JPH03500297A - テルピリジン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 チルピリジン誘導体 発明の分野 本発明は、２．２’　；　６’　、２＃チルピリジン構造を有する有機錯体形成 剤（リガンドまＩ；はキレート試薬）に関する。

本明細書を通じて、この構造を有する化合物は、とくに他の指示がない限り、チ ルピリジンと呼ばれる。本発明は適当な金属イオンと蛍光性ランクナイドキレー トを形成する。

このような新規なキレートならびにリガンドは、キレートに一般的な分野で応用 される。本発明の蛍光性金属キレートは、時間分解蛍光分光測定法におけるプロ ーブとして有用である。多くの公知のランクナイドキレート試薬と異なり、本発 明のキレート試薬は大部分、Ｔｂ３＋およびＥｕ”の両者と強力な蛍光性キレー トを与える。これにより、本発明のキレート試薬は多情標識技術においてきわめ て重要であると考えられる。

分子蛍光に基づく分析方法の感度には、ラマン散乱やサンプル中の蛍光性不純物 によるバックグランドシグナルによる限界がある。これらの妨害はいずれも一般 に短寿命の減少である。すなわち、分子の励起に続く放射遷移はマイクロ秒の間 隔内で起こる。したがって、長寿命の蛍光をもつ化合物は、時間分解蛍光光度計 を利用すれば短寿命のバックグランドの存在下にも効果的に定量できる。この蛍 光光度計では、サンプルは短寿命バックグランドの崩壊に続く晴朗に長寿命の蛍 光を測定できるように間欠的な光源によって照射される。

従来技術の説明 チルピリジン、ビピリジンおよび置換ピリジンのキレート能は、ＥＰ−Ａ−６８ ，８７５（２９頁）　、Ｃｈｅｎ＋１ｃａｌ　Ａｂｓｔｒａｃｔｓ９８　（１９ ８３）　２２６９１３ｋ　、　１０２　（１９８５）　７１５８９ｊ　、　１０ ３　（１９８５）７１４１９ｚおよび１０６（１９８７）　９４８８５、ＦＲ− Ａ−２，５７０，７０３、ＣｈｅｍＢｅｒｉｃｈｔｅ　１１８　（１９８５）　 ２１２〜７、ＥＰ−Ａ−１９５，４１３ならびにＥＰ−Ａ−２０３，０４７によ ってよく知られている。

蛍光性ランクナイドキレートを用いる時間分解蛍光分光法もまた、以前から知ら れている。ＤＥ−Ａ−２、６２８、１５８およびＵＳ−Ａ−４、３７４、１２０ は蛍光免疫検定法に用いられる蛍光性ランクナイドキレートにおけるリガンドと してβ−ジケトンを利用する。ＤＥ−Ａ−２、６２８、１５８では、蛍光性キレ ートの光吸収残基は、試験操作時にその免疫学的対応体と免疫複合体を形成させ る抗原または抗体に、共有結合により接合させる。この種類の検定法では、形成 した免疫複合体が検出される物質（＝被検物質）の指示手段を構成することにな る。用いられるランタナイド標識免疫反応体は被検物質と共通のエピトープを有 するか（被検物質類縁体）、あるいは被検物質または免疫複合体の形成に用いら れる他の抗原もしくはハプテン物質に向けられた抗体活性成分でｈる。この種類 の検定の多くの様式では、キレートは抗原またはハプテンとして用いられる分子 に直接接合される。蛍光免疫検定法および生物特異的な親和性反応（反応体）を 用いる他の検定法を分類するにはいくつかの別の方法がある。蛍光の測定前に免 疫複合体中に導入されたキレートを導入されなかったキレート部分から分離する 場合には、この方法は不均一系と呼ばれる。このような分離工程が含まれていな い場合には、これらは均一系と呼ばれる。これらの２つの変法では用いるランク ナイドキレートに体する要求が異なる。均一系を用いる方法では、キレートの蛍 光性が免疫複合体形成の結果として測定可能な様式で変化することを要求し、一 方、不均一系を用いる方法ではこのような必要はない。

免疫検定法は生物特異的親和性反応を利用する方法の一例にすぎない。同様に、 ＤＮＡ−相補性ＤＮＡ１　プロティンＡ−ＩｇＧのＦｃ部分、レクチン−炭水化 物構造等のような他の種類の生物特異的親和性を利用する検定系がある。上に略 述した原理および分類はこれらにも同様に適用される。

蛍光性ランクナイドキレートの大きな欠点は、良好な水安定性と効率的な蛍光を 合わせもつことが稀なことである。水性溶媒中ではそれらの蛍光は水によって消 光することが多い。

ＥＰ−Ａ−６４２４８４には、標識が良好な蛍光体であることを請求しないラン クナイドキレート不均一系蛍光免疫検定法の一変法が示されている。蛍光性では なく、興味は使用されるランクナイドキレートの水安定性に集中されている。リ ガンドは分離工程を通してランタナイドを運搬するためだけに働き、その後ラン タナイド陽イオンは低いｐＨで脱離させ、ミセル相内でリガンドとしての芳香族 β−ジケトンと強力な蛍光を有するキレートを形成させるものである。この方法 ではきわめて良好な感度が得られるが、操作はかなり長くなるという欠点がある 。

良好な水安定性を有し、強力な蛍光をもつランクナイドプローブを見出せればき わめて有利である。このようなプローブであれば均一系検定が可能となり、不均 一系検定における検定操作を短縮できる。このようなプローブはまた他の蛍光法 たとえば蛍光顕微鏡にも利用が可能である。

水性メジウム中で蛍光を発するランクナイドキレートはこれまで、ＥＰ−Ａ−１ ８０，４９２（マクロポリ環式化合物）、ＥＰ−Ａ−６８，８７５（フェノール およびアリールエーテルならびに１種の特定のチルピリジンキレート試薬）　、 ＥＰ−Ａ−１９５，４１３（アリールピリジン）およびＥＰ−Ａ−２０３，０４ ７（エチニルピリジン）に示唆されてきた。これらはある程度上述の欠点を克服 できるものであるが、直接蛍光を発する標識として市販できるだけの効率的な量 子収量および水安定性を示すことが明らかにされたのはエチニルピリジン（ＥＰ −Ａ−２０３，０４７）のみであった。

一１ 本発明の化合物は式Ｉで与えられる共通の構造を有し、またそれらのキレート形 成へテロ原子の１個もしくは２個以上が関与する酸、エステル、塩およびキレー ト形のようなそれらの通常の類縁体を包含する。

式１中、ｎは整数０．１または２であって１が好ましく、−−−−は基Ｘ−Ｙが 親チルピリジン化合物中の水素または基Ｘ１〜Ｘ、を置換する置換基臼あること を特定している。

ｂ）直鎖状、分岐状または環状の炭化水素基たとえばアルキル、アルケニル、ア ルキニルおよび芳香族基（アリール）であり、キレート形成に関与しない付加的 構造たとえば芳香環系、エーテル、チオエーテル、エステル、アミド、アミノ（ −級、二級もしくは三級）、カルボキシ、ハロ、シアノ等、ならびに他の構造を 与えるヘテロ原子を含有していてもよい炭化水素基、Ｃ）　シアノ、ハロおよび ニトロ ｄ）　カルボン酸（ｃｏｏＨ）、アミド（ＣＯＮＨり、アミノ（Ｎｌ（２）、〔 ドロキシＣＬＪＨ）、メルカプト（ＳＨ）、およびこれらの基の水素が上記ｂ） に定義した炭化水素基で置換されているかまたアミンおよびヒドロキシ基の水素 がアシル基ＲＣＯ（この場合Ｒは上記ｂ）に定義した炭化水素基である）で置換 されていてもよい置換形 から選択される。

アルキルの例としては１２個未満、たとえば１〜５個の炭素原子を有する低級ア ルキルがある。

様々な芳香族基の例としてはフェニル、キノリル、ナフチル、ピリジル、ピリミ ジル等があり、これらはすべて付加的な置換基を含んでいてもよい。式Ｉのヘテ ｒ＝芳香環のいずれかに直接、またはカルボニルもしくは荷電されていない窒素 原子を介して結合するアルケニル、アルキニルまたは芳香族系を選択することに より、共役電子系をさらに芳香環または炭素原子に伸展させることができる。多 くて２個の芳香環構造がチルピリジン構造に共役していることが好ましい。

好ましいｘ１〜Ｘ、は水素、ヒドロキシル、アルコキシル、アミン、アミド、ア ルキルたとえばアミノアルキル、アルキルチオ、アルキルアミノ、アルキニルた とえばアミノエチニル、アリールたとえばアミノアリール、アラールキル、アリ ールオキシル、アリールアミノおよびアリールエチニルである。フェニル（フェ ニレン）は好ましいアリール残基である。合成的観点からは、ｘｌおよびＸ。

はいずれも水素であることが好ましい。

２、およびＺ、は互いに同種または異種のキレート形成基である。Ｚｌおよび２ ．はそれぞれ−ＣＨ２−Ｚ’および−ＣＨ，−Ｚ”であることが好ましく、キレ ート形成能は２′およびＺ＃に限局される。

