JPS59190921A - 抗ウイルス活性物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規な抗ウイルス活性物質に関し、さらに詳し
くは、オトギリソウ科オトギリソウ（Ｈｙｐｅｒｉｃｕ
ｍ　ｅｒｅｃｔｕｍ）植物に由来する、抗ウイルススペ
クトルが広く、殺ウイルス的作用とウィルス増殖抑制作
用の両件用を兼備し且つ細胞毒性の低い抗ウイルス活性
物質に関する。

従来より抗ウィルス剤（化学療法剤）として各種のもの
が報告されているが、これら従来の抗ウィルス剤はウィ
ルス特異性が大きく特定のウィルス感染症に対してしか
効果がなく、また、ウィルスの宿主細胞内増殖のどこか
の過程を阻害するという作用機序をもつのが基本である
。ところが発病時にはウィルスの増殖は極大に達してい
ることが多く、従来のウィルス増殖阻害作用を基本とす
る抗ウィルス剤だけでは治療効果があまり期待できない
というのが実情である。

本発明者は抗ウイルススペクトルが広く且つウィルス増
殖抑制作用のみならず殺ウイルス作用をも兼ね備えた抗
ウィルス剤を求めて鋭意研究を行なっている過程で、過
熱にも、止血、収斂及び含囃用の生薬として民間で使甲
さねでいるオトギリソウ科オトギリソウ（Ｈｙｐｅｒｉ
ｃｕｍ　ｅｒｅｃｔｕｍ）の抽出成分中に極めて強力な
抗ウィルス活性を有する物質が存在することを姑い出し
、本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明により提供される抗ウイルス活性物質
は、オトギリソウ科オトギリソウ植物中に存在する水溶
性成分であり、以下に示す理化学的性質を有する物質で
ある、 （１）分子量は１０００以下である。

ここで、［分子ｔ、Ｊは米国スペクトラム・メディカル
・インダストリーズ社製のスペクトラポアー・メンブレ
ン・チープイングの内、分子量１０００をカット・オフ
する透析チューブを用いて透析外液中に活性物質が得ら
れる事により推定したものである。

（２）溶剤に対する溶解性 水、メタノールに易溶で且つエタノール、ｎ−ブタノー
ル、酢酸エチル、２−ブタノン、１，４−ジオキサン、
クロロホルム、石油エーテル及びエーテルに難溶乃至不
溶である。

（３）ペーパークロマトグラム（東洋沖紙Ａ３２６使用
）上のＲｆ値 （イ）展開溶媒としてピリジン／ｎ−ブタノール／蒸留
水（１：Ｉ：１）を使用した場合のＲｆ値は０．７５〜
０．７８（２２〜２５℃にて）であるが、 ←）展開溶媒としてｎ−ブタノール／酢酸／水（４：１
　：５）、ｎ−ブタノール／アンモニア／水（６：］：
２）、ｎ−ブタノール／エタノール／水／アンモニア（
４ｏ：１０：４９：１）、を使用した場合いずれも原点
にとどまる。

（４）　　カラムクロマトグラム セルロース系の支持体（例えばセルロファインＧＬＬ−
９０ｍ）を充填［７たカラム（例えば直径２、６　ｃｍ
　Ｘ長さ７２　ｃｍ　）で蒸留水を移動相として流速１
ｗ１１分で溶出させると、流出液の約１８０８１〜約２
７０１の範囲のフラクションに本活性物質が得られる。

（５）イオン交換樹脂に対する吸着特性上記活性物質は
強酸性の陽イオン交換樹脂（例えばアンバーライ）ＩＲ
１２０）にも強塩基性の゛陰イオン交換樹脂（例えばア
ンバーライ）ＩＲＡ４００）にも実質的に吸着されない
。従って、本活性物質はほぼ中性の物質であると考えら
れる。

