JPH01163122A

JPH01163122A - 抗レトロウイルス剤

Info

Publication number: JPH01163122A
Application number: JP62321518A
Authority: JP
Inventors: Katsuhiko Ono; 克彦小野; Masanori Fukushima; 雅典福島; Hideo Nakane; 英雄中根
Original assignee: Tsumura and Co
Current assignee: Tsumura and Co
Priority date: 1987-12-21
Filing date: 1987-12-21
Publication date: 1989-06-27
Also published as: JPH0551567B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】［産業上の利用分野］本発明は、レトロウィルスに起因する各種ウィルス性疾
但の治療に有効な抗レトロウィルス剤に関するものであ
る。

［従来の技術および問題点］ウィルスに関する研究が為されるにつれ、ウィルス性疾
患の治療法が徐々に確立されつつある。

特に最近問題となっている後天性免疫不全症候群（ＡＩ
ＤＳ）を引き起こす、ＨＩ　Ｖ　（Ｈｕｍａｎ　１ｍｍ
ｕｎ。

ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　Ｖｉｒｕｓ）、ＨＴＬＶ−Ｉ（
成人Ｔ細胞白血病ウィルス）等はレトロウィルスとして
知られている。

レトロウィルスはウィルス粒子内に、ＲＮ　Ａ　（ｌｉ
存ＤＮＡ合成酵素（以下、逆転写酵素と称する）を含む
ウィルスであり、以下のようにして増殖している。

■宿主細胞に感染後、まずＲＮＡが逆転写酵素によりＤ
ＮＡに転写される。

■このＤＮＡが宿主細胞染色体に組み込まれ、次いで宿
主細胞のＲＮＡ合成酵素によってｍＲＮ　Ａか合成され
る。

■このｍＲＮ　Ａにより各種のウィルス蛋白が生成され
る。

このレトロウィルスに起因するヒトの疾病に画期的な治
療効果を有する薬剤の開発が望まれていた。

［問題を解決するための手段］本発明者等は種々の生薬について、レトロウィルス増殖
阻害効果に関する研究を行った結果、生薬陳皮より抽出
単離したヘスペレチンにレトロウィルス増殖阻害効果の
あることを見い出した。

本発明はこの知見に基づくもので、ヘスペレチンを有効
成分とする抗レトロウィルス剤である。

ヘスペレチンは抗炎症作用、抗アレルギー作用、降圧作
用を有することが知られている。また、このヘスペレチ
ンがＤＮＡウィルスの増殖を抑制することも知られてい
るが、逆転写酵素を有し、この逆転写酵素により増殖す
るレトロウィルスに対して、抗レトロウイルス効果を有
することは従来全く知られていなかったことである。

ヘスペレチンは下記の化学構造で示される化合物であり
、東京化成工業株式会社より市販されている。

［発明の効果］本発明の抗レトロウィルス剤が抗レトロウイルス効果を
有することについて実験例を挙げて説明する。

実験例！マウス白血病ウィルス（ラウシャー株）感染細胞を培養
し、中高等の方法［Ｃ０ＮＰＡＲＡＴＩＶＥ　ＬＥＵＫ
ＥＭＩＡＲＥＳＥＡＲＣｌｌ　１９７３．ＬＥＵＫＥＭ
ＯＧＥＮＥＳＩＳ、ＥＤ、Ｙ、　ＩＴＯ，ＡＮＤ　Ｒ。

