JPH02501220A - 芳香族多環式ジオンを含有する抗ウイルス性薬剤及びレトロウイルス感染治療方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 芳香族多環式ジオンを含有する抗ウイルス性薬剤及びレトロウィルス感染治療方 法 技術分野 本発明は抗ウイルス性芳香族ジオン化合物を含む薬剤及びそれを使用した方法に 関する。

背景技術 多年にわたり抗ウイルス性療法の分野では宿主細胞には何ら損傷を与えずにその 宿主細胞内に侵入したウィルスがそのなかで増殖することを阻害してしまう作用 を持つ薬がめられてきた。ウィルスの子孫に遺伝させるため細胞の生化学的機作 を占有し、細胞を身体的に侵害するウィルスの能力はそのようなウィルスの選択 的な抑制の根櫨を形成できるような独特な生化学的な態様を示すのは僅かである 。その僅かの化合物のみ選択性の抗ウイルス性活性を持つことが知られていて、 特にアジドチミジン（ＡＺＴ）、ジデオ牛シシチジン、アシクロビア、リバビリ ン及びビハラジンのような抗ウイルス性治療薬剤の床几な種類があり、ウィルス が細胞機能を阻害できるよりも薬剤がさらに有効にウィルスの機能を阻害できる という事実は薬剤の選択的な毒性に負っている。一般的にこれらの薬剤はウィル ス性のポリメラーゼ、ホスホリラーゼ、及びヌクレオチドキナーゼを目標にして ｙ）る。これらの薬剤の使用はウィルス性活性の範囲が狭いために、長時間にわ たって宿主有機体に対し系統的に投与されるときには副作用の毒性のために限定 されている。

インクフェロンは抗ウイルス性ポリペプチドであり、最近ヒトに対して治療に実 験的に使用されているが、しかしながら現状では治療的価値は限定されているよ うに思われる。ヒトのインクフェロンの精製と純化にはうんざりするほどの過程 が必要。

とされ、利用できる量は限定され、細胞毒性が起こることも知られている。

最近、レトロウィルスに活性である薬剤を発見することは特に、ヒトの免疫欠損 ウィルス（ＨＩ　Ｖ）が後天性免疫欠損症候群を引きおこすので非常に重要にな ってきている。

それ故に、技術は定常的に新しい抗ウイルス性薬剤を探求しつづけられ、レトロ ウィルスに対して有効な特殊な薬剤が追及されている。それらの薬剤は低い細胞 毒性を有して高度のウィルス殺傷力を発揮し、多くの通常の抗−ウィルス性製剤 に対して抵抗性があることが証明されている。

発　明　の　目　的 本発明の目的は抗ウイルス性活性及び低細胞毒性を有する治療薬剤を提供するこ とである。

本発明の他の目的はレトロウィルスにより生じる病気及びレトロウィルス感染に 苦しむ哺乳類動物を治療するために抗ウイルス性薬剤を使用する方法を提供する ことである。

本発明のさ、らに他の目的はレトロウィルス感染に苦しむ哺乳発明の要約 成る芳香族多環式ジオン化合物、ヒペリシン及びブソイドヒペリシンにより例証 され、家族性ヒペリシウム（Ｆａｍｉｌｙ　股■虹ｉｃｕｍ　Ｓｔ、Ｊｏｈｎｓ ｖｏｒｔ）の植物に存在し、植物のオトギリソウ科の薬草Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ　 ｔｒｉｑｕｅｔｒｉｆｏｌｉｕｍから遊離されてきた芳香族多環式ジオン化合物 は、例えばブレンド白血病ウィルス（Ｆｒｉｅｎｄ　Ｌｅｕｋｅｍｉａ　Ｖｉｒ ｕｓ　（ＦＶ））　、放射線白血病ウィルス（Ｒａｄｉａｔｉｏｎ　Ｌｅｕｋｅ ｍｉａ　Ｖｉｒｕｓ　（ＲａｄＬＶ）及びヒト免疫欠損ウィルス（ｈｕｍａｎ　 ｉｌｌｌｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　Ｖｉｒｕｓ　（ＨＩＶ、またはＩＩＴ ＬＶ　Ｉｌｌとして公知である））を含むレトロウィルスに対して有効であるこ とは思いがけない発見でありた。

本発明はヒペリシン、ブンイドヒペリシンまたはその混合物によるそのようなウ ィルスを抑制するのに有効な量を含むレトロウィルスにより生じた病気で苦しむ 哺乳類動物を治療する薬剤を提供するものである。その製剤はまた生理学的に受 け入れられる担体及び塩類を含有できる。別の観点として本発明はヒペリシン、 プソイドヒペリシンまたはその混合物によるレトロウィルス治療のための有効量 をレトロウィルス感染で苦しむ哺乳類動物に投与することからなり、レトロウィ ルスにより生じる病気で苦しむ哺乳類動物の治療方法を提供するものである。

本発明は当業者にとって詳細な説明、請求の範囲及び図面に照らして明白になる であろう。

図面の簡単な説明 第１図はヒベリシンの化学構造を示す図である。

第２図はプソイドヒペリシンの化学構造を示す図である。

第３図はプソイドヒペリジンで治療した後放射性白血病ウィルス感染マウス細胞 の逆転写酵素活性の抑制を説明する棒グラフである。

発明の詳細な説明 ヒペリシン及びプソイドヒペリシンを含む成る芳香族多環式ジオンは抗ウイルス 性薬剤であり、レトロウィルスに対して活性が高い。抗−レトロウィルス薬剤は 多年性植物のむ上ｅｒｉｃｕｍ−ｔｒｉｑｕｅｔｒｉｆｏｌｉｕｍから遊離され てきた。

ここで使用されるレトロウィルスなる術語はＲＮＡゲノム及びＲＮＡ−従属ＤＮ Ａポリメラーゼ（逆転写酵素）酵素活性を含むウィルスに参照させられる。すべ てのレトロウィルスは単一ウィルス家族のなかに含まれ、形態学的、生化学的及 び物理的性質を持っている。これらのパラメータを表Ａに以下集約する。

