JPH02500364A - ヒトにおけるウイルス感染の治療法およびそのための組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ヒトにおけるウィルス感染の治療法およびそのための組成物 〔発明の分野〕 本発明は、ＲＮＡ依存性ＤＮＡポリメラーゼを特徴とするウィルスによってもた らさｎる疾病を有するヒトの治療法に関する。とくに１喪なのは、レトロウィル ス感染、殊に後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ　）の原因であるヒト免疫不全症 候群（ＨＩＶ　）によって惹起される感染の治療法である。

〔背型および先行技術〕

後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ　）　ｆ示す患者は、１９８１年に初めて観察 された。発生者は最初は隔離され、かつ男性の同性愛集団にｉ［ｔｌＪ限される と思われたが、この観察はエイズがすべての果団評に広く行きわたっていること が見出された場合には早急に誤りであることが立証された。

エイズ感染は、世界の若干の部分における流行病として規定されておシ、世界の 他の部分も間もなく感染することが期待される。

米国特許第４５２［１１１３号１９８４年４月２３日出願）においてガロ（Ｇａ ｌｌｏ　）等は、疾病は病原体の伝搬によって拡がる証拠が提出妊ｎたと述べて いる。

人体における苦痛の一次ターデットは、Ｔ細胞の特殊な亜群である。これら患者 の激しい免疫欠落は、ヘルパーＴ細胞（Ｔ４）のリンパ球集団の異常に低い割合 から生じ、こうして＠Ｂ細胞”による抗体生産がある多くのＴ４ヘルパー機能の 有効性が低下する。

ガロ等［：　”　５ｃｉｅｎｃｅ　’　、第２２０巻、第８６５頁〜第８６７頁 （１９８３年５月２０日）〕は、エイズの作因はヒトのＴ細胞白血病ウィルス（ ＨＴＬＶ　）であることを示慢じている。これらのウィルスは、Ｔ４＋１ｔｔｌ 胞、即ち高い分子蓋（１００ｋｄ）を有しかつ最適酵素活（′″５ｃｉｅｎｃｅ ″、第５ｃｉｅｎｃｅ″、３頁〜第５０５頁（１９８４年５月４日〕〕。バレ・ シナツシイ（Ｂａｒｒｅ　−５ｉｎｕｓｓｉ　）等（−５ｃｉｅｎｃｅ　’　、 第２２０巻。

第８６８頁〜第８７１頁（１９８３年５月２０日）のにすぎない。最近、この分 野における多くの科学者は、このウィルスをヒト免疫不全ウィルス（ＨＩＶ　） と称しており、この用語を下記において使用する。

常に致命的であるＨＩＶ感染を旧僚するための適当な方法お、よ・、び材料に対 する研究は殆んど即座にはじまった。研究は、若干のレベルに進行したことを指 摘しなければならない。これらのうち最初のものは１予防”レベルであり、つま り感染を発生から防止することを企てる。この方法は、行動パターンの修正を包 含し、ここではこれ以上討論しない。第２の方法は、ワクチンにより、ウィルス に応答する免疫を発展させる線に沿った研究でおった。調量は、若干の理由でこ の分野においては遅れていた。ＨＩＶ感染はヒトにおいてのみ生じ、常に致命的 である。ワクチン研究は一般に、免疫応答を発展さセるため、被検者へのウィル スの暗黄化菌株または死んだ菌株の挿入を包含する。動物モデルは働かずかつヒ トの試用に包含されている危険はこの分野に２いて研究を進めるのには太きすぎ る。

なお第６の研究は、ＨＩＶが疫免系を破壊した後に発育する肺炎Ｍ　（Ｐｓｅｕ ｄｏｍａｎｓ　ｃａｒｉｎｉｉ　Ｐｎｅｕｍｏｎｉａ　（ＰＣＰ）ンのような追 従（ｆｏｌｌｏＷ　ｕｐ　）感染を治療することであった。１バクトリム（Ｂａ ｃｔｒｉｍ　）として市販されているサルファメトキブゾールは１つの有効な薬 剤であった。しかしこのものは極めて有梯であり、多数のエイズ患者はそれに対 してアレルギー七有する。これらの因子が薬剤の有用性を制限するに到る。サル ファメトキサゾール七使用することができない場合、抗原生成物剤として公知の ペンタアミジンイセチオネートが使用される。この薬剤はエイズ患者に静脈内ま ｆｃはエーロゾルの形で適用した場合に若干より有効であることが立証されたが 、とｎもまた極めて有毒であシ、糧々の公仰かつ疑われている副作用七有する。

これらの物質のいずれかを用いる長期治療は不可能でおる。

ＨＩＶ　’ｉ治療する第４および第５の研究は、ウィルスの複製能力を妨げる薬 剤による。この領域は、結局、感染をその発生源において破１ｓまたは制限しよ うとする堆−の研究であるので、多くの注目を集めた。

しく制限された試験において、ウィルスの複′＆ヲ妨け、感染の若干の軽減をも たらすことを示した。

しかし、ＡＺＴ’７用いる問題も同様に存在していた。

これは有毒であり、骨髄機能を押圧する疑いもある〔たとえばＫｃｌａｔａ　ｌ 　”　５Ｃ１１１ｉ！ｎＣｅ″、第２２５巻歩第１４６６頁（１９８７年６月２ ０日〕参照〕。ＡＺＴでの治療に使用される養生法は、薬剤が有効であるために 患者が従わねばならない非常に厳重な条件ｔ−袂求ずつ停止されてもいない。

