JPH0269415A - 抗レトロウイルス剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、レトロウィルスに起因する各種ウィルス性疾
患の治療に有効な抗レトロウィルス剤に関ずろものであ
る。

［従来の技術および課題］ 従来、ウィルスの感染を防止する手段としてワクチンの
接種による方法が一般的にとられていた。

科学技術の発展に伴って、一部のウィルスに対してその
増殖を抑制する薬剤の開発がすすめられている。

ウィルスのうち、特に最近問題となっている後天性免疫
不全症候群（ＡＩＤＳ）を引き起こす、ＨＩ　Ｖ（ｔ（
ｕｍａｎ　Ｉｍｍｕｎｏ　ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　Ｖｉ
ｒｕｓ）、成人Ｔ細胞白血病を引き起こすＨＴＬＶ−１
（成人Ｔ細胞白血病ウィルス）等はウィルスのうちレト
ロウィルスとして知られている。

レトロウィルスはウィルス粒子内に、ＲＮＡ依存ＤＮＡ
合成酵素（以下、逆転写酵素と称する）を含むウィルス
であり、以下のようにして増殖している。

■宿主細胞に感染後、まずＲＮＡが逆転写酵素によりＤ
ＮＡに転写される。

■このＤＮＡが宿主細胞染色体に組み込まれ、次いで宿
主細胞のＲＮＡ合成酵素によってｍｎＮＡが合成される
。

■このｍ　ＲＮ　Ａにより各種のウィルス蛋白が生成さ
れる。

■上記ｍＲＮ　Ａにより形成された蛋白とゲノムＲＮＡ
が結合し、子ウィルスとなって細胞外に出る。

このレトロウィルスに起因するヒトの疾病に画期的な治
療効果を有する薬剤は従来存在しておらず、そのような
薬剤の開発が望まれていた。

［課題を解決するための手段］ 本発明者等は種々の植物成分について、抗レトロウイル
ス効果に関する研究を行った結果、アカネ科植物アカネ
の赤色色素であるアリザリン（１゜２−ジヒドロキシア
ンスラキノン）およびその誘導体に抗レトロウイルス効
果のあることを見い出し、本発明を完成するに至った。

すなわち本発明は、下記式 （式中、Ｒ８、Ｒ３およびＲ１は同一または異なって、
水素原子または水酸基を表し、Ｒ，は水素原子、スルホ
ン酸基またはジカルボキシメチルアミノメチル基を表す
）で表されろアリザリン誘導体およびその薬理学的に許
容しうる塩（以下、式の化合物と称する）を有効成分と
する抗レトロウィルス剤である。

式の化合物は、色素としては知られているが、抗ウイル
ス効果、特に抗レトロウイルス効果を有することは従来
全く知られていなかったことである。

本発明の抗レトロウィルス剤の有効成分である式の化合
物は、アカネ科植物アカネより抽出分離することが容易
なアリザリンをそのまま用いるか、このアリザリンを原
料として容易にその誘導体を得ることができるが、試薬
として市販されているものを用いることらできる。

■アリザリン（１，２−ジヒドロキシアンスラキノン）
■アリザリンコンブレキソン （１，２−ジヒドロキシ−３−ジカルボキシメチルアミ
ノメチルアンスラキノン） ■アリザリンレッドＳ （１，２−ジヒドロキシ−３−スルホニルアンスラキノ
ン）■キナリザリン （１，２，５，８−テトラヒドロキシアンスラキノン）
■プルプリン（１，２，４−）ジヒドロキシアンスラキ
ノン）［発明の効果］ 本発明の抗レトロウィルス剤か抗レトロウイルス効果を
存することについて実験例を挙げて説明する。

実験例１ く逆転写酵素活性に及ぼす影響〉 以下の組成の反応混合液を調製しｒコ。

Ｏ逆転写酵素（Ｒｏｕｓ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｖｉ
ｒｕｓ−２，宝酒造製）　２単位／−〇テンプレート・
ブライマー複合体としてのポリアデニル酸・オリゴチミ
ジル酸複合体［ポリアデニル酸ｐｏｌｙｒＡ（ファルマ
シア製）。

