JPH03119989A - 微小インジェクション装置及びそのインジェクション制御方法 - Google Patents

微小インジェクション装置及びそのインジェクション制御方法

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JPH03119989A
JPH03119989A JP1255197A JP25519789A JPH03119989A JP H03119989 A JPH03119989 A JP H03119989A JP 1255197 A JP1255197 A JP 1255197A JP 25519789 A JP25519789 A JP 25519789A JP H03119989 A JPH03119989 A JP H03119989A
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 (産業上の利用分野) 本発明は、液体注入用マイクロマニピュレータの微小イ
ンジェクタ5ン装置及びそのインジェクション制御方法
に関するものである。
(従来の技術) 従来、バイオテクノジーの世界においては、遺伝子・細
胞などに人工的操作を加え、新しい遺伝情報体を作成し
、それを利用或いは研究する分野がある。その対象は遺
伝子、細胞、核、受精胚、組織或いは原生動物とさまざ
まであるが、このうち、光学顕微鏡で観察できるものに
対して物理的・機械的操作を加える手法として、マイク
ロマニピユレーションがある0例えば、動植物細胞や核
に外来遺伝子を注入し、遺伝子の形質発現機構の解析を
行う場合、また初期胚、桑実胚を分割し、仮説に移植し
て一卵性複数子の作成を行う場合、或いは受精卵の細胞
質に他の個体を移植してクーロン生物の作成を行う場合
、などにマイクロマニピユレーションは不可欠のもので
ある。
112図は従来のマイクロマニピユレーションシステム
の全体構成図である。
図中、lはベース、2はベース1上に配置される顕微鏡
、3は位置検出器、4は微動部、5は粗動部、6はTV
カメラ、7はマイクロインジェクタ、8は左操作ボック
ス、9は右操作ボックス、10はカメラ制御ユニット、
11はビデオモニタ、12は主制御ユニットである。
この図に示すように、2つの操作ボックス89では、左
右の微動部4、粗動部5を操作する一方で、注入液量測
定など各種の機能の制御も行う。
また、顕微鏡2にはTVカメラ6が設けられており、細
胞の状態や微細操作の様子がビデオモニタ11に写し出
されて観察される。
従来のマイクロインジェクション装置の構成は、第13
図に示すようになっている。即ち、微動部先端の微小器
具13(例えば微小針、微小ピペット、微小電極など)
を支持棒14で支持し、その支持棒14にチューブ15
を繋ぎ、細胞への注射、吸引などのためにマイクロシリ
ンジ16のプランジャ17を手動つまみ18でねし送り
することにより、正・負の圧力を加えることができる(
「計測と制御」Vol。
27 、 No、3昭和63年3月発行 P、78〜7
9  参照)。
以下、上記従来のマイクロインジェクション装置につい
て詳細に説明する。
このような分野の技術としては、例えば「マイクロマニ
ピユレーションj丸善(株)、実験生物学講座8.細胞
生物学、P、277〜297に記載されるものがあった
多くの物質は、細胞膜を自由に透過することができない
。そのため、細胞内部の原形質や細胞小器官に対する物
質の直接作用を調べるためには、毛細管(微小ピペット
)を通して細胞内に物質を注入することができるマイク
ロインジェクションが最も直接的な方法である。
マイクロインジェクションとは、一般に細胞内へ物質を
注入する操作を言うが、細胞や組織の特定の部位に外か
ら液を作用させる場合や、細胞内から原形質の一部を吸
い取ったり、小型細胞のような微小な物体を吸い取った
りする場合にも、同じ方法を利用することができる。ま
た、マイクロインジェクション方法には、予め微小ビペ
・ント中に入れておいた液を、圧力によって押し出す圧
力法と、微小ピペットを通して電流を流し、電流ととも
に内部の物質を流出させる微小電気泳動法とがある。
ここでは、前者の圧力法によるマイクロインジェクショ
ンについて述べる。
この圧力法によるマイクロインジェクション装置は、第
14図に示すように、微小ピペット(微小器具)21を
中空の支持棒22に取り付け、支持棒22をチューブ2
3でマイクロシリンジ24に繋ぐ。このマイクロシリン
ジ24はスクリュ付き注射器の構造をしており、手動つ
まみ25を手動操作することによって正・負の圧力を加
えることができる。
なお、マイクロインジェクション装置とは異なるが、上
記した従来のマイクロマニピュレータに代えて、本願の
出願人の発明に係る「圧電・電歪素子を用いた衝撃力に
よる微小移動装置」(特開昭63−299785号参照
)を応用した「マイクロマニピュレータ」 (特願平1