従って、不発明の１つの色凶は、ＲＮＡ依存性ポリメラーゼに％徴とするウィル スで感染されたヒト、殊にヒト免疫欠損ウィルス（Ｈｒｖ　）で感染されたヒト の治療法を提供テることでおる。

不発明のもう１つの目的は、ヒト免疫欠損ウィルスによシ感染された偽体’１ｆ ｔ３僚するのに有用な組成物を提供することである。

これらの目的ならびに不発明の他の目的は、下記の記載により明らかである。

〔発明の要約〕

ｍＡ依存性ポリメラーゼｔ−特徴とするウィルスで感染されたヒトを治療する方 法は、感染された個体に、式： 〔式中Ｘはアジド基、メ）−？シ基ｌたはフッ素原子であり、ＢはＸがメトキシ 基またはフッ素原子である場合にチミン、ウラシル、グアニン、シトシン、ヒポ キサンチン１ｆｃはプリン残基であり、Ｘがアジドでらる場合Ｂはグアニン、プ リンまたはヒポキサンテア１基である〕で示さｎる少なくとも１つの化合物なら ひにその薬学的認容性塩の有効量を投与することを要旨とする。従って、上述し たような少なくとも１つの化合物を常用の薬学的担体および布釈剤と共に官有す る組成物が製造される。

〔図面の簡単な説明〕

第１図は、ＭＴ４細胞に対するＨＩＶの病原性を示すグラフを示す。

第２図は、ＨＩＶ感染されｆｃ１１ｔ＋１抱に６′−アジド−２’、３’　−ジ デオキシグアノシンを加えた場合の試験管内生存度実験の結果を示す。

第６図は、ＨＩＶ感染された細胞に６′−フルオロ−゛６′−デオキシチミジン を加えた揚台の試験管内生存度試験の結果を示す。

第４図は、ｈｒｖ感染された細胞に６′−フルオロ−２’、３’−ジデオキシグ アノシンを加え７ｃｌｓ合の試験管内生存度試験の結果を示す。

第５図は、ＨＩＶ感染された細胞に３′−アジド−２’、３’　−ジデオキシイ ノシンを加えｆｃ胸合の試験管内生存度試験の結果を示す。

〔有利な構成の詳細な記載〕

上記した活性物質は、チミジン／ウリジン／グアノシン／シチジン／プリンヌク レオシドまたはイノシン系列の９−（β−Ｄ−デオキシリボ７ラノシルクヌクレ オシドでおると認められる。とくに′ｊＬ賛な詳細な化曾＃＠は、６′−アシド −２’、３’　−ジデオキシグアノシン、３′−アジド−２’、３’−ジデオキ シイノシン、６′−フルオロ−２’　、３’　−ジデオキシグアノシンおよび６ ′−フルオロ−３′−デオキシチミジンである。最初の化合物は、イマデワ等（ ＠Ｊ、　Ｏｒｇ。

Ｃｈｅｍ、　”　ａ　ｔｉｎ　４３巻、第６０４４頁〜第６０４８頁（１９７８ 年））Ｋ記載された方法により製造さ１、その記載は参考のため挙げ’／＃ｊｌ ’７’ｌｌる。

本発明により使用される化合物がＨＩＶに対して活性であることは驚異的である 。それというのもクレルコ（Ｃ１ｅｒｃｏ　）等（”　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｐｈ ａｒｍ、　’″、第２９巻。

第１８４９頁〜第１８５１頁（１９８０年）〕のうちの１人は、３′−アジド− ２’、５’　−ジデオキシグアノシンはワクシニアウィルス（熱性抱疹ウィルス １）または水抱性口円炎ウィルスに対して認めうる抗ウィルス作用を示さないこ とを教示しているからである。

６′−アジド−２’、６’　−ジデオキシグアノシンの製造は原則として、相応 する５′−〇−アセテルーまたは５′−〇−トリメチルシリルー３′−アジド− ６′−デオキシチミジンを、触媒としてトリメチルシリル−トリフルオロメタン スルホネートの存在でシリル化Ｎ２−バルミトイルグアニンでトランスグリコジ ル化することによって行なわれる。

相応するヒボキサンチン化合物は、同様に相応するバルミトイル−ヒボキサンチ ンを使用することによって得らｎる。ｖｆｃ、こｎらのグアニンおよびヒボキサ ンチンは、１−０−メチル−５−０−（４−メチルベンゾイル）−６−アジド− ２，３−ジデオキシ−Ｄ−リホフラ／−ス（＠５ｙｎｔｈｅｓｉｓ　”　ｍ　（ １９８４年〕。

第９６１頁に記載されたデアトキナ（Ｎ、Ｄ、　Ｄｙａｔｋｉｎａ、３およびア ズハイエフ（Ａ、Ｖ、　Ａｚｈａｙｅｖ　）の方法により得られる〕を、フォル ブルゾン（Ｈ，Ｖｏｒｂｒｕｇｇｅｎ　）、クロキエビクスＬ　Ｋ、　Ｋｒｏｋ ｉｅｗｉｃｓ　）　２よびペナ（Ｂ。

