JPH03206890A

JPH03206890A - 抗生物質ｔａｎ―１２５４及びその製造法

Info

Publication number: JPH03206890A
Application number: JP2000831A
Authority: JP
Inventors: Masayuki Muroi; 室井　正之; Seiji Hakoda; 箱田　聖二; Tsuneaki Hida; 飛田　恒明
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1990-01-06
Filing date: 1990-01-06
Publication date: 1991-09-10

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】産業上の利用分野本発明は、真菌感染症の治療剤として有用な新規抗生物
質ＴΔＩｆ−１２５４及びその塩ならびにそれらの製造
法に関する。

従来の技術抗生物質１゛ＡＮ−１２５４の紫外線吸収スペクトル、
赤外線吸収スペクトル、＋１４および１３Ｃ核磁気共鳴
スペクトル、分子式および塩酸加水分解物のアミノ酸分
析を指標として既知抗真菌化合物との異同を調べたとこ
ろ、近縁の化合物は見出されなかった。

発明か解決しようとする課題近年、癌化学療法剤、免疫療法剤、副腎皮質ホルモン剤
の繁用なとによる生体内免疫能の低下や抗菌剤投与によ
る菌交代現象等により、深在性の真菌症か増加し医療の
而で大きな問題となりつ＼ある。深在性或いは表在性の
真菌症に対してはポリエン系抗生物質、フルシトシン、
イミタゾール系抗真菌剤などによる化学療法か行われて
いるが、従来の抗真菌性物質は毒性（副作用）か強いも
のか多く、またそれらを長期あるいは大全に投与するこ
とによる起因菌の変化あるいは耐性菌の出現なとは現在
の真菌感染症治療医学分野で大きな問題となっている。

上記のように真菌感染症に対する治療剤は未だ極めて不
満足なものであり、当分野では、常に毒性（副作用）が
弱く、新規骨格を有し、新しい生物活性を示す抗生物質
、あるいはそれらを合成するための中間原料が求められ
ている。

課題を解決するための手段本発明質らは多数の土壌試料から微生物を分離し、それ
らの代謝産物から新しい抗真菌剤を得るための探索研究
を行ってきた。その結果、ある種の放線菌が培養物中に
抗真菌活性を有する抗生物質を産生ずることを見出し、
この物質を培養物中から純粋に単離し、その理化学的性
質から、当該抗生物質が新規物質であることを確かめ、
これを抗生物質ＴＡＮ−１２５４と称することにした。

本発明者らは、これらの知見に基づいてさらに研究を重
ねた結果、本発明を完成した。

即チ、（１）本発明ハ抗生物質ＴＡＮ１２５４およびそ
の塩、（２）ストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔ。

ｍｙｅｅｓ）属に属し抗生物質′ｒＡＮ−１２５４を生
産する能力を有する微生物を培地に培養し、培養物中に
該抗生物質を生成蓄積せしめ、これを採取することを特
徴とする抗生物質ＴＡＩＩ−１２５４またはその塩の製
造法および（３）抗生物質ＴＡＮ１２５４を生産する能
力を有するストレプトミセス・エスピー　、ｌ−４０１
に関する。

なお、本明細書において「抗生物質ＴＡＮ１２５４Ｊを
単に［ＴＡＮ−１２５４Ｊと祢することもある。

本発明で使用されるＴＡＮ−１２５４の生産菌としては
、ＴＡＮ−１２５４を産生ずる能力を有するものであれ
ば如何なる微生物でも良いが、たとえば本発明者らが兵
庫県より採取した土壌より分離し、ストレプトミセス・
エスピー　Ａ４０１　（ＳＬｒｅｐｔｏｍｙｃｃｓ　　
ｓｐ、　　Ａ　−／ｌ　Ｏ１）と名付けた菌株またはそ
れに類縁の菌株なとはもつとも有効に用いられる一例で
ある。以後本菌をＡ＝４０１閑と略称することもある。

該閑の形態的特徴および分類培地」−の培養所見はたと
えば次のとおりである。

本閑においては通常の分類培地上で気菌糸が形１戊され
、それらは単純分枝を示し、また胞子形成菌糸は直状を
呈する。胞子は１０個以上連鎖しており、その表面は平
滑で、大きさは０．４〜０．６μｍＸ０．８〜０．９μ
ｍである。通常の分類培地上で胞子のう、鞭毛胞子、菌
核なとの形成は認められない。