５− （６）酸、塩基に対する安定性 本発明物質の水溶液を塩酸でｐ　Ｈ３又は５、あるいけ
水酸化ナトリウムでｐＨ９に調整して１００℃で６０分
間の処理を施した後にも抗ウィルス活性は保持されてい
る。

（７）酵素に対する安定性 本発明物質の水溶液をβ−Ｇｌｒｂｃｏｓｉｄａｓｅル
ス活性は維持されている。この時の緩衝液は酢酸緩衝液
ｐＨ５を用いた。

上記の抗ウイルス活性物質は、オトギリソウ科オトギリ
ソウ（Ｈｙｐｅｒｉｃｗｍ　ｅｒｅｃ、ｔｕｍ　Ｔんｗ
ｎ−ｂｇｒｇ）からの抽出・精製により製造することが
　６− できる、 オトギリソウは岐阜や富山地方に多く野生する多年草で
あり、本発明においてはオトギリソウの全草を開花期に
収穫１〜だものをその！！まで又は乾燥ｌ、だ後に抽出
する。

抽出・精製操作の詳細は後記実施例に記載するが、その
概略を説明すれば次のとおりである。

抽出はまず５０〜１００チエタノールで行なう。

このエタノール抽出は約０〜約１００℃の温度で、オト
ギリソウ１匂（乾物重）当り５〜１０ｔのエタノール中
に３〜５日間浸漬することにより行なうことができる。

その間適当に攪拌を行なってもよい。抽出を２〜３回〈
り返えした後、このエタノール抽出液を次いで減圧下に
乾固し、固体残留物ヲクロロホルム／メタノール／水不
均−混合溶媒（水１容に対しクロロホルム２．５〜３容
、メタノール１〜１．５の混合物）中で約４〜約３０℃
にて充分に混合攪拌した後、メタノール／水層を分離し
蒸発乾固する。得られる残留固形分を更にｎ−ブタノー
ル（水飽和）と水との間で約４〜約３０℃にて充分に混
合攪拌して分配し、ｎ−ブタノール（水飽和）層を分離
し蒸発乾固する。

かくして抗ウィルス活性を有する粗抽出物質が得られ、
このものは必要に応じて、さらに精製することができる
。精製はそれ自体公知のカラムクロマトグラフィー法に
より行なうことができる。

例えば、上記粗抽出物質を１〜５重量％重ソウ水溶液に
溶解しく濃度は１〜３重量％程度が適当である）、得ら
れる溶液を１〜２倍容量の酢酸エチルで少なくとも１回
洗浄した後、該重ソウ溶液を強酸性イオン交換樹脂、例
えばアンバーライトｌＲ１２０、ダウエックス５０など
、及び強塩基性イオン交換樹脂例えばアンバーライ）　
ＩＲＡ４００、アンバーライトＩＲＡ４１０、ダウエッ
クス−１などのカラムに少なくとも１回ずつ、好ましく
は１〜２回ずつかけ、抗ウイルス活性画分を回収する。

このようにして回収された両分は必要に応じて、分子ｚ
ｉｏｏｏのカット・オフ能力をもつ透析膜による透析及
びセルロース系ゲル洒過剤、例えばチッソ（Ｉｔ）製セ
ルロファインＧＣＬ−９０−ｍ。

同ＧＣＬ−２５ｍ％同ＧＣ−１５ｍ等によるカラムクロ
マトグラフィーを適宜組合わせて使用するととによりさ
らに精製することができる。

かくして、前述し７た１化学的性質をもつ抗ウイルス活
性物質が得られる。

本発明により捺供される抗ウイルス活性物質は以下に述
べる如き生物活性を有しており（なお、具体的な活性デ
ータは後記参考例に示す）、化学療法剤として各種のウ
ィルス感染症の予紡・治療に使用することができる。

