JPH0251150B2 - - Google Patents
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- JPH0251150B2 JPH0251150B2 JP15492283A JP15492283A JPH0251150B2 JP H0251150 B2 JPH0251150 B2 JP H0251150B2 JP 15492283 A JP15492283 A JP 15492283A JP 15492283 A JP15492283 A JP 15492283A JP H0251150 B2 JPH0251150 B2 JP H0251150B2
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Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
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- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
発明の背景
技術分野
本発明は、血中の抗原または抗体量の測定方法
およびそれに使用する試験液に関するものであ
る。 さらに詳しくは、本発明は、血中の抗原または
抗体量を免疫反応に基づく凝集反応により測定す
る方法およびそれに使用する試験液に関するもの
である。 本発明は、慢性関節リウマチの診断等各種の免
疫学的検査に利用される。 先行技術およびその問題点 従来、凝集反応により血液中の抗原または抗体
量を測定する場合、検体中に赤血球が存在すると
肉眼による凝集の判定が困難であることから検体
として血清が用いられていた。しかし検体の個数
が多い場合等は血清の調製に相当の手間と時間を
要する。また血清の調製のため、本来検査に必要
としない余分な量の血液を採取しなければならな
い。 発明の目的 そこで本発明は、血清を調製する手間を省き、
全血から直接抗原または抗体量を測定することが
できる方法を提供することを目的とする。 さらに本発明は、上記の測定方法に使用される
試験液を提供することを目的とする。 かかる目的を達成するため、本発明は、全血検
体に溶血剤の抗原または抗体感作担体浮遊液とを
加え、その凝集反応を追跡することを特徴とする
血中の抗原または抗体量の測定方法からなる。 さらに本発明は、溶血剤と抗原または抗体感作
担体とを含有する上記測定に使用される試験液か
らなる。 さらに本発明は、溶血剤がサポニンである上記
試験液からなる。 発明の具体的説明 本発明の方法は、採取した全血検体に溶血剤と
抗原または抗体感作担体浮遊液とを加え、その凝
集反応を追跡することによつて実施される。 上記方法において溶血剤としてはサポニンや各
種の界面活性剤が使用される。溶血剤は凝集反応
に先立つて予め全血に加え、赤血球を溶解しても
よく、あるいは、抗原または抗体感作担体浮遊液
に約0.2〜２％の濃度で加えておき、凝集反応の
際に赤血球を溶解させてもよい。抗原または抗体
感作担体としては、ラテツクス樹脂、無機吸着
剤、薬品処理した固定赤血球等従来公知のものが
特に限定なく使用されうる。 凝集反応の追跡は常法に従つて行なわれる。即
ち、全血１滴をスライドグラス上に滴下し、これ
に溶血剤および抗原または抗体感作担体浮遊液の
１滴を加え木の棒でよく混和し、およそ20×25mm
ぐらいにひろげる。スライドグラスを両手にも
ち、１分間ゆり動かした後凝集の有無を肉眼で判
定する。その際赤血球は溶解しているので凝集判
定の阻げにならない。 次に実施例を示して本発明をさらに具体的に説
明する。 実施例 (1) リユーマチ因子（RF）検出用ヒトガンマー
グロブリン感作ラテツクスの作成 グリシン−塩化ナトリウム緩衝液（PH8.2）
（以下GNBと略称する）にポリスチレンラテツ
クス（粒径0.117μ）を固形分2.0％となるよう
に加えて懸濁させる。一方、GNBに対して透
析したヒトガンマーグロブリンを10mg／mlとな
るようにGNBに溶かす。両液を体積比１：１
で混合し、50℃で１時間加温した。得られた液
をGNBで遠心洗浄（17000γpm、10分間）し、
これに牛血清アルブミン0.5％、サポニン0.4％
を含むGNBを加えて0.4％感作ラテツクス浮遊
液を作成した。以上の条件では感作蛋白濃度は
10〜100μｇＮ／ml、ラテツクス粒子密度は4.53
×108個／mlとなり、ラテツクス粒子１個当た
り75000個のガンマーグロブリン分子が結合す
ると概算された。 (2) スライド凝集反応 上記(1)で得られた感作ラテツクス１滴（約
0.02〜0.03ml）および血液または血清１滴を反
応用スライドグラス上でよく混ぜ合わせ、直径
約２cm程度にひろげて凝集反応を行なつた。ス
ライドグラスを前後にゆり動かしながら１分後
