JPH03292895A - イソマルトオリゴ糖含有シラップおよびイソマルトオリゴ糖の製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 「産業上の利用分野」 本発明は、甘味料並びに健康食品として用いられるイソ
マルトオリゴ糖含有シラップおよびイソマルトオリゴ糖
の製造方法に関する。

［従来の技術Ｊ 近年、イソマルトースやパノースなどの分岐オリゴ糖が
難消化性で、しかも抗う触性を有する非発酵性糖質とし
て、また、ヒト腸内有用細菌であるビフィズス菌の増殖
因子として注目を集めている。また、α−１，６−グル
コシド結合のみから構成されるグルコ３糖であるイソマ
ルトトリオースも、抗う触性甘味料、ヒト腸内のビフィ
ズス菌増補因子、あるいは研究用試薬、また、保温性が
極めて高いので有効な保温剤などとしての用途が期待で
き、その効率的な製造方法の開発が望まれている。

従来、分岐オリゴ糖の製造方法としては、例えばイソマ
ルトースの場合、マルトースまたはマルトースシラップ
などを原料として、アスペルギルス・＝　ｉ　−（組匣
Ｉ上」曲直）などのカビ起源のトランスグルコシラーゼ
（α−グルコシダーゼ）を作用させる方法［Ｊ、Ｈ，Ｐ
ａｚｕｒ　ａｎｄ　Ｔ、Ａｎｄｏ。

Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｉｎ　Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ　Ｃ
ｈｅｍｉｓｔｒｙ、　Ｖｏｌ、　　Ｉ　。

３１９　（１９６２）　、　　特開昭６１−２１９３４
５号参照］、あるいは、５０％以上の高濃度グルコース
溶液にグルコアミラーゼを作用させて調製する方法（特
開昭６１−１２４３８９号、特開昭６１−２１９３９２
号参照）などが採用されている。

「発明が解決しようとする課題」 しかしながら、これらの方法で生成される分岐オリゴ糖
は、ａ−１，６−グルコシド結合からなるイソマルトー
スおよびａ−１，４−グルコシド結合と（１２−１，６
−グルコシド結合からなるパノースなどが主成分であり
、α−１，６−グルコシド結合のみがら構成されるイソ
マルトオリゴ糖だけを生成させることは、不可能であっ
た。

また、α−１，６−グルコシド結合を多く含むグルコー
スポリマーであるアミロペクチン、グリコーゲン、プル
ランまたはデキストランなどを原料として、酵素または
酸を用いる加水分解後、各種の分画技術、例えばゲル濾
過クロマトグラフィーカチオン交換樹脂クロマトグラフ
ィーおよびカーボンカラムクロマトグラフィーなどを適
用して調製する方法も知られている。

しかしながら、上記の方法で得られるａ−１，６グルコ
シド結合のみからなるイソマルトオリゴ糖の収率は非常
に低く、がっ生産コストも高いという問題点があった。

したがって、本発明の目的は、イソマルトオリゴ糖を高
純度かつ高収率で製造できるようにしたイソマルトオリ
ゴ糖含有シラップおよびイソマルトオリゴ糖の製造方法
を提供することにある。

［課題を解決する手段」 上記目的を達成するため、本発明のイソマルトオリゴ糖
含有シラップの製造方法は、デキストランを酸処理して
デキストラン分子中のα−１，６−グルコシド以外の結
合を選択的に分解する工程と、この酸処理したデキスト
ラン溶液に、エンドデキストラナーゼまたは担体に固定
化したエンドデキストラナーゼを作用させて酵素反応を
行う工程とを含むことを特徴とする。

この場合、上記生成糖は、グルコース、イソマルトース
、イソマルトトリオースおよび高級イソマルトデキトリ
ンからなり、糖組成中におけるイソマルトオリゴ糖の含
有量が７０％ｆｗ／ｗ）以上であることが好ましい。

また、本発明のイソマルトオリゴ糖の製造方法は、デキ
ストランを酸処理してデキストラン分子中のα−１，６
−グルコシド以外の結合を選択的に分解する工程と、こ
の酸処理したデキストラン溶液に、エンドデキストラナ
ーゼまたは担体に固定化したエンドデキストラナーゼを
作用させて酵素反応を行う工程と、この酵素糖化液を分
画用カラムまたは分画用膜に通過させる工程とを含むこ
とを特徴とする。

