EA012844B1 - Аналоги противовирусных нуклеозидов и способы лечения вирусных инфекций, в частности вич-инфекций - Google Patents

Аналоги противовирусных нуклеозидов и способы лечения вирусных инфекций, в частности вич-инфекций Download PDF

Info

Publication number
EA012844B1
EA012844B1 EA200501325A EA200501325A EA012844B1 EA 012844 B1 EA012844 B1 EA 012844B1 EA 200501325 A EA200501325 A EA 200501325A EA 200501325 A EA200501325 A EA 200501325A EA 012844 B1 EA012844 B1 EA 012844B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
group
compound
virus
denotes
composition according
Prior art date
Application number
EA200501325A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200501325A1 (ru
Inventor
Хиромичи Танака
Масанори Баба
Юн-Чи Чэн
Original Assignee
Йельский Университет
Хиромичи Танака
Масанори Баба
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Йельский Университет, Хиромичи Танака, Масанори Баба filed Critical Йельский Университет
Publication of EA200501325A1 publication Critical patent/EA200501325A1/ru
Publication of EA012844B1 publication Critical patent/EA012844B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/52—Purines, e.g. adenine
    • A61K31/522—Purines, e.g. adenine having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. hypoxanthine, guanine, acyclovir
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/675—Phosphorus compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pyridoxal phosphate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A61K31/7072—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid having two oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. uridine, uridylic acid, thymidine, zidovudine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C07H19/10—Pyrimidine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/14—Pyrrolo-pyrimidine radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • C07H19/20—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение относится к новым соединениям в соответствии с формулойв которой В обозначаетилиR обозначает Н, F, Cl, Br, I, C-Cалкил, -C≡N, -C≡C-R,илиX обозначает Н, С-Салкил, F, Cl, Br или I; Rобозначает Н, ацильную группу, С-Салкильную или эфирную группу; Rобозначает Н, ацильную группу, С-Салкильную или эфирную группу, фосфатную, дифосфатную, трифосфатную, фосфодиэфирную группу либо группуилиNu обозначает радикал биологически активного противовирусного соединения, таким образом, чтобы аминогруппа или гидроксильная группа из указанного биологически активного противовирусного соединения образовывала фосфатную, фосфорамидатную, карбонатную или уретановую группу с соседней частью; Rобозначает Н или С-Салкильную или эфирную группу; Rобозначает Сили Салкильную группу; -(CH)-C≡C-R,илиRи R, каждый независимо, обозначают Н, F, Cl, Br или I; Rобозначает Н, F, Cl, Br, I или -С-Салкил; Y обозначает Н, F, Cl, Br, I или -С-Салкил; k составляет 0, 1 или 2, и n составляет 0, 1, 2, 3, 4 или 5, либо их аномерам, фармацевтически приемлемым солям, полиморфам или их сольватам.

Description

По заявке на данный патент испрашивается приоритет на основании предварительной заявки на патент номер 60/448554, поданной 19 февраля 2003 г., которая полностью включена в данное описание.
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к новым аналогам 2',3'-дидезокси и дидегидронуклеозида и связанными с ними пролекарствами и их использованием при лечении ряда вирусных инфекций и заболеваний, включая ВИЧ и связанный с ними СПИД, наряду с другими заболеваниями, в частности вызываемыми ретровирусами.
Проведение данной работы финансировалось из средств гранта ΑΙ-38204 на развитие здравоохранения, предоставленного Национальным институтом здравоохранения. Правительство сохраняет за собой определенные права на данное изобретение.
Предпосылки к созданию изобретения
Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ/СПИД) стал основной инфекционной причиной смерти людей во всех странах мира, превзойдя малярию и туберкулез по уровню смертности. По данным изданного в декабре 2002 г. отчета ВОЗ об эпидемии ВИЧ в настоящее время зарегистрировано 3,1 млн смертельных случаев и 42 млн людей, больных СПИДом. Существует очевидная необходимость в новых более эффективных терапевтических средствах. Дидезоксинуклеозиды являются важной группой противовирусных химических соединений (16, 26, 27). Относящийся к этой группе 3'-азидо-3'-дезокситимидин (ΑΖΤ, Ретровир, Зидовудин) стал первым лекарственным средством, одобренным для лечения ВИЧ. Побочным эффектом, ограничивающим его дозировку, является миелосупрессия (14, 36, 39), которая может усиливаться при одновременном приеме других лекарств, что вызывает подавление функции костного мозга или функций, за метаболизм которых отвечает печень. 2',3'-дидегидро-3'-дезокситимид (Ό4Τ, Ставудин, Церит) был в дальнейшем одобрен ввиду простоты его биологического получения и сниженного токсического воздействия (1). Применение Ό4Τ ограничивается долгосрочной отсроченной токсичностью, периферийной сенсорной невропатией (4), которая связана с митохондриальным повреждением (3, 5, 6, 13, 18, 22, 30, 33, 34). 2',3'-Дидезоксииннозин (66Ι, Диданозин, Видекс) и 2',3'-дидезоксицитедин (ббС, Цальситабин) являются дидезоксиниуклиазидными против ВИЧ соединениями, которые также характеризуются периферийной невропатией, являющейся их основным побочным эффектом. В процессе поиска аналогов против ВИЧ-нуклиазидов, характеризующихся меньшей невропатией, было синтезировано много классов химических соединений и была проведена их оценка на антивирусную активность и цитотоксичность, включая их воздействие на митохондриальные ДНК. Дидезоксинуклиозиды в необычной форме Ь, представленные в-Ь-2',3'-дидезокси-3'-тиацитидином (3ТС, Ламивудин), его 5-фтор аналогом (РТС, Эмтрицитабин) и в-Ь-2',3'-дидезокси-2',3'-дидегидро-5-фторцитидином (ЪР64С, Элвуцитабин), как было продемонстрировано изобретателями (2, 11, 12, 23-25) и другими авторами (8, 9, 15, 37), обладают хорошей противовирусной активностью и низкой митохондриальной токсичностью. Тем не менее, даже при наличии химических соединений, являющихся относительно нетоксичными по отношению к митохондрии, отсутствует пролонгированный ответ. Это состояние может быть вызвано либо быстрым появлением резистентных вирусов, либо изменениями в организме-хозяине, вызывающими различия в метаболизме лекарств (10, 19, 35).
Один подход к решению этой проблемы заключается в разработке менее токсичных соединений, не имеющих перекрестной резистентности к другим антивирусным лекарствам. При использовании в сочетании эти соединения позволят снизить дозировку существующих лекарств, необходимых для достижения аналогичного антивирусного эффекта при меньшей токсичности. Кроме того, эти соединения могли бы даже отсрочить наступление резистентности, которая могла бы быть основана на более низкой вирусной нагрузке во время курса лечения. В процессе поиска новых противовирусных соединений другие авторы обратили внимание на аналоги 4'-замещенного 6ΤΜ (29, 32), в то время как нами была синтезирована серия аналогов 4'-замещенных Ό4Τ. Испытания показали, что 4'-этил Ό4Τ является наиболее активным из протестированных соединений (17). В изложенном в данном документе исследовании нами описывается отношение действий структур в этом классе соединений и дается более детальная характеристика 4'-этил Ό4Τ относительно его принципа действия против ВИЧ и взаимодействия с основными клеточными ферментами, способствующими его активности.
Цели изобретения
Целью настоящего изобретения является создание соединений для лечения вирусных инфекций.
Другой целью изобретения является создание фармацевтических составов, которые могут быть использованы для лечения вирусных инфекций.
Еще одной целью настоящего изобретения является создание пролекарственных форм соединений в соответствии с настоящим изобретением, изготавливаемых по химической формуле в сочетании с известными противовирусными препаратами.
Другой целью изобретения является создание терапевтических способов для лечения различных вирусных заболеваний, как описано в настоящем патенте, или рака.
Эти и/или иные цели изобретения изложены в нижеприведенном описании изобретения.
- 1 012844
Краткое описание чертежей
Фиг. 1 изображает ряд предпочтительных химических соединений в соответствии с настоящим изобретением.
Фиг. 2 изображает против ВИЧ химические соединения Ь(-)Еб4С, Ь(-)8ббС, ббС и Ό4Τ.
Фиг. 3 изображает предпочтительные соединения динуклеозида в соответствии с настоящим изобретением.
Фиг. 4 показывает химический синтез ΤΌΚ-4-152 по схеме А.
Фиг. 5 показывает химический синтез ΤΌΚ-4-114 по схеме В.
Фиг. 5А показывает альтернативный химический синтез ΤΌΚ4-114.
Фиг. 5В показывает альтернативную подготовку промежуточных соединений ацилоксинуклеозида в соответствии с изобретением, которые могут использоваться для производства ΤΚΌ-4-114 по фиг. 5А.
Фиг. 6 показывает химический синтез ΚΜΑ-23-153.
Фиг. 7А показывает синтез 4'-этинил-2'-дезоксинуклеозидов из 2'-дезоксинулкозидов в соответствии с методологией Иотига, е! а1. 1. Меб. СНет., 42, 2901-2908 (1999).
Следует отметить, что 8Ж.3 представляет собой трет-бутилдиметилсилильную группу, а 8ίΒ'3 трет-бутилдифенилсилильную группу. X представляет собой атом галогена, например хлора, а В являет ся нуклеозидным основанием, например урацилом, аденином, гуанином или цитозином и т.д.
Фиг. 7В показывает синтез 4'-этинил-2'-дезоксинуклеозидов из блокированного предшественника сахара в соответствии с методологией Ойгш, е! а1., 1. Меб. СНет. 43, 4516-4525 (2000). Следует отметить, что В представляет собой нуклеозидное основание.
Фиг. 7С показывает общий химический синтез 2',3'-дидегидронуклеозидных соединений из соответствующих аналогов 2'-дезоксинулеозидов в соответствии с настоящим изобретением.
Фиг. 8 показывает против ВИЧ активность аналогов 4'-замещенных Ό4Τ: противовирусная активность 4'-этинил Ό4Τ, Ό4Τ, 4'-этинилметил Ό4Τ и 4'-циано Ό4Τ была определена в системе ΜΤ-2/Ηΐν ΙΙΙΒ, описанной в разделе «Материалы и способы» в примерах. Ингибирование определяли путем сравнения показаний при оптической плотности 595 нм с показаниями неинфицированных необработанных (НН) контрольных клеток МТ-2.
Фиг. 9 показывает обращение против ВИЧ эффекта 4'-этинил Ό4Τ. 6ΤΗ6 (10 мкМ), 6ΤΗ6 (1 мкМ) и бСуб (10 мкМ) в присутствии ΤΗυ (5 мкМ) добавляли к стандартной пробе. Ингибирование определяли путем сравнения показаний при оптической плотности 595 нм с показаниями неинфицированных необработанных (НН) контрольных клеток МТ-2.
Фиг. 10 показывает противовирусные изоболограммы Ό4Τ и 4'-этилэтинил Ό4Τ в сочетании с: данными А) 3ТС и В) ЬРб4С, полученными в системе ΜΤ-2/Ηΐν ΙΙΙΒ. Номера вдоль каждой оси являются пропорциями ЕС50 (взятыми за 1) для лекарственного препарата, указанного в качестве единичного реагента. [ЕС50 для единичных реагентов являются 1,4 мкМ Ό4Τ, 0,5 мкМ 4'-этинил Ό4Τ, 1,0 мкМ 3ТС и 0,18 мкМ ЬЕб4С]. Каждая опорная точка представляет сочетание, создающее эффект, эквивалентный эффекту ЕС50 для любого отдельного лекарственного препарата. Индекс синергизма (ИС) рассчитан как дробная часть 45-градусной линии к линии, указывающей, что взаимодействие лекарственных препаратов является аддитивным, при этом общее расстояние составляет 1,0.
Фиг. 11 показывает лечение аналогов Ό4Τ с использованием тимидинфосфорилазы: 6Τ1ι6. Ό4Τ и 4'этинил Ό4Τ были инкубированы из экстракта человеческой печени с помощью частично очищенного препарата ТР. Отношение основания к нуклеозиду определяли с помощью обратной фазы жидкостной хроматографии высокого разрешения на колонке ОДС Бэкмана в соответствии с описанием в разделе «Материалы и способы».
Краткое изложение существа изобретения
Настоящее изобретение относится к соединению в соответствии с формулой
в которой В обозначает или
аЛг·
- 2 012844
ΝΗΚ1
ι
К обозначает Н, Г, С1, Вг, I, СгСдалкил, -С=Ы -С=С-Ка,
к /“ или
X обозначает Н, С1-С4алкил, Г, С1, Вг или I;
К1 обозначает Н, ацильную группу, С1-С2оалкильную или эфирную группу;
К2 обозначает Н, ацильную группу, С1-С20алкильную или эфирную группу, фосфатную, дифосфатную, трифосфатную, фосфодиэфирную группу либо группу
или
N1.1 обозначает радикал биологически активного противовирусного соединения, таким образом, чтобы аминогруппа или гидроксильная группа из указанного биологически активного противовирусного соединения образовывала фосфатную, фосфорамидатную, карбонатную или уретановую группу с соседней частью;
К8 обозначает Н или С1-С20алкильную или эфирную группу;
или
3
К обозначает С3 или С4алкильную группу; -(СН2)п-С=С-Ка, >
К3а и К3Ь, каждый независимо, обозначают Н, Г, С1, Вг или I;
Ка обозначает Н, Г, С1, Вг, I или -С1-С4алкил;
Υ обозначает Н, Г, С1, Вг, I или -С1-С4алкил;
к составляет 0,1 или 2, и п составляет 0, 1, 2, 3, 4 или 5, либо их аномеры, фармацевтически приемлемые соли, полиморфы или их сольваты.
Предпочтительно В является тиминовым основанием (т.е. урацильным основанием с 5-метиловым замещением) или незамещенным адениновым основанием. К1 и К2 предпочтительно обозначают Н. К3 * * * * предпочтительно обозначает -(СН2)п-СН=С-Ка, где п составляет 0 и Ка обозначает Н.
Другие предпочтительные особенности настоящего изобретения заключаются в том, что средство против ВИЧ выбирают из группы, состоящей из ййС. 6Л, άάΆ, ΑΖΤ, абакавира, 3ТС, Ό4Τ и ГТС, ЕЖе и Г64С, в которых биологически активное средство присоединено к фосфатной, фосфорамидатной, карбонатной или уретановой части через гидроксильную группу в положении 5' нуклеозида синтона сахара.
В другом примере осуществления изобретения в соответствии с настоящим изобретением фармацевтические составы включают эффективное количество одного или нескольких соединений, как описывалось выше, произвольно в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем, наполнителем или добавкой.
Применение состава в соответствии с настоящим изобретением при производстве лекарственного препарата для лечения вирусных инфекций является еще одной особенностью настоящего изобретения. Соединения могут быть использованы для лечения инфекций или заболеваний, связанных с вирусами, включающими, например, вирусы 1 и 2 иммунодефицита человека (ВИЧ-1 и ВИЧ-2), включая лекарственно устойчивые штаммы, вирусы 1 и 2 Т-клеточного лейкоза человека (НТЬУ-1 и НТЬУ-2), респираторный синтициальный вирус (К8У), вирус папилломы человека (НРУ), аденовирус, вирус гепатита В (НВУ), вирус гепатита С (НСУ), вирус Эпштейна-Барра (ЕВУ), вирус ветряной оспы-опоясывающего герпеса (νζν), цитомегаловирус (СМУ), вирусы 1 и 2 простого герпеса (Н8У-1 и Н8У-2), вирус герпеса человека 8 (ННУ-8, также известного как вирус, сопутствующий саркоме Капоши) и флавивирусы, включающие вирус желтой лихорадки, вирус лихорадки денге, вирусы японского энцефалита и вирусы лихорадки Западного Нила. Предпочтительно соединения в соответствии с настоящим изобретением
- 3 012844 могут использоваться для лечения ВИЧ-инфекций. Кроме того, настоящие соединения могут использоваться для предотвращения и/или снижения вероятности таких вирусных инфекций, как ВИЧ-инфекция или состояния, которое может быть побочно вызвано вирусной инфекцией, при риске развития состояния, которое является СПИДом, а указанная вирусная инфекция является ВИЧ-1 или ВИЧ-2.
