣ：Ｒｆｚ＝０．４０　０．５３　　ｍｐ＝１３０
°Ｃ（ｄｅｃ、）〔αＬ＝４６°（ｃ＝０．５　、　Ｄ
ＭＦ）Ｃｚｓ）Ｉ３ｓＮ６０ｉ、Ｃｆｆ１　・３／２　
Ｈ２Ｏ・１／３Ｎａｃｊ２に対する元素分析値 理論値：　Ｃ５３，０８％、　　Ｈ６，０５％、　Ｎ　
１３．２６％。

実測値：　Ｃ５３，１８％、　Ｈ６，００％、　Ｎ　１
２．８７％。

実施例１ Ｌ−アルギニナールジブチルアセクール塩酸塩（０，１
６ｇ、０．５０　ｍｍｏｌ　）の塩化メチレン（５戚）
懸濁液に、トリエチルアミン（０，０７ｄ、０．５ｍｍ
ｏｌ）、次いで、Ｎ−ヘンシルオキシカルボニルＤ−ピ
ログルタミル−し−ピペコリン酸−Ｎ−ヒドロキシスク
シンイミドエステル（０，２６ｇ。

０、５５　ｍｍｏｌ　）を室温にて加える。反応混合物
を室温にて一夜、攪拌する。反応終了後、反応混合液を
飽和食塩水にて洗浄し、濃縮する。残渣（０，２８ｇ）
をシリカゲル（１４ｇ）カラムクロマトグラフィーに付
し、クロロホルム：メタノール：酢酸（８０：１０：５
、次いで５０：１０：５）で溶出することにより、０．
０９７　ｇ　（２８％）のベンジルオキシカルボニル−
Ｄ−ピログルタミル−Ｌ−ビペコリルーし一アルギニナ
ールジブチルアセクール塩酸塩をオイルとして得る。

ＴＬＣ：Ｒｆ＋　＝０．３０−０．３６Ｎ−ベンジルオ
キシカルボニル−Ｄ−ピログルタミル−し−ピペコリル
ーし一アルギニナールジプチルアセタール塩酸塩（４９
■、０．０７２　ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（７ｍ）
溶液に、ＩＮ塩酸水溶液（３，６ｍ）を加え、３６°Ｃ
で１．５時間、攪拌下に反応する。反応終了後、反応混
合液を、ＩＮ水酸化ナトリウム水溶液で、ｐ　Ｈ４，８
にする。溶媒を減圧下に留去し、残渣にクロロホルムを
加え、不溶な部分をろ過して取り除く。炉液を濃縮した
後、残渣を、クロロホルム−ヘキサンで再結晶し、２７
■（６８％）のＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−ピ
ログルタミル−し−ピペコリルーしアルギニナール塩酸
塩を得る。

ＴＬＣ：Ｒｆ２　　＝０．３６−０．５３Ｍ５　：　ｍ
／　ｚ　　５１５　（ＭＨ”）実施例１１ Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログルタミル−
し−プロリル−し−アルギニナール塩酸塩（０，０８１
ｇ、０．１５ｍｌｌ１ｏｌ）をジメチルホルムアミド（
１０ｄ）に溶解し、その溶液にパラジウム黒（１ｇ）を
加え、水素気流下に、室温で３０分間、触媒還元する。

反応終了後、触媒をろ過して取り除き、エーテルを加え
る。析出する結晶をろ取し、０．０２８　ｇ　（４６％
）のし−ピログルタミル−Ｌ−プロリル−し−アルギニ
ナール塩酸塩を得る。

ＴＬＣ：Ｒｆ、＝０．３４−０．４１ ＣＩ６Ｈ２７Ｎ６０４Ｃｌ・２Ｈ２０に対する元素分析
値理論値：　Ｃ４３，７８％、　Ｈ７，１２％、　Ｎ　
１９．１５％。

実測値：　Ｃ４３，８１％、　Ｈ７，２６％、　Ｎ　１
９．２２％。

実施例１２ ヘ ンシルオキシカルボニルピ ログル Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログルタミル−
し−プロリル−し−アルギニナールジブチルアセクール
塩酸塩（０．　３　ｇ．　　０．　４　５ｍｍｏｌ）を
クロロホルムに溶解し、５％硫酸を含む飽和硫酸ナトリ
ウム水溶液２０ｄで３回、飽和硫酸ナトリウム２０戚で
２回、洗浄する。硫酸マグネシウムで乾燥した後、濃縮
し、減圧乾燥する事により、オイルとして、Ｎ−ベンジ
ルオキシカルボニルし一ピログルタミルーし一プロリル
ーし一アルギニナールジブチルアセタール１／２硫酸塩
を得る。