−87287号参照)において、電圧・電歪素子に電圧
を印加して慣性体を加速し、その反動を利用して微小器
具の移動を引き起こすことにより、10nm〜10μm
程度の正・負方向の微動を可能にしたものが既に提案さ
れている。
(発明が解決しようとする課題) しかしながら、上記した従来のマイクロインジェクタに
おいては、その制御がつまみによる手動操作に依存して
いるため、作業性に難があり、的確なインジェクト・を
行うには不満足なものであった。換言すれば、的確なイ
ンジェクトを行・うには、このマイクロインジェクタの
特性に習熟する必要があると共に、その操作技術にも高
度の熟練を要するといった問題があった。
また、手動つまみによるインジェクション操作によって
は、細かい分解能を得ることができなかった。
更に、−上記したマイクロインジェクタの場合は、マイ
クロシリンジと支持棒とを繋ぐチューブも長くなり、そ
の分、スペースを要すると共に、応答性も劣るといった
問題があった。
本発明は、上記問題点を除去し、迅速、かつ的確なイン
ジェクトを行い得ると共に、コンパクトであり、しかも
自動化を推進した微小インジェクション装置及びそのイ
ンジェクション制御方法を提供することを目的とする。
(課題を解決するための手段) 本発明は、上記目的を達成するために、微小器具の中に
セットされた液体を圧力によって移動させるマイクロマ
ニピュレータの微小インジェクション装置において、プ
ランジャ(43,64,73)を有するマイクロシリン
ジ(40,62,72)と、前記プランジャ(43,6
4,73)の一端に設けられる移動体(35,74)と
、該移動体(35,74)に装着され、慣性体(36,
38,75>付き圧電・電歪素子(37,39,76)
を有する微小移動装置(A、B、C)とを設けるように
したものである。
(作用) 本発明によれば、2第2図及び第3図に示すように、プ
ランジャ(43)を有するマイクロシリンジ(40)と
、軸(44)と共に回転する回転移動体(35)と、該
回転移動体(35)に装着される慣性体(36,38)
付き圧電・電歪素子(37,39)を有する微小移動装
置(A、B)とがら構成される微小インジェクション装
置を設け、前記微小移動装置(A、B)へ電気信号を印
加することにより駆動力を生じさせ、前記回転移動体(
35)を微小回転させる。これにより、プランジャ(4
3)を軸方向に微小移動させ、マイクロシリンジ(40
)内の液体(45)を移動させることができる。
また、第5図及び第6図に示すように、中心軸(61)
に取り付けられるプランジャとしての回転板(64)を
内蔵するマイクロシリンジ(62)と、前記中心軸(6
1)と共に回転する回転移動体(35)と、この回転移
動体(35)に装着される慣性体(36,38>付き圧
電・電歪素子(37,39)を有する微小移動装置(A
、B)とから構成される微小インジェクション装置を設
け、i訂記微小移動装置(A、B)へ電気信号を印加す
ることにより駆動力を生しさせ、前記回転移動体(35
)を微小回転させる。これにより、プランジャとしての
回転板(64)を微小回転させ、マイクロシリンジ(6
2)内の液体(66)を移動させることができる。
更に、上記微小インジェクション装置は、第8図及び第
9図に示すように、慣性体(75)付き圧電・電歪素子
(16)を有する微小移動装置(C)を駆動させ、直線
移動体(74)を直接直線方向に駆動させることにより
、プランジャ(73)を操作するように構成してもよい
(実施例) 以下、本発明の実施例について図面を参照しながら詳細
に説明する。
第1図は本発明の第1実施例を示す微小インジェクショ
ン装置の全体構成図、第2図はその微小インジェクショ
ン装置の要部構成図、第3図はその微小インジェクショ
ン装置の要部正面図、第4図は本発明の第1実施例の動
作態様の説明図である。
図中、31はベース、32はステージ、33は支持体、
34は内部に雌ねじが切られているインジェクションホ
ルダ、35は回転移動体、Aは第1の微小移動装置であ
り、慣性体36及び圧電・電歪素子37がらなり、同様
にBは第2の微小移動装置であり、慣性体38及び圧電
・電歪素子39がら構成されている。
イOはマイクロシリンジ、41は微小器具、42は圧電
・電歪素子37.39を駆動するために給電するワイヤ
、43はマイクロシリンジ4o内に出入りするプランジ
ャである。44はプランジャ43と回転移動体35とを
固定する軸であり、その外周に形成された雄ねじ44a
によって、その内周に雌ねじが切られているインジェク
ションホルダ34との螺合を行い、摩擦機能を有する。
45はマイクロシリンジ40内にセ・ツトされる液体、
50はこのマイクロマニビュブレータの制御を行う制御
ボックスであり、微小インジェクション制御スイッチも
設けられている。
51は位置検出器、52は顕微鏡である。
次に、上記第1実施例の微小インジェクション装置の動
作について、第11図をも参照しながら説明する。
