JPH03215428A - Ｂｍｙ―４１９５０抗腫瘍抗生物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 関連出願についてのクロス・リファレンス本出願は１９
８９年３月２３日付の本出願人らの同時係属米国特許出
願第３２７．　９２９号の部分継続出願である。

発明の背景 発明の分野 本発明は新規の抗腫瘍抗生物質並びにその製造及び回収
に関する。

の発酵による抗生物質ＡＭ−２２８２の製造を記載して
いる。この抗生物質は抗感染及び活性を有すると報告さ
れている。ＡＭ−２２８２は後にスタウロスポリン（ｓ
ｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ　）と命名され、その構造は
Ｊ．Ｃｈｅｍ，Ｓｏｃ，Ｃｈｅｍ，　　Ｃｏｍｍｕｎ．
　　Ｌ　９　７　８　：８００−８０１、１９７８に であると報告されている。

ヨーロッパ公告特許出願第２３８，　０１１号は の構造を有し、ストレプトミセス（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙ
ｃｅｓ）ｓｐ．　ＵＣＮ−０　１　　（ＦＥＲＭ　ＢＰ
−９９０　）の発酵によって生産されるＵＣＮ−０　１
という名称の抗腫瘍抗生物質を記載している。化合物Ｕ
ＣＮ−０　１はＪ，Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，　ｐ，　
１７８２、１９８７　１２月号にも記載されている。

米国特許第４．　５５２．　８４２号にはレベツカマイ
シン（ｒｅｂｅｃｃａｍｙｃｉｎ）と呼ばれる抗腫瘍抗
生物質が、ノカルジア・アエロコロニケネス（Ｎｏｃａ
ｒｄｉａａｅｒｏｃｏｌｏｎｉｇｅｎｅｓ）　　ＡＴＣ
Ｃ　３　９　２　４　３の発酵によって生産されるとし
て記載されている。レベッカマイシンは構造式 ■ ａｃｅｒｏｃｏｌｏｎｉｇｅｎｅｓ） （Ｊ， Ａｎｔｉｂｉｏｔ． ４　０　： れた。

６７８、 ９８７》 として分類しなおさ ａｅｒｏｃｏｌｏｎｉｇｅｎｅｓ　）　Ａ　Ｔ　Ｃ　Ｃ
　３　９　２　４　３の発酵にによって生産される４′
−デスク口口レベッ力マイシンと呼ばれる抗腫瘍抗生物
質を記載している。

この化合物は構造式 ■ ＵＭｅ を有する。

■ ８６年１ １月２１日付提出の米国特許出願 第 ９３３．　４２８号は式 Ａ６ 〔上記式中、 ｎは１〜６の整数であり、 Ａ６ 及びＡ ３はＨ及びー（ＣＨ２）．，ＮＲ’Ｒ２から選ば れ、 かつＡ６ 及びｐ，　＋　３の少なくとも１つは （（：Ｈ２）、 ＮＲ Ｒ２ であり、 Ｒ’及びＲ２は、無関係に、水素、未置換及び置換Ｃ１
　Ｃｓアルキルと、アルキル部分中に１〜３個の炭素を
有しかつアリール部分が未置換フエニルあるいは１〜３
個のアルキル、アルコキシ、ハロ、カルボキシル、アル
コキシ力ルボニル、及びアミノ並びに千ノー及びジ−低
級アルキルアミノ基で置換されたフェニルであるアリー
ルアルキルと、未置換フェニル及び１〜３個のアルキル
、アルコキシ、ヒドロキシ、ハロ、アミノ、モノ及びジ
アルキルアミノ、二トロ、カルボキシル、アルコキシカ
ルボニル及びシアノ基で置換されたフェニルから選ばれ
るアリールとから選ばれ、但しＲ１とＲ２の両方共がお
のおのアリールであることはなくかつ、一緒になるとき
、Ｒ１とＲ２とは窒素原子と一緒に５一又は６一員環を
形成するためー（ＣＨ２）．一及び＝（ＣＨ２）２−Ｒ
’−（ＣＨ２）−　（ここで、Ｒ３はＣＨ２、ＮＨ、０
及びＳから選ばれる）から選ばれ得ることを条件とし、 ＸはＨ，Ｆ，［Ｉ！、ＢｒＳＣ，−Ｃ３アルキル、ＯＨ
，カルボキシル、アルキル部分がＣ１−Ｃ３アルキルで
あるアルコキシ力ルボニル及びアルコキシ、ペンジルオ
キシ、アミノ、及びモノー及びジーアルキルアミノから
選ばれ、かつ Ｒ４はＨ及びＣＨ３から選ばれる〕 及びその製剤上受容できる酸付加塩及び塩基塩の一連の
抗腫瘍抗生物質を記載している。

ヨーロッパ公告特許出願第１７５．　２８４号はアクチ
ノマズラ・メリアウラ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　　
ｍｅｌｌｉａｕｒａ）．へＴＣＣ３９６９１の発酵によ
って生産されるＡＴ２４３３Ａｌ、ＡＴ２４３３Ａ２、
ＡＴ２４３３Ｂ１およびＡＴ２４３３Ｂ２と称する４種
の抗腫瘍抗生物質を記載している。これらの化合物は構
造式ＨｔＪ （上記構造式中、ＸはＨ又はＣ１であり、ＲはＨ又はＣ
Ｈ３である） を有する。

ＰＣＴ出願Ｗ○８　８／０　７　０　４　５はある種の
細胞系に対して生体外抗腫瘍活性を有すると報告されて
いる化合物Ｋ２５２の誘導体を記載している。

記載されている化合物の中には、４４頁に化合物６５〜
７６として見られる幾つかのＫ２５２　　７才キソ誘導
体がある。

発明の要約 本発明は構造式 Ｈ を有する本明細書中でＢＭＹ−４　１　９　５　０と称
する新規の抗腫瘍抗生物質並びに実質的に純粋な形での
ＢＭＹ−４　１　９　５　０の製造、単離及び精製方法
に関する。

