JPH03148221A - 記憶および学習憎進または認知もしくは精神障害治療用のｄ―シクロセリンおよびｄ―アラニン含有組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本出願は、１９８９年３月１５日出願の米国特許出願０
７／３２４．２７９号の部分継続出願である。

発明の分野 本発明＆１臨床神経学り分野に属し、とくに記憶増進な
らびに認知および精神障害の治療用の化合物、組成物お
よび方法に関する。

発明り背景 記憶が関係する状態は多く、それに対する治療１！ｉ！
−たとえば記憶を増進する方ｇ：また（工記憶機能障害
馨治療する方法が研究されている。たとえば、記憶機能
障害は、老化過程ならびにアルツノ・シマー病のような
神経変性疾患に関連している。記憶の損傷はまた、頭部
外傷または多梗塞性痴呆に続いて起こることがある。認
知過程を増強し、記憶および記憶を改善できる多く　ｏ
、ｙ化合物および治療法が検討されてきた。

γことえば、化合物Ｄ−シクロセリ／は、米国特許出願
０７／１２７，１２１号（１９８７年１２月１日出願）
およびｐａｒ／ｒｙｓ　８８　／　０４２４４（１９８
８年１２月１日出願）に記載されているように、認知機
能に改善を与え、認知機能不全の治療に有用であること
が最近発見された。

治療法が検討されている精神状態は多い。現在上布され
ている薬剤は、中枢神経系（ＣＮＢ）に存在するドーパ
ミン作動性受容体にかいてアンタゴニストとして作用す
ると考えられ、たとえばノ・ロペリドールおよびりａル
プａマシンがある。これらの薬剤を工通常、長期に持続
し、時に１工不可逆性となる副作用、たとえば遅発性ジ
スキネシアを誘発する。丁なわち、精神障害の治療の改
善の研究は、作用様式の異なる薬剤の使用に回けられて
きた。

フェンサンクリジンＥｌ−（フェニルシクロヘキシル）
ピペリジン；　ｐａｐ　］　ｈ工公知の全身麻酔薬であ
り、動物用トランキライず−として使用されている。　
ｐａｐは強力な幻覚桑であり、しばしば「ストリート・
ドラッグ」として用いられる。

ＰＣＰ１７）濫用が広がるに及んで、ＰＯＰ−誘発精神
病の発症が増卯してきＣ［Ｃ，Ｖ、Ｓｈｏｗａｌｔｓｒ
ら：Ａｍａｒ、　ｙ、　ｐｓｙｃｈｔａｔ、、　１３４
　：　１２３４（１９７７）］。

ｐａｐ濫用者は、人をぞっとさせることがある離人感を
伴った見かげ上の知覚解離馨経験する。これらり主観的
変化により、ｐａｐは精神分裂病の研究に適当な薬物性
モデルとなっている。ＰＣＰ精神病が精神分裂病に類似
することを示す最も印象的に証拠として、この薬物の使
用者は、その薬物の使用層を知らないと経験の深い精神
病医によっても、精神分裂病と誤診されるという事実が
あるＣ８．Ｈ。

Ｂｎｙｄｅｒ　：　Ｎａｔｕｒθ、２８５：３５５〜３
５６（１９８０）］。

ＰＯＰ　ｔ”！　ＮＭＤＡ受容体をアミステリックに修
飾すると報告されていて（ｐ４．ｅｏら：　Ｂｕｒ、Ｊ
、Ｆｈａｒｍａｃｏ上。

１２３．４６７〜４６８（１９８６）、ＰＣＰの幻覚活
性はそのＮＡＤＭ伝達のアンタゴニストに関連すると推
則されている［　Ｃ，Ａ、　Ｔａｌｎｌｎｉｎｇａら：
５ｙｎａｐｓｅ、　１　：　４９７〜５０４　（１９８
７）ｏグリシン調節部位にかげる作用によるＮＭＤＡ伝
達り促進は内因性Ｐａｐミル様リガンド用に拮抗する（
　ＲｏＱｕｉｒｉｏｎら：　ｐｅｐｔｉｄｅｓ、　５　
：　９６７〜９７３（１９８４）］。また、グリシン修
飾ＮＭＤＡ受容体にかけるグルタミン酸作動作用が精神
分裂病治療への道であろうとも推則されている（　Ｓ、
工。

１１１９ｕｔｃｈら：　Ｃ１１ｎ、Ｎｅｕｒｏｐｈａｒ
ｍ、、　１２：　１〜１３（１９８９））。

Ｄ−シクロセリンは以前から静菌剤として知られていた
（　Ｔｈｅ　Ｍｅｒｃｋ工Ｈｄｅ！、　−Ｔ−ノブラフ
番号２７４７、第１０版、　Ｍｅｒｃｋ　＆　ＱＯ，、
３９５頁（１９８３）参照〕。その作用機構は、細菌細
胞壁内へ導入されるＤ−アラニンと競合することによる
感染微生物り細胞壁合成り阻害が関与するもりと考えら
れている。ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　Ｋ　：！？けるＤ−シク
ロセリンの抗細菌活性はＤ−アラニンによって阻害され
ることも知られている［　□ｏｏｄｍａｎ　＆Ｇｉ１ｍ
ａｎ　：　Ｔｈｅ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ　
Ｂａ５ｉｓ　０ｆＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第７版、
　ＭａＯＭｉｌｌａｎ、　ＮａＷ　ＹＯｒｌｃ。