以下、本発明について詳細に説明する。

本発明において、原料として用いられるデキストランは
、グルコースが主にａ−１，６−グルコシド結合で連結
した多糖であるが、その分子中にはσ−１，２−，ａ−
１，３−およびａ−１，４−グルコシド結合も一部存在
することが明らかにされている［Ｒ，Ｌ。

Ｓｉｄｅｂｏｔｈａｍ、　Ａｄｖ、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ
、Ｃｈｅｍ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、、　３０゜３７１＋１９
７４１　？照］。したがって、デキストラン分子にデキ
ストラナーゼを直接作用させた場合には、ａ−１，６−
グルコシド結合以外の結合箇所で反応が停止し、せいぜ
い３０％程度の分解率しが得られない。

すなわち、第１図には、０．２５％濃度および２．０％
濃度の各デキストラン溶液に、糸状菌フザリウム（Ｆｕ
ｓａｒｉｕｍｌ属起源の新規エンドデキストラナーゼ（
特願平１−２２４２６２号参照）を直接作用させた場合
における、反応時間と分解率との関係が示されている。

図中、Ａは０．２５％濃度のデキストラン溶液を用いた
場合の結果であり、Ｂは２０％濃度のデキストラン溶液
を用いた場合の結果である。このように、デキストラン
にエンドデキストラナーゼを直接作用させた場合には、
その分解率がほぼ３０％付近で停止することがわかる。

そこで、本発明者らは、鋭意検討した結果、先ず、デキ
ストラン分子中のα−１，６−グルコシド以外の結合、
すなわちα−１，２−、α−１，３−およびα−１，４
−グルコシド結合を酸処理により選択的に分解した後に
、例えば上記の糸状菌フザリウムｉＦｕｓａｒｉｕｍｌ
属起源の新規エンドデキストラナーゼを作用させること
により、グルコース、イソマルトース、イソマルトトリ
オースおよび高級イソマルトデキトリンからなり、糖組
成中におけるイソマルトオリゴ糖の含有量が７０％ｆｗ
／ｗ）以上である酵素糖化液が得られることを見いだし
た。また、この酵素糖化液を分画用カラムまたは分画用
膜を通過させ、それぞれのイソマルトオリゴ糖画分を集
めることにより、イソマルトオリゴ糖を高収率で生産で
きることを見いだした０本発明は、これらの事実に基づ
いてなされたものである。

本発明の原料であるデキストランは、例えば［デキスト
ランＴ２Ｏ００Ｊ　　（商品名、ファルマシア／　ＬＫ
Ｂ社製）などの市販品を使用することができる。また、
デキストラン生合成菌であるロイコノストック・メツセ
ンチロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ＋＋＋ｅｓｅｎ
ｔｅｒｏｉｄｅｓ　）などを用いて、下記文献記載の方
法により、スクロースを炭素源として、培養することに
より調製することも可能である［Ｅ、Ｊ。

Ｈｅｈｒｅ、　５ｃｉｅｎｃｅ、　９３．２３７　（１
９４１）、　　Ｅ、Ｊ、Ｈｅｈｒｅａｎｄ　Ｊ、Ｙ、Ｓ
ｕｇｇ、　Ｊ、Ｅｘｐｔｌ、ｍｅｄ、、　７５．３３９
　（１９４２１゜Ａ、Ｊｅａｎｅｓ　ｅｔ　ａｌ、、　
Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、、　１７６、６０３Ｔ１９４
８１参照］。

本発明においては、デキストランを酸処理してデキスト
ラン分子中の（２−１，６−グルコシド以外の結合を選
択的に分解する。この場合、酸としては塩酸、硫酸など
各種のものが使用できる。また、酸の濃度は０．０４〜
０．５Ｎが好ましく、さらには０．０５〜０．３Ｎが好
ましい。処理温度は、９０〜ｉｏ。

