JPH03247286A - リゾープス属由来のフォスフォグリセリン酸キナーゼ遺伝子のプロモーター遺伝子 - Google Patents
リゾープス属由来のフォスフォグリセリン酸キナーゼ遺伝子のプロモーター遺伝子Info
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- JPH03247286A JPH03247286A JP4471590A JP4471590A JPH03247286A JP H03247286 A JPH03247286 A JP H03247286A JP 4471590 A JP4471590 A JP 4471590A JP 4471590 A JP4471590 A JP 4471590A JP H03247286 A JPH03247286 A JP H03247286A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、リゾープス属由来のフォスフォグリセリン酸
キナーゼ遺伝子のプロモーター遺伝子に関する。
キナーゼ遺伝子のプロモーター遺伝子に関する。
フォスフォグリセリン酸キナーゼは、１． ３ジフオス
フオグリセリン酸とＡＤＰから、３−フォスフォグリセ
リン酸とＡＴＰを生じる解糖系の酵素である。よって、
フォスフォグリセリン酸キナーセは、糖の資化に使用さ
れる最も重要な酵素である。従って、そのプロモーター
は、大量のタンパク質をリゾージス中で生産する可能性
のある強力なプロモーターであると考えられる。
フオグリセリン酸とＡＤＰから、３−フォスフォグリセ
リン酸とＡＴＰを生じる解糖系の酵素である。よって、
フォスフォグリセリン酸キナーセは、糖の資化に使用さ
れる最も重要な酵素である。従って、そのプロモーター
は、大量のタンパク質をリゾージス中で生産する可能性
のある強力なプロモーターであると考えられる。
酵素の人工的な製造は、細胞工学の技術を用いて、例え
ば大腸菌に酵素の遺伝子を組み込んだ、所謂形質転換体
を培養して行われるようになってきた。ところが、大腸
菌を用いて有核生物のタンパク質（例えば酵素）を製造
すると、寿られたタンパク質の２次構造が天然のものと
異なることがあるという問題がある。
ば大腸菌に酵素の遺伝子を組み込んだ、所謂形質転換体
を培養して行われるようになってきた。ところが、大腸
菌を用いて有核生物のタンパク質（例えば酵素）を製造
すると、寿られたタンパク質の２次構造が天然のものと
異なることがあるという問題がある。
そこで、有核生物であるカビの一種であるリゾープスを
宿主として用いた形質転換体を用いることが検討されて
いる。形質転換したりゾープスの産生ずるタンパク質は
、天然のものと、１次及び２次構造が同一である可能性
があるばかりでなく、リゾープスは、タンパク質を体外
へ分泌する力も強い。
宿主として用いた形質転換体を用いることが検討されて
いる。形質転換したりゾープスの産生ずるタンパク質は
、天然のものと、１次及び２次構造が同一である可能性
があるばかりでなく、リゾープスは、タンパク質を体外
へ分泌する力も強い。
以上のような観点から、本発明者らは、各種のタンパク
質や酵素をリゾープスを用いて製造することを検討して
いる。この際、目的のタンパク質や酵素の遺伝子の直前
に、強力なりゾープスのプロモーターを接続することが
、目的のタンパク質や酵素の大量生産のために必要であ
る。しかもリゾープスには、リゾープスのプロモーター
を使用しなくては、特異性を満足することができない。
質や酵素をリゾープスを用いて製造することを検討して
いる。この際、目的のタンパク質や酵素の遺伝子の直前
に、強力なりゾープスのプロモーターを接続することが
、目的のタンパク質や酵素の大量生産のために必要であ
る。しかもリゾープスには、リゾープスのプロモーター
を使用しなくては、特異性を満足することができない。
このフオスフォグリセリン酸キナーゼのプロモーターは
その可能性の強いものである。
その可能性の強いものである。
そこで本発明の目的は、リゾープスを用いて各種のタン
パク質や酵素を産生させるために必要なプロモーター遺
伝子を提供することにある。
パク質や酵素を産生させるために必要なプロモーター遺
伝子を提供することにある。
本発明は、リゾープス属由来のフォスフォグリセリン酸
キナーゼ遺伝子のプロモーター遺伝子であって、開始コ
ドン（Ａ Ｔ Ｇ）の上流５６塩基〜７６塩基の範囲内
にプロモーターとしてのコンセンサス配列を有するプロ
モーター遺伝子に関する。
キナーゼ遺伝子のプロモーター遺伝子であって、開始コ
ドン（Ａ Ｔ Ｇ）の上流５６塩基〜７６塩基の範囲内
にプロモーターとしてのコンセンサス配列を有するプロ
モーター遺伝子に関する。
以下本発明について説明する。
本発明のプロモーター遺伝子の例を、第１図及び第２図
に示す。尚、以下、本明細書中で、便宜上、第１図のプ
ロモーター遺伝子をＰＧＫＩとよび、第２図のプロモー
ター遺伝子をＰＧＫ２とよぶことがある。
に示す。尚、以下、本明細書中で、便宜上、第１図のプ
ロモーター遺伝子をＰＧＫＩとよび、第２図のプロモー
ター遺伝子をＰＧＫ２とよぶことがある。
本発明のプロモーター遺伝子は、例えば以下のようにし
て調製できる。
て調製できる。
リゾープス ニベウス（Ｒｈｉｚｏ ｕｓ ｎ１ｖｅｕ
ｓ） （ＩＦＯ４８１０）の細胞の全ＤＮＡを制限酵素
、例えば旧ｎｄｌｌＬ Ｂａｍ旧、Ｂｇｌｌｌ、Ｘｂａ
Ｉ、 ５ａｃｌまたは（ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）のフォ
スフォグリセリン酸キナーゼ（以下ＰＧＫと略記するこ
とがある）遺伝子をｐ３２ラベルしたものをプローブと
して用いて、ササーンハイブリッド法を行い、プローブ
とハイブリダイズする断片を確認する。次いで、Ｂａｍ
旧部位を利用してｐＢＲ３２２にＲ，ニベウス（ＩＦＯ
４８１０）のジェネリックライブラリーを作製する。こ
のジェネリックライブラリーはコロニーハイブリッド法
を用いて作る。そのライブラリーよりサザーンハイブリ
ッド法でポジティブであるクローンを解析して、上記サ
ザーンハイブリッド法で確認した断片を含むことを確認
する。
ｓ） （ＩＦＯ４８１０）の細胞の全ＤＮＡを制限酵素
、例えば旧ｎｄｌｌＬ Ｂａｍ旧、Ｂｇｌｌｌ、Ｘｂａ
Ｉ、 ５ａｃｌまたは（ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）のフォ
スフォグリセリン酸キナーゼ（以下ＰＧＫと略記するこ
とがある）遺伝子をｐ３２ラベルしたものをプローブと
して用いて、ササーンハイブリッド法を行い、プローブ
とハイブリダイズする断片を確認する。次いで、Ｂａｍ
旧部位を利用してｐＢＲ３２２にＲ，ニベウス（ＩＦＯ
４８１０）のジェネリックライブラリーを作製する。こ
のジェネリックライブラリーはコロニーハイブリッド法
を用いて作る。そのライブラリーよりサザーンハイブリ
ッド法でポジティブであるクローンを解析して、上記サ
ザーンハイブリッド法で確認した断片を含むことを確認
する。
もし、ポジティブなりローンがサザーンハイブリッド法
で得た断片を含まれていることが確認された場合には、
該当する箇所の電気泳動ゲルを切出し、大腸菌プラスミ
ドｐＵｃ１１９にサブジェネリッタライブラリーを作製
し、Ｓ、セレビシアエのＰＧＫ遺伝子をｐ３２ラベルし
たものをプローブとして用いて確認する。
で得た断片を含まれていることが確認された場合には、
該当する箇所の電気泳動ゲルを切出し、大腸菌プラスミ
ドｐＵｃ１１９にサブジェネリッタライブラリーを作製
し、Ｓ、セレビシアエのＰＧＫ遺伝子をｐ３２ラベルし
たものをプローブとして用いて確認する。
上記操作で不完全な断片しか得られない場合には、以下
の操作を行う。Ｒ，ニベウス（ＩＦＯ４８１０）の細胞
の全ＤＮＡを先に用いたとは別の制限酵素、例えば先に
旧ｎｄＩＩＩを用いた場合には、Ｂａｍ旧、Ｂｇｌｌｌ
、 Ｘｂａｌ、５ａｃｌ及びＰｓｔｌ等で消化したもの
を、不完全な断片をプローブとしてサザーンハイブリッ
ド法でハイブリダイズする断片を得る。
の操作を行う。Ｒ，ニベウス（ＩＦＯ４８１０）の細胞
の全ＤＮＡを先に用いたとは別の制限酵素、例えば先に
旧ｎｄＩＩＩを用いた場合には、Ｂａｍ旧、Ｂｇｌｌｌ
、 Ｘｂａｌ、５ａｃｌ及びＰｓｔｌ等で消化したもの
を、不完全な断片をプローブとしてサザーンハイブリッ
ド法でハイブリダイズする断片を得る。
次いで、ハイブリダイズする断片を与える制限酵素で消
化した上記トータルＤＮＡをサイズフラクショネーショ
ンに付して該当する断片の画分を得る。次いでこの画分
をλ２００１ （Ｘｂａｌ）にサブジエネリッタライブ
ラリーを作製し、上記不完全な断片をプローブとして用
いて、プラークハイブリッド法で確認する。この方法で
ポジティブであるクローンを解析して、上記ササーンハ
イブリッド法で得た不完全な断片を含む完全な断片を含
むことを確認する。
化した上記トータルＤＮＡをサイズフラクショネーショ
ンに付して該当する断片の画分を得る。次いでこの画分
をλ２００１ （Ｘｂａｌ）にサブジエネリッタライブ
ラリーを作製し、上記不完全な断片をプローブとして用
いて、プラークハイブリッド法で確認する。この方法で
ポジティブであるクローンを解析して、上記ササーンハ
イブリッド法で得た不完全な断片を含む完全な断片を含
むことを確認する。
本発明のプロモーター遺伝子は、開始コドン（ＡＴＧ）
の上流５６塩基〜７６塩基の範囲内にプロモーターとし
てのコンセンサス配列を有するものである。プロモータ
ーとしてのコンセンサス配列は、ＲＮＡ合成酵素が結合
する機能を有し、この下流の開始コドンにリポソームが
結合してＲＮＡへの翻訳が開始される。従って、上記塩
基範囲内にプロモーターとしてのコンセンサス配列を有
することにより、本発明のプロモーター遺伝子はプロモ
ーターとして機能する。プロモーターとしてのコンセン
サス配列としては、例えば、ＴＡＴＴ、ＴＡＴＡＸＡＴ
ＴＡ、ＡＴＡＡ又はＴＴＴＡを挙げることができる。
の上流５６塩基〜７６塩基の範囲内にプロモーターとし
てのコンセンサス配列を有するものである。プロモータ
ーとしてのコンセンサス配列は、ＲＮＡ合成酵素が結合
する機能を有し、この下流の開始コドンにリポソームが
結合してＲＮＡへの翻訳が開始される。従って、上記塩
基範囲内にプロモーターとしてのコンセンサス配列を有
することにより、本発明のプロモーター遺伝子はプロモ
ーターとして機能する。プロモーターとしてのコンセン
サス配列としては、例えば、ＴＡＴＴ、ＴＡＴＡＸＡＴ
ＴＡ、ＡＴＡＡ又はＴＴＴＡを挙げることができる。
第１図に示すＰＧＫＩの塩基配列の４９１〜４９７ｂｐ