Подробное описание изобретения
Термин «соединение», в том смысле, в каком он используется в данном описании, если не указано иначе, относится к любому конкретному химическому соединению, описываемому в настоящем патенте. В пределах использования термина в данном контексте он обычно относится к единичному соединению, предпочтительно β-аномерам, но в некоторых случаях он может также относится к стереоизомерам и/или оптическим изомерам (включая рацемические смеси), также предпочтительно специфические энантиомеры, в частности β-Ό или β-Ь, предпочтительно аналогам β-Ό нуклеозида или энантиомерическим обогащенным смесям описанных соединений. В настоящем изобретении в некоторых случаях, в частности при описании особенности настоящего изобретения, относящегося к двойным антагонистам/динуклеозидным пролекарствам, соединение в соответствии с настоящим изобретением химически связано через фосфатную (включая полифосфатную), фосфофамидатную, карбонатную или уретановую часть с биологически активным противовирусным средством через аминогруппу или гидроксильную группу биологически активного противовирусного средства.
Термин «двойной антагонист» (в контексте «динуклеозид») относится к соединению пролекарства, включающему два активных средства, при этом одно является активным нуклеозидным соединением в соответствии с настоящим изобретением, а второе является известным активным средством, предпочтительно известным противовирусным средством, более предпочтительно средством против ВИЧ, имеющим свободную аминогруппу или гидроксильную группу, которая может использоваться для создания связи средства с соединением в соответствии с настоящим изобретением через фосфатную или карбонатную группу. В этой особенности изобретения, относящейся к двойному антагонисту, биологически активное средство, имеющее свободную гидроксильную или аминогруппу, может использоваться для создания связи с соединением в соответствии с настоящим изобретением через фосфатную или карбонатную часть для создания соединений пролекарства, проявляющих биологическую активность, предпочтительно противовирусную активность. С этой точки зрения аналог нуклеозида в соответствии с настоящим изобретением связан с биоактивным средством предпочтительно через первичный спирт в положении 5'ОН синтона сахара для получения фосфатной, фосфорамидатной, карбонатной или уретановой части. В предпочтительных примерах осуществления изобретения биологически активное противовирусное средство предпочтительно является другим противовирусным нуклеозидным средством, таким как ббС, абакавир, бб1, ббА, 3ТС, ΑΖΤ, Ό4Τ. РТС, РббС и Рб4С. Предпочтительные нуклеозидные соединения приведены на фиг. 3.
Приведенные в качестве примера биоактивные средства, в частности средства против ВИЧ, которые могут использоваться в соответствии с этой особенностью настоящего изобретения, относящейся к двойному антагонисту, включают, например (название соединения и активная часть, через которую возникает связь с нуклеозидным соединением в соответствии с настоящим изобретением), следующие:
Атазанавир (ВМ8-232632) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы; бис-(РОМ)-РМЕА (Адефовир дипивоксил) с использованием свободной аминогруппы; бис-(РОС)-РМРА (Тенофовир дизопроксил) с использованием свободной аминогруппы;
Этекавир с использованием первичной гидроксильной группы на карбоциклическом синтоне сахара;
Индинавир (Криксиван, МК-639 Ь-735,524, Мегск) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
КН1-227 (Киностатин, №кко Куобо Со.) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы:
2-[3-[3-(8)-[(тетрагидрофуранилокси)карбонил]амино]-4-фенил-2(В)-гидроксибутил]-И-(1,1диметилэтил)дека-гидро-3-изохинолинкарбоксамид (аналог Изохин-СОИ фуранилуретана, Мегск) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
карбаминовая кислота, [3-{[(4-метоксифенил)сульфонил](циклофенилметил)амино}-2-гидрокси-1(фенилметил)пропил]-, тетрагидрофураниловый эфир (УВ-11,328, Уейех) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
ΚΝΙ-174 (№кко Куобо Со.) с использованием свободной вторичной гидроксильной (или свободной амино) группы;
Уа1-Уа1-81а (8апбох (Австрия)) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
СРС53820 (С1Ьа-Се1§у) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
бис-Уа1 ΗΟΕ1-Ν2 аза-пептид изостер с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
производное С2-8ут Фосфиник (Ноесйз! АС) с использованием свободной аминогруппы;
2,5-диамино-И,И'-бис-(И-бензилоксикарбонилуэлил)-1,6-дифенил-3(8),4(8)-гексанедиол ВхОСУа!
- 4 012844
Рйе[б1СНОН(88)]РйеУа1В7ОС (АЬЬой) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы; 2,5-диамино-Ы,Х'-бис-(Х-бензилоксикарбонилуэлил)-1,6-дифенил-3(К),4(К)-гексанедиол ВхОСУа1Р11е|б|СНОН(ВК)|Р11еУа1В/ОС (АЬЬой) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы; бис-(8-ацетил-2-тиоэтил)фосфотриеэфир ббА или [бис-(8АТЕ)ббАМР] с использованием свободного амина;
В1ЬА2186В8 (Вю-Меда/Вое11пидег 1идеШе1т) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
Агенеразе (Ампренавир; УХ-478; 141^94) (Уейех/К155е1/С1ахо \Уе11соте) при свободной вторичной гидроксильной или аминогруппе;
А-98881 (производное азациклической мочевины) (АЬЬой) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы или фенольной гидроксильной группы;
А-83962 (производное Рифонавира) (АЬЬой) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
А-80987 (производное Рифонавира) (АЬЬой) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
(2-Нафталкарбонил)А5и[декарбонилфе-гидроксиэтил]ПроОтертБутил или 2ХарйСОА5иРйе[СНОНСН2]Про-ОтБу (Кос1е) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
производное 2-Аминобензилстатина валила СЬх (8апйох) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы или амина;
производное 2-Аминобензилстатина валила СЬх (8апйох) с использованием свободной гидроксильной группы;
производное 10Н-2(СЬх-Уа1ХН)3РЬРг[ 14] парациклофана (8апйох) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
производное 10Н-2(СЬх-Уа1ХН)3РйРг[13] парациклофана (8апйох) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
производное 10Н-2(СЬх-Уа1ХН)3РЬРг[13] метациклофана (8апйох) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
производное 10Н-2(СЬх-Т1е)3Р1Рг[14] парациклофана (8апйох) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
1-(20НРг)-4-замещенный пиперазин (циклопропил), производное тиенилкарбамата (Мегск) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
1-(20НРг)-4-замещенный пиперазин (циклобутил), производное тиенилкарбамата (Мегск) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
1-(20НРг)-4-замещенный пиперазин (3-пентил), производное тиенилкарбамата (Мегск) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
производное 10Н-2(СЬх-Уа1ХН)3РЬРг[ 17] парациклофана (8апйох) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
А-81525 (АЬЬой) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
ХМ323 (ОМР (диметилфенол (ДМФ) - 323, ЭиРои! Мегск) с использованием свободной первичной или вторичной гидроксильных групп;
Типранавир (И-140690 или РНИ-140690, Рйаттааа & ир|о1т) с использованием фенольной гидроксильной группы;
производные Тиенопирид-СОЫ тиенилуретана (НОСН2СН2 изостер, Ы11у) (замещенное производное бензила или замещенные производные метил меркаптофенила) с использованием свободных вторичных гидроксильных групп;
8ΌΖ РК1 053 (8апйох) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
8Ό146 (ЭиРоШ Мегск) с использованием любой из свободных вторичных гидроксильных групп;
Телинавир (8С-52151, 8еат1е/Мои5аи1о) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы или амина;
(К)2РитСОА8пРйе[СНОНСН2]Р1рСОХН1Ви (Кос1е) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы или амина;
Сахинавир (Инвиразе или КО 31-8959, Кос1е) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы или амина;
производное Сахинавира/Мелфинавира (ЬШу) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
аналог Изохин-СОЫ Т11Г-Т11Г уретана (Мегск) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
аналог Изохин-СОЫ тиенилуретана (Мегск) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
К-87366 (АНРВА аналог, 8аикуо) с использованием свободной аминогруппы;
ДМФ 460 (Пироп! Метс1бАу1б) с использованием свободный вторичных гидроксильных групп или
- 5 012844 любой из анилиновых аминогрупп;
Ь685,434 (Мегск) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
производное Ь685,434-6-гидроксила (Мегск) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
Ь685,434-ОЕ1ИМе2 (Мегск) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
производное Ь685,434-ОРт-Морф (Мегск) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
Ь689,502 (Мегск) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
Лазинавир (ССР 61755, С1ВЛ/Ыоуаг11к) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
Алувиран (Лопинавир, АВТ-378, К.8-346 А157378, АЬЬой) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
аналог Нельфинавир-октагидро-тиенопиридина (Ь111у) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
Р9941 (ИиРо! Мегс1с) с использованием любой из свободных вторичных гидроксильных групп;
Палинавир (В1ЬА 2011 В8, ВЮ-МЕСА/Вое1тшдег 1пдеШе1т) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы;
Пенициллин, аналог 2-Изохин-ОНРгМН2 (С1ахо \Уе11соте) с использованием свободной вторичной гидроксильной группы, наряду с другими.
Информацию о вышеперечисленных активных соединениях и иных соответствующих биоактивных средствах, предназначенных для использования в двойных антагонистах в соответствии с настоящим изобретением, можно найти на веб-сайте ΝΙΗ по адресу 1Шр:/Лу\у\у.ша1Й.ш11.доу/йа1Йк/й1рйЬ/. соответствующие части которых включены в данное описание по ссылке. Предпочтительно, хотя не обязательно или несущественно, чтобы в двойном антагонисте в соответствии с настоящим изобретением два активных средства, образующих двойной антагонист, обладали различными механизмами действия, такими как обратное ингибирование транскриптазы, ингибирование протеазы, ингибирование цинкосодержащей пальцеобразной области, ингибирование ТАТ, ингибирование интегразы либо иным ингибирующим действием. Следует отметить тот факт, что каждое из вышеуказанных средств, без ограничения, может приниматься в сочетании с любым одним или несколькими соединениями в соответствии с настоящим изобретением без образования химических связей.
Термин «эффективный» используется в настоящем описании, если не указано иначе, для описания количества соединения, которое в контексте используется для получения или достижения намеченного результата независимо от того, относится ли этот результат к лечению состояния вирусного заболевания, расстройства или состояния, связанного с вирусным заболеванием, или, в альтернативном случае, используется для получения другого соединения, средства или состава. Данный термин включает все другие термины эффективного количества или эффективной концентрации, которые, так или иначе, описываются в настоящей заявке.
Термин «пациент» используется в тексте описания изобретения для описания животного, в основном млекопитающего и предпочтительно человека, которому предоставляется лечение, включая профилактическое лечение с использованием составов в соответствии с настоящим изобретением. Для лечения указанных инфекций, состояний или болезненных состояний, являющихся специфическими для конкретного животного, например пациента-человека, термин «пациент» относится к этому специфическому животному.
Термин «вирус» используется для описания всех типов вирусов, рост или репликация которых могут быть ингибированы либо болезненные состояния которых могут быть излечены с использованием одного или нескольких способов в соответствии с настоящим изобретением. Вирусы, которые могут быть излечены в соответствии с настоящим изобретением, включают, например, наряду с другими, вирусы 1 и 2 иммунодефицита человека (ВИЧ-1 и ВИЧ-2), вирусы 1 и 2 Т-клеточного лейкоза человека (НТЬУ-1 и НТЬУ-2), респираторный синтициальный вирус (К8У), вирус папилломы человека (НРУ), аденовирус, вирус гепатита В (НВУ), вирус гепатита С (НСУ), вирус Эпштейна-Барра (ЕВУ), вирус ветряной оспы-опоясывающего герпеса (У2У), цитомегаловирус (СМУ), вирусы 1 и 2 простого герпеса (Н8У-1 и Н8У-2), вирус герпеса человека 8 (ННУ-8, также известного как вирус, сопутствующий саркоме Капоши) и флавивирусы, включающие вирус желтой лихорадки, вирус лихорадки денге, вирусы японского энцефалита и вирусы лихорадки Западного Нила.
Термин «вирус иммунодефицита человека» используется для описания вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) и его инфекций, при этом термин включает как вирус 1 иммунодефицита человека (ВИЧ1), так и вирус 2 иммунодефицита человека (ВИЧ-2).
Термин «вирус Т-клеточного лейкоза человека» используется для описания вируса Т-клеточного лейкоза человека и его инфекций, при этом термин охватывает как вирус 1 Т-клеточного лейкоза человека (НТЬУ-1), так и вирус 2 Т-клеточного лейкоза человека (НТЬУ-2).
Термин «вирус гепатита В (НВУ)» используется для описания вируса (вируса сывороточного гепатита), вызывающего вирусный гепатит типа В у человека. Это вирусное заболевание с длительным инку
- 6 012844 бационным периодом (от 50 до 160 дней) в противоположность вирусу гепатита А (вирус инфекционного гепатита), характеризующегося коротким инкубационным периодом. Вирус обычно передается при инъекции зараженной крови или производных крови или путем использования зараженных шприцевых игл, ланцетов или иных инструментов. Клинически и патологически заболевание аналогично вирусному гепатиту А, тем не менее отсутствует перекрестный иммунитет. После инфекции в сыворотке находится вирусный антиген (НВАд).
Термин «вирус простого герпеса» (Н8У) используется в описании изобретения для описания Н8У1 и Н8У2, которые являются вирусными возбудителями инфекций герпеса, включая инфекции генитального герпеса.
Термин «вирус гепатита С» (НСУ) используется по всему тексту описания изобретения для описания вируса гепатита, который является вирусным возбудителем неинфекционного и несывороточного гепатита А, В. Заболевание в острой стадии в целом протекает в более легкой форме, чем гепатит В, но значительная часть таких инфекций переходит в хроническое заболевание.
Термин «вирус Эпштейна-Барра (ЕВУ)» используется в описании изобретения для описания герпетовируса, найденного в клеточных культурах лимфомы Беркитта. ЕВУ является возбудителем инфекционного мононуклеоза, а также ряда других сопутствующих состояний/болезненных состояний, включающих лимфомы, связанные с ЕВУ.
Термин «вирус ветряной оспы-опоясывающего герпеса (У2У)» используется для описания Негрез У1гиз Уапсе11ае, также известного как ветряная оспа или опоясывающий герпес. Ветряная оспа возникает от первичной инфекции вирусом; опоясывающий герпес возникает в результате вторичной инвазии, вызванной аналогичной или реактивационной инфекцией, которая во многих случаях являлась латентной в течение ряда лет. Как первичная, так и вторичная инфекции У2У могут быть излечены с использованием составов в соответствии с настоящим изобретением.
Термин «респираторный синтициальный вирус (КБУ)» используется по всему тексту описания изобретения для описания РНК-содержащего вируса семейства Рпеипиоу1Ш8, вызывающего легкую респираторную инфекцию с ринитом и кашлем у взрослых, но способного вызвать бронхит и бронхопневмонию у детей младшего возраста. Вирус получил это название в связи с тенденцией формирования синцития в тканевой культуре.
Термин «аденовирус» используется по всему тексту описания изобретения для описания вируса семейства абепоушбае, являющегося вирусом, который содержит двунитевую ДНК и который инфицирует млекопитающих и птиц. Вирион составляет 70-90 нм в диаметре и является безоболочным. Вирус развивается в ядрах инфицированных клеток. Для его выделения требуются культуры тканей, так как лабораторные животные не восприимчивы к явной инфекции. Семейство включает два класса: Маз1абепоу1гиз и Асу1абепоу1Ш8.
Термин «вирус герпеса человека 8 (ННУ-8)» используется по всему тексту описания изобретения для описания герпетовируса, который, как считается, является возбудителем саркомы Капоши у больных СПИДом.
Термин «вирус папилломы человека (НРУ)» используется по всему тексту описания изобретения для описания вируса, вызывающего остроконечные кондиломы. Также известный как инфекционный вирус остроконечных кондилом НРУ является универсальной общей рецидивирующей вирусной инфекцией с большим количеством серотипов. Инфекция НРУ может привести к образованию остроконечных кондилом, которые, в свою очередь, могут вызвать генитальный и/или пришеечный рак. Остроконечные кондиломы, вызванные НРУ типа 1, 2, 6, 11, 16 и 18 обычно передаются половым путем и нередко связаны с пришеечным и/или генитальным раком. НРУ может развиться и вызвать аденопапиллярную опухоль или остроконечную кондилому, представляющую собой скрытую доброкачественную эпителиальную опухоль, выступающую над окружающей поверхностью. Обычно она представляет собой скрытую эпителиальную неоплазму, состоящую из ворсинчатых или древовидных выростов сосудистоволокнистой стромы, покрытой неопластическими клетками.
