JPS60257363A - Ｆｄｐの測定法 - Google Patents
Ｆｄｐの測定法Info
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- JPS60257363A JPS60257363A JP11395384A JP11395384A JPS60257363A JP S60257363 A JPS60257363 A JP S60257363A JP 11395384 A JP11395384 A JP 11395384A JP 11395384 A JP11395384 A JP 11395384A JP S60257363 A JPS60257363 A JP S60257363A
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Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/86—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood coagulating time or factors, or their receptors
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明はフィブリノゲン、フィブリン分解産物（以下Ｆ
ＤＰと略す）の測定法に関する。
ＤＰと略す）の測定法に関する。
近年、血栓・塞栓により死亡したり基礎疾患が増悪した
りする例が増加し、それにつれて臨床検査法も進展して
きている。現在は抗ヒトフィブリノゲン抗体を被覆した
ポリスチレンラテックス粒子を用いる凝集法が一般的に
用いられている。しかしながらこの場合には検体中のフ
ィブリノゲンの混在があると疑似的にＦＤＰが陽性とな
って表現される。そのため検体は確実に脱フィブリノゲ
ンされた血清もしくは同等品であることが要求されるが
、そのような操作は煩雑であり、臨床的にはフィブリノ
ゲンの存在下でもＦＤＰを特異的にかつ簡便に測定する
方法ならびにその試薬の開発が強く望まれていた。この
問題を克服する目的で本発明者らは鋭意研究し本発明を
完成した。
りする例が増加し、それにつれて臨床検査法も進展して
きている。現在は抗ヒトフィブリノゲン抗体を被覆した
ポリスチレンラテックス粒子を用いる凝集法が一般的に
用いられている。しかしながらこの場合には検体中のフ
ィブリノゲンの混在があると疑似的にＦＤＰが陽性とな
って表現される。そのため検体は確実に脱フィブリノゲ
ンされた血清もしくは同等品であることが要求されるが
、そのような操作は煩雑であり、臨床的にはフィブリノ
ゲンの存在下でもＦＤＰを特異的にかつ簡便に測定する
方法ならびにその試薬の開発が強く望まれていた。この
問題を克服する目的で本発明者らは鋭意研究し本発明を
完成した。
即ち、近年各方面で応用されているハイブリドーマ法に
より、先に特許出願を行った特願昭５９−２０８４２号
に記載したフィブリノゲンとは反応しない抗ＦＤＰモノ
クローナル抗体を得、これをラテックス凝集法に適用す
ることによりフィブリノゲン存在下でも適確にＦＤＰの
量を測定することを可能にした。
より、先に特許出願を行った特願昭５９−２０８４２号
に記載したフィブリノゲンとは反応しない抗ＦＤＰモノ
クローナル抗体を得、これをラテックス凝集法に適用す
ることによりフィブリノゲン存在下でも適確にＦＤＰの
量を測定することを可能にした。
本発明の原理は抗ヒトＦＤＰモノクローナル抗体で感作
したポリスチレンラテックス粒子を用いる逆受身凝集反
応である。即ち、先に特許出願した特願昭５９−ｉｏｓ
４ｚ号に記載の０８２０２．０Ｆ３２０４の２種の抗ヒ
トＦＤＰモノクローナル抗体をそれぞれポリスチレンラ
テックス粒子を緩衝液（ｐＨ８付近）に懸濁させた溶液
中に添加し＋’ ０３２０２抗ヒ１− Ｆ Ｄ Ｐモノ
クローナル抗体感作ポリスチレンラテックス粒子及び０
８２，０４抗ヒトＦＤＰモノクローナル抗体感作ポリス
チレンラテックス粒子を調製する。この両粒子を良く混
和し、測定用感作ラテックスとする。この感作ラテツク
スの一定量と被検体の一定量をスライド板もしくはマイ
クロクイタープレート上で良く混和揺動し、凝集像の有
無、もしくは強弱を観察し判定する。本発明に使用する
ポリスチレンラテックス粒子は市販のものが使用でき。
したポリスチレンラテックス粒子を用いる逆受身凝集反
応である。即ち、先に特許出願した特願昭５９−ｉｏｓ
４ｚ号に記載の０８２０２．０Ｆ３２０４の２種の抗ヒ
トＦＤＰモノクローナル抗体をそれぞれポリスチレンラ
テックス粒子を緩衝液（ｐＨ８付近）に懸濁させた溶液
中に添加し＋’ ０３２０２抗ヒ１− Ｆ Ｄ Ｐモノ
クローナル抗体感作ポリスチレンラテックス粒子及び０
８２，０４抗ヒトＦＤＰモノクローナル抗体感作ポリス
チレンラテックス粒子を調製する。この両粒子を良く混
和し、測定用感作ラテックスとする。この感作ラテツク
スの一定量と被検体の一定量をスライド板もしくはマイ
クロクイタープレート上で良く混和揺動し、凝集像の有
無、もしくは強弱を観察し判定する。本発明に使用する
ポリスチレンラテックス粒子は市販のものが使用でき。
その粒径は０１ないし１μｍ好ましくは０２ないし０５
μｍのものを使用するのが良い。また、予め透析・遠沈
等で緩衝液中に懸濁し使用しても良い。
μｍのものを使用するのが良い。また、予め透析・遠沈