にＴＡＴＴＴＡが、また第２図に示すＰＧＫ２の塩基配
列の２３４〜２３８ｂｐにＴＡＴＡＡが、それぞれプロ
モーターとしてのコンセンサス配列として存在する。
にＴＡＴＴＴＡが、また第２図に示すＰＧＫ２の塩基配
列の２３４〜２３８ｂｐにＴＡＴＡＡが、それぞれプロ
モーターとしてのコンセンサス配列として存在する。
さらに、本発明のプロモーター遺伝子は、プロモーター
としてのコンセンサス配列の上流８０塩基〜１２０塩基
の範囲内にＣＡＡＴ配列を有することが好ましい。上記
塩基範囲にＣＡＡＴ配列を有することにより、プロモー
タ一部位のＲＮＡ合成か強化されるからである。
としてのコンセンサス配列の上流８０塩基〜１２０塩基
の範囲内にＣＡＡＴ配列を有することが好ましい。上記
塩基範囲にＣＡＡＴ配列を有することにより、プロモー
タ一部位のＲＮＡ合成か強化されるからである。
第１図に示すＰＧＫＩは４３５〜４３８及び４４３〜４
４６ｂｐにＣＡＡＴ配列を有する。また第２図に示すＰ
ＧＫ２は１７３〜１７６ｂｐにＣＡＡＴ配列を有する。
４６ｂｐにＣＡＡＴ配列を有する。また第２図に示すＰ
ＧＫ２は１７３〜１７６ｂｐにＣＡＡＴ配列を有する。
さらに、本発明のプロモーター遺伝子は、ＣＡＡＴ配列
の上流に１つまたは２つ以上の上流活性部位があること
が好ましい。ＣＡＡＴ配列の上流に上流活性部位を有す
ることにより、タンパク質のＲＮＡ合成が強化されるか
らである。
の上流に１つまたは２つ以上の上流活性部位があること
が好ましい。ＣＡＡＴ配列の上流に上流活性部位を有す
ることにより、タンパク質のＲＮＡ合成が強化されるか
らである。
第１図に示すＰＧＫＩは２７９〜２９６．３１１〜３３
０，３８３〜３９９．４０４〜４４２ｂｐに上流活性部
位と考えられる部位を有する。また第２図に示すＰＧＫ
２は１〜１７．３２〜５０．１０７〜１２３．１３０〜
１４８ｂｐに上流活性部位と考えられる部位を有する。
０，３８３〜３９９．４０４〜４４２ｂｐに上流活性部
位と考えられる部位を有する。また第２図に示すＰＧＫ
２は１〜１７．３２〜５０．１０７〜１２３．１３０〜
１４８ｂｐに上流活性部位と考えられる部位を有する。
このようにして得られた本発明のプロモーター遺伝子は
、リゾープスに各種のタンパク質や酵素を産生させるた
めのプロモーター遺伝子として用いることができる。
、リゾープスに各種のタンパク質や酵素を産生させるた
めのプロモーター遺伝子として用いることができる。
以下本発明を実施例によりさらに説明する。
リゾープス ニベウス（Ｒｈｉｚｏｕ ｓ ｎ１ｖｅｕ
ｓ） （ＩＦ０４８１０）の細胞の全ＤＮＡを旧ｎｄｌ
ｌｌで消化したものを、Ｓ、セレビシアエ（ｃｅｒｅｖ
ｉｓｉａｅ）のフォスフォグリセリン酸キナーゼのプロ
モーター遺伝子をｐ３２ラベルしたものをプローブとし
て用いて、サザーンハイブリッド法を行い、プローブと
ハイブリダイズする断片を確認した。その結果、約２Ｋ
ｂｐ及び約４Ｋｂｐの断片にハイブリダイズした。
ｓ） （ＩＦ０４８１０）の細胞の全ＤＮＡを旧ｎｄｌ
ｌｌで消化したものを、Ｓ、セレビシアエ（ｃｅｒｅｖ
ｉｓｉａｅ）のフォスフォグリセリン酸キナーゼのプロ
モーター遺伝子をｐ３２ラベルしたものをプローブとし
て用いて、サザーンハイブリッド法を行い、プローブと
ハイブリダイズする断片を確認した。その結果、約２Ｋ
ｂｐ及び約４Ｋｂｐの断片にハイブリダイズした。
次に、ＢａｍＨ１部位を利用してｐＢＲ３２２にＲ，ニ
ベウス（ＩＦ０４８１０）のジェネリックライブラリー
を作製した。このジェネリックライブラリーをコロニー
ハイブリッド法で確認した。この方法でポジティブであ
るクローンを解析した結果、全てのクローンが旧ｎｄｌ
ｌｌ ４ Ｋ ｂ ｐの断片であった。
ベウス（ＩＦ０４８１０）のジェネリックライブラリー
を作製した。このジェネリックライブラリーをコロニー
ハイブリッド法で確認した。この方法でポジティブであ
るクローンを解析した結果、全てのクローンが旧ｎｄｌ
ｌｌ ４ Ｋ ｂ ｐの断片であった。
ＰＧＫＩプロモーター遺伝子の塩基配列を第１図に示す
。
。
そこで、）ｌｉｎｄｌｌｌ約２Ｋｂｐ断片は、ＰＧＫＩ
プロモーター遺伝子とは、別のＰＧＫプロモーター遺伝
子（ＰＧＫ２プロモーター遺伝子）であると推定された
ので、次いでＰＧＫ２プロモーター遺伝子のクローニン
グを行った。第３図に旧ｎ＋ＨＩＩ約２Ｋｂｐ断片の制
限酵素地図を示す。
プロモーター遺伝子とは、別のＰＧＫプロモーター遺伝
子（ＰＧＫ２プロモーター遺伝子）であると推定された
ので、次いでＰＧＫ２プロモーター遺伝子のクローニン
グを行った。第３図に旧ｎ＋ＨＩＩ約２Ｋｂｐ断片の制
限酵素地図を示す。
Ｒ，ニベウス（ＩＦ０４８１０）の細胞の全ＤＮＡの旧
ｎｄＩＩＩ消化物を電気泳動に付し、２．０〜２．３Ｋ
ｂｐの断片を含む電気泳動ゲルを切出し、大腸菌プラス
ミドｐＵｃ１１９にサブジェネリッタライブラリーを作
製した。このサブジェネリッタライブラリーについて、
Ｓ、セレビシアエのＰＧＫプロモーター遺伝子をｐ３２
ラベルしたものをプローブとして用いて、コロニーハイ
ブリッド法で確認した。このシーフェンシングでポジテ
ィブであるクローンを解析した結果、ＰＧＫＩプロモー
ター遺伝子とは、別のＰＧＫプロモーター遺伝子（ＰＧ
Ｋ２プロモーター遺伝子）であることが分かった。しか
し、この旧ｎｄＩＩＩ約２Ｋｂｐ断片には、クローニン