ＴＬＣ　：　Ｒ　ｆ，　＝０．２　７−０．３　６ＩＲ
　（ν）ｃｍ−’：６１０，１１２０ｂ）　　Ｎ−ベン
ジルオキシカルボニル−し−ピログル　ミル−し一プロ
１ルーＬーアルギニ　ミル・１／１」幻ｉ監 Ｎ−ヘンシルオキシカルボニル−し−ピログルタミル−
し−プロリル−し−アルギニナールジブチルアセタール
１／２硫酸塩（０．６　１　ｇ，　０．９　０戚）のア
セトニトリル（９０成）溶液に、ＩＮ硫酸水溶液（４５
ｍ）を加え、３６°Ｃで４時間、攪拌下に反応する。反
応終了後、反応混合液を、ＩＮ水酸化ナトリウム水溶液
で、ｐ　Ｈ　５．　６にする。

溶媒を減圧下に留去し、残渣にクロロホルムを加え、不
溶な部分をろ過して取り除く。炉液を濃縮した後、残渣
を、クロロホルム−ヘキサンで再結晶し、０．４３ｇ（
８７％）のＮ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログ
ルタミル−し−プロリル−Ｌ−アルギニナール１／２硫
酸塩を得る。

ＴＬＣ：Ｒｆ＋＝０．１３　　０．２４　　　ｍｐ＝９
０°Ｃ　（ｄｅｃ．）Ｃα］ｏ＝　　４６’　（ｃｍ０
．５　、　ＤＭＦ）ＩＲ（ν）ｃｍ−’：６１０　　１
１１０Ｃ２ａＨｚ３ＮｂＯｎＳｏ．　ｓ・６　／　５　
Ｈｚｏに対する元素分析値理論値：　Ｃ　５０．４７％
，　Ｈ　６．２５％，　Ｎ　１４．７１％。

実測値：　Ｃ　５０．４４％，　Ｈ　６．００％，　Ｎ
　１４．５６％。

実施例１３ Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−ピログルタミル−
し−プロリル−し−アルギニナール・１／２硫酸塩（０
．０５５　ｇ、０．　１　０ｍｍｏｌ）を８５％メタノ
ール（２５ｍｆ）に溶解し、その溶液に少量のパラジウ
ム黒（１ｇ）を加え、水素気流下に、室温で１時間、−
接触還元する。反応終了後、触媒を決別し、炉液を濃縮
する。残渣を少量のメタノールに溶かし、過剰の乾燥エ
ーテルにあける。析出する結晶を炉底し、０．０３２　
ｇ　（　７　７％）のしピログルタミル−し−プロリル
−し−アルギニナール１／２硫酸塩を得る。

ＴＬＣ：Ｒｆｓ＝０．２０　　０．３２　　ｍｐ１８０
°Ｃ　（　ｄｅｃ．）〔αＬ＝ー７５°　（　ｃ　＝　
０．　２５，　ＤＭＦ／Ｈ２０　（１　：　１）　）Ｉ
Ｒ　（ν）　ｃｍ−’　：　６１０，　１１２０Ｃ＋Ｊ
ｚＪ６０ｂＳｏ．　ｓ・２Ｈ２０に対する元素分析値理
論値：　Ｃ　４２．５６％．　Ｈ　６．９２％．　Ｎ　
１Ｂ．６１％。

実測値：　Ｃ　４２．６１％，　Ｈ　６．４６％，　Ｎ
　１８．２７％。

実施例１４ 次に、いくつかのセリンプロテアーゼの阻害活性につい
て代表的な試験例を示し、具体的に説明する。試験結果
は、本発明の化合物については前記実施例の番号にて表
３に示す。比較として既知の蛋白分解酵素阻害剤につい
ては、表１に化合物の構造を示し、試験結果を表２に示
す。