表Ａ 公知のレトロウィルスの一般的な物理的性質５゛構造（ｍ’Ｇ’ｐｐｐ’Ｎｍｐ Ｎｐ）　；ポリアデニレート化３°末端； ３°及び５°末端での繰返し連続；　ｔＲＮＡはゲノム複合体に塩基対になって いる タンパク質　約ａｏｉｉｔ％ｌ　ｇａｇ、内部構造タンパク質；ｐｏ１２．逆転 写酵素；　ｅｎｖ、皮膜タンパク質脂　質　約３５重！％で、細胞膜から誘導さ れる炭水化物　約４重量％で、皮膜タンパク質と会合する物理化学的性質　密度 はスクロースのなかで１．１６−１．１８９７ｍ（１゜密度はセシウムクロライ ドのなかで１．１６−１．２１９／ｌ（！、脂脂質溶媒性洗浄剤敏感及び熱によ る不活性化（５６℃＋　３０　ｍ　ｉｎ　）　：紫外線及びＸ線照射に対して高 耐久性 形　態　球状皮膜ピリオン（８Ｇ−１２０−ｎｍ直径）、可変表面投影（８−ｎ ｍ直径）、２０面体カプシドはコア殻（核様体）と複合体をつくるリボヌクレす べてのレトロウィルスは同様な包括的な化学的組成を持っている。一般に、レト ロウィルスは約６０−７０％のタンパク質、３０−４０％の脂質、２〜４％の炭 水化物及び約１％のＲＮＡから成っている。レトロウィルス粒子の被膜は細胞− 表面膜から誘導され、ウィルス粒子における脂質の大部分はピリオンの単位薄膜 皮膜のなかに位置している。レトロウィルスの非制限的例にはフレンド白血病ウ ィルス（ＦＶ）、放射線白血病ウィルス（Ｒａ　ｄ　ＬＶ）及びヒトの免疫欠損 ウィルス（ＨＩ　Ｖ）がある。

本発明の芳香族多環式ジオン化合物がフレンド白血病ウィルスや放射線白血病ウ ィルスの複製をマウスについて生体内、試験管内の両方で抑制することは以外な 発見であった。さらに驚くべきことは抑制が以下の実施例に示すように哺乳類動 物の受容に対して重要な毒性なしに起こるということである。そこでは酵素レベ ルのようなラクテート　デバイドロゲナーゼ（ＬＤＨ）及び血清グルタミル　ア ミノトランスフェラーゼ（Ｓ　Ｇ。

Ｔ）及びこれらのビリルビン（胆汁）のような肝臓機能検査はフレンド白血病ウ ィルス感染により増殖し、（及びこのウィルスの病原性作用と会合しているが） 本発明の抗ウイルス性化合物の投与の後には正規値に近づき戻っている。

メルク　インデクス（１０版７１０頁）にはヒペリシンが抗抑制剤であり、小量 でもヒトの有機体に毒性及び精神安定効果を持つらしいことが記載されている。

さらに、ヒベリシンは摂取により光感受性を生じると言われている；　０ｘ４ｏ ｒｄ、ＲａｉｓｔｉｃｋＢｉｏｃｈｅｍ　Ｊ、　３４．７９０　（１９４０）。

ヒベリシン及びブソイドヒベリシンはレトロウィルス感染後のマウスに対する投 与のときにいずれも抗ウイルス性活性を示す。以下の実施例■に示すようにヒペ リシンはマウスにおけるＲａｄＬＶｇ染を抑制するのに効果があったし、プソイ ドヒペリシンはマウスにおけるＦＶ感染に対する抑制活性を示した。

さらに、ヒベリシンとブソイドヒペリシンの５０　：　５０の混合物は以下実施 例（２）に示されるように培養においてＲａｄＬＶ−感染マウス細胞の逆転写酵 素の酵素活性の完全抑制を導いた。同一レベルの抑制はヒペリシンまたはブソイ ドヒベリシン単独のいずれでも投与により達成できる。

芳香族多環式ジオンはヒトに対して精神安定剤として以前投与されてきたので血 液−脳障害に交差する可能性があると思われる。このことはＨＩＶの場合におい て、脳及び中央神経系統の感染が個人感染で観察されてきたために重要である。

またＨＩＶが脳及び中央神経系統の細胞を感染できることはよく知られている。

事実、最近、ｇｐ１２０はウィルス的に記号化したポリペプチドであり、直接二 ニーロン有機体の細胞に対して細胞毒性があることが知られている。それ故にこ れらのウィルス薬剤により生じる病気で苦しむ哺乳類動物の治療は本発明の最も 重要な応用である。

ヒベリシン及びプソイドヒペリジンは芳香族多環式ジオンであり、レトロウィル スにより生じた感染により苦しむ哺乳類動物の治療に用いることができる。これ らの抗ウイルス性ジオン化合物は以下実施例Ｉで詳しく示されるようにオトギリ ソウ科の薬草でヒペリシンを含有する７の植物から抽出によって得られる。また はＢｒｏｃｋｍａｎｎ、Ｍ、ｅｔ　ａＱ＊　Ｕ、Ｓ、特許Ｎｏ、２．７０７．７ ０４　１９５５年５月３日発行及びＢｒｏｃｋｔａａｎｎ、　Ｈ。

ｅｔ　ａ（ｌ　Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔｅｒｓ　２３　：　１９９１ −１９９４．１９７４．の方法を使用することにより化学的に合成することがで きる。これらの文献を引例としてここに挿入する。世界全土でのＳｔ、　Ｊｏｈ ｎｓｖｏｒｔ植物の有効性と床几な分布のために、比較的に便利で高価でない方 法が以下実施例■で本発明の化合物の抽出及び純化が詳しく説明される。抽出方 法は小量（例えばグラム）が望まれるときに好ましく、大量生産の製造に対して （キログラム及びそれ以上）は化学合成が望ましい。

Ｈｙｐｅｒｉｃｕａ＋は家族型Ｇｕｔｔｉｆｅｒｅａｅから１つの属である。そ れは＊を家族型肚と旺■■肚及びＣＱｕｓｉａｃｅａｅに関係しているとされて きた。その属は地理的にはるかに広汎に分布し、エーテル含有油として知られ、 赤い蛍光色素の小腸の産出が知られている。

植物のｌｙｐＢｒｉｃｕｍ属は非常に広汎な面積において中央及び東ヨーロッパ 、アジャ、北及び南アフリカに成長することが報告されている。さらにアメリカ 大陸、オーストラリヤ、ニニージーランドの成る部分にもその産出が報告されて いる。植物は「北アメリカ野生花に対するＡｕｄｕｂｏｎ　５ｏｃｉｅｔｙ　Ｆ ｉｅｌｄ　ＧｕｉｄのＥａｓｔｅｒＲｅｇｉｏｎＪ　ｐｇ、５５ｇ、ｃｈａｎｔ ｉｃｌｅｅｒ　Ｐｒｅｓｓ、１ｎｃ、ＮＹ、のなかに索引されている。この文献 を引例としてここに挿入する。

芳香族多環式ジオンは後天性免疫欠損症候群（ＡＩＤＳ）で苦しむ哺乳類動物の 治療に用いることができる。その効力及び細胞毒性が無いために芳香族多環式ジ オンはこれらの病気に対して特異的な抗ウイルス性治療薬剤として使用されるで あろう。

これらレトロウィルス感染を治療するために併発的な細胞毒性のない、利用でき る、広汎な範囲を有する薬剤は存在していない。

本発明はさらに抗ウィルス活性を有するヒベリシン及びプソイドヒペリシンの塩 類または他の誘導体を包含している。塩基がアルカリまたはアミンである塩類は 本発明の範囲のなかに特に含まれている。