Термин «флавивирус» используется по всему тексту описания изобретения для описания вирусов рода Е1ау1У1Ш8 семейства Тодаушбае. В соответствии с систематикой вирусов около 50 вирусов, включая вирус гепатита С (НСУ), вирус желтой лихорадки, вирус лихорадки денге, вирус японского энцефалита, вирус лихорадки Западного Нила и сопутствующие флавивирусы относятся к этому роду. Вирусы, относящиеся к роду Е1ау1У1шз, просто называются флавивирусами. Эти вирусы в прошлом классифицировались как группа В арбовирусов. Флавивирусы являются возбудителями инфекционного заболевания и превалируют в Восточной, Юго-Восточной Азии и Африке, хотя они также могут быть обнаружены в других частях мира.
Термин «вирус желтой лихорадки» используется для описания флавивируса, являющегося возбудителем желтой лихорадки. Желтая лихорадка является переносимым москитами вирусным гепатитом, вызываемым вирусом желтой лихорадки (УЕУ), с городской формой, передаваемой Аебез аедурб, и сельской, джунглевой и лесной формой, разносимой различными москитами видового комплекса Наетадодиз от обитающих не деревьях млекопитающих. Клинически желтая лихорадка характеризуется высокой температурой, замедленным пульсом, протеинурией, желтухой, отечностью лица, геморрагией, в
- 7 012844 частности гематимезисом (кровавой рвотой). Желтая лихорадка приводит к летальному исходу приблизительно в 5-10% случаев.
Термин «вирус лихорадки денге» используется по всему тексту описания изобретения для описания флавивируса, являющегося возбудителем лихорадки денге/геморрагической лихорадки денге. Лихорадка денге является заболеванием тропических и субтропических регионов, возникающим эпидемически и вызываемым вирусом денге, одним из группы арбовирусов, вызывающих синдром геморрагической лихорадки. Заболевание имеет четыре степени тяжести: степень I - повышенная температура и конституциональные симптомы, степень II - степень I плюс самопроизвольное кровотечение (кожи, десен и желудочно-кишечного тракта), степень III - степень II плюс тревожное возбуждение и нарушение кровообращения и степень IV - глубокий шок. Заболевание передается москитом рода Аебех (обычно А. аедурШ, но часто А. αΐόορίοίζίχ). Болезнь также имеет названия Аден, букет, костолом, денди, дейт, денге (геморрагический) или полька, солнечная лихорадка, кривошейная лихорадка, ревматическая скарлатина или арторозная экзантема.
Геморрагическая лихорадка денге является более патогенной эпидемической формой лихорадки денге, вспышки которой произошли в тихоокеанском регионе за последние годы.
Термин «фармацевтически приемлемая соль» используется по всему тексту описания изобретения для описания формы соли одного или нескольких составов (и в исключительно предпочтительных примерах в соответствии с настоящим изобретением - фосфатные соли), которые предназначены для повышения растворимости соединения в соляном растворе для парентерального приема или в желудочном соке желудочно-кишечного тракта пациента с целью содействия растворению и бионакоплению соединений. Фармацевтически приемлемые соли включают соли, полученные из фармацевтически приемлемых неорганических или органических оснований и кислот. Приемлемые соли включают соли, полученные из таких щелочных металлов, как калий и натрий, таких земельно-щелочных металлов как кальций, магний и соли аммония, наряду с другими многочисленными кислотами, хорошо известными в фармацевтической области. Соли натрия и калия являются исключительно предпочтительными в качестве нейтрализующих солей карбоновых кислот и свободных кислых фосфатов, содержащих составы в соответствии с настоящим изобретением. Термин «соль» означает любую соль, совместимую с использованием соединений в соответствии с настоящим изобретением. В том случае, если соединение используется в фармацевтических показаниях, включая лечение неоплазий, в том числе рака, термин «соль» означает фармацевтически приемлемую соль совместимую с использованием соединений в качестве фармацевтических средств.
Термин «фармацевтически приемлемое производное» используется по всему тексту описания изобретения для описания любой фармацевтически приемлемой формы пролекарства (например, сложного эфир или простого эфира или другой группы пролекарств), которая при введении пациенту прямо или косвенно обеспечивает получение настоящего соединения или активного метаболита настоящего соединения.
Термин «алкил» в рамках своего контекста обозначает С1-С20, предпочтительно С1-С10линейный, с разветвленной цепью или циклический полностью насыщенный углеводородный радикал. Термин «простой эфир» означает эфирную группу С1-С20, образованную из кислорода и алкильной группы в положении на сахарной части соединения в соответствии с настоящим изобретением, либо, в альтернативном случае, также может содержать по меньшей мере одну кислородную группу в алкильной цепи.
Термин «ацил» используется по всему тексту описания изобретения для описания группы в положении 5' нуклеозидного аналога (т.е. в положении свободного гидроксила в синтоне сахара), содержащего С1-С20линейную, разветвленную или циклически алкильную цепь. Ацильная группа в положении 5' в сочетании с 5'-гидроксильной группой образует сложный эфир, который после введения может быть расщеплен с образованием свободной нуклеозидной формы в соответствии с настоящим изобретением. Ацильные группы в соответствии с настоящим изобретением представлены структурой
О
II шсгде В4 обозначает С1-С20линейную, разветвленную или циклическую алкильную группу, алкиксиалкил, арилоксиалкил, например феноксиметил, арил, алкокси и т. д. Предпочтительными ацильными группами являются группы, в которых Я4 является С1-С10алкильной группой. Ацильные группы, в соответствии с настоящим изобретением, также включают, например, ацильные группы, полученные из бензойной кислоты и родственных кислот, 3-хлорбензойную кислоту, янтарную, каприновую и капроновую, лауриновую, миристиновую, пальмитиновую, стеариновую и олеиновую группы, наряду с многочисленными другими, включая мезилатные группы. Специалисты в данной области смогут определить, что ацильные группы, которые используются в настоящем изобретении, можно применять либо для синтеза целевых фармацевтических соединений, либо в качестве форм пролекарственных форм нуклеозидов в соответствии с настоящим изобретением.
Термин «эфир фосфорной кислоты», или «фосфодиэфир», используется по всему тексту описания изобретения для описания монофосфатных групп в положении 5' диоксанильной части или синтона са
- 8 012844 хара, которые диестерифицируют таким образом, чтобы фосфатная группа стала нейтральной, т.е. имела нейтральный заряд. Эфиры фосфорной кислоты, используемые в настоящем изобретении, включают эфиры, представленные структурами нуклеозид
О
II . р-си<5
I ОВ5 или нуклеозид
О
II
- Р-О-1С
I
Ν-ΟΗ-&7
I
О=С-СЖ где В5, Кб и В выбирают из С1-С20линейной, разветвленной или циклической алкильной группы, алкоксиалкила, арилоксиалкила, например феноксиметила, арила и алкокси наряду с другими, а В7 обозначает С1-С20линейную, разветвленную или циклическую алкильную или ацильную группу, алкоксиалкил, арилоксиалкил, например феноксиметил, арил и алкокси наряду с другими. Предпочтительными эфирами монофосфорной кислоты для использования в пролекарственных формах в соответствии с настоящим изобретением являются эфиры, в которых В5 является С1-С20линейной или с разветвленной цепью алкильной группой, более предпочтительно, С1-Сзалкильной группой.
Термин «защитная группа» или «блокирующая группа» означает в данном контексте химическую группу или часть, используемую для предотвращения реакции в данной схеме реакции активной части, например аминовой, гидроксильной или меркаптогруппы, и которая легко удаляется при мягких условиях, которые не оказывают нежелательного неблагоприятного воздействия на молекулу или соединение, к которой присоединена защитная группа. В настоящем изобретении многочисленные защитные группы могут использоваться для получения соединений в соответствии с настоящим изобретением, причем предпочтительные группы включают бензоатную группу для защиты или блокировки первичной или вторичной гидроксильной группы и силильных групп (в частности, третичную бутидиметилсилильную группу, третичную бутилдифинилсилильную группу или триметилсилильную группу или родственную силильную защитную группу) для блокировки первичных (или вторичных) гидроксильных групп. Специалисты в данной области техники определят различные защитные группы, которые могут быть использованы в контексте при получении соединений и промежуточных соединений в соответствии с настоящим изобретением.
Термин «ингибирующая эффективная концентрация» или «ингибирующее эффективное количество» используется по всему тексту описания изобретения для описания концентраций и количеств соединений в соответствии с настоящим изобретением, которые существенно или значительно тормозят рост или репликацию (размножение) восприимчивых вирусов, в частности, включающих наряду с другими вирусы 1 и 2 иммунодефицита человека (ВИЧ-1 и ВИЧ-2), вирусы 1 и 2 Т-клеточного лейкоза человека (НТЬУ-1 и НТЬУ-2), респираторный синтициальный вирус (В8У), вирус папилломы человека (ИРУ), аденовирус, вирус гепатита В (НВ¥), вирус гепатита С (НСУ), вирус Эпштейна-Барра (ЕВУ), вирус ветряной оспы-опоясывающего герпеса (νζν), цитомегаловирус (СМУ), вирусы 1 и 2 простого герпеса (Н8У-1 и Н8У-2), вирус герпеса человека 8 (ННУ-8, также известного как вирус, сопутствующий саркоме Капоши) и флавивирусы, включающие вирус желтой лихорадки, вирус лихорадки денге, вирусы японского энцефалита и вирусы лихорадки Западного Нила.
Термин «профилактическое эффективное количество» используется по всему тексту описания изобретения для описания концентраций и количеств соединений в соответствии с настоящим изобретением, являющихся профилактически эффективными в предотвращении, снижении вероятности инфекции или замедления наступления инфекций у пациентов, вызванных наряду с другими вирусами 1 и 2 иммунодефицита человека (ВИЧ-1 и ВИЧ-2), вирусами 1 и 2 Т-клеточного лейкоза человека (НТЬУ-1 и НТЬУ-2), респираторным синтициальным вирусом (В8У), вирусом папилломы человека (НРУ), аденовирусом, вирусом гепатита В (НВУ), вирусом гепатита С (НСУ), вирусом Эпштейна-Барра (ЕВУ), вирусом ветряной оспы-опоясывающего герпеса ^Ζ^, цитомегаловирусом (СМУ), вирусами 1 и 2 простого герпеса (Н8У-1 и Н8У-2), вирусом 8 герпеса человека (ННУ-8, также известного как вирус, сопутствующий саркоме Капоши) и флавивирусами, включающими вирус желтой лихорадки, вирус лихорадки денге, вирусы японского энцефалита и вирусы лихорадки Западного Нила.
Соединения в соответствии с настоящим изобретением могут использоваться в фармацевтических составах, обладающих биологической/фармакологической активностью для лечения, например, вирусных инфекций, а также ряда иных заболеваниях и/или болезненных состояний, которые могут быть побочно вызваны вирусной инфекцией, в частности, СПИДом. Указанные составы включают эффективное
- 9 012844 количество одного или нескольких соединений, описание которых приведено выше в настоящем патенте, произвольно в сочетании с фармацевтически приемлемой добавкой, носителем или инертным наполнителем.
Составы в соответствии с настоящим изобретением могут изготавливаться обычным способом с использованием одного или нескольких фармацевтически приемлемых носителей. Фармацевтически приемлемые носители, которые могут быть использованы в указанных фармацевтических составах, включают иониты, оксид алюминия, стеарат алюминия, лецитин, сывороточные белки, такие как сывороточный альбумин человека, буферные вещества, такие как фосфаты, глицин, сорбиновая кислота, сорбат калия, смеси частичного глицерида насыщенных растительных жирных кислот, воды, соли или электролитов, таких как сульфат проламина, фосфороводород динатрия, фосфороводород калия, хлорид натрия, соли цинка, коллоидальный диоксид кремния, трисиликат магния, поливинилпирролидол, вещества на основе целлюлозы, полиэтиленовый спирт, карбоксиметил целлюлоза натрия, полиакрилаты, воски, полиэтилен - полиоксипропилен - блок-сополимеры, полиэтиленгликоль и ланолин, но не ограничиваются ими.
Составы в соответствии с настоящим изобретением можно вводить орально, парентерально, путем ингаляционных спреев, локально, ректально, назально, буккально, вагинально или с помощью имплантированной емкости. Термин «парентеральный» в соответствии со значением, используемым в настоящем описании, включает подкожные, внутривенные, внутримышечные, внутрисуставные, внутрисиновиальные, внутристернальные, внутритекальные, внутригепатические, внутрилезиональные и внутрикраниальные способы инъекции или инфузии. Предпочтительно составы принимаются орально и внутриперетониально или внутривенно.
Стерильные инъекционные формы составов в соответствии с настоящим изобретением могут быть водными или маслянистыми суспензиями. Эти суспензии могут быть изготовлены в соответствии со способами, известными в данной области техники, с применением приемлемых диспергирующих или смачивающих веществ и суспендирующих агентов. Стерильные инъекционные препараты могут также быть стерильным инъекционным раствором или суспензией в нетоксичном парентерально приемлемым разбавителем или растворителем, например, раствором в 1,3-бутанэдиоле. Среди приемлемых разбавителей и растворителей может быть использована вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные жидкие жиры обычно используются в качестве растворителя или суспендирующей среды. Для этой цели может быть использован любой мягкий жидкий жир, включая синтетические моно или диглицериды. Жирные кислоты, такие как олеиновая кислота и ее глицеридные производные являются приемлемыми для подготовки инъекционных препаратов, также как и природные фармацевтически приемлемые масла, такие как оливковое масло или касторовое масло, в частности их полиоксиэтилированные варианты. Растворы или суспензии этих масел могут также содержать длинноцепной спиртовый разбавитель или диспергатор, например РН. Не1у или аналогичный спирт.
Фармацевтические составы в соответствии с настоящим изобретением можно вводить орально в любой орально приемлемой дозированной форме, включая капсулы, таблетки, водные суспензии или растворы, но не ограничиваясь ими. В случае таблеток для орального приема широко используемые носители включают лактозу или кукурузный крахмал. Обычно также добавляются смазывающие вещества, например стеарат магния. Для орального приема в виде капсул эффективные разбавители включают лактозу и высушенный кукурузный крахмал. При оральном приеме в виде водных суспензий активные ингредиенты смешиваются с эмульгаторами и суспендирующими агентами. При необходимости также могут быть добавлены определенные подсластители, ароматизаторы или красители.
Кроме того, фармацевтические составы в соответствии с настоящим изобретением можно вводить в форме свеч для ректального приема. Эти свечи могут быть изготовлены путем смешивания реагента с приемлемым нераздражающим наполнителем, затвердевающим при комнатной температуре, но превращающийся в жидкость при ректальной температуре и, таким образом, расплавляются в прямой кишке для высвобождения лекарственного препарата. Такие материалы включают какао-масло, пчелиный воск и полиэтиленгликоли.
Фармацевтические составы по настоящему изобретению можно также вводить местно, в частности, если объект лечения включает зоны или органы, доступные для местного применения, включая заболевания глаз, кожи или нижнего пищеварительного тракта. Приемлемые составы для местного применения можно легко приготовить для каждой из этих зон или органов.
Местное применение для нижней части пищеварительного тракта может быть осуществлено в виде ректальных свечей (см. выше) или в виде приемлемой клизмы. Также могут быть использованы местно наносимые трансдермальные пластыри.
Для местного применения фармацевтические составы могут быть изготовлены в виде приемлемой мази, содержащей активный компонент, суспендированный или растворенный в одном или нескольких носителях. Носители для местного введения соединений в соответствии с настоящим изобретением включают минеральное масло, жидкий вазелин, медицинский вазелин, пропиленгликоль, полиоксиэтилен, полиоксипропиленовое соединение, эмульгирующий воск и вода, но не ограничены ими. В альтернативном случае фармацевтические составы могут быть изготовлены в виде приемлемого бальзама или
- 10 012844 крема, содержащего активные компоненты, суспендированные или растворенные в одном или нескольких фармацевтически приемлемых носителях. Приемлемые носители включают минеральное масло, сорбитанмоностеарат, полисорбат 60, воск цетилового эфира, цетеариловый спирт, 2-октилдодеканол, бензиловый спирт и воду, но не ограничиваются ими.