１２０９頁（１９８５））。

化合物Ｄ−シクロセリンを工、そのＤ型およびＬ異性型
で、動物にかげるＯＮＳ作用も評２７０されてき−１；
　［ｏ、Ｍａｙｅｒ　ら　：　　Ａｒｚｎｅｉｍ、Ｆｏ
ｒｓｃｈ、　　２　１　　（２）二２９８〜３０３（１
９７１））。これらりシクロセリン異性体は、ヒトでり
精神作用および生理作用も検討されている。たとえば、
Ｄ−シクロセリンは健常ヒト対象に５００■／日り用ｔ
を投与すると、わずかに社交性が刺激されるが、精神警
戒性は低下するようであつ７．：　［Ｎ、ｖｏ、１ｔｅ
ｃｈｏｖｓｌｃｙ　：ＡＣｔ、Ｎｅｒ’７．８ｕｐ１３
ｒ、ｅ　７　（３）　：　２６９　（１９６５）”］。

また、］Ｄ−シクロセリを健常志願者に１．０００〜１
．５００５ｗ／日投与したところ、モノアミンオキシダ
ーゼ酵素活性の上昇が認められた〔ｖ。

”／１ｔｅｋら：　Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏ
ｇｉａ、　７　（３）　：２０３〜２１．９　（１９６
５）　］。

］Ｄ−シクａセリは、精神障害の治療剤として臨床試験
によって研究され、精神障害患者に１日５００■の用量
で投与され１．Ｈ（：　Ｇ、　Ｅ、　Ｃｒａｎｅ　：　
ＣＯｍｐｒ。

ｐｓｙｃｈｉａｔ、、　２　：５１〜５３（１９６１）
　］。この臨床試験でを工、５つ症状、不眠、食欲不振
また←８心的緊張の改善が一部り患者に認められたが、
重篤な神経症または精神病を有する患者りこのような薬
物投与への反応を８乏しかった。さらに、Ｄ−シクロセ
リンは、症状誘発による疾患の治療り試みにかいて、精
神分裂病の症状を増悪させるために使用されている［　
Ｊ、　Ｓｉｍｅｏｎら：　Ｃ！Ｏｍｐｒ、ＰＨ１−（！
ｈｉａｔ、、二：８０〜８８（１９７０）］。コレらの
研究で用いられた用量レベルでは、Ｄ−シクロセリンは
、ＮＭＤＡ−ＰＯＰ受容体複合体のグリシン結合部位で
アンタゴニストとして働き、精神病を誘発することによ
ってｐａＰり作用を模倣するもりと思われる。

Ｄ−シクロセリンは結核菌に対する治療用に市販されて
いる。結核菌に対する静菌用量で使用した場合、Ｄ−シ
クロセリン１工、様々な望ましくない副作用を伴う、こ
れ１で知られている最も頻度の高い副作用は神経系に関
連するものである。実際、シクａセリンＱノ使用に際し
てり制限因子はそのＣＮＢ毒性であって、神経および精
神障害り両者が包含される［　ＤｒｕｇＥｖａｌｕａｔ
ｉｏｎ、　７５章。

Ａｍｅｒｔｃａｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　ＡｓａＯＯｌａｔ
ｉＯｎ、　ＱｈｉＣａｇＯ（１９８６）ｌ）Ｄ−シクロ
セリンχ投与されている患者は、うとうと状態、め１い
、頭痛、嗜眠、抑うつ、振戦、構音障害、反射異常亢進
、知覚異常、神経過敏、不安、眩量、記憶喪失２伴う錯
乱釦よび失見当識、不全麻痺、大および小間代性発作、
けいれん、はらびに昏睡を呈することか記録されている
［　ａ、　Ｋ。

ＭｃＥｖｏｙら：　Ａｍｅｒｔｃａｎ　ＨＯｌｌｐｉｔ
ａｌ　Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ　ｓ８ｒ　−ｖｉｃｅ　：　
Ｄｒｕｇ工ｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ、　８：　ｉ　＜Ｓ　
、　ＡｍｅｒｉｃａｎＳｏｃｉｅｔｙ　　ｏｆ　　ＨＯ
Ｉｌｌｐｉｔａｌ　　Ｐｈａｒｍａｃｉａｔｓ、　　　
Ｂｅｔｈｅｓｄａ。

ＭＤ（１９８（５）］。

Ｄ−シクロセリンを用いる治療には、また、他の副作用
も随伴する。結核菌静菌用量を患者に慢性投与する臨床
試験では、Ｄ−シクロセリンは、下痢と口内炎の病相期
を生じることが認められている。下痢の病相期は、菌叢
り細胞産生へりＤ−シクロセリンり干渉による自然の腸
内菌叢り欠失に関連するもりと考えられている、Ｄ−シ
クロセリン投与に＃うこの菌叢欠失作用を逆転させるた
めに、いくつかの試みが行われてきた。γことえば、Ｄ
−シクａセリンσクパラ結核菌に対する抗菌作用はマイ
コバクチンによって逆転された［Ｗ、Ｂ。

Ｂｕｔｔｏｎら：　Ａｎｔｉｏｔ、Ｏｈ８ｍＯｔｈｅｒ
ａｐ７．５　：　５８２〜５８４（１９５５）］。結結
核菌静菌用量）　Ｄ−シクロセリンを投与され、下痢を
起こしている患者に５ｔｒｅｐｔＯＯＯＱｃｕｓ　ｆａ
ｅｃｉｕｍの製剤を与えると、下痢の病相は有意に低減
しｒｓ　ＣＭ、　ＥＯｒｇｉａら：　ｃｕｒｒ。