オリゴチミジル酸ｐｄＴ＋ｔ−＋ａ（ファルマシア製）
］　　　　　　ｌ　０１４／ｄＯトリス塩酸（ＰＨ８，
３）　　　　　　　　　　５０π開０塩化カリウム　　
　　　　　　　　　　　５０祠０塩化マグネシウム　　
　　　　　　　　ＩＯ，＝１．ＩＯ［’Ｈ］デオキシチ
ミジン三リシリ ン酸　０Ｃｉ／ｍｍＸＩ　、０ｍＣ１／Ｊ）　　　　　
　　　　　　　　　　０．２％４０デオキシチミジン三
リン酸　　　　　　　　　　　　　　　９　、８　ｔｉ
”ｄＯ精製水　　　　　　　　　　　　　　　適１＊１
単位とは、逆転写酵素が３７℃、１０分間でｄＮＴＰ（
デオキシ核酸三リン酸）Ｉｎ−を消費する比活性単位で
ある。

この反応混合液５０成を３７°Ｃ１３０分間反応させた
。

反応産物Ｄ　Ｎ　Ａの定量はイオン交換濾紙法を用い、
［３Ｈ］デオキソチミノン三リン酸のＤＮＡへの放射活
性の取り込みをベックマン・シンチレーンヨンカウンタ
ーで測定して、逆転写酵素活性とし、各被験物質におけ
る５０％阻害濃度（ＩＣｓｏ）を算出した。その結果を
第１表に示す。

第１表 実験例２ くラウス肉腫ウィルス（ＲＳＶ）による初代ニワトリ胚
繊維芽細胞形質転換に対する抑制効果〉２４穴マイクロ
プレートに１穴当たり ３、ｓｘ、ｔｏ’細胞の初代ニワトリ胚繊維芽細胞をい
れ、３７℃、５％ＣＯを下で６時間培養した。

培養後、この細胞にＲｓＶ・５Ｒ−Ａ株、感染多重度（
Ｍ、Ｏ，１，）約２．０Ｘ１０−’および各被験物質を
加え、２時間培養した後、細胞を洗浄し、更に各被験物
質と寒天培地を加え、３７℃、５％ＣＯ７下で８日間培
養した後、そのフォーカス数を測定した。

その結果をＩＣｓ。で示したのが、第２表である。

実験例Ｉおよび２の結果から本発明の抗レトロウィルス
剤の有効成分である式の化合物は、逆転写酵素活性阻害
作用に基づく抗レトロウイルス効果を有することが確認
された。

すなわち式の化合物は、レトロウィルスの増殖において
必要な逆転写酵素活性を阻害することにより、その増殖
を抑制するものであるから、レトロウィルスであればい
かなるウィルスにも適用することができる。

レトロウィルスの具体例としては、白血病ウィルス、肉
腫ウィルス、乳癌ウィルス、ビスナウィルス、マエデイ
ウイルス、ＨＩＶ、ＨＴＬＶ−１等が挙げられる。

更に、式の化合物は逆転移酵素活性を阻害するだけでな
く、レトロウィルス感染細胞のレトロウィルス産生能を
抑制する作用を有する。

以下にその実験例を示す。

実験例３ ＜ＭＴ−２培養細胞における成人ヒト白血病ウィルス（
Ｉ−［ＴＬＶ−ｔ）産生に対する抑制効果〉２４穴マイ
クロプレートに１穴当たり ｌＸＩＯ３細胞のＭＴ−２細胞と各被験物質をいれ、４
日間培養した。培養後、各式のＭＴ−２浮遊液を遠心分
離し、その上清をフェノール抽出してＨＴ　Ｌ、　Ｖ　
−１のＲＮＡを得た。このＲＮＡと既知蛍のＩ（ＴＬＶ
−ＴｃＤＮＡをニトロセルロース紙にプローｔトし、３
！Ｐ標識！−ＩＴＬＶ−１ｃＤＮＡをプローブとしたハ
イブリダイゼーション法による比較定量を行い、コント
ロールに対するウィルス産生量との比較から被験物質の
抑制率を算出した。