（１）本発明の活性物質は抗ウイルススペクトルが９− 極めて広い。例えば本活性物質は単純庖疹ウィルス、イ
ンフルエンザウィルス、水痘性口内炎ウィルス、狂犬病
ウィルス等のウィルスに対して強力な抗ウィルス活性を
示す。殊に１従来狂犬病ウイルスの増殖を抑制できる物
質は未だ見い出されていないが、本発明の活性物質は狂
犬病ウィルスの増殖をも効果的に抑制する能力を有して
いる点で極めてユニークである。

ウィルス疾患は一般に発症の時点でかなり細胞に変質を
きだしていると考えられるので、作用スペクトルの広い
化学療法剤を病因ウィルスの同定を待たずに早期に投与
できることはウィルス疾患の治療予防上極めて望ましい
ことであわ、本発明の活性物質はこれに応えることがで
きる画期的な薬剤である。

（２）本発明の活性物質は殺ウイルス的作用とウィルス
増殖抑制的作用の両件用を兼ね備えている。

１０− 従来の抗ウィルス剤の中にはこれら両部用を兼ね備えて
いるものは知られておらず、本発明の活性物質はこの点
従来の抗ウィルス剤とけ全く異なる新規な抗ウィルス剤
である。

従来の抗ウィルス剤はウィルスの宿主細胞内増殖のどこ
かの過程を阻害するという作用機序をもつのが基本であ
る。ところが、発病時にはウィルスの増殖は極大に達し
ていることが多く、従って、従来の抗ウィルス剤は発病
後に投与１〜でもあまり治療効果が期待できないという
のが実情である。これに対し、本発明の活性物質はウィ
ルス増殖抑制的作用のみならず、強力な殺ウイルス的作
用をも有しているので、発病後に膜力しても細胞外での
感染性ウィルス粒子を不活化し病変拡大を未然にくいと
めることができる。

（３）既知の抗ウィルス剤よりも細胞毒性が少ない。

ウィルスの増殖過程は宿主細胞の代謝系に依存している
ため、ウィルスの増殖抑制は正常な宿主細胞の障害と結
びつき、従来のウィルス増殖抑制タイプの抗ウィルス剤
は副作用の問題は避けられなかった。ところが、本発明
の活性物質は正常な細胞に対する毒作用が極めて少ない
という特徴を有している。

（４）本発明の活性物質はさらに免疾賦活化作用も有し
ている。

ｖ下に実施例及び参考例により本発明をさらに説明する
。

実施例１ 乾燥したＨｙｐｅｒｉｃｕｍ　ｅｒａｃｔｕｍｌ　Ｋｇ
をミキサーで粉砕して８０チェタノール１．　ＯＬに３
日間浸漬して室温で成分を抽出する。ロータリーエバポ
レーターで溶媒を除去したところにクロロホルム／メタ
ノール／蒸留水＝１０００　：　５００　：３７５を添
加して分配を行いメタノール−蒸留水層をとり、これを
減圧乾固させたのち、ｎ−ブタノール５　Ｑ　Ｑ　ｍｌ
と蒸留水５００ｄを加えて分液しｎ−ブタノール層を凍
結乾燥して２５〜３０ｇの粗抽出物を得る。

上記粗抽出物５ｇを２．５チ重ソウ水５００ｍにとかし
、これに環部の酢酸エチルを加えて分液して重ソウ水部
をとる。これを強酸性イオン交換樹脂、Ａｍｂｅｒｌｉ
ｔｅ　ｒＲｌ　２０　（Ｏ−ム・アンド・ハース社製）
Ｒｏｏｍを通過させ通過液を更に強塩基性イオン受検樹
脂、Ａｍｈｅｒｌｉｔｅ　ＴＲ，Ａ　４００（ローム・
アンド・ハース社＃）３００ａ＋ｚのカラムにかける。