本閑の分類培地上の生育状態はつぎのとおりである。と
くに記載しない限り２８°Ｃで２１日間観察した培養所
見である。なお、記載中（）内はカラー・ハーモニー・
マニュアル第４版（コンテイナー・コーポレーション・
オブ・アメリカ１９５８年）による色名の記載である。

（以下余白） Δ−４０１閑の生理的性質は次のとおりである。

（１）生育泥度範囲：８．５〜３２．８°Ｃで生育する
が２６．１〜２８川°Ｃでより良好な生育を示す。

（２）セラチンの液化：陽性（３）スターチ加水分解；陽性（４）脱脂牛乳の凝固・ペプトン化：陽性（５）メラニ
ン様色素の生成：陰性（ペプトン・イースト・鉄寒天培
地およびチロ７ン寒天培ｔｉｌｌ）（６）硝酸塩還元：
陽性（インターナショナル・ストレプトミセス・プロジ
ェクトＮｏ、　８培地）（７）炭素源の利用性（ブリド
ハム・ゴツトリーブ寒天培地）よく利用される炭素源イ／シトール、Ｄ−マンニトール、Ｄ−キンロース、Ｉ
）−グルコース、Ｄ−フラクトース、ラフィノース、Ｌ
−アラビノース、ラムノース利用されない炭素源ラフィノース、シュークロースＡ−４０１閑閑体の塩酸加水分解物中にはｌ−Ｌ−ジア
ミ７ピメリン酸か検出された。このことがら本菌はスト
レプトミセス属に属すると考えられる。Ａ−４０１閑の
形態的特徴、培養所見、生理的性質に基き、本菌をスト
レプトミセス・エスピーと同定し、ストレプトミセス・
エスピー　Ａ４０１　（ＳｔｒｅｐＬｏｍｙｃｅｓ　　
ｓｐ、　　Δ−４０１）と名付けた。本発明に使用され
るストレプトミセス・エスピー　Ａ、−４０１は平成１
年１２月５日から財団法人発酵研究所（ｒＦｏ）に受託
番号ＩＦＯ１４９７７として、また平ｌ戊１年１２月２
０口から通商産業省工業技術院微生物工業技術研究所（
ＦＲＩ）に受託番号ＦＥＲＭ　　１３Ｐ−２６９３とし
てそれぞれ寄託されている。

ストレプトミセス属菌の一般的性状として菌学上の性質
はきわめて変異しやすく、ストレプトミセスしたがって、本閑の性質も上述のとおりに一定のもので
はなく種々の変異株が容易に得られる。しかしこれらの
変異株にあっても抗生物質ＴＡＮ１２５４を生産する性
質を失わないかぎり本発明の方法に使用することができ
る。もちろんそれらの変異か自然の原因に由来するもの
であっても各種変異誘起剤（例えば紫外線，エックス線
，放射線。

ニトロソグアニジン等）を用いて人工的に行なわれたも
のであってもさしつかえない。

本発明の方法において培養に際しては、一般に微生物が
同化しうる炭素源、消化しうる窒素源および無機塩など
を含有させた培地が使用される。

また培地には必要に応じて微量栄養素，発育促進物質，
前駆物質なとの微量有効物質を添加してもよい。一般に
微生物か同化しうる炭素源としてはぶどう糖，しょ糖，
糖みっ，でんぷん、デキストリン。

グリセリンなとがあり、消化しうる窒素源としてハ肉エ
キス、大豆粉，コーンステイープリカーペプトン、カゼ
イン、綿実粕なと、および硝酸塩類アンモニウム化合物
なとの無機窒素化合物などがあり、それらはいずれも有
効に利用される。培養は表面培養法によってもよいが、
深部通気培養法によるのが通常である。深部通気培養法
による場合、培地の性質は中性付近にするのがよく、培
養時の温度は１０〜３０°Ｃ付近、好ましくは１５〜２
８°Ｃに保つのがよい。しかしこれらの培養組成物、培
地の液性、培養温度、攪拌数などの培養条件は使用する
菌株の種類や外部の条件などに応じて好ましい結果が得
られるように適宜調節、選択されることはいうまでもな
い。

本発明のｉ’ＡＮ　　１２５４を培養液から採取するに
は、後述する実施例に示すように当該物質か水溶性両性
物質であることを考慮して、そのような微生物代謝産物
を採取するのに通常用いられる分離、精製の手段が適宜
利用される。例えば、夾雑物との溶解度の差を利用する
方法あるいはクロマトグラフィーなとか中独或いは組合
わせて用いられる。