ここで、微小インジェクタぢンは、生体内に薬品等を注
入する注入モードと、体液等を吸引する吸引モードとに
大別される。なお、細胞や卵などをホールドするモード
も挙げられるが、それは吸引モードと見なすことができ
る。
そこで、注入モードにしたい場合は、制御ボックス50
に設けられる微小インジェクションスイッチのモードI
の押ボタンを操作する。すると、第1、第2の微小移動
装置A、Bにはともに押圧力が生じ、回転移動体35は
第3図に示すように時計回りに微小回転し、プランジャ
43及び液体45が前進することになり、マイクロシリ
ンジ40には正圧が生じる。
一方、吸引モードにしたい場合は、制御ボックス50に
設けられる微小インジェクシッンスイノチのモード■の
押ボタンを操作する。すると、第1第2の微小移動装置
A、 Bにはともに引張力が生じ、回転移動体35は第
3回において反時計回りに微小回転し、プランジャ43
及び液体45が後退することになり、マイクロシリンジ
40には負圧が生じる。
なお、上記実施例においては、第1.第2の微小移動装
置A、Bを用いてバランスをとるように配置したが、単
一の微小移動装置を用いるようにしてもよい、その場合
には、その単一の微小移動装置の押圧力と引張力の何れ
かの動作を選択して用いるようにする。
第5図は本発明の第2実施例を示す微小インジヱクショ
ン装置の要部構成図であり、第5図(a)は一部破断側
面図、第5図(b)は第5図(a)のDD線断面図であ
る。第6図はその微小インジェクション装置の要部正面
図、第7図は本発明の第2実施例の動作態様の説明図で
ある。
図中、60はインジェクションホルダ、61は中心軸、
62はマイクロシリンジ、63はマイクロシリンジ62
に形成される圧抜き穴、64はマイクロシリンジ62に
内蔵されて回転するプランジャとしての回転板、65は
回転板64の周辺に設けられるシール材、66はマイク
ロシリンジ62内にセットされる液体、67はマイクロ
シリンジ62に取り付けられる微小器具である。ここで
、中心軸61に取り付けられる回転移動体及び微小移動
装置は前記したものと同様であり、ここでは同じ番号を
付して説明を省略する。
次に、上記第2実施例の微小インジェクション装置の動
作について、第11図をも参照しながら説明する。
まず、注入モードにしたい場合は、制御ボ・7クス50
 (第1図参照)に設けられる微小インジェクションス
イッチのモードIの押ボタンを操作する。
すると、第1.第2の微小移動装置A、 Bにはともに
押圧力を生じ、回転移動体35は第6図に示すように時
計回りに微小回転し、回転板64も時計回りに微小回転
することにより、液体66は前進し、マイクロシリンジ
62には正圧が生じる。その場合、マイクロシリンジ6
2には圧抜き穴63が形成されているので、その空間部
が負圧になることはない。
一方、吸引モードにしたい場合は、制御ボックス50(
第1回参照)に設けられる微小インジェクションスイン
チのモード■の押ボタンを操作する。
すると、第1.第2の微小移動装置A、 Bにはともに
引張力が生じ、回転移動体35は第6図において反時計
回りに微小回転し、回転板64も反時計回りに微小回転
することにより、液体66は後退し、マイクロシリンジ
62には負圧が生じる。
第8図は本発明の第3実施例を示す微小インジェクショ
ン装置の要部構成図、第9圀はその微小インジェクショ
ン装置の要部正面図、第10図は本発明の第3実施例の
動作態様の説明図である。
図中、71はインジェクションホルダ、72はマイクロ
シリンジ、73はプランジャ、74は直線移動体、Cは
第3の微小移動装置であり、慣性体75及び圧電・電歪
素子76から構成されている。77はマイクロシリンジ
72内にセットされる液体、78はマイクロシリンジ7
2の先端に取り付けられる微小器具である。また、マイ
クロシリンジ72の後端部にはプランジャ73の振動を
防止するためのずり割りを形成し、その後端部の外周に
弾発的に弾性リング79を装着する。なお、この摩擦機
能は、一端が固定部に取り付けられる板ばねの自由端を
、マイクロシリンジ72の後端部に当接させるように、
構成することもできる。
次に、上記第3実施例の微小インジェクション装置の動
作について、第11図をも参照しながら説明する。
ここでも、微小インジェクションは、前記したように、
注入モー1′と、吸引モードとに大別される。
そこで、注入モードにしたい場合は、制御ボックス50
(第1図参照)の微小インジェクションスイッチのモー
ドIの押ボタンを操作する。すると、第3の微小移動装
置Cには押圧力が生じ、直線移動体74は第8図におい
て左方向に微小移動し、プランジャ73及び液体77は
前進することになり、マイクロシリンジ72には正圧が
生じる。
一方、吸引モードにしたい場合は、制御ボックス50(
第1図参照)の微小インジェクションスイッチのモード
■の押ボタンを操作する。すると、第3の微小移動装置
Cには引張力が生じ、直線移動体74は第8図において