グ領域の一部と５゛ ノンコーディング領域が欠けてい
た。そこで、次に完全長のＰＧＫ２プロモーター遺伝子
のクローニングを行った。
ｎｄＩＩＩ消化物を電気泳動に付し、２．０〜２．３Ｋ
ｂｐの断片を含む電気泳動ゲルを切出し、大腸菌プラス
ミドｐＵｃ１１９にサブジェネリッタライブラリーを作
製した。このサブジェネリッタライブラリーについて、
Ｓ、セレビシアエのＰＧＫプロモーター遺伝子をｐ３２
ラベルしたものをプローブとして用いて、コロニーハイ
ブリッド法で確認した。このシーフェンシングでポジテ
ィブであるクローンを解析した結果、ＰＧＫＩプロモー
ター遺伝子とは、別のＰＧＫプロモーター遺伝子（ＰＧ
Ｋ２プロモーター遺伝子）であることが分かった。しか
し、この旧ｎｄＩＩＩ約２Ｋｂｐ断片には、クローニン
グ領域の一部と５゛ ノンコーディング領域が欠けてい
た。そこで、次に完全長のＰＧＫ２プロモーター遺伝子
のクローニングを行った。
Ｒ，ニベウス（ＩＦ０４８１０）の細胞の全ＤＮＡをＢ
ａ用旧、ＢｇｌｌＩ、 ＸｂａＬ ５ａｃｌ及びＰｓｔ
Ｉ等で消化したものを、Ｈｉｎｄｌｌｌ約２Ｋｂｐ断片
中の１．２Ｋ ｂ ｐ ＥｃｏＲＩ−Ｈｉｎｄｌｌｌ断
片をプローブとしてサザーンハイブリッド法でハイブリ
ダイズする断片を確認した。その結果、Ｘｂａｌ約１５
Ｋｂｐ断片とハイブリダイズすることが分かった。次い
で、Ｘｂａｌで消化した上記トータルＤＮＡを蔗糖密度
勾配を用いたサイズフラクショネーションに付して約１
５Ｋｂｐ断片の画分を得た。次いでこの画分をλ２００
１ （Ｘｂａｌ）にサブジェネリックライブラリーを
作製し、１．２ Ｋ ｂ ｐ ［ＥｃｏＲＩ−Ｈｉｎｄ
ｌｌｌ断片をプローブとして用いて、プラークハイブリ
ッド法で確認した。この方法でポジティブであるクロー
ンを解析した結果、完全長のＰＧＫ２プロモーター遺伝
子をクローニングしていることを確認した。
ａ用旧、ＢｇｌｌＩ、 ＸｂａＬ ５ａｃｌ及びＰｓｔ
Ｉ等で消化したものを、Ｈｉｎｄｌｌｌ約２Ｋｂｐ断片
中の１．２Ｋ ｂ ｐ ＥｃｏＲＩ−Ｈｉｎｄｌｌｌ断
片をプローブとしてサザーンハイブリッド法でハイブリ
ダイズする断片を確認した。その結果、Ｘｂａｌ約１５
Ｋｂｐ断片とハイブリダイズすることが分かった。次い
で、Ｘｂａｌで消化した上記トータルＤＮＡを蔗糖密度
勾配を用いたサイズフラクショネーションに付して約１
５Ｋｂｐ断片の画分を得た。次いでこの画分をλ２００
１ （Ｘｂａｌ）にサブジェネリックライブラリーを
作製し、１．２ Ｋ ｂ ｐ ［ＥｃｏＲＩ−Ｈｉｎｄ
ｌｌｌ断片をプローブとして用いて、プラークハイブリ
ッド法で確認した。この方法でポジティブであるクロー
ンを解析した結果、完全長のＰＧＫ２プロモーター遺伝
子をクローニングしていることを確認した。
第２図にＰＧＫ２プロモーター遺伝子の塩基配列を示し
、第４図に完全長のＰＧＫ２プロモーター遺伝子の制限
酵素地図を示す。
、第４図に完全長のＰＧＫ２プロモーター遺伝子の制限
酵素地図を示す。
第１図はＰＧＫ１プロモーター遺伝子の塩基配列を示し
、第２図はＰＧＫ２プロモーター遺伝子の塩基配列を示
す。 第３図はＰＧＫ２プロモーター遺伝子の旧ｎｄｌｌｌ約
２Ｋｂｐ断片の制限酵素地図を示し、第４図は完全長の
ＰＧＫ２プロモーター遺伝子の制限酵素地図を示す。 第１図− ０ ＴＡＣＡＴＴＡＴＡＴ ０ ＴＡＴＧＴＧＡＧＣＡ Ｃ ＴＡＡＣＡＡＴＣＴＡ ０ ＴＴＡＣＴＧＡＴＡＣ ０ ＧＣＡＴＴＧＡＴＴＡ ０ ＴＴＣＴＴＴＧＴＡＣ ３０ ＡＣＣＴＡＣＣＴＧＴ ４０ ＧＡＡＴＴＴＴＡＴＡ ５０ ＡＴＴＣＡＧＣＴＴＧ ９０ ＴＣＴＧＡＴＧＴＣＧ ００ ＣＧＡＴＡＴＣＡＡＡ １０ ＡＴＴＣＡＡＧＡＣＣ ５０ ＴＧＡＣＴＣＣＡＡＧ ６０ ＡＴＧＴＴＡＴＣＡＧ ７０ ＡＡＡＴＡＴＣＡＡＧ １０ ＡＧＣＴＴＣＡＴＴＴ ２０ ＴＴＴＡＧＡＡＧＡＡ ３０ ＧＡＡＡＡＡＡＡＡＡ ７０ ＡＴＧＴＴＡＴＡＣＡ ８０ ＡＴＡＡＧＣＡＴＧＴ ９０ ＧＣＴＴＴＣＡＴＡＡ ３０ ＣＧＡＴＴＴＣＣＡＴ ４０ ＣＧＡＡＣＡＡＴＴＡ ５０ ＣＣＣＡＡＴＡＡＴＡ ９０ ＡＴＴＴＴＴＴＴＣＴ ００ ＴＡＴＴＴＡＴＧＴＣ １０ ＡＡＧＣＡＡＡＴＡＴ その ） ０ ＴＴＴＡＴＡＴＴＧＣ ０ ＴＴＴＡＴＴＡＴＡＡ ０ ＣＴＴＡＧＡＴＡＡＣ ００ ＧＣＡＧＡＣＡＣＴＡ １０ ＡＣＣＡＡＡＣＡＣＧ ２０ ＴＴＡＧＣＴＴＴＡＴ ６０ ＣＴＴＡＡＧＣＴＴＴ ７０ ＣＣＡＡＧＴＧＧＣＡ ８０ ＴＧＧＴＴＴＴＴＴＣ ２０ ＧＴＡＴＣＡＣＡＴＴ ３０ ＴＡＴＣＡＡＡＣＡＡ ４０ ＡＡＡＡＡＡＡＡＧＧ ８０ ＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣ ９０ ＴＴＴＡＴＡＴＴＡＴ ００ ＴＣＧＴＴＴＡＧＧＡ ４０ ＧＡＡＡＧＴＴＧＡＡ ５０ ＡＡＴＡＣＡＡＧＧＡ ６０ ＡＡＣＡＡＧＴＴＡＡ ００ ＣＡＧＡＡＡＧＧＣＴ １０ ＣＣＴＴＴＡＧＴＴＴ ２０ ＡＡＴＧＡＡＡＴＣＣ ６０ ＴＣＡＴＴＴＧＧＧＡ ７０ ＡＡＧＴＧＡＡＧＴＣ ８０ ＡＴＧＴＡＴＧＡＴＴ ２０ ＴＴＴＴＣＴＴＣＴＣ ３０ ＴＴＣＴＣＴＴＴＡＡ ４０ ＴＴＴＣＡＡＡＴＡＣ 第１図−・ １０３０ ＴＡＡＧＧＣＴＧＡＴ ０４０ ＧＣＴＧＡＡＧＣＡＡ ０５０ ＴＣＡＡＡＡＡＡＴＴ ０９０ ＡＴＡＣＡＴＣＡＡＴ １００ ＧＡＴＧＣＣＴＴＴＧ １１０ ＧＴＡＣＴＧＣＴＣＡ １５０ ＣＣＴＴＴＣＴＣＡＡ １６０ ＣＧＴＧＣＡＧＣＣＧ １７０ ＧＴＴＴＣＣＴＴＡＴ ２１０ ＡＣＴＣＧＡＡＡＡＴ ２２０ ＣＣＣＴＣＴＣＧＣＣ ２３０ ＣＴＴＴＴＣＴＴＧＣ ２７０ ＡＡＴＴＣＡＡＴＴＧ ２８０ ＡＴＴＧＡＡＡＡＴＡ ２９０ ＴＧＣＴＴＧＡＴＡＡ ３３０ ＧＧＣＴＴＴＣＡＣＴ ３４０ ＴＴＣＡＡＡＡＡＧＡ ３５０ ＣＡＣＴＴＧＡＴＡＡ ３９０ ＡＧＡＴＣＴＧＡＴＡ ４００ ＣＴＴＡＴＡＡＴＡＡ ４１０ ＣＡＡＴＡＡＴＡＧＡ ４５０ ＣＴＡＡＡＴＴＡＧＴ ４６０ ＡＣＡＡＡＡＴＣＴＴ ４７０ ＧＴＡＡＡＡＡＡＡＧ ５１０ ＣＴＧＴＴＧＡＣＴＴ ５２０ ＴＡＴＣＡＣＴＧＣＴ ５３０ ＧＡＴＡＡＧＴＴＴＧ その ０６０ ＣＣＧＴＧＣＡＴＣＴ ０７０ ＴＴＧＡＣＴＡＣＴＣ ０８０ ＴＴＧＣＴＧＡＴＡＴ １２０ ＣＣＧＴＧＣＴＣＡＣ １３０ ＴＣＴＴＣＣＡＴＧＧ １４０ ＴＴＧＧＴＧＴＴＧＡ １８０ ＧＣＡＡＡＡＧＧＡＧ １９０ ＣＴＴＧＡＡＴＡＣＴ ２ｏＯ ＴＴＧＣＡＡＡＧＧＣ ２４０ ＴＡＴＣＣＴＴＧＧＴ ２５０ ＧＧＴＧＣＣＡＡＡＧ ２６０ ＴＴＴＣＴＧＡＴＡＡ。 ３００ ＧＧＴＡＡＡＴＧＣＴ ３１０ ＴＴＧＡＴＴＡＴＣＴ ３２０ ＧＴＧＧＴＧＧＴＡＴ ３６０ ＴＧＴＴＡＡＡＧＴＡ ３７０ ＡＧＧＴＴＣＴＣＴＴ ３８０ ＡＴＡＡＴＡＡＡＡＣ 第２図 拳 ０３０ ＴＧＡＡＡＡＣＡＴＧ ０４０ ＣＴＴＧＡＣＡＡＧＧ ０５０ ＴＡＡＡＣＧＣＴＴＴ ０９０ ＣＡＣＴＴＴＣＡＡＧ １００ ＡＡＧＡＣＧＣＴＴＧ １１０ ＡＴＡＡＣＧＴＣＡＡ １５０ ＡＴＧＴＡＴＴＡＡＴ １６０ ＡＴＧＴＣＣＡＣＡＧ １７０ ＡＴＴＧＧＴＡＡＧＴ ２１０ ＴＡＣＧＡＡＡＣＣＴ ２２０ ＴＧＴＣＡＡＧＡＡＧ ２３０ ＧＣＣＧＣＣＧＡＡＡ ２７０ ＴＴＧＴＣＡＣＴＧＣ ２８０ ＴＧＡＴＡＡＡＴＴＣ ２９０ ＧＣＴＣＣＴＧＡＴＧ ３３０ ＧＴＡＴＴＣＣＴＧＡ ３４０ ＴＧＡＡＴＧＧＧＡＡ ３５０ ＧＧＣＣＴＴＧＡＣＴ ３９０ ＡＡＧＡＡＡＴＣＴＴ ４００ ＧＡＡＧＴＣＣＡＡＧ ４１０ ＡＣＣＡＴＣＧＴＣＴ ４５０ ＡＴＧＣＴＴＴＴＧＣ ４６０ ＴＡＡＴＧＧＴＡＣＣ ４７０ ＡＡＧＴＣＴＧＴＴＣ ５１０ ＧＴＧＣＴＡＣＴＡＣ ５２０ ＡＡＴＣＡＴＴＧＧＴ ５３０ ＧＧＴＧＧＴＧＡＣＡ の３ ０６０ ＧＡＴＴＧＴＣＴＧＴ ０７０ ＧＧＴＧＧＴＡＴＧＧ ０８０ ＣＴＴＴＣＡＣＴＴＴ １２０ ＧＧＴＡＡＴＴＣＡＣ １３０ ＡＡＡＡＴＡＴＡＧＣ １４０ ＴＣＡＴＡＴＧＡＧＴ １８０ ＣＴＣＴＣＴＴＴＧＡ １９０ ＴＧＡＡＧＣＴＧＧＴ ２００ ＴＣＣＡＡＧＴＴＧＧ ２４０ ＡＧＡＡＣＧＴＣＡＡ ２５０ ＡＣＴＣＧＴＴＴＴＣ ２６０ ＣＣＴＧＴＴＧＡＣＴ ３００ ＣＴＡＡＣＡＣＴＧＧ ３１０ ＴＴＡＴＧＣＡＡＣＣ ３２０ ＧＡＴＧＣＴＧＡＴＧ ３６０ ＧＴＧＧＴＡＡＡＡＡ ３７０ ＡＴＣＣＴＣＣＧＡＧ ３８０ ＴＴＧＴＴＣＣＧＴＧ ４２０ ＧＧＡＡＣＧＧＴＣＣ ４３０ ＣＴＣＴＧＧＴＧＴＡ ４４０ ＴＴＣＧＡＡＴＴＣＧ ４８０ ＴＴＡＡＴＧＣＴＧＴ ４９０ ＣＡＴＣＧＡＡＧＣＴ ５００ ＡＣＡＡＡＧＧＡＡＧ ５４０ ＣＴＧＣＴＡＣＴＧＣ ５５０ ＴＧＣＴＣＴＣＡＡＧ ５６０ ＴＧＧＧＧＴＧＣＴＧ 第２図− １５７０ ＡＡＧＧＴＡＡＡＧＴ ５８０ ＴＴＣＴＣＡＣＡＴＣ ５９ ＴＣＴＡＣＴＧＧＴ ６３０ ＡＡＧＡＡＣＴＴＣＣ ６４０ ＴＧＧＴＧＴＣＮＣＣ ６５ ＧＣＴＣＴＴＴＣＴ ６９０ ＡＡＣＣＡＡＡＡＡＡ ７００ ＡＡＧＣＡＴＴＧＡＣ ７１ ＴＴＴＴＧＴＴＡＡ ７５０ ＴＴＡＡＣＴＴＧＡＡ ７６０ ＴＡＡＡＡＴＡＴＴＴ ７７ ＡＴＣＴＴＴＴＧＴ ８１０ ＴＴＧＣＡＡＡＧＴＡ ８２０ ＴＧＡＣＴＧＡＡＡＣ ８３ ＴＧＣＴＣＡＴＴＴ ８７０ ＡＴＡＧＴＡＴＣＣＴ ８８０ ＴＡＴＴＡＡＡＧＣＣ ８９ ＡＧＡＡＡＣＡＧＴｆ ９３０ ＡＣＡＴＴＡＴＧＴＡ ９４０ ＴＴＧＴＣＡＴＧＴＡ １９５（ ＣＴＣＧＣＣＡＴＴ（ ９９０ ＡＴＴＧＴＧＣＧＣＴ ０００ ＡＡＴＴＡＴＡＡＡＴ ２０１（ ＴＡＡＴＡＴＡＴＴ’］ −その４ ０ １６００ １６１０ １
６２０Ｇ ＧＴＧＧＴＧＣＣＴＣＴＣＴＴＧＡＡＣＴＣ
ＣＴＣＧＡＡＧＧＣＡｏ １６６０
１６７０ １６８０Ａ ＧＣＡＡＧ
ＡＡＴＴＡ ＡＡＴＣＡＴＡＧＧＡ ＧＡＡＡＡＧＡＧ
ＴＡｏ １７２０ １７３０
１７４０Ａ ＡＡＴＡＡＣＡＴＴＴ Ｔ
ＴＴＴＡＴＧＣＡＴ ＧＴＡＴＴＴＣＡＴＡｏ
１７８０ １７９０ １
８００Ａ ＡＡＡＴＡＴＴＣＡＡ ＡＣＴＴＧＡＡ
ＡＡＡ ＧＡＡＧＧＡＡＴＧＧｏ １８
４０ １８５０ １８６０：
ＡＡＡＡＴＡＣＧＡＴ ＡＧＡＣＡＧＴＡＧＡ Ａ
ＣＡＧＴＧＴＡＴＧＤ １９００
１９１０ １９２０： ＴＡＴＧＴＴ
ＣＡＡＣＡＣＴＡＴＴＧＧＡＴ ＴＡＴＴＣＴＡＡＴ
Ｃ） １９６０ １９７０
１９８０フ ＡＡＡＣＡＴＡＣＧＴ ＧＴＧ
ＴＧＴＧＣＡＡ ＡＣＣＣＡＡＴＴＣＴ）
２０２０ ２０３０ ２０４
０ｒ ＴＴＴＣＡＴＧＧＣＴ ＡＴＴＧＧＴＴＣＡ