Для офтальмического применения фармацевтические составы могут быть изготовлены в виде тонкоизмельченных суспензий в изотоническом, рН отрегулированном стерильном соляном растворе или предпочтительно в виде растворов в изотоническом, рН отрегулированном стерильном соляном растворе, либо с консервантом, таким как, например, хлорид бензилалкония. Кроме того, для офтальмического применения могут быть изготовлены фармацевтические составы на основе мази, например вазелина.
Фармацевтические составы в соответствии с настоящим изобретением также могут вводиться в виде назальной аэрозоли или путем ингаляции. Такие составы изготавливаются в соответствии со способами, хорошо известными в области изготовления фармацевтических составов и могут быть изготовлены в виде растворов в соляном растворе с использованием бензилового спирта или иных приемлемых консервантов, активаторов всасывания с целью повышения бионакопления, фтороуглеродов и/или иных обычных растворителей и диспергаторов.
Количество нового нуклеозида в соответствии с настоящим изобретением, которое может сочетаться с материалами носителя для получения единичной дозовой формы, изменяется в зависимости от организма-хозяина, проходящего лечения, и конкретного режима приема. Предпочтительно составы должны изготавливаться таким образом, чтобы доза в диапазоне примерно 0,01-150, предпочтительно примерно 0,5-25 мг/кг веса пациента в день нового нуклеозида была введена пациенту, получающему эти составы.
Специалистам в данной области также должно быть понятно, что конкретная доза и режим лечения, назначенные любому конкретному пациенту, зависят от множества факторов, включая активность конкретного примененного соединения, возраст, вес, общее состояние здоровья, пол, питание, время приема, скорость выделения, сочетание лекарств, заключение лечащего врача и тяжесть конкретного заболевания или состояния, в отношении которого применяется лечение.
Введение активного соединения может включать как непрерывный прием (внутривенное капельное введение), так и несколько оральных приемов в день (например, четыре раза в день) и могут включать оральные, местные, парентеральные, внутримышечные, внутривенные, подкожные, трансдермальные (которые могут включать промотор всасывания), буккальные, суппозитарные и иные способы введения. Таблетки с энтеросолюбильным покрытием для орального применения также могут использоваться для повышения бионакопления соединений при оральном способе приема. Наиболее эффективная форма дозировки зависит от фармакокинетики конкретного выбранного реагента, а также от тяжести заболевания пациента. Оральная форма дозировки является исключительно предпочтительной ввиду легкости введения и перспективного благоприятного соблюдения больным режима и схемы лечения.
Для подготовки фармацевтических составов в соответствии с настоящим изобретением терапевтически эффективное количество одного или нескольких соединений в соответствии с настоящим изобретением предпочтительно однородно примешивается к фармацевтически приемлемому носителю в соответствии с известными способами фармацевтического приготовления лекарственного средства для получения дозы. Носитель может иметь большое разнообразие форм в зависимости от формы препарата, требуемого для введения, например, орального или парентерального. При подготовке фармацевтических составов в форме оральной дозы может быть использована любая из обычных фармацевтических сред. Таким образом, для жидких оральных препаратов, таких как суспензии, эликсиры и растворы, могут быть использованы приемлемые носители и добавки, включающие воду, гликоли, масла, спирты, ароматизаторы, консерванты, красители и т.п. Для твердых оральных препаратов, таких как порошки, таблетки, капсулы и для твердых препаратов, таких как свечи, могут быть использованы приемлемые носители и добавки, включающие крахмалы, сахарные носители, такие как декстроза, маннитол, лактоза и родственные носители, разбавители, грануляторы, смазочные вещества, связывающие вещества, дезинтеграторы и т.п. При необходимости таблетки или капсулы могут иметь энтеросолюбильное покрытие для постоянного выделения лекарственных препаратов с использованием стандартных способов. Использование указанных форм дозировки может существенно повысить бионакопление соединений в организме пациента.
Для парентеральных составов носитель обычно включает стерильную воду или водный раствор хлорида натрия, хотя также могут быть включены другие ингредиенты, способствующие дисперсии. Без сомнения, в тех случаях, когда предусматривается использование стерильной воды и сохранение ее стерильности, составы и носители также должны подвергнуться стерилизации. Также могут быть изготовлены инъекционные суспензии, и в этом случае могут быть использованы соответствующие жидкие носители, суспендирующие агенты и т. п.
Липосомные суспензии (включая липосомы, нацеленные на вирусные антигены) также могут быть изготовлены с использованием известных способов с целью получения фармацевтически приемлемых носителей. Это может быть приемлемым для доставки свободных нуклеозидов, ацил/алкилнуклеозидов или пролекарственных форм эфира фосфорной кислоты нуклеозидных соединений в соответствии с настоящим изобретением.
- 11 012844
В исключительно предпочтительных примерах осуществления в соответствии с настоящим изобретением соединения и составы используются для лечения вирусных инфекций млекопитающих, в частности ВИЧ-инфекции, инфекции вируса гепатита В, инфекции вируса 1 и/или 2 простого герпеса, инфекции вируса Эпштейна-Барра, инфекции вируса 8 герпеса человека и флавивирусные инфекции. В предпочтительных примерах осуществления соединения используются для лечения ВИЧ-инфекций, инфекций вируса 1 и/или 12 простого герпеса, инфекций вируса гепатита В, инфекций вируса Эпштейна-Барра или инфекций вируса 8 гепатита человека, в частности ВИЧ-инфекций у людей. Предпочтительно для лечения, профилактики или замедления наступления вирусной инфекции предусматривается введение составов в форме оральной дозы в количествах от приблизительно 250 мкг до приблизительно 500 мг или более, как минимум один раз в день, предпочтительно до 4 раз в день в пределах дозировок, используемых для терапевтического лечения. Указанные соединения предпочтительно вводятся орально, но могут быть введены парентерально, местно, в виде свечей или иной форме.
Соединения в соответствии с настоящим изобретением ввиду их низкой токсичности для клетокхозяина могут быть с успехом профилактически применены для предотвращения вирусной инфекции или предотвращения возникновения клинических симптомов, связанных с вирусной инфекцией, например, СПИДа, являющийся вторичным от ВИЧ. Таким образом, настоящее изобретение охватывает способы профилактического лечения (предотвращения, снижения вероятности или замедления наступления) вирусных инфекций и, в частности, ВИЧ и, в частности, состояний, возникающих вторично от указанного вируса. В этой особенности в соответствии с настоящим изобретением указанные составы используются для предотвращения, снижения вероятности или замедления наступления вирусной инфекции, в частности ВИЧ, или связанной с таким состоянием, как СПИД. Этот профилактический метод включает введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, или пациенту, находящемуся под угрозой приобретения ВИЧ, количества соединения в соответствии с настоящим изобретением, являющегося эффективным для устранения, предотвращения или замедления наступления вирусной инфекции. При профилактическом лечении в соответствии с настоящим изобретением предпочтительно, чтобы используемое противовирусное соединение обладало максимально низкой токсичностью и, предпочтительно, являлось нетоксичным для пациента. Исключительно предпочтительным в данной особенности настоящего изобретения является то, что используемое соединение должно быть максимально эффективным против вируса и должно характеризоваться минимальной токсичностью для пациента. Соединения в соответствии с настоящим изобретением для профилактического лечения вирусных инфекций могут вводиться в одном и том же диапазоне доз для терапевтического лечения (как описывалось выше) в качестве профилактического агента для предотвращения распространения вирусной инфекции или, в альтернативном случае, для замедления наступления вирусной инфекции или снижения вероятности заражения вирусной инфекцией, проявляющейся в клинических симптомах.
Кроме того, соединения в соответствии с настоящим изобретением можно вводить отдельно или в сочетании с другими средствами, включая другие соединения в соответствии с настоящим изобретением. Определенные соединения в соответствии с настоящим изобретением могут являться эффективными для повышения биологической активности некоторых средств в соответствии с настоящим изобретением путем снижения метаболизма, катаболизма или инактивирования других соединений и, как таковые, вводятся совместно для достижения этого планируемого эффекта.
Как указывалось, соединения в соответствии с настоящим изобретением можно вводить по отдельности или в сочетании с другими противовирусными реагентами для лечения вирусных инфекций, как описывается в настоящем изобретении, в частности, включающими другие соединения в соответствии с настоящим изобретением или соединения, которые применяют для лечения ВИЧ или флавивирусных инфекций, включая соединения, используемые в настоящее время для лечения ВИЧ, такие как ингибиторы нуклеозидной обратной транскриптазы (ΝΚΤΊ), ингибиторы ненуклеозидной обратной транскриптазы, ингибиторы протеазы, ингибиторы синтеза и т.д., характерные соединения которых могут, например, включать 3ТС (Ламивудин), ΑΖΤ (Зидовудин), (-)-РТС, άάΐ (Диданозин), ббС (зальцитабин), абакавир (АВС), тенофовир (РМРА), О-Э4БС (Реверсет), Ό4Τ (Ставудин), Рацивир, Ь-РббС, Ь-Э4РС, ΝνΡ (Невирапин), ОЬУ (Делавирдин), ΕΡν (Ефаверенц), δφΥΜ (Сахинавир мезилат), РТУ (Ритонавир), ΙΌν (Индинавир), §0ν (Сахинавир), ΝΡν (Нельфинавир), ΑΡν (Ампренавир), ΕΡν (Лопинавир), такие ингибиторы синтеза, как Т20, наряду с фузеоном и его смесями, включая соединения против ВИЧ, проходящие в настоящее время клинические испытания или находящиеся на стадии разработки, а также соединения, описанные ίηΐβτ аИа в патентах США 6240690; 6316505; 6316492; 6232120; 6180604; 6114327; 5891874; 5821242; 5532215; 5491135; 5179084 и 4880784, соответствующие части которых включены в данный патент со ссылкой на них.
Настоящее изобретение далее описывается в целях иллюстрации на следующих примерах. Специалистам в данной области техники понятно, что указанные примеры ни в коей мере не являются ограничивающими и что могут быть внесены различные изменения, не выходящие за пределы существа и объема настоящего изобретения.
Химия.
Новые соединения в соответствии с настоящим изобретением в основном получены в соответствии
- 12 012844 с общим описанием синтеза, приведенном на фиг. 4-7С. Остальные соединения могут быть легко синтезированы по аналогии. Как правило, первоначально получают аналог нуклеозида (т.е. соединение, содержащее основание и синтон сахара), а далее вводится соответствующая 4'-группа в соответствии с общим описанием по схемам А и В и с описанием экспериментов. Специалисты в данной области техники смогут легко синтезировать соединения в соответствии с настоящим изобретением по аналогии, исходя из синтеза, описанного в экспериментах, не занимаясь чрезмерным экспериментированием.
Как указано на фиг. 4, 5'-йодо, З'-О-блокированный 2'-дезоксинуклеозид преобразуется в 4',5'-винил блокированный нуклеозид 2, который далее преобразуется, проходя серию этапов, через 4',5'-оксиран блокированный нуклеозид 4 в 4'-винил соединение ΤΏΚ-4-152. Как показано на фиг. 5, ΤΚΌ-4-114 синтезируется из 5'-йодо-З'-О-блокированного нуклеозидного соединения 7 путем формирования 4',5'-винил соединения 8, введения этинильной группы в положение 4'-блокированного нуклеозида для получения нуклеозида 10а и далее, в конечном счете, путем формирования 2',3'-ненасыщенной двойной связи за счет ликвидации мезилированной гидроксильной группы в положении 3' соединения 13. Другие соединения в соответствии с настоящим изобретением синтезируют по аналогии с использованием вышеописанных химических схем.
На фиг. 5А приведен альтернативны синтез ΤΌΚ-4-114 из промежуточного химического соединения 9 на фиг. 5. В этом примере изобретения промежуточное химическое соединение 9 вступает в реакцию с бензоатом свинца РЬ(ОСОРй)4 или тетраацетатом свинца РЬ(ОАс)4 в основании для удаления примесей, таком как триетиламин, диизопропилэтиламин или пиридин в соответствующем растворителе для получения 4',5'-диацил (бензоил или ацетил) блокированного нуклеозида 2 (фиг. 5А), в зависимости от используемого свинцового (РЬ) ацилирующего реагента. Введение 4'-этинил группы происходит через промежуточный блокированный нуклеозид 2 за счет действия реагента ацетилена алюминия Е1А1(С1)С^81Ме3 (см. фиг. 5А) в растворителе для получения 4'-ацетиленнуклеозидного соединения 3 (фиг. 5А). Синтез ΤΚΌ-4-114 протекает непосредственно путем удаления мезилированной гидроксильной группы для образования 4'-этинил-2',3' ненасыщенного нуклеозидного соединения 7. Следует отметить, что промежуточное химическое соединение 3 на фиг. 5А (и 5В) может в альтернативном случае быть синтезировано из 4',5'-винил блокированного нуклеозидного соединения 1 на фиг. 5А и 5В (идентичного соединению 9 на фиг. 5) в двухэтапной реакции, в результате которой получают ди-О-бензоил соединение 3 (или ди-О-ацетил) на фиг. 5В с использованием первого этапа йода и бензоата серебра (ацетат серебра) в растворителе для получения промежуточного химического соединения 2 (фиг. 5В), которое далее может вступить в реакцию с бензоатом серебра (ацетатом серебра) в растворителе при повышенной температуре для получения промежуточного химического соединения 3 (или ди-О-ацетил соединения по аналогии).
Схема химического синтеза на фиг. 6 является примером синтеза ненасыщенного углеродноциклического аналога КМА-23-153 (фиг. 6) из сложного эфира циклопентанона 1 (фиг. 6), который проходит через ряд промежуточных химических соединений и образует промежуточное химическое соединение 8 (фиг. 6), которое может быть концентрировано нуклеозидным основанием для получения промежуточного химического соединения 9, в котором 4'-сложный эфир может быть преобразован в 4'этинил соединение 10 с последующим удалением 5'-блокирующей группы для получения КМА-23-153.
На фиг. 7А приведен химический синтез 4'-этинил-2'-дезоксинуклеозидных соединений, исходя из общего способа Νοιηιιπι. е1 а1., 1. Меб. Сйет., 42,2901-2908 (1999) путем введения галогенированной виниловой группы в положении 4' нуклеозида, который подвергается дегидрогалогенированию и образует 4'-этинилнуклеозидного соединение 8 (фиг. 7А). На фиг. 7В приведен синтез 4'-этинил-2'дезоксинуклеозида из доступного предшественника сахара 9 (фиг. 7В), который протекает путем введения 4'-галогенированной виниловой группы в 4'-формиловую группу синтона сахара 10 для получения 11 (фиг. 7В) с последующим дегидрогалогенированием, введением нуклеозидного основания и, в конечном счете, преобразованием 2'-гидроксильной группы через ряд этапов и получением соединения 18. На схеме 3 на фиг. 7С показано введение 2',3'-двойной связи в аналог 4'-этинила путем мезилирования 3'ОН группы с последующей реакцией мезилированного промежуточного химического соединения с сильным основанием для получения двойной связи в положении 2', 3' сахара.
Специалисты в данной области техники могут легко получить соединения в соответствии с настоящим изобретением, следуя одному или нескольким из вышеописанных способов синтеза и используя установившиеся в данной области техники способы синтеза.
Конкретные примеры
Химический синтез в соответствии со схемами А и В на фиг. 5 и 6.
Синтез ΤΚΌ-4-152 (фиг. 4).
ΤΚΌ-4-152 (4'-аллилтимидин) был синтезирован путем проведения серии реакций, приведенных на фиг. 5, схема А, начиная от соединения 1, которое было изготовлено в соответствии с опубликованной процедурой: 1.Р.Н. Уетйеубеп и 1.О. Мойай, 1. Отд. Сйет., 39, 3573-3579 (1974).
1-[3-О-(1-Бутилдиметилсилил)-2,5-дидезокси-в-О-глицеро-реп1-4-энофуранозил]тимин (3).