通過液をロータリーエバポレーターで濃縮後、透析チュ
ーブ、５ｐｅｃｔｒａｐｏｒ　ｍｅｍｈ−ｒａｎｅ　　
ｔｕｂｊｒ＋ｇ　　（Ｍ、Ｗ、ｃｕｔｏｆｆ：　１　０
００゜Ｓｐｅｃｔｒｕｍ　Ｍｅｄｉｃａｌ　　Ｉｎｄｕ
ｓｔｒｉｅｓ　ＩＮＣ，製）に入れて蒸留水に対し数日
間透析を行い、その外１３− 液を凍結乾燥して次工程へ進む。

凍結乾゛桑物の約３０ｍ９を０．５　ｍｌの蒸留水にと
かしてセルロファインＧ　ＣＬｉ　−９０ｍ　（チッソ
ｆ株）製）を充填したカラム（直径２．６（７）×長さ
？　２　ｔｙｎ　）ＶＣのせ、蒸留水を移動相として流
速１ｍｅ／分の速さで溶出させると流出液の約１８０ｍ
１から約２７０ｍＡのフラクションＶＣ目的物質が流出
する。これを凍結乾燥して活性抽出物的５■を得る。

この活性抽出物は前記（１）〜（７）ＶＣ示す理学的性
質を示し、さらに塩１図及び第２図ＶＣ示す赤外吸収ス
ペクトル及びＯｒ視−紫外吸収スペクトルを示す。

また、上ｄ已活性抽出物は塩化第二鉄による呈色が１場
性であり、金属ナトリウムによる窒素の検出反応は１均
件であった。

参考１り１１ 一ヒ記実施１り１１１で得られた物質の抗ウィルス活性
、宿主、ｖＩＩＩ胞に対する毒性および免疾賦活化能Ｖ
Ｃつい−１４− て行った実験を下記に参考例として示す。尚、下記にお
いてウィルスの濃度の単位としてはＴＣＩＤ、。

（５０チ細胞培養感染価）を用い、又、試供ウィルスと
しては次に示すものを用いた。

１　）　　Ｈｅｒｐｅｓ　ｓｉｍｐｌｅｘ　ｖｉｒｕｓ
（単純庖疹ウィルス） ：１型（ＨＦ株） ：１型（ｍｉｙａｍａ株） 上記の２株共Ｖｅｒｏ細胞を宿主に増殖させた。

２　）　　Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ　ｖｉｒｕｓ　（インフ
ルエンザウィルス） ：　Ａ　／Ａｉｃｈｉ／　２　／　Ｆｌ　８株：　Ａ　
／　ＲＩ　／　５−　（Ｈ２Ｎ２　）株：Ａ／ＰＲ／８
／３４株 ：　Ｂ　／　Ｇｉ　ｆｕ、／　２　／　７３株発育鶏卵
で増殖させたＰＲ／８株以外けＭＤＣＫ細胞を宿主とし
て増殖させた。

３　）　　Ｖｅｓｉｃｕｌａｒ　ｓｔｏｍａｔｉｔｉｓ
　ｖｉｒｕｓ（水痘性口内炎ウィルス）　：　Ｉｎｄｉ
ａｎａ株Ｘ細胞を宿主として増殖させた。

４　）　　Ｒａｂｉｅｓ　ｖｉｒｕｓ　（狂犬病ウィル
ス）：ＰＶ株 二〇Ｖ株 ＰＶ株はＢＨＫ２１細胞を宿主として増殖させ、０７株
は狂犬病発症マウスの脳乳剤をウィルス液とした。

５）　　Ｂ型肝炎ウィルスのＳ抗原（ＨＢＳ）ＨＢＳ陽
性の血清から分離精製した。

全実験を通じて細胞の増殖にはＭＥＭ培地（日永製）に
１０％の割で牛胎児血清を加えたもの、細胞の維持とウ
ィルスの希釈は同血清を２％に加えたものを用いた。

１　ウィルス不活化試験 一般の消毒剤検定法に順にて行った。

１０　’　ＴＣＩ　Ｄａｏ／　’Ｒ１のウィル、ｚ、　
ｌ　ｍｌと下記表１又け２に示す濃度で実施例１の抽出
物をとかした溶液ｊ　ｍｌと混和１２、直ち（０分）に
その混液からＱ、　２ｒｇｌを取り出１〜で手早く１０
倍階段希釈を行う。