クロマトグラフィーでＩＴＩいられる担体としＣは、慣
用の無機及び有機の担体、例えば活性炭、／＼イボーラ
スの合成吸着樹脂、イオン交換樹脂、アルミナ、セルロ
ース、イオン交換セルロース、セファデックスあるいは
イオン交換セファデックス等が利用される。

ＴＡＮ−１２５４を培養液から採取する方法を具体的に
例示すると、まず予め遠心分離或いはン濾過等の方法で
分離して得られた培養上浦或いは培養が液のｐＨを弱酸
性として活性炭のカラムに通し、水洗した後、希イソブ
タノール水で溶出する。

活性炭から活性物質を溶出するのに用いられる溶媒とし
ては、この他メタノール水、アセトン水等アルコール類
、ケトン類などの有機溶媒と水との混合溶媒が用いられ
る。溶出液は有機溶媒を濃縮して留去した後、陽イオン
交換樹脂アンバーライトＣＧ−５０（タイプＩ　、　Ｈ
＋型、ローム・アンド・ハース社製、米国）のカラムを
通過させ、水洗後、希酢酸ナトリウム水溶液のような塩
類を含む水溶液で活性物質をカラムから溶出する。

溶出液を濃縮後、合成吸着性樹脂ＭＣＩゲルＣＨＰ−２
０Ｐ（１５０〜３００μｍ、三菱化成工業社製）のカラ
ムに通し、水で展開する。活性画分を集めｐｉ（を弱酸
性（ｐＨ５，５）に調整して濃縮した後、陽イオン交換
セファデックスおよびＳＰセファデックスＣ−２５（Ｎ
ａ”型、ファルマシアｔに製、スウェーデン）のブＪラ
ムクロマトグラフィーに付し、水で展開する。活性画分
を集め、ｐ　Ｉ−１を弱酸性ないし中性に調整して濃縮
、凍結乾燥すると、ＴＡＮ−１２５４の粗粉末か得られ
る。

粗粉末を逆相系の分取高速液体クロマトグラフィー（カ
ラム；　ＹＭＣ−ｐａｃｋ　　Ｓ　　３６３　０ＤＳ（
山村化学研究所５２）、移動相；５％メタノール−０゜
０２Ｍリン酸緩衝液（ｐｉ（６、３）、検出；Ｕ■２１
４　ｎｍ）に付し、シングルピーク（ｔＲ２６分）のフ
ラクションを分取し、濃縮してｐｏを中性（ｐｉ−１７
，０）に調整した後活性炭のカラムに通す。

カラムを水洗した後、希イソブタノール水て溶出し、濃
縮後、エタ／−ルのような該化合物の溶は難い溶媒を加
えるかそのま＼冷所に放置して析出する沈澱を１月収す
ることにより、ＴＡＮ１２５４の白色粉末を得ることか
できる。

このようにして得られたＴＡＮ−１２５４遊離体の物理
化学的性状は次の通りである。

■）外観：白色粉末３）質量分析値（３１ＭＳ法）：ｍ／ｚ３８２（ＭトＨ
）４）分子式：　Ｃ、、Ｈ、、Ｎ　７０゜５）元素分析値
：　（Ｃ，４Ｎ　、８Ｎ　７０　、−　Ｈ、Ｏとして）計算値：Ｃ，４２，１１１−（，５，３０Ｎ、２４．５
５実測値：　Ｃ，４２，０３Ｈ，５，１９Ｎ、２４．５
４６）紫外線吸収スペクトル：入水中＝２２９±３ｒ＋ｍ（Ｅ’％４６６±９０）。