抗生物質ＢＭＹ−４　１　９　５　０は、ストレプトミ
セス・スタウロスポレウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ
ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｅｕｓ）　ｎｏｖ．ｓｐ．のＢＭ
Ｙ−４　１　９　５　０生ＡＴＣＣ５　５　０　０　６
あるいはその突然変異株又は４１９５０生産性株、好ま
しくはストレプトミセス・ヒグロスコピクス（Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃｕｓ）株Ｃ３
９２８０−４５０−９（ＡＴＣＣ　５　３　７　３　０
）あるいはその突然変異株又は変異株の、水性栄養培地
中、液中好気条件下での、該培地中で該閑によって実質
的な量のＢＭＹ−４１９５０が生産されるまでの発酵並
びに共生産物質を実質的に含まないＢＭＹ−４　１　９
　５　０の培地からの回収によって得られる。

ＢＭＹ−４　１　９　５　０は抗菌性を示しかつ実験動
物腫瘍系に対する活性をも示す。

詳細な説明 ４１９５０生産性株の発酵によって製造される。

特に好ましいＢＭＹ−４　１　９　５　０生産性株は米
国農務省ノーザン・リジョナル・リサーチ・センター　
（Ｎｏｒｔｈｅｒｎ　　Ｒｅｇｉｏｎａｌ　　Ｒｅｓｅ
ａｒｃｈ　　（：ｅｎｔｅｒ）、ＡＲＳパテント・カル
チャー・コレクション（Ｐａｔｅｎｔ　［：ｕｌｔｕｒ
ｅ　［：ｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）から得られ、そこでは該
株はＮＲＲＬ１１、１８４ストレプトミセス（　Ｓｔｒ
ｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）　ｓｐ，として同定される。

ＮＲＲＬ　１　１、１８４株の生物学的純粋培養菌は米
国メリーランド州口ックビレのアメリカン・タイプ・カ
ルチャー・コレクション（　ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅ
　ｃｕｌｔｕｒｅ　Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ　）に寄託さ
れかつＡＴＣＣ５５００６としてその永久菌コレクショ
ン加えられている。この株の培養菌は米国コネチカット
州、ウォーリングフォードのブリストルーマイヤーズ・
スクイブ・カンパ−＝−　−（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅ
ｒｓ　ＳｑｕｉｂｂＣｏｍｐａｎｙ　）　Ｐ　Ｒ　Ｄ　
Ｄアクチノミセス・カルチャー・コレクション（Ａｃｔ
ｉｎｏｍｙｃｅｓ　Ｃｕｌｔｕｒｅ　［：ｏｌｌｅｃｔ
ｉｏｎ）に凍結乾燥菌としても保存されている。

ＮＲＲＬＩＩ、１８４の分類学的研究は米国特許第４，
　１０７，　２９７号及びＪ，　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ
ｓ　　３　０　（４）　：２７２−２８２、１９７７中
に詳細に記載されている。この株はストレプトミセス・
スタウロスポレウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　　ｓ
ｔａｕｒｏｓｐｏｒｅｕｓ）　ｎｏｖ．ｓｐ．という名
称をもつ新規のストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙ
ｃｅｓ）種として分類されている。

もう１つの特に好ましいＢＭＹ−４　１　９　５　０生
Ｃ３９２８０−４５０−９と称するストレプトミセス・
ヒグロスコピクス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｈｙｇｒ
ｏｓｃｏｐｉｃｕｓ）の新規株である。この株は沼津で
集められた土壌試料から単離された。株Ｃ３９２８０４
５０−９の生物学的純粋培養菌は米国メリーラント州ロ
ックビレのアメリカン・タイプ・カルチャー０コレクシ
ョン（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕｌｔｕｒｅ［
：ｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）に寄託され、ＡＴＣＣ　５　３
　７　３　０としてその永久菌コレクションへ加えられ
た。

Ｃ３９２８０と称するこの培養菌は米国コネクチカット
州ウォーリングフォードのブリストルーマイヤーズ・ス
クイブ・ファーマシュウティカル、リサーチ・アンド・
ディベロプメント・ディビジョン・カルチャー・コレク
ション（Ｂｒｉｓｔｏｌ−ＭｙｅｒＳｑｕｉｂｂ　Ｐｈ
ａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ａｎｄ
　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ［］ｉｖｉｓｉｏｎ　Ｃｕｌ
ｔｕｒｅ　Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ　）の凍結乾燥管及び
低温パイアル中の休眠培養菌としても保存されている。

株Ｃ３９２８０−４５０−９について行われた株である
ことを示す。株Ｃ３９２８０−４５０一９はシャーリン
グ及びゴットリーブ（Ｓｈｉｒｌｉｎｇ＆　Ｇｏｔｔｌ
ｉｅｂ）　（Ｉｎｔ，　Ｊ．Ｓｅｐｔ．Ｂａｃｔｅｒｉ
ｏｌｏｇｙ　１　６　：３１３−３４０、１９６６；同
上１８：６９−１８９、１９６８；同上２２：２６５−
３９４、１９７２）、スタネック及びロバーツ（Ｓｔａ
ｎｅｃｋ＆　Ｒｏｂｅｒｔｓ（Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂ
ｉｏｌ，　　２　８　：　２　２　６３１、１９７４）
、Ｋ．　Ｐ．シャール（Ｋ，　Ｐ，　Ｓｈａａｌ）　［
Ｍ．グッドフェロー及びＤ．Ｅ．ミニキン（Ｍ，　Ｇｏ
ｏｄｆｅｌｌｏｗａｎｄ　Ｄ．Ｅ．Ｍｉｎｎｉｋｉｎ）
編、ケミカル・メソッズ・イン・バクテリアル・システ
マテ２イックス（ＣｈｅｍｉｃａｌＭｅｔｈｏｄｓ　ｉ
ｎ　Ｂａｃｔｅｒｉａｌ　Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃｓ）、
ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ　Ｉｎｃ．＋ｐｐ．　３　
５　９　−　３　８　１、１　９　８　５〕によって記
載されている物質及び方法によって決定された下記の性
質を有する。