Ｔｈｅｒａｐ、Ｒｅ８．、３１　（２）　：　２６５〜
２７１（１９８２）］。また、ある種の熟成した発酵チ
ーズたとえばカマンベール筐たはマロワールチーズを用
いて抗生物質投与による菌叢の欠失を回復させる治療法
もよく知られている。

細菌に対するＤ−シクロセリンの成長阻止作用に、Ｄ−
シクロセリンの構造類縁体である化合物、Ｄ−アラニン
によって競合的に逆転されることが明らかにされ７ｅ　
（、Ｔ、　Ｗ、　Ｍｏｕｌｄｅｒら：　Ｊ、　Ｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍ、。

８５ニア０７〜７１１（１９６２））。Ｄ−シクロセリ
ンは、アラニンフセマーゼの競合的インヒビターとして
、天然の基質Ｄ−アラニンよりも１００倍強力に結合す
ることが明らかにされている〔σ、　ＲＱＩＩｆ３ら：
　Ｍｏ１．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、、　２　：　９２〜９
４（１９６６）］。

Ｄ−シクロセリンとアラ二ｙ型化合物υ間り相互作用は
他にも知られている。たとえば、米国特許第４．０３１
．２３１号には、３−フルオａ−Ｄ−アラニン型化合物
たとえば３−フルオ０−Ｄ−アラニンｐよびそのＤ型類
縁体を、３−フルオｏ　−Ｄ−アラニン自己アンダゴニ
ストーインヒビターＴコとえばＤ−シクロセリンと配合
して含有する抗菌組成物が記載されている。

第１図は、各種濃度のグリシンの存在下にｂける’ｒａ
ｐ結合の最大グリシン刺激に対して影響するＤ−シクロ
セリンり濃度な示すグラフである。

第２図（工、各種濃度りＤ−シクロセリンク）存在下に
かけるＴＣＰ結合り最大グリシン刺激に対して影響する
グリシンの濃度７示すグラフである。

発明の説明 認知機能の改善または認知機能障害もしく１工精神障害
Ｑノ処置りための治療方法は、このような治療が指示さ
れる対象ゲ、治療的に有効量のシクロセリン型化合物お
よび治療的に有効量りＤ−アラニンによる併用療法で処
置することによって遠戚される。本明ａｌ書で用いられ
る「併用療法」の語は、シクロセリンおよびＤ−アラニ
ン酸分の連続方式で０）投与ｐよびこれらの２成分の同
時方式でり共投与の両者を包含するものである。認知機
能の改善または認知機能障害処置もしくは抗精神病処置
のためのこれら２成分の共投与は、活性成分として治療
有効量σ】シクロセリン型化合物と治療有効量（１）　
Ｄ−アラニンを含有する医薬組成物によって行うことが
できる。この組成物は１種もしくは２種以上の医薬的に
許容される賦形剤を含有することが好筐しい。主として
治療有効量のシクロセリン化合物と治療有効量のＤ−ア
ラニンからなる医薬組成物がざらに好ましい。治療有効
量のＤ−アラニンｋＺ　Ｄ−アラニンσ〕副作用抑制量
と定義される。Ｄ−アラニン投与によって防止′！！り
は減弱できる望Ｉ　Ｌ　＜　ｒｌい副作用り例１工、異
腸系障害たとえば下痢および腸内菌叢の破壊である。

好ましい種類υシクロセリン化合物をより一シクａセリ
ンである。医薬組成物は治療的に有効な比でＤ−シクロ
セリンとＤ−７２ニンｙａ−含有するもりでなげればな
らない。

「治療的に有効ｒｌ比」の語は、認知機能障害の改善筐
り１工稍神病の治療に有効で、一方間時にＤ−シクロセ
リン単独の使用に伴う望ましくない副作用を低減させる
σ〕に有効な、Ｄ−アラニンとＤ−シクロセリンの相対
量の範囲を意味する。認知機能の改善とを工記憶１″ｒ
Ｓは学習能力の一役的な改善を意味する。認知機能不全
り処置には、神経変性疾患たとえばアルクＩ・シマー病
、加齢に伴う記憶障害′！；は学習欠損の処置を包含す
る。精神障害はＮＭＤＡ−ＰＯＰ受容体複合体υＰＣＰ
部位にかいて作用する内因性りがンドの濃度の上昇に関
連すると考えられる。この内因性リガンドは、リガンド
とＮＭＤＡ−ＰＣ！Ｐ受容体複合体の相互作用が、ＮＭ
ＤＡによって誘発されるイオンチャネルり開放を阻止す
る点でＰＣＰ様り性質を有すると考えられる。本発明り
グリシンＢアゴニストハ、ＮＭＤＡ伝達を増強すること
により、内因性りがノド０作用に拮抗する。内因性リガ
ンドが精神分裂病のような精神障害の原因である限り、
このようなりがンドの作用σつ遮断１工精神病的行動り
低下を生ずるはずである。