右方向に微小移動し、プランジ+73及び液体77は後
退することになり、マイクロシリンジ72には負圧が生
じる。
なお、第11図に示した制御ボックスの正面には前記し
たモード選択スイッチの他に、を源のオン・オフスイッ
チやマイクロインジェクション制御以外の各種制御卸用
スインチが設けられている。
また、微小移動装置の移動体に対する配置構造は適宜変
形することができる。
なお、本発明は上記実施例に限定されるものではなく、
本発明の趣旨に基づいて種々の変形が可能であり、これ
らを本発明の範囲から排除するものではない。
(発明の効果) 以上、詳細に説明したように、本発明によれば、次のよ
うな効果を奏することができる。
(1) iJL速、的確なインジェクション制御を行う
ことができる。
(2)微小移動装置の駆動により、lOnm〜10μm
程度の正・負方向の微動を実現することができ、細かい
分解能での操作が可能となる。
(3)チェーブが短くなるため、装置全体のコンパクト
化を図ることができると共に、応答性を高めることがで
きる。
(4)インジェクション装置の所要スペースが小さく、
しかもステージ上に闇単に取付けることができる。
(5)オペレータは熟練を要することなくインジェクシ
ョン操作を行うことができ、操作に伴う精神的疲労から
解放され、しかも省力化を図ることができる。
【図面の簡単な説明】
第1図は本発明の第1実施例を示す微小インジェクショ
ン装置の全体構成図、第2図はその微小インジェクショ
ン装置の要部構成図、第3図はその微小インジェクショ
ン装置の要部正面図、第4図は本発明の第1実施例の動
作態様の説明図、第5図は本発明の第2実施例を示す微
小インジェクション装置の要部構成図、第6図はその微
小インジェクション装置の要部正面図、第7図は本発明
の第2実施例の動作態様の説明図、第8図は本発明の第
3実施例を示す微小インジェクション装置の要部構成図
、第9図はその微小インジェクション装置の要部正面図
、第1O図は本発明の第3実施例の動作態様の説明図、
第11図は本発明の制御ボックスの正面図、第12図は
従来のマイクロマニピユレーションシステムの全体構成
図、第13図は従来のマイクロインジェクション装置の
斜視図、第14図は従来のマイクロインジェクション装
置の横成図である。 31・・・ベース、32・・・ステージ、33・・・支
持体、346071・・・インジェクションホルダ、3
5・・・回転移動体、36.38.75・・・慣性体、
37.39.76・・・圧電・電歪素子、40.62.
72・・・マイクロシリンジ、41.6778・・・微
小器具、42・・・ワイヤ、43.73・・・プランジ
ャ、44・・・軸、44a・・・雄ねじ、45.66、
77・・・液体、50・・・制御ボックス、51・・・
位置検出器、52・・・顕微鏡、61・・・中心軸、6
3・・・圧抜き穴、64・・・回転板(プランジャ)、
65・・・シール材、74・・・直線移動体、79・・
・弾性リング、A・・・第1の微小移動装置、B・・・
第2の微小移動装置、C・・・第3の微小移動装置。

Claims (6)

    【特許請求の範囲】
  1. (1)微小器具の中にセットされた液体を圧力によって
    移動させるマイクロマニピュレータの微小インジェクシ
    ョン装置において、 (a)プランジャ付きマイクロシリンジと、 (b)前記プランジャの一端に設けられる移動体と、 (c)該移動体に装着され、慣性体付き圧電・電歪素子
    を有する微小移動装置とを具備する微小インジェクショ
    ン装置。
  2. (2)前記移動体は回転移動体であることを特徴とする
    請求項1記載の微小インジェクション装置。
  3. (3)前記回転体は正・逆両方向に回転可能であること
    を特徴とする請求項2記載の微小インジェクション装置
  4. (4)前記移動体は直線移動体であることを特徴とする
    請求項1記載の微小インジェクション装置。
  5. (5)前記直線移動体は正・逆両方向に移動可能である
    ことを特徴とする請求項4記載の微小インジェクション
    装置。
  6. (6)マイクロマニピュレータの微小インジェクション
    制御方法において、 マイクロシリンジのプランジャの一端に設けられる移動
    体に慣性体付き圧電・電歪素子を有する微小移動装置を
    設け、該微小移動装置の電気的駆動により、微小器具の
    中にセットされた液体を圧力によって移動させることを
    特徴とするマイクロマニピュレータの微小インジェクシ
    ョン制御方法。
JP1255197A 1989-10-02 1989-10-02 微小インジェクション装置及びそのインジェクション制御方法 Expired - Fee Related JPH0648975B2 (ja)

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