本発明によればレトロウィルスにより生じる感染で苦しむ哺乳類動物を治療する ときに、感染に感応する特殊なレトロウィルスの治療のために最も有効な化合物 （またはその混合物）の投与は以下実施例■で記載されているようにヒトの免疫 欠損ウィルスまたは実施例■ではＦＶ及びＲ′ａｄＬｖについて実験動物におい て記載したように日常的実験法によって確認することができた。

レトロウィルスにより引きおこされるｖｉｒｅａ＋ｉａ　（血の流れのなかのウ ィルス）または５ｅｐｓｉｓ　（体の液体のウィルス汚染）のような先天性免疫 欠損症候群（ＡＩＤＳ）の治療に使用される時には本発明の芳香族多環式ジオン 化合物は口軽的、局所的、または好ましくは非口経的に、最も好ましくは静脈注 射により投与され、その服用量は、好ましくは治療当たり体重Ｋｇ当たり約４０ ０と約４０００マイクログラムの間であり、治療当たり体重Ｘｇ当たり約２００ マイクログラムと約１２０００マイクログラムの間で投与される。患者の病気を 制御するのに必要とされる治療または服用量の回数及びその接続期間は患者の条 件及び病気の段階及び苛酷さに依存し、個人個人で変化するであろう。代表的な 治療は本発明の化合物の１つまたはそれ以上を体重１１ｇ当たり約１０００と約 ３０００マイクログラムの静脈注射の投与からなる。各治療に必要な全服用量は 分割して投与することもまた一回の投与で行うこともできる。抗ウイルス治療は １週に１回また２回、またはそれ以上、患者の病気の段階及び患者の条件によっ て決められ投与される。

本発明の芳香族多環式ジオン化合物は便宜的には固体及び液体の薬剤（タブレッ ト、カプセル、キャブレット及び注射可能な及び口軽的に投与できる液体）に混 合され、膜ウィルス感染で苦しむ哺乳類動物を治療するのに使用される。本発明 の薬剤はすくなくとも活性成分の１つとして上述した芳香族多環式ジオンまたは その混合物の有効な抗ウイルス量を含んでいる。全服用量が１つまたは複数のカ プセル、タブレッ）、注射１またはその組み合わせの投与により達成できるため に各カプセル。

タブレットまたは注射液によって供給される有効服用量は相対的には重要でない 。そのような薬剤は薬学的に受け入れられる担体、稀釈剤、充填剤、塩類及び使 用される服用量の形に依存して公知技術の他の材料を包含する不活性な要素から 成るものである。カプセルが用い′られるときにはゼラチンまたは繊維素誘導体 のような薬学的に受け入れられる材料から構成できる。

タブレットは公知技術により固体の担体を使用する通常の方法で製剤することが できる。固体の担体としては例えば澱粉、糖。

ベントナイトまたは他の通常使用される担体が使用できる。例えば好ましい非口 軽服用量の形式は体重１１ｇ当たり０．２ミリグラム（２００マイクログラム） と体重１１ｇ当たり約１２ミリグラム（１２０００マイクログラム）との間の範 囲の芳香族多環式ジオンまたはその混合物を１つまたはそれ以上を含む無菌の等 滲透圧的な生理食塩溶液から成っている。プロピレングリコール、ベンジルアル コール、エタノールまたは他の生理学的に受け入れられる有機溶剤が稀釈剤、担 体または溶媒として本発明の抗ウイルス性化合物を含む固体及び液体の薬剤の調 製に使用できる。ヒペリシン及びプソイドヒペリジンは別々にまたは単一の服用 量の形式で混合＜ｍみ合わせ）して投与でき、または同時に共投与できる。使用 される特別な製剤の選択は特別な患者に最高に効く抗ウイルス性化合物または混 合物を確認することにより決定されるであろう。

本発明の芳香族多環式ジオンは免疫系細胞、Ｔ−細胞′またはインクロイキン− ２，細胞毒性薬剤のような因子、インクフェロンのようなリンパ循環または同類 物であり、レトロウィルスに対して有効性を持つことが知られているものと共投 与して完璧に適合できる。

本発明は特別な製造実施例を以下説明するがこれによって本発明の範囲が限定さ れるものではない。

実施例Ｉ ＳＴ、　ＪＯＨＮＳＹＯＲＴからのヒペリシン及びブソイドヒペリシンの抽出 ヒヘリシ：／　＋　（ＣｓｏＨｓｈｏ　＠＊分子量５０４．４３）　は、ニー、 ニーにＨｙと略称し、ブソイドヒベリシン（Ｃ，。Ｈ，，０，、分子ｊ１５２０ ．４３）はＰｓとここに略称する。ヒペリシン及びブソイドヒペリシンは次のよ うにして得られた。

全ＳＴ、　ＪＯＩＩＮＳＷＯＲＴの植物の薬草の開花時、東半球では７月から１ ０月にわたる間に刈り取られ、５５℃で乾燥され、切断され、粉砕された。そこ でにｇ当たり約５−１０ｆｆのアセトンにより抽出された。材料１１［ｇがソッ クスレー抽出器（キーマックス、二ニーシャーシー州ニューブルンスピック、フ ィッシャ　サイエンティフィクから入手可能）内に置かれ、約５から１０時間、 溶剤が無色になるまで抽出された。芳香族多環式ジオンを含有する溶液は赤色の 蛍光を有し、引例としてここに挿入される２つの文献５ｃｈｅｉｂｅ　鉦旦旦Ｊ 、Ｂｅｒ、　７５：　２０１９１９４Ｌ　Ｂｒｏｃｋａａｎｎ、Ｍ。

Ｎａｔｕｒｖｉｓｓ　３８　：　４’Ｌ　１９５Ｌに記載されているような吸収 スペクトル及び蛍光スペクトルを持っている。

芳香族多環式ジオンを含有する溶剤は減圧下で蒸発し、完全に残渣を乾燥し、残 渣を９５９得た。この残渣はさらにシリカゲル６０　（０，０６−０，２０ｘｘ 、イリノイ州マツクガウパーク　アメリカンサイエンティフィク　プロダックト 　マリンロード）を充填したクロマトグラフカラムで分別した。乾式クロマトグ ラフィ法は上述のように得られた残渣２５ｇｒをアセトンの約５００ａ＋ｆｆに 溶解し、等量のシリカゲル６０に加えられ使用された。回転蒸発器ｒｏｔａｖａ ｐｏｒ　（ブブチアメリカンサイエンティフィク　プロダクツ）により混合物が 均一になるまで渦巻させながら蒸発させ、乾燥した。シリカゲル６０のＩＫｇを 含むカラムの頂上にその混合物を置き、クロロホルムにより溶剤がカラムの底に 達すまで溶離させた。つづいてクロロホルム−アセトン−メタノール、７５　： 　１５　：　１０　（Ｖｏ１２／Ｖｏ（２／Ｖｏｆｆ）　（Ｄ比からなる混合溶 剤をもってそのカラムを洗浄した。赤色が最初の強度の１７５になった時にクロ ロホルムの濃度を下げ、カラムをクロロホルム−アセトン−メタノール５５：１ ５：１０（Ｖｏ１２／Ｖｏ１２／Ｖｏ１２）をもッテ溶離し、２５０ｍｅの画分 が集められた。各画分は薄層クロマトプレー）　（ＶＴＲ，サンフランシスコカ ルフォルニア州）の上で検出され、２５４ｎ鵬での紫外線の下で２つの主な赤色 の蛍光斑点のＲｆが決定された。現像混合溶媒はクロロホルム−アセトン−メタ ノール、５５：１５：１０であった。クロマトグラフは約２日で完結した。