とくに、本発明の化合物は、急性また１工漫性のＰＣＰ
誘発精神病の処置に有用であると考えられる。

Ｄ−アラニンとＤ−シクロセリンの治療的に有効は比は
約１：１〜約１００：１の範囲である。

Ｄ−シクロセリンを工、構造式 を有スる４−アミノ−３−イソキサゾＩＪトンである。

この化合物１工りおよびＤ異性体型で存在するが、この
うち化合物Ｄ−シクａセリンがはるかに好ましい。

本発明にを工また、式 で表されるような、上述のシクロセリン化合物り互変異
性型も包含する。

本発明り化合物詳にシエ、上述の化合物のジアステレオ
ーマーを含む異性型、およびその医娯的に許容される塩
が包含される。「医薬的に許容される頃Ｊ　Ｏ）語には
、遊＠酸１り９工遊離塩基リアルカリ金属［および酸性
η口塩を形成させて通常用いられる塩が包含される。シ
クロセリン化合物は塩基性の窒素原子を含有するので、
こりようは塩ｆ工通常、酸性卵塩またを８四級塩である
。塩の性質にはそれが医薬的に許容される塩である限り
とくに制限を工耽い。このような塩の形成に使用できる
酸はもちろん、本技術分野の熟練者にはよく知られてい
る。医薬的に許容される酸性７ＪＯ塩の形成に筐用でき
る酸Ｃｔ）舛には、無機酸たとえば塩酸、硫酸およびリ
ン酸、たらびに有機酸たとえばマレイン酸、コハク酸卦
よびクエン酸がある。他り医薬的に許容されろ塩に１８
、アルカリ金属もしくをエアルカリ土類金属たとえばナ
トリウム、カリウム、カルシウムおよびマグネシウムと
の塩、ｉｙ、＝を工有機塩基ｆことえげジシクロヘキシ
ルアミンと０）塩が包含すｉする。これらの塩をエアべ
て、たとえば適当な酸１ｆこ（工頃基馨相当するシクロ
セリン化合物と反応させることにより、常法で製造でき
る。

本発明に使用されるシクロセリン化合物は文献に記載さ
れた方法で合成できる。たとえば、Ｄ−シクロセリンの
Ｎ−アシル誘噂体カよびシッフ塩基誘導体の合或は、Ｎ
、　Ｐ、　、Ｔｅｎ５ｓｎらによりＪ、　Ｍａｄ。

Ｏｈｅｍ、、　２３　：　６〜Ｂ　（１９８０）Ｋ記載
されている。シクロセリンのＮ、Ｎ’−ジアシル誘導体
の合ｆＥ　ｋＺ　、Ｔ、　Ｃ１［（ｏｗａｒｄにより１
．Ｔ、　ｏｒｇ、　Ｃｈｌｌｌｍ、　、　４６　：１７
２０〜１７２３（１９８１）に記載されている。シクロ
セリンリアルキル誘導体の台底はＯ，Ｈ。

ｓｔａｍｍｅｒ　Ｋ　ＬすＪ、Ｍｅｄ、　ｃｈｅｍ、、
　　１３　（６）　１０１３（１９７０）に記載されて
いる。シクロセリンυＬおよびＤ異性体ならびにその類
縁体の合或はＰＬ、Ａ、　ｐｌａｔｔｎｅｒらによりＨ
ｅ１ｒ、Ｃｈｉｍ、Ａｃｔａ、　４０　：１５３１（１
９５７）に記載されてＬする。Ｄ−アラニンについて４
工多くの市販ルート力あるし、Ｄ−アラニンり製造も多
くの方法が報告されている。

シナプス形質膜（ＳＰＭ）ｔエラット前脳から以前に報
告されたように調製し、保存した［、Ｔ、Ｂ。

ＭＯｎａｈａｎ　＆　、Ｔ、Ｍｉｃｈｅｌ　　：　　Ｊ
、Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ、、　　４８　　：１６９９〜１
７０８　（１９８７）　］。凍結した膜を解凍し、５　
Ｑ　ｍＭ　ｔｒｉｏ　／酢酸塩（ｐＨ７，４）中０．０
４％ｔｒｉｔｏｎ　ｘ　−１００で１：２０に希釈しＴ
こ。３７℃で３０分間インキュベートシタυち、ＳＰＭ
’＆　９５．０００　Ｘｇで１５分間遠心分離した。

ペレット’ｌ　５０　ｍＭ　ｔｒ工８／酢酸頃（ｐＨ７
，４゜ｔｒｉｔｏｎを含でない）中に再＠濁し、５回生
作業でホモジナイズした。膜χ再び前回同様、遠心分離
シタ。ペレットをさらに２回５０　ｍＭ　ｔｒｉｓ　／
酢＃ｌ塩で洗浄し、（ホモジナイズしない）、遠心分離
した。最終のベレツ）　を５０　ｍＭｔｒｔｓ　／酢酸
塩に再懸濁し、ホモジナイズした。

受容体結合検定の一般操作で＆工、１０　ｎＭ　［’Ｈ
］グリシンを適当な濃度り試験化合物に０口え、検定は
水冷ＳＰＭ　Ｏ，２〜０．４　ｎｐを加えて開始させγ
こ。検定←工１．５ｍの遠沈管中で行い、丁べて０）添
η口（工５０　ｍＭ　ｔｒｉ８／酢＃＠、ｐＨ７，４中
４℃で行い、総容ｔを１．０−に調整した。２°Ｃで１
０分間インキュベートしたりち、サンプｋ　Ｙ　Ｂｅｃ
ｌｃｍａｎ　ＭｉＣｒＯ−ｆｕｇｅ１２中１２．０００
　、！ｖ（４℃）で１５分間遠心分離した。上澄液を吸
引し、ペレット化した膜を含む遠沈管の先端を切り取り
、Ｂｅｃｋｍａｎ　ＢＴ８−４５０組織溶解剤０．５−
中、最低６時間、室温で攪拌した。酢酸７−／ｌを含有
する１３ｅｃｋｍａｎ　ＭＰシンチレーションカクテル
（５−）を次に卯え、サンプ／Ｌ／Ｙ　Ｂｅｃｋｍａｎ
　Ｌ８５８００液体シンチレーションカウンターで自動
的に消化効率と計算効率の補正を行い計数した。非特異
的結合を工Ｑ、１ｍＭグリシンの存在下にかいて残留す
る結合と定義され、通常、総結合の２５〜３５優に相当
した。