К раствору соединения 1 (11,9 г, 30,19 ммоль) в ΘΗ^Ν (150 мл) добавляли ДБН (ди^-бутил
- 13 012844 нитрозамин (ДБН) (11,2 мл, 90,57 ммоль) при температуре 0°С в атмосфере аргона и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После нейтрализации путем добавления АсОН реакционную смесь выпаривали до получения сухого остатка и остаток разделяли между СНС13/насыщенным водным раствором №1НС.'О3, (200 млх2/50 мл). Путем силикагелевой колоночной хроматографии (гексан/АеОЕ1=5/1-1/2) органического слоя получали 2 (6,98 г, 87%) в виде пены. Соединение 2 (6,90 г, 25,92 ммоль) обрабатывали насыщенным ИН3 в МеОН (350 мл) в течение ночи при температуре 0°С. Реакционную смесь выпаривали до получения сухого остатка, который высушивали в течение ночи под вакуумом. К раствору ΌΜΕ (Ν,Ν-диметил-формамид (ДМФ)) (60 мл) остатка добавляли имидазол (5,29 г, 77,75 ммоль) и трет-бутилдиметилсилилхлорид (7,81 г, 51,83 ммоль) при 0°С в атмосфере аргона и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разделяли между АсОЕ1/Н2О (300 мл/100 млх5). После силикагелевой колончатой хроматографии (гексан/АеОЕ1=10/1-3/1) органического слоя получали соединение 3 (7,87 г, 90%) в виде пены:
υν (МеОН) Атах 264 нм (ε11100), Атт 234 нм (ε 4900);
'Н ЯМР (СРС13) δ 0,13 (6Н, 8, 81Ме), 0,91 (9Н, 8, 81Ви-1), 1,94 (3Н, б, 16Ме=1,2 Нг, Ме), 2,13-2,20 (1Н, т, Н-2'а), 2,40 (1Н, ббб, 18ет=13,6 Нг, 12ь,3=3,4 Нг и 1^=6,2 Н, Н-2'Ь), 4,24 (1Н, б, 16ет=2,0 Н, Н-5'а), 4,54 (1Н, б, 1бет=2,0 Нг, Н-5'Ь), 4,75 (1Н, бб, 12а3=6,0 и 12,Ь,3=3,4 Нг, Н-3'), 6,49 (1Н, 1, 11,2а=%,2Ь=6,2 Нг, Н1'), 6,98 (1Н, б, 16,Ме=1,2 Нг, Н-6), 8,47 (1Н, Ьг, ЫН);
ЕАВ-М8 т/ζ 339 (М++Н).
Аналогично рассчитано для С16Н2&Ы2О481: С, 56,78; Н, 7,74; Ν, 8,28. Обнаружено: С, 57,04; Н, 7,99; Ν, 8,14.
3'-О-(1-Бутилдиметилсилил)тимидин 4',5'-эпоксид (4).
К раствору соединения 3 (20 мг, 0,059 ммоль) в СН2С12 (3 мл) добавляли диметилдиоксиран (0,072 М в ацетоне, 1,2 мл, 0,089 ммоль) при -30°С в атмосфере аргона и перемешивали реакционную смесь в течение 30 мин при -30°С. Выпаривание растворителей позволило получить соединение 4 в виде твердого вещества:
'Н ЯМР (СРС13) δ 0,09, 0,10 (6Н, каждый как 8, 81Ме), 0,90 (9Н, 8, 81Ви-1), 1,95 (3Н, б, 16,Ме=1,3 Нг, Ме), 2,25 (1Н, ббб, 16ет=14,0 Нг, 12а,3'=4,9 Нг и 11,2а=7,1 Нг, Н-2'а), 2,52 (1Н, ббб, 16ет=14,0 Нг, 12ь,3=1,6 Нг и %2Ь=6,2 Нг, Н-2'Ь), 3,07 (1Н, б, б8ет=3,3 Нг, Н-5'а), 3,36 (1Н, б, б8ет=3,3 Нг, Н-5'Ь), 4,26 (1Н, бб, 12а,3=4,9 и 12,Ь,3=1,6 Нг), 6,12 (1Н, бб, %,2а=7,1 Нг и %2Ь=6,2 Нг, Н-1'), 7,27 (1Н, б, 16,Ме=1,3 Нг, Н-6), 9,06 (1Н, Ьг, Ν^ί; ’
ЕАВ-М8 т/г 355 (М++Н).
3'-О-(1-Бутилдиметилсилил)-4'-а-аплилтимидин (5).
К раствору соединения 3 (80 мг, 0,24 ммоль) в СН2С12 (5 мл) добавляли диметилдиоксиран (0,098 М в ацетоне, 3,6 мл, 0,36 ммоль) при -30°С в атмосфере аргона и смесь перемешивали в течение 30 мин при -30°С. Растворители выпаривали, а остаток высушивали вакуумированием в течение 1 ч с получением соединения 4. К раствору соединения 4 в СН2С12 (5 мл) добавляли аллилтриметилсилан (0,11 мл, 0,71 ммоль) и 8пС14 (1М в СН2С12, 0,71 мл, 0,71 ммоль) при -30°С в атмосфере аргона, и смесь перемешивалась в течение 4 ч при -30°С. После гашения насыщенным водным раствором NаΗСО3 реакционную смесь фильтровали через селитный наполнитель. Фильтрат разделяли между СНС13/насыщенным водным раствором NаΗСО3 (60 млх3/20 мл). Органический слой выпаривали до сухого остатка, а остаток обрабатывали насыщенной НН3 в МеОН (30 мл) при комнатной температуре в течение 12 ч. После выпаривания проводили препаративную очистку тонкослойной хроматографией (гексан/Е1ОАе=2/3) органического слоя и получали соединение 5 (75 мг, 80%) в виде пены:
υν (МеОН) Хтах 267 нм (ε 12700), Хтт 235 нм (ε 5900);
'Н ЯМР (СРС13) δ 0,08, 0,08 (6Н, каждый как 8, 81Ме), 0,89 (9Н, 8, 81Ви-1), 1,87 (3Н, б, 16,Ме=1,1 Нг, Ме), 2,16 (1Н, бб, б8ет=14,5 Нг и 1ва,7=8,1 Нг, СН2СН=СН2), 2,27-2,39 (2Н, т, Н-2'), 2,44 (1Н, бб, б8ет=14,5 Нг и 1еЪ,7=6,3 Нг, СН2СН=СН2), 2,94 (1Н, Ьг, ОН), 3,52 (1Н, бб, 1дет=11,8 Нг и 15',ОН=6,1 Нг, Н-5'а), 3,73 (1Н, бб, 1бет=11,8 Нг и 15',ОН=2,7 Нг, Н-5'Ь), 4,62 (1Н, бб, 12а,3=5,8 Нг и 12,Ь,3=7,0 Нг, Н-3'), 5,07-5,13 (2Н, т, СН2СН=СН2), 5,83-5,93 (1Н, т, СН2СН=СН2), 6,11 (1Н, бб, %,2а=5,8 Нг и %,2Ь=6,9 Нг, Н-1'), 7,45 (1Н, б, 16,Ме=1,1 Нг, Н-6), 9,40 (1Н, Ьг, ЫН);
пОе эксперимент, Н-1'/СН2СН=СН2 (0,8%), СН2-5'/Н-3' (5,3%), СН2-5'/Н-6 (0,6%), НО-5'/Н-3' (0,7%) и НО-5'/Н-6 (1,2%);
ЕАВ-М8 т/г 397 (М++Н).
Аналогично рассчитано для С19Н32М2О581-1/3Н2О: С, 56,69; Н, 8,18; Ν, 6,96. Обнаружено: С, 56,46; Н, 8,18; Ν, 6,87.
ΤΚΌ-4-152 (4'-аллилтимидин) на фиг. 4.
Смесь из соединения 5 (59 мг, 0,149 ммоль) и фторид тетрабутиламмония (58 мг, 0,223 ммоль) в ТГФ (тетрагидрофуран (ТГФ) (3 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. После силикагелевой колончатой хроматографии (СНС1/МеОН=20/1) выпаренной реакционной смеси получали ΤΚΌ-4-152 (37,7 мг, 90%) в виде пены:
- 14 012844 иУ (МеОН) Хтах 267 нм (ε 9300), Хтт 235 нм (ε 2000);
1Н ЯМР δ 1,86 (3Н, б, 16,Ме=1,2 Нд Ме), 2,27-2,35 (3Н, т, Н-2' и СН2СН=СН2), 2,42-2,48 (1Н, т, СН2СН=СН2), 3,56 (1Н, б, 1бет=11,8 Нд Н-5'а), 3,64 (1Н, б, 1дет=11,8 Нг, Н-5Ъ), 4,48 (1Н, 1, 12а,3=Ь, 3'=5,8 Нг, Н-3'), 5,04-5,13 (2Н, т, СН2СН=СН2), 5,88-5,98 (1Н, т, СН2СН=СН2), 6,23 (1Н, 1, 1г2а=1г 2Ь=6,5 Нг, Н1'), 7,89 (1Н, б, 16,Ме=1,2 Нг, Н-6);
ГАВ-М8 т/ζ 283 (М+Н), 321 (М++К).
Аналогично рссчитано для С13Н18Ы2О5-1/2Н2О: С, 54,16; Н, 6,57; Ν, 9,62. Обнаружено: С, 53,87; Н, 6,49; Ν, 9,28.
ТКО-4-114 (2',3'-дидегидро-3'-дезокси-4'-этинилтимидин, 4'-этинил-б4Т) синтезировали путем проведения серии реакций, приведенных на схеме В, начиная с соединения 6, которое было получено в соответствии с опубликованной процедурой: В.У. 1окЫ и С.В. Кееке, Те1гайебгоп Ье11., 32, 2371-2374 (1992).
1-(3-О-ацетил-2,5-дидезокси-5-йодо-в-Э-трео-пентофуранозил)тимин (7).
Смесь из соединения 6 (5,3 г, 15,05 ммоль) и Ас2О (4,3 мл, 45,15 ммоль) в пиридине (30 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 13 ч. Реакционную смесь разделяли между СНС13/насыщенным водным раствором ЫаНСО3 (250 млх3/50 мл). После силикагелевой колончатой хроматографии (гексан/Е1ОАс=1/1-1/2) органического слоя получали соединение 7 (5,53 г, 93%) в виде пены:
Ή ЯМР (СБС13) δ 1,96 (3Н, к, Ме), 2,11 (3Н, к, Ас), 2,11-2,16 (1Н, т, Н-2'а), 2,82 (1Н, ббб, 1дет=15,8 Н, %,2Ь=8,0 Н и 12Ь,3=5,7 Πζ, Н-2'Ь), 3,32-3,39 (2Н, т, Н-5'), 4,28 (1Н, б1, 13,4=3,3 Н и 14,5=7,1 Πζ, Н-4'), 5,48 (1Н, бб, 12Ь,3=5,7 Н и Ь,4=3,3 Н Н-3'), 6,30 (1Н, бб, 1г,2а=2,8 Н и 1Г,2Ь=8,0 Εζ, Н-1'), 7,38 (1Н, б, 16,Ме=0,7 Нг, Н-6), 8,59 (1Н, Ьг, ЫН);
ГАВ-М8 т/ζ 395 (М+Н).
1-(3-О-ацетил-2,5-дидезокси-в-Ь-глицеро-пент-4-энофуранозил)тимин (8).
К раствору соединения 7 (5,5 г, 13,95 ммоль) в СН3СЫ (40 мл) добавляли ДБН (6,9 мл, 55,81 ммоль) при 0°С и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч. После нейтрализации путем добавления АсОН реакционную смесь выпаривали до сухого остатка. Остаток разделяли между СНС13/насыщенным водным раствором ЫаНСО3 (200 млх3/50 мл). После силикагелевой колончатой хроматографии (гексан/Е1ОАс=2/1-1/1) органического слоя получали соединение 8 (3,34 г, 90%) в виде пены:
Ή ЯМР (СПС13) δ 1,96 (3Н, б, 16Ме=1,3 Βζ, Ме), 2,06 (3Н, к, Ас), 2,21 (1Н, б1, ^=15,2¾ 1г,2а=12а,з=2, 7Κζ, Н-2'а), 2,83 (1Н, б1, 1дет=15, 2 Нд 11^=1^=7,1¾ Н-2'Ь), 4,51 (1Н, бб, 1дет=2,4 13,5'а=0,8 Н-5'а), 4,73 (1Н, бб, 1дет=2,4 Н и Ь,5ъ=0,7 Н, Н-5'Ь), 5,70-5,73 (1Н, т, Н-3'), 6,44 (1Н, бб,
1г,2а=2,7 Н и 1г,2Ь=7,1 Н, Н-1), 7,25 (1Н, б, 16,Ме=1,3 Н, Н-6), 8,54 (1Н, Ьг, ЫН);
ГАВ-М8 т/ζ 267 (М+Н).
1-[3-О-(1-Бутилдиметилсилил)-2,5-дидезокси-в-Ь-глицеро-пент-4-энофуранозил]тимин (9).
Соединение 8 (5,2г, 19,53 ммоль) в насыщенном ЫН3 в растворе МеОН (150 мл) выдерживали при комнатной температуре в течение 9 ч. После выпаривания остаток растворяли в ДМФ (60 мл). К этому раствору добавляли имидазол (5,32 г, 78,12 ммоль) и хлорид трет-бутилдиметилсилила (8,83 г, 58,59 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 11 ч и затем разделяли между Е1ОАс/Н2О (250 мл/50 млх4). После силикагелевой колончатой хроматографии (гексан/Е1ОАс=10/1) органического слоя получали соединение 9 (6,43 г, 97%) в виде пены:
ИУ (МеОН) Хтах 266 нм (ε 11600), Хтт 236 нм (ε 5700);
Ή ЯМР (СВС13) δ 0,11 и 0,14 (6Н, каждая как к, 81Ме), 0,88 (9Н, к, 81Ви-1), 1,92 (3Н, б, 16, ^=1,2¾ Ме), 2,03 (1Н, б1, 1дет=10,8 Ш, ^=3,2¾ и ^=3,2¾ Н-2'а), 2,61-2,68 (1Н, т, Н-2'Ь), 4,25 (1Н, б, 1^=2,2^, Н-5'а), 4,57 (1Н, б, ^=2,2¾ Н-5'Ь), 4,68 (1Н, бб, 12а,3=3,2 Ш, 12Ь,3=6,8 Н Н-3'), 6,46 (1Н, бб, 1г,2а=3,2 Κζ и 1г,2Ь=7,2 Ш, Н-1'), 7,44 (1Н, б, 16,СН3=1,2 Ш, Н-6), 9,12 (1Н, Ьг, ЫН);
ГАВ-М8 т/ζ 339 (М+Н).
Аналогично рассчитано для С16Н26Ы2О481: С, 56,78; Н, 7,74; Ν, 8,28. Обнаружено: С, 56,61; Н, 7,87; Ν, 8,17.
1-[2-Дезокси-3-О-(1-бутилдиметилсилил)-4-этинил-в-О-трео-пенто-фуранозил]тимин (10а) и 1-[2дезокси-3-О-(1-бутилдиметилсилил)-4-этинил-а-Ь-эритро-пентофуранозил]тимин (10Ь).
К раствору соединения 9 (60 мг, 0,177 ммоль) в СН2С12 (5 мл) добавляли диметилдиоксиран (0,09 М в ацетоне, 3,0 мл, 0,266 ммоль) при -30°С. После перемешивания в течение 0,5 ч смесь выпаривали и высушивали в вакууме в течение 1 ч. Остаток растворяли в СН2С12 (5 мл). К этому раствору добавляли триэтинилалюминий (0,3 М в СН2С12, 1,8 мл, 0,532 ммоль) при -30°С в атмосфере аргона и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч. После гашения насыщенным водным раствором ЫН4С1 реакционную смесь фильтровали через целитный наполнитель. Фильтрат разделяли между СНС13/насыщенным водным раствором ЫН4С1 (60 млх3/20 мл). Разделением с помощью жидкостной хроматографией высокого разрешения (гексан/Е1ОАс=2/3) органического слоя получали соединение 10а (1К=10,8 мин, 39,3 мг, 58%, пена) и соединение 10Ь (1К=16,2 мин, 18,8 мг, 28%, твердое вещество).