さらに２つの主成分の精製及び分離は０．０４−０．０６メツシユのシリカゲル ６０を使用してガスクロマトグラフィに記載された圧力でフラッジクロマトグラ フの２つのラウンドにより得られた。（ガスクロマトグラフィ、原理、技術及び 応用Ａ、Ｂ、Ｌｉｔｔｌｅｖｏｏｄ、ｅｄ、Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ、　 Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ、　１９７０．）このものを引例として挿入する。

２つの主成分のヒベリシン（Ｈｙ）はＲｆが０．４５．０゜１９９の収量であり 、プソイドヒペリシン（Ｐ　ｓ）はＲｆが０゜３５．０．７３９の収量であった 。この２成分のＮＭＲスペクトルの分析はこれまでに報告されたものと同一であ った。（Ｂｒｏｃｋｍａｎｎ、Ｈ，ｅｔ　ａ１２＋　Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　 Ｌｅｔｔｅｒｓ　１：３７．１９７５．文献は引例として挿入される）。その化 合物は使用するまで暗所の無水エタノールのなかで４℃にて貯蔵された。

実施例■：哺乳類における抗ウイルス性活性レトロウィルスのフレンド白血病ウ ィルス（Ｆ　Ｖ）及び放射線白血病ウィルス（ＲａｄＬＶ）による哺乳類動物の 感染に及ぼす本発明の化合物の効果は次のようにして試験された。

（１）フレンド白　ウィルス感染 フレンド白血病ウィルス（Ｆ　Ｖ）の積極的なレトロウィルスはＢ　Ａ　Ｌ　Ｂ 　／　ｃ及びＮＩＨ５ＷＩＳＳマウスのようなマウスの感受性株に敏感な赤白血 痰を誘発する。（Ｆｒ１ｅｎｄ、　Ｃ，Ｊ、　石。

Ｍｅｄ、　１０５：　３０７−３２４．１９５７；　Ｆｒ１ｅｎｄ、Ｃ，ｅｔ　 ａＱ　Ｎａｔ、Ｃａｎｃｅｒ　Ｉｎ５ｔ。

Ｍｏｎｏｇｒ、２２　：　５０５−５２２，１９６６　；　Ｆｒ１ｅｎｄ、Ｃ， ｅｔ　ａｆｆ　Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｆｆ、Ａｃａｄ。

Ｓｃｉ、Ｕ、Ｓ、Ａ、　８Ｂ：　３７ｇ−３８３，１９７１，ここにおいてすべ て文献は引例して挿入される。）悪性な形質転換（ｔｒｏｎｓｆｏｒｍａｔｉｏ ｎ）は腺腫病巣形成ウィルス（Ｓｐｌｅｅｎ　ｆｏｃｕｓ　ｆｏｒｍｉｎｇ　ｖ ｉｒｕｓ　（ＳＦＦＹ））及びエコトロピック　ネズミ　フレンド白血病ヘルパ ーウィルス（ｅｃｏｔｒｏｐｉｃ　ｍｕｒｉｎｅ　Ｆｒ１ｅｎｄ　Ｌｅｕｋｅｍ ｉａ　ｈｅｌｐｅｒ　ｖｉｒｕｓ　（Ｆ−ＭｕＬｖ））の結合活性の結果である 。敏感な赤白血痰は肝臓肺腺（肺臓及び肝臓の大きさが著しく増大すること）及 び激しい貧血症に特徴がある。

フレンド白血病ウィルスはウィルス静脈注射の１０日後、ＦＶで前もって感染し たマウスの拡大した腺腫を均質化して製造した。肺腺は遊離腺腫のＭ量の１０倍 に等しい容積の燐酸塩緩衝液生理食塩溶液のなかで均質化した。

Ｈｙ及びＰｓのＢ　Ａ　Ｌ　Ｂ　／　ｃ　マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ　Ｌａｂｓ、 　ＢａｒＨａ　ｂ　ｏ　ｒ　＋　Ｍ　Ｅ　）の肺臓の大きさく肺腺）の増大に及 ぼす効果が試験された。この実験においてウィルス（１０＠ｆｏｃｕｓ　ｆｏｍ ｉｎｇｕｎｉｔ−ＦＦＵ　（病巣形成単位乃は静脈注射で接種された。この発明 の抗ウイルス性化合物の表示された服用量は内層膜的に２４時間おくれてＢ　Ａ 　Ｌ　Ｂ　／　ｃマウスに投与された。動物はそこで１０日後に犠牲になり、肺 臓の重さが量られた。その結果は第１表に要約されている。