Ｂ６ｎｎａ　）の方法〔Ｃｈｅｍ、　Ｂｅｒ、　”　、第１１４巻、第１２３４ 頁、（１９８１年）記載〕Ｋより、！ｆ！、謀、たとえばトリメチルシリル−ト リフルオロメタンスルホネートの助けをかりて、シリル化グアニンまたはヒボキ サンチンと反応させることによって得ることができる。２−デオキシ−リボフラ ノシル構造の６位にフッ素原子またはメトキシ残基を有する相応するグアニンお よびヒボキサンチン化合物は、３′−フルオロ−３′−デオキシ−または３′− 〇−メチルー６′−デオキシチミジンから、同じトランスグリコジル化反応によ って得ることができる。これによｆｆ、２．３’　−アンヒドロ−１−（２−デ オキシ−β−Ｄ−キシロフラノシル）−チミン（０２、０３／−シクロチミジン と略称〕ＣＧ、　Ｋｏｗｏｌｌｉｋ　、　Ｋ、　Ｇａｒｔｎｅｒ　、　Ｐ、　Ｌ ａｎｇｅｎ　（”Ｔｅｔｒａ−ｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔｅｒｓ″、１９６９年、 第６８６３頁）によシ製造さｎる〕もまた、出発物質として使用される。

ナトリウムメチレートとの反応により、３’　−０−メチル−６′−デオキシチ ミジンが製造さｎる。

３′−フルオロ−６′−デオキシチミジン、およびその製造は、工１ｔルド（Ｇ 、　Ｅｔｚｏｌ　）、ヒンテエ（Ｒ８Ｈｉｎｔｓｃｈｅ　）、コポリク（Ｇ、　 Ｋｏｗｏｌｌｉｋ　）およびランデ：ｙ　（Ｐ、　Ｌａｎｇｅｎ　）　［”　Ｔ ｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ″、第２７巻（１９７１年）、第２４６３頁〜第２４７２ 頁〕から公知である。製造は、原則としてジエチレングリコール中でシクロチミ ジンとニフツ化水素カリウムとの反応によって連取される。反応生底物は、シリ カデルカラムでＣＨＣＬ３とメタノールとの混合物を用いて分離される。第２の 精製工程は、リフログレグ（ＬｉＣｈｒｏｐｒｅｐｆｌＰ−１８）カラムで、５ ０　ｍＭ　）リエテルアンモニクムカルポネート１５チアセトニトリルの混合物 を用いるクロマトグラフィーによって行なわれた。

６′−フルオロ−３′−デオキシチミジンはまた、シクロチミジン［Ｇ、　Ｋｏ ｗｏｌｌｉｋ　、　Ｇ、　Ｅｔｚｏｌ　、　Ｍ、　ｖｏｎＪａｎｔａ　、　Ｌｉ ｐｉｎｓｋｉ　、　Ｋ、　Ｇ１１ｒｔｎｅｒ　、　Ｂ、　Ｌａｎｇｅｕ　（＠Ｊ 。

Ｐｒａｋｔ、　Ｃｈｅｍ、、’″（１９７３年〕、第６１５巻、第８９５頁〕の 方法により製造される〕を、フッ化水素酸および三フッ化アルミニウムと反応さ せることによって製造することもできるｅまた、シクロチミジンを、ジメチルホ ルムアミドまたはジオキサン中でクラウンエーテル　１８−クラウン−６の存在 でフッ化カリウムと反応させることもできる。付加的に、ヒボキサンチン化合物 は、相応するアデニン組成物（上記の文献から部分的に公知）から、硝！Ｉ！ま たは塩化ニトロシルでの脱アミン化によって得ることができる。

６′−フルオロ−２’、５’　−ジデオキシクリジンの合成は、６′−フルオロ −３′−デオキシチミジンＣＧ、　Ｅｔｚｏｌｄ　、　Ｒ，Ｈｉｎｔｓｃｈｅ　 Ｉ　（）、　ＫｏｗｏｌｌｉｌｃおよびＰ、　Ｌａｎｇｅｎ　、　＠Ｔｅｔｒａ ｈｅｄｒｏｎ　’　、　第２７巻（１９７１年）第２４６３頁〜第２４７２頁〕 の製造と同様に実施される。こうして、２，６−アンヒドロ−１−（ｚ−デオキ シ−β−Ｄ−キシロフラノシルノーウラシル（（）２　、　（）３’−シクロデ オキシウリジンと略称）は、２−デオキシウリジンから出発して、０２．　ｏ３ ／−シクロＬａｕｇｅｎ　、”　Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔ、１ｅｒｓ　 ″　、（１９６９年〕。