〔３Ｈ〕グリシンリ８ＰＭに対する結合はスキャツチャ
ードーヒル変Ｉｌｌ’用いて解析し、他の化合物に対す
るＫｉｔ工ａジット−ａグ解析を用いて決定した。計算
釦よび回帰分析は以前に記載されたようにＬｏｔｕｓ　
１２３について開発されたテンプレートを用いて実施し
た。

結　　果　　　　　　　　　　　　Ｋｉ　　（μＭ）グ
リシン　　　　　　　　０．１８ Ｄ−シクロセリン　　　１．９２ Ｌ−シクロセリン　　　〉１００ ［３Ｈ］ｒｃｐ結合な工、以前に報告されているように
ラット前脳（３０〜４５日齢、雄性Ｓｐｒａｇｕｅ　−
Ｄａｗｌｅ７；　８ａｓｃｏ日ｔ、　Ｃｈａｒｇｅｓ、
　ＭＯ）から調製シタＴｒ１ｔｏｎ　ｘ　−１００洗浄
シナプス形質膜（ＳＰＭ）’ｇ用いて実施Ｌ　１＠　［
：　Ｊ、　Ｗ、　ＴｈＯｍａｓ、　Ｗ、　Ｆ、　Ｈｏｏ
ｄ、　Ｊ、　Ｂ。

Ｍｏｎａｈａｎ、　Ｐ、　Ｏ，Ｃｏｎｔｒｅｒａｓ　＆
　Ｔ、　Ｌ、　Ｏ’　Ｄｏｎｏｈｕｅ　：ＢｒａｉｎＲ
ｅ８．．４４２　：　３９６〜３９８　（１９８８）″
ｌＯ検定は、２．ＯｎＭ［３Ｈ］　ＴＣＰ　（４７，１
０１／ｍｍｏｌｅ。

Ｎｅｗ　Ｋｎｇｌａｎｄ　Ｎｕｑｌｅａｒ、　Ｂｏｓｔ
ｏｎ、　ＭＡ　）　ｂよび各種濃度り適当な試験化合物
を認容量０．５−中に含有するインキュベーション液に
８ＰＭ　（０，１５〜０．２５９）　’ｋ　ＩＩＳη口
することによって開始しく添加を８丁べて５　ｍＭＴｒ
ｉｓ　／　ｔｊＭ　酸塩緩衝ｉ、ｐＪ４７．４中で行っ
た）、２５′Ｃで６０分間継続した。次にサンプルを、
予め０６０５％（Ｖ／Ｖ）ポリエチレンイミンで処理し
たガラス繊維フィルターな通して濾過した。フィルター
を洗浄し、放射能を液体シンチレーション分析でθ１１
定した。［３Ｆｌ］　ＴＣＰ結合の刺激を基底特異的結
合の増大としく基底結合＝２５８３±３８１　ＤＭ。

この値は０．６μＭグリシンの存在下に最大４７１２士
７７９　ＤＰＭに増η口した）、６０μＭ　ＰＣＰ存在
下にかげる残余結合を非特異的結合（５６２±３０ＤＰ
Ｍ　）として測定した。基底状態にかける〔３Ｈ〕’ｒ
ａｐの　Ｋｄ　）”！　４４　ｎＭであった。［３ａ″
ｌ　ＴＯＰ結合の刺激０）ＥＣ５ｏ値を工４パラメータ
ー計算法回帰分析を用いて測定した。

Ｄ−シクロセリンは基底［’［（］　Ｔａｐ結合を用量
依存性に、ＫＣ５ｏ　＝　１９．７μＭで刺激した。以
前りデータを工、Ｄ−シクロセリンがＮＭＤＡ会合〔３
Ｈ〕グリシン認識部位と相互作用することを示している
、（Ｋｉ　＝　２．３３±０．２９μＭ）。しかしなが
ら、ＮＭＤＡ認識部位に対する親和性は、ＮＭＤＡ￥ｊ
異的Ｌ−［：３Ｈ］グルタミン酸結合り置Ｆ！８を欠く
こと（ｘｉ＞１００μＭ）ｆｌ”ら明もかはように検知
されなかった。この所見は、Ｄ−シクロセリンがＮＭＤ
Ａ受容体会合グリシン認識部位（以下、「グリシンＢ受
容体という）とり相互作用を介して［３ａ〕Ｔｃｐ結合
を増大させることを示している。しかしながら、Ｄ−シ
クロセリンによって生じる最大刺激ヲ工、グリシンおよ
びＤ−セリンの両者によって生じる刺激よりも有意に小
さかった。