第　１　表 フレンド赤白血病ウィルスで接種し、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおける腺腫に及ぼす Ｐｓ化合物（１％エタノールをもって燐酸塩緩衝液生理食塩水に稀釈した）の効 果対照マウス　ＦＶ接種マウス （ＰＢＳ）　（１０＠ＦＦＵ） ０、２０９４肺臓重量（ｇｍｓ）　１．０２７２胛臓重Ｎ　（ｇ＋ａｓ）０、１ ８３４胛臓重量（ｇｍｓ）　０．９５９６胛臓重ｊｌ　（ｇａｓ）０、１７９０ 　ｐｌ？−臓重Ｎ（ｇａｓ）　１．２４３２胛臓重ｌｉｔ（ｇａｓ）Ｘ＝０．１ ８４６±０．０１７８　Ｘ＝１．０１ｉ６５±０．１２２６対照を差引いた正味 の変化 ＝０．９０１９ フレンドウィルス　フレンドウィルス （４ｏ６ｒｐｕ）　（１０”ＦＦＵ）＋＋ｐｓ　８０ｍｃｇ／ｍｏｕｓｅ　２回 注射ＰＳ　８０ｍｃｇ／ｍｏｕｓｅ０、２８３１肺臓重量（ｇｍｓ）　０．２４ ５７胛臓重量（ｇａｓ）０、２７６１肺臓重量（ｇａｓ）　０．３４００肺臓重 Ｉｔ　（ｇＩＩｌｓ）０、２２１５肺臓重ｊｉ（ｕｓ）　０．２９３８肺臓重量 （ｇａｓ）Ｘ＝０．２４０４±０．０４８２　Ｘ＝０．２６８７±０．０６２１ 対照を差引いた正味の変化　対照を差引いた正味の変化＝０．０５５８　＝０． ０８４１ ％Ｉｎｈｉｂ＝９３．８２　％Ｉｎｈｉｂ＝９０．７０対照マウス　フレンドマ ウス （ＰＢＳ）　＜２ＸＩＱ’ＦＦＵ） ０．２０９４胛臓重量（ｇａｓ）　０．８９１１牌臓重量（ｇａｓ）０、１８３ ４牌臓重量（ｇｍｓ）　０．９２１１牌臓重１　（ｇａｓ）０、１７９０肺臓重 量（Ｕｓ）　０．８００４肺臓重量（ｇａｓ）Ｘ＝０．１ｇ４６ｆ０．０１７８ 　Ｘ＝０．８６９７±０．０５１３対照を差引いた正味の変化 ＝０．６８５１ フレンドウィルス　フレンドウィルス （２Ｘ１０５ＦＦＵ）　（２Ｘ１Ｇ’ＦＦＬＩ）＋ＰＳ　８０ｍｃｇ／ｍｏｕｓ ｅ　２回注射ＰＳ　８０ｍｃｇ／ｉ＋ｏｕｓｅ０、３４５７肺臓重量（ｇ＋ｎｓ ）　０．４９２４牌臓重量（ｕｓ）０、２７８４牌臓重量（ｇａｐｓ）　０．２ ４６９牌臓重Ｉｔ（ｇｒＡｓ）０、２２０８胛臓Ｍ量（ｇｓｓ）　０．２７２２ 　Ｊｔ！？！臓重ｆｌｃｇｍｓ）対照を差引いた正味の変化　対照を差引いた正 味の変化＝０．０７１４　＝０．１２９２ ％Ｉｎｈｉｂ＝８９．５８　％Ｉｎｈｉｂ＝８１．１５第１表のデータはひきつ づきＰｓのマウス当たり８０マイクログラムの１回注射を行った平均抑制値の９ ３，８％をもって肺臓の抑制を示している。肺臓拡大における８９．６％の平均 抑制値はマウス当たり８０マイクログラムのＰｓがマウスに対して１回の注射で 投与されたときに観察された。その注射は前もってウィルス薬剤（ウィルスの２ 　Ｘ　１０　’ＦＦＵに相当する）の０．５ｍＱを接種した。日２回の連続した Ｐｓの注射がマウス当たり８０マイクログラムの化合物を各々含むように投与さ れた時には肺臓の平均抑制値はｌ　Ｏ＠ＦＦＵを含むウィルス薬剤では９０．７ ％であり、２　Ｘ　１０　’ＦＦＵを含むウィルス薬剤では８１゜７％であった 。（第１表） 上の結果はＰｓの内腹膜的投与が注射の２４時間後、フレンド白血病ウィルスの 悪性な形質変換能力（腺腫の減少を測定する）の著しい減少を示した。

（２）フレンド白血病ウィルスによる共投与ＦＶ複合体と共にＰｓの同時的な静 脈注射による共投与を含む別の実験計画が試験された。この場合、ウィルス薬剤 は種々の濃度でＰｓと混合され、混合物は最終容積０．５ｍｅでマウスの尾の静 脈に注射された。マウスは１０日後に犠牲になった。

肺臓の重量を測定し、肺臓の抑制の水準を決定した。その結果を第２表に要約し た。

第２表 ウィルス誘起の腺腫に及ぼすＦＶと共にブソイドヒペシリン（エタノール１％を 含むＰＢＳに稀釈）の静脈共投与の効果０．１３０４　０．１８６２　１．１４ ９９　０．３４２５　０．１６５５　０．１ｇ３００．１４９０　０．１５６７ 　１．０６５７　０．３７６６　０．１４２６　０．１６７４０．１３６２　０ ．１３ｇ６　０．９５９７　０．４００５　０．１４３３　０．１４２２±０． ０１０１　±０．０２４０　±０．０８６６　±０．０３５３　±０．０２５３ 　±０．０２１７ＰＢＳ＋１％ＥｔＯＨ中のＰｓを受入れるグループと比較され る抑制　％　＝７５．４４％　１００％　１００％第２表に示されるように腺腫 の１００％抑制はＰｓがマウス当たり２０マイクログラム及びマウス当たり５０ マイクログラム（平均マウス重量は約１５０グラム）の濃度のウィルス複合体を 投与したときに見出され、平均抑制値の７５．４４％はマウス当たり５マイクロ グラムの時にウィルスに共投与された。

これらの結果は本発明の化合物の有効性を示すものであり、マウス当たり５マイ クログラムと同じ位のすくなくてもこの積極的なＲＡＮ腫瘍ウィルスによりウィ ルス形質転換を抑制することに有効であった。

（３）　ＦＶ感染動物の肝臓機能に及ぼすＰｓの効肝臓機能に及ぼすＰｓの存在 及び不存在におけるＰｓの抗ウィルス性活性、　ＦＶ感染の効果の実例として肝 臓−関連するタンパク質のために感染マウスの血清を分析することにより検査し た。

Ｂ　Ａ　Ｌ　Ｂ　／　Ｃ７ウスは２　Ｘ　１０５ＦＦＵ（７）濃度でＦｖと共に 接種された。各グループの動物は４匹のマウスであり、分析はプールされた部分 標本について行われた。

第３表 肝臓機能に及ぼすＰｓによるまたはＰｓによらない（１％ＥｔＯＨを伴うＰＢＳ のなかで）フレンドウィルスの効果コレスト　全タンパク質　アルブミン　Ｂｕ 　ＡＰ　ＬｊｌＨ５ＧＯＴＳＧＰＴ　ＧＧＴＮＪｄｌ　ｇａｓ／ｄ１２　ｕｓ／ ｄｅ　ａｇノ’ｄｌｌ　ＩＵ／１ｉｔｅｒ　ＩＵ／１ｉｔｅｒ　ＩＩＩ／１ｉｔ ｅｒ　Ｉｔｌ／１ｉｔｅ秩@ｍｉｕ／ｄ ＰＢＳ　１２２　５．７　３．２　０．２　２２６　１０７５　１３２　１０５ 　３ＩＶＦＶ　１１ｇ　５．５　３．４　０．４　２００　６７１０　４５０　 １１０　４ＩＶＦｎＰＰＳ　１０９　５．７　３．４　０．１　２２６　３３０ ３　２１３　９９　＋１ＤＩＰＦＶ　１１１　５．４　３．３０．２　２２３　 ３３３０　２４５　１００　３ＩＰＦＹＩＶＰＳ　１３７　５．５　３．２　０ ．３　２００　２３０５　２４４　１３５　４ＰＢＳ　−燐酸塩緩衝液生理食塩 水 ＩＶＦＶ　−フレンドウィルスの静脈注射投与ＩＶＦＶＩＰＰＳ−フレンドウィ ルスの静脈注射投与、Ｐｓ化合物の内腹膜注射投与ＩＰＦＶ　−フレンドウィル スの内層膜投与ＩＰＦＶＩＶＰ−フレンドウィルスの内層膜投与、Ｐｓ化合物の 静脈注射投与第３表においてＢｕ＝全ビリルビン、ＡＰ＝アルカリポスファター ゼ、ＬＤＨ＝乳酸脱水素酵素、５ＧＯＴ＝血清グルタミルアミノトランスフエラ ーゼ、５ＧＰＴ＝血清グルタミルペンチジルトランスフエラーゼ、ＧＧＴ＝ガン マーグルタミルートランスベプチターゼ。