Ｚ□およびＺ２はそれぞれ非結合電子対を有する２個またはそれ以上のへテロ原 子を含み、互いに２個または３個の原子をはさんで配置される。効率的なキレー ト形成へテロ原子の例には、アミノ窒素原子（−級、二級および三級アミン）、 負に荷電した酸素原子たとえばカルボキシレート陰イオン（ＣＯＯつ、エルレー ト陰イオン（Ｃ＝Ｃ−０−）、ホスフェートまたはホスホネートがある。他の良 好なキレート形成構造はヒドロキサメート基（ＣＯＮＯＨ）である。

多くの場合、２個の隣接するキレート形成へテロ原子の間の架橋は、１２または ３個の脂肪族炭素原子を含有する。とくに重要な２′およびＺ＃溝構造してはＮ −ビスカルボキシメチルアミノおよびＮ−ビスカルボキシエチルアミノ基、類似 のホスフェ−）　（−Ｎ（−ＣＨｚ−０−ＰＯｓ”つ２〕およびホスホネー）　 （−Ｎ（−ＣＨｚ−ＰＯｓ”−）ｚ）ならびに２，６−ジカルポキシビベリジン ＝１−イルを挙げることができる。

また、ＺｌおよびＺ、は２個の外側のピリジン環を連結する架橋を形成し、マク ロ環状キレート形成化合物を与えてもよい。好ましいこのような架橋は一〇Ｈ， Ｎ（ＣＨ，ＣｏｏつＣＨ，−（Ｚ’−Ｚ’−ＮＣＢ、ＣＯＯつである。

本発明の一部の化合物では、キレート形成へテロ原子（Ｎおよび０）は相当する プロトン化型および０についてはまたエステル型たとえば低級アルキル（Ｃ＋〜 Ｃａ）もしくはベンジルエステルとして存在してもよい。

分光蛍光法の観点からは２および２′はＥｕ”“、Ｔｂ”、Ｄｙ３＋または５Ｉ Ｔ１３＋にキレートすることが好ましい。

Ｘ−Ｙは不活性有機基を表し、Ｘは不活性で安定な架橋であり、Ｙは（ａ）官能 基、または（ｂ）鋭化合物に共有結合したのち式Ｉの化合物（ｎ＝１または２） 中でその性質を維持する有機化合物（Ｙ′）の残基である。上述の「不活性」の 語は、この形容詞で特性づけられた基または架橋が、連結金属イオンのキレート 形成に加わるヘテロ原子から４原子の距離を越えて接近する効率的なキレート形 成へテロ原子をもたないことを意味する。実際上は、これは４個の原子が通常４ ｇＭの炭素鎖であることを意味する。「安定」の語は、本発明の化合物が使用さ れた場合、架橋Ｘが悪影響を受けないこと、たとえば架橋が容易に加水分解され たりしないことを意味する。式！においてＸ−ＹはＺ、および／もしくはＺ、基 好ましくはＺ′および／もしくはＺ＃基の水素、または１個もしくは２個のＸ。

〜Ｘ、中の水素を置換する置換基として存在する。

Ｘは以下の中から選ばれる少なくとも１個の構造要素を含有する。すなわち、− ＮＲ−（二級および三級アミン）、−ＣＯＮＲ−および−ＮＲＣＯ−（置換アミ ド）　、−５−５−（脂肪族ジスルフィド）　、−Ｓ−（脂肪族チオエーテル’ ）　、−０−（エーテル）　、−ＣＯＯ−および−００Ｃ−（エステル）、−Ｎ ＝Ｎ−（ジアザ）、ならび直鎖状、分岐状または環状の、炭素原子１〜１２個を 含有する純粋な炭化水素から選ばれる構造要素を含有する。炭素鎖は純粋な脂肪 族でも純粋な芳香族（フェニル、ナフチル、キノリル、ピリジルおよびジピリジ ルを包含する）でもよく、また上述のキレート形成に参加しない他の不活性官能 基をもっていてもよい。上記置換アミド中の記号Ｒは好ましくは水素であるが、 アルキルたとえば５個未満の炭素原子を有するアルキルであってもよい。

Ｙは２種の主な範ＩＰ（以下のＡおよびＢ）から選択される。

Ａ）　Ｙは、ある種の性質をもつ有機化合物（Ｙ′）の残基であり、その性質は 式Ｉの化合物（ｎ＝１または２）中でも実質的に維持される。化合物（Ｙ′）は 、抗原（ハブテン）と同種の抗体活性成分、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド 、相補性核酸（ＲＮＡ、　ＤＮＡ）　、レシチンと炭水化物構造体、プロティン ＡとＩｇＧ等の間にみられるような生物特異的親和性反応に関与する能力を有す る生物学的活性分子であってもよい。この種類の生物学的活性分子は標的物質（ 標的分子）と呼ばれることが多い。これらの分子は様々な種類の化合物への接合 を可能にする官能基を含むように誘導化されているかまたは誘導化することがで きる。化合物（Ｙ′）はまた多重官能性有機化合物であって、その官能基の１つ によって架橋Ｘに結合し、その残った官能基の少なくとも１個がさらに誘導化が 可能なように遊離したままになっている化合物であってもよい・ Ｂ）　Ｙは、有機化合物（Ｙ′）の官能基Ａと化学的に反応させることができる ように選択された官能基で　Ｙ　／と式Ｉの化合物（ｎ−１または２）の間に共 有結合連鎖を形成する基であってもよい。Ｙの選択はＡに依存し、またＡの選択 はＹに依存するが、熟練者であれば相互に反応性の基の適当な選択が可能と考え られる。ＹとＡは電子的および核的な基の中から選択できる。それらが一対の電 子的基または一対の核的束である場合には、たとえば（ａ）結合の形成に酸化的 カップリング（たとえば−ＳＨ＋ＨＳ−→−５−Ｓ−）を使用するか、または（ ｂ）一対の基の一方を反対の種類の基に化学的に変換することができる。後者の 例としては二官能性カップリング試薬（活性化試薬とも呼ばれる）による活性化 がある。Ｙが電子性でＡが核性であるかまたはその逆の場合は、これらの２つの 基は通常、予め活性化することなく互いに反応させることができる。大部分の核 性の基は電子不足厚（求電子基）との反応に利用できる電子対を有するヘテロ原 子を含有する。

適当な官能基の例としては、イソチオシアネート、ブロモアセトアミド、ヨード アセトアミド、スクシンアミド、ピリジルジチオ、メルカプト、カルボキシルお よびその活性エステル（たとえばＮ−ヒドロキシスクシンイミドまたはｐ−ニト ロフェニル）、ヒドロキシル、アルデヒド、アミノ、ジアゾニウム、トシル、メ ジチリル、トレキシル、ホスホジエステルまたはホスホトリエステルがある。他 の官能基は本技術分野の熟練者にはよく知られているとおりである。

本発明の化合物においては、上述のすべての基が共存できることが必要である。

しかしながら、反応性基Ｙは本発明のキレート形成基と共存することは必ずしも 必要ではない。ある目的では、分子のキレート形成部分が一時的にｔ；とえばエ ステルの形に保護されていてもよく、保護されたリガンドが標的分子にカップリ ングされ、脱保護後に所望の標識生成物が最終的に形成されてもよい。保護基は 既知の原理に従って選択される（たとえばＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ 　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ；　Ｇｒｅｅｎ　ＴＮ；Ｊｏｈｎ 　Ｗｉｌｅｙ　＆　５ｏｎｓ　Ｉｎｃ；　ＵＳＡ、　１９８１参照）。基を選択 する場合に考慮しなければならない因子はとくに、Ｙを反応させる化合物の安定 性、Ｙの反応性および意図した化合物とＹの反応で形成する構造の種類である。

本明細書の実施例には、ピリジン核に隣接する官能性メチレン基の導入のだめの よく知られた方法を示す。これらの基はついでイミノビス酢酸エステルと反応さ せてキレート形成基Ｚ、およびＺ２を形成させることができる。

ホスホネート基はＪ、　Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｍ、　３１　（１９６６）　１６０３ 〜に従い、ホスフェート基はＨｅ１ｖ、　Ｃｈｉｍ、　Ａｃｔａ　７０　（１９ ８７）　１７５に従い導入できる。様々な金属イオンとのキレートの形成につい てはＮｕｃｌ、　Ｗｅｄ、　Ｂｉｏｌ、　１３　（１９８６）　３１１〜および それに引用された文献が参考になる。この特許出願の最初の出願以前には、イミ ノビス酢酸エステルのそれらのアセチル残基のメチレン基に官能性置換基を有す る誘導体の合成のための良い方法の報告はなかった。合成経路はＷａｌｌａｃ　 Ｏｙ、　Ｆｉｎｌａｎｄで開発され、この明細書にその詳細を例示する（例３７ 〜４５）。このようにして合成された誘導体は以下の例３４〜３５に示した方法 と同様にして６，６“−ビスハロメチルチルピリジンの反応と反応させること本 発明の好ましい化合物を式■に要約した。