阻害剤が酵素の基質分解を抑制する作用を試験するため
に用いる合成基質は、プラスミンにＰｓ−９９４（Ｈ−
Ｄ−Ｌｙｓ（Ｔｏｓ）−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＣＨＡ　・２
Ｈ（、ｅ　、日東紡績社製）、トロンビン、トリプシン
にＰＳ　−９１５（ＬＤ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｃ
ＨＡ　・２ＨＣｊ２、日東紡績社製）、ファクターＸａ
にＰＳ−２０００（Ｚ−Ｄ−Ｌｙｓ（ＨＣＯ）−Ｇｌｙ
−Ａｒｇ−ＣＨＡ・ＨＣｊ２、日東紡績社製）、カリク
レインにＳ−２３０５−２３０２（ｆｌ−Ｄ−Ｐｒｏ−
Ｐｈｅ−Ａｒ、カビ社製）、ウロキナーゼにＭＩＪＫ−
３４（Ｈ−Ｄ−Ｇｌｕ（−０−○）−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−
ｐＮＡ　−２）ＩＣｆ　、　　日東紡績社製）を用いる
。

プラスミンは、三共カラーテストα２　　　ＰＩ測定用
キットの標準品を０．３ＣＵ／ｄ、トロンビンは、三共
カラーテスＦＡＴ−ｍ測定用キットのものを１２ＮＪＨ
Ｕ／ｄ、トリプシンはワージンクストーン社コード３７
０３のものを２μｇ／ｄ、ヒトファクターＸ８はペーリ
ンガー・マンハイム社のものを０．２５Ｕ／ｍｅ、ヒト
血しょうカリクレインはカビ社のものを０．１２Ｕ／ｄ
、ウロキナーゼは、持田製薬ウロキナーゼ６万（６０，
０ＯＯＵ　／ｖｉａｌ）を１０００１Ｊ／ｄを用いた。

停止（呈色）液は、ＣＨＡ系基質の場合、三共カラーテ
スト用のキットのものを用いた。

ブースミンに　　る ０、　４　ｄの緩衝液（１００ｍＭトリスを含む１５０
ｍＭ食塩水、ｐ　Ｈ７，８）に種々の濃度の阻害剤の水
溶液（０，１ｄ）を加え、５分間加温する。０．２蔵の
プラスミン溶液を加え、５分間反応し、０．１　ｄのＰ
Ｓ−９９４溶液（１０ｎＭ）を加え、５分間反応させる
。反応終了後、２．０−の停止呈色液を加え、１０分間
放置後７００ｎｍで吸光度を測定し、阻害剤なしの場合
の１／２の吸光度を示す反応系の阻害側濃度をＩＣ５０
として求める。

トロンビンに　　る ０、　４　ｄの緩衝液（１５０ｍＭトリスを含む１５０
ｍＭ食塩水、ｐ　Ｈ８，５）に種々の濃度の阻害剤の水
溶液（０，１ｄ）を加え、５分間加温後、０．２　ｄの
トロンビン溶液を加え、５分間反応させる。さらに、０
．１　ｄのＰＳ−９１５溶液（１０ｍＭ）を加え、５分
間反応後、２−の停止呈色液を加える。１゜分間放置後
、７００ｎｍで吸光度を測定し、上記の方法でＩＣｓ。

を求める。

ト１プシンに・　る　　２ ０．５ｍｌの緩衝液（１５０ｍＭトリスを含む１５０ｍ
Ｍ食塩水、ｐ　Ｈ８，０）に阻害剤の水溶液０．１　ｄ
を加え、５分間、加温した後、０．１　ｄのトリプシン
溶液を加え、５分間反応させる。さらに、０．１雁のＰ
Ｓ−９１５溶液（１０ｍＭ）を加え、５分間反応後、２
−の停止呈色液［２，５■／ｄのソイビーントリプシン
インヒビター〔シグマ社製ＮαＴ−９００３）を含む〕
を加え、１０分間放置後、７００ｎｍで吸光度を測定し
、上記の方法でＩＣ５゜を求める。

フ　　り　　−Ｘａ　に　　　　る ０、３ｄ（７）緩衝液（５０ｍＭ）’Ｊスと含む１５０
ｆｆ１Ｍ食塩水、ｐ　Ｈ８，５＞に０．１−の種々の濃
度の阻害剤の水溶液を加え、５分間、加温した後、０．
１蔵のファクターＸａ溶液（５０ｍＭ）リス、２０ｍＭ
塩化カルシウムを含む１５０ｍＭ食塩水、ｐ　Ｈ８，５
）を加え、５分間、反応する。さらに、１０ｍＭのＰｓ
−２０００を含む５％ポリビニルピロリドン溶液（０，
１１ｄ）を加え５分間反応させ、反応終了後、２−の停
止呈色液を加え、１０分間放置後、７００ｎｍで吸光度
を測定し、上記の方法でＩＣ５゜を求める。