ｍａｘ　　　　　　　　　　　　　　１ｃＩ１１２９７
±３ｒ＋ｍ（Ｅ’％２５０±５０）１ｃｍ λ０．ＯＩＮ塩酸中−２２９±３ｎｉ（Ｅ’％４５６＋
　９０）。

＋ｌａＸ　　　　　　　　　１ｃ１１＋２９６±３ｒ＋
ｍ（Ｅ’％２３４±５０）Ｉｃｎ＋ λ０．０１　ＮＮａ０ＩＩ水中１１８Ｘ２３２±３ｎｍ（Ｅ’％４０４±８０）。

Ｃｌ１１３０２±３ｎｍ（Ｅ’％２３７±５０）１ｃｍ７）赤外線吸収スペクトル：ＫＢｒＢｒ錠剤戸主収を示
す（波数、ｃｍ−リ３４２０、３２４０．１６５０．１６３５．１５９Ｇ、
　１５４０゜１４３５、　１４１０．　１３４０．　　
＋３１５．　１２８５．　１１８０゜１０８５．　１０
？０．　１０１０．　　８００．　　７４５８）’Ｈ核
磁気共鳴スペクトル：３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ、中、δｐｐｍ　：１、７
０（ＩＩＩ、　ｍ）、　２．０５（ＩＩＩ、　ｍ）、　
３．３７（３１１，ｓ）、　３．５７（ＩＩＩ、ｍ）、
　３．６３（２１１，ｍ）、　５．５５（ｉｌｌ、ｄｔ
、Ｊ＝３．５８．２１１ｚ）、　６．９３（２１１，ｂ
ｒ、　ｓ）、　７．３１（ｌｔｌ、　ｓ）、　８．２３
（ＩＩＩ、ｂｒ、ｓ）、　１０．６８（ＩＩＩ、ｄ、Ｊ
＝８．２１１ｚ）、　！１．６４（ｌｔｌ、　ｂｒ、　
）９）１３Ｃ核磁気共鳴スペクトルニア　５ＭＩＩｚ、Ｉ）ＭＳＯ−ｄｅ中、δｐｐｍ　：１
７１．７（ｓ）、　　１７１．４（ｓ）、　１６１．９
（ｓ）、　　１５９．８（ｓ）。

１５３．２（ｓ）、　　１５０．７（ｓ）、　　１２３
．８（ｄ）、　１１４．１（ｓ）９５、０（ｓ）、　　
７０．１（ｄ）、　　５０．８（ｄ）、　　４２．４（
Ｌ）４０．０（ｔ）、　　２８．３（ｑ）１０）溶解性：可　溶・ＤＭＳＯ，アルカリ水難　溶　水、メタノール、酢酸エチル１１）薄層クロマトグラフィー゛担体、ンリカケル６０　Ｆ　２５４（メルク社製西独）１２）高速液体クロマトグラフィー担　体：ライクロスフイア−（Ｌｉｃｈｒｏｓｐｈｅｒ
）１００ＲＰ−１８（ｅ）Ｅｚｚｍ４Ｘ１２５ｍｍ（メルク社製、西独）溶媒系＝７％メタノールー０．０１Ｍリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ６，３）流速：　１．０ｄ／分保持時間（ｔｌ、）：４．８分１３）〒色反応：陽性；ニンヒドリン、エールリッヒ、ブレイブ・リーバ
ツク、ヨード試薬陰性；ドラーゲンドルフ、坂ロ、バートン試薬１４）酸性、中性、塩基性の別：両性１５）アミノ酸分析；化合物ＴＡＮ−１２５４の酸加水
分解物をアミノ酸分析に付すと、グリジンが検出された
。

化合物ＴＡＮ−１２５４は以上の物理化学的性状から、
新規化合物と判断された。

又、当該化合物は両性物質であるので、それ自体公知の
方法で、塩酸、硫酸、リン酸、ギ酸、酢酸。

酒石酸、クエン酸等の無機或いは有機の酸と酸付加塩を
、またナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩　トリ
エチルアミン塩なとの生理学的に許容される塩を形成さ
せることかできる。

次にＴＡＮ−１２５４の生物学的性状について述・＼る
。

抗生物質ＴＡＮ−１２５４の１０００μｇ／ｄ水溶液に
浸漬したろ紙円板（東洋製作断裂、直径８　ｍｍ）を各
種真菌および細菌の自画寒天平板にはりつけ、２８°Ｃ
で所定時間培養後、ろ紙円板のまオ）りに生じた生育阻
止内の直径を第１表に示す。

表中“０”は阻止円の認められなかったことを示す。ま
た培地は、イースト・ナイトロゲン・ベース（デイフコ
社製、米国）にグルコース２％および寒天１．５％を添
加したものを用いた。