式■中、ＸＩ−ｘｓ、ｎ、ＸおよびＹは、多くて２個のＸ。

〜Ｘ、が水素以外の基であるほかは、上述したのと同じ意味を有する。

−−−−はＸ−Ｙが基Ｘ、〜Ｘ、またはＨ′を置換する置換基であることを意味 する。ｃｈは−ｃｏｏ−１−ｏｐｏ、”−および−ｐｏ、”−から選ばれるキレ ート形成基である。本発明のこの好ましい態様にはまた、上に定義したような酸 、エステル、塩およびキレート形も包含する。

一般的な観点から、本発明の一様式は、本発明者らの新規な蛍光発光キレートを 時間分解蛍光分光法におけるプローブとして応用することにある。−態様におい ては、キレートのキレート形成光吸収残基は、実質的に蛍光性を示さないＥｕ” −１Ｄｙ３＋−１５ｍ”−またはＴｂ”−キレートを用いる方法での蛍光エンハ ンサ−として使用される〔たとえばＥＰ−Ａ−６４，４８４（Ｗａｌｌａｃ　Ｏ ｙ）およびｔｌｓ−Ａ−４，３５２，７５１（Ｗｉｅｄｅｒ）参照〕。他の態様 は蛍光性ランクナイドキレートを標的物質（構造）の定量用プローブとして使用 する時間分解蛍光分析法である。一般的にこれらの検定方法は（ｉ）標的構造を 本発明のランタナイド（プローブ）キレートで特異的に標識しくまたは標的がリ ガンドと蛍光性キレートを形成するランタナイドイオンである場合はキレート形 成リガンドのみ）、（ｉｉ）上記プローブに関連する蛍光をそれ自体公知の方法 で測定する、２工程からなる。序説の部分に述べたような生物特異的親和性反応 を用いる検定系はこの定義に含まれる最も重要な系のひとつである。すなわち工 程（ｉ）と（ｉｉ）の前後または間に、他の工程を包含させ、実行することもで きる。ＵＳ−Ａ−４，０５８，７３２（Ｗｉｅｄｅｒ）とも比較されたい。

本発明は、この説明の一部である添付の請求の範囲に定義される。以下に本発明 を、本発明の数種の化合物の合成について例示する。

実験の部に採用された構造および合成経路はスキーム１〜３に示す。スキーム１ ８よび２にはそれぞれ４′または４と４＃に置換基を有するチルピリジン化合物 を例示する。出発化合物中のＲ′の適切な選択により、置換基は直接カップリン グまたは通常の二官能性カップリング試薬を用いたカンプリングで、生物特異的 親和性反応に関与する生物活性分子に導入される。このような基の例には核性の 基がある（−級アミノ、インチオシアネート等）。スキーム３にはキレート形成 基Ｚ、およびＺ２　（式Ｉの）形成に使用できるイミノビス酢酸誘導体の合成を 例示する。誘導体は、キレート形成には関与しないが上述の種類の生物活性分子 をチルピリジン構造に共有結合的に連結するのに使用できる反応性の基を含有す る。

実施例　１ ｌ−（２−ピリジル”）−３−（３−ニトロフェニル）−ＫＯＨ（０，６７ｇ、 １２．０ｍ＋＋＋ｏ１２）の水（６ｍｆｆ）とメタノール（５４ｍＱ）中溶液に ２−アセチルピリジン（１，８２９，１５，ＯｍｒｎｏＱ）および３−ニトロベ ンズアルデヒド（２，２７ｇ、１５，０ｒｒＨｒｎｏＱ）を加えた。この溶液を 室温で２時間撹拌すると、生成物の沈殿が完結した。沈殿を濾過し、メタノール で洗浄しｌ；。

収率：９３％ ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ（２ａ）　：　７．５２−７．５５（ＩＨ，ｍ）　；　７． ６２（ＩＨ，ｔ、Ｊ□８Ｈｚ）　；７．９１（ＬＨ，ｄｔ、Ｊ＝８Ｈｚおよび２ Ｈｚ）　；　７−９４（ＬＨ，ｄ、Ｊ＝１６Ｈｚ）　；８．０１（１Ｂ、ｄ、Ｊ ＝８Ｈｚ）　；　８．２１（ＬＨ，ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ）　；　８．２６（ＩＨ，ｄ ｄ、Ｊ＝８Ｈｚおよび２Ｈｚ）　；　８−４４（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝１６Ｈｚ）　 ；　８．５９（ＩＨ，ｓ）　；８．７８（ＩＨ，ｄ、Ｊ・５Ｈｚ） 実施例　２ ｌ−（２−ピリジル）−３−（４−ニトロフェニル）−２−プロペノン、３ａ この化合物は実施例１，３ｂに記載した合成と同様な方法を用いて合成した。粗 生成物をエタノールから結晶化した。

収率：６８％ ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩ２ｓ）　：　７．５２−７．５６（ＬＨ，ｍ）　；　７． ８７（２Ｈ，ｄ、Ｊ□９Ｈｚ）　；７．９１（ＩＨ，ｄｔ、Ｊ＝８Ｈｚおよび２ Ｈｚ）　；　７−９２（ＩＨ，ｄ、Ｊ−１６Ｈｚ）　；８．２１（ＩＨ，ｄ、Ｊ □８Ｈｚ）　；　８．２７（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝９Ｈｚ）　；　８−４３（ＩＨ，ｄ 。

Ｊ：１６Ｈｚ）；　８．７６（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝５Ｈｚ）実施例　３ ｌ−（２−ピリジルカルボニルメチル）ピリジニウムアイオダイド、５ ２−アセチルピリジン（１，２１ｇ、ｌ　Ｏ、Ｏｍｍｏ（１）とヨウ素（２−５ ４ｇ、１０．０ＩＩ１ｍｏｒｌ）をピリジン（１：）１２）中で１時間還流加熱 した。溶液を冷却し、暗色の沈殿を濾過し、ピリジンで洗浄した。

収率ニア２％ ”ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ）　：　６．５１（２Ｈ，ｓ）　；　７．８２−７４５（ ＩＨ，＋ｎ）　；　８．０８（ＩＨ。

ｄ、Ｊ□７Ｈｚ）　；　８．１４（１Ｂ、ｄｔ、Ｊ＝８Ｈｚおよび２Ｈｚ）　； 　８．２８（２Ｈ，Ｌ。

Ｊ＝８Ｈｚ）　；　８．７３（ＬＨ，ｔ、Ｊ＝８Ｈｚ）　；　８．８７（ＩＨ， ｄ、Ｊ−５Ｈｚ）　；　９．００（２Ｈ，ｄ、Ｊ−６Ｈ２） 実施例　４ ４’−（３−ニトロフェニル）　−２，２’；６’、２”−チルピリジン、５ｃ １−（２−ピリジル）−３−（３−ニトロフェニル）−２−プロペノン（２，５ ４ｇ、１０．０＋１Ｉｌｏ１２）、１−（２−ピリジルカルボニルメチル）ピリ ジニウムアイオダイド（３，２６ｇ、ｌｏ、ＯｍｍｏＱ）および酢酸アンモニウ ム（４，８２９，６０，０ｍｍｏ１２）を酢酸（３’ｈ＋Ｑ）中で１．５時間還 流加熱し、ついで溶液を冷却し、沈殿を濾過し、酢酸で洗浄した。粗生成物をア セトニトリルから結晶化しＩ；。

収率：５６％ ”ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ）　：　７−５４−７．５８（２Ｈ，ｍ）　；　７．８９ （ＬＨ，ｔ、Ｊ：８Ｈｚ）　：８．０６（２Ｈ，ｄｔ、Ｊ＝８Ｈｚおよび２Ｈｚ ）　；　８．３８−８．４１（ＩＨ，ｍ）　；８．４１−８．４４（ＩＨ，ｍ） ；　８−６６（ＩＨ，ｔ、Ｊ＝２Ｈｚ）；　８．７０（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ） ；　８．７８−７．８０（４Ｈ，ｍ）実施例　５ ４’−（４−ニトロフェニル）　−２，２’；６’、２＃−チルピリジン、６ｃ この化合物は実施例４，６ｃに記載された合成に類似の方法を用いて合成された 。粗生成物を７ラツシユクロマトグラフイー（シリカゲル、クロロホルムにメタ ノール勾配）で精製しｔ；。