この見かげ上低い効果ｋＸ、Ｄ−シクロセリンが部分ア
ゴニストの性格をもつ可能性を示していて、これ１工以
下り実験によって確認された。第１図に示すように、外
因的に添加したグリシンの非存在下にを工、Ｄ−、シク
ロセリンをエアゴニストの性質？有し、［Ｈ］　ＴＣＰ
結合を、グリシン単独で誘発される刺激の最大４０〜５
０％まで上昇させる。しかＬ　ｒＬがら、各種！　［Ｉ
）グＩＪ　シｙ　（０，１〜０．６　ｐＭ）の存在下に
（工、Ｄ−シクロセリンは見かけ上アンタゴニストの性
質を有し、グリシン刺激の最大レベル馨低下させる。こ
れらのデータは、グリシン単独によって誘発される最大
刺激の４０〜５０％に無症候性に接近するＤ−シクロセ
リン用量曲線ｕＹ与え（数種の固定＃Ｉ！度りグリシン
Ｏ存在下に発生）、他り受容体に作用する異なる化合物
で知られているような部分アゴニスト性をもつ化合物の
特徴的なパターンを示している。

Ｄ−シクロセリンの部分アゴニストとしての特性は、数
種Ｑ〕固定濃度ＫかけるＤ−シクロセリンの存在下で（
０〜１００μＭ）実施したグリシン用量反応解析の実験
でも明らかにされ、さらに確認された。第２図に示すよ
うに、Ｄ−シクロセリンはグリシン１１度０．１μＭ未
満でｈｓ　（’ａ〕Ｔ（！Ｐ結合σ〕グリシン刺激な増
強したが、一方、もつと高いグリシン濃度（０，１〜１
５μＭ）では、Ｄ−シクロセリンは用量反応曲線を右方
に移動させた。これらり結果←工また、部分アゴニスト
０）特性に一致するものである。

本明細書に記ａ！されたＤ−シクロセリンり機能分析は
、こりグリシンモジュレーション部位にかいて相互作用
し、部分アゴニスト特性を示す化合物の最初の報告であ
る。これらσ〕結果を工、この化合物り好ましい脳生勧
学的利用性および学習や記憶へのＮＭＤＡ受容体の関与
を示す証拠とともに、Ｄ−シクロセリンがＮＭＤＡ受容
体機能を証明する価値あるツールと耽る可能性を示して
いる。さらに重要は点は、７９７７３部分アゴニストに
は、精神病、認知機能障Ｗｒとえはアルツハイマー病、
加齢に伴う記憶障害、多梗塞性痴呆、様々な原因の混合
器質性脳症候詳代謝性脳症、アルコール性痴呆ならびに
各種の学習障害の処置に治療的利益の提供が期待される
ことである。とくに、７９７７３部分アゴニストを工、
精神分裂病、アルツノ・イソ−病、加齢に伴う記憶障害
および学習欠損のような障害７有、ｊるヒト患者り処置
に、また、健康人の記憶および学習能力の改善に有用と
考えられる。

る。

受動回避試験 方法 対象二体重約２００．９の雄性１ｏｎｇ−Ｅｖａｎａラ
ン）　（８ａｓｃｏ　）を使用した。動物は実験期間中
、ケージに２匹ずつ入れて飼育し、飼料および水は自由
に摂取させた。

装置：装置はプレキシガラス製り箱（３２Ｘ２６Ｘ　２
０　ｃｒＩＬ）で、蓋を設け、床）Ｘｌ、８ｃＷＬ間隔
り金属棒とした。箱は２室に区切って、一方は黒色に、
他方＆工灰色に塗った。２個の入口（高さ１２備）を箱
の前面に切り取り、各室に入れるようにした。

Ｙ字型σ〕プレキシガラスの通路を箱の前面に接続した
。Ｙ字の幹部＆８長さ１６ｃｒＩＬとして色は塗らなか
った。Ｙ字り腕部（それぞれ１４ｃＷＬ）を工２つの入
口に通じるようにし、それぞれ通じる部屋と同じ色に塗
った。装置を置いたテーブルの端筐でＹ字の幹部は達し
、シタがって床から約７５αの高さにあった。箱の金属
床はＬａｆａｙｅｔｔｅのショック発生器に接続し、Ｑ
、５　ｍＡｍｐのショックを送ることができるようにし
た。

操作：第１８目には、各ラットを通路上に置き、一方の
小室に入らせた。ついでこの小室の入口を閉じ、以後ラ
ットは他室に入ることが許された。

第２試験日には、一部のラットに、０．９％食塩水に溶
解しｆ、−Ｄ−シクロセリンまたは食塩水単独のいずれ
かＹｉ、ｐ、′注射した。６０分後に、各ラットを再び
一方の小室に入らせ、ここで２秒間足前ショックを与え
た。前に注射を受けていなかったラットには足聴ショッ
ク１０秒後に、Ｄ−シクロセリン１７：ホ食塩水を注射
した。試験第３日に、クツｌ−再び通路に置き、室内に
入らせる。第２日および第３日に、各ラットが小室に入
る１での潜時、およびどちσフ小室に入るかを記録する
。

ショック２４時間後に箱に入ろ１での受動回避学習潜時
（秒）に対するＤ−シクロセリン（１０ｍｇ／に９）の
効果□第■表に示す。

第０表 薬剤投与時期 食塩水　　　　　８．９±１．５　　１４．８±３．１
（ｎ＝６　）　　　　　　　（ｎ＝５　）Ｄ−シクロセ
リン　　１６．６±３．０　　　２２．８±２．４（ｎ
＝６）　　　　　　　（ｎ＝６） 記憶り増進な示すこの動物モデルでは、ラットが小室に
入る１での時間の遅延（「潜伏期」）が、足蹟ショック
を受けたことの以前の経験のラットり記憶の指標である
。潜伏期が長いＩヨど、試験化合物の記憶増進効果は良
好である。これらの動物実験は、グリシンリがンドとし
て作用するＤ−シクロセリンが、こりモデルにかいて動
物が小室に入る１でり潜時の増７１１１によって特徴づ
けられる記憶増進効果を有することを示している。

