JPH0346540A - 粒子状物質の検出方法 - Google Patents
粒子状物質の検出方法Info
- Publication number
- JPH0346540A JPH0346540A JP1180354A JP18035489A JPH0346540A JP H0346540 A JPH0346540 A JP H0346540A JP 1180354 A JP1180354 A JP 1180354A JP 18035489 A JP18035489 A JP 18035489A JP H0346540 A JPH0346540 A JP H0346540A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- sample
- detected
- signal
- particulate matter
- diameter
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000011236 particulate material Substances 0.000 title abstract 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title description 6
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 claims abstract description 9
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- 239000013618 particulate matter Substances 0.000 claims description 20
- 230000005284 excitation Effects 0.000 claims description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 abstract description 20
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 abstract description 5
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 abstract description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract 6
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 abstract 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 14
- 102100023635 Alpha-fetoprotein Human genes 0.000 description 6
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 239000013076 target substance Substances 0.000 description 5
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 4
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 4
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 4
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 4
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 4
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 101000848653 Homo sapiens Tripartite motif-containing protein 26 Proteins 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 102000046101 human AFP Human genes 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000010408 sweeping Methods 0.000 description 1
- 230000001360 synchronised effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analyzing Materials By The Use Of Ultrasonic Waves (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は液体中の粒子状物質の検出方法に係り、特に、
免疫分析に好適な光音響分析方法に関する。
免疫分析に好適な光音響分析方法に関する。