収率：５６％ ’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ）　＝　７．５３−７．５６（２Ｈ，ｍ）　；　８．０５ （２Ｈ，ｄｔ、Ｊ□８Ｈｚおよび２Ｈｚ）　；　８．２２（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝９Ｈ ｚ）　；　８．４０（２Ｈ，ｄ、Ｊ−９Ｈｚ）　；８．６ｇ（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝８ Ｈｚ）　；　８−７６（２Ｈ，ｓ）　；　８．７７（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝５Ｈｚ）実 施例　６ ２．２’　；６’、２’−チルピリジン−Ｎ、Ｎ＃−ジオキシド、７ａ２．２’ 　；６’　、２＃−チルピリジン（０，９４９，４，Ｑｍｍｏｆｆ）をジクロロ メタン（８０ｍＱ）に溶解し、ｍ−クロロ過安息香酸（２，６０ｇ、１．５１ｍ ＋＋＋ｏ（ｉ）を添加した。−夜撹拌シタッチ少量のジクロロメタンを添加し、 溶液を１０％炭酸ナトリウムで洗浄した。ジクロロメタン相を蒸発させ、フラッ シュクロマトグラフィーで精製した。

収率：９３％ ”ＨＮＭＲ（ＣＤＣ４ｓ）　：　７−３１（２Ｈ，ｄｄ、Ｊ・２および７Ｈｚ） 　：　７．４０（２Ｈ。

ｄｄ、Ｊ＝１および３Ｈｚ）　；　７．９８（ＩＨ，ｔ、Ｊ＝８Ｈｚ）　；　８ ．２０（２８，ｄｄ。

Ｊ＝２および８Ｈｚ）　；　８．３７（２Ｈ，ｃｌｄ、Ｊ＝１および７Ｈｚ）　 ；　８．９４（２Ｈ。

ｄ、Ｊ・８Ｈｚ） ＵＶ（λｍａｘ　、エタノール中）：２４１．２７９実施例　７ ４’−（４−ニトロフェニル）　−２，２’；６’、２″−チルピリジン−Ｎ、 Ｎ”−ジオキシド、７ｂ この化合物は実施例６，７ａに記載した合成と同様の方法を用いて合成した。粗 生成物はアセトニトリルとメタノールの混合物から結晶化して精製した。

収率：５１％ ’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ）　：　７−５２−７．５８（４Ｈ，ｍ）　；　８−１１ （２Ｈ，ｄｄ、Ｊ＝７Ｈｚおよび２Ｈｚ）　：　８．２６−８．２８（２Ｈ，ｍ ）　；　８．４１−８．４６（４Ｈ，ｍ）　：　９．１６実施例　８ ４’−（３−ニトロフェニル’）　−２，２’；６’、２”−チルピリジン−Ｎ 、Ｎ”−ジオキシド、７ｃ この化合物は実施例６，７ａに記載した合成と同様の方法を用いて合成した。粗 生成物はエタノールとクロロホルムの混合物から結晶化して精製した。

収率ニア８％ ’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ）　：　７．５２−７．５８（４Ｂ、ｍ）　；　７．８９ （ｉＨ，ｔ、Ｊ＝８Ｈｚ）　；８．２５−８．２８（２Ｈ，ｍ）　；　８．３１ （ＩＨ，ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ）　；　８．３８（ＩＨ，ｄｄ。

Ｊ＝８Ｈｚおよび１Ｈｚ）　；　８．４３−８−４５（２Ｈ，ｒｎ）　；　８． ６１（ＬＨ，ｔ、Ｊ・２ｒｌｚ）　；　９．１７（２Ｈ，ｓ） 実施例　９ ６．６″−ジシアノ−２，２’；６’、２″−チルピリジン、８ａ２．２’；６ ’、２“−チルピリジン−Ｎ、Ｎ“−ジオキシド（７ａ）（０，９ｈ、３．５＋ ｘｍｏ４）をジクロロメタン（１０ｍＱ）に懸濁した。

Ｎ、Ｎ−ジメチルカルバミルクロリド（０，９５９，８，８ｍ＋ｉ＋ｏｆ２）と トリメチルシリルシアニド（１，２６ｇ、１２．７ｍｍｏＱ）を加えた。室温で ２週間撹拌したのち、溶液が中性になるまで１０％炭酸カリウムを加えた。相を 分離し、水層をクロロホルムで抽出した。クロロホルムを蒸発させ、残留物をア セトニトリルとテトラヒドロフランの混合物がら結晶化した。

収率：６５％ ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩ２３）　：　７．７５（２Ｈ，ｄ、ＪＪＨｚ）　；８．０ １（２Ｈ，ｔ、’Ｊ＝８Ｈｚ）　；　８．０５（ＬＨ，ｔ、Ｊ＝８Ｈｚ）　；　 ８．５８（２Ｈ，ｄ、Ｊ・８Ｈｚ）　；　８．８２（２Ｈ，ｄ。

Ｊ＝８Ｈｚ） ＵＶ（λｍａｘ　、エタノール中）　：、２１５．２５０．２９１実施例　１０ ４’−（４−ニトロフェニル’）　−６，６”−ジシアノ−２，２’。

６’、２”−チルピリジン、８ｂ この化合物は実施例９，８ａに記載された合成と同様の方法を用いて合成した。

粗生成物はアセトニトリルとテトラヒドロフランの混合物から結晶化して精製し た。

収率：５６％ ’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ）　：　８．２２（２Ｈ，ｄｄ、Ｊ＝８Ｈｚ８よび１Ｈｚ ）　；　８．３０（２Ｈ。

ｄ、　Ｊ＝９Ｈｚ）　；　８．３３（２Ｈ，ｔ、Ｊ＝８Ｈｚ）　；　８．４３（ ２Ｈ，ｄ、　Ｊｅ９Ｈｚ）　；８．７７（２Ｈ，ｓ）　；　８．０１（２Ｈ，ｄ ｄ、Ｊ＝８）１ｚ８よび１Ｈｚ）実施例　１１ ４’−（３−ニトロフェニル）　−６，６”−ジシアノ−２，２’ｉ６′、２“ −チルピリジン、８ｃ この化合物は実施例９，８ａに記載された合成と同様の方法を用いて合成された 。粗生成物はアセトニトリルとテトラヒドロフランの混合物から結晶化により精 製しＩこ　。

収率ニア１％ ’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ）　：　７．９０（ＩＨ，ｔ、Ｊ＝８Ｈｚ）　；　８．２ ２（２Ｈ，ｄｄ、Ｊ＝８Ｈｚおよび１Ｈｚ）　；　８．３３（２Ｈ，ｔ、Ｊ＝８ Ｈｚ）　；　８．４１−８．４５（ＬＨ，ｍ）　；８．４７−８．７２（ＬＨ， ｍ）　；　８−７２（ＬＨ，ｓ）　；　８．７７（２Ｈ，ｓ）　；　９．００（ ２Ｈ。

ｄ、Ｊ＝ｇＨｚ） 実施例　１２ ６．６“−ビス（アミノメチル）　−２，２’；６’、２“−チルドピリグン五 塩酸塩、９ａ 化合物８　ａ　（０，５５９、ｌ　、９ｒｎｍｏＱ）を乾燥テトラヒドロフラン （１５１２）中に懸濁した。この懸濁液に窒素を通じｔ；。ポランテトラヒドロ フラン複合体（Ｉ　Ｍ　、　２５ｍＱ。

２５．０ｍｍｏＱ）を徐々に加えた。−夜撹拌したのち、過剰のボランをメタノ ールを加えて分解した。混合物を蒸発乾固し、残留物を塩酸飽和エタノール（３ ０＋＋Ｑ）　Ｈ溶解しｔ；。

１時間撹拌したのち、溶液を冷却し、生成物を濾過した。

収率：５４％ １ＨＮＭＲ（ＤｚＯ）　：　４．６８（４Ｈ，ｓ）　？　７．８９（２Ｈ，ｄ、 ＪＪＨｚ）　；　８．３１（２Ｈ，ｔ、Ｊ−８Ｈｚ）；　８．５１（２Ｈ，ｄ、 Ｊ□８Ｈｚ）；　８．８２（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ）；　８．９０（ＩＨ，ｔ、 Ｊ＝８Ｈｚ）ＵＶ　（λｍａｘ、　Ｈ，Ｏ中）：２３２．２９３実施例　１３ ４’−（４−ニトロフェニル）−６，６＃−ビス（アミノメチル）−２，２’； ６’、２“−チルピリジン五塩酸塩、９ｂこの化合物は実施例１２．９ａに記載 された合成と同様の方法を用いて合成した。生成物は精製しなかったので、適当 なＮＭＲデータは得られなかった。粗生成物はそのまま次工程に使用した。

粗生成物の収率：５６％ 実施例　１４ ４’−（３−ニトロフェニル）−６，６“−ビス（アミノメチル）−２，２’； ６’、２＃−チルピリジン五塩酸塩、９ｃこの化合物は実施例１２．９ａに記載 された合成と同様の方法を用いて合成された。粗生成物はさらに精製することな く次工程に使用した。

粗生成物の収率：６１％ 実施例　１５ ６．６“−ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（１−ブトキシカルボニルメチル）アミノメチル ）　−２，２’；６’、２’−チルピリジン、　１０ａ化合物９　ａ　（０，４ ３９、Ｑ、９ｍ１ｏＱ）　、アセトニトリル（１５Ｉｌ１ｇ）、乾燥炭酸ナトリ ウム（２，００ｇ）およびブロモ酢酸のｔ−ブチルエステル（１，４４９，７、 ４＋ｕ＋＋ｏ（２）を２時間還流し、塩を濾過した。有機相を蒸発させ、フラッ シュクロマドグラフィー（シリカ、クロロホルム）で精製した。

収率：３８％ ’ＨＮＭＲ（ＣＤ！、Ｊ）：　１．４８（３６Ｈ，ｓ）；　３．５６（８Ｈ，ｓ ）；　４．１５（４Ｈ。

ｓ）　；　７．６６（２Ｈ，ｄ、Ｊ−８Ｈｚ）　；　７．８４（２Ｈ，ｔ、Ｊ− ８Ｈｚ）　；　７．９０（ＬＨ。

ｔ、Ｊ□８Ｈｚ）　；　８．４７（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ）　；　８−５０（２ Ｈ，ｄ、Ｊ・８Ｈｚ）ＬＩＶ（λｍａｘ　、エタノール）：２３５．２８８実施 例　１６ ４’−（４−アミノフェニル）−６，６“−ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（エトキシカル ボニルメチル）アミノメチル）　−２，２’；６’、２”−チルピリジン、　１ Ｏｂ １０ａに記載された合成と同様の方法を用い、９ｂとブ成した。この生成物はフ ラッシュクロマトグラフィー（シリカ、クロロホルムとメタノール勾配）で精製 した。

収率：２０％ ”ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩ２ｓ）：　１．２５（１２Ｈ，ｔ、Ｊ＝７Ｈｚ）；　４− １８（８Ｈ，ｑ、Ｊ＝７Ｈｚ）　；　３．７１（８Ｈ，ｓ）　；　４．２３（４ Ｈ，ｓ）　：　７．６６（２Ｈ，ｄｄ、Ｊ＝８Ｈｚおよび２Ｈｚ）　；　７．９ ０（２Ｈ，ｔ、Ｊ＝８Ｈｚ）　；　８．０６（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝９Ｈｚ）　：　８ ．４２（２Ｈ，ｄ、Ｊ・９Ｈｚ）　；　８．５７（２Ｈ，ｄｄ、Ｊ＝８Ｈｚおよ び２Ｈｚ）；８．７６（２Ｈ，ｓ）アミノ化合物１０ｂは相当するニトロ化合物 からｌＯｃに記載された合成と同様の方法を用いて合成された。

収率：１６％ 実施例　１７ ４’−（３−アミノフェニル’）−６，６“−ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（エトキシカ ルボニルメチル）アミノメチル）　−２，２’；６’、２”−チルピリジン、　 ｌｏｃ 相当するニトロ化合物は１０ａに記載された合成と同様な方法を用い、９ｃとブ ロモ酢酸エチルエステルから合成されｌ；。この生成物はフラッシュクロマトグ ラフィー（シリカ、クロロホルムとメタノール勾配）によって精製した。

収率：５３％ ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＱｓ）　：　１．２４（１２Ｈ，ｔ、Ｊ・８Ｈｚ）　；　４ ．１７（８Ｈ，ｑ、　Ｊ・８Ｈｚ）；３．６９（８Ｈ，ｓ）　；　４．２３（４ Ｈ，ｓ）　；　７．６７（２Ｈ，ｄｄ、Ｊ＝８Ｈｚおよび２Ｈｚ）　；　７．８ ９（２Ｈ，ｔ　、　ＪＪＨｚ）　；　７．８５−８．３０（４Ｈ，ｍ）　；　８ ．５７（２Ｈ，ｄｄ、Ｊ＝８Ｈｚおよび２Ｈｚ）　；　８．７５（２Ｈ，ｓ）ア ミノ化合物１０ｃはメタノール（２ｍ１２）に溶解した相当するニトロ化合物（ ５０ｍｇ、０．０７ｍｔｎｏＱ）から合成した。

１０％パラジウム黒（１０ｍｇ）を加え、ついで水素化ホウ素ナトリウムＣ４ｍ ｇ、０．１ｒｎｍｏＱ）を徐々に添加した。１時間後、反応混合物を濾過し、溶 液を蒸発させた。残留物を０．１Ｍ水酸化ナトリウム溶液に溶解し、生成物を水 相からクロロホルムで抽出した。有機相を乾燥し、蒸発させた。生成物はフラッ シュクロマトグラフィー（ＣＨＣｆｆ　１、ＭｅＯＨ；　１０　：　０．５）に よって精製した。

収率ニア９％ 実施例　１８ ６．６＃−ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（カルボキシメチル）アミノメチル）　−２，２ ’　ｉ６’　、２’−チルピリジン、　ｌｌａテトラエステル（１０ａ　Ｘ２６ ＯＢ、０．４ｍ１ｌｌｏＱ）をトリフルオロ酢酸（３ｍＱ’）に溶解した。２時 間後、トリフルオロ酢酸を蒸発させ、ジニチルエーテルを加え、生成物を濾過し た。

収率：８７％ ”ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ）　：　３．９９（８Ｈ，ｓ）　；　４．４７（４Ｈ，ｓ ）　；　７．６５（２Ｈ，ｄ。

Ｊ＝８Ｈｚ）　；　８．１０（２Ｈ，ｔ、Ｊ＝８Ｈｚ）　；　８．１１（ＩＨ， ｔ、Ｊ＝８Ｈｚ）　；　８．４８（２Ｈ，ｄ、Ｊ□８Ｈｚ）　；　８．６１（２ Ｈ，ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ）ＵＶ（λｍａｘ　、水）：２３７．２８８．３０５実施例 　１９ ４’−（４−アミノフェニル）−６，６＃−ビス［：Ｎ、Ｎ−ビス（カルボキシ メチル）アミノメチル）　−２，２’；６’、２’−チルとリジン、ｌｌｂ この化合物は実施例２０．　ｌｉｅに記載された合成と同様の方法を用いて合成 された。

収率：１００％ ’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ）　：　３．８２（８Ｈ，ｓ）　；　４．３１（４Ｈ，ｓ ）　：　６．９０（２１，ｄ。

ＪニアＨｚ）　；　７．６７（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ）　；　７．８０（２Ｈ， ｄ、Ｊ＝９Ｈｚ）　；　８．０８（２Ｈ，ｔ、Ｊ”８Ｈｚ）　；　８．６０（２ Ｈ，ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ）　；　８．６７（２Ｈ，ｓ）実施例　２０ ４’−（３−アミノフェニル）−６，６’−ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（カルボキシメ チル）アミノメチル）　−２，２’；６’、２“−チルピリジン、ｌｌｃ 相当するテトラエステル、ＩＯＣ（０，１０９，０，１７ｍ１ｌｌｏ１２）を５ ｒｎＱの０．５Ｍ　ＫＯＨ−ＥｔＯＨ溶液に溶解した。２時間室温で撹拌したの ち、エタノールを蒸発乾固し、水を加えた。混合物を室温で３０分間撹拌し、つ いで生成物を２Ｍ塩酸で沈殿させた。

収率：１００％ ’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ）　：　３．７４（８Ｈ，ｓ）　；　４．２７（４Ｈ，ｓ ）　；　７．７１（２Ｈ，ｄ。

Ｊ＝７Ｈ２）　；　７．８７（ＩＨ，ｔ、Ｊ＝８Ｈｚ）　；　８．０９（２Ｈ， ｔ、Ｊ＝７Ｈｚ）　；　８．３３（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ）　；　８．６２（ｌ Ｈ，ｄ、　Ｊ＝８Ｈｚ）　；　８．６３（２Ｈ，ｄ、Ｊ□７Ｈｚ）　；　８．７ ９（２Ｈ，ｓ）　；　８．８３（ＩＨ，ｓ）実施例　２１ １−　（２Ｊ−ピリジルジカルボニルメチル）−ビスピリジニウムアイオダイド 、　１３ ２．６−ジアセチルピリジン（８，１６ｇ、５０．ＯｍｍｏＱ）とヨウ素（２５ ，３８ｇ、ｌｏｏ、０＋ｎｍｏｆｆ）をピリジン（１２５＋＋１２）中で２時間 還流加熱した。溶液を冷却し、褐色の結晶性ピリジニウム塩（１３）を炉別した 。

収率：８７％ 実施例　２２ ６．６″−ジカルボキシ−４，４″−ジフェニル−２，２’　；６’　、２″− チルピリジン、１６ａ １３　（２，８６ｇ、５．０ｍｍｏｒｌ）　、２−オキソ−４−７二二ルー３− ブテン酸（１，７６９、ｌｏ、ＯｍｍｏＱ）および酢酸アンモニウム（８，８６ ｇ、１１５．ＯｍｍｏＱ）の酢酸（５ｋＱ）中溶液を５時間還流加熱したのち、 褐色の溶液を冷却した。固体物質を濾過し、風乾した。２のアンモニウム塩を水 に溶解し、６ＭＨＣｌ２で酸性にした（ｐＨ約１）。生成物を濾過し、水で洗浄 した。