- 15 012844
Физические данные по соединению 10а:
υν (МеОН): Хтах 266 нм (ε 2100), Хтт 235 нм (ε 6000);
1Н ЯМР (СБС13) δ 0,11 и 0,16 (6Н, каждый как 5, 81Ме), 0,90 (9Н, 5, 81Ви-1), 1,91 (3Н, б, 16,Ме=1,3 Ηζ, Ме), 1,91-1,96 (1Η, т, Η-2'а), 2,33 (1Η, Ьг, ОН), 2,62 (1Η, 5, этинил), 2,95 (1Η, ббб, бдет=14,6 Ηζ, 1Г,2Ь=7,9 Ηζ и 12Ь,з=5,5 Ηζ, Η-2'Ь), 3,93 (1Η, б, фет=11,6Ш, Η-5'а), 3,99 (1Η, б, 1дет=11, 6Ηζ, Η-5'Ь), 4,49 (1Η, бб, 12а,з=2, ΟΗζ и 12Ъ,з=5, 5Ηζ, Η-3'), 6, 39 (1Η, бб, 1г,2а=3,7 Ηζ и 1Г,2Ь=7,9 Ηζ, Н-1'), 7,65 (1Η, б, 1,^=1,3 Ηζ, Η-6), 8,72 (1Η, Ьг, ΝΗ);
РАВ-М8 т/ζ 381 (Μ++Η).
Аналогично рассчитано для Γ8Η28Ν2Ο58ί·Η2Ο: С, 54,24; Η, 7,59; Ν, 7,03. Обнаружено: С, 54,46; Н, 7,20; Ν, 6,72.
Физические данные по соединению 10Ь: точка плавления 96-98°С;
υν (МеОН): Хтах 267 нм (ε 9300), Хтт 235 нм (ε 1700).
Ή ЯМР (СОС13) δ 0,08 и 0,13 (6Н, каждый как 5, 81Ме), 0,89 (9Н, 5, 81Ви-е), 1,93 (3Н, б, 1,^=0,9 Ηζ, Ме), 2,12-2,17 (1Η, т, Η-2'а), 2,63 (1Η, Ьг, ΟΗ), 2,71-2,77 (1Η, т, Η-2'Ь), 2,75 (1Η, 5, этинил), 3,67 (1Η, б, 16ет=11,5 Ηζ, Η-5'а), 3,74 (1Η, б, б8ЯП=11,5 Ηζ, Η-5'Ь), 4,47 (1Η, ΐ, 12а,з'=12'Ь,з'=5,3 Ηζ, Η-3'), 6, 30 (1Η, бб, ΙΓ,2α=4,8Ηζ и б 1г,2Ь=6,9 Ηζ, Η-1'), 7,80 (1Η, б, 16,СЩ=0,9 Ηζ, Η-6), 9,00 (1Η, Ьг5, ΝΗ);
РАВ-М8 т/ζ 381 (М+Η).
Аналогично рассчитано для Γ8Η28Ν2Ο58ί: С, 56,82; Η, 7,42; Ν, 7,36. Обнаружено: С, 56,57; Н, 7,58; Ν, 7,19.
1-[5-О-Ацетил-2-дезокси-3-О-(1-бутилдиметилсилил)-4-этинил-в-О-трео-пентофуранозил]тимин (11).
К раствору пиридина (4 мл) 10а (161 мг, 0,423 ммоль) добавляли Ас2О (120 мл, 1,269 ммоль) при 0°С и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 11 ч. Реакционную смесь разделяли между СΗС13/насыщенным водным раствором NаΗСΟ3 (60 млх3/20 мл). После силикагелевой колончатой хроматографии (гексан/ЕЮАс=3/1) органического слоя получали соединение 11 (169,7 мг, 95%) в виде пены:
υν (МеОН): Хтах 266 нм (ε 9200), Хтт 234 нм (ε 2000);
1Н ЯМР (СОС13) δ 0,10 и 0,14 (6Н, каждый как 5, 81Ме), 0,90 (9Н, 5, 81Ви-1), 1,90-1,94 (4Н, т, Н-2'а и Ме), 2,14 (3Н, 5, Ас), 2,58 (1Н, 5, этинил), 3,01 (1Н, ббб, бдет=14,8 Ηζ, 1Г,2Ь=8,3 Ηζ и 12Ь,3=5,0 Ηζ, Η-2'Ь), 4,37 (1Η, б, 1дет=11,1 Ηζ, Η-5'а), 4,45 (1Η, б, 12Ь,3=5,0 Ηζ, Η-3'), 4,53 (1Η, б, б8ЯП=11,1 Ηζ,’ Η-5'Ь), 6,40 (1Η, бб, 1г,2а=2,8 Ηζ и 1Г,2Ь=8,3 Ηζ, Н-1'), 7,53 (1Η, б,’ 16,Ме=1,3 Ηζ, Η-6), 8,04 (1Η, Ьг, ΝΗ);
РАВ-М8 т/ζ 461 (М++К).
Аналогично рассчитано для ^0Η30Ν2Ο68ί: С, 56,85; Η, 7,16; Ν, 6,63. Обнаружено: С, 56,84; Н, 7,35; Ν, 6,26.
1-(5-О-Ацетил-2-дезокси-4-этинил-в-О-трео-пентофуранозил)тимин (12).
К раствору ТГФ (4 мл) 11 (169,7 мг, 0,402 ммоль) добавляли фторид тетрабутиламмония (1М в ТГФ, 602 мкл, 0,602 ммоль) в атмосфере аргона. После перемешивания в течение 1 ч при комнатной температуре растворитель выпаривали. После силикагелевой колончатой хроматографии (СΗС13/МеОН=100/1) остатка получали соединение 12 (114,7 мг, 93%) а в виде пены:
υν ^ΟΗ) Хтах 265 нм (ε 8400), Хтт 233 нм (ε 1700);
1Н ЯМР (С1)С1; после добавления Ό2Ο) δ 1,93 (3Н, б, 16,Ме=1,3 Ηζ, Ме), 2,14-2,18 (1Η, т, Η-2'а), 2,18 (3Н, 5, Ас), 2,59 (1Η, 5, этинил), 2,94-3,02 (1Η, т, Η-2'Ь), 4,22 (1Н, б, б8ет=11,4 Ηζ, Η-5'а), 4,31 (1Η, б, 12'ь3'=5,5 Ηζ, Η-3'), 4,68 (1Η, б, б8ет=11,4 Ηζ, Η-5'Ь), 6, 24 (1Η, бб, 551Г2а=2,9 Ηζ и 1Г2Ь=9,0 Ηζ, Н-1'), 7,60 (1Η, б, 66^=1,3 Ηζ, Η-6);
13С ЯМР (СОС13) δ 12,52, 20,84, 38,76, 63,30, 74,73, 76,23, 79,85, 82,08, 85,33, 111,41, 137,93, 150,53, 163,63, 171,98;
РΑВ-ΗΚ-Μ8 т/ζ. Рассчитано для Ο14Η17Ν2Ο6 309,1087 (М+Η), обнаружено 309,1074.
1-(5-О-Ацетил-2-дезокси-3-О-метансульфонил-4-этинил-в-О-трео-пентофуранозил)тимин (13).
К раствору пиридина (4 мл) 12 (76 мг, 0,247 ммоль) добавляли хлорид метансульфонила (57 мкл, 0,74 ммоль) при 0°С и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разделяли между СΗС13/насыщенным водным раствором NаΗСΟ3 (60 млх3/20 мл). После силикагелевой колончатой хроматографии (СΗС13/МеОН=100/0-100/1) органического слоя получали соединение 13 (95,0 мг, 100%) в виде пены:
Ή ЯМР (СОС13) δ 1,96 (3Н, б, 16,Ме=1,2 Ηζ, Ме), 2,16 (3Н, 5, Ас), 2,38 (1Η, ббб, фет=6,0 Ηζ, %,2а=3,5 Ηζ и 12а,3'=0,7 Ηζ, Η-2'а), 2,70 (1Η, 5, этинил), 3,11 (1Η, 5, М5), 3,19 (1Η, ббб, б8ет=16,0 Ηζ, 1Г,2Ь=8,4 Ηζ и 12'Ь,3'=5,5 Ηζ, Η-2'Ь), 4,48 (1Η, б, б8ет=11,3 Ηζ, Η-5'а), 4,53 (1Η, б, б8ет=11,3 Ηζ, Η-5'Ь), 5,27-5,28 (1Η, т, Η31), 6,52 (1Η, бб, ίΐ',2'8=3,5 Ηζ и 61'>2Ь=8,4 Ηζ, Н-1'), 7,33 (1Η, б, 16,Ме=1,2 Ηζ, Η-6), 8,86 (1Η, Ьг5, ΝΗ);
РАВ-М8 т/ζ 387 (М+Η).
ΤΚΌ-4-114 (2',3'-дидегидро-3'-дезокси-4'-этинилтимидин).
Смесь соединения 13 (105 мг, 0,272 ммоль) и ДБН (101 мкл, 0,815 ммоль) в ΟΗ3ΟΝ (10 мл) дефлег
- 16 012844 мировали в течение 11 ч. После гашения АсОН реакционную смесь разделяли между СНСД/насыщенным водным раствором ИаНСО3 (60 млх3/20 мл). Продукт, полученный после очистки силикагелевой колончатой хроматографией (гексан/ЕЮАс=1/1) органического слоя, растворяли в насыщенном ΝΗ3 в МеОН (30 мл) и выдерживали при комнатной температуре в течение 12 ч. После выпаривания раствора с последующей очисткой препаративной тонкослойной хроматографией (гексан/Е!ОАс=1/1) получали ΤΚΌ-4-114 (49,6 мг, 74%) в виде твердого вещества: точка плавления 207209°С;
υν (МеОН) Хтах 264 нм (ε АР; 10800), Хтт 235 нм (ε 4800);
'Н ЯМР (СОС13) δ 1,83 (3Н, 8, Ме), 2,63 (1Н, 8, этинил), 3,47 (1Н, Ьг, ОН), 3,88 (1Н, б, 1дет=12,5 Ηζ, Н-5'а), 3,96 (1Н, б, 1бет=12, 5 Ηζ, Η-5'Ь), 5,91 (1Н, бб, %,2=1,1 Ηζ и 12,3=5,9 Ηζ, Н-2'), 6,30 (1Н, бб, %,3=2,0 Ηζ и 123=5, 9 Ηζ, Н-3'), 7,16-7,17 (1Н, т, Н-1'), 7,44 (1Н,’ б, 16,Ме=1,1 Ηζ, Н-6), 9,06 (1Н, Ьг, ΝΗ);
ГАВ-М8 т/ζ 249 (М++Н).
Аналогично рассчитано для С12Н12И2О4-1/6Н2О: С, 57,37; Н, 4,95; Ν, 11,15. Обнаружено: С, 57,36; Н, 4,69; Ν, 10,98.
Альтернативный химический синтез ΤΌΚ-4-114 (фиг. 5А).
ΤΚΌ-4-114 (2',3'-дидегидро-3'-дезокси-4'-этинилтимидин, 4'-этинил-б4Т) был синтезирован путем проведения серии реакций, приведенных на схеме (см. фиг. 5А), начиная с соединения 1, изготовление которого было описано ранее.
Приготовление соединения 2 дибензоила (смесь двух диастереомеров).
К соединению 1 (3,98 мг, 11,76 ммоль) в растворе толуола (70 мл) добавляли ι-Ργ2ΝΕϊ (5,1 мл, 29,4 ммоль) и РЬ(ОСОРН) 4 (20,33 г, 29,4 ммоль) при 0°С в атмосфере аргона и перемешивали смесь в течение 4 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором ИаНСО3 и фильтровали через целит. Фильтрат разделяли между СНС13/насыщенным водным раствором ИаНСО3. Очистку органического слоя проводили силикагелевой колончатой хроматографией (гексан/АсОЕ!=2/1) с получением соединения 2 (4,84 г, 71%) в виде пены:
'Н ЯМР (СОС13) δ 0,02, 0,07, 0,15 и 0,20 (6Н, каждый как 8, 81Ме), 0,75 и 0,93 (9Н, каждый как 8, 81Ви-1), 1,69 и 1,91 (3Н, каждый как б, 16,Ме=1,2 Ηζ, Ме-5), 1,91- 2,00, 2,33-2,40, 2,76-2,83 и 2,94-3,01 (2Н, каждый как т, Н-2'), 4,73 и 4,95 (1Н, ! и б, 12,3=6,8 и 4,4 Ηζ, Н-3'), 4,91, 5,08, 5,11 и 5,19 (2Н, каждый как
6, Т,е1|| 12.0 Ηζ, СН2-5'), 4,24 (1Н, б, 1дет=2,0 Ηζ), 6,34 и 6,64 (1Н, б и бб, 1Г,2=6,4 и %,2=2,8, 8,2 Ηζ, Н-1'), 7,32-7,37, 7,45-7,51, 7,58-7,67, 7,92-7,94, 8,02-8,04 и 8,04-8,13 (11Н, каждый ’ как т, Н-6 и РН), 8,92 (1Н, Ьг, ΝΗ);
ГАВ-М8 (т/ζ) 581 (М++Н).
Аналогично рассчитано для С30Н36И2О881: С, 62,05; Н, 6,25; Ν, 4,82. Обнаружено: С, 61,85; Н, 6,37; Ν, 4,70.
1-[5-О-Бензоил-3-О-(1-бутилдиметилсили)-2-дезокси-4-(триметилсилил)этинил-в-О-треопентофуранозил]тимин (3).
К раствору НС=С81Ме3 (3,2 мл, 22,44 ммоль) в толуоле (40 мл) добавляли ВиЫ (2,44 М в гексане) (9,2 мл, 22,44 ммоль) при 0°С в атмосфере аргона и смесь перемешивали в течение 30 мин. К этому раствору добавляли Е!А1С12 (0,94 М в гексане) (23,4 мл, 22,44 ммоль) при 0°С. После перемешивания смеси в течение 30 мин добавляли соединение 2 (3,26 г, 5,61 ммоль) в СН2С12 (50 мл) при 0°С и перемешивали смесь в течение ночи. Реакционную смесь разделяли между СНС13/насыщенным водным раствором ИаНСО3. Органический слой очищали с применением силикагелевой колончатой хроматографии (гексан/Е!ОАс=3/1) с получением соединения 3 (1,14 г, 37%) в виде пены:
'Н ЯМР (СОС13) δ 0,09 и 0,13 (6Н, каждый как 8, 81Ме), 0,12 (9Н, 8, С С8|Ме;). 0,89 (9Н, 8, 81Ви-1), 1,90 (3Н, б, 1Ме6=0,8 Ηζ, Ме-5), 1,95 (1Н, ббб, %2а=2,8, 12а3=1,2 и 12а2Ь=14,6 Ηζ, Η-2'а), 3,02 (1Н, ббб, 1г,2Ь=8,2, 12ь,з=5,2 и 12а,2Ь=14,6 Ηζ, Η-2'Ь), 4,50 ’ (1Н, бб, 12а,3'=1,2 и ’ 1Ж3'=5,2 Ηζ, Н-3'), 4,64 (1Н, б, 15'а,5Ъ=10,8 Ηζ, Η-5'а), 4,68 (1Н, б, 15Ч5ъ=10,8 Ηζ, Η-5'Ь), 6,40 (1Н, б, %,2а=2,8 и 1Г,2Ь=8,2 Ηζ, Н-1'), 7,447,48, 7,57-7,61 и б 8,07-8,10 (6Н, каждый как т, Н-6 и РН), 8,24 (1Н, Ьг);
РАВ-М8 (т/ζ) 557 (М++Н).
1-[5-О-Бензоил-2-дезокси-4-этинил-в-О-трео-пентофуранозил]тимин (4).
К раствору соединения 3 (208,2 мг, 0,37 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли Ви4ИР 3Н2О (290,2 мг, 1,11 ммоль) при 0°С и перемешивали смесь в течение 1 ч. Реакционную смесь выпаривали до сухого остатка. Силикагелевая колончатая хроматография (2% МеОН в СН2С12) остатка давала соединение 3 (115,3 мг, 84%) в виде пены:
Ίΐ ЯМР (СОС13+О2О) δ 1,94 (3Н, б, 1Ме,6=1,2 Ηζ, Ме-5), 2,15 (1Н, бб, %,2а=3,2 и 12а,2Ь=15,0 Ηζ, Η-2'а), 2,60 (1Н, 8, С СН). 3,01 (1Н, ббб, %,2ь=9,0, 12ь,3'=5,2 и 12а,2'Ь=15,0 Ηζ, Η-2'Ь), 4,34 (1Н, б, 1Ж3'=5,2 Ηζ, Н-3'), 4,40 (1Н, б, Э5'а,5'Ь=11,2 Ηζ), 4,96 (1Н, б, 15а,5ъ=11,2 Ηζ), 6,34(1Н, б, %,2а=3,2 и %,2Ь=9,0 Ηζ, Н-1'), 7,46-7,51,
7, 61-7,65 и 8,09-8,11 (5Н, каждый как т, РН), 7,70 (1Н, б, 1Ме,6=1,2 Ηζ), 8,47 (1Н, Ьг);
РАВ- М8 (т/ζ) 371 (М++Н).