形態 株Ｃ３９２８０−４５０−９の形態的特性には、１）ノ
ン・フラグメンティング（ｎｏｎ−ｆｒａｇｍｅｎｔｉ
ｎｇ）基質及び気中菌糸の生成、２）気中菌糸上の枝分
かれ担胞子体から生じた分節胞子のらせん鎖でかつ該胞
子鎖が２〜６巻きを有すること、３）なめらかな胞子装
飾が含まれる。

培養及び生理的特性 記述培地上で観察された培養特性を第１表に示す。ＩＳ
Ｐ培地Ｎｏ．　４及び改良ベネット（Ｍｏｄｉｆｉｅｄ
Ｂｅｎｎｅｔ’　ｓ）培地中で吸湿性変化が明らかであ
る。

可溶性馬鈴薯澱粉及びブドウ糖は増殖のために利用され
る。イノシットの利用は疑わしい。生理的特性は第２表
に示してある。

細胞壁の化学 株Ｃ３９２８０−４５０−９全細胞加水分解物の分析は
細胞壁成分としてＬＬ−ジアミノピメリン酸、ガラクト
ース、リボース、及びマンノースを示した。従ってこの
菌はタイプＩ細胞壁に割当てられる。燐脂質の分析はホ
スファチジルエタノールアミンとホスファチジルグリセ
リンとの存在を検出し、燐脂質パターンをＰＩＩとして
分類している。

第１表 株Ｃ　３９２８０ ９の培養特性 ｌｓＰ６ 不良 無色 なし なし ＩＳＰ７ 不良 無色 なし なし 灰色、 ２ｔｌｌ 第１表 続き 色名及び番号はＡ．コーネラップ（Ａ．　Ｋｏｒｎｅｒ
ｕｐ）及びＪ．　Ｈ．’７　ンシャ−　（Ｊ．Ｈ，Ｗａ
ｎｓｃｈｅｒ）、ラインホールド・カラー・アトラス（
Ｒｅｉｎｈｏｌｄ　ＣｏｌｏｒＡｔｌａｓ），Ｒｅｉｎ
ｈｏｌｄ　Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉ
ｏｎ，コペンハーゲン、デンマークカラとった。

第２表　株Ｃ　３９２８０−　４５０−　９の生理的特
性増殖温度　　　　　　　　１０〜３７℃ｐＨ許容範囲
　　　　　　５．５〜９ ＮａＣ　Ｉｔ許容範囲　　　　　１％〜８％ゼラチン液
化　　　　　　　　十 澱粉加水分解　　　　　　　　十 ウレアーゼ　　　　　　　　　＋ ミルク凝固 ペプトン化　　　　　　　　　十 硝酸塩還元 リゾチーム 株Ｃ３９２８０−４５０−９はその形態特性及び細胞の
化学からストレプトミセス（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ
）としての分類は菌のらせん胞子鎖の菌株群形成及びそ
の次の吸湿性によって確認される。

本発明が特別な好ましい菌株ＡＴＣＣ　５３７３０又は
ＡＴＣＣ　５　５　０　０　６の使用あるいはその説明
に充分に答える菌に限定されるものではないことは言う
までもない。他のＢＭＹ−４　１　９　５　０生産性株
あるいはＸ線照射、紫外線、窒素マスタードによる処理
、ファージ暴露などのような通常の手段によって生成さ
せることができる上記閑の突然変異株を含むことを特に
意図している。

抗生物質製造 のＢ　Ｍ　Ｙ ０生産性株、好ましくはスト （ＡＴＣＣ　５　３　７　３　０）又はその変異株又は
突然変異株を水性栄養培地中で液中好気条件下で培養す
ることによってＢＭＹ−４　１　９　５　０を製造する
ことができる。菌は資化性炭素源、例えば蔗糖、乳糖、
ブドウ糖、ラムノース、果糖、マンノース、メリビオー
ス、グリセリン又は可溶性澱粉を含む栄養培地中で増殖
する。栄養培地は魚粉、ペプトン、大豆粉、落花生粉、
綿実粉、とうもろこし浸漬液、酵母エキス又はアンモニ
ウム塩のような資化性窒素源をも含むべきである。必要
ならば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸マグネシ
ウム、炭酸カルシウム、燐酸塩などのような無機塩が添
加される。所望ならば、銅、マンガン、鉄、亜鉛などの
ような微量元素が培地へ添加され、あるいはこれらを培
地の他の成分の不純物として供給することができる。

ＢＭＹ−４　１　９　５　０の製造はＢ　Ｍ　Ｙ−４１
９５０生産性菌の満足な増殖を助ける任意の温度、例え
ば２０〜４０℃で行うことができるが、好ましくは２５
〜３５℃、最も好ましくは２７〜３２℃で発酵を行う。

培地には好ましくは中性ｐＨが用いられかつ該抗生物質
の製造は一般に約７〜約１Ｚ日間行われる。

発酵は、フラスコ内、あるいは種々の容量の実験室用又
は工業用発酵槽中で行われる。タンク発酵を用いようと
するときには、該閑の斜面又は土壌培養菌あるいは凍結
乾燥培養菌を含む少量の培地を接種することによって栄
養ブロス中に増殖形接種物を生成させることが望ましい
。この方法で活性接種物を得た後、ＢＭＹ−４　１　９
　５　０の大規模生産用の発酵タンク培地へ無菌的に移
す。増殖形接種物がその中で生成される培地はＢ　Ｍ　
Ｙ　−４１９５０生産性閑の良好な増殖が得られるよう
なものである限り、タンク内で利用されるものと同じで
あっても、あるいは異なっていてもよい。

発酵中の撹拌は機械的インペラーによって行うことがで
きかつラード油やシリコーン油のような通常の消泡剤を
所要ならば添加することができる。

所望のＢＭＹ−４　１　９　５　０抗生物質の発酵培地
からの単離及びＢＭＹ−４　１　９　５　０の精製は通
常の抽出及びクロマトグラフィー技術によって達成され
る。好ましい単離及び精製方法は下の実施例２に示され
る。

上記の発酵方法でＢＭＹ−４１９５０を得た後、ＢＭＹ
−４　１　９　５　０　　（７−オキソスタウ口スポリ
ン）はスタウロスポリンの酸化によって化学的に合成す
ることもできることが発見された。代表的な酸化は下記
のようである。