従来の粒子状物質の検出は、特開昭63−44149号
公報に記載のように、免疫分析において凝集反応の生成
物の粒径に励起光を一致させていた。従って、凝集反応
生成物が、必ずしも、一定の粒径をとらない点について
考慮されていなかった。
公報に記載のように、免疫分析において凝集反応の生成
物の粒径に励起光を一致させていた。従って、凝集反応
生成物が、必ずしも、一定の粒径をとらない点について
考慮されていなかった。
上記従来技術は、凝集反応生成物が必ずしも一定の粒径
をとらない点については考慮がされておらず、添加した
特定の径の粒子と凝集反応を起こす試料中の検出目的物
質を必ずしも感度良く検出できない問題があった。
をとらない点については考慮がされておらず、添加した
特定の径の粒子と凝集反応を起こす試料中の検出目的物
質を必ずしも感度良く検出できない問題があった。
本発明の目的は、凝集反応生成物の粒径に無関係に試料
中の検出目的物質を定量する方法を提供することにある
。
中の検出目的物質を定量する方法を提供することにある
。
上記目的は、試料中の検出目的物質と凝集反応を起こす
特定の径をもつ粒子状物質を所定量添加し、特定の粒子
状物質の径と事実上等しく波長を調整した励起光を上記
試料に照射することにより、未反応の特定の径をもつ粒
子状物質の存在量を検出し、特定の径をもつ粒子状物質
の添加量と未反応の特定の径をもつ粒子状物質の存在量
との差がら試料中の検出目的物質の濃度を検出すること
により達成することができる。
特定の径をもつ粒子状物質を所定量添加し、特定の粒子
状物質の径と事実上等しく波長を調整した励起光を上記
試料に照射することにより、未反応の特定の径をもつ粒
子状物質の存在量を検出し、特定の径をもつ粒子状物質
の添加量と未反応の特定の径をもつ粒子状物質の存在量
との差がら試料中の検出目的物質の濃度を検出すること
により達成することができる。
以下に本発明の詳細な説明する。
第1図に、本発明による抗原抗体未反応粒子定量装置の
基本構成の一例を示す。レーザなどの光源1からの励起
光9はセル4に入射する。セル6内の液体試料に含まれ
る粒子状物質は、励起光を吸収し、光音響信号を発生す
る。発生した光音響信号は、セルに取り付けられた圧電
素子などの検出器により検出される。検出された光音響
信号12は、光チョッパなどの強度変調器2からの信号
を参照信号11とし、ロックインアンプ7により増幅さ
れる。このような光音響装置で測定された光音響信号の
強度は、試料に含まれる粒子状物質の量(濃度)に比例
する。従って、光音響信号の強度による粒子状物質の検
量線を得ることができる。
基本構成の一例を示す。レーザなどの光源1からの励起
光9はセル4に入射する。セル6内の液体試料に含まれ
る粒子状物質は、励起光を吸収し、光音響信号を発生す
る。発生した光音響信号は、セルに取り付けられた圧電
素子などの検出器により検出される。検出された光音響
信号12は、光チョッパなどの強度変調器2からの信号
を参照信号11とし、ロックインアンプ7により増幅さ
れる。このような光音響装置で測定された光音響信号の
強度は、試料に含まれる粒子状物質の量(濃度)に比例
する。従って、光音響信号の強度による粒子状物質の検
量線を得ることができる。
次に、第2図に、光音響分析装置の感度、即ち、検量線
の傾きの粒径依存性を示す。第2図の測定結果は、ポリ
スチレン粒子について測定したものであり、励起光の強
度1.8W、波長488nm、変調周波数181 Hz
による測定である。第2図に示すように、粒子の大きさ
が、励起光の波長488nm (約0.5μm)に一致
すると、光音響分光装置の感度が共鳴的に増大する。こ
の効果により、第1図の励起光9の波長と一致する粒径
の粒子状物質を試料に添加することにより、この粒子を
選択的に検出・定量することができる。特に、添加粒子
が試料中の分析目的物質と抗原抗体反応による凝集で粒
径が変化すると、この光音響分光装置では検出されなく
なるので、粒子の添加3 量と未反応粒子の存在量の差から分析目的物質を選択的
、かつ、高感度に測定することができる。
の傾きの粒径依存性を示す。第2図の測定結果は、ポリ
スチレン粒子について測定したものであり、励起光の強
度1.8W、波長488nm、変調周波数181 Hz
による測定である。第2図に示すように、粒子の大きさ
が、励起光の波長488nm (約0.5μm)に一致
すると、光音響分光装置の感度が共鳴的に増大する。こ
の効果により、第1図の励起光9の波長と一致する粒径
の粒子状物質を試料に添加することにより、この粒子を
選択的に検出・定量することができる。特に、添加粒子
が試料中の分析目的物質と抗原抗体反応による凝集で粒
径が変化すると、この光音響分光装置では検出されなく
なるので、粒子の添加3 量と未反応粒子の存在量の差から分析目的物質を選択的
、かつ、高感度に測定することができる。
以下、本発明の一実施例を第1図及び第3図により説明
する。
する。
本実施例の装置構成を第1図に示す。光源lはArレー
ザで、488nmのレーザ光9を発振する。レーザ光9
は回転ブレード式の光強度変調器2、即ち、光チョッパ
により、変調周波数181Hzの矩形波に強度変調され
、励起光10となる。