第６８６３頁〕と同様にして合成される。次いで、シクロデツキシーウリジンを エチレングリコール中で二フッ化水素カリウムと反応させて６′−フルオロ−２ ’、３’−デオキシ−クリジンを得る。この組成物に、リー（Ｂ、Ｆ、Ｌ、Ｌｉ 　）、リース（Ｃ，Ｂ、　Ｒｅｅｓｅ　）およびスワン（Ｐ、Ｆ、　Ｓｗａｎｎ 　）　［”　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　’″、第２６巻（１９８７年）、第１０８６頁 〜第１０９３頁）によるアミノ化反応によるか、またはサン（Ｗ、Ｌ、　Ｓｕｎ ｇ　）（−Ｊ、　Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｗ、　”　、第４７巻（１９８２年〕、第３ ６２３頁〜第３６２８頁〕によりジフェニルホスホルクロリデートｌたけトリイ ソグロビルベンゼンスルホニルクロリド、またはニトロトリアゾール、トリアゾ ールまたは他の適当な核試薬の存在で他の過当な活性化剤と反応させ、引き続き アンモニアと反応させることによって、５’−’ルオロー２’、５’　−デオキ シシチジン合成の出発物質として使用された。

本発明により使用される活性化合物の有効性は、エイズおよびＡＲＣ患者から分 離さｎたＨＩＶ″ｆｔ感受性ヒトＴ細肥で培養する生物学的系において確認され メー。こうして培養さｎたＨＩＶの試験管内病原性は、ＭＴ４細胞の使用によっ て決定された（Ｔ４細胞系に対してＨＩＶは細胞変性である）。ＭＴ４細綱系は 、“サイエンス（５ｃｉｅｎｃｅ　）″、第２２９巻（１９８５年）、第５６６ 頁〜第５６６頁に記載されている。こｎにより、細胞変性効果は、細胞中へのチ ミジン取込みの測定によって監視された。本発明による活性物質、殊に３′−ア ジド−２’、３’　−ジデオキシグアノシンを分能された）ＨＶ　ｉ有する細胞 に７加える場合、活性物質のナノモル濃度でさえも、ウィルスによってもたらさ れた細胞変性効果ＶＣ対して保護することが可能でめった。

毒性決定も同じ系中で行なわれた。この場合には、ＭＴ４細胞を、ＨＩＶの不在 において活性物質として本発明による医薬組成物に含有さｎているヌクレオシド 類縁体に５＆露し、再び毒性をチミジンの取込みに基づき決定した。こうして決 定された、抗ウイルス効果をた。

最も望ましい６′−アジド−２’、３’　−ジデオキシグアノシン化合物に対し て、この治療指数は、使用したヒト細胞系の場合には、１０３に等しいかまたは これよりも大きく、６′−フルオロ−３′−デオキシチミジンに対しては１０３ エクも大きく、６′−フルオロ−２’、３’　−ジデオキシ−グアノシンに対し ては約４００であった。試験は、ウィルスを生産する細胞系の上澄液の試料を、 ＭＴ４細胞系會含有する微量滴定板中で段階的に希釈するような方法で実施した 。同時に、微量滴定板に、放射性標識チミジンを加え、細胞の生活活性と平行に 進むこの物質の取込みを測定した。不発明ｅζよる活性＃４！ｌＪ′ＪＲの毒性 濃度またはウィルス含有液の細胞変性蓋の影會下に、放射性標識チミジンの取込 みは相応に減少した。

第１図には、ＭＴ４細胞中へのチミジンの取込みに対する、ウィルス生産細胞系 のＨ工ｖウィルス含有上澄液の異なる希釈度（種々のウィルス濃度〕の影響がグ ラフで説明されている。取込み曲線は、１：３０の希釈度１ではＨＩＶウィルス の細胞変性は相応して非常に低いチミジン取込みヲ住じ、１：１００００のウィ ルス含有上澄液の希釈度で最高値に違すること金示す。

こうして、第１図に、培養上澄液の１：４０の希釈度の場合、ＭＴ４細胞に対す るＨＩＶのほとんど最高の細胞変性がなお存在することを示す。本発明による医 薬組成４１ＩＪＶｃ対する活性物質の有効性の調査は、このウィルス希釈度の場 合に、調査すべき活性物質およびウィルスお釈液の予備混合液を細胞系試料に加 え、査びチミジン取込みを決定することにより実施した。

望ましい化合物３′−アジド−２’、３’　−ジデオキシグアノシンを用いるこ れらの試験の結果は、重付図面の第２囚に示されている。第２図は、加えた活性 物質の量（μｍ１／ｌ１ｌ＝）とチミジン取込み速度（ｃｐｍｓａｃｏｕｎｔｓ 　ｐｅｒ　ｍ１ｎｕｔｓ　）との間の関係をグラフで示す。

−ＨＩＶで示し友曲線はウィルスの不在で得らｎたものでおり、＋ＨＩＶＢ線は ウィルスの存在で得られたものでおる。活性物質０．３μ９７紅の濃度に、ＨＩ Ｖ母液の１：４０希釈度の細胞変性効果に対し細胞をｌ／２最大作用で保護する ことを示す。

第３図は、３′−フルオロ−３′−デオキシチミジンの添加量（μ９７ｍ）とチ ミジン取込み速度（ＣｐＴｒｉ）との間の関係會、第２図に説明したと同様に描 写する。

これは、０．００２μ＆／Ｉｌｌ、より小さい濃度では活性化合物は既にｌ／２ 最大活性で、ＨＩＶ母液の１＝４０希釈度の疎胞変性効果に対して細胞を保護す ることを示す。

これと同様に、第４図は、６′−フルオロ−２′、。

３′−ジデオキシグアノシンの試験管内抗ウィルス活性を示す。実施および評価 は、第２図の説明によって行なった。１．５μｇ／Ｉｕより小さい濃度でこの活 性物質は、既にｌ／２最大活性で、ＨＩＶ母液の１：４０希釈度の細胞変性効果 に対して細胞上保護する。

第５図には、３′−アジド−２’、３’　−ジデオキシイノシンを薬剤投与した 実験が示されている。イノシン化合物の毒性は高いが、チミジン取り込み速度は ＨＩＶ感染Ｔ４ｍ胞系に２いて増加し、はとんど非感染Ｔ４＃Ｉ胞系のものに等 しかった。

例　Ｈ 次の実験においてに、フィトヘマグルチニン（ＰＩ（Ａ）刺戟末梢血液リンパ球 におけるＨＩＶ生産抑＋！ＩＪを研究した。

末梢血液リンパ球の試料をＰＨＡで刺戟し、これに引き続いて細胞が成長した培 養フラスコにＨＩＶウィルス　、を直接に添加した。薬剤が添加されたこ、れら の試料ランにおいては、この添加は培養フラスコに対しウィルスの挿入直後に行 なわれた。

ＨＩＶの存在量は、１Ｐ２４”として公知のＨＩＶの成分に対する放射線免疫検 定によって決定さｎた。使用した免役検定は、試験しｆｃ２０〜０．６２５μｇ ｌＩＬＬの感度を有する。

この試験を実施する場合にｆｉ、ＰＢＬＳの生存度を決定することが重要である 。これは、上記に例１において記載したように、放射性チミジンの椴込みによっ て行なった。

各薬剤の種々の濃度を使用しｆｃ：アジドーテミシン（ＡＺＴ　）　Ｋ対するこ れら濃度は１μＭ　＄　０．１μＭおよび０．０１μＭでらり、３′−アシド− ２’、３’　−ジデオキシグアノシン（ＡＤＧ　）に対するこれらの濃度は６μ ｌｌ　、　０．３　ｔｉｌｌ　、　０．０３４＞Ｌひ０．０００３　μｒｃ；ｂ ツウイルスを受付けない。検定は培養の４日、７日。

１１日および１４日目処行なった。各時点において、培地會新しい培地に代えた 。

これらの結果は表１に示さｎている： 表　１ Ｐｔ／試料　日　日付　計数１　計数２　平　均　正　休　チＶＢｏｎｇｐ２４ ＾Ｔｏｔａｌ　Ｃ０ｕｎｔＳ　５６３９　５４７８　５４２３．５Ｂｌａｎｋ　 １５１　１３８　１４４．５　０．０”Ｏ’５ｔａｎｄａｒｄ　５１８７　２９ ３２　３０５９．５　２９１５．０　１００．０％０．６２５ｎｇ　２６９５　 ２７２４　２７０９．５　２５６５．０　８８．０チ１．２５ｎｇ　２４９２　 ２４９７　２４９４．５　２３５０．０　８０．６チ２．５ｎｇ　１９Ｂ１　２ １０５　２０４３　１８９８．５　６５．１％５、Ｏｎｇ　１４９４　１４７２ 　１４８３　１５３８．５　４５．９チ１０、Ｏｎｇ　８１５　８９９　８５７ 　７１２．５　２４．４％２２０−０ｎ　５４６　４９８　５２２　３７７．５ 　１３．０％ＡＺＴ　１　４　１７００　１６８４　１＜５９２　１５４７．５ 　５３．１％　３．７ＡＺＴ０．１　４　１６００　１７０８　１６８９　１５ ４４．５　５３．０チ　６．７ＡｚＴｏ、Ｏｌ　４　１７５９　１６９２　１７ ２５．５　１５８１．０　５４．２％　５．６＋　ａ　３０７　３１４３１０． ５　１６６−０　５．７チ　２０＋　４　３２０９　３１６５　３１８７　５０ ４２．５　１０４．４チ　０−　４　２７０９　２７７１　２７４０　２５９５ ．５　８９．０％　０ＡＤＧ３　４　１５８７　１７３０　１６５８．５　１５ １４．．０　５１．９ラ　３．８ＡＤＧ０．３　４　１２１５　１２０８　１２ １１．５　１０６７．０　３６．６チ　６．８ＡＤＧ０．０３　４　３５７　３ ６０　５５８．５　２１４．０　７．３％　２０ＡＤＧ０．００３　４　３９６ ３７６　３８６２４１．５　８．３チ　２０ＡＺＴ１７　２３１０　１９５７　 ２１３３．５　１９８９．０　６８．２％　２．２ＡＺＴ０．１　７　２３０４ 　２３６９　２３３６．５　２１９２．０　７５．２％　１．６ＡＺＴ０．０１ 　７　１９５９　１９６０　１９５９．５　１Ｂ１５．０　６２．３％　２．７ ＋　７　２２４　２３２　２２８　８３．５　２．９％　２０＋　７　２９３　 ２３９　２６６　１２１．５　ａ、２チ　２０７　７　２６４９２８３９　２７ ４４２５９９．５　８９．２Ｓ　０ＡＤＧ３　７　２２５５　２２５５　２１１ ０．５　７２．４％　１．８ＡＤＧ０．３　７　１０４７　８４３　９４５　８ ００．５　２７．５チ　１０ＡＤＧ０．０３　７　３１６　２６２　２８９　１ ４４．５　５．０％　２０ＡＤｅＯ，００３７２９４２８３２８８，５１４４， ０４，９％　２０ＡＺＴ１　１１　２４５Ｂ　２４８３　２４７０．５　２３２ ６．０　７９．８％　１．２５ＡＺＴ０．１　１１　２５３１　２３４０　２４ ３５．５　２２９１．０　７８．６チ　１．５ＡＺＴ０．０１　１１　５０１　 ４８５　４９３　３４８．５　１２．０４　２０＋　１１　２４９　’Ｂ６　２ ４２．５　９８．０　３．４チ　２０＋　１１　２４２　２６０　２５１　１０ ６．５　３．７チ　２０−　１１　２７７０　２８１７　２７９３．５　２６４ ９．０　９０．９％　０ＡＤＧ３　１１　２６５３　２５９２　２６２２．５　 ２４７８．Ｏａ５．０チ　０．９ＡｐＧＯ−３１１２７７２８７２８２１３７， ５４，７１２０ＡｐｏＯ−０５１１２２５２４２２３５−５８９，０３，１％　 ２０ＡＤＧ０．００３１１　２０１　２２５　２１３　６Ｂ、５　２．３チ　２ ０ＡＺＴＩ　１４　２６５２　２５５８　２６０５　２４６０．５　８４．４％ 　０．９４ＡＺＴ０．１　１４　２１５１　２０４８　２０９９．５　１９５５ ．０　６７．１％　２．３ＡＺＴ０．０１　１４　３５１　２９９　３２５　１ ８０．５　６．２％　２０＋　１４　２７７　３０９　２９３　１４８．５　５ ．１チ　２０＋　１４　２２７　２４５　２３６　９１．５　３．１チ　２０− 　１４　２３９３　２６６５　２５２９　２３８４．５　８１．８％　１．１Ａ ＤＧ３　１４　２７２５　２７２１　、　２７２３　２５７８．５　８８．５チ 　０．６ＡＤＧ０．３　１４　３１６　２９７　３０６．５　１６２．０　５． ６％　２０ＡＤＧ０．０３　１４　２９２　２８２　２８７　１４２．５　４． ９チ　２０ＡＤＧ０．００５１４　２８Ｂ　２６０　２７４　１２９．５　４． ４チ　２０は、それらの最低濃度でほとんど同時に効率を喪失しはじめた。薬剤 はＰＢＬに対する毒性を示さず、チミジンから得らｎる”計数２は細胞生存率が 良好のままでおることを指示する。