第３表に示されるようにＦ’／にょる静脈注射の接種はり、ＤＨ。

５ＧＯＴ及び５ＧＰＴ酵素活性を増加に導き、感染マウスにおける全血清ビリル ビンの増加を導いている。そのような増加は公知のように肝臓機能損失の指示で ある。静脈注射及び内層膜注射の両方のＰｓの投与はこれらのウィルス的に誘起 する増加を減少に導いている。

マウスの感受性株におけるねずみの放射線白血病ウィルスの胸腺接種は明白な白 血病の発生及び胸腺細胞の悪性形質転換を生じる。（Ｍｅｒｕｅｌｏ、Ｄ、　ｅ ｔ　ａＱ　Ｊ、Ｅｘｐ、Ｍｅｄ、　１４７　：　４７０−４８７この文献は引例 として挿入される）この形質転換はウィルスの白血病誘発効果に対して抵抗性ま たは罹患性を決定するところの主要な組織適合性複合体（ＭＭＣ）に関連するこ とが示されている。

若干のマウス株におけるウィルス感染が続く初期の結果にはグループＩ　Ｈ−２ 抗原の細胞表面表現の劇的な増加がある。

この増加は白血病の次の発生及び悪性な形質転換後のこれらの抗原の表現におけ る減少による結果として生じる。Ｈ−２抗原表現における変化はウィルス感染を 検査し、このウィルスの感染レベルに及ぼすＨ７及びＰｓの効果を決定するのに 使用されてきた。

ねずみの放射線白血病ウィルス（ＲａｄＬＶ）はＭｅｒｕｅｌｏ　ｅｔａＮ　（ 前掲）において記載されるようにＢＩＯ，Ｔ　（６Ｒ）マウスに腹膜内的に接種 された。６つのマウスのグループは等浸透圧の生理食塩水溶液中の腹膜内的に投 与されたＨＶ化合物のマウス当たり３０マイクログラムをもって２４時間後に治 療した。マウスは１０日後に犠牲になった。クラスＩ　Ｈ−２抗原の表現は蛍光 活性化セルソータ（ｃｅｌｌｓｏｒｔｅｒ）　（Ｏｒｔｈｏ　Ｃｙｔｏｆｌｕｏ ｔｏｇｒａｐｈ　Ｍｏｄｅｌ　５０Ｈ，０’ｔｈｏ　Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ　Ｓ ｙｓｔｅｍｓ、Ｉｅｓｔｖｏｏｄ、ＭＡ）（ＦＡＣ８）を用いて、Ｘ−５６抗− Ｈ−２Ｄ’マウスの単一な特異性の抗体（Ｍｅｒｕｅｌｏ、　ｅｔ　ａＱにおい て記載されたもの、同様な抗体はＡＴＣＣＮｏ、　ＨＢ７５として入手できる。

Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｅ　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏ６．Ｒｏｃｋ ｖｉｌｌｅ、ＭＤ）を使用して分析により決定された。その結果は第４表に示し た。

第４表におけるデータからみることができるようにＨｙは６つの試験されたマウ スの４つにおけるＨ−２表現での増加において著しい抑制を与え（第４表）、化 合物Ｈｙの内層膜の投与につづいてウィルスの感染能力の著しい減少を示してい る。このことは最初のウィルス接種の後２４時間はどおそく生起した。

ＲａｄＬＶにより誘発されたＨ−２表現に及ぼす効果は化合物Ｐｓについて見い 出せなかった。

実施例ｎＩ　：　ＲＮＡ−従属　ＤＮＡポリメラーゼ（逆転写酵、）に及ぼすＰ ｓ及びＨｙの効果 レトロウィルス（ＲＮＡ腫腸ウィルス）はピリオンのなかに逆転写酵素を運ぶ。

逆転写酵素はウィルスと共に細胞の感染により鋳型としてのウィルスのＲＮＡゲ ノムを用いてピリオンＲＮＡの相補的ＤＮＡ　（ｃＤＮＡ）複写を細胞合成器及 び転写器に補充している。レトロウィルスで感染した細胞の成長媒体中での逆転 写酵素（ＲＴ）活性のレベルの決定は公知の方法であり、細胞により感染ウィル ス粒子の放出を評価し、本発明の成分の抗ウィルス活性を測定するのに用いられ てきた。ＨＹ及びＰｓの化合物のｔａ（ｌ当たりｌＯマイクログラムの濃度でＲ ａｄＬＶ　ＲＴ活性に及ぼすＨｙ及びＰｓ両方の混合物の効果を試験され、上清 は採取され、５ｔｅｐｈｅｎｓｏｎ等による方法によりＲＴ活性を検査した。（ Ｓｔｅｐｈｅｎｓｏｎ　ｅｔ　ａ１２．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ　４８　：　７４９− ７５Ｌ１９７２、及びＷｅｉｓｓｂａｃｋ　ｅｔ　ａ１２．Ｊ、Ｖｉｒｏ１２． １０　：　３２１−３２７　、１９７２．これらは引用例として挿入する） 検査は次のように行われた。

ａ）欠工亙ス久１１ ＲａｄＬＶ−感染リンハ芽球細胞ライフＢ　１０．Ｔ　（６Ｒ）は４℃で、３５ ００　ｒｐｍ、　１５分間遠心分離され、小球にされた。

上清（１０ｍＱ）の上部の２／３が検査のため除去された。上清は１２ｄの超遠 心分離用管のなかで４℃で１時間４０００００ｒｐｍの回転数で遠心分離された 。このために固定角度式超遠心分離回転器（Ｔｉ７０　Ｒｏｔｏｒ、Ｂｅｃ）ｖ ａｎＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、ＦｕｌｌｅｔｔｏＭ、ＣＡ）が使用された。上清 は注意深く傾斜し、その管は乾燥された。