ザで、488nmのレーザ光9を発振する。レーザ光9
は回転ブレード式の光強度変調器2、即ち、光チョッパ
により、変調周波数181Hzの矩形波に強度変調され
、励起光10となる。
励起光10はセル4に入射する。セル4は円筒状の光音
響セルで、ガラス円筒の中心部に同一内径の円筒状圧電
素子を組み込み、これを光音響信号の検出器とする。励
起光は円筒の中心軸に沿って入射する。セル4の内部に
液体試料を充填し、励起光10を入射した時に発生する
光音響信号は圧電素子によって電気信号に変換される。
響セルで、ガラス円筒の中心部に同一内径の円筒状圧電
素子を組み込み、これを光音響信号の検出器とする。励
起光は円筒の中心軸に沿って入射する。セル4の内部に
液体試料を充填し、励起光10を入射した時に発生する
光音響信号は圧電素子によって電気信号に変換される。
この電気信号に変換された光音響信号12はロックイン
アンプ7に入力する。ロックインアンプ7では、光強度
検出器2の変調に同期した信号11を参照信4− 号として、検出した光音響信号12から励起光10に対
応する光音響信号のみを抽出し、光音響信号強度14を
記録計8に入力する。
アンプ7に入力する。ロックインアンプ7では、光強度
検出器2の変調に同期した信号11を参照信4− 号として、検出した光音響信号12から励起光10に対
応する光音響信号のみを抽出し、光音響信号強度14を
記録計8に入力する。
以下、本発明を免疫分析に応用した実施例について説明
する。上述の装置を用いてα−フェトプロティン(以下
AFPと略す)を測定する。
する。上述の装置を用いてα−フェトプロティン(以下
AFPと略す)を測定する。
(1)AFP測定用試料の調整
抗ヒトAFP抗体の0.1M グリシン緩衝液(pH6
,5)10m+2に粒径0.5μm の白色ポリスチレ
ンラテックス(固形分濃度10%)1mQを加えて室温
で三時間撹拌したのち、2〜4℃の冷却下で40分間、
1200Orpmで遠心分離した。得られた沈殿を、0
.5%牛血清アルブミン、0.1MNaCQ、2mMM
gCf1zを含む10mMリン酸緩衝液(pH6,5)
に懸濁させて、感作ラテツクス粒子濃度が1%の抗AF
P抗体感作ラテックス試薬を調整した。
,5)10m+2に粒径0.5μm の白色ポリスチレ
ンラテックス(固形分濃度10%)1mQを加えて室温
で三時間撹拌したのち、2〜4℃の冷却下で40分間、
1200Orpmで遠心分離した。得られた沈殿を、0
.5%牛血清アルブミン、0.1MNaCQ、2mMM
gCf1zを含む10mMリン酸緩衝液(pH6,5)
に懸濁させて、感作ラテツクス粒子濃度が1%の抗AF
P抗体感作ラテックス試薬を調整した。
(2)試料の測定
試料溶液であるヒトAFPを添加した牛血清アルブミン
溶液10μ悲ら(1)で調整した抗ヒトAFP抗体感作
ラテックス試薬50μ氾。
溶液10μ悲ら(1)で調整した抗ヒトAFP抗体感作
ラテックス試薬50μ氾。
10mMリン酸緩衝溶液(pH6,5)200μ氾を加
えて、37℃、10分間抗抗原体反応させた。この反応
液を光音響セルに充填し、光音響信号を測定した。
えて、37℃、10分間抗抗原体反応させた。この反応
液を光音響セルに充填し、光音響信号を測定した。
本発明によれば、試料中の検出目的物質と添加する特定
の径をもつ粒子状添加物質の凝集反応生成物の粒径に無
関係に検出目的物質を定量できるので、以下の効果があ
る。すなわち、 (1)、凝集反応生成物の粒径が一定でない場合でも、
検出目的物質を正確に定量できる。
の径をもつ粒子状添加物質の凝集反応生成物の粒径に無
関係に検出目的物質を定量できるので、以下の効果があ
る。すなわち、 (1)、凝集反応生成物の粒径が一定でない場合でも、
検出目的物質を正確に定量できる。
(2)、試料に添加する粒子状物質の径を励起光に一致
させることにより、励起光の波長掃引機構が不要となる
。
させることにより、励起光の波長掃引機構が不要となる
。
第1図は本発明の一実施例のブロック図、第2図は感度
の粒径依存性を示す特性図、第3図は第1図の装置を用
いたアルファフェトプロティンの検量線を示す特性図で
ある。 1・・光源、2・強度変調器、3・・ハーフミラ−4・
・セル、5 ・ビームストッパ、6・・光強度モニタ、
7・・ロックインアップ、8・・・記録計、9 ・レー
ザ光、10・・・励起光、]1・・参照信号、12・・
光音響信号、↓3 モニタ信号、14・・信号強度。
の粒径依存性を示す特性図、第3図は第1図の装置を用
いたアルファフェトプロティンの検量線を示す特性図で
ある。 1・・光源、2・強度変調器、3・・ハーフミラ−4・
・セル、5 ・ビームストッパ、6・・光強度モニタ、
7・・ロックインアップ、8・・・記録計、9 ・レー
ザ光、10・・・励起光、]1・・参照信号、12・・
光音響信号、↓3 モニタ信号、14・・信号強度。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1、励起光を試料中の粒子状物質に照射して前記励起光
の波長と等しい径をもつ前記粒子状物質の濃度を求める
方法において、 前記試料に前記試料の一部の成分と凝集反応を起こす特
定の径の粒子状物質を所定量添加し、前記特定の径をも
つ粒子状物質の径と事実上等しく波長を調整した光を前
記試料に照射することにより、未反応の前記特定の径を
もつ粒子状物質の存在量を検出し、前記特定の径をもつ
粒子状物質の添加量と前記未反応の特定の径をもつ粒子
状物質の存在量との差から、前記試料の一部の成分と凝
集した特定の径をもつ粒子状物質の量を検出する光音響
分析方法。 2、請求項1において、 前記凝集した特定の径をもつ粒子状物質の量から、前記
試料の一部の成分の濃度を求める光音響分析方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP1180354A JPH0346540A (ja) | 1989-07-14 | 1989-07-14 | 粒子状物質の検出方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP1180354A JPH0346540A (ja) | 1989-07-14 | 1989-07-14 | 粒子状物質の検出方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH0346540A true JPH0346540A (ja) | 1991-02-27 |
Family
ID=16081773
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP1180354A Pending JPH0346540A (ja) | 1989-07-14 | 1989-07-14 | 粒子状物質の検出方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH0346540A (ja) |
-
1989
- 1989-07-14 JP JP1180354A patent/JPH0346540A/ja active Pending
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4725140A (en) | Method of measuring specific binding reaction with the aid of polarized light beam and magnetic field | |
Zhao et al. | Nanoparticle-based photoacoustic analysis for highly sensitive lateral flow assays | |
JPS5990053A (ja) | 抗原−抗体反応 | |
US4115699A (en) | Apparatus for sensitive detection and quantitative analysis of biological and biochemical substances | |
EP0256474B1 (en) | Method and apparatus for detecting particular particulate substance | |
US4799796A (en) | Method and apparatus for measuring immunological reaction with the aid of phase-modulation of light | |
JPS62291547A (ja) | 物質の濃度測定方法 | |
JPH0743381B2 (ja) | 光音響免疫分析方法及び装置 | |
JPH0346540A (ja) | 粒子状物質の検出方法 | |
JPS62116263A (ja) | 直線偏光の多重散乱を用いる免疫反応の測定方法および装置 | |
JPS6259841A (ja) | 直線偏光を用いる免疫反応の測定方法および装置 | |
JPH0233097B2 (ja) | ||
JPH09251004A (ja) | 光音響分析方法およびその装置 | |
CN116930485B (zh) | 一种基于免疫生物反应的痕量污染物红外信号增强及原位快速检测方法及检测系统 | |
JPH0514219B2 (ja) | ||
GB1600069A (en) | Method for the measurement of antigens and antibodies | |
JPH03110447A (ja) | 光音響を用いた粒子の測定方法、装置及びこれを利用した免疫測定方法 | |
JPS61173138A (ja) | 光強度ゆらぎによる免疫反応測定方法 | |
JPH02275361A (ja) | 免疫反応の測定方法 | |
JPH01214761A (ja) | 光音響分光法による免疫分析方法 | |
JPS6165144A (ja) | 光強度ゆらぎを用いる免疫反応測定装置 | |
JPH06100600B2 (ja) | 免疫分析方法 | |
JPH01187459A (ja) | 免疫分析方法 | |
US8529837B2 (en) | System and method for detecting specific binding reactions using magnetic labels | |
JPH0478138B2 (ja) |