収率：３４％ 融点：２７９℃（分解） ’ＨＮＩＪＲ（Ｄ）＋！Ｓｏ）　：　７．５６−８−０６（ＩＯＨ，ｍ）　；　 ８．２７（ＩＨ，ｔ）　；　８．４０（２Ｈ，ｄ）　；　８．７０（２Ｈ，ｄ） 　；　９．１８（２Ｈ，ａ）ＪＲ（ＫＢｒ）　：　１７６０．１７１５．１６９ ５．１４２０．１３６５．１２７２ｃｍ−’（Ｃ＝０とＣ−０） 実施例　２３ ６．６＃−ジカルボキシ−４，４＃−ビス（４−ニトロフェニル）−２，２’、 ６’、２“−チルピリジン、　１６ｂ化合物１６ｂは１６ａに記載の合成と同様 の方法を用い、１３と１５ｂから合成された。

収率：５７％ ’ＨＮＩＩＩＲ（ＤＭＳＯ）　：　８．２４（１）１．ｔ）　；　８゜２８（４ Ｈ，ｄ）　；　８．３７（４Ｈ，ｄ）　；８．４３（２Ｈ，ｄ）　；　８．６５ （２Ｈ，ｄ）　；　９．１３（２Ｈ，ｄ）実施例　２４ ６．６“−ジカルボキシ−４，４“−ビス（３−ニトロフェニル）−２，２’　 ｉ６’　、２“−チルピリジン、　１６ｃ化合物１６ｃは１６ａに記載の合成と 同様の方法を用い、１３と１５ｃから合成された。

収率：８１％ 実施例　２５ ６．６”−ビス（メトキシカルボニル）−４，４“−ジフェニル−２，２’；６ ’、２＃−チルピリジン、１７ａ１６ａ　（０，７７ｇ、ｌ　、５ｍｍｏＱ）の メタｙ−ル（５ｒｎＱ）中懸濁液に濃硫酸１滴を加えた。混合物を２４時間還流 加熱した。

冷却した混合物を濾過し、生成物をジクロロメタンから結晶化した。

収率：６１％ 融点：　２８５．５〜２８６．５°Ｃ ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＱｇ）　：　４．１３（６）！、ｓ）　；　７．４９−７． ８８（ＩＯＨ，ｍ）　；　８．０７（ＬＨ，ｔ）　；　８．４４（２Ｈ，ｄ）　 ；　８．６７（２Ｈ，ｄ）　；　９．０７（２Ｈ，ｄ）ＩＲ（ＫＢｒ）：　１７ ｔｌ、１７２５．１２５５．１１４４ｃｍ−’　（Ｃ＝ＯとＣ−０）実施例　２ ６ ６．６＃−ビス（メトキシカルボニル）−４，４“−ビス（４−二トロフェニル ）−２，２’；６’、２”−チルピリジン、１７ｂ化合物１７ｂは１７ａに記載 の合成と同様の方法を用い１６ｂから合成した。

収率：４５％ ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩ２３）　：　４−０５（６Ｈ，Ｓ）　；　７．８０−９． ０３（１５Ｈ，ｍ）ＩＲ（ＫＢｒ）　：　１７４０．１２５０．１１２５ｃｍ− ’　（Ｃ＝ＯとＣ−０）　、１５２５．１３４５ｃ＋＋＋−’（Ｎｏ２） 実施例　２７ ６．６＃−ビス（メトキシカルボニル）−４，４“−ビス（３−二トロフェニル ’）　−２，２’；６’、２“−チルピリジン、１７ｃ化合物１７ｃは１７ａに 記載の合成と同様の方法を用い１６Ｃから合成された。

収率：３８％ ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＬ）　：　４．０５（３Ｈ，ｓ）　；　４．０９（３Ｈ，ｓ ）　；　７．７５−８−９７（１５Ｈ，ｍ） ＩＲ（ＫＢｒ）　：　１７２５．１２６０．１１３０ｃ＋ｎ−’　（Ｃ□ｏとＣ −０）　、１５３０．１３４０ＣＩＩ＋−’（ＮＯ２） 実施例　２８ ６．６”−１：”ス（ヒドロキシメチル）−４，４“−ジフェニル−２，２’　 、６’　、２″−チルピリジン、１８ａ１７　ａ　（（Ｌ４０ｇ、０．８ｍｍｏ ｆｆ）の無水エタノール（１０ｍ＋２）懸濁液に水素化ホウ素ナトリウム（０， １３ｇ、３．５ｍ１Ｉｌｏ（２）を加えた。室温で２時間撹拌したのち、混合物 を１５時間還流加熱した。溶液を真空中で蒸発させた。残留物に炭酸水素ナトリ ウムの飽和溶液（５１）を加えた。溶液を煮沸したのち、水（１５ｍｆｆ）を加 えた。混合物を冷所に一夜放置した。沈殿を濾過し、風乾し、最後にメタノール から結晶化した。

収率：４７％ 融点：２１８〜２１９℃ ’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ）　：　４．７５（４Ｈ，ｓ）　；　７．５２−７．９５ （ＩＯＨ，ｍ）　；　７．８６（２Ｈ，ｄ）　；　８．１４（ＩＨ，ｔ）　；　 ８．４９（２Ｈ，ｄ）　；　８．８１（２Ｈ，ｄ）実施例　２９ ６．６′−ビス（ヒドロキシメチル’）−４，４＃−ビス（４−ニトロフェニル ）−２，２’；６’、２“−チルピリジン、１８ｂ化合物１８ｂは１８ａに記載 の合成と同様な方法を用いて１７ｂから合成した。

収率：４０％ 実施例　３０ ６．６＃−ビス（ヒドロキシメチル”）−４，４＃−ビス（３−二トロフェニル ）−２，２’；６’、２＃−チルピリジン、１８ｃ化合物１８ｃは１８ａに記載 の合成と同様な方法を用いて］、７ｃから合成した。

収率：５６％ ’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ）　：　４．９８（４Ｈ，ｓ）　；　７．８６−９．１３ （１５Ｈ，＋ｎ）ＩＲ（ＫＢｒ）　：　１５３０．１３５０ｃｍ−’　（ＮＯ２ ）実施例　３１ ６．６“−ビス（ブロモメチル）−４，４”−ジフェニル−２，２’；６’、２ ”−チルピリジン、　１９ａ １８ａ（０，１３ｇ、０．３ｍｍｏｆｆ）のクロロホルム（１７ｍｆｆ）溶液に 、三臭化リン（０，１２ｇ、０．４＋ｕ＋＋ｏＱ）のりｏロホルム（１ｍＱ）溶 液を加えｔ；。混合物を１１時間還流したのち、混合物を５％炭酸水素ナトリウ ムで中和した。水層をクロロホルム（３Ｘ　２０＋＋＋１２）で抽出した。有機 相を合し、硫酸ナトリウムで乾燥し、真空中で蒸発させた。残留物をジクロロメ タンから結晶化した。

収率：２９％ 融点：　２５３．５〜２５５．５℃ ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣｆｆｓ）　：　４．７３（４Ｈ，ｓ）　；　７−４７−７． ８１（ＩＯＨ，ｍ）　；　７−７３（２Ｈ，ｄ）　；　８−０［ＩＨ，ｔ）　； 　８．５７（２Ｈ，ｄ）　；　８．７９（２Ｈ，ｄ）実施例　３２ ６．６“−ビス（ブロモメチル）−４，４＃−ビス（４−ニトロフェニル）　− ２，２’；６’、２＃−チルピリジン、　１９ｂ化合物１９ｂは１９ａに記載の 合成と同様な方法を用い、１８ｂから合成された。

収率：３７％ ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＪ）　：　４．７５（４）１．ｓ）　；　７．４０−８．７ ０（１５Ｂ、ｍ）実施例　３３ ６．６“−ビス（ブロモメチル）−４，４”−ビス（３−ニトロフェニル）　− ２，２’；６’、２＃−チルピリジ７．１９ｃ化合物１９ｃは１９ａに記載の合 成と同様な方法を用い、１８ｃから合成した。

収率：５０％ ’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１２３）　：　４．７８（２Ｂ、ｓ）　；　４．８３（２Ｈ ，ｓ）　；　７−４８−８−６５実施例　３４ ６．６＃−ビス（Ｎ、Ｎ−ビス、（カルボキシメチル）アミノメチル）　−４， ４”−ジフエニルニ２．２’　；６’、２“−チルピリジン。

０ａ １９　ａ　（４７ｒｎｇ、０．０８ｍｍｏ（２）とイミノジ酢酸ジｔ−ブチルエ ステル（４１ｍｇ、０　、２０ｍｍｏＱ）の乾燥アセトニトリル（５ｍ１２）中 温合物に炭酸カリウム（１２０ｍｇ、Ｑ、９ｍ１ＩｌｏＱ）を加え、混合物を室 温で２４時間撹拌した。混合物を真空中で蒸発させ、残留物をクロロホルム（１ ０ｍｌ２）と撹拌し、水（２Ｘ　ｌＯ＋ｌ１１２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで 乾燥した。蒸発させると油状物が得られ、このＮＭＲスペクトル特性を調べた。