小球は０．０２ＭのＴｒｉｓ／ＨＣＣ，ｐＨ７，８，０，１ＭのＮａＣＱｒｏ、 ００１Ｍのジチオトレイトール及び０．２％のＴｒｉｔｏｎ　Ｘ−１００を含む 緩衝液の２００マイクロリツトルのなかに再懸濁された。ウィルス含有小球及び 緩衝液の混合物は渦巻され、使用される前に３０分間氷の上で培養された。

逆転写酵素検査は容積１００マイクロリツタのなかに次の成分を含有させて行わ れた： 第　５　表 試薬スト、り　検査当りの　検査当りの（１００ｏｆｆ）ストックのｕＱ　最終 濃度 溶液Ａ： ０、５Ｍ　Ｔｒｉｓ／ＢＣｌ２　５０＋ａＭｐＨ７，８（３７’）　１０ｕ（２ ６ｈ＋Ｍ０．６ＭＫＣｆｆ 溶液Ｂ： ２０ｍＭ酢酸マンガン　１０ｕｉ２　０．２ａＭ溶液Ｃ： ４０ｍＭジチオトレイトール　５ｕＩ２２ｍＭ（ＤＴＴ） Ｔｒｉｔｏｎ　Ｘ−１００（１０％）　１ｕＮ　Ｏ，１％Ｐｏ１ｙ（ｒＡ）　・ （ｄＴ）　ｔ　ｔ　４ｕ（ｌ　０．４Ａｔ＊ｏ／ｌρ（１０Ａｚｓｏ　ｕ／ｍの ’　（２０Ｉｌａｇ／ｍのｄ　ＴＴＰ　（２Ｘ１０−’Ｍ）　１０ｕ１２　２ｘ ｌＯ−’Ｍ’Ｂ−ｄＴＴＰ　（５００ｕＣｉ／ｍ（２戸　１０ｕ１２　５ｕＣｉ ２５００　ｕｃｉ／ｍ（２５０ｕｆｆ １、　ＰｈａｒＩＩｌｏｃｉａ　Ｆｉｎｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ、　Ｄｉｓｃａｔ ａｗａｙ、　ＮＪ２、Ｎｅｗ　Ｅｎｇｌａｎｄ　ｌ１ｕｃｌｅａｒ、Ｂｏｓｔｏ ｎ、ＭＡより得た〇反応混合物５０マイクロリッタは上に得られた５０マイクロ リツタの上澄液と混合され、３０℃で１特命培養した。反応は０゜ｌｌｌｌＩ２ の０．０６Ｍ燐酸ナトリウムを添加して停止させ、渦巻させ、水の中で培養した 。０．３Ｍの燐酸ナトリウムを含む２＋ａ１２の１０％トリクロロアセティク（ Ｔ　ＣＡ）が加えられ、混合物は渦巻され、１０から２０分間氷の上で培養した 。ＴＣＡ−鋭敏−放射能はガラスファイバフィルタ（２、４ｃｍ　Ｗｈａｔｍａ ｎＧＦＣ，ｌｌｈａｔｍａｎ、　Ｃ２Ｒｔｏｎ、　Ｍｌ）を使用して試料を濾過 した後に決定された。第３図にその結果が示されている。第３図におけるデータ はＨｙ及びＰｓの５０　：　５０の混合物についてのウィルス感染細胞の培養を ２時間及び４時間のポスト感染における検出可能なＲＴ活性におけるすくなくと も５０％減少に導き、さらに１６時間のポスト感染で検査されたときにはこの酵 素は約７５％抑制されたことを示している。

実施例■：本発Ｉの化Ａ　によるＨＩＶの立Ｐｓ、Ｈｙ及びその混合物のヒトの 免疫欠損ウィルス（ＨＩ　Ｖ）に対する活性は次のやり方で検討できる。クロー ン（Ｃ１ｏｎｅ）Ｈ９のようなＨＩＶ−感染　０ＫＴ４＋リンパ芽球細胞は（Ｐ ｏｐｏｖｉｃ、Ｍ、、　ｅｔ　ａ（２，５ｃｉｅｎｃｅ　２２４：　４９７−５ ００．１９８４．これを引例として挿入する）２０％の子牛の胎児血精（Ｆｌｏ ｗ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、　Ｉｎｇｌｅｖｏｏｄ　ＣＡ）を含有するＲＰ ＭＩ−１６４０媒体（ＧＩＢＣＯ，ＧＲＡＮＤ　ｌ５ｌａｎｄ、Ｎｅｖ　Ｙｏｒ ｋ）のなかに保持される。細胞の三重の培養は　ＩＩＩＱ当たり約４Ｘ１０５細 胞の濃度で種をつけ、Ｐｏ１ｙｂｒｅｎｅ　（ｉｆｆ当り２マイクログラム、　 Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅ＋＋＋１ｃａｌ　Ｃｏ、Ｓｔ。

Ｌｏｕｉｓ、　ＭＯ）にさらされ、４Ｘ１０’Ｈ９細胞当たり２Ｘ１０＠ＨＴＬ ＶＩ［［粒子をもって感染させ、Ｐｓ、Ｈｙ及びその混合物の存在または不存在 において上記実施例２と同様にして培養した。

本発明の化合物の抗ウィルス活性は逆転写酵素活性及びＨＩＶタンパク質ｐ２４ 及びｐ１７０表現を検査することにより決定された。これは５ａｒｉｎ、Ｐ、Ｓ 、　ｅｔ　ａＱ　Ｊ、Ｎａｔ、ｃａｎｃｅｒ　Ｉｎ５ｔ、　７８：　６６３−６ ６５．１９８７に記載されている。この文献を引例として押入する。

実施例Ｖ：ＨＴＬＶｍ　ｇａｇ９ンパク質　２４及び　１７の表現 感染されてないまたはＨＴＬＶＩ［Ｉに感染されたいずれかのＨ９細胞（２Ｘ１ ０’）は４日間１当たり５から１００マイクログラムの間の濃度でＰｓ、Ｈｙ及 びその混合物の種々な濃度に対して連続的にさらされた。ＨＴＬＶＩＩ［のｐ２ ４及びＴ）　１７　ｇ。

ａｇタンパク質を表現する細胞の百分率はＨＴＬＶ−Ｉ［［ｐ　１７及びｐ２４ に対するマウスのモノクロナール抗体を使用して蛍光抗体間接顕微鏡により決定 された。（Ｈ’ｒｔ、ｖ−ｍｐ　１７及びｐ２４はＡｂｂｏｔｔ　Ｌａｂｓ、　 Ｎｏｒｔｈ　Ｃｈｉｃａｇｏ、ｆＬ及びＤＣＩＩ）ｏｎｔ。

Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、　ＤＥからＨＩＶ血清抗原検出キットとして商業的販売 源から入手できる）陽性な細胞は蛍光標識した山羊　抗−マウスＩ　ｇ　Ｇ　（ Ｃａｐｐｅｌｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｃｏｃｈｒａｎｖｉｌｌｅ　ＰＡ ）で処理することにより視覚化される。実験はすくなくとも３回重複して行われ た。

実施例■：逆転写酵素活性の決定 感染されないＨ９またはＨＴＬＶ−ＤＩ　（５００ウィルス粒子／細胞）により 感染されたＨ９細胞は上述のようにＰｓ、Ｈｙ及びその混合物の種々な濃度でさ らされた。４日間で、培養の上清は集められ、ウィルス粒子はポリエチレングリ コールにより沈澱され、ＦＶのための実施例２で記載したように遠心分離により 得られた。ウィルス粒子は５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣ＆　（ｐＨ７゜５）、５ｍ Ｍのジチオトレイトール＋　２５０　ｍＭのＫＣｌ２．及び０．２５％のＴｒｉ ｔｏｎ　Ｘ−１００を含有する緩衝液３００マイクロリツトルのなかに懸濁され る。これらの試料の逆転写酵素活性は５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＸＣ２（ｐＨ７，５ ）、５ｍＭのジチオトレイトール。

１００ｍＭのＸＣ（２，０，０１％Ｔｒｉｔｏｎ　Ｘ−１ＯＬ鋳型プライマとし ての１０ｕ２のｄＴ、５ｒＡｎ＋　ｌ　ＱｍＭのＭｇＣＱｔ、１５　ｕｌｌの［ Ｈ］ｄｔｔｐ（二ニー　イングランド　ニウクレア、ボストン　ＭＡ）、及び１ ０マイクロリツタの破壊されたウィルス懸濁液を含有する５Ｏ−ｕＱの反応混合 物中で分析された。３７℃で１時間の培養の後５０マイクログラムの酵母ｔ　Ｒ Ｎ　Ａ　（ＳｉｇｍａＣｈｅｍｆｃａＬ　ｓｔ、　Ｌｏｔ＋ｉｓ、　Ｎｏ）を添 加し、冷トリクロロ酢酸−不溶フラクシヲンのなかの混合物が上述の実施例２と 同様にして検査された。検査はＭ複して行われ、ミロ繰返された。

鉢写ｆ！Ｉｌ！＋東地性（１０００）

Claims (26)

【特許請求の範囲】
1. １．ヒベリシン，プソイドヒベシリン及びその塩及びその混合物からなる群より 選ばれた１つの化合物の抗ウイルス有効量を哺乳類動物に投与することからなる レトロウイルスにより生じる病気で苦しむ哺乳類動物の治療方法。
2. ２．前記有効量は経口的に投与されることからなることを特徴とする特許請求の 範囲第１項記載による哺乳類動物の治療方法。
3. ３．前記化合物の有効量を非口軽的に投与することからなることを特徴とする特 許請求の範囲第１項記載による哺乳類動物の治療方法。
4. ４．前記化合物がヒベリシンを含むことを特徴とする特許請求の範囲第１項記載 による哺乳類動物の治療方法。
5. ５．前記化合物はプソイドヒベシリンを含むことを特徴とする特許請求の範囲第 １項記載による哺乳類動物の治療方法。
6. ６．前記化合物はヒベリシンとプソイドヒベシリンとの混合物を含むことを特徴 とする特許請求の範囲第１項記載による哺乳類動物の治療方法。
7. ７．前記化合物の投与は静脈注射で行われることを特徴とする特許請求の範囲第 １項記載による哺乳類動物の治療方法。
8. ８．前記有効量は前記哺乳類動物の体重１ｋｇ当り約２００マイクログラムと約 １２０００マイクログラムの間であることを特徴とする特許請求の範囲第１項記 載による哺乳類動物の治療方法。
9. ９．レトロウイルスにより生ずる感染で苦しむ哺乳類動物の治療のためにヒベリ シン，プソイドヒベシリン，その塩及びその混合物から成る群より選ばれた１つ の化合物の有効量を哺乳類動物にレトロウイルス感染治療のために含むことを特 徴とする薬剤。
10. １０．前記化合物はヒベリシンを含むことを特徴とする特許請求の範囲第９項記 載による薬剤。
11. １１．前記化合物がプソイドヒベシリンを含むことを特徴とする特許請求の範囲 第９項記載による薬剤。
12. １２．ヒベリシン及びプソイドヒベシリン混合物を含むことを特徴とする特許請 求の範囲第９項記載による薬剤。
13. １３．非口径の服用量の形を含むことを特徴とする特許請求の範囲第９項記載に よる薬剤。
14. １４．タブレット，カプセルから成る群から選ばれた固体口経的服用量の形を含 むことを特徴とする特許請求の範囲第９項記載による薬剤。
15. １５．前記有効量が前記化合物の約２００ミリグラムと約１２０００ミリグラム の間を含むことを特徴とする特許請求の範囲第９項記載による薬剤。
16. １６．服用量の形式が非口径的に認められた担体または稀釈剤を含むことを特徴 とする特許請求の範囲第１４項記載による薬剤。
17. １７．注射可能な溶液を含むことを特徴とする特許請求の範囲第１３項記載によ る薬剤。
18. １８．ヒベリシン，プソイドヒベシリン及びその混合物から成る群から選ばれた 化合物の有効な抗レトロウイルス量を前記レトロウイルス感染に悩む哺乳類動物 に投与することを特徴とするレトロウイルスに感染した哺乳類動物の治療方法。
19. １９．前記有効服用量が前記ヒトの体重１ｋｇ当り約４００マイクログラムと約 １２０００マイクログラムの間の範囲にあることを特徴とする特許請求の範囲第 １８項記載による治療方法。
20. ２０．前記化合物がヒベリシンを含むことを特徴とする特許請求の範囲第１８項 記載による治療方法。
21. ２１．前記化合物がプソイドヒベシリンを含むことを特徴とする特許請求の範囲 第１８項記載による治療方法。
22. ２２．前記化合物がプソイドヒベシリン及びヒベリシンの混合物を含むことを特 徴とする特許請求の範囲第１８項記載による治療方法。
23. ２３．前記ウイルスがフレンド白血病ウイルスを含むことを特徴とする特許請求 の範囲第１８項記載による治療方法。
24. ２４．前記ウイルスが放射線白血病ウイルスを含むことを特徴とする特許請求の 範囲第１８項記載による治療方法。
25. ２５．前記ウイルスがヒトの免疫欠損ウイルスを含むことを特徴とする特許請求 の範囲第１８項記載による治療方法。
26. ２６．ヒベリシン，プソイドヒベシリン，その塩及びその混合物からなる群から 選ばれた芳香族多環式ジオンの有効な抗ウイルス量を哺乳類動物に投与すること から成ることを特徴とする哺乳類動物のウイルス感染治療方法。