２４穴プラスチツクシヤーレに予め準備した宿主細胞の
単層培養に各希釈液を０．５　ｍ、！　／穴でチャレン
ジ（ｃｈａｌ］ｅｎｇｅ）後、型の如く３日間保持して
細胞変性効果ｆ’ｃＰＥ）の出現を検べる。同様に３０
分と６０分についても不活化されたウィルス量を測定す
る。

混液の保持は室温あるいけ３７℃で行い、不活化の温度
依存性についても検討した。

結果 単純庖疹ウィルス（ＨＦ株）の不活化状態を下記表１に
示す。

１７一 特開昭５９−１９０９２１（６） Ａ　／　Ａ　ｉ　ｃ旧株とＢ　／　Ｇ　ｉ　ｆ　ｕ株の
両者共に同様な不活化結果であった。又どのウィルスの
場合も室温でも３７℃でも不活化状態に差はなかった。

尚、単純庖疹ウィルスｍｉｙａｍａ株、インフルエンザ
ウィルスＰＲ／８株更に狂犬病ウィルスＣｖ株の夫々に
実施例１で示した該物質と混和して不活化されたウィル
スは生体内（マウス、ＩＣＲ。

４〜５週令各群５匹）に投与されてもその毒力を回復し
なかった。この生存状態を下記表３に示す。

考察 本試験では不活化剤とウィルスの混液が宿主細胞の維持
液中に加えられるので不活化剤が細胞内でのウィルス増
殖に影響を与えぬ濃度とするため大量のウィルスを用い
、他方物質は１０倍希釈されるとウィルスの細胞内増殖
抑制がみられぬ濃度で試験した。したがってここで得ら
れたものは細胞外でのウィルス不活化の結果であると云
える。

又不活化状態は物質濃度によシ強弱が生じる事も判明し
た。

然し温度依存性はみられない。

尚、本発明の抽出物で一担不活化されたウィルスは生体
内に投与されても病原性を現わさぬ事が確認され、この
点でも大きな意義を有すると考えられる。

２　赤血球凝集阻止試験 精製したＨＢＳ抗原（１０μｇ／−１’）の５０μｔ２
２− と本発明物質（５００μｇ／−）の５０μＬを混和して
室温に３０分間静置する。この混液から２５μｔをとっ
て９６穴Ｕ字型マイクロプレート上で２倍階段希釈を行
い、そこへ１％ＨＢＳ抗体感作ヒツジ赤血球の２５μｔ
を加えて攪拌後室温で６０分間反応させてから型の如く
判定する。

結果 本発明物質はＨＢＳ−感作ヒツジ赤血球の凝集を５〜６
穴阻止した。これは抗原量に換算すると９０％以上の阻
止率である。尚、本物質単独では勿論赤血球を凝集しな
い。

長！ 赤血球凝集反応の阻止現象として（１１立体阻害、（２
）非特異的阻害、（３）ウィルス抗原の変性に基づく阻
害等が考えられている。したがって本発明物質の阻止現
象が上記（１）〜（３）のどの機序によるものかを検べ
る必要がある。そこでまず（１）について考察すると、
本発明物質が分子−ＪｉｌＯＯＯ以下と考えられるので
立体阻害を起す事は否定出来る。（２）については、ウ
ィルス抗原の関与しない抗坑体測定法に基づいてをの反
応系での凝集阻止の有無を検べたところ、その抗抗体測
定法に於ては本物質は作用しなかった。したがって本発
明物質の赤血球凝集阻止反応はウィルス抗原の関与する
反応系に特異的に作用すると思われる。