Ｍ、ＤｔｌＴＣＨＥＲ，ＵＮＩＶ、ＯＦ　ＴＯＫＹＯＰ
ＲＥＳＳ　　ＴＯＫＹＯ／ＫＡＲＧＥＲ。

ＢＡＳＥＬ、ＰＰ、６０３−６０５（１９７５）］に準
拠して、逆転写酵素を分離精製した。次に一１以下の組
成の反応混合液を調製した。

０逆転写酵素　　　　　　　　１単位／ｄＯテンプレー
ト・プライマー複合体としてのポリアデニル酸・オリゴ
デミジル酸複合体［ポリアデニル酸（ファルマシア製）
；オリゴチミジル酸（ファルマシア製）＝４：１］　　
　　　　　　　　　　　　　　２ｕ９／ｄｏトリス塩酸
（ｐＨ８，０）　　　　　　　　　　　５０ｚＭＯジチ
オスレイトール　　　　　　　　　　５關Ｏ塩化カリウ
ム　　　　　　　　　　　　　　５０門Ｏ塩化マンガン
　　　　　　　　　　　　０．２ｍＭ０［３Ｈ］デオキ
シチミジン三リン酸　　　　　　　　　　　　０．０１
ｆｆＭ（以下、［’Ｈ］ｄＴＴＰと略す）　　　　　　
　　　（４００ｃｐｍ／ｐＩｌｆｆｌ）Ｏグ　リ　セ　
ロ　−　ル　　　　　　　　　　　Ｉ　５　（ｖ／ｖ）
％０精製水　　　　　　　　　　　適量＊１単位とは、逆転写酵素が３７°Ｃ１１時間でｄＮＴ
Ｐ（デオキシ核酸三リン酸）　１　ｎｄを消費する比活
性単位である。

この反応混合液２０成に、ヘスペレチンおよび精製水を
加えて５０ｄとし、［３Ｈ］ｄＴＴＰの酸不溶性画分へ
の放射活性の取り込みをベックマン・ンンチレーション
カウンターで測定して、逆転写酵素活性とし、各濃度に
おける阻害率を算出した。

その結果を第１表に示す。

第１表実験例２Ｍ　Ｔ　−２細胞を濃度３ＸＩＯ’個／ｄに調製し、１
０％ＦＣ３（ギブコ社製）を含むＲＰ）ＩＩ＋　１６４
０（ギブコ社製）培地中において培養した。２日後、Ｍ
　Ｔ　−２細胞２００個あたり１個のＨＩＶを感染させ
た後、ヘスペレチン５１１１／ｆｄ添加群と非添加群（
対照群）に分けて薬剤の添加効果を観察した。１週後、
生細胞数を計測した結果、本発明の抗レトロウィルス剤
によって、ＦＩＩｖによるＭＴ−２細胞変性は９０％以
上抑制されることが確認された。

この結果から優れた抗レトロウイルス効果が確認された
。

以上のように本発明の抗レトロウィルス剤は、レトロウ
ィルスの増殖において必要な逆転写酵素活性を阻害する
ことにより、その増殖を抑制する作用を有するものであ
るからレトロウィルスであればいかなるウィルスにも適
用することができる。

レトロウィルスの具体例としては、白血病ウィルス、肉
腫ウィルス、乳癌ウィルス、ヒスウィルス、マエデイウ
イルス、ＨＩＶＳＩ−ＩＴＬＶ−Ｉ等が挙げられる。

次に、ヘスペレチンの経口投与での急性毒性試験をｄｄ
Ｙ系雄性マウス及びウィスター（Ｗｉｓｔａｒ）系雄性
ラットを用いて行ったところ、ヘスペレチンは１９７に
９の経口投与でも死亡例はなかった。

このように、ヘスペレチンは、極めて毒性が低く安全性
の高いものである。

次に、ヘスペレチンの投与量および製剤化について説明
する。

ヘスペレチンはそのまま、あるいは慣用の製剤担体と共
に動物および人に投与することができる。

投与形態としては、特に限定がなく、必要に応じ適宜選
択して使用され、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、
散剤等の経口剤、注射剤、層剤等の非経口剤が挙げられ
る。

経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の年
令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人でヘス
ペレチンの重量として１００〜６０００　ｍｇを、１日
数回に分けての服用が適当と思イつれる。

本発明において錠剤、カプセル剤、顆粒剤等の経口剤は
、例えばデンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルボキ
シメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩類等を用
いて常法に従って製造される。

この種の製剤には、適宜前記賦形剤の他に、結合剤、崩
壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着
色剤、香料等を使用することができる。それぞれの具体
例は以下に示す如くである。

［結合剤］デンプン、デキストリン、アラビアゴム末、ゼラチン、
ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、カル
ボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピ
ルセルロース、結晶セルロース、エチルセルロース、ポ
リビニルピロリドン、マクロゴール。