1-[5-О-Бензоил-2-дезокси-4-этинил-3-О-метасульфонил-в-О-трео-пентофуранозил]тимин (5).
К раствору соединения 4 (110,9 мг, 0, 30 ммоль) в пиридине (3,5 мл) добавляли М8С1 (0,12 мл,
- 17 012844
1,5 ммоль) при 0°С в атмосфере аргона и перемешивали смесь в течение 6 ч. Реакционную смесь разделяли между СНС13/насыщенным водным раствором ЫаНСО3. Силикагелевая колончатая хроматография (1,5% МеОН в СН2С12) органического слоя дала соединение 5 (105,2 мг, 78%) в виде пены:
1Н ЯМР ^С13) δ 1,92 (3Н, б, 1Ме,6=1,2 Нг, Ме-5), 2,43 (1Н, бб, Дг,2.а=3,6 и 12а,2ъ=16,0 Нг, Н-2'а), 2,72 (1Н, 8, С СН). 3,07 (3Н, 8, 8О2Ме), 3,23 (1Н, ббб, 4Г2ь=8,2, 12ь,3-=5, 2 и 12а,2Ъ=16,0 ’ Нг, Н-2'Ь), 4,72 (1Н, б, 45-а,5ъ=11,2 Нг), 4,76 (1Н, б, б5.а>5Ь=11,2 Нг), 5,37 (1Н, б, 12Ь,3=5,2 Нг, Н-3'), 6,56 (1Н, б, 1г,2а=3,6 и 1Г,2Ь=98,2 Нг, Н-1'), 7,36 (1Н, б, бМе>6=1,2’Нг), 7,47-7,51, 7,60-7,64 и 8,07-8,10 (5Н, каждый как т, РЬ), 8,32 (1Н, Ьг);
РЛБ-М8 (т/ζ) 449 (М+Н).
5'-О-Бензоил-2',3'-дидегидро-3'-дезокси-4'-этинилтимидин (6).
К раствору соединения 5 (101,9 мг, 0,23 ммоль) в СН3СЫ (4 мл) добавляли ДБН (67 мкл, 0,54 ммоль) при 0°С в атмосфере аргона и смесь перемешивали при 80°С в течение 9 ч. Реакционную смесь нейтрализовывали путем добавления АсОН и разделяли между СНС13/насыщенным водным раствором №НСО3. Силикагелевая колончатая хроматография (1,5% МеОН в СН2С12) органического слоя давала соединение 6 (60 мг, 74%) в виде твердого вещества;
'И ЯМР ^С13) δ 1,42 (3Н, б, ДМе,б=1,2 Нг, Ме-5), 2,70 (1Н, 8, С 8СН), 4,59 (1Н, б, 6^51,=12,0 Нг, Н5'а), 4,76 (1Н, б, Ца,5'Ь=12,0 Нг, Н-5'Ь), 5,99 (1Н, бб, 11-2=1,2, 12,3=5,9, Н-2'), 6,38 (1Н, бб, 11-3=2,0 и 12,3=5,9 Нг, Н-3'), 6,98 (1Н, б, ДМе,б=1,2 Нг), 7,12 (1Н, т, Н-1'), 7,45-7,49, 7,60-7,63 и 8,00-8,03 (5Н, каждый как т, РЬ), 8,37 (1Н, Ьг);
ГАВ-М8 (т/ζ) 353 (М%Н).
2',3'-Дидегидро-3'-дезокси-4'-этинилтимидин (7) (ТКЭ-4-114,4'-Этинил-б4Т).
К суспензии соединения в (56 мг, 0,16 ммоль) в МеОН (3 мл) добавляли 1 М ЫаОМе (0,32 мл, 0,32 ммоль) при 0°С в атмосфере аргона и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0 ч. Реакционную смесь нейтрализовывали путем добавления АсОН и хроматографировали на силикагелевой колонке (2% МеОН в СН2С12) с получением соединения 7 (35,8 мг, 90%) в виде твердого вещества.
Физические данные соединения 7 (ТКО-4-114) соответствуют данным, приведенным выше.
Химический синтез КМА-23-153: углеродно-циклический аналог ТКО-4-114 (см. фиг. 6).
КМА-23-153 получали в виде рацемической модификации (смеси равных количеств Э- и Ьэнантиомеров) путем проведения серии реакций, приведенных на схеме, проиллюстрированной на фиг. 6. Способ приготовления начального материала 2 был уже опубликован: см. Ка1о, е1 а1., СЬет. РНагт. Ви11., 47, 1256-1264 (1999).
1Тидроксиметил-2-оксоциклопентанкарбоновокислый метиловый эфир (3 на фиг. 6).
К суспензии соединения 2 (10 г, 55,48 ммоль) и НМРА (29 мл, 166,44 ммоль) в ТГФ (450 мл) добавляли Ви38иС1 (16,5 мл, 61,0 ммоль) при 0°С при избыточном давлении сухого аргона. После перемешивания при 0°С в течение 30 мин к смеси добавляли (СН2О)П (8,32 г, 277,4 ммоль) и перемешивали всю реакционную смесь в течение 48 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь разделяли между ЛеОЕ1 и соляным раствором. Органический слой высушивали (Ыа28О4), выпаривали и хроматографировали на силикагелевой колонке (гексан/ЕЮАс=1/1). Получали соединение 3 (7,13 г, 77%) в виде масла.
'И ЯМР ^С13) δ 1,97-2,18 (2Н, т, СН2), 2,21-2,25 (1Н, т, СН2), 2,29-2,53 (3Н, т, ОН и СН2), 2,622,66 (1Н, т, СН2), 3,74 (3Н, 8, Ме), 3,81 (1Н, бб, 6=11,2 и 8,0 Нг, СН2ОН), 3,89 (1Н, бб, 1=11,2 и 4,4 Нг, СН2ОН).
1-(трет-Бутилдифенилсилилоксиметил)-2-оксо-циклопентанкарбоновокислый метиловый эфир (4 на фиг. 6).
Смесь соединения 3 (10,35 г, 60,1 ммоль), имидазола (8,18 г, 120,2 ммоль) и ТВ^Р8С1 (15,6 мл, 60,1 ммоль) в ДМФ (40 мл) перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре при избыточном давлении сухого аргона. Смесь разделяли между ЕЮАс и насыщенным водным раствором ЫаНСО3. Органический слой высушивали (Ыа28О4) и выпаривали. Полученный густой остаток обрабатывали МеОН (са. 40 мл) и получали соединение 4 в виде осадка. Эту процедуру повторяли дополнительно 3 раза для получения соединения 4 (18,97 г, 77%) в виде белого твердого вещества.
'И ЯМР ^С13) δ 1,02 (9Н, 8, 81Ви-1), 2,03-2,11 (2Н, т, СН2), 2,26-2,35 (1Н, т, СН2), 2,41-2,53 (3Н, т, СН2), 3,65 (3Н, 8, Ме), 3,87 (1Н, б, 1=9,6 Нг, СН2О81), 4,09 (1Н, б, 1=9,6 Нг, СН2О81), 7,37-7,46 (6Н, т, РЬ), 7,61-7,65 (4Н, т, РЬ).
1-(трет-Бутилдифенилсилилоксиметил)-2-оксоциклопент-3-энекарбоновокислый метиловый эфир (5 на фиг. 6).
К перемешиваемой смеси соединения 4 (3,58 г, 8,72 ммоль) и Εΐ3Ν (6,1 мл, 43,6 ммоль) добавляли Ме381О8О2СГ3 (2,56 мл, 13,0 ммоль) при 0°С при избыточном давлении сухого аргона. Смесь перемешивали в течение 30 мин при этой же температуре и затем разделяли между СН2С12 и насыщенным водным раствором NаНСО3. Органический слой высушивали Ща28О4) и выпаривали. Остаток растворяли в ЭМ8О (12 мл). К этому раствору добавляли Рб(ОАс)2 (98 мг, 0,44 ммоль) и перемешивали смесь в течение 36 ч при избыточном давлении О2. Смесь разделяли между ЕЮАс и соляным раствором. Органический слой высушивали Ща28О4), выпаривали и хроматографировали на силикагелевой колонке (гексан/ЕЮАс=5/1) с получением соединения 5 (3,13 г, 88%) в виде белого твердого вещества.
- 18 012844 1Н ЯМР (СБС13) δ 0,97 (9Н, 8, 81Ви-1), 2,99-3,05 (1Н, т, СН2), 3,21-3,26 (1Н, т, СН2), 3,66 (3Н, 8, Ме), 3,98 (1Н, б, 1=10,0 Нг, СН2О81), 4,18 ((1Н, б, 1=10,0 Нг, СН2О81), 6,24-6,26 (1Н, т, СН=СН), 7,377,45 (6Н, т, РЬ), 7,58-7,62 (4Н, т, РЬ), 7,86-7,88 (1Н, т, СН=СН).
1-(трет-Бутилдифенилсилилоксиметил)-(транс-2-ацетокси)циклопент-3 -энекарбоновокислый метиловый эфир (6 на фиг. 6).
Смесь №1ВН4 (628 мг, 16,6 ммоль) и МеОН (50 мл) охлаждали и перемешивали при -70°С. К этой смеси капельно добавляли смесь соединения 5 (3,39 г, 8,3 ммоль) и СеС13-7Н2О (3,1 г, 8,3 ммоль) в ТГФ/МеОН=1/1 (50 мл) в течение 15 мин. Полученную суспензию перемешивали в течение 1 ч при -70°С. Реакцию гасили путем добавления АсОН (са. 1 мл). Реакционную смесь выпаривали. Остаток суспендировали в МеСЫ (15 мл). К этой суспензии добавляли ΌΜΑΡ (1,02 г, 8,3 ммоль), ι-Ργ2ΝΕϊ (1,45 мл, 8,3 ммоль) и Ас2О (1,57 мл, 16,6 ммоль). Смесь перемешивали в течение 30 мин при 0°С при избыточном давлении сухого аргона и разделяли между СН2С12 и насыщенным водным раствором ЫаНСО3. Органический слой высушивали (Ыа28О4), выпаривали и хроматографировали на силикагелевой колонке (гексан/Е1ОАс=4/1). Получали соединение 6 (3,74 г, 100%) в виде масла.
Ή ЯМР (СОС13) δ 1,02 (9Н, 8, 81Ви-1), 1,87 (3Н, 8, Ас), 2,50-2,55 (1Н, т, СН2), 2,91-2,97 (1Н, т, СН2), 3,71 (3Н, 8, Ме), 3,87 (1Н, б, 1=9,6 Нг, СН2О81), 4,08 (1Н, б, 1=9,6 Нг, СН2О81), 5,76-5,78 (1Н, т, СН=СН), 5,99-6,00 (1Н, т, СН=СН), 6,07-6,08 (1Н, т, АсОСН), 7,29-7,45 (4Н, т, РЬ), 7,61-7,65 (4Н, т, РЬ).
1-(трет-Бутилдифенилсилилоксиметил)-(транс-4-гидрокси)циклопент-2-энекарбоновокислый метиловый эфир (7 на фиг. 6)
Смесь соединения 6 (1,87 г, 4,13 ммоль), РбС12 (МеСЫ)2 (106 мг, 0,41 ммоль) и р-хинона (224 мг, 2,07ммоль) в ТГФ (17 мл) дефлегмировали в течение 3 ч при избыточном давлении сухого аргона. Смесь разделяли между СН2С12 и насыщенным водным раствором Ыа282О3. Органический слой высушивали (Ыа28О4) и выпаривали. Остаток растворяли в МеОН (5 мл) и обрабатывали КгСО3 (685 мг, 4,96 ммоль) в течение 1 ч при перемешивании. Смесь разделяли между СНС13 и соляным раствором. Органический слой высушивали (Ыа28О4), выпаривали и хроматографировали на силикагелевой колонке (гексан/Е1ОАс=6/1). Получали соединение 7 (1,14 г, 67%) в виде масла.
Ή ЯМР (СОС13) δ 1,02 (9Н, 8, 81Ви-1), 1,87 (1Н, бб, 1=14,4 и 2,4 Нг, СН2), 2,73 (1Н, бб, 1=14,4 и 7,2 Нг, СН2), 3,65 (3Н, 8, Ме), 3,79 (1Н, б, 1=9,6 Нг, СН2О81), 3,85 (1Н, б, 1=9,6 Нг, СН2О81), 4,82-4,87 (1Н, т, СНОН), 5,84-5,87 (1Н, т, СН=СН), 6,02-6,04 (1Н, т, СН=СН), 7,38-7,44 (6Н, т, РЬ), 7,63-7,65 (4Н, т, РЬ).
1-(трет-Бутилдифенилсилилоксиметил)-(цис-4-гидрокси)циклопент-2-энекарбоновокислый метиловый эфир (8 на фиг. 6).
Смесь соединения 7 (1,08 г, 2,63 ммоль), РЬ3Р (897 мг, 3,42 ммоль) и АсОН (301 мкл, 5,26 ммоль) в ТГФ (10 мл) охлаждали до 0°С при избыточном давлении сухого аргона. К ней капельно добавляли диэтилазодикарбоксилат (2,3 М раствор в толуоле, 1,49 мл, 3,42 моль). После перемешивания в течение 30 мин смесь разделяли между СН2С12 и насыщенным водным раствором ЫаНСО3. Органический слой высушивали (Ыа28О4) и выпаривали. Остаток обрабатывали К2СО3 (727 мг, 5,26 ммоль) в МеОН (5 мл) в течение 1 ч. Смесь разделяли между СНС13 и соляным раствором. Органический слой высушивали (Ыа28О4), выпаривали и хроматографировали на силикагелевой колонке (гексан/Е1ОАс=4/1). Получали соединение 8 (892 мг, 83%) в виде масла.
Ή ЯМР (СОС13) δ 1,02 (9Н, 8, 81Ви-1), 2,20-2,31 (3Н, т, СН2 и ОН), 3,70 (1Н, б, 1=9,6 Нг, СН2О81), 3,71 (3Н, 8, Ме), 3,87 (1Н, б, 1=9,6 Нг, СН2О81), 4,76-4,81 (1Н, т, СНОН), 5,88 (1Н, б, 1=5,6 Нг, СН=СН), 6,03 (1Н, бб, 1=5,6 и 2,4 Нг, СН=СН), 7,36-7,46 (6Н, т, РЬ), 7,61-7,65 (4Н, т, РЬ).
1-[цис-4-(трет-Бутилдифенилсилилоксиметил)транс-4-метоксикарбонилциклопент-2-эн-1-ил]тимин (9 на фиг. 6)
К раствору ТГФ (25 мл) с РРЬ3 (2,28 г, 8,68 ммоль) капельно добавляли диэтилазодикарбоксилат (2,3 М раствор в толуоле, 3,63 мл, 8,35 моль) при 0°С при избыточном давлении сухого аргона. После перемешивания в течение 30 мин к суспензии ТГФ (76 мл), содержащей соединение 8 (1,37 г, 3,34 ммоль), капельно добавляли Ы3-бензоилтимин (1,15 г, 5,01 ммоль). Смесь перемешивали в течение 70 ч при комнатной температуре, выпаривали и затем обрабатывали 2 М ЫаОМе в МеОН (6,7 мл) в течение 2 ч. За нейтрализацией реакционной смеси путем добавления АсОН (1,15 мл) следовало разделение между СН2С12 и насыщенным водным раствором ЫаНСО3. Органический слой высушивали (Ыа28О4), выпаривали и хроматографировали на силикагелевой колонке (гексан/Е1ОАс=1/1). Получали соединение 9 (1,21 г, 70%) в виде белой пены.