℃が好ましく、９５〜１００℃がより好ましい。さらに
処理時間は、１〜１０時間程度が好ましく、２〜７時間
がより好ましい。したがって、酸処理は、所定の規定濃
度の酸に一定濃度にデキストランを溶解し、上記のよう
な条件下で処理することにより行なうことができる。な
お、各種のα−グルコビオースを０．ＩＮ塩酸を用いて
、９９．５士０．１°Ｃで処理した場合、それぞれの結
合様式の酸分解における速度を、擬−次反応の速度定数
にで比較すると、ａ　−１，２−、ａ−１，３−および
ａ−１，４−グルコシド結合が、ａ−１，６−グルコシ
ド結合に先立って選択的に分解される［Ｍ、Ｌ、Ｗｏｌ
ｆｒｏｍ　ｅｔ　ａｌ、、　ＣｅｒｅａｌＣｈｅＩｌｌ
、、　４０．８２　ｆ１９６３）、千葉ら、澱粉科学、
２５゜１０５　ｆ１９７８１参照］。

次に、上記のようにして酸処理したデキストラン溶液を
アルカリで中和した後、エンドデキストラナーゼ　（１
，６−ａ　−Ｄ−Ｇｌｕｃａｎ　６−ｇｌｕｃａｎｏ−
ｈｙｄｒｏｌａｓｅ、　ＥＣ３，２，１，１１］　によ
る酵素反応を行う。

本発明で使用するエンドデキストラナーゼは、デキスト
ランを加水分解し、主としてイソマルトトリオースを生
成する酵素で１例えば糸状菌フザリウム（Ｆｕｓａｒｉ
ｕｍｌ属に属するエンドデキストラナーゼ生産菌または
その突然変異株を培養培地に接種し、所定の培養条件下
で培養後、当該培養物から採取することができる。かか
るエンドデキストラナーゼ生産菌としては、例えばＦｕ
ｓａｒｉｕｍ　ｓｐ。

株（特願平１−２２４２６２号参照）が好ましく採用さ
れる。この菌株は、工業技術院微生物工業技術研究所に
、微工研菌寄第１０９７６号（ＦＥＲＭ　Ｐ−１０９７
６＋として寄託されている。

本菌株を用いたエンドデキストラナーゼの製造は、例え
ば次のようにして行うことができる。まず、１．０％デ
キストラン（８糖７０）　、　０．３％ポリペプトン、
０３％イーストエクストラクト、　０．２％ＮＨ４ＮＯ
３，０，０５％Ｍｇ５０４４Ｈ２０，０，０４％ＣａＣ
ｌ２・２Ｈ２０，０，１％に８２Ｐ０４からなる培養借
地（ｐＨ５，５１３１２を、５Ｉ２のジャーファメンタ
ーに仕込み、糸状菌Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｓｐ　　の前培
養液（２５℃、３日間培養）　Ｉ００＋＋１を添加して
、１．ｌｖｖｍ、　１１０ｒｐｍにて２５℃、５日間培
養する。培養後、培養液を高速冷却連続遠心分離にかけ
て菌体を除去し、無細胞上演液を得る０本上清液を限外
濾過膜で約２０倍に濃縮して、粗酵素液として用いるこ
とができる。

なお、デキストランを加水分解して、主としてイソマル
トトリオースを生成するデキストラナーゼ生産菌として
は、前記したフザリウム（ＦｕｓａｒｉｕｍＪ属以外に
、アスペルギルス・カルネウス（知且肛担１堕ｓ　ｃａ
ｒｎｅｕｓｌ　［Ｄ、Ｔｓｕｒｕ　ｅｔ旦１．Ｊ。

Ｂｉｏｃｈｅｍ、、　７１．６５３　ｆ１９７２１］　
、ブレビバクテリウム°フスクム（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍ　ｆｕｓｃｕｍ　ｖａｒ。

ｄｅｘｔｒａｎｌｙｔｉｃｕ＋ｗｌ　［Ｍ、Ｓｕｇｉｕ
ｒａ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｂｉｏｃｈｅｍ。

Ｂｉｏｐｈｙｓ、　Ａｃｔａ、　３５０．６Ｎ１９７４
１］　、フラボバクテリウム属（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅ
ｒｉｕｍ　ｓｐ、ｌ　　［Ｍ、Ｋｏｂａｙａｓｉ　ｅｔ
ａｌ、、　Ａｇｒｉｃ、　Ｂｉｏｌ、ｆ：ｈｅｍ、、　
４７．２５８５（１９８３１１などが知られており、本
発明の場合、いずれの起源の酵素でも有効に使用するこ
とができる。

フザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍｌ属起源の新規エンドデ
キストラナーゼ（特願平１−２２４１６１号）の反応条
件について述べると、反応液のｐｎは、好ましくは５．
０〜８．０、より好ましくは６．０〜７．０がよい。

また、反応温度は、好ましくは２５〜４５℃、より好ま
しくは３０〜４０℃がよい、また、基質であるデキスト
ランに対するエンドデキストラナーゼの添加量は、基質
ＩＢ当り、好ましくは０．０４単位以上、より好ましく
は０．４単位以上とする。なお、本発明において、酵素
力価を示す１単位とは、最終濃度０．２５％の［デキス
トランＴ２Ｏ００Ｊを基質とし、３０℃、ｐＨ６，４で
酵素反応を行い、１分間に１μｍｏｌのグルコースに相
当する還元力を生成する酵素量を示すものとする。

また、基質として用いるデキストラン溶液の濃度は一般
に、０．１〜４．０％が好ましく、より好ましくは０．
２５〜２．５％が有効である。反応時間は、上記の条件
下で通常３〜２４時間である。

また、酵素反応は、デキストラン溶液に酵素液を添加し
て回分式で行ってもよいが、特定の担体に固定したエン
ドデキストラナーゼにデキストラン溶液を通液して連続
式で行うこともできる。エンドデキストラナーゼを固定
化する担体としては、例えば［タイヤイオンＨＰ−５０
Ｊ　　（商品名、三菱化成工業）や「デュオライトＳ−
７６１Ｊ　　（商品名、ダイヤモンドジャムロック社製
）や、キトサンビーズ（商品名［キトパール　ＢＣＩＩ
　　３００５゜３００６゜３００７．３５０５．３５０
７Ｊ　、富士紡績製）などの市販の吸着樹脂を用いるこ
とができる。

このようにして得られた反応液中には、通常、イソマル
トトリオースを主体とし、その他イソマルトースなどの
α−１，６−グルコシド結合のみからなるイソマルトオ
リゴ糖が７０％（ｗ／ｍ１以上含まれており、それ以外
はグルコースと高級イソマルトデキストリンとからなっ
ている。また、イソマルトトリオースは、通常、５０％
ｆｗ／ｗ１以上含有されている。なお、ここで高級イソ
マルトデキストリンとは、グルコースの重合度４以上の
イソマルトデキストリンを意味する。

この糖液は、例えば活性炭による脱色およびイオン交換
樹脂による脱イオンを行って、そのままシラップとして
、また、還元処理して糖アルコルとして使用することが
できる。

さらに、必要により、ゲル濾過クロマトグラフィー、カ
ーボンカラムクロマトグラフィー、カチオン交換樹脂カ
ラムクロマトグラフィーを用いたり、または、膜分画法
や晶析法などを用いることにより、高純度のイソマルト
オリゴ糖を容易に調製することができる。

「実施例」 実施例１ 市販デキストラン「デキストランＴ２Ｏ００Ｊ　　（商
品名、ファルマシア／　ＬＫＢ社製）２０ｇを０．２Ｎ
塩酸３２０ｍβに溶解した後、沸騰水浴中（１００℃）
で４時間処理し、デキストランの加水分解を行った。次
いで、２Ｍ水酸化ナトリウムを用いて中和後、蒸留水を
加えて全量を４００ｍβとし、５％ＦＷ／Ｖｌ　溶液を
調製して基質溶液とした。

次いで、上記基質溶液１５０ｍβに、等量の２５　ｍＭ
Ｍｃｌｌｖａｉｎｅ緩衝液（ｐＨ６，４１に溶解した前
記糸状菌Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｓｐ、起源の新規エンドデ
キストラナーゼ溶液（特願平１−２２４１．６１号記載
の酵素）３００単位を添加し、３５℃で２０．４０分間
、１．３．６．２０時間、それぞれ反応を行った１反応
液中の生成糖組成の経時的な変化を、高速液体クロマト
グラフィーにより分析した結果を第２図に示す。

第２図から明らかなように、本実験条件下では、所要の
イソマルトオリゴ糖生成に要する反応時間は３時間で十
分であり、反応３時間内に生成された糖組成を第１表に
示す。