Ａ ＡＧＧＡＡＣＴＣＡＧ第２図−イ ０５０ ＣＴＴＴＣＴＴＣＡＡ ０６０ ＧＡＴＧＡＣＧＧＡＧ ０７Ｃ ＴＧＧＣＴＣＴＧＧ’Ｉ １１０ ＴＴＧＡＡＣＡＧＣＣ １２０ ＡＣＡＧＡＡＡＡＡＣ １３Ｃ ＴＡＡＡＴＴＡＴＧＡ １７０ ＡＣＡＡＧＴＧＧＴＣ １８０ ＧＧＧＴＴＧＧＴＧＡ １９０ ＡＡＴＧＧＣＡＴＴＡ ２３０ ＣＡＡＣＴＴＴＴＣＡ ２４０ ＴＧＡＴＴＧＴＴＣＡ ２５０ ＧＡＡＧＴＣＡＴＡＴ ２９０ ＴＴＣＴＡＧＣＡＧＴ ３００ ＡＴＡＡＴＧＡＧＴＣ ３１０ ＴＡＣＴＣＡＴＡＣＴ ３５０ ＣＣＴＧＡＴＧＡＧＧ ３６０ ＡＣＡＴＧＡＧＴＡＡ ３７０ ＣＣＡＧＡＡＡＧＡＧ ４１Ｏ ＧＡＴＣＡＧＡＡＡＡ ４２０ ＧＧＡＴＴＣＡＴＡＣ ４３０ ＣＣＡＡＡＣＧＧＣＴ ４７０ ＴＡＡＡＧＡＣＧＣＴ ４８０ ＧＧＴＣＡＧＣＧＴＧ ４９０ ＴＴＴＡＴＮＡＣＣＴ ５３０ ＴＣＡＣＡＧＣＴＡＧ ５４０ 、ＡＴＴＡＡＡＡＴＴＡ ５５０ 、ＡＣＴＡＴＡＴＴＴＴ ５９０ ＡＧＮＣＡＡＴＧＮＴ ６０Ｏ ＮＴＴＡＴＧＮＴＡＡ ＣＴＴ ６１０ シの５ ） ２０８０ ２０９０
２１００’ ＡＡＣＴＧＡＧＡＡＣＧＴＣＴＴ
ＴＡＡＡＴ ＡＴＣＡＴＣＣＡＴＴ） １４０ ＡＣＣＴＴＴＧＧＡＧ １５０ ＡＡＴＡＣＴＡＴＴＴ １６０ ＡＡＴＴＴＴＧＴＣＴ ２００ ＣＣＡＴＡＴＧＴＴＣ ２１０ ＴＧＴＴＣＡＡＧＴＴ ２２０ ＴＴＣＴＡＴＣＡＴＴ ２６０ ＴＡＴＴＴＣＴＧＡＡ ２７０ ＡＣＴＧＴＴＧＡＡＧ ２８０ ＡＡＡＧＣＡＡＣＴＴ ＡＡＴＴＡＴＴＣＣＧ ＡＣＧＡＧＴＡＴＧＡ ＴＴＧＡＧＡＧＴＡＡ ４４０ ＡＴＣＴＣＡＡＡＧＧ ４５０ ＡＡＴＡＴＴＡＣＡＡ ４６０ ＴＣＡＡＴＴＴＴＣＡ ５００ ＡＣＡＡＴＴ丁ＧＴＴ ５１０ ＧＴＣＡＡＡＡＴＡＡ ５２０ ＣＡＡＴＧＡＡＧＣＣ ５６０ ＣＡＴＧＡＴＡＧＡＡ ５７０ ＡＧＣＡＴＧＴＴＣＡ ５８０ ＴＧＡＴＧＡＧＣＧＣ
、第２図はＰＧＫ２プロモーター遺伝子の塩基配列を示
す。 第３図はＰＧＫ２プロモーター遺伝子の旧ｎｄｌｌｌ約
２Ｋｂｐ断片の制限酵素地図を示し、第４図は完全長の
ＰＧＫ２プロモーター遺伝子の制限酵素地図を示す。 第１図− ０ ＴＡＣＡＴＴＡＴＡＴ ０ ＴＡＴＧＴＧＡＧＣＡ Ｃ ＴＡＡＣＡＡＴＣＴＡ ０ ＴＴＡＣＴＧＡＴＡＣ ０ ＧＣＡＴＴＧＡＴＴＡ ０ ＴＴＣＴＴＴＧＴＡＣ ３０ ＡＣＣＴＡＣＣＴＧＴ ４０ ＧＡＡＴＴＴＴＡＴＡ ５０ ＡＴＴＣＡＧＣＴＴＧ ９０ ＴＣＴＧＡＴＧＴＣＧ ００ ＣＧＡＴＡＴＣＡＡＡ １０ ＡＴＴＣＡＡＧＡＣＣ ５０ ＴＧＡＣＴＣＣＡＡＧ ６０ ＡＴＧＴＴＡＴＣＡＧ ７０ ＡＡＡＴＡＴＣＡＡＧ １０ ＡＧＣＴＴＣＡＴＴＴ ２０ ＴＴＴＡＧＡＡＧＡＡ ３０ ＧＡＡＡＡＡＡＡＡＡ ７０ ＡＴＧＴＴＡＴＡＣＡ ８０ ＡＴＡＡＧＣＡＴＧＴ ９０ ＧＣＴＴＴＣＡＴＡＡ ３０ ＣＧＡＴＴＴＣＣＡＴ ４０ ＣＧＡＡＣＡＡＴＴＡ ５０ ＣＣＣＡＡＴＡＡＴＡ ９０ ＡＴＴＴＴＴＴＴＣＴ ００ ＴＡＴＴＴＡＴＧＴＣ １０ ＡＡＧＣＡＡＡＴＡＴ その ） ０ ＴＴＴＡＴＡＴＴＧＣ ０ ＴＴＴＡＴＴＡＴＡＡ ０ ＣＴＴＡＧＡＴＡＡＣ ００ ＧＣＡＧＡＣＡＣＴＡ １０ ＡＣＣＡＡＡＣＡＣＧ ２０ ＴＴＡＧＣＴＴＴＡＴ ６０ ＣＴＴＡＡＧＣＴＴＴ ７０ ＣＣＡＡＧＴＧＧＣＡ ８０ ＴＧＧＴＴＴＴＴＴＣ ２０ ＧＴＡＴＣＡＣＡＴＴ ３０ ＴＡＴＣＡＡＡＣＡＡ ４０ ＡＡＡＡＡＡＡＡＧＧ ８０ ＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣ ９０ ＴＴＴＡＴＡＴＴＡＴ ００ ＴＣＧＴＴＴＡＧＧＡ ４０ ＧＡＡＡＧＴＴＧＡＡ ５０ ＡＡＴＡＣＡＡＧＧＡ ６０ ＡＡＣＡＡＧＴＴＡＡ ００ ＣＡＧＡＡＡＧＧＣＴ １０ ＣＣＴＴＴＡＧＴＴＴ ２０ ＡＡＴＧＡＡＡＴＣＣ ６０ ＴＣＡＴＴＴＧＧＧＡ ７０ ＡＡＧＴＧＡＡＧＴＣ ８０ ＡＴＧＴＡＴＧＡＴＴ ２０ ＴＴＴＴＣＴＴＣＴＣ ３０ ＴＴＣＴＣＴＴＴＡＡ ４０ ＴＴＴＣＡＡＡＴＡＣ 第１図−・ １０３０ ＴＡＡＧＧＣＴＧＡＴ ０４０ ＧＣＴＧＡＡＧＣＡＡ ０５０ ＴＣＡＡＡＡＡＡＴＴ ０９０ ＡＴＡＣＡＴＣＡＡＴ １００ ＧＡＴＧＣＣＴＴＴＧ １１０ ＧＴＡＣＴＧＣＴＣＡ １５０ ＣＣＴＴＴＣＴＣＡＡ １６０ ＣＧＴＧＣＡＧＣＣＧ １７０ ＧＴＴＴＣＣＴＴＡＴ ２１０ ＡＣＴＣＧＡＡＡＡＴ ２２０ ＣＣＣＴＣＴＣＧＣＣ ２３０ ＣＴＴＴＴＣＴＴＧＣ ２７０ ＡＡＴＴＣＡＡＴＴＧ ２８０ ＡＴＴＧＡＡＡＡＴＡ ２９０ ＴＧＣＴＴＧＡＴＡＡ ３３０ ＧＧＣＴＴＴＣＡＣＴ ３４０ ＴＴＣＡＡＡＡＡＧＡ ３５０ ＣＡＣＴＴＧＡＴＡＡ ３９０ ＡＧＡＴＣＴＧＡＴＡ ４００ ＣＴＴＡＴＡＡＴＡＡ ４１０ ＣＡＡＴＡＡＴＡＧＡ ４５０ ＣＴＡＡＡＴＴＡＧＴ ４６０ ＡＣＡＡＡＡＴＣＴＴ ４７０ ＧＴＡＡＡＡＡＡＡＧ ５１０ ＣＴＧＴＴＧＡＣＴＴ ５２０ ＴＡＴＣＡＣＴＧＣＴ ５３０ ＧＡＴＡＡＧＴＴＴＧ その ０６０ ＣＣＧＴＧＣＡＴＣＴ ０７０ ＴＴＧＡＣＴＡＣＴＣ ０８０ ＴＴＧＣＴＧＡＴＡＴ １２０ ＣＣＧＴＧＣＴＣＡＣ １３０ ＴＣＴＴＣＣＡＴＧＧ １４０ ＴＴＧＧＴＧＴＴＧＡ １８０ ＧＣＡＡＡＡＧＧＡＧ １９０ ＣＴＴＧＡＡＴＡＣＴ ２ｏＯ ＴＴＧＣＡＡＡＧＧＣ ２４０ ＴＡＴＣＣＴＴＧＧＴ ２５０ ＧＧＴＧＣＣＡＡＡＧ ２６０ ＴＴＴＣＴＧＡＴＡＡ。 ３００ ＧＧＴＡＡＡＴＧＣＴ ３１０ ＴＴＧＡＴＴＡＴＣＴ ３２０ ＧＴＧＧＴＧＧＴＡＴ ３６０ ＴＧＴＴＡＡＡＧＴＡ ３７０ ＡＧＧＴＴＣＴＣＴＴ ３８０ ＡＴＡＡＴＡＡＡＡＣ 第２図 拳 ０３０ ＴＧＡＡＡＡＣＡＴＧ ０４０ ＣＴＴＧＡＣＡＡＧＧ ０５０ ＴＡＡＡＣＧＣＴＴＴ ０９０ ＣＡＣＴＴＴＣＡＡＧ １００ ＡＡＧＡＣＧＣＴＴＧ １１０ ＡＴＡＡＣＧＴＣＡＡ １５０ ＡＴＧＴＡＴＴＡＡＴ １６０ ＡＴＧＴＣＣＡＣＡＧ １７０ ＡＴＴＧＧＴＡＡＧＴ ２１０ ＴＡＣＧＡＡＡＣＣＴ ２２０ ＴＧＴＣＡＡＧＡＡＧ ２３０ ＧＣＣＧＣＣＧＡＡＡ ２７０ ＴＴＧＴＣＡＣＴＧＣ ２８０ ＴＧＡＴＡＡＡＴＴＣ ２９０ ＧＣＴＣＣＴＧＡＴＧ ３３０ ＧＴＡＴＴＣＣＴＧＡ ３４０ ＴＧＡＡＴＧＧＧＡＡ ３５０ ＧＧＣＣＴＴＧＡＣＴ ３９０ ＡＡＧＡＡＡＴＣＴＴ ４００ ＧＡＡＧＴＣＣＡＡＧ ４１０ ＡＣＣＡＴＣＧＴＣＴ ４５０ ＡＴＧＣＴＴＴＴＧＣ ４６０ ＴＡＡＴＧＧＴＡＣＣ ４７０ ＡＡＧＴＣＴＧＴＴＣ ５１０ ＧＴＧＣＴＡＣＴＡＣ ５２０ ＡＡＴＣＡＴＴＧＧＴ ５３０ ＧＧＴＧＧＴＧＡＣＡ の３ ０６０ ＧＡＴＴＧＴＣＴＧＴ ０７０ ＧＧＴＧＧＴＡＴＧＧ ０８０ ＣＴＴＴＣＡＣＴＴＴ １２０ ＧＧＴＡＡＴＴＣＡＣ １３０ ＡＡＡＡＴＡＴＡＧＣ １４０ ＴＣＡＴＡＴＧＡＧＴ １８０ ＣＴＣＴＣＴＴＴＧＡ １９０ ＴＧＡＡＧＣＴＧＧＴ ２００ ＴＣＣＡＡＧＴＴＧＧ ２４０ ＡＧＡＡＣＧＴＣＡＡ ２５０ ＡＣＴＣＧＴＴＴＴＣ ２６０ ＣＣＴＧＴＴＧＡＣＴ ３００ ＣＴＡＡＣＡＣＴＧＧ ３１０ ＴＴＡＴＧＣＡＡＣＣ ３２０ ＧＡＴＧＣＴＧＡＴＧ ３６０ ＧＴＧＧＴＡＡＡＡＡ ３７０ ＡＴＣＣＴＣＣＧＡＧ ３８０ ＴＴＧＴＴＣＣＧＴＧ ４２０ ＧＧＡＡＣＧＧＴＣＣ ４３０ ＣＴＣＴＧＧＴＧＴＡ ４４０ ＴＴＣＧＡＡＴＴＣＧ ４８０ ＴＴＡＡＴＧＣＴＧＴ ４９０ ＣＡＴＣＧＡＡＧＣＴ ５００ ＡＣＡＡＡＧＧＡＡＧ ５４０ ＣＴＧＣＴＡＣＴＧＣ ５５０ ＴＧＣＴＣＴＣＡＡＧ ５６０ ＴＧＧＧＧＴＧＣＴＧ 第２図− １５７０ ＡＡＧＧＴＡＡＡＧＴ ５８０ ＴＴＣＴＣＡＣＡＴＣ ５９ ＴＣＴＡＣＴＧＧＴ ６３０ ＡＡＧＡＡＣＴＴＣＣ ６４０ ＴＧＧＴＧＴＣＮＣＣ ６５ ＧＣＴＣＴＴＴＣＴ ６９０ ＡＡＣＣＡＡＡＡＡＡ ７００ ＡＡＧＣＡＴＴＧＡＣ ７１ ＴＴＴＴＧＴＴＡＡ ７５０ ＴＴＡＡＣＴＴＧＡＡ ７６０ ＴＡＡＡＡＴＡＴＴＴ ７７ ＡＴＣＴＴＴＴＧＴ ８１０ ＴＴＧＣＡＡＡＧＴＡ ８２０ ＴＧＡＣＴＧＡＡＡＣ ８３ ＴＧＣＴＣＡＴＴＴ ８７０ ＡＴＡＧＴＡＴＣＣＴ ８８０ ＴＡＴＴＡＡＡＧＣＣ ８９ ＡＧＡＡＡＣＡＧＴｆ ９３０ ＡＣＡＴＴＡＴＧＴＡ ９４０ ＴＴＧＴＣＡＴＧＴＡ １９５（ ＣＴＣＧＣＣＡＴＴ（ ９９０ ＡＴＴＧＴＧＣＧＣＴ ０００ ＡＡＴＴＡＴＡＡＡＴ ２０１（ ＴＡＡＴＡＴＡＴＴ’］ −その４ ０ １６００ １６１０ １
６２０Ｇ ＧＴＧＧＴＧＣＣＴＣＴＣＴＴＧＡＡＣＴＣ
ＣＴＣＧＡＡＧＧＣＡｏ １６６０
１６７０ １６８０Ａ ＧＣＡＡＧ
ＡＡＴＴＡ ＡＡＴＣＡＴＡＧＧＡ ＧＡＡＡＡＧＡＧ
ＴＡｏ １７２０ １７３０
１７４０Ａ ＡＡＴＡＡＣＡＴＴＴ Ｔ
ＴＴＴＡＴＧＣＡＴ ＧＴＡＴＴＴＣＡＴＡｏ
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８００Ａ ＡＡＡＴＡＴＴＣＡＡ ＡＣＴＴＧＡＡ
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ＡＡＡＡＴＡＣＧＡＴ ＡＧＡＣＡＧＴＡＧＡ Ａ
ＣＡＧＴＧＴＡＴＧＤ １９００
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ＣＡＡＣＡＣＴＡＴＴＧＧＡＴ ＴＡＴＴＣＴＡＡＴ
Ｃ） １９６０ １９７０
１９８０フ ＡＡＡＣＡＴＡＣＧＴ ＧＴＧ
ＴＧＴＧＣＡＡ ＡＣＣＣＡＡＴＴＣＴ）
２０２０ ２０３０ ２０４
０ｒ ＴＴＴＣＡＴＧＧＣＴ ＡＴＴＧＧＴＴＣＡ
Ａ ＡＧＧＡＡＣＴＣＡＧ第２図−イ ０５０ ＣＴＴＴＣＴＴＣＡＡ ０６０ ＧＡＴＧＡＣＧＧＡＧ ０７Ｃ ＴＧＧＣＴＣＴＧＧ’Ｉ １１０ ＴＴＧＡＡＣＡＧＣＣ １２０ ＡＣＡＧＡＡＡＡＡＣ １３Ｃ ＴＡＡＡＴＴＡＴＧＡ １７０ ＡＣＡＡＧＴＧＧＴＣ １８０ ＧＧＧＴＴＧＧＴＧＡ １９０ ＡＡＴＧＧＣＡＴＴＡ ２３０ ＣＡＡＣＴＴＴＴＣＡ ２４０ ＴＧＡＴＴＧＴＴＣＡ ２５０ ＧＡＡＧＴＣＡＴＡＴ ２９０ ＴＴＣＴＡＧＣＡＧＴ ３００ ＡＴＡＡＴＧＡＧＴＣ ３１０ ＴＡＣＴＣＡＴＡＣＴ ３５０ ＣＣＴＧＡＴＧＡＧＧ ３６０ ＡＣＡＴＧＡＧＴＡＡ ３７０ ＣＣＡＧＡＡＡＧＡＧ ４１Ｏ ＧＡＴＣＡＧＡＡＡＡ ４２０ ＧＧＡＴＴＣＡＴＡＣ ４３０ ＣＣＡＡＡＣＧＧＣＴ ４７０ ＴＡＡＡＧＡＣＧＣＴ ４８０ ＧＧＴＣＡＧＣＧＴＧ ４９０ ＴＴＴＡＴＮＡＣＣＴ ５３０ ＴＣＡＣＡＧＣＴＡＧ ５４０ 、ＡＴＴＡＡＡＡＴＴＡ ５５０ 、ＡＣＴＡＴＡＴＴＴＴ ５９０ ＡＧＮＣＡＡＴＧＮＴ ６０Ｏ ＮＴＴＡＴＧＮＴＡＡ ＣＴＴ ６１０ シの５ ） ２０８０ ２０９０
２１００’ ＡＡＣＴＧＡＧＡＡＣＧＴＣＴＴ
ＴＡＡＡＴ ＡＴＣＡＴＣＣＡＴＴ） １４０ ＡＣＣＴＴＴＧＧＡＧ １５０ ＡＡＴＡＣＴＡＴＴＴ １６０ ＡＡＴＴＴＴＧＴＣＴ ２００ ＣＣＡＴＡＴＧＴＴＣ ２１０ ＴＧＴＴＣＡＡＧＴＴ ２２０ ＴＴＣＴＡＴＣＡＴＴ ２６０ ＴＡＴＴＴＣＴＧＡＡ ２７０ ＡＣＴＧＴＴＧＡＡＧ ２８０ ＡＡＡＧＣＡＡＣＴＴ ＡＡＴＴＡＴＴＣＣＧ ＡＣＧＡＧＴＡＴＧＡ ＴＴＧＡＧＡＧＴＡＡ ４４０ ＡＴＣＴＣＡＡＡＧＧ ４５０ ＡＡＴＡＴＴＡＣＡＡ ４６０ ＴＣＡＡＴＴＴＴＣＡ ５００ ＡＣＡＡＴＴ丁ＧＴＴ ５１０ ＧＴＣＡＡＡＡＴＡＡ ５２０ ＣＡＡＴＧＡＡＧＣＣ ５６０ ＣＡＴＧＡＴＡＧＡＡ ５７０ ＡＧＣＡＴＧＴＴＣＡ ５８０ ＴＧＡＴＧＡＧＣＧＣ
Claims (3)
- （１）リゾープス属由来のフォスフォグリセリン酸キナ
ーゼ遺伝子のプロモーター遺伝子であって、開始コドン
の上流５６塩基〜７６塩基の範囲内にプロモーターとし
てのコンセンサス配列を有するプロモーター遺伝子。 - （２）プロモーターとしてのコンセンサス配列の上流８
０塩基〜１２０塩基の範囲内にＣＡＡＴ配列がある請求
項１記載のプロモーター遺伝子。 - （３）ＣＡＡＴ配列の上流に１つまたは２つ以上の上流
活性部位がある請求項１記載のプロモーター遺伝子。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4471590A JPH03247286A (ja) | 1990-02-26 | 1990-02-26 | リゾープス属由来のフォスフォグリセリン酸キナーゼ遺伝子のプロモーター遺伝子 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4471590A JPH03247286A (ja) | 1990-02-26 | 1990-02-26 | リゾープス属由来のフォスフォグリセリン酸キナーゼ遺伝子のプロモーター遺伝子 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03247286A true JPH03247286A (ja) | 1991-11-05 |
Family
ID=12699121
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4471590A Pending JPH03247286A (ja) | 1990-02-26 | 1990-02-26 | リゾープス属由来のフォスフォグリセリン酸キナーゼ遺伝子のプロモーター遺伝子 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH03247286A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001072967A3 (en) * | 2000-03-27 | 2002-02-28 | Battelle Memorial Institute | Promoter sequence of 3-phosphoglycerate kinase gene 2 of rhizopus oryzae and its use |
| WO2001073083A3 (en) * | 2000-03-27 | 2002-02-28 | Battelle Memorial Institute | Promoter sequence of 3-phosphoglycerate kinase gene 1 of rhizopus oryzae and its use |
-
1990
- 1990-02-26 JP JP4471590A patent/JPH03247286A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001072967A3 (en) * | 2000-03-27 | 2002-02-28 | Battelle Memorial Institute | Promoter sequence of 3-phosphoglycerate kinase gene 2 of rhizopus oryzae and its use |
| WO2001073083A3 (en) * | 2000-03-27 | 2002-02-28 | Battelle Memorial Institute | Promoter sequence of 3-phosphoglycerate kinase gene 1 of rhizopus oryzae and its use |
| US6465635B2 (en) * | 2000-03-27 | 2002-10-15 | Battelle Memorial Institute | Promoter sequence of 3-phosphoglycerate kinase gene 1 of lactic acid-producing fungus rhizopus oryzae and a method of expressing a gene of interest in fungal species |
| US6528636B1 (en) * | 2000-03-27 | 2003-03-04 | Battelle Memorial Institute | Promoter sequence of 3-phosphoglycerate kinase gene 2 of lactic acid-producing fungus rhizopus oryzae and a method of expressing a gene of interest in fungal species |
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