Ή ЯМР (СОС13) δ 1,05 (9Н, 8, 81Ви-1), 1,74 (3Н, б, 1=1,2 Нг, тимин-5-Ме), 1,75 (1Н, бб, 1=14,0 и 6,8 Нг, СН2), 3,01 (1Н, бб, 1=14,0 и 8,4 Нг, СН2), 3,70 (3Н, 8, Ме), 3,87 (1Н, б, 1=10,0 Нг, СН2О81), 3,90 (1Н, б, 1=10,0 Нг, СН2О81), 5,79 (1Н, бб, 1=5,2 и 2,0 Нг, СН=СН), 5,83-5,88 (1Н, т, СНЫ), 6,10 (1Н, бб, 1=5,2 и 2,4 Нг, СН=СН), 6,88 (1Н, ф 1=1,2 Нг, тимин-Н-6), 4, 36-7,47 (6Н, т, РЬ), 7,61-7,64 (4Н, т, РЬ), 8,89 (1Н, Ьг, тимин-ЫН).
1-[цис-4-(трет-Бутилдифенилсилилоксиметил)транс-4-этинилциклопент-2-эн-1-ил]тимин (10 на фиг. 6).
К соединению 9 (550 мг, 1,06 ммоль) в растворе СН2С12 (10 мл) капельно добавляли 1-Ви2А1Н (1,01
- 19 012844
М в толуоле, 1,16 мл, 1,17 ммоль) при -70°С при избыточном давлении сухого аргона. После перемешивания в течение 20 мин добавляли дополнительное количество ί-Βι.ι2Λ1Η (2,32 мл, 2,34 ммоль) и перемешивание продолжали в течение 20 мин. После гашения путем добавления АсОН (200 мл) производили выпаривание. После силикагелевой хроматографии на короткой колонке (гексан/ЕЮАс=1/5) получали производное транс-4-гидроксимитила (294 мг). Производное транс-4-гидроксиметила растворяли в СН2С12 (10 мл) и оксидировали с помощью периодинана Десс-Мартина (Пе88-Матйп репобшапе) (477 мг, 1,12 ммоль). После перемешивания в течение 1,5 ч смесь разделяли между СН2С12 и насыщенным водным раствором №1НС.'О3. Органический слой высушивали (Ыа28О4) и выпаривали для получения неочищенного транс-4-альдегида (274 мг). Альдегид растворяли в МеОН, содержащей К2СО3 (310 мг, 2,24 ммоль) и перемешивали в течение 10 мин при 0°С при избыточном давлении сухого аргона. К этой смеси добавляли диметил(1-диазо-2-оксопропил)фосфонат (для приготовления этого реагента см. Р. Са11ап1, Ь. □'Наспех и М. Уапбе^айе, 8уп111. Соттип., 14, 155-161 (1984). Использование этого реагента для преобразования ЯСНО в КС^СН: I. СШа1/еаи. 1.М. Ьадо)а. 8.Р. Νοίηη. V. Аисадпе, 1. Когепхк!, Р. Негбе\\Дп и Ь.А. АдтоГодйо, Еиг. 1. Огд.СЬет., 666-671 (2003)) (270 мг, 1,4 ммоль). Смесь перемешивали в течение 1 ч, а затем разделяли между ЕЮАс и насыщенным водным раствором NаНСОз. Органический слой высушивали Ща28О4), выпаривали и хроматографировали на силикагелевой колонке (гексан/ЕЮАс=1/1). Получали соединение 10 (138 мг, 27%) в виде белой пены.
'|| ЯМР (СИС13) δ 1,07 (9Н, 8, 81Ви-1), 1,71 (3Н, б, 1=1,2 Нг, тимин-5-Ме), 2,02 (1Н, бб, 1=13,2 и 7,6 Нг, СН2), 2,20 (1Н, 8, С СН), 2,70 (1Н, бб, 1=13,2 и 8,0 Н, СН2), 3,69 (1Н, б, 1=9,6 Нг, СН2О81), 3,83 (1Н, б, 1=9,6 Нг, СН2О81), 5,76 (1Н, бб, 1=5,2 и 2,0 Нг, СН=СН), 5,91-5,95 (1Н, т, СНК), 6,02 (1Н, бб, 1=5,2 и 2,4 Нг, СН=СН), 6,98 (1Н, ф 1=1,2 Нг, тимин-Н-6), 7,37-7,48 (6Н, т, РЬ), 7,63-7,66 (4Н, т, РЬ), 8,20 (1Н, Ьг, тимин-КН).
РАВ-М8 (т/г): 485 (М+Н). 1-(цис-4-Гидроксиметил-транс-4-этинилциклопент-2-эн-1-ил)тимин (11, фиг. 6): КМА-23-153. Смесь соединения 10 (101 мг, 0,21 ммоль) и Ви4№ (1М раствор в ТГФ, 230 мкл, 0,23 ммоль) в ТГФ (3 мл) перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. К этой смеси добавляли 4диметилламинопиридин (51 мг, 0,42 ммоль), 1-Рг2КЕ1 (73 мкл, 0,42 ммоль) и Ас2О (80 мкл, 0,84 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин, а затем разделяли между СН2С12 и насыщенным водным раствором №1НС.'О3. Органический слой высушивали Ща28О4), выпаривали и хроматографировали на силикагелевой колонке (АсОЕ1). Получали ацетат (52 мг) в виде белого твердого вещества. Полученный ацетат обрабатывали КН3/МеОН (35 мл) ниже 0°С в течение 12 ч. В процессе выпаривания растворителя происходило осаждение вещества. Осадок промывали горячим бензолом (50 мл) для получения аналитически чистого соединения 11 (31 мг, 60%).
' Н ЯМР (СИС13) δ 1,96-1,94 (5Н, т, СН2, ОН и тимин-5-Ме), 2,30 (1Н, 8, С СН), 2,81 (1Н, бб, 1=13,6 и 8,8 Нг, СН2), 3,65 (1Н, бб, 1=10,0 и 7,6 Нг, СН2ОН), 3,78 (1Н, бб, 1=10,0 и 4,8 Нг, СН2ОН), 5,78-5,80 (1Н, т, СН=СН), 5,85-5,89 (1Н, т, СНК), 6,04-6,06 (1Н, т, СН=СН), 7,10 (1Н, ф 1=1,2 Нг, тимин-Н-6), 8,09 (1Н, Ьг, тимин-КН).
Аналогично рассчитано для С13Н14К2О3-1/5 Н2О: С, 62,49; Н, 5,81; Ν, 11,21. Обнаружено: С, 62,57; Н, 5,65; N,11,22,
Биологическая активность.
Способы и материалы.
Химические препараты: 4'-Ό4Τ аналоги (фиг. 1) были синтезированы в лаборатории д-ра Хиромати Танака, Школа фармацевтических наук, университет Сева, Япония. бТЬб, Ό4Τ и А2Т были закуплены у «81дта-А1бпсЬ Согр», Св. Луис, шт. Миссури, бб1 был закуплен у «ΙΟΝ ВюсЬеткаИ 1пс», Аврора, шт. Огайо. 3ТС был получен от «Тпапд1е РЬаттасеибса18», Дурхамб шт. Сев. Каролина. ЬРб4С был получен от «νώη 1пс», Нью Хэйвен, шт. Коннектикут. Все другие использованные химические препараты обладали чистотой реактивов или более высокой чистотой.
Линии клеток и вирус: как линия клеток Н9, используемая для исследований токсичности и разведения вирусов, так и линия клеток МТ-2, используемая для исследования противовирусной активности, были получены в рамках программы исследования СПИДа и эталонных реагентов Национального института здравоохранения и были переданы Др. Робертом Галло и Др. Дугласом Ричманом соответственно. Штамм 111В ВИЧ-1 был получен от д-ра Джона Меллорса.
Определение вирусной активности: соединения были испытаны в клетках МТ-2, инфицированных штаммом ШВ ВИЧ-1 в целом, как описывалось ранее (31). Вкратце, серийные растворы лекарственных препаратов помещали в тройные ячейки чашки для культуры тканей с 96 ячейками, затем клетки МТ-2, выращенные в среде ЯРМ1 1640, дополненной 10% диализированной плодной бычьей сывороткой и 100 мкг/мл канамицина, добавляли при 104 клеток/100 мкл ±0,1 множественного заражения ВИЧ-1 ШВ. Пять дней спустя в ячейки добавляли краситель МТТ, и цвет тетразолиевого красителя, измеренный при 595 нм, использовался для количественного определения клеточной жизнеспособности (20). Описываются расчеты процентной защиты и комбинированных исследований изоболограммы (12).
Клеточная токсичность аналогов нуклеозидов.
- 20 012844
Оценка указанных 6ТМ аналогов проводилась в нескольких линиях клеток; Н9, СЕМ, МТ-2 и НерС2. Основные процедуры являются аналогичными. Клетки высевают при низкой концентрации, затем добавляют серийные растворы испытываемых соединений. Используемые линии клеток СЕМ, МТ-2 и Н9 выращивали в среде ЯРΜI 1640, дополненной диализированной плодной бычьей сывороткой и 100 мкг/мл канамицина. После 48-96 ч инкубации при 37°С в 5% СО2 увлажнительном инкубаторе анализ завершали. Образцы, подвергшиеся воздействию лекарства, сравнивали с необработанными контрольными образцами. Анализ завершали в суспензионных линиях клеток путем подсчета количества клеток либо с помощью гемоцитометра или счетчика Сои11ег. Клетки НерС2, клетки линии гепатомы человека выращивали в среде ΌΜΕΜ, дополненной диализированной плодной бычьей сывороткой и 10 мкг/мл канамицина. Влияние на НерС2, монослойную линию клеток, было количественно определено путем окрашивания красителем 1,0% синего метилена, растворенного в 50% этаноле, после декантирования среды для выращивания. Далее слой клеток растворяли в 5% растворе саркозила и полученный цвет измеряли при 595 нм на считывающем спектрофотометре Мо1еси1аг Эеуюех модели Vтаx р1а1е (Меп1о Рагк, шт. Калифорния). Цвет необработанных контрольных образцов сравнивали с образцами, подвергшимися воздействию лекарственного препарата.
Митохондриальная ДНК.
Оценка влияния аналогов нуклеозидов на содержание мтДНК проводилась в соответствии с ранее описанной процедурой (2). Вкратце, клетки СЕМ, содержащиеся в среде ЯРМ[ 1640, дополненной диализированной плодной бычьей сывороткой, были засеяны при 2х105/мл на чашке для культуры ткани с 24 ячейками. Клетки, обработанные лекарственным препаратом при различных концентрациях либо по отдельности, либо в сочетании с другими препаратами, выращивали в течение 4 дней, далее был произведен сбор клеток и их обработка протеиназой К и ДНКазой свободной РНКазой. Экстракты были нанесены на нейлоновые мембраны и гибридизированы с использованием мтДНК пробы. После очистки мембраны загрузка была нормализирована путем повторной гибридизации мембраны с использованием пробы А1и. Пятна количественно определяли с помощью персонального денситометра Мо1еси1аг Эупатюх Д и аналитического программного обеспечения ИпадеОиаНТ.
Монофосфорилирование аналогов тимидинкиназой.
Все аналоги испытывали на возможность их фосфорилирования с использованием тимидинкиназы (ТК-1) от клеток СЕМ. Этот фермент очищали с помощью аффинного колончатого способа (хроматография по сродству), разработанного в лаборатории (7). Аналоги тимидинов (250 мкМ) инкубировались в смеси, содержащей 150 мМ Тпх НС1 рН 7,5, 2,4 мМ АТР, 2,4 мМ МдС12, 0,6 мг креатинфосфата, 5,8 единиц креатинфосфокиназы, 0,19 мг альбумина и 0,07 единиц ТК-1 в общем объеме 200 мкл. В конце инкубационного периода реакцию останавливали путем добавления 3 частей холодного метанола класса жидкостной хроматографии высокого разрешения (НРЬС). После инкубации на льду как минимум в течение 10 мин проводили осаждение метанолового нерастворимого материала путем центрифугирования, а метаноловые растворимые надосадочные жидкости помещали в чистые пробирки микроцентрифуги. Эти образцы высушивали в центрифуге 8реебуас. Образцы растворяли в воде и разделяли на жидкостном хроматографе высокого разрешения 8Ытаΐζи модели 8СЬ 10Аур с использованием градиента воды до 300 мМ фосфата калия и 8АХ колонки 10/25 частиц АНа1шап. Исследования Кт и соответствующие исследования Vтаx проводили аналогичным образом с использованием той же самой смеси и различных количеств субстрата и фермента.
Исследование стабильности кислоты.
Нуклеозидные образцы смешивали с 1Ν НС1 и инкубировали при 37°С в течение 2,5 ч. Затем образцы исследовали с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения с использованием колонки Весктап ΘΌ8, применяющей градиент воды до 80% метанола.
Анализы тимидин фосфорилазы.
Аналоги нуклеозидов (100 мкМ) инкубировали в 75 мМ буфере фосфата калия рН 7,3 при 37°С с использованием частично очищенного препарата экстракта печени человека (28) в качестве источника тимидин фосфорилазы (ТР). После инкубации реакцию останавливали путем добавления трихлоруксусной кислоты до окончательной концентрации 15%. Далее образцы инкубировали на льду. Затем кислотные нерастворимые компоненты удаляли путем центрифугирования, надосадочную жидкость нейтрализовали двумя экстракциями с половиной объема триоктиламина/фреона (45:55). Водные надосадочные жидкости исследовали с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения с использованием ΘΌ8 колончатого способа Весктап, как описывалось в исследованиях стабильности кислоты.
Анализы тимидинкиназы.
Анализы тимидинкиназы проводились аналогичным способом в соответствии с описанием в (21). Вкратце, при анализе используется [14С]-бТМ (100 мкМ, 6,7 мКи/ммоль) в смеси, содержащей 2,4 мМ АТР-Мд, 156 мМ Тг1х-НС1 рН 7,5, 0,23 мг креатинфосфата, 7 мкг креатинфосфокиназы, 67 мкг В8А и 1,9 мМ ЭТТ в 75 мкл объеме. Реакции инкубировали в течение различных периодов времени, затем их останавливали путем нанесения проб 50 мкл целых частей на ΌΕ-81 анионнообменные диски (А11а1тап Ичс.. Клифтон, шт. Нью-Джерси), которые немедленно погружали в 95% этанол. После двух дополнительных
- 21 012844 промывок в этаноле диски высушивали и помещали в стинцилляционные пробирки, содержащие 5 мл стинцилляционный коктейль (8аГе8ст1 8сшШ1айои Соск1аП (Атепсаи Вюаиа1уйса1, Натик, шт. Массачусетс). Количество радиоактивности, представляющее количество образованного бТМР, было количественно определено в стинцилляционном счетчике (Весктаи Ε85000ΤΌ 8сшШ1а1юи СоиШег (Весктаи 1иЧгитегИз 1ис., Пало Альто, шт. Калифорния).
Результаты биологической активности.
Противовирусное действие аналогов 4'-замещенных Ό4Τ.
В системе МТ-2/ШВ анти-ВИЧ-1 были проведены эксперименты путем добавления соединений, замещенных в 4' положении Ό4Τ метиловой, виниловой, этиниловой этинилметиловой, этинилхлоро, алиловой и цианогруппой (фиг. 1). Результаты указывали на то, что 4'-этиниловый аналог оказался более эффективным против ВИЧ и менее токсичным, чем исходное соединение Ό4Τ. В то время как 4'-циано Ό4Τ и 4'-этинилметил Ό4Τ были менее активными, чем Ό4Τ против ВИЧ (фиг. 8), 4'-метил, 4'-винил, 4'этинилхлоро и аналоги 4'-аллил замещенного Ό4Τ не достигли ЕС50 при концентрации 100 мкМ. В табл.1 ниже приведена сводная информация о ЕС50 против ВИЧ этих соединений совместно с Ό4Τ.
Таблица 1
Влияние аналогов 4'-замещенного Ό4Τ на ВИЧ
Соединение ЕС50 (мкМ)а Ю5о (мкМ)°
Б4Т 1,3 ±0,4 98,0 ± 10,8
4’-метил Б4Т > 100“ > 100
4’-винил Б4Т >100“ > 100
4’-этинил Б4Т 0,25 ± 0,14“ >256°
4’-этинилмегил 047 4,0 ±1,6 > 100
4’-этинилхлороБ4Т > 100 63,3 ± 