第１表抗生物質ＴＡＮ−１２５４の抗菌スペクトル第１表に示
すように抗生物質ＴＡＮ−１２５４は、ある種の真菌類
に対して抗菌力を示す。

さらに、ＴＡＮ　　１２５４を投与ｆｆｔ２００ｍｇ／
ｋｇでマウスに腹腔内投与しても急性毒性は全く認めら
れなかった。

これらのデータから明らかなように１’　Ａ　Ｎ１２５
４は真菌に対して抗菌性を示し、吐乳動物なとに毒性を
示さない抗生物質であると云える。

したがってＴＡＮ−１２５４はヒトおよび家畜、家きん
なとの真菌感染症の治療に用いることが出来る。

この治療用に、′ｒＡＮ−１２５４は公知の製剤化技術
に従って種々の剤形の医薬組成物に処方して用いること
ができる。

′１゛ΔＮ−１２５４をたとえばキャンプイタ感染症の
治療薬として通常＋１１いるには、たとえば１’　Ａ　
Ｎ　−１２５４を生理的食塩水に溶解して注射剤として
非経口的に静脈内、皮下または筋肉内に通常１〜５０　
ｍｇ／　ｋｇ／口、好ましくは５〜２０ｍｇ／　ｋｇ／
口投与する。また経口剤として、抗生物質Ｔ　Ａ　Ｎ−
１２５４を乳糖と混合してカプセル剤、あるいは公知の
方法によって製造される糖衣錠とし、ＴＡＮ−１２５４
として通常１〜ｌ　ＯＯｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは５
〜５０　ｍｇ／　ｋｇ／日投与する。

また、本発明によって得られるＴＡＮ−１２５４は、外
用殺菌剤として用いることができる。たとえば１゛Ａ　
Ｎ　−１２５４を通常０．１−１０重■／容量％、好ま
しくは０．５〜５重１／容里％の濃度で蒸留水などに溶
解した液剤、またはワセリン、う／リンを基剤とし、Ｉ
ｇあたり′ＦＡ　Ｎ１２５４を通常０．２〜１００悄ｇ
１好ましくは１〜２０ｍｇｔ有する軟膏剤として、ヒト
および動物の皮膚あるいは粘膜などの殺菌、消毒に用い
ることかできる。

実施例次に実施例をもってさらに詳細に本発明を説明するが、
これによって本発明か限定されるものではない。パーセ
ントは、特にことわりのないかぎり重量／容量％を示す
。

実施例１３σ容爪の坂ロコルヘンにグルコース２．０％。

可溶性デンプン３，０％、コーンスチープリ力−■。

０％、脱脂大豆粉１．０％、ペプトン０．５％、塩化ナ
トリウム０．３％、炭酸カルシウム０．５％（ｐｉ−１
７調整）からなる培地５００ｄを注入後滅菌し、これに
ストレプトミセス・エスピー　Ａ−４０１（ｌＦｏ　　
１４９７７、ＦＩζＲＭ　　ＢＰ−２６９３）の斜面培
養から１白金耳を接種したのち１２０往復／分の往復振
盪機上２８°Ｃて４８時間培養した。

５０（２Ｆ’ｆｆｉのステンレスタンクに上記培地組成
にアクトコール（消泡剤、代用薬品工業社製）０．０５
％加えた培地３０（２を調製、滅菌し、先に培養した坂
［」コルヘンの全培養液５００ｄをこれに接種して通気
ｆｆ１３０ｆ２／分、攪拌数２８　Ｏｒｐｍで２８°Ｃ
２４８時間深部培養を行い種培養液を得た。

２００ｉ２容ｆｉのステンレスタンクにグルコース０．
５％、テキストリン５％、脱脂大豆粉３．５％炭酸カル
シウム０．７％（ｐＨ７、０）からなる培地１２０Ｑを
調製滅菌したものに前記種培養液６Ｑを接種し、通気ｆ
ｆｉ！２（Ｈ！／分、攪拌数１７　Ｏｒｐｍで１７°Ｃ
，９０時間培養を行った。

実施例２実施例１で得られた培養１（ｔｉＥ（１０５Ｑ）をハイ
フロス−パーセル（ジョーンズ・マンビレ（Ｊｏｈｎｓ
Ｍａｎｖｉｌｌｅ）社製、米国）をｌ濾過助剤として用
いてｌ濾過して得られた１戸液（１００ｃ）のｐＨを５
．５に調整して、活性炭（３１２）のカラムに通過させ
た。

カラムを水洗（１２０した後、８％イソブタノール水（
３ｇ）で活性成分を溶出し、濃縮してイソブタノールを
留去し、約２０ＱとしてアンバーライトＣＧ−５０（タ
イプＩ　、　Ｉ−（＋型、３ρ）のカラムに通した。