等で緩衝液中に懸濁し使用しても良い。
被覆時の抗体濃度は該粒子の単位面積（約あたり６０な
いし５００■好ましくは１５０ないしｇｏｏｍ９の範囲
である。なお２本発明に使用できる被検体としては血清
、血漿、尿等が使用可能である。
いし５００■好ましくは１５０ないしｇｏｏｍ９の範囲
である。なお２本発明に使用できる被検体としては血清
、血漿、尿等が使用可能である。
本発明の利点としては次のことが挙げられる。
■ フィブリノケンと反応しないモノクローナル抗体を
使用するため、フィブリノケンの混在による影響を受け
ない。従って、被検体として従来の測定法では脱フィブ
リノゲンされた血清もしくは同等品に限定されていたが
１本発明の方法ではフィブリノケンの混在した血清、血
漿または尿等を使用することができる。
使用するため、フィブリノケンの混在による影響を受け
ない。従って、被検体として従来の測定法では脱フィブ
リノゲンされた血清もしくは同等品に限定されていたが
１本発明の方法ではフィブリノケンの混在した血清、血
漿または尿等を使用することができる。
■ 判定は凝集像を肉眼的に観察するため、特別な機器
を必要とせず、ベッドサイドでも容易に測定できる。
を必要とせず、ベッドサイドでも容易に測定できる。
以下実施例で本発明を説明する。
実施例
平均粒径０４２９μｍのポリスチレンラテックス粒子（
日本合成ゴム製）の１０％エマルジョンを１０ｍＭトリ
ス緩衝液（ｐＨ８） −１０ｍＭ塩化ナトリウム液（以
下トリス緩衝液という）に対し透析した後、固液で希釈
して１％濃度とした。先に特許出願した特願昭５９−２
０８４２号に記載した０３２０２、０３２０４の２種の
抗ヒトＦＤＰモノクローナル抗体をそれぞれトリス緩衝
液に透析した後、同緩衝液で希釈し２５０μｇ／ｍｅの
濃度とした。
日本合成ゴム製）の１０％エマルジョンを１０ｍＭトリ
ス緩衝液（ｐＨ８） −１０ｍＭ塩化ナトリウム液（以
下トリス緩衝液という）に対し透析した後、固液で希釈
して１％濃度とした。先に特許出願した特願昭５９−２
０８４２号に記載した０３２０２、０３２０４の２種の
抗ヒトＦＤＰモノクローナル抗体をそれぞれトリス緩衝
液に透析した後、同緩衝液で希釈し２５０μｇ／ｍｅの
濃度とした。
１％ポリスチレンラテックス粒子液ｌ容に対し。
２５０μｐ旬に調製した０８２０２抗ヒトＦＤＰモノク
ローナル抗体を１容添加し良く混合した後。
ローナル抗体を１容添加し良く混合した後。
室温に８時間放置しポリスチレンラテックス粒子に感作
した。未反応の抗体は遠心分離（１８，０００粒子はト
リス緩衝液で１回洗浄した後、０．１％牛血清アルブミ
ンおよび０００１％トリトンＸ−１００を含有するトリ
ス緩衝液に懸濁し２１％エマルジョンとした。
した。未反応の抗体は遠心分離（１８，０００粒子はト
リス緩衝液で１回洗浄した後、０．１％牛血清アルブミ
ンおよび０００１％トリトンＸ−１００を含有するトリ
ス緩衝液に懸濁し２１％エマルジョンとした。
また、０８．２０２抗ヒトＦＤＰモノクローナル抗体の
代りに０８２０４抗ヒトＦＤＰモノクローナル抗体を用
いて上記調製法と同様に操作して０３２０４抗ヒトＦＤ
Ｐモノクローナル抗体感作ポリスチレンラテックス粒子
を調製した。０８２０２抗ヒｉ・ＦＤＰモノクローナル
抗体感作ポリスチレンラテックス粒子および０３２０４
抗ヒトＦＤＰモノクローナル抗体感作ポリスチレンラテ
ックス粒子を等量ずつ混和し、ラテックス凝集用試薬と
し ゛た。血清２０μｌ、ラテックス凝集用試薬ｚＯμ
ｌをガラス製スライド上で良く混和し２分間揺動し凝集
の有無を判定した。
代りに０８２０４抗ヒトＦＤＰモノクローナル抗体を用
いて上記調製法と同様に操作して０３２０４抗ヒトＦＤ
Ｐモノクローナル抗体感作ポリスチレンラテックス粒子
を調製した。０８２０２抗ヒｉ・ＦＤＰモノクローナル
抗体感作ポリスチレンラテックス粒子および０３２０４
抗ヒトＦＤＰモノクローナル抗体感作ポリスチレンラテ
ックス粒子を等量ずつ混和し、ラテックス凝集用試薬と
し ゛た。血清２０μｌ、ラテックス凝集用試薬ｚＯμ
ｌをガラス製スライド上で良く混和し２分間揺動し凝集
の有無を判定した。
次に血漿を用いて同様に操作し判定を行った。
測定値は、凝集像を示さなくなる才で血漿および血清を
倍々に希釈ル、その希釈度で表した。
倍々に希釈ル、その希釈度で表した。
血漿と血清の測定結果はよく一致した。
Claims (1)
- ヒトフィブリノゲンまたはフィブリンのプラスミン分解
物（以下ＦＤＰと略す）中り画分もしくはＤＤ画分ある
いはＤ画分もしくはＤＤ画分を保持する画分とは反応す
るがフィブリノゲンとは反応しない性質を有し且つ互い
に認識する抗原決定基の異なる２種の抗ＦＤＰモノクロ
ーナル抗体を別個のポリスチレンラテックス粒子に被覆
した各々の抗Ｆｌ）Ｐ抗体と被検体とを接触させ凝集反
応させることを特徴とするＦＤＰの測定法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11395384A JPS60257363A (ja) | 1984-06-05 | 1984-06-05 | Ｆｄｐの測定法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11395384A JPS60257363A (ja) | 1984-06-05 | 1984-06-05 | Ｆｄｐの測定法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60257363A true JPS60257363A (ja) | 1985-12-19 |