なお、高速液体クロマトグラフィーの条件は、以下の如
くである。

カラム：４ｍ１ｎｅｘ　ＨＰＸ−４２Ａ（７，８ｍｍ　
　ｘ　３００ｍｍ１移動相：脱イオン水 流　速：　０．６ｍｆｆ　／ｍｉｍ ミロカラム　３０　ｋｇ／ｃｍ” カラム温度ニア０℃ 検出器：示差屈折計（■島津製作所製、商品名ｒＲＩＤ
−６ＡＪ　） 分岐生成糖は、デキストランの酸による部分加水分解物
を標準物質として、ベーパークロマトグラフィーおよび
高速液体クロマトグラフィーにより構造確認を行ったと
ころ、すべてα・１．６−グルコシド結合からなるイソ
マルトオリゴ糖であった。

実施例２ 実施例１で用いた基質溶液１５０ＩＩＩβに、等量の２
５１１！！　Ｍｃｌｌｖａｉｎｅ緩衝液（ｐＨ６，４１
に溶解した、前記糸状菌Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｓｐ、起源
の新規エンドデキストラナーゼ溶液３０単位を添加し、
３５℃で２４時間反応を行った。反応終了後の反応液中
の生成糖組成を実施例１と同様の方法で分析した。得ら
れた結果を第１表に示す。

実施例３ 実施例１で得られた反応液（２５０ｎＩｐ！、）を活性
炭で脱色後、イオン交換樹脂で脱イオンした。さらに、
ロータリーエバポレーターにより濃度６０％ＦＷ／Ｖｌ
　にまで濃縮した。次いで、ジャケット付きカラム（２
，Ｏｘ　　１２０ｃｍ）にカチオン交換樹脂ｒＤｏｗｅ
ｘ　９９Ｊ　　（Ｎａ”型、ダウケミカル社製）を充填
した後、樹脂量当り５．９％（ｗ／ｖｌの固形分量を負
荷し、温度７５℃、空間速度（ＳＶ、　５ｐａｃｅＶｅ
ｌｏｃｉｔｙｌＯ，３４ｈｒ”の条件下で分画し、それ
ぞれの２イソマルトオリゴ糖画分を集めた。その際の生
成糖組成を第１表に示す。

実施例４ 固定化用担体として［キトバールＢ（Ｊ　３５０５Ｊ（
商品名、富士紡績■製）を用い、２５ｍＭＭｃｌｌｖａ
ｉｎｅ緩衝液（ｐＨ６，４）で充分に平衡化した後、担
体１ｇｆ湿重量）当り、前記糸状菌Ｆｕｓａｒｉｕｍ　
ｓｐ、起源の新規エンドデキストラナーゼ（特願平１−
２２４１６１号）を同上緩衝液に溶解して１０００単位
添加し、室温で１時間往復振盪（１２０ストロ一ク／分
、３　ｃｍ幅）して、担体に酵素を吸着させた。その後
、濾紙で濾過し、得られた固定化酵素を上記緩衝液でタ
ンパク質が溶出しなくなるまで洗浄した。

こうして得られた固定化酵素１０ｍβをガラスカラム（
１，５Ｘ　　１０　ｃｒｎ　　ｌ　に充填した、次に、
実施例１の場合と全く同一条件下で調製した基質溶液に
、防腐剤としてアジ化ソーダを、ロー０２％濃度になる
よう添加した。この基質溶液を上記カラムに温度４５℃
、空間速度０．２〜０．３ｈｒ−’の条件下で連続通液
した。７日間にわたる連続通液後の反応液の糖組成を第
１表に示す。また、４０日間連続通液し、固定化酵素の
半減期を計算した結果、約４０日であった。

第１表　　糖組成　　［％（ｗ／ｗｌ　］上記第１表の
結果から、イソマルトースおよびイソマルトトリオース
を合わせた量が糖組成中の７０％（ｗ／ｗｌ　Ｊｄ上で
あり、イソマルトトリオースの量は５０％ｆｗ／ｗ１以
上であることがわかる。

実施例５ 実施例１で調製した基質溶液７０　ｍｊ２に等量の２５
ｍＭ　Ｍｃｌｌｖａｉｎｅ緩衝液（ｐＨ６，４１に溶解
した前記Ｆｕｓａｒｉｕａ＋　ｓｐ、起源の新規エンド
デキストラナーゼ溶液１４０単位を添加し、３５℃で２
４時間反応を行った０反応終了後、反応液を１００℃、
　１０分間加熱処理して、酵素反応を停止した。

上記処理液を水冷後、高速冷却遠心分離（１５００Ｘｇ
、２０分間）にかけて不溶性物質を除去し、さらにグラ
スフィルター（Ｇ３）を通過させることにより、透明な
生成糖溶液を調製した。次いで、全試料溶液（約１４０
ｍりをカーボン−セライトカラム（５，ＯＸ　　５０　
ｃａ＋　）にのせ、エチルアルコールの濃度を段階的に
上昇させ、■溶出分画を５（ｌ　ｍβとして、各イソマ
ルトオリゴ糖を分画精製した。

それぞれの分画中に含まれる全糖をフェノール硫酸法［
Ｍ、Ｄｕｂｏｉｓ　ｅｔ　ａｌ、、　Ａｎａｌ、にｈｅ
ｍ、、　２８．３５０（１９５６）ｌ照］を用いて、グ
ルコース換算として定量した結果を第３図に示す。図中
、−・−はイソマルトトリオース、−■−はイソマルト
ース。

−口−はグルコース、−〇−は高級イソマルトデキスト
リンのそれぞれの生成率を表わす。

また、この実験の結果、イソマルトース（５％　ＥｔＯ
Ｈで溶出される画分）およびイソマルトトリオース（１
０％　ＥｔＯＨで溶出される画分）を、それぞれ３８０
ａ＋ｇおよび］、６００ｍｇの収量で得た。そして１両
イソマルトオリゴ糖のカーボン−セライトカラム法によ
る回収率は、いずれも９５％以上であった。

「発明の効果」 以上説明したように、本発明によれば、デキストランを
酸処理してデキストラン分子中のａ−１，６−グルコシ
ド以外の結合を選択的に分解し、この酸処理したデキス
トラン溶液に、エンドデキストラナーゼまたは指体に固
定化したエンドデキストラナーゼを作用させて酵素反応
を行うことにより、イソマルトトリオースを主体とし、
その化イソマルトースなどのα−１，６−グルコシド結
合のみからなるイソマルトオリゴ糖が７０％（Ｗ／ｍ１
以上含まれており、それ以外はグルコースと高級イソマ
ルトデキストリンとからなるイソマルトオリゴ糖含有シ
ラップを高収率で生産することができる。また、上記の
酵素糖化液を分画用カラムまたは分画用膜に通過させて
、それぞれのイソマルトオリゴ糖両分を集めることによ
り、精製イソマルトオリゴ糖を高収率で得ることができ
る。

【図面の簡単な説明】

第１図は、０．２５％および２．０％デキストラン溶液
を基質としてＦｕｓａｒｉｕｍ　ｓｐ起源のエンドデキ
ストラナーゼを作用させた場合の分解率の経時変化を示
す図である。 第２図は、酸処理後の２．５％デキストラン溶液を基質
としてＦｕｓａｒｉｕｍ　ｓｐ、起源のエンドデキスト
ラナーゼを作用させた際に得られる生成糖組成の経時変
化を示す図である。 第３図は、本発明の実施例５で得られた酵素糖化液のカ
ーボンカラムクロマトグラフィーにおける溶出パターン
を示す図である。

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）デキストランを酸処理してデキストラン分子中の
   α−１，６−グルコシド以外の結合を選択的に分解する
   工程と、この酸処理したデキストラン溶液に、エンドデ
   キストラナーゼまたは担体に固定化したエンドデキスト
   ラナーゼを作用させて酵素反応を行う工程とを含むこと
   を特徴とするイソマルトオリゴ糖含有シラップの製造方
   法。
2. （２）特許請求の範囲第１項において、生成糖が、グル
   コース、イソマルトース、イソマルトトリオースおよび
   高級イソマルトデキトリンからなり、糖組成中における
   イソマルトオリゴ糖の含有量が７０％（ｗ／ｗ）以上で
   あるイソマルトオリゴ糖含有シラップの製造方法。
3. （３）デキストランを酸処理してデキストラン分子中の
   α−１，６−グルコシド以外の結合を選択的に分解する
   工程と、この酸処理したデキストラン溶液に、エンドデ
   キストラナーゼまたは担体に固定化したエンドデキスト
   ラナーゼを作用させて酵素反応を行う工程と、この酵素
   糖化液を分画用カラムまたは分画用膜に通過させる工程
   とを含むことを特徴とするイソマルトオリゴ糖の製造方
   法。