表２は、このデータを１０６細胞／酩に調節された只ＩＡによって表わす。

表　２ Ｐｔ／試料　８正ｆｆ１ｔｔ数ＣＰＭ／ａｔ　＠胞＋０６　ＣＰｌｔ／１＋０６ 細胞ＡＺＴＩＵＭ　７　３８０．２２．９ｇ＋０３３．７２７．６６Ｅ＋Ｄ２Ａ ＺＴ０．ＩＵＭ　７　４７．０３．５ｇ＋０２４．０８８．６４Ｅ＋０１ＡＺＴ ０．０１ＵＭ　７　７８４．０５．９Ｂ＋０５　３．３１．７８ｇ＋０３＋Ｃ０ ＮＴＲ０Ｌ　７４１．１８６．０３．１Ｂ＋０５２．９２１．０（ＳＥ＋０５＋ Ｃ０ＮＴＲ０Ｌ　７６２，２９８．０４．７ｇ＋０５３−６８１．２７ｇ＋０５ −ＣＯＮＴＲＯＬ　７　２１．０１．６ｇ＋０２　４３．９４に＋０１ＡＤＧ３ ＵＧ　７　３２５．０　２．４ｇ＋０３　５．７　．６．５９ｇ＋０２ＡＤＧ０ ．３ＵＧ　７１．７０４．０１．５Ｅ−１−０４５，９２５，２６Ｅ＋０５ＡＤ Ｇ０．０５ＵＧ　７３６．１６［］、０２．７ｇ＋０５　２．６８１．０１ｇ＋ ０５ＡＤＧ０．００３ＵＧ　７４３．２３６．０３．２ｇ＋０５　３．７８８． ５８１１！＋０４ＡＺＴ　ＩＵＭ　１１　Ｌｌ、０８４．０）　−８，ＩＦｆ＋ ０３５．０２−１．６２ｇ＋０３ＡＺＴ０．ＩＵＭ　１１　１６３．０１．２ｍ ０３　４．９２．４９Ｅ＋０２ＡＺＴ０．０１ＵＭ　１１３．６８１．０２．８ Ｂ４−０４３．８４７．１９１＋０５＋Ｃ０ＮＴＲ０Ｌ　１１４４．５６７．０ ３．３１０５４．２２７．９２！！＋０４＋Ｃ０ＮＴＲ０Ｌ　１１４８，７７８ ．０３．７ｇ＋０５４．４４８．２４ｇ＋０４−ＣＯＮＴＲＯＬ　１１　（１， ２２５，０）−９，２Ｅ＋０５５．７２−１．６１Ｅ−１−０３ＡＤＧ　３ＵＧ 　１１　（１，２８０，ＤＪ　−９，６ＩＣ＋０３５．８４−１．６４１Ａ−Ｏ ５ＡＤＧ０．３ＵＧ　１１２４．２８７．０１．８Ｅ＋０５４．８４３．７６１ Ｅ＋０４ＡＤＧ［Ｊ、０３ＵＧ　１１５２．５２９．０３．９Ｂ＋０５４．４８ ８．７９針０４ＡＤ（）　０．００３Ｔ）Ｇ　１１５８．７３８．０２．９ｇ＋ ０５　ａ、７６．１ａＥ＋ｏ４ＡＺＴＩＵＭ　１４　７６．０５．７に＋０２３ ．６８１．５５１Ｆ＋０２ＡＺＴ０．ＩＵＭ　１４　５１９．０３．９Ｅ＋０３ ３．９８９．７８ｇ＋０２ＡＺＴ０．０１ＵＭ　１４１８．４１１．Ｏｉ、４ｇ ＋ｏｓ　５．７４２．４１Ｅ＋０４＋Ｃ０ＮＴＲ０Ｌ　１４１５．８６４．０１ ．２に＋０５５．０２２．３７Ｊ）＋０４＋Ｃ０ＮＴＲ０Ｌ　１４２７．５２５ ．０２．１ｇ＋０５４．７２４．５７Ｅ＋０４−ＣＯＮＴＲＯＬ　１４　（４０ ５，０）−３，ＯＢ＋０３５．９８−７．６３ｇ＋０２ＡＤＧ　３ＵＧ　１４　 （１２，０）−９，０計０１　５．５−２．５７１０１ＡＤＧ０．３Ｕ（）　１ ４１９．３０７．０１．４１ｉ）−１−０５３，０Ｂ　４．７０１０４ＡＤＧ０ ．０３ＵＧ　１４３０．８１８．０２．３Ｂ＋０５３．６６６．５２Ｅ＋０４Ａ ＤＧ　Ｏ，００３ＵＧ　１４３１．９７Ｂ、０２．５Ｂｉ＋０５　＜、５６５． ６７ｇ＋０４これらの結果は、ＡＤＧが０．３〜６μ９／ＩＩＩの用量で有効で あることを示す。６′−アジド−２’、３’−ジデオキシイノシンに対しても同 様の結果が期待される。