Family
ID=14625342
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP11395384A Expired - Lifetime JPS60257363A (ja) | 1984-06-05 | 1984-06-05 | Ｆｄｐの測定法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60257363A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1991004492A1 (en) * | 1989-09-25 | 1991-04-04 | Agen Limited | Agglutination assay |
| JPH03118472A (ja) * | 1989-09-29 | 1991-05-21 | Sekisui Chem Co Ltd | インスリン定量方法及び定量試薬 |
| US5086002A (en) * | 1987-09-07 | 1992-02-04 | Agen Biomedical, Ltd. | Erythrocyte agglutination assay |
| EP1085088A1 (en) * | 1998-06-02 | 2001-03-21 | Teikoku Hormone Mfg. Co., Ltd. | Monoclonal antibodies and method for assaying fdp |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5678598A (en) * | 1979-11-28 | 1981-06-27 | Fujirebio Inc | Method for measuring enzyme immunity by simultaneous determination of two components |
| JPS5811856A (ja) * | 1981-07-16 | 1983-01-22 | Mihama Hisaharu | 抗フラグメントＤγ−２量体血清の製造方法 |
| JPS5880558A (ja) * | 1981-11-09 | 1983-05-14 | Sekisui Chem Co Ltd | 免疫化学的測定試薬 |
| JPS60185800A (ja) * | 1983-11-14 | 1985-09-21 | ニユ−ヨ−ク ブラツド センタ−，インコ−ポレイテイド | モノクロナ−ル抗体 |
-
1984
- 1984-06-05 JP JP11395384A patent/JPS60257363A/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5678598A (en) * | 1979-11-28 | 1981-06-27 | Fujirebio Inc | Method for measuring enzyme immunity by simultaneous determination of two components |
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| JPS5880558A (ja) * | 1981-11-09 | 1983-05-14 | Sekisui Chem Co Ltd | 免疫化学的測定試薬 |
| JPS60185800A (ja) * | 1983-11-14 | 1985-09-21 | ニユ−ヨ−ク ブラツド センタ−，インコ−ポレイテイド | モノクロナ−ル抗体 |
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| US5413913A (en) * | 1987-09-07 | 1995-05-09 | Agen Biomedical, Ltd. | Erythrocyte agglutination assay |
| WO1991004492A1 (en) * | 1989-09-25 | 1991-04-04 | Agen Limited | Agglutination assay |
| JPH03118472A (ja) * | 1989-09-29 | 1991-05-21 | Sekisui Chem Co Ltd | インスリン定量方法及び定量試薬 |
| EP1085088A1 (en) * | 1998-06-02 | 2001-03-21 | Teikoku Hormone Mfg. Co., Ltd. | Monoclonal antibodies and method for assaying fdp |
| EP1085088A4 (en) * | 1998-06-02 | 2001-11-28 | Teikoku Hormone Mfg Co Ltd | MONOCLONAL ANTIBODIES AND THEIR DETERMINATION METHOD |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |