JPH0346540A - 粒子状物質の検出方法 - Google Patents
粒子状物質の検出方法Info
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- JPH0346540A JPH0346540A JP1180354A JP18035489A JPH0346540A JP H0346540 A JPH0346540 A JP H0346540A JP 1180354 A JP1180354 A JP 1180354A JP 18035489 A JP18035489 A JP 18035489A JP H0346540 A JPH0346540 A JP H0346540A
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Landscapes
- Investigating Or Analyzing Materials By The Use Of Ultrasonic Waves (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は液体中の粒子状物質の検出方法に係り、特に、
免疫分析に好適な光音響分析方法に関する。
免疫分析に好適な光音響分析方法に関する。
従来の粒子状物質の検出は、特開昭６３−４４１４９号
公報に記載のように、免疫分析において凝集反応の生成
物の粒径に励起光を一致させていた。従って、凝集反応
生成物が、必ずしも、一定の粒径をとらない点について
考慮されていなかった。
公報に記載のように、免疫分析において凝集反応の生成
物の粒径に励起光を一致させていた。従って、凝集反応
生成物が、必ずしも、一定の粒径をとらない点について
考慮されていなかった。
上記従来技術は、凝集反応生成物が必ずしも一定の粒径
をとらない点については考慮がされておらず、添加した
特定の径の粒子と凝集反応を起こす試料中の検出目的物
質を必ずしも感度良く検出できない問題があった。
をとらない点については考慮がされておらず、添加した
特定の径の粒子と凝集反応を起こす試料中の検出目的物
質を必ずしも感度良く検出できない問題があった。
本発明の目的は、凝集反応生成物の粒径に無関係に試料
中の検出目的物質を定量する方法を提供することにある
。
中の検出目的物質を定量する方法を提供することにある
。
上記目的は、試料中の検出目的物質と凝集反応を起こす
特定の径をもつ粒子状物質を所定量添加し、特定の粒子
状物質の径と事実上等しく波長を調整した励起光を上記
試料に照射することにより、未反応の特定の径をもつ粒
子状物質の存在量を検出し、特定の径をもつ粒子状物質
の添加量と未反応の特定の径をもつ粒子状物質の存在量
との差がら試料中の検出目的物質の濃度を検出すること
により達成することができる。
特定の径をもつ粒子状物質を所定量添加し、特定の粒子
状物質の径と事実上等しく波長を調整した励起光を上記
試料に照射することにより、未反応の特定の径をもつ粒
子状物質の存在量を検出し、特定の径をもつ粒子状物質
の添加量と未反応の特定の径をもつ粒子状物質の存在量
との差がら試料中の検出目的物質の濃度を検出すること
により達成することができる。
以下に本発明の詳細な説明する。
第１図に、本発明による抗原抗体未反応粒子定量装置の
基本構成の一例を示す。レーザなどの光源１からの励起
光９はセル４に入射する。セル６内の液体試料に含まれ
る粒子状物質は、励起光を吸収し、光音響信号を発生す
る。発生した光音響信号は、セルに取り付けられた圧電
素子などの検出器により検出される。検出された光音響
信号１２は、光チョッパなどの強度変調器２からの信号
を参照信号１１とし、ロックインアンプ７により増幅さ
れる。このような光音響装置で測定された光音響信号の
強度は、試料に含まれる粒子状物質の量（濃度）に比例
する。従って、光音響信号の強度による粒子状物質の検
量線を得ることができる。
基本構成の一例を示す。レーザなどの光源１からの励起
光９はセル４に入射する。セル６内の液体試料に含まれ
る粒子状物質は、励起光を吸収し、光音響信号を発生す
る。発生した光音響信号は、セルに取り付けられた圧電
素子などの検出器により検出される。検出された光音響
信号１２は、光チョッパなどの強度変調器２からの信号
を参照信号１１とし、ロックインアンプ７により増幅さ
れる。このような光音響装置で測定された光音響信号の
強度は、試料に含まれる粒子状物質の量（濃度）に比例
する。従って、光音響信号の強度による粒子状物質の検
量線を得ることができる。
次に、第２図に、光音響分析装置の感度、即ち、検量線