油状物をトリフルオロ酢酸（３ｒｎＱ”）に溶解し、室温にＸ６時間保持した。

トリフルオロ酢酸を真空中で蒸発させ、固体残留物をエチルエーテルと磨砕した 。

収率：５９％ ！Ｈ′ζ’、’Ｐ、（ＤＭＳＯ）：　３．７１（８Ｈ，ｓ）；　４．２７（４Ｈ ，ｓ）；　７．５４−７．９６（１０，う、ｍ）；　８．０４（２Ｈ，ｄ）；　 ８．１８（１１（、ｔ）；　８．５１（２Ｈ，ｄ）；８．８５（２Ｈ，ｄ） ＩＲ（ＫＢｒ）　：　１７３４．１６３０．１３９５．１２００ｃ＋＋＋−’　 （Ｃ＝０とＣ−０）実施例　３５ ６．６′−ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（カルボキシメチル）−アミノメチル）−４，４ ’−ビス（４−アミノフェニル）　−２，２’；６’、２”−チルピリジン、２ ０ｂ 乾燥アセトニトリル（１０ｉａ）中１９ｂ　（０，１１９，０，２＋＋＋ｍｏｆ ｆ）とイミノジ酢酸ジエチルエステル（７６＋ｎ９．０．４０＋＋＋ｍｏ（１） および炭酸カリウム（０，２７ｇ、２ａｍｒｎｏ（１）の間の反応は２０ａと同 様に実施した。この反応で得られた油状物をフラッシュクＯ？トゲラフイー（シ リカ、ＭｅＯＨ／　ＣＨＣ（ｉｓ　１／　１９）で精製した。油状物をメタノー ル（５ｙｄ）に溶解した。

１０％パラジウム黒（２０＋＋＋ｐ）を加え、ついで水素化ホウ素ナトリウム（ ２３＋ｕ、０．６０ｍｍｏＱ）を徐々に添加した。１時間後、混合物を濾過し、 炉液を真空中で蒸発させた。残留物を０．５Ｍ水酸化カリウムエタノール（２０ Ｉ１１１２）に溶解した。室温で３時間撹拌したのち、混合物を蒸発させ、水（ ２０ｉａ）を加えた。混合物を６ＭＨＯｆｆで酸性にした（ｐＨ約２．０）。生 成物を濾過し、水洗した。

収率：６０％ ”ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ）　：　３．７１（８Ｈ，ｓ）　；　４．３０（４Ｈ，ｓ ）　；　７．７５−８．８０（１５Ｈ，＋ｎ） ＩＲ（ＫＢｒ）：　１７３５．１６３０．１４００．１２００ｃｍ−’　（Ｃ− ０とＣ−０）実施例　３６ ６．６＃−ビス（Ｎ、Ｎ−ビス（カルボキシメチル）−アミノメチル）−４，４ ”−ビス（３−アミノフェニル）−２，２’ｉ６’、２’−チルピリジン、２０ ｃ 化合物２０ｃは２０ｂに記載の合成と同様な方法を用い、１９ｃから合成された 。

収率ニア９％ ’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ）　：　３．６８（８Ｈ，ｓ）　；　４．２１（４Ｈ，ｓ ）　；　７．６３−８．６４（１５Ｈ，ｍ） ＩＲ（ＫＢｒ）：　１７２５、ｌ　６３−０．１４００、ｌ１９０ｃｍ−’　（ Ｇ□ｏとｃ−ｏ）実施例　３７ Ｌ−リジンエチルエステル（出発化合物、反応式３）塩化チオニル（５，０ｓｌ ｆｆ、８−０６ｇ、６８ｍ＋＋＋ｏ１２）を５００＋ｎ１２の氷冷乾燥エタノー ルに滴下した。混合物を撹拌しながらこの温度に２０分間保持し、Ｌ−リジン塩 酸塩（２０ｇ、１０９ＩＩ＋ＩＩｏρ）を加えた。

次に混合物を３時間還流し、ついで容量的２００ｍｆｆに濃縮した。ジエチルエ ーテル２００＋ｍｆｆを加え、結晶性の生成物を濾過した。

収量：　２９ｇ（９７％）二塩酸塩 Ｒｆ−（Ｌ２０　（システムＦ） 実施例　３８ ω−Ｎ−（４−ニトロベンゾイル）−Ｌ−リジンエチルエステル（３７） 水５Ｑ＋ｎＱに溶解したし一リジン塩酸塩（５ｇ、２７．４ｒｎｗｒｏＱ）を５ ＭＮａＯＨで処理してｐＨ１０，５とした。ジオキサン（５０ｉａ）中４−ニト ロベンゾイルクロリド（６，６ｇ、３１３ｍ１ｏ１２）と５ＭＮａＯＨを徐々に 加え、この間反応混合物は激しく撹拌し、ｐＨ１０，５に維持した。

添加が終了し、桃色が消失したのち、反応混合物を濃塩酸でｐＨ２の酸性にし、 ジエチルエーテルで４回抽出した。水相を濃縮乾固し、２０（ｈ＋＋Ｑの乾燥エ タノールと２回共蒸発させ、予め１０ｉａの塩化チオニルで処理した乾燥エタノ ール２５ｏＩｌｌＱ中に懸濁した。混合物を３時間還流し、濾過し、蒸発させた 。残留物質を飽和炭酸水素ナトリウムとクロロホルム／エタノール　１：１の間 に分配し、有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥すると粗生成物が得られ、これを 溶出液として５％ＥｔＯＨ／クロロホルムを使用したフラッシュクロマトグラフ ィーにより精製した。

収量：１．０８９　（１２％）、油状物は放置すると結晶化する。Ｒｆ−０，２ ３（システムＡ） Ｈ’ＮＭＲ（６０ＭＨｚ、ＣＤＣＱｓ）　：　８−２５（ｄ、２Ｂ、Ｊ＝９Ｈｚ ）　；　７．９３（ｄ、２Ｈ。

Ｊ・９Ｈｚ）　；　６．６３（ｓ、ｂｒｏａｄ、　１Ｂ）　；　３．９５−４． ３０（ｑ、２Ｈ）　；　３．６８（ｓ、３Ｈ）　；　３．３０−３．６０（ｍ、 ＳＨ）　；　１．４０−１．７５（ｍ、７１（）　；　１．１１−１．３７（ｔ 、３Ｈ） 実施例　３９ σ−Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−ω−Ｎ−（４−ニトロベンゾイル）− Ｌ−リジンエチルエステル（３８）化合物（３７）　（０，５４９，１，７ｍｍ ｏＱ）をトルエンと共蒸留し、乾燥アセトニトリル（１０ｒＡＱ）に溶解し、ブ ロモ酢酸メチルエステル（０，２６５ｇ、１．７＋＋＋ｍｏ＋２）　、ついで乾 燥炭酸ナトリウム粉末（２，０ｇ）を加えた。混合物を３時間還流し　ｔこ　。

無機塩を濾過し、アセトニトリルを蒸発させると油状の粗生成物が得られ、これ をフラッシュクロマトクラフィーで精製した。

収量：　０．４５９（６８％）油状物、Ｒｒ−０，２６（システムＡ）Ｈ’ＮＭ Ｒ（６０ＭＨｚ、ＣＤＣｆｆ５）　：　８．２５（ｄ、２Ｈ，Ｊ＝９Ｈｚ）　； 　７．９３（ｄ、２Ｈ。

Ｊ＝９Ｈｚ）　；　６．８７（ｓ、ｂｒｏａｄ、１Ｈ）　；　３．９９−４−３ ４（ｑ、２Ｈ）　；　３．３０−３．６０（ｍ、３Ｈ）　；　１．４０−１．７ ５（ｍ、８Ｈ）　；　１．１１−１．３７（ｔ、３Ｈ）実施例　４０ ω−Ｎ−モノメトキシトリチル−し−リジンエチルエステル（３９） 乾燥トリエチルアミン（１，８ｍ＋２．１８＋＋＋＋＋＋ｏｆ２）を出発化合物 （反応式３）　（１−５ｇ、５　ｍｒｎｏ（りの乾燥ピリジン２ＯｍＱ中懸濁液 に添加した。この混合物を室温で撹拌しながら、固体モノメトキシトリチルクロ リド（１，９６ｇ、６　ｒｎｒｎｏ（２）（ＭＭＴｒＣＩ２）を少量ずつ１時間 をかけて加え、さらに２時間混合物を撹拌した。標準的な炭酸水素ナト’Ｊウム 処理に続いてクロロホルムで抽出するとα−ＭＭＴｒ異性体を夾雑する粗生成物 が得られた。

異性体間にはＲｆに大きな差があるので、純粋な標記生成物はフラッシュカラム クロマトグラフィーによって容易に単離された。

収量：　１．３５ｇ（：４８％）油状物、Ｒｆ＝　０．４３　（システムＡ）Ｈ ’ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣＱ、）：　７．５−６．７５（＋＋＋、１４Ｈ ）；　４．１８−４．１３（ｑ、２Ｈ）；　３．７８（ｓ、３Ｈ）；　３．４５ −３．３７（＋ｎ、１）Ｉ）；　２．１４−２．１０（ｔ。