例　Ｉ 例■に記載したような実験を、６′−フルオロ−２’、３’　−ジデオキシグア ノシンについて繰り返した。３′−フルオロ−２’、３’　−ジデオキシグアノ シンは、６′−アジド−２’、３’−ジデオキシグアノシン（Ｉｍａｚａｗａお よびＥｃｋｓｔｅｉｎ　、　−Ｊ、　Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｍ、、”第４３巻、第３ ０４４頁（１９７８年）と同様に、６′−フルオロ−６′−デオキシチミジン［ Ｇ、　Ｅｔｚｏｌｄ等（”’　Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　’″、第２第２７第、 第２４６６１９７１年）により合成〕をアセトニトリル中のバルミトイルグアニ ンを用い、アセトニトリル中でビス（トリメチルシリル）−７セトアミド２よひ トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネートの存在で６０分間還流下にト ランスグリコシド化することにより合成した。

シリカゾルでのクロマトグラフィーで得られる生成物は、ＴＬＣ（ＣＨＣＬ３　 ／　ＭｅＯＨ−９：　１　）でチミジン（０，３８）よりも僅かに大きいＲＦ（ ０，４３）ｔｌ−有する。これを、ＮＨ３で飽和したＭｅＯＨ中で５０℃で一晩 反応させた。蒸発乾橋した後、残分ｔ−Ｈ２Ｏ／　ＭｅＯＨＶｃ溶かし、ＬｉＣ ｈｒｏｐｒｅｐ　ＲＰ　−１８カラムで、アセトニトリル６チを含有する５０ｍ Ｍの炭酸水素トリエチルアンモニウム（ｐ８７．５）ｔ−用いるクロマトグラフ ィーにかけた。生成物含有フラクションを蒸発およびＭｅＯＨとの再蒸発後に、 ９−（３−フルオロ−２，３−ジデオキシ−β−Ｄ−リボフラノシル）グアニン の結晶性残分が得られる；融点〉２６０℃、ＩＨ−恥（ＤＭＳＯ）。

δ、６−１５　ｐｐｍ　（ｄａ、　ＩＨ，Ｊ３．　Ｈ，Ｆ　−５３Ｈ２，Ｈ−３ す。

４．１４　（ｄｍ、　ＩＨ，Ｊ、、　Ｈ，３’Ｆ−３２Ｈｚ、　Ｈ−４’）、　 １００鮨炭醒水素トリエチルアンモニウム（ｐ８７．５　）およびアセトニトリ ル（１５分間に０〜１５チ〕の線型勾配によるＯＤＳハイパージル（Ｈｙｐｅｒ ｓｉｌ　）でのＨＰＬＣ。