３　ウィルスの増殖抑制 御）　単純庖疹ウィルス、インフルエンザウィルス、水
痘性口内炎ウィルスについては、１２穴プラスチツクシ
ヤーレに３日間で単層とした夫々の宿主細胞（Ｖｅｒｏ
、ＭＤＣＫ、Ｘ）に、培養液を除去して、１０″ＴＣＩ
Ｄ５゜のウィルスをチャレンジし、６０分間吸着後に維
持液を１ｍ／穴で注ぐ。

この維持液添加時を０分としてその後任意の時間に物質
を加えてウィルスをチャレンジしたのち７２時間目の維
持液中の感染性ウィルスの定量を行う。

収量測定は９６穴マイクロプレートを用いてＣＰＥで判
定する。

２）　狂犬病ウィルスの場合はＢＨＫ、１　（ＩＸｌ　
０’／Ｍｌ　）ノ０．２ｍ、！＝ＰＶ株（１０’ＴＣＩ
Ｄ、、）０．１ｄを混じたところに無血清培地に溶した
実施例１で得られた物質（５００〜１２５μｇ／ｌ）０
．１１を加えてこれらの混合物をラブチック（ラブチッ
ク社製）に植え込み３７℃の５チ炭酸ガス含有インキユ
ベーターに保つ。植え込んでから４８時間後に直接法で
型の如く螢光抗体染色を施してウィルス抗原出覗の有無
を検べ、他方７２時時間項養を維ｍｌ−九時のウィルス
の定量も行う。

これらのウィルス増殖の抑制状態を下記表４に示十。尚
この結果はウィルスチャレンジ後θ分で物質を添加した
ものである。

２５− ２６一 単純庖疹ウィルスの場合、ウィルスチャレンジ後２．４
．８．１２の各時間に１回のみ当該物質を加えた結果は
０分と同様である。

単純庖疹ウィルスに対する抗ウィルス剤とＵ７て知られ
る市販のＡｒ１ｅｎｉｎｅ　Ａｒａｈｉｎｎｓｉｄｅ（
Ａｒａ−ａ　）　（Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｆ／Ｐ
ａｒｋｅ　１）ａｖｉｓ。

Ｃ１１ｎｉｃａｌ　　ＲｅｓｅａｒｃｋＤｅｐａｒｔｍ
ｅｎｔ４＃）を対照にＨＦ株の増殖抑制試験を同様に行
うと、Ａｒａ−３５０μｇ／ａｔの添加で１００チの抑
制がみられる。

考察 ウィルスの増殖は細胞への吸着という現象にはじまりそ
の後いくつかの過程を経て完了する。本発明物質が、そ
れらのどの段階に作用するかまだ不明であるが、最小用
土濃度は比較的少量であろうと推測される。父、ワクチ
ンの効果があまり期待出来々いインフルエンザの如き呼
吸器系疾患、あるいは単純庖疹の様な持続感染性ウィル
スに、更にかつてその増殖を抑制する物質の報口がない
狂犬病ウィルス等に有効と見なされる点で本発明物質は
非常にユニークである。

４　細胞の増殖に対する影肴 ］２穴プラスチツクシヤーレに３日間で単層になる様に
細胞を寸〈。この植え込み時に物質を添加して２４時間
、４８時間、７２時間後の細胞増殖状態を６−’Ｈ−サ
イミジンの酸不溶性画分への取り込みを常法に従って検
べる。アイソトープは１マイクロキユーリー／穴で添加
１７、いづれの場合も２４時間細胞へ取り込ませた。

この実験対照としてＡｒａ−ａを用いて実施例１で得ら
れた物質と比較した結果を第３図〜第６図に示す。

考察 抗ウィルス剤として報告されている物質は毒性の問題が
あるため使用上の困離を有している。現在臨床上抗ウィ
ルス剤と１〜ではＡ−ｒａ−ａを用いているが、これと
本発明物質とを比較した場合、参考例３で述べた如く本
発明物質けＡｒａ−ａの約手細胞毒性についてもＡｒａ
−ａより少ない結果を得た。