Ｄ−シクロセリンり用量−効果の関係、たらびにこり化
合物を情報検索試験の＠前に投与した場合の効果も、第
■表に示すように検討した。

第■表 受動回避の食塩対照潜時に対する僑 投与 ＤＯ８の用量　　ショック前　　ショック後　　　検索
前食塩水　　１００ ０．３　　　　１５２” ３　　　　２４５” １０　　　　　　１３８” ０ １００　　　　　１００ 脣 １６０　　　　　１０５ 畳 ２１５　　　　１５３” １５３”　　　１８０” 　００ 対照に対して有意差あり （ｐ＜０．０５゜ ｔ−テスト） Ｄ−シクロセリンとＤ−アラニンをラットに共投与した
嚇合の効果を、第■表に記載した方法に従って検討した
。結果を第■表に示す。

第ｍ表 受動回避の潜時（秒） 用量　　　　潜時 （ｑ／−■、Ｇ、）　　　Ｃ秒） 食塩水　　　　　　　　　　　　　　１１．９Ｄ−７ラ
ニン　　　　　　　　　５３４　　　　１　（Ｌ９Ｄ−
シクロセリン　　　　　６０　　　１７．３１対照に対
し有意差あり（ｐ＜０．０５．ｔ−テスト）第ｍ表にか
げるこれらの結果は、Ｄ−シクロセリンの記憶増強作用
が、Ｄ−シクロセリンとＤ−アラニンを共投与しても度
化しはいことを示している。

Ｔ−迷路にかけるラットの報酬交代 ラットにＤ−シクロセリン（３岬／−）または食塩水ｉ
１．ｐ、投与したのち、Ｔ−迷路で場所学習課題の訓練
な行った。両群とも約２０試行でこの課題を修得した。

修得は、１０回の連続選択中９回が正しく行ｂ７ｔた場
合と定義する。翌日、迷路り他のアームに飼料報酬を配
置した（逆転）。

食塩水処置ラットヲ工逆転を学習する１で約５２試行を
要したが、Ｄ−シクロセリン処置ラットｉ工約２０試行
で逆転を修得した。これらのデータは、この行動モデル
にかいて、Ｄ−シクロセリンが学習訃よび記憶過程に促
進作用２有することを確認するもりである。

脳が情報を処理し１、それを記憶に保存するには、完全
な海馬構造が必要である。「長期増強」（ＬＴＰ）現象
が、この処理２起こす機構であると思われる。ＬＴＰ　
Ｉｃ　：１？ける興奮性アミノ酸受容体のサブタイプで
あるＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（「ＮＭＤＡＪ　
）受容体の重要は役割が、電気生理学的研究によって明
確に確立されている。２−アミノ−７−ホスホノヘプタ
ｙ　ｆＩＲ（ＡＰＨ）　（１）　Ｌうｒ（ＮＭＤＡアン
タゴニストはＬ’Ｉ’Ｐの確立筐たＩ工伝達を阻害する
。

最近、培養脳神経細胞にかいて、ＮＭＤＡ受容体受容体
性化に対する応答をグリシンが増強することか、神経生
理学的研究によって明らかにされた。

これ＆ニストリキニーネ非感受性作用で、ＮＭＤＡ活性
化により誘発されるＮａ　＋−Ｃｏ　＋＋チャネルり開
放を調節するを髄上位グリシン受容体（本明細書で１ニ
ゲリシンＢ受容体と呼ぶ）り活性化から生じると考えら
れる。たとえば、グリシンのプロドラッグであるミラセ
ミド１工、グリシンの全脳含量を３（Ｉｌｌ上昇させる
。上に説明した機構により、こりグリシン０）増加はＮ
ＭＤＡ伝達を促進し、記憶および学習能力を改善する。

第■表に示すデータは、Ｄ−シクロセリンり用量−効果
の関係が、ベル形曲線の特＠馨もつこと２明らかにして
いる。こり通常みられない関係＆より一シクａセリンの
部分アゴニスト特性に関連するものと思われる。すなわ
ち、最大の効果＆ニ一定り範囲内で達成され、高用量た
とえばとトり場合１回用量が５００η馨越えると、効果
は低下することが予想される。

酸性アミノ酸、アスパラギン酸およびグルタミン酸は、
興奮性および興奮毒性の両者馨もつことが明らかにされ
ている［　Ｊ、Ｗ、　０１ｎｅｙ　：　５ｃｉｅｎｃｅ
。

１６４ニア１９〜７２１　（１９６９）　；　Ｊ、Ｗ。

○Ｉｎ　ｅ７ら：　Ｅｘｐ、　Ｂｒａｉｎ　Ｒｅｓ、、
　１４　：　６１〜７６（１９７１）］。実際、その樹
状突起また１工体細胞表面上に興奮性アミノ酸受容体を
有する神経細胞は、これらの受容体がグルタミン酸によ
って過度に活性化された場合、急性の興奮毒性変性を生
じる。