その結果を抑制率（％）で示したのが、第３表である。

第３表 実験例３の結果から式の化合物のレトロウィルス感染細
胞のレトロウィルス産生能抑制効果が認められた。

また、アリザリンおよびアリザリンレッドＳは、マウス
における静脈内投与でのＬＤ５ａがそれぞれ１２０１１
９／に９．７０Ｑ７に９と高イコトカ知うレテオリ、式
の化合物は、極めて毒性が低く安全性の高いものである
ことがわかる。

次に、式の化合物の投与量および製剤化について説明す
る。

式の化合物はそのまま、あるいは慣用の製剤担体と共に
動物および人に投与することができろ。

投与形態としては、特に限定がなく、必要に応じ適宜選
択して使用され、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、
散剤等の経口剤、注射剤、坐剤等の非経口剤が挙げられ
る。

経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の年
令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人で式の
化合物の重量として０．１〜６ｇを、１日数回に分けて
の服用が適当と思われる。

本発明において錠剤、カプセル剤、顆粒剤等の経口剤は
、例えばデンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルボキ
シメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩類等を用
いて常法に従って製造される。

この種の製剤には、適宜前記賦形剤の他に、結合剤、崩
壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着
色剤、香料等を使用することができる。それぞれの具体
例は以下に示す如くである。

［結合剤コ デンプン、デキストリン、アラビアゴム末、ゼラチン、
ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、カル
ボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピ
ルセルロース、結晶セルロース、エチルセルロース、ポ
リビニルピロリドン、マクロゴール。

［崩壊剤］ デンプン、ヒドロキシプロピルスターチ、カルボキシメ
チルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロー
スカルシウム、カルボキシメチルセルロース、低置換ヒ
ドロキシプロピルセルロース。

［界面活性剤］ ラウリル硫酸ナトリウム、大豆レシチン、ショ糖脂肪酸
エステル、ポリソルベート　８０゜［滑沢剤コ タルク、ロウ類、水素添加植物油、ショ糖脂肪酸エステ
ル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウ
ム、ステアリン酸アルミニウム、ポリエチレングリコー
ル。

［流動性促進剤］ 軽質無水ケイ酸、乾燥水酸化アルミニウムゲル、合成ケ
イ酸アルミニウム、ケイ酸マグネシウム。

また式の化合物は、懸濁液、エマルジョン剤、シロップ
剤、エリキシル剤としても投与することができ、これら
の各種剤形には、矯味矯臭剤、着色剤を含有してもよい
。

非経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の
年令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人で式
の化合物の重量として１日ｉ〜１００　ｍ９までの静注
、点滴静注、皮下注射、筋肉注射が適当と思われる。

この非経口剤は常法に従って製造され、希釈剤として一
般に注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、注射
用植物油、ゴマ油、ラッカセイ油、ダイズ油、トウモロ
コシ油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコー
ル等を用いることかできる。さらに必要に応じて、殺菌
剤、防腐剤、安定剤を加えてもよい。また、この非経口
剤は安定性の点から、バイアル等に充填後冷凍し、通常
の凍結乾燥技術により水分を除去し、使用直前に凍結乾
燥物から液剤を再調製することもできろ。更に、必要に
応じて適宜、等張化剤、安定剤、防腐剤、無痛化剤等を
加えても良い。

その他の非経口剤としては、外用液剤、軟膏等の塗布剤
、直腸内投与のための坐剤等が挙げられ、常法に従って
製造される。

実施例１ ■コーンスターチ　　　　　　　４４９■結晶セルロー
ス　　　　　　４０ｇ ■カルボキンメチル セルロースカルシウム　　　５９ ■軽質無水ケイ酸　　　　　　０．５Ｌｉ■ステアリン
酸マグネシウム　０．５９■アリザリン　　　　　　　
　　１０ｇ計　　　　　ｔｏｏ９ 」二足の処方に従って■〜■を均一に混合し、打錠機に
て圧縮成型して一部２００Ｂの錠剤を得た。