以上の如く有効量が少なく更に毒性に関しても現在使用
されている抗ウィルス剤より少ない物質の報告はまだな
されていないため、本発明物質の有効性は大きいと考え
られる。

５　生体における抗ウィルス作用 実験動物としてマウス（ＩＣＲ，雄、６．５〜７週令、
平均３０９０９日本フレア導入）を用い、ウィルスは単
純＠　疹ウィルスのＭｉｙａｍａ株（脳親和性株）を用
いた。

２９− １群１０匹に分けてまず全群にＭｉｙａｍａ株の１０Ｌ
Ｄ！１゜を腹腔より投与する。その後下記に示す実験ス
ケジュールに従って本発明物質を投与し、対照として用
いた蒸留水投与群との比較を行った。

効果の有無は生死をもって判定した。結果を下表５に示
す。

結果 表５ ３０− 考察 脳に親和性を有する学純庖疹つィルスをマウスに膜力す
ると辿常５〜７日目に死亡する。ところが本発明物質を
静脈から１００μｇを３回投与することによって約半数
の救命効果を得た。投与の経路は皮下性より静注の方が
好捷しく思える。■、投与量の増加により更に効果が上
昇する可能性が残されているが、同時に副作用の問題も
詳細に検討すべきであろう。但し１００μｇでは外観々
変化けＶめられ々かった。

【図面の簡単な説明】

第１図は実施例１で得られた活性抽出物の赤外吸収スペ
クトルであｈｌ 第２図は実施例１で得られた活性抽出物の可視−紫外吸
収スペクトルであり、 第３図けＡｒａ−ａのＶｅ「０細胞増殖に対する影響を
示すグラフであゆ、 第４図はＡｒａ−ａのｘＭＥｓ増殖に対する影響を示す
グラフであり、 第５図は本発明の物質の”Ｊｅｒｏ細胞増殖に対する影
響を示すグラフであり、 第６図は本発明の物質のｘｍ胞増殖に対する影響を示す
グラフである。 手続補正書（自発） 昭和５８年５　月２５日 特許庁長官　　若　杉　和　夫　　　殿１、事件の表示 昭和５８年特許軸第６３２５４号 ２、発明の名称 抗ウイルス活性物質 ３、補正をする渚 事件との関係　　特許出願人 住　所東京都新宿区新宿６−１５−６の３Ｆ６４、代　
理　人〒１０７ 明細書の１−発明の詳細な説明」の欄 （１）　明細書第１８頁の第１表中、「保持時間３０分
」の「不活化ウィルス」の欄の２行目に「）　９０　ｚ
　Ｊとあるを「）９９１　Ｊｌと訂正する。 （２）　同第２６頁の第４表中、左端の「加えた本発明
物質濃度」の欄の１行目に１２０μ、！ｉ’　／　ｍｅ
　ｊとあるをＦｓｏμ９　／　ｍｅ　」と、そして２行
目に［５０ｔｉ　、！ｉ’　／　ｍｅ　Ｊとあるを「２
０μｍ１７ｍ１Ｊと訂正する。 （３）　同第２９頁第６行に「第１図並びに第３図」と
あるを「第５図並びに第６図」と訂正する。 以上 ２−

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （ａ）オトギリソウ利オトギリソウ植物中に存在し、 （ｂ）　　分子量が１０００以下であり、（Ｃ）水、メ
   タノールに易溶で且つエタノール、ｎ−ブタノール、酢
   酸エチル、２−ブタノン、１．４−ジオキサン、クロロ
   ホルム、石油エーテル及びエーテルに離溶乃至不溶であ
   り、 （ｄ）ペーパークロマトグラム〔東洋沖紙Ａ３２６ｉ展
   開溶媒−ビリジン／ｎ−フリノール／蒸留水（１：１：
   １）〕上ノＲｆ値が０．７５〜０．７８　（２２〜２５
   ℃）であり、且つ（ｅ）　　はぼ中性 の杭ウィルス活性物質。