保時時間：β−アノマーに対しては８分、α−アノマーに対しては６．８分。収 率約１５％。

本発明による医薬組成物は、活性物５Ｉｊを遊離形または生理的に許容しうる塩 の形で、つまり上記一般式の化合物または化合物の混合物の形で含有しうる。さ らに、医薬組成物は、意図された投与形に対し常用の薬学的添加剤２よび希釈剤 を含有しうる。

投与は、経口的、非経口的、を髄内または静脈内てらってもよく、経口投与が望 ましい。望ましい用量は、ヒトに投与する場合には体１７０ゆあた９１日に約１ 〜約２０９である。投与の最適量および１式に、患者ごとに変わる。

現在本発明の望ましい構成であると思われるものが記載されているが、専門家に と９、種々の変化および変更を本発明から逸脱することなく行なうことができる ことは明らかでわり、従ってかかる変化および変更もすべて本発明の真の思想お よび範囲内に入るものとしてカバーするものとする。

チミジン取込み チミジン取込み チミジン取込み 手続補正書（自発） 平成１年５月２２日

Claims (28)

【特許請求の範囲】
1. １．ＲＮＡ依存性ポリメラーゼを特徴とするヒトにおけるウイルス感染を治療す る方法において、ＲＮＡ依存性ポリメラーゼ活性を特徴とするウイルスの感染を 有するヒトに、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中Ｘはアジド基、メトキシ基またはフツ素原子であり、ＢはＸがメトキシま たはフツ素である場合にチミン、ウラシル、グアニン、シトシン、プリンまたは ヒボキサンチンであり、Ｘがアジドである場合にグアニン、プリンまたはヒポキ サンチンである）で示される化合物、またはその薬学的認容在塩の抗ウイルス有 効量を投与することからなるヒトにおけるウイルス感染の治療法。
2. ２．Ｘがフツ素またはメトキシであり、Ｂがチミン、グアニン、シトシン、プリ ンまたはヒボキサンチンである、請求の範囲第１項記載の方法。
3. ３．該化合物が３′−アジド−２′，３′−ジデオキシグアノシンである、請求 の範囲第１項記載の方法。
4. ４．該化合物が３′−フルオロ−３′−デオキシチミジンである、請求の範囲第 １項記載の方法。
5. ５．該化合物が３′−フルオロ−２′，３′−ジデオキシグアノシンである、請 求の範囲第１項記載の方法。
6. ６．該化合物が３′−アジド−２′，３′−ジデォキシィノシンである、請求の 範囲第１項記載の方法。
7. ７．該ウイルスがヒト免疫不全症候群ウィルスである、請求の範囲第１項記載の 方法。
8. ８．Ｘがアジドである、請求の範囲第１項記載の方法。
9. ９．Ｘがメトキシである、請求の範囲第１項記載の方法。
10. １０．Ｘがフツ素である、請求の範囲第１項記載の方法。
11. １１．Ｂがチミンである、請求の範囲第１項記載の方法。
12. １２．Ｂがウラシルである、請求の範囲第１項記載の方法。
13. １３．Ｂがグアニンである、請求の範囲第１項記載の方法。
14. １４．Ｂがシトシンである、請求の範囲第１項記載の方法。
15. １５．Ｂがプリンである、請求の範囲第１項記載の方法。
16. １６．Ｂがヒポキサンチンである、請求の範囲第１項記載の方法。
17. １７．該化合物が経口的、非経口的、脊髄的または静脈内に投与される、請求の 範囲第１項記載の方法。
18. １８．該化合物が経口的に投与される、請求の範囲第１項記載の方法。
19. １９．該化合物が体重７０Ｋｇあたり１回に約１ｇ〜約１０ｇの量で投与される 、請求の範囲第１項記載の方法。
20. ２０．ＲＮＡ依存性ポリメラーゼを特徴とする感染の治療用組成物において、式 ： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中Ｘはアジド基、メトキシ基またはフツ素原子であり、ＢはＸがメトキシま たはフツ素である場合にチミン、ウラシル、グアニン、シトシン、プリンまたは ヒポキサンチンであり、Ｘがアジドである場合にグアニン、プリンまたはヒポキ サンチンである〕で示される化合物、またにその薬学的認容在塩の抗ウイルス有 効量および薬学的認容性担体を含有する、ヒトにおけるウイルス感染の治療用組 成物。
21. ２１．Ｘがフツ素原子またはメトキシ基であり、Ｂがチミン、ウラシル、グアニ ン、シトシン、プリンまたはヒポキサンチンである、請求の範囲第２０項記載の 組成物。
22. ２２．該化合物が３′−アジド−２′，３′−ジデオキシグアノシンである、請 求の範囲第２０項記載の組成物。
23. ２３．該化合物が３′−フルオロ−３′−デオキシチミジンである、請求の範囲 第２０項記載の組成物。
24. ２４．該化合物が３′−フルオロ−２′，３′−ジデオキシグアノシンである、 請求の範囲第２０項記載の組成物。
25. ２５．該化合物が３′−アジド−２′，３′−ジデオキシイノシンである、請求 の範囲第２０項記載の組成物。
26. ２６．該化合物か１日量あたり約１ｇから約２０ｇの量で存在する、請求の範囲 第２０項記載の組成物。
27. ２７．３′−フルオロ−２′，３′−ジデオキシグアノシン。
28. ２８．３′−アジド−２′，３′−ジデオキシイミン。