に凝集の有無、程度を次の判定基準に従い判定
した。結果を表１に示す。 陽性（＋） 液全体に凝集塊が極めて多く、凝集している
ことが肉眼ではつきり認められる。 陰性（−） 肉眼では全く凝集が認められない。 判定不能（？） ラテツクスの凝集が判然としない。 陽性コントロール 慢性関節リウマチ（RA）コントロール血清
（凝集力価160） 陰性コントロール 健常人血清 上記コントロール血清と健常人濃厚赤血球と
をそれぞれ再構成し（ヘマトクリツト値40％）、
被検体とした。
およびそれに使用する試験液に関するものであ
る。 さらに詳しくは、本発明は、血中の抗原または
抗体量を免疫反応に基づく凝集反応により測定す
る方法およびそれに使用する試験液に関するもの
である。 本発明は、慢性関節リウマチの診断等各種の免
疫学的検査に利用される。 先行技術およびその問題点 従来、凝集反応により血液中の抗原または抗体
量を測定する場合、検体中に赤血球が存在すると
肉眼による凝集の判定が困難であることから検体
として血清が用いられていた。しかし検体の個数
が多い場合等は血清の調製に相当の手間と時間を
要する。また血清の調製のため、本来検査に必要
としない余分な量の血液を採取しなければならな
い。 発明の目的 そこで本発明は、血清を調製する手間を省き、
全血から直接抗原または抗体量を測定することが
できる方法を提供することを目的とする。 さらに本発明は、上記の測定方法に使用される
試験液を提供することを目的とする。 かかる目的を達成するため、本発明は、全血検
体に溶血剤の抗原または抗体感作担体浮遊液とを
加え、その凝集反応を追跡することを特徴とする
血中の抗原または抗体量の測定方法からなる。 さらに本発明は、溶血剤と抗原または抗体感作
担体とを含有する上記測定に使用される試験液か
らなる。 さらに本発明は、溶血剤がサポニンである上記
試験液からなる。 発明の具体的説明 本発明の方法は、採取した全血検体に溶血剤と
抗原または抗体感作担体浮遊液とを加え、その凝
集反応を追跡することによつて実施される。 上記方法において溶血剤としてはサポニンや各
種の界面活性剤が使用される。溶血剤は凝集反応
に先立つて予め全血に加え、赤血球を溶解しても
よく、あるいは、抗原または抗体感作担体浮遊液
に約0.2〜２％の濃度で加えておき、凝集反応の
際に赤血球を溶解させてもよい。抗原または抗体
感作担体としては、ラテツクス樹脂、無機吸着
剤、薬品処理した固定赤血球等従来公知のものが
特に限定なく使用されうる。 凝集反応の追跡は常法に従つて行なわれる。即
ち、全血１滴をスライドグラス上に滴下し、これ
に溶血剤および抗原または抗体感作担体浮遊液の
１滴を加え木の棒でよく混和し、およそ20×25mm
ぐらいにひろげる。スライドグラスを両手にも
ち、１分間ゆり動かした後凝集の有無を肉眼で判
定する。その際赤血球は溶解しているので凝集判
定の阻げにならない。 次に実施例を示して本発明をさらに具体的に説
明する。 実施例 (1) リユーマチ因子（RF）検出用ヒトガンマー
グロブリン感作ラテツクスの作成 グリシン−塩化ナトリウム緩衝液（PH8.2）
（以下GNBと略称する）にポリスチレンラテツ
クス（粒径0.117μ）を固形分2.0％となるよう
に加えて懸濁させる。一方、GNBに対して透
析したヒトガンマーグロブリンを10mg／mlとな
るようにGNBに溶かす。両液を体積比１：１
で混合し、50℃で１時間加温した。得られた液
をGNBで遠心洗浄（17000γpm、10分間）し、
これに牛血清アルブミン0.5％、サポニン0.4％
を含むGNBを加えて0.4％感作ラテツクス浮遊
液を作成した。以上の条件では感作蛋白濃度は
10〜100μｇＮ／ml、ラテツクス粒子密度は4.53
×108個／mlとなり、ラテツクス粒子１個当た
り75000個のガンマーグロブリン分子が結合す
ると概算された。 (2) スライド凝集反応 上記(1)で得られた感作ラテツクス１滴（約
0.02〜0.03ml）および血液または血清１滴を反
応用スライドグラス上でよく混ぜ合わせ、直径
約２cm程度にひろげて凝集反応を行なつた。ス
ライドグラスを前後にゆり動かしながら１分後
に凝集の有無、程度を次の判定基準に従い判定
した。結果を表１に示す。 陽性（＋） 液全体に凝集塊が極めて多く、凝集している
ことが肉眼ではつきり認められる。 陰性（−） 肉眼では全く凝集が認められない。 判定不能（？） ラテツクスの凝集が判然としない。 陽性コントロール 慢性関節リウマチ（RA）コントロール血清
（凝集力価160） 陰性コントロール 健常人血清 上記コントロール血清と健常人濃厚赤血球と
をそれぞれ再構成し（ヘマトクリツト値40％）、
被検体とした。
【表】
表１から、サポニン添加感作ラテツクス試験
液においては、検体として全血を使用しても判
定が明瞭であり特異性に優れていることが明ら
かである。 発明の具体的作用効果 本発明によれば、全血から直接抗原または抗体