２０ｍｌパイアル中の２００ｍｇのスタウロスポリンへ
５ｍｊ！の無水塩化メチレンを大過剰（０．２５ｇ）の
酸化マンガンＣＭｎθ２活性化（Ａ　ｌｄｒ　ｉｃｈ）
　コを添加した。この混合物を２３℃で２０分間音波処
理した。追加のＭｎ０２（０．　２　５　ｇ　）を添加
し、さらに音波処理（２０分間）した。この方法をさら
に４回、２時間にわたって繰返し、この時点で反応混合
物を２３℃で１晩中（さらに１４時間）撹拌させた。

反応混合物へディカライ｝　（Ｏｉｃａｌｉｔｅ）を加
えた後、濾過し、アセトンーメタノール（９：１）で洗
浄し、濃縮した。所望な７−才キソスタウ口スポリンを
真空液体クロマトグラフィーで精製した後、逆相（Ｃ，
．）ＨＰＬＣで精製して５　ｍｇの精製物を得た。

ＢＭＹ−４　１　９　５　０の物理化学的性質ＢＭＹ−
４　１　９　５　０の物理化学的性質は下記の通りであ
る。

外観：黄色無定形固体 分子式：　Ｃ　２８Ｈ　２，Ｎ　−０　４分子量：４８
０ 質量スペクトル： 紫外線スペク トル （Ｍ＋Ｈ）“イオン４８１ 〔フィニンガン４５００シングル・ タアドラポール・マス・ス ベクト口メーター（Ｆｉｎｎｉｇａｎ ４５００　Ｓｉｎｇｌｅ　ＱｕａｄｒａｐｏｌｅＭａｓ
ｓ　Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ）］：ヒューレットーパ
ッカード （Ｈｅｗｌｅｔ−Ｐａｃｋａｒｄ）　（ＨＰ）８４５２
Ａダイオード・アレー・スペ クト口フォトメーター （Ｄｉｏｄｅ　Ａｒｒａｙ　Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｍｅ
ｔｅｒ）（濃度０．２ｍｇ／２０−メタノ ール） 中性：　４２０ｎｍ（６５）　、３７２ｎｍ（８１）　
、３３７ｎｍ肩、３１８ｎｍ　（８０７）、３０８ｎｍ
肩、２８８ｎｍ　（４４７）、２６０ｎｍ　（３７４）
、２４０ｎｍ（６７１）３６０　ＭＨｚ　’Ｈ−ＮＭＲ
　：ブルカー（Ｂｒｕｋｅｒ）モデルＡＭ３０００分光
計。ジュアル（Ｄｕａｌ）炭素一プロトンプローブ、５ ｍＩＴｌＯ 溶剤：　ｄ　６−ＤＭＳＤ 観察された化学シフト（ｐｐｍ）　： １１．０１　（ｓ，ＩＨ）．　　９．１９　（ｄ，ＩＨ
）９、０６　（ｄ，ＩＨ），　８．０１　（ｄ，ＩＨ）
，７．７０　（ｄ，ＬＨ），　７．５６　（ｍ，ＩＮ）
，７．４７　（ｍ，ＩＮ），　７．３９　（ｍ，ＩＮ）
，７．３１　（ｍ，ＩＨ），　６．７４　（ｍ．ＩＨ）
．４．１０　（ｍ，ｉｌｌ），　３．２２　（ｓ，３日
），２．３２　（ｓ，３Ｈ）．　１．９６　（ｍ，ＩＨ
），１、７５　（ｍ，ＩＨ），　１．４０　（ｓ，３Ｈ
）。

溶解度：ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）　、テトラ
ヒド口フラン（ＴＩＩＦ）　、ＣＨＣＩ　３−Ｃｌ３０
１｛（２：１　ｖ／ｖ）に可溶。

呈色反応：ヨウ化白金酸に対して紫色陽性Ｒｆ値：シリ
カゲル６０　ＴＬＣ［メルク個ｅｒｋ）］　　；［：Ｈ
［：Ａ　３　（：Ｈ３０Ｈ（９：１　ｖ／ｖ）　：　０
．　４２。ＴＨＦ：０．　２０ｏワットマン（Ｗｈａｔ
ｍａｎ）ＭＫ　Ｃ＋ａ：０、ＬＭ　ＮＨ４０ＡＣ　ＴＨ
Ｆ（１’ｌ　ｖ／ｖ）’　０．２５ｏＢＭＹ−４　１　
９　５　０の特性に基づいて、該抗生物質は構造式 Ｈ を有する新規化合物７ オキソスタウ口スポリン であると決定された。

生物学的活性 ＢＭＹ．−４　１　９　５　０は標準生体外スクリーニ
ング試験で抗菌活性を示すことがわかった。例えば、て
６．２５μｇ／ｍ１、エンテロコックス・ファエカリス
　（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｆａｅｃａｌｉｓ）　
Ａ　２０６８８に対して１２．５μｇ／ｍ１のＭＩＣ　
（最小阻止濃度）を示す。

ＢＭＹ−４　１　９　５　０は、通常の生体外系及び生
体内実験動物腫瘍系で試験するとき、抗腫瘍活性をも示
す。

ＢＭＹ−４　１　９　５　０の抗腫瘍試験のより詳細な
記載を以下に示す。

ＢＭＹ−４　１　９　５　０をネズミ及びヒトの腫瘍細
胞系に対する生体外細胞毒活性について試験した。

生体内では、ネズミの白血病腫瘍モデルに対する活性を
試験しｔこ。生体外では、マイトマイシンＣ及びシスプ
ラチンを参照化合物として使用したが、生体内参照とし
てはエトポシド（ＶＰ−１６）を用いた。