ＮＭＤＡ伝達に対して増強作用を有するグリシンアゴニ
ストハ、グルタミン酸υ興奮毒性を増強することが期待
される。グリシンＢ部分アゴニスト１工、好ましくない
興奮毒性の副作用を示すことはく、有益な興奮作用を達
成する。グリシンリガンドの大部分＆工極性〜高い分子
で、血液脳関門なｔヨとんど通過しない。血液脳関門′
？：横切るのが困難なために、こりようなりガント１工
治療的な有用性を発揮するａ度で生物学的に利用される
ことがない。Ｄ−シクロセリンが血液脳関門を容易に通
過することはわかっているＣ　Ｇｏｏｄｍａｎ　＆　Ｇ
ｉｌｍａｎ：Ｔｈｅ　　ＰｈａｒｍａｃｏｌＯｇｉ（ｉ
　　Ｂａ５ｉ８　　ｏｆ　Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｌｃｓ、
　　第５３章、１２１０〜１２１１頁（１９８０）〕。

上述の結合データによって示されるように、Ｄ−シクロ
セリンがストリキニーネ非感受性グリシン受容体にこの
ような良好な親和性を有することは全＜驚＜べきことで
あり、予期し得ないもりであツタ。グリシンアゴニスト
ｔ）　ＮＭＤＡ伝達を促進し、したがってＬＴＰに対し
て陽性効果をもつものと考えられる。ＬＴＰの改善が記
憶増強につながるものと想定される。このようなグリシ
ンアゴニストはまた、精神分裂病の症状を回復させる可
能性、とくに、急性または慢性ｐａｐ中毒によって誘発
される症状を回復させるｉ５Ｔ能性を有するもりと考え
られる。

シクロセリン化合物とＤ−アラニンの連続または共投与
は、これらの化合物の組合せな胃腸系内に導入できる任
意の方法によって達５Ｘ、することができる。

予防療法用にはこのような配合物は、Ｄ−アラ二ンとシ
クロセリン化合物り比が約１：１から約１００：ｉｔで
の範囲で投与されるのが好筐しい。

Ｄ−アラニンとＤ−シクロセリンの比は約１０＝１から
約１００：１の範囲とすることが好ましい。

一般に、こりような配合物は゛、記憶の増進ｔｇｔ’ｚ
認知機能障害の処置に有効なり一シクロセリンの用量に
基づいて投与される。Ｄ−シクロセリンの有効量は、一
般的に、１日用量で体重ｌ　ｋｇあたり約０．０１　ｔ
ａｐから約１０１Ｎｉの範囲である。さらに好ましい投
与量ｉ工、体重１ゆあたり約０．０１ηから約５■の範
囲である。とくに好筐しい投与量は、１日に体重１ゆあ
たり約０．０５〜約２．５＋ｎｇの範囲である。適当な
用量を１日に何回かに分割して投与することができる。

通常、この用量または分割用殴を、単位用量刑形あたり
活性化合物約１岬から約１００■として含有させる。さ
らに好ましい投与量として、単位用量刑形あたり約２η
から約５０ｍｇの活性化合物を含有させる。とくに好ま
しい削形は、単位用量あたり約３ＷＩｇから約２５ＷＩ
９り活性化合物を含有する。

活性化合物は通常、医薬的に許容される製剤として投与
される。このよう社製削１工、各活性化合物の有効量と
ともに１種筐たは２種以上り医薬的に許容される担体ま
たは希釈剤を含有する。他の治療剤を製剤中に添加する
こともできる。医薬的に許容される担体筐たは希釈剤は
、望普しくない副作用な生じることなく、活性化合物の
送達用の適当なビヒクルを提供する。このような製剤中
の活性化合物の送達は、経口、経鼻、局所、経頬および
舌下を包含する様々な経路で行うことができろ。

経口投与用り製剤は、結合剤たとえばゼラチンまた（エ
ピドロキシゾロビルメチルセルロース中に分散された活
性化合物を、１種またｔ工２種以上の滑沢剤、防腐剤、
界面活性剤筐には分散剤とともに含有するカプセル０）
　Ｒ１Ｉ形とすることかできる。

このようｒＬカプセルまたは錠剤は、ヒドロキシプロざ
ルメチルセルロース中への活性化合物り配剤によって得
られるようｒｌ放出制御処方を含有してもよい。

本発明を以上、特定の態様に関して説明したが、これら
の態様の詳細を工水発明を限定するもので１工たい。本
発明の精神および範囲から逸脱することはく様々な均等
、改変および修飾が可能であり、こりような均等な態様
を工水発明の一部であることを理解すべきである。

【図面の簡単な説明】

第１図は、各種＃度のグリシンの存在下におけろＴＣＰ
結合結合液大グリシン刺激に対して影響するＤ−シクロ
セリンり濃度を示すグラフであり、第２図を工、各種！
１度のＤ−シクロセリンの存在下にかげる’ｒａｐ結合
り最大グリシン刺激に対して影響するグリシンの＃に度
を示すグラフである。

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. （１）治療有効量のシクロセリン化合物および治療有効
   量のＤ−アラニンを、１種または２種以上の医薬的に許
   容される賦形剤とともに含有する医薬組成物
2. （２）主として治療有効量のＤ−シクロセリンおよび治
   療有効量のＤ−アラニンからなる請求項（１）記載の組
   成物
3. （３）Ｄ−アラニンとＤ−シクロセリンの比は約１：１
   〜約１００：１の範囲である請求項（２）記載の組成物
4. （４）比は約１０：１〜約１００：１の範囲である請求
   項（３）記載の組成物