の傾きの粒径依存性を示す。第２図の測定結果は、ポリ
スチレン粒子について測定したものであり、励起光の強
度１．８Ｗ、波長４８８ｎｍ、変調周波数１８１ Ｈｚ
による測定である。第２図に示すように、粒子の大きさ
が、励起光の波長４８８ｎｍ （約０．５μｍ）に一致
すると、光音響分光装置の感度が共鳴的に増大する。こ
の効果により、第１図の励起光９の波長と一致する粒径
の粒子状物質を試料に添加することにより、この粒子を
選択的に検出・定量することができる。特に、添加粒子
が試料中の分析目的物質と抗原抗体反応による凝集で粒
径が変化すると、この光音響分光装置では検出されなく
なるので、粒子の添加３ 量と未反応粒子の存在量の差から分析目的物質を選択的
、かつ、高感度に測定することができる。
の傾きの粒径依存性を示す。第２図の測定結果は、ポリ
スチレン粒子について測定したものであり、励起光の強
度１．８Ｗ、波長４８８ｎｍ、変調周波数１８１ Ｈｚ
による測定である。第２図に示すように、粒子の大きさ
が、励起光の波長４８８ｎｍ （約０．５μｍ）に一致
すると、光音響分光装置の感度が共鳴的に増大する。こ
の効果により、第１図の励起光９の波長と一致する粒径
の粒子状物質を試料に添加することにより、この粒子を
選択的に検出・定量することができる。特に、添加粒子
が試料中の分析目的物質と抗原抗体反応による凝集で粒
径が変化すると、この光音響分光装置では検出されなく
なるので、粒子の添加３ 量と未反応粒子の存在量の差から分析目的物質を選択的
、かつ、高感度に測定することができる。
以下、本発明の一実施例を第１図及び第３図により説明
する。
する。
本実施例の装置構成を第１図に示す。光源ｌはＡｒレー
ザで、４８８ｎｍのレーザ光９を発振する。レーザ光９
は回転ブレード式の光強度変調器２、即ち、光チョッパ
により、変調周波数１８１Ｈｚの矩形波に強度変調され
、励起光１０となる。
ザで、４８８ｎｍのレーザ光９を発振する。レーザ光９
は回転ブレード式の光強度変調器２、即ち、光チョッパ
により、変調周波数１８１Ｈｚの矩形波に強度変調され
、励起光１０となる。
励起光１０はセル４に入射する。セル４は円筒状の光音
響セルで、ガラス円筒の中心部に同一内径の円筒状圧電
素子を組み込み、これを光音響信号の検出器とする。励
起光は円筒の中心軸に沿って入射する。セル４の内部に
液体試料を充填し、励起光１０を入射した時に発生する
光音響信号は圧電素子によって電気信号に変換される。
響セルで、ガラス円筒の中心部に同一内径の円筒状圧電
素子を組み込み、これを光音響信号の検出器とする。励
起光は円筒の中心軸に沿って入射する。セル４の内部に
液体試料を充填し、励起光１０を入射した時に発生する
光音響信号は圧電素子によって電気信号に変換される。
この電気信号に変換された光音響信号１２はロックイン
アンプ７に入力する。ロックインアンプ７では、光強度
検出器２の変調に同期した信号１１を参照信４− 号として、検出した光音響信号１２から励起光１０に対
応する光音響信号のみを抽出し、光音響信号強度１４を
記録計８に入力する。
アンプ７に入力する。ロックインアンプ７では、光強度
検出器２の変調に同期した信号１１を参照信４− 号として、検出した光音響信号１２から励起光１０に対
応する光音響信号のみを抽出し、光音響信号強度１４を
記録計８に入力する。
以下、本発明を免疫分析に応用した実施例について説明
する。上述の装置を用いてα−フェトプロティン（以下
ＡＦＰと略す）を測定する。
する。上述の装置を用いてα−フェトプロティン（以下
ＡＦＰと略す）を測定する。
（１）ＡＦＰ測定用試料の調整
抗ヒトＡＦＰ抗体の０．１Ｍ グリシン緩衝液（ｐＨ６
，５）１０ｍ＋２に粒径０．５μｍ の白色ポリスチレ
ンラテックス（固形分濃度１０％）１ｍＱを加えて室温
で三時間撹拌したのち、２〜４℃の冷却下で４０分間、
１２００Ｏｒｐｍで遠心分離した。得られた沈殿を、０
．５％牛血清アルブミン、０．１ＭＮａＣＱ、２ｍＭＭ
ｇＣｆ１ｚを含む１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６，５）
に懸濁させて、感作ラテツクス粒子濃度が１％の抗ＡＦ
Ｐ抗体感作ラテックス試薬を調整した。
，５）１０ｍ＋２に粒径０．５μｍ の白色ポリスチレ
ンラテックス（固形分濃度１０％）１ｍＱを加えて室温
で三時間撹拌したのち、２〜４℃の冷却下で４０分間、
１２００Ｏｒｐｍで遠心分離した。得られた沈殿を、０
．５％牛血清アルブミン、０．１ＭＮａＣＱ、２ｍＭＭ
ｇＣｆ１ｚを含む１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６，５）