８１６−ＦＩＯ（ネズミ黒色＠）及びＨＣＴ１１６　（
ヒト結腸癌細胞クローン）細胞をコンプリート・マッコ
イ培地（Ｃｏｍｐｌｅｔｅ　ＭｃＣｏｙｓ　Ｍｅｄｉａ
）で培養した。この培地はマッコイ　（ＭｃＣｏｙｓ）
　　５　Ａ培地４　２　（ｌｉｔ’＋水６ｍｌ中の５０
０ｍｇの炭酸水素ナトリウム、Ｌ−セリン６．５６ｍｇ
，Ｌ−アスパラギン１．　５　ｍｇ、水２ｄ中の８　２
．　４　ｍｇのピルビン酸ナトリウム、必須アミノ酸〔
５０Ｘ、ギブコ（Ｇｉｂｃｏ）］６．２５ｍｊ！、非必
須アミノ酸［１００Ｘ、ギブコ（Ｇｉｂｃｏ））　３．
　０　ｍｌ，　３　ｍｌのし−グルタミン（２００ＭＭ
）　、３艷のＭＥＭビタミン〔ギブコ（Ｇｉｂｃｏ）　
］、ペニシリン／ストレプトマイシン〔ギブコ（Ｇｉｂ
ｃｏ）］６．２５ｍｌ及び５０ｒｄの熱不活性化、画定
胎児子牛血清からなる。

両細胞系を対数期細胞増殖中に採取し、１５０μｌ培地
中３６００細胞を９６ウエルミクロタイタープレートの
各ウエル中に入れた。空気９５％、二酸化炭素５％加湿
インキュベーター中で３７℃で２４時間インキユベーシ
ョンして細胞をプレートヘ付着させた後、試料／参照薬
品の５０μｌをウエルの最上列の１２のうちの１１へ入
れるが、１２番目には５０μｌの培地を入れる。薬品／
培地をプレートの８ウエルを下へ逐次希釈（４倍希釈）
する。薬品／培地の存在下で細胞を次に７２時間インキ
ユベートする。１０％ホル７リンで固定した後、薬品で
死んだ細胞をプレートから洗浄除去するが、生存細胞は
０．　０　０　７　５％クリスタルバイオレットで染色
される。乾燥後、染着物を１０％エタノール及び１％酢
酸で処理し、プレートをダイナテク（Ｄｙｎａｔｅｃｈ
）　ＭＲ　６　０　０プレート読み機で定量化し、ＩＣ
ｓｏ値（５０％の細胞の死又は増殖阻止が起こる薬品濃
度）を計算する。下表はＢＭＹ−４　１　９　５　０及
び標準薬品マイトマイシンＣ及びシスプラチンについて
測定されたデータを示す。

生体外抗腫瘍活性（ＩＣ，。μｇ／ｍｌ！．又は希釈）
薬品　　Ｂ１６−ＦＩＯ　　ＨＣＴ−１１６ＢＭＹ−４
１９５０　　　　０．９８μｇ／ｍｆ　　　Ｏ．２４ｕ
ｇ／ｍｆシスプラチン　　　３．９　ｔ−ｔｇ／−１５
．６　ｔｔｇ／ｍｌマイトマイシンＣ　　Ｏ．９８μｇ
／ｍｌ．０．９８μｇ／一ＢＭＹ−４　１　９　５　０
の生体内活性をネズミ白血病腫瘍系で測定した。雌ＣＤ
Ｆ，マウスを、１０６個のリンパ球白血病Ｐ３８８細胞
を含む希釈腹水０．５ｍｉｌ’で腹腔内接種した。１０
匹のマウスは未処理であったが、この群の中間生存期間
は１０日であった。各４匹のマウス３群を、腫瘍移植の
１、２、３、４及び５日後にＢＭＹ−４　１　９　５　
０で処理した。ＢＭＹ−４　１　９　５　０は初めにＤ
ＭＳ○、Ｔｗｅｅｎ８　０及び緩衝食塩水に溶解した後
、腹腔内投与した。１８及び６ｍｇ／ｋｇ／日で処理し
た群は薬品誘発毒性を受け、全マウスが７日前に死亡し
た。２ｍｇ／ｋｇ／日を投与された第３群は中間生存期
間が１３日であった。かくして％Ｔ／Ｃ　（薬品処理群
の生存期間／未処理対照群の生存期間×１００）は１３
０％であった。このネズミ腫瘍試験の抗腫瘍活性の基準
は１２５％以上の％Ｔ／Ｃである。かくして、ＢＭＹ−
４　１　９　５　０はＰ３８８８ネズミ白血病腫瘍モデ
ルに於ける抗腫瘍活性の基準を満たしている。

治療的使用 上述のように、ＢＭＹ−４　１　９　５　０は抗菌活性
、ような細菌に対する活性を示す。

従って、本発明は、ＢＭＹ−４　１　９　５　０に感じ
やすい微生物感染の治療法であって、宿主、例えば温血
噛乳類へ、かかる治療が必要なときに、かかる感染を治
療するのに充分な量のＢＭＹ４１９５０又はその製剤組
成物を投与することを含む治療法を提供する。

ＢＭＹ−４　１　９　５　０は啼乳動物の悪性腫瘍に対
する抗腫瘍活性をも示す。

本発明は、もう１つの面に於て、ＢＭＹ４１９５０に感
受性の悪性腫瘍にかかつている晴乳動物宿主の治療法で
あって、該宿主へ腫瘍抑制量のＢＭＹ−４　１　９　５
　０又はその製剤組成物を投与することを含む治療法を
提供する。

さらにもう１つの面に於で、本発明は、製剤上受容でき
る不活性担体又は希釈剤と組み合わせ有効な抗菌又は腫
瘍抑制量のＢＭＹ−４　１　９　５　０を含む製剤組成
物を提供する。かかる組成物は他の抗菌剤又は抗腫瘍剤
を含むことができかつ所望な投与ルートのために適当な
任意の形に作ることができる。かかる組成物の例には、
錠剤、カプセル、丸剤、散剤及び穎粒のような経口投与
用の固体組成物、液剤、懸濁液、シロップ又はエリキシ
ルのような経口投与用液体組成物及び滅菌溶液、懸濁液
又はエマルジョンのような非経口投与用製剤が含まれる
。これらの組成物は、使用直前に滅菌水、生理的食塩水
又は他の滅菌注射用媒質に溶解させることができる滅菌
固体組成物の形で製造することができる。