この錠剤−錠には、アリザリン２０ｍ９が含有されてお
り、成人１日５〜７錠を数回にわけて服用する。

実施例２ ■結晶セルロース　　　　　８４．５ｇ■ステアリン酸
マグネシウム　０．５ｇ■カルボキシメチル セルロースカルシウム　　　　５ｇ ■アリザリンコンブレキソン　１０１ｉ１計　　　　　
１００ｇ 上記の処方に従って■、■および■の一部を均一に混合
し、圧縮成型した後、粉砕し、■および■の残量を加え
て混合し、打鍵機にて圧縮成型して一部２００だこの錠
剤を得た。

この錠剤−錠には、アリザリンコンブレキソン２０’／
１９か含有されており、成人１日５〜７錠を数回にわけ
て服用する。

実施例３ ■結晶セルロース　　　　　３４．５９■１０％ヒドロ
キシプロピル セルロースエタノール溶液　５０９ ■カルボキノメチル セルロースカルシウム　　　５９ ■ステアリン酸マグネシウム　０．５９■アリザリンレ
ツドＳ　　　　　　１（１計　　　　　１００ｇ 上記の処方に従って■、■および■を均一に混合し、常
法によりねつ和し、押し出し造粒機により造粒し、乾燥
・解砕した後、■および■を混合し、打鍵機にて圧縮成
型して一部２００　Ｒ９の錠剤を得た。

この錠剤−錠には、アリザリンレッド３２０　Ｒ９か含
有されており、成人１日５〜７錠を数回にわけて服用す
る。

実施例４ ■コーンスターチ　　　　　　８４９ ■ステアリン酸マグネシウム　０．５ｇ■カルボキシメ
チル セルロースカルシウム　　　５９ ■軽質無水ケイ酸　　　　　　０．５ｇ■キナリザリン
　　　　　　　１０９ 計　　　　　１００９ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、圧縮成型機
にて圧縮成型後、破砕機により粉砕し、篩別して顆粒剤
を得た。

この顆粒剤Ｉ９には、キナリザリン１００１ｆｒ９が含
有されており、成人１日１〜２，５ｇを数回にわけて服
用する。

実施例５ ■結晶セルロース　　　　　　５５９ ■！０％ヒドロキシプロピル セルロースエタノール溶液　３５９ ■プルプリン　　　　　　　　１０９ 計　　　　　ｔｏｏｙ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、ねつ和した
。押し出し造粒機に上り造粒後、乾燥し、篩別して顆粒
剤を得た。

この顆粒剤１ｇには、プルプリン１００　ｍ９が含有さ
れており、成人１日１〜２．５９を数回にわけて服用す
る。

実施例６ ■コーンスターチ　　　　　８９．５９■軽質無水ケイ
酸　　　　　　０．５９■アリザリンコンブレキソン　
１０９ 計　　　　　ｔｏｏ９ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、２００句を
２号カプセルに充填した。

このカプセル剤１カプセルには、アリザリンコンブレキ
ソン２０〜が含有されており、成人１日５〜７カプセル
を数回にわけて服用ずろ。

実施例７ ■注射用蒸留水　　　　　　　　適量 ■ブドウ糖　　　　　　　　　２００　ｍ９■アリザリ
ンコンブレキソン　ｌ０ｍｇ全量　　　　　　　　１５
７ 注射用蒸留水に■および■を溶解させた後、５−のアン
プルに注入し、ｌ　２１　’Ｃで１５分間加圧滅菌を行
って注射剤を得た。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 下記式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＿１、Ｒ＿２およびＲ＿３は同一または異な
   って、水素原子または水酸基を表し、Ｒ＿４は水素原子
   、スルホン酸基またはジカルボキシメチルアミノメチル
   基を表す）で表されるアリザリン誘導体およびその薬理
   学的に許容しうる塩を有効成分とする抗レトロウイルス
   剤。