に懸濁させて、感作ラテツクス粒子濃度が１％の抗ＡＦ
Ｐ抗体感作ラテックス試薬を調整した。
（２）試料の測定
試料溶液であるヒトＡＦＰを添加した牛血清アルブミン
溶液１０μ悲ら（１）で調整した抗ヒトＡＦＰ抗体感作
ラテックス試薬５０μ氾。
溶液１０μ悲ら（１）で調整した抗ヒトＡＦＰ抗体感作
ラテックス試薬５０μ氾。
１０ｍＭリン酸緩衝溶液（ｐＨ６，５）２００μ氾を加
えて、３７℃、１０分間抗抗原体反応させた。この反応
液を光音響セルに充填し、光音響信号を測定した。
えて、３７℃、１０分間抗抗原体反応させた。この反応
液を光音響セルに充填し、光音響信号を測定した。
本発明によれば、試料中の検出目的物質と添加する特定
の径をもつ粒子状添加物質の凝集反応生成物の粒径に無
関係に検出目的物質を定量できるので、以下の効果があ
る。すなわち、 （１）、凝集反応生成物の粒径が一定でない場合でも、
検出目的物質を正確に定量できる。
の径をもつ粒子状添加物質の凝集反応生成物の粒径に無
関係に検出目的物質を定量できるので、以下の効果があ
る。すなわち、 （１）、凝集反応生成物の粒径が一定でない場合でも、
検出目的物質を正確に定量できる。
（２）、試料に添加する粒子状物質の径を励起光に一致
させることにより、励起光の波長掃引機構が不要となる
。
させることにより、励起光の波長掃引機構が不要となる
。
第１図は本発明の一実施例のブロック図、第２図は感度
の粒径依存性を示す特性図、第３図は第１図の装置を用
いたアルファフェトプロティンの検量線を示す特性図で
ある。 １・・光源、２・強度変調器、３・・ハーフミラ−４・
・セル、５ ・ビームストッパ、６・・光強度モニタ、
７・・ロックインアップ、８・・・記録計、９ ・レー
ザ光、１０・・・励起光、］１・・参照信号、１２・・
光音響信号、↓３ モニタ信号、１４・・信号強度。
の粒径依存性を示す特性図、第３図は第１図の装置を用
いたアルファフェトプロティンの検量線を示す特性図で
ある。 １・・光源、２・強度変調器、３・・ハーフミラ−４・
・セル、５ ・ビームストッパ、６・・光強度モニタ、
７・・ロックインアップ、８・・・記録計、９ ・レー
ザ光、１０・・・励起光、］１・・参照信号、１２・・
光音響信号、↓３ モニタ信号、１４・・信号強度。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、励起光を試料中の粒子状物質に照射して前記励起光
の波長と等しい径をもつ前記粒子状物質の濃度を求める
方法において、 前記試料に前記試料の一部の成分と凝集反応を起こす特
定の径の粒子状物質を所定量添加し、前記特定の径をも
つ粒子状物質の径と事実上等しく波長を調整した光を前
記試料に照射することにより、未反応の前記特定の径を
もつ粒子状物質の存在量を検出し、前記特定の径をもつ
粒子状物質の添加量と前記未反応の特定の径をもつ粒子
状物質の存在量との差から、前記試料の一部の成分と凝
集した特定の径をもつ粒子状物質の量を検出する光音響
分析方法。 ２、請求項１において、 前記凝集した特定の径をもつ粒子状物質の量から、前記
試料の一部の成分の濃度を求める光音響分析方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1180354A JPH0346540A (ja) | 1989-07-14 | 1989-07-14 | 粒子状物質の検出方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1180354A JPH0346540A (ja) | 1989-07-14 | 1989-07-14 | 粒子状物質の検出方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0346540A true JPH0346540A (ja) | 1991-02-27 |
Family
ID=16081773
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1180354A Pending JPH0346540A (ja) | 1989-07-14 | 1989-07-14 | 粒子状物質の検出方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0346540A (ja) |
-
1989
- 1989-07-14 JP JP1180354A patent/JPH0346540A/ja active Pending
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