力１クレインに　　る ０、　４　ｄの緩衝液（５０ｍＭ）リスを含む１５０ｍ
Ｍ食塩水、ｐ　Ｈ８，０）に０．１−の阻害剤の水溶液
を加え、５分間加温した後、０．１−のカリクレイン熔
解液（０，５％生血清アルブミン、シグマ社ＮａＡ３０
２２を含む）を加え、５分間反応する。さらに、１０ｎ
＋ＨのＳ−２３０２水溶液（０，１−）を加え５分間反
応させた後、５戚の２０％酢酸水溶液を加え、反応を中
止し、４０５ｎｍで吸光度を測定し、上記の方法でＩＣ
，。を求める。

ウロキ　−ゼに　　る ０、３　ｄの緩衝液（５０ｍＭトリス１５０戚食塩水、
ｐ　Ｈ８，２０）に０．１　ｄの阻害剤の水溶液（０，
１ｄ）を加え、５分間加温した後、０．１戚のウロキナ
ーゼ溶液（５０ｍＭ）リス、１５０ｍＭ食塩水、０．１
％ＢＳＡを含む、ｐ　Ｈ８，２０）を加え、５分間反応
する。さらに、１０ｍＭのＭＵＫ−３４水溶液（０，１
ｄ）を加え、５分間反応させた後、１０％酢酸水溶液（
２，０ｍ）を加え、反応を中止し、４０５ｎｍで吸光度
を測定し、上記の方法でＩＣ６゜を求める。

〔発明の効果］ 本発明の化合物と類似している構造を持つロイペプチン
（アセチル−し−ロイシル−し−ロイシル−し−アルギ
ニナール）はトリプシンを、ｆＰＡ（Ｄ−フェニルアラ
ニル−Ｌ−プロリル−しアルギニナール）は、トリプシ
ン及びトロンビンを阻害するが、他のプラスミン、カリ
クレイン。

ファクターＸａ、　ウロキナーゼを強く阻害しない。

一方、本発明の化合物は、前述の如く、プラスミン、ト
ロンビン、トリプシン、カリクレイン、ファクターＸａ
及びウロキナーゼのような多くのトリプシン様セリンプ
ロテアーゼを強く阻害するという特徴を有する。したが
って、本発明化合物は、生体内の種々のトリプシン様セ
リンプロテアーゼを阻害する事が可能で、新規な蛋白分
解酵素阻害剤としてめざましい薬効を期待し得るもので
ある。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）一般式（ I ） Ｘ−Ａ＿１−Ａ＿２−Ａ＿３−Ｈ（ I ） 〔式中、Ｘは、Ａ＿１の第２級アミノ基に結合する水素
   原子、アレーンスルホニル基（アルキル基、またはアル
   キルオキシ基を置換基として有するものも含む）、アル
   カンスルホニル基（アリール基を置換基として有するも
   のも含む）、アロイル基（アルキル基、ハロゲン原子、
   アミン誘導体基、アルキルオキシ基を置換基として有す
   るものも含む）、アシル基（アリール基を置換基として
   有するものも含む）、またはアルキルオキシカルボニル
   基（アリール基を置換基として有するものも含む）を表
   わし、Ａ＿１は、Ａ＿２の第１級アミノ基に結合するＬ
   −またはＤ−ピログルタミン酸残基を表わし、Ａ＿２は
   、Ａ＿３の第１級アミノ基に結合するグリシン残基、Ｌ
   −アラニン残基、Ｌ−バリン残基、Ｌ−ロイシン残基（
   ただし、Ａ＿１がＬ−ピログルタミン酸残基の場合を除
   く）、Ｌ−イソロイシン残基、Ｌ−セリン残基、Ｌ−ス
   レオニン残基、Ｌ−リシン残基、Ｌ−プロリン残基、Ｌ
   −ピペコリン酸残基、またはＬ−フェニルアラニン残基
   を表わし、Ａ＿３はＬ−、Ｄ−またはＤＬ−アルギニン
   残基を表わす〕で表わされるトリペプチド誘導体または
   薬学的に許容し得るその酸付加塩。
2. （２）請求項（１）項記載のトリペプチド誘導体または
   薬学的に許容し得るその酸付加塩を有効成分とする蛋白
   分解酵素阻害剤。