［崩壊剤］デンプン、ヒドロキシプロピルスターチ、カルボキンメ
チルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロー
スカルシウム、カルボキシメチルセルロース、低置換ヒ
ドロキシプロピルセルロース。

［界面活性剤］ラウリル硫酸ナトリウム、大豆レンチン、ショ糖脂肪酸
エステル、ポリソルベート　８００［滑沢剤］タルク、ロウ類、水素添加植物油、ショ糖脂肪酸エステ
ル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルンウ
ム、ステアリン酸アルミニウム、ポリエチレングリコー
ル。

［流動性促進剤］軽質無水ケイ酸、乾燥水酸化アルミニウムゲル、合成ケ
イ酸アルミニウム、ケイ酸マグネシウム。

また、ヘスペレチンは、懸詞液、エマルジョン剤、シロ
ップ剤、エリキシル剤としてら投与することができ、こ
れらの各種剤形には、矯味矯臭剤、着色剤を含有しても
よい。

非経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の
年令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人でヘ
スペレチンの重機として１日１〜１００　ｒｔｔｙまで
の静注、点滴静注、皮下注射、筋肉注射が適当と思われ
る。

この非経口剤は常法に従って製造され、希釈剤として一
般に注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、注射
用植物油、ゴマ油、ラッカセイ油、ダイズ池、トウモロ
コン油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコー
ル等を用いることができる。さらに必要に応じて、殺菌
剤、防腐剤、安定剤を加えてもよい。また、この非経口
剤は安定性の点から、バイアル等に充填後冷凍し、通常
の凍結乾燥技術により水分を除去し、使用直府に凍結乾
燥物から液剤を再調製することもできる。更に、必要に
応じて適宜、等張化剤、安定剤、防腐剤、無痛化剤等を
加えても良い。

その他の非経口剤としては、外用液剤、軟膏等の塗布剤
、直腸内投与のための層剤等が挙げられ、常法に従って
製造される。

実施例１ ■結晶セルロース　　　　　８４．５９■ステアリン酸
マグネシウム　０．５９■カルボキシメチルセルロースカルシウム　　　　５９ ■ヘスペレチン　　　　　　　１０９計　　　　　１００９上記の処方に従って■、■および■の一部を均一に混合
し、圧縮成型した後、粉砕し、■および■の残量を加え
て混合し、打鍵機にて圧縮成型して一部２００　Ｒ９の
錠剤を得た。

この錠剤−錠には、ヘスペレチン２０．１１９が含有さ
れており、成人１日５〜７錠を数回にわけて服用する。

実施例２ ■コーンスターチ　　　　　　８４９ ■ステアリン酸マグネシウム　０，５９■カルボキシメ
チルセルロースカルシウム　　　５９ ■軽質無水ケイ酸　　　　　　０．５９■ヘスペレチン
　　　　　　　ｔｏ９計　　　　　１００９上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、圧縮成型機
にて圧縮成型後、破砕機により粉砕し、篩別して顆粒剤
を得た。

この顆粒剤１ｇには、ヘスペレチンＩ　００　Ｒ９が含
有されており、成人１日１〜２．５９を数回にわけて服
用する。

実施例３ ■コーンスターチ　　　　　８９．５９■軽質無水ケイ
酸　　　　　　０．５１■ヘスペレチン　　　　　　　
１０９計　　　　　１００９上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、２００　Ｒ
９を２号カプセルに充填した。

このカプセル剤１カプセルには、ヘスペレチン２０句が
含有されており、成人１日５〜７カプセルを数回にわけ
て服用する。

実施例４ ■注射用蒸留水　　　　　　　適量 ■ブドウ糖　　　　　　　　　２００句■ヘスペレチン
　　　　　　　　１０．マ９全棗　　　　　　　　１５
７ｄ注射用蒸留水に■および■を溶解させた後、５７ｄのア
ンプルに注入し、１２１　’Ｃで１５分間加圧滅菌を行
って注射剤を得た。

Claims

【特許請求の範囲】

ヘスペレチンを有効成分とする抗レトロウイルス剤。