２Ｈ，Ｊ□７Ｈｚ）；　１．７５−１．３５（ｍ、９Ｈ）；　１．２６（ｔ、３ Ｈ）実施例　４１ α−Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−ω−Ｎ−モノメトキシトリチル−し− リジンエチルエステル（４０）部分的に保護したＬ−リジン誘導体（３９）　（ １，０９，２，１３ｍ　ｍ　ｏ　Ｑ、）を、例３６に記載の方法を用いて生成物 （４０）に変換した。

収率：　０．８１９（７０％）、油状物、Ｒｆ−ｏ、７３（システムＡ）Ｈ’Ｎ ＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｆｆ５）　：　７．４６−６．７７（ｍ、１４Ｈ） 　；　４−１９−４．１４（ｑ、２Ｈ）　；　３．７７（ｓ、３Ｈ）　；　３． ７０（ｓ、３Ｈ）　；　３−３１−３．４５（ｑ、２Ｈ）；３．２２−３．２５ （ｔ　、　ＩＨ）　；　２．０９−２．１２（ｔ　、２Ｈ）　；　１．３５−１ ．７０（ｍ。

６Ｈ）　；　１．２３−１．２７（ｔ、３Ｈ）実施例　４２ ω−Ｎ−トリフルオロアセチル−し−リジンエチルエステル（４１） 乾燥エタノール１０！ＩｌＱに溶解した出発化合物（反応式３）（２，０ｇ、８ ．１＋＋＋ｏＱ）を乾燥トリエチルアミン（４，０ｂ、４０．４ｍｍｏＱ）で処 理しｌ；。生成した懸濁液を撹拌しながら、トリフルオロ酢酸（１，５ｇ、１０ ．５ｍｍｏＱ）を加え、混合物を６時間還流した。

すべての揮発性成分を蒸発させ、残留物を飽和炭酸水素ナトリウムとクロロホル ム／エタノール　１：ｌの間に分配した。

有機相を合しく５×６０６）、蒸発させ、トルエンと共蒸留し、フラッシュクロ マトグラフィーに付すと標記生成物が無色油状物の形で得られた。

収量：　１．９ｇ（８７％）　、Ｒｆ＝０．７２　（システムＤ）Ｈ’ＮＭＲ（ ４００ＭＨｚ、ＣＤＣＬ）　：　７−１０（ｔ、ＩＨ，交換可能）　；　４−２ １−４．１６（ｑ、２Ｈ）　；　３．４５−３．４０（ｍ、　ＩＨ）　；　３３ −３８−３−３１（，２Ｈ）　；１−８４（ｓ、２Ｈ，交換可能）　；　１．８ ２−１．４０（ｍ、６Ｈ）　；　１．２８（ｔ。

３Ｈ） 実施例　４３ α−Ｎ−（メトキシカルボニルメチル）−ω−Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｌ− リジンエチルエステル（４２）Ｌ−リジン誘導体（４１）　（１，０ｇ、３．７ ＋＋＋ｍｏｆｆ）を実施例３６と同様の方法によって生成物（４２）に変換した 。

収量：　１．０５ｇ（８３％）油状物、Ｒｆ−０，４８（システムＡ））１”Ｎ ＭＲ（６０ＭＨｚ、ＣＤＣＱ、　＋　ＣＤ、ＯＤ）　：　４．４−４．０（ｑ、 ２）１）　；　３．６８（ｓ。

３Ｈ）　；　３．５−３．１（ｍ、５Ｈ）　；　１．８−１．４（ｍ、６Ｈ）　 ；　１．２３（ｔ、３Ｈ）実施例　４４ ω−Ｎ−（４−ヒドロキシブチリル）−Ｌ−リジンエチルエステル（４３） Ｌ−リジンエチルエステルニ塩酸塩（３６）　（２ｇ、８．１１１１１１０１２ ）を乾燥エタノール３０ｍｆｆに取り、乾燥トリエチルアミン（５，６３ｍｆｆ 、　４０．５ｍｍｏＱ）およびγ−ブチロラクトン（０，７ｇ、ＬＩＩＩＩＩｌ ｏｆｆ）を加え、生成した懸濁液を３時間還流した。

揮発成分を蒸発させ、トルエンと共蒸留すると粗生成物が得られ、これを、溶出 液として２０％メタノール／クロロホルムを用いたフラッシュクロマトグラフィ ーで精製した。

収量：　１．５４１？（７３％）油状物、Ｒｆ−０，２８（システムＤ））１’ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣＱ、　＋ＣＤ３０Ｄ）　：　４．３０−４．２２ （ｑ、２Ｈ）　；　３−７２−３．７７（ｍ、　ＩＨ）　；　３．５８−３．６ ５（ｔ、２Ｈ）　；　３．１８−３．２８（ｍ、２Ｈ）　；２．３０−２．３６ （ｔ、２Ｈ）　；　１．４０−２．００（ｍ、８Ｈ）　；　１．２ｇ−１−３４ （ｔ。

３Ｈ） 実施例　４５ 化合物２０ａのユウロピウムおよびテルビウムキレートの蛍光 化合物２０ａのユウロピウムおよびテルビウムキレートの蛍光収量の比ｌｌ１ｒ ｅＱ１に化合物２０ａの等モル１０−’Ｍ浴溶液相当するランタナイドイオンに ついて測定した。蛍光の測定は、ランタナイド蛍光の崩壊曲線の測定が可能なリ ン光モードを用いＰｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ　ＬＳ−５０分光蛍光計によって行 った。蛍光収量は式 により非錯体化ランタナイド陽イオンの蛍光（Ｌｎ）に相関することが報告され ている。■　および’Ｌｎはそれぞｈｅ れキレート化および非錯体化ランタナイド陽イオンの発光減衰曲線の前指数項で ある（ユウロピウムについては６１４ｎｍ、テルビウムについては５４４ｎｍ） 。非錯体化ユウロピウムについての励起波長は３９５ｎｍ、テルビウムについて は３７０ｎｍであった。ＣおよびＣ６ｈｅはそれぞれ遊離およｎ び錯体化ランタナイド陽イオンの濃度であり、ｋＬｎおよびｋ　は相当する崩壊 定数である。化合物２０ａの場合、ｈｅ ユウロピウム錯体での相対蛍光収量は２．１Ｘ　１０’、テルビウム錯体では８ ．ｌＸｌ０’となる。キレート励起光はいずれの場合も３４０ｎｍであっＩ；。

国際調査報告 １ｍ・−−１ゆ一−＾帥ｌ□ζ−１１−＝ｗ＋、Ｐ（Ｔ／Ｓ［的／Ｃコ３７９

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）構造 ▲数式、化学式、表等があります▼式Ｉ〔式中 ｉ）ｎは整数０、１または２であり、 ｉｉ）Ｘ１〜Ｘ５は水素、ならびに炭素、酸素および／または窒素含有基から選 ばれ、 ｉｉｉ）Ｚ１およびＺ２は互いに同種または異種のキレート形成基であって、そ れぞれ少なくとも２個のヘテロ原子からなり、それらがテルピリジン構造の窒素 と一緒に結合金属イオンのキレート化できるように配置されていて、 ｉｖ）………は基Ｘ−Ｙが親化合物に存在する水素を置換する置換基であること を特定し、 ｖ）Ｘ−Ｙは上記キレート形成に不活性な有機基であって、Ｘは不活性かつ安定 な架橋であり、Ｙは（ａ）官能基であるかまたは（ｂ）式Ｉ（ｎ−１または２） の化合物に付与される性質を有する有機化合物（Ｙ′）の残基である〕 を有するテルビリジン、またはその酸、エステル、塩およびキレート形で上記キ レート形成ヘテロ原子の１個もしくは２個以上が上記の形に遷移している化合物 。 ２）少なくとも２個のヘテロ原子は、窒素たとえば一級、二級および三級アミン 、ならびに負に荷電した酸素たとえばＣＯＯ−、ホスホネートおよびホスフエー トからなる群より選ばれる請求項１記載の化合物。 ３）Ｘ１およびＸ５は水素である請求項１または２記載の化合物。 ４）Ｚ１およびＺ２はそれぞれＣＨ２−Ｚ′およびＣＨ２−Ｚ′′であり、この 場合Ｚ′およびＺ′′はＮ（一ＣＨ２−ＣＯＯ−）２、Ｎ（−ＣＨ２−ＣＨ２− ＣＯＯ−）２、Ｎ（ＣＨ２−ＯＰＯ３２−）２，２，６−ジカルボキシピベラジ ン−１−イル、およびＣＨ２Ｚ′とＣＨ２−Ｚ′′のメチレン基がＮ（−ＣＨ２ ＣＯＯ−）で架橋されている基からなる群より選ばれる請求項１〜３のいずれか に記載の化合物。