抗菌剤として使用するためには、ＢＭＹ４１９５０又は
その製剤組成物を、活性成分の濃度が処理される特別な
菌に対する最小阻止濃度より高いように投与する。

抗腫瘍剤として用いるためには、ＢＭＹ４１９５０又は
その製剤組成物をＥＰ　２３８．０１１号に記載されて
いる化合物ＵＣＮ−０　１と実質的に同じ方法で投与す
ることができる。与えられた噛乳類宿主に対するＢＭＹ
−４　１　９　５　０の最適投与量及び投与法は当業者
が容易に確かめることができる。勿論、用いられるＢＭ
Ｙ−４　１　９　５　０の実際の投与量は調合されるそ
の組成物、投与形式及びその投与部位、宿主及び治療さ
れる疾病によって異なることは言うまでもない。薬品の
作用を変化させる年令、性別、体重、食事、投与時間、
投与ルート、排泄速度、患者の状態、薬品の組み合わせ
、反応感受性及び病気の重篤度を含む多くの因子を考慮
に入れる。

下記の実施例は説明のためのみのものであり、本発明の
範囲を限定するためのものではない。ヌートリソイ　（
Ｎｕｔｒｉｓｏｙ）は米国イリノイス州デカター（Ｄｅ
ｃａｔｕｒ）のアーチャーズ・ダニエルズ・ミドランド
・カンパニー　（Ａｒｃｈｅｒｓ　Ｄａｎｉｅｌｓ　Ｍ
ｉｄｌａｎｄＣＯ，）から発売されている大豆粉である
。ファ−マメディア（Ｐｈａｒｍａｍｅｄ　ｉａ）は米
国テキサス州フオートウォースのバッキー・オイル・シ
ード・プロダクッ・カンパ−−　−　（Ｂｕｃｋｅｙｅ
　Ｏｉｌ　Ｓｅｅｄ　ＰｒｏｄｕｃｔｓＣｏ．）から市
販されている綿実内胚乳粉である。

Ｓ．　Ｊ．　澱粉〔スタクリブス（Ｓｔａｃｌｉｐｓｅ
）　　Ｊ−ＵＢ＃扮〕は米国イリノイス州デカター（Ｄ
ｅｃａｔｕｒ）のＡ，　Ｅ．ステーリー・マヌファクチ
ャリング・カンパニー　（　Ａ，Ｅ．Ｓｔａｌｅｙ　Ｍ
ａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ　Ｃｏ，　）が発売している
とうもろこし澱粉である。

実施例１ （ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　　ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒ
ｅｕｓ）株Ｒ１００６９（ＡＴＣＣ　５　５　０　０　
６）を保持し、試験管内のＣａＣＯ３で補充された酵母
エキスー麦芽エキス寒天の寒天斜面上に移した。この培
地はデキストロース４．０ｇ，酵母エキス４．０ｇ、麦
芽エキス１０ｇ１炭酸カルシウム１．５ｇ及び寒天２０
ｇと１１にするための蒸留水とからなる。おのおのが移
入された寒天斜面を２８℃で５〜７日間インキユベート
した。生産期の接種物をつくるため、斜面培養からの表
面増殖菌を、蒸留水１ｌにしたセレロース３０ｇ１ファ
ーマメディア（Ｐｈａｒｍａｍｅｄｉａ　，綿実内胚乳
粉）１０ｇ，ヌートリソイ　（Ｎｕｔｒ　ｉｓｏｙ，大
豆粉）１０ｇ、炭酸カルシウム３．０ｇからなる滅菌培
地１　０　０ｍｆを含む５　０　０ｍｌのエルレンマイ
ヤーフラスコへ移した。この増殖形培養物を２５ｏｒｐ
ｍにセットしたロータリーシェーカーで２８℃で４８時
間インキユベートした。この増殖形培養物５−を、蒸留
水で１ｌにしたＳ．Ｊ．澱粉（とうもろこし澱粉）　６
０ｇ、セレロース１０ｇ、ヌートリソイ　（Ｎｕｔｒｉ
ｓｏｙ）　　１　０　ｇ，デヒ゛ツタード・ブリュワー
ズ（Ｄｅｂｉｔｔｅｒｅｄ　Ｂｒｅｗｅｒ’ｓ）酵母５
ｇ，硫酸第一鉄７水化物１ｇ、硫酸アンモニウムｌｇ、
塩基性燐酸アンモニウムＩｇ及び炭酸カルシウム１０ｇ
からなる生産培地１００１１１１をおのおのが含む５　
０　０ｍｊ２のエルレンマイヤーフラスコ中へ接種した
。この生産培養物をロータリーシェーカーで２８℃でイ
ンキユベートし、回転速度を２５Ｏｒｐｍにセットした
。最適生産は一般に２１６〜２６４時間で起こった。

実施例２ 溶剤は使用前に再蒸留しなかった。メタノール、酢酸エ
チル、クロロホルム、アセトン及びエチルエーテルはＡ
ＣＳ試薬等級であった。水とはバーンスデッド・ナノピ
ュア（Ｂａｒｎｓｔｅａｄ　Ｎａｎｏｐｕｒｅ）　ＩＩ
システム中を通した自家用（ｉｎ−ｈｏｕｓｅ）脱イ才
ン水である。テトラヒド口フランはＢ＆ＪブランドＨＰ
ＬＣ等級溶剤であった。酢酸アンモニウムはフィッシャ
ー　（Ｆｉｓｈｅｒ）　ＨＰＬＣ等級であった。

ブロス濾過 全発酵ブロスをＤｉｃａｌｉｔｅ（ｓｐｅｅｄｐｌｕｓ
）濾過助剤含有ソーン（ｓｅｗｎ）フィルターバックで
ライニングされた１２′　トルハースト・ラボラトリー
・センタースラング・セントリフユーガル・フィルタ０
ユニット　（Ｔｏｌｈｕｒｓｔ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ
　ＣｅｎｔｅｒｓｌｕｎｇＣｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ　Ｆ
ｉｌｔｅｒ　［Ｊｎｉｔ（Ｍｏｄｅｌ　ＩＢ１５．Ａｒ
ｎｅｔｅｋ，！ｎｃ．）　］で濾過した。

薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ） シリカゲル６０Ｆ−２５４プレート（ＢＭ，　ｒｅａｇ
ｅｎｔｓ，Ｃａｔ．　５７６５　、５ｃｍＸ　１　０ｃ
ｍＸ０．２　５ｍｍ厚》で正相ＴＬＣを行った。逆相Ｔ
ＬＣはワットマン（Ｗｈａｔｍａｎ）ＭＫＣ．．プレー
ト　（Ｃａｔ．　４８０３−１１０　、０．　２　ｍｍ
厚）で行った。プレートは、キャップ付きワットマン円
筒形ジャー及び１０ｍｆの溶離液で展開した。展開、風
乾したプレートを２５４及び２６６ｎｍ紫外線で可視化
した。正相ＴＬＣプレートもアルカロイド用ヨウ化白金
酸噴霧試薬で可視化した。

真空液体クロマトグラフイ−（ＶＬＣ）ＶＬＣ装置は封
入ガラスディスク（Ｍポロジティ、１　０−１　５μ）
、真空用側ホース及び受器フラスコ取付け用下部２　４
／４　０ジョイントを含むブフナー漏斗（Ｋｏｎｔｅｓ
，　Ａｒｔ，　Ｋ−９５４１００）からなる。

漏斗に吸着剤をドライ充填し、充分な量の最小極性溶出
溶剤を真空下に吸い込んで、密に充填した高さ５ｃｍの
吸着剤床を形成させた。

試料は、予め吸着させて調製された漏斗へ装填してもよ
く、あるいは最小極性溶出溶剤の溶液で装填される。

同質溶離液にて所定容量溶出するか、あるいは溶離液の
極性を増加して段階勾配で溶出する。各容量の溶出溶媒
使用の後、漏斗は吸引乾燥する。

半分取ＨＰＬＣ 下記の構成部品を用いてＨＰＬＣ装置をつくった。ウォ
ーターズ・アソシェーツ（ＷａｔｅｒｓＡｓｓｏｃｉａ
ｔｅｓ）モデル５９０ソルベント・デリバリー０システ
ム（Ｓｏｌｖｅｎｔ　Ｄｅｌｉｖｅｒｙ　Ｓｙｓｔｅｍ
）ポンプ、３２０ｎｍにセットしたクナバー（Ｋｎａｖ
ｅｒ）モデル８７可変波長検出器、ウォーターズ・アソ
シエーツ（ＷａｔｅｒｓＡｓｓｏｃｉａｔｅｓ）モデル
Ｕ６Ｋ注入器、ヒース（Ｈｅａｔｈ）モデルＳＲ−２　
０　４ストリップ・チャート・レコーダー、ワットマン
・パーティシル（Ｗｈａｔｍａｎ　Ｐａｒｔｉｓｉｌ）
　　１　６　０　Ｄ　Ｓ　−　３カラム（１０ｍｍＸ５
０ｃｍ）。各装置を３１６ステンレス鋼チューブ（外径
１．　６　ｍｍ、内径０．２３１１１［Ｄ）で連結した
。

溶離液を４−／分でポンプ輸送した。

単離： 抽出 全ブロス（１　０　Ｉ！＞を８００ｇのＤｉｃａｌｉｔ
ｅ濾過助剤を用いて遠心分離濾過した。菌糸マットをテ
トラヒド口フラン（８β）中に３時間懸濁し、２４ｃｍ
ブフナー漏斗（Ｃｏｏｒｓ　Ｎｏ．　１　１　）を通し
て濾過し、固体を追加の２１のアセトンで洗浄した。

有機相を合わせ、減圧下で蒸発して残留物３３ｇを得た
。

濾液を、分液別の漏斗でＴＨＦ　（：ｌ）とエチルエー
テル（６ｎ）との混合物で１回抽出した。

有機層を減圧下で溶剤を除去して４００ｍｇの残留物を
得た。濾液を酢酸エチル（２１）で第２回の抽出を行い
、濃縮後２６６ｍｇの残留物を得た。

上記抽出法で得た３つの粗製残留物をさらに精製するた
めに合わせた。

酸一塩基抽出 粗製固体（３３．７６ｇ）を０．　５　Ｍ　Ｈ［［　（
ｐＨ１．　５　）２５０ｍｊ！に溶解し、この酸性水層
を分液の漏斗で１　５　０ｍｌずつのクロロホルムで３
回抽出した。有機層を合わせ、真空中で濃縮して４．　
０　４　ｇの残留物を得た。

水層をアンモニア水でｐＨ９．５〜１０に調節した。

１５０ｄずつのクロロホルムでさらに３回洗浄して、有
機層を合わせて濃縮した後、１．　１　１　ｇの残留物
を得た。

第１回ＶＬＣ一段階勾配 ３　０　ｍｌＫｏｎｔｅｓ焼結ガラス漏斗に、通常の方
法で、Ｌｉｃｈｒｏｐｒｅｐ　　Ｓｉ　６０　、１５−
２５μ（ＥＭ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ａｒｔ．９３３６）　
　１　６　ｇを充填した。塩基性ｐＨでのクロロホルム
抽出物（１．１１ｇ）を追加の３ｇの吸着剤上に予め吸
着させ、クロロホルムスラリーとして漏斗に装填した。