量を測定することができる血中の抗原または抗体
量測定方法が提供される。 本発明の方法においては前述した如く溶血剤が
使用され、赤血球が溶解するので検体として全血
を用いても凝集の有無判定は容易である。従つて
従来の測定法におけるように、凝集試験のために
血清を調製する必要がなく、測定操作が簡略化さ
れる。 さらに本発明によれば、上記の測定に好適に使
用される試験液が提供される。本発明の試験液
は、溶血剤と抗原または抗体感作担体とを含有し
ているので、これを全血と混合するだけで赤血球
が溶け、凝集の判定が容易に行なわれる。
液においては、検体として全血を使用しても判
定が明瞭であり特異性に優れていることが明ら
かである。 発明の具体的作用効果 本発明によれば、全血から直接抗原または抗体
量を測定することができる血中の抗原または抗体
量測定方法が提供される。 本発明の方法においては前述した如く溶血剤が
使用され、赤血球が溶解するので検体として全血
を用いても凝集の有無判定は容易である。従つて
従来の測定法におけるように、凝集試験のために
血清を調製する必要がなく、測定操作が簡略化さ
れる。 さらに本発明によれば、上記の測定に好適に使
用される試験液が提供される。本発明の試験液
は、溶血剤と抗原または抗体感作担体とを含有し
ているので、これを全血と混合するだけで赤血球
が溶け、凝集の判定が容易に行なわれる。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 全血検体に溶血剤と抗原または抗体感作担体
浮遊液とを加え、その凝集反応を追跡することを
特徴とする血中の抗原または抗体量の測定方法。 ２ 溶血剤と抗原または抗体感作担体とを含有す
ることを特徴とする血中の抗原または抗体量の測
定に使用する試験液。 ３ 溶血剤がサポニンである特許請求の範囲第２
項記載の試験液。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15492283A JPS6047962A (ja) | 1983-08-26 | 1983-08-26 | 血中の抗原または抗体量の測定方法およびそれに使用する試験液 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15492283A JPS6047962A (ja) | 1983-08-26 | 1983-08-26 | 血中の抗原または抗体量の測定方法およびそれに使用する試験液 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6047962A JPS6047962A (ja) | 1985-03-15 |
| JPH0251150B2 true JPH0251150B2 (ja) | 1990-11-06 |
Family
ID=15594880
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP15492283A Granted JPS6047962A (ja) | 1983-08-26 | 1983-08-26 | 血中の抗原または抗体量の測定方法およびそれに使用する試験液 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6047962A (ja) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60244861A (ja) * | 1984-05-19 | 1985-12-04 | Masakatsu Hashimoto | 溶血式測定方法及びそれに使用する試薬キツト |
| US6855562B1 (en) | 1996-07-30 | 2005-02-15 | Horiba, Ltd. | Immunoassay method for lyzed whole blood |
| ATE316244T1 (de) * | 2000-07-27 | 2006-02-15 | Sysmex Corp | Vollblut-immunoassay |
| GB2372319A (en) * | 2000-12-12 | 2002-08-21 | R A Lab Ltd | A solid phase immunoassay involving blood cells which assay excludes washing steps |
-
1983
- 1983-08-26 JP JP15492283A patent/JPS6047962A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6047962A (ja) | 1985-03-15 |
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