カラムを水洗（３，０ｆ２）シた後、０．１Ｍ酢酸すト
リウム水溶液（１５１２）で溶出し、３４Ｑになる迄濃
縮してＭＣＩケルＣＨＰ　−２０Ｐ　（１５０〜３００
μｍ、三菱化成工業社製、■、０ρ）のカラムに通した
。カラムを水で展開し２００ｊ！１２つつ分画し、フラ
ク７ヨンＮｏ、８〜１７を集め（合計２．０Ｑ）、ｐｉ
（５，５に調整して濃縮した。濃縮液（６５ｄ）をＳ　
Ｐ−セファデックスＣ−２５（Ｎａ＋型、ファルマシア
社製、スウェーデン、３００ｄ）のカラムクロマトグラ
フィーに付して水で展開し、５０ｄつつ分画した。フラ
クションＮｏ、　５〜１３を集め（合計４５０ｄ）、ｐ
ｉ−１を６．０に調整した後濃縮、凍結乾燥すると打ｌ
扮末（１，３８ｇ）か得られた。

この粗粉末のうち６８０ｍｇを２回に分けて高速液体ク
ロマトグラフィー（カラム；ＹＭＣ−ｐａｃｋＳ−３６
３０ＤＳ、移動相；５％メタノール０．０２Ｍリン酸緩
衝液（ｐＨ６、３）、流速：２０ｍＱ。

７分）で分取精製し保持時間２６分のピークのフラクシ
ョンを集めて（合計４４０ｍ）、１ＩＯ−になる迄濃縮
し、ｐａｒを７．０に調整して活性炭（１０ｍＱ）のカ
ラムに通した。カラムを水洗（５０ｄ）した後、８％イ
ソブタ／−ル水（１５０ｄ）で活性成分を溶出し、約１
０ｄになる迄濃縮して、エタノールを加え析出してくる
沈澱を１戸数すると、ＴＡＮ−１２５４の白色粉末（３
０５ｍｇ）か得られた。

発明の効果本発明の新規抗生物質ＴＡＮ−１２５４およびその塩は
、真菌に抗菌作用を示し、たとえばヒトおよび他の動物
に経口的、非経口的または外用的に投与することによっ
てこれらの真菌感染症の治療に有利に用いることかでき
る。

【図面の簡単な説明】

第１図、第２図および第３図はそれぞれ実施例２の方法
で得られたｌ’ＡＮ−１２５４の、紫外線吸収スペクト
ル（図中、実線は水中、点線は０．０１Ｎ水酸化ナトリ
ウト水中、破線は０．０１Ｎ塩酸中で測定した紫外線吸
収スペクトルを示す。）。赤外線吸収スペクトルわよび’１１核磁気共鳴スペクト
ルを示す。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）遊離体として次の物理化学的性質を有する抗生物
質ＴＡＮ−１２５４またはその塩１）外観：白色粉末２）分子式：Ｃ＿１＿４Ｈ＿１＿９Ｎ＿７Ｏ＿８３）紫外線吸収スペクトル（水中）： ▲数式、化学式、表等があります▼ ２９７±３ｎｍ（Ｅ１％２５０±５０）４）Ｈ核磁気共鳴スペクトル：３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ＿６中、δｐｐｍ：１．７
０（１Ｈ、ｍ）、２．０５（１Ｈ、ｍ）、３．３７（３
Ｈ、ｓ）、３．５７（１Ｈ、ｍ）、３．６３（２Ｈ、ｍ
）、５．５５（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝３．５、８．２Ｈｚ）
、６．９３（２Ｈ、ｂｒ．ｓ）、７．３１（１Ｈ、ｓ）
、８．２３（１Ｈ、ｂｒ．ｓ）、１０．６８（１Ｈ、ｄ
、Ｊ＝８．２Ｈｚ）、１１．６４（１Ｈ、ｂｒ．）５）＾１＾３Ｃ核磁気共鳴スペクトル：７５ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ＿８中、δｐｐｍ：１７１．
７（ｓ）、１７１．４（ｓ）、１６１．９（ｓ）、１５
９．８（ｓ）、１５３．２（ｓ）、１５０．７（ｓ）、
１２３．８（ｄ）、１１４．１（ｓ）、９５．０（ｓ）
、７０．１（ｄ）、５０．８（ｄ）、４２．４（ｔ）、
４０．０（ｔ）、２８．３（ｑ）
（２）ストレプトミセス属に属し、抗生物質ＴＡＮ−１
２５４を生産する能力を有する微生物を培地に培養し、
培養物中に抗生物質ＴＡＮ−１２５４を生成蓄積せしめ
、これを採取することを特徴とする抗生物質ＴＡＮ−１
２５４またはその塩の製造法。
（３）抗生物質ＴＡＮ−１２５４を生産する能力を有す
るストレプトミセス・エスピーＡ−４０１。