下記の容量及び組成の溶離液から９分画が得られた。

分画Ｎｏ　　溶離液容量　溶離液組成　　残留物重量１
　　　　１００　ｍｌ［：Ｈ［：Ｉｌ３１７１　ｍｇ２
　　　　１００　ｍＲ　　　ＣＨＣｊ！　３　　　　　
　　３２　ｍｇ３　　　　１００　ｍｊｉ！　　　ＣＨ
［：ｆ　３１％ＭｅＯＨ　　　１３　ｍｇ４　　　　１
００　ｄ　　　ＣＨＣｊ’　３−１％ＭｅＯＨ　　　５
４　ｍｇ５　　　　１００　ｒｄ　　　ＣＨ（［　３−
２％ＭｅＯ８　　２０８　ｍｇ６　　　　１００　ｍｉ
！　　　ＣＨＣｊｌ！　３−２％ＭｅＯＨ　　　４３　
ｍｇ７　　　　１００　ｍｌ［：ＨＣｊ！　３−２％Ｍ
ｅＯＨ　　　２４　ｍｇ８　　　　２００　ｒｎｆ　　
　ＣＨ（［　３−５％Ｍｅ［ｌＨ　　１０９　ｍｇ９　
　　　２００　ｍｌ［：ＨＣＡ　３−５０％ＭｅＯＨ　
　２８９　ｍｇＴＬＣ分析の結果、分画３と４がＢＭＹ
４１９５０の特性をもつ黄色蛍光物質を含んでいたので
これらを合わせた。

第２回ＶＬＣ １５ｍｌのＫｏｎｔｅｓ焼結ガラス漏斗に７．５ｇのし
ｉｃｈｒｏｐｒｅｐ　　Ｓｉ　　６０、　１５−２５μ
　（ＥＭ　　Ｓｃｉｅｎｃｅ，　　Ａｒｔ，９３３６）
を充填した。黄色蛍光物質（６７ｍｇ）を含む分画を５
ＩｎＩ！の酢酸エチルに溶解し、漏斗の頂部へ装填した
。所望の黄色帯を目で見ながら溶出し、従って、 分画を下記のように分けた。

１　　　　　１００ｒｎｌＥｔＯＡｃ　　　　　　　３
９＋ｎｇ２　　　　　７５ｍｌ　　　εｔＯＡｃ　　　
　　　　２０　ｍｇ３　　　　　１００ｍｊ！　　　Ｅ
ｔＱＡｃ　　　　　　　１９ｍｇ第２分画がＴＬＣで黄
色蛍光物質を有することを示した。

ＨＰＬＣ精製 ＢＭＹ−４　１　９　５　０　（２　０ｍｇ）を含む粗
分画部を０．３ｍｌのＴＨＦに溶解し、０．　２　Ｍ　
ＮＨ．ＯＡｃ−ＴＨＦ（１　：　１）流速４−／分で平
衡になっているＷｈａｔｍａｎ　Ｐａｒｔｉｓｉｌ　１
　０　０　Ｄ　Ｓ　−　３カラム（５０ｃｍＸ１０ｍｍ
）上へ注入した。２種の青色蛍光物質が８．７分及び１
３分で溶出した後、Ｂ　Ｍ　Ｙ　−　４１９５０が１７
分で２つの分画にわたって溶出した。これらの分画を集
め、２５ｍｌずつのクロロホルムで２回抽出し、クロロ
ホルム層を合わせ、真空中で濃縮乾固してＢＭＹ　＝４
　１　９　５　０　（１．　８ｍｇ）を得た。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を有するＢＭＹ−４１９５０と称する化合物。 ２、液中好気条件下で資化性炭素及び窒素源を含む水性
   栄養培地中で￥ストレプトミセス￥・￥スタウロスポレ
   ウス￥（￥Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ￥￥ｓｔａｕｒｏ
   ｓｐｏｒｅｕｓ￥）のＢＭＹ−４１９５０生産性株を該
   培地中で該菌によって実質的な量のＢＭＹ−４１９５０
   が生産されるまで培養すること及び培地から共生産物質
   を実質的に含まないＢＭＹ−４１９５０を回収すること
   を含む式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を有するＢＭＹ−４１９５０の製造法。 ３、該菌が￥ストレプトミセス￥・￥スタウロスポレウ
   ス￥（￥Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ￥￥ｓｔａｕｒｏｓ
   ｐｏｒｅｕｓ￥）ＡＴＣＣ５５００６、あるいはそのＢ
   ＭＹ−４１９５０生産性突然変異株又は変異株である請
   求項２記載の製造法。 ４、製剤上受容できる不活性粗体又は希釈剤と組み合わ
   せて有効抗菌量のＢＭＹ−４１９５０を含む製剤組成物
   。 ５、製剤上受容できる不活性担体又は希釈剤と組み合わ
   せて有効腫瘍抑制量のＢＭＹ−４１９５０を含む製剤組
   成物。 ６、菌感染に冒された動物宿主へ有効抗菌量のＢＭＹ−
   ４１９５０を投与することを含む菌感染に冒された動物
   宿主を治療する方法。 ７、悪性腫瘍に冒された哺乳類宿主へ有効腫瘍抑制量の
   ＢＭＹ−４１９５０を投与することを含む悪性腫瘍に冒
   された哺乳類宿主を治療する方法。 ８、￥ストレプトミセス￥・￥ヒグロスコピクス￥（￥
   ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ￥￥ｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃ
   ｕｓ￥）のＢＭＹ−４１９５０生産性株を液中好気条件
   下で資化性炭素及び窒素源を含む水性栄養培地中で、該
   培地中で該菌によって実質的な量のＢＭＹ−４１９５０
   が生産されるまで培養すること及び共生産物質を実質的
   に含まないＢＭＹ−４１９５０を培地から回収すること
   を含む式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を有するＢＭＹ−４１９５０の製造法。 ９、該菌が￥ストレプトミセス￥・￥ヒグロスコピクス
   ￥（￥ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ￥￥ｈｙｇｒｏｓｃｏ
   ｐｉｃｕｓ￥）株Ｃ３９２８０−４５０−９（ＡＴＣＣ
   ５３７３０）あるいはその変異株又は突然変異株である
   請求項８記載の製造法。 １０、資化性炭素及び窒素源を含む水素栄養培地中で培
   養するとき回収可能な量の抗生物質ＢＭＹ−４１９５０
   を生産することができる￥ストレプトミセス￥・￥ヒグ
   ロスコピクス￥（￥ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ￥￥ｈｙ
   ｇｒｏｓｃｏｐｉｃｕｓ￥）株Ｃ３９２８０−４５０−
   ９（ＡＴＣＣ５３７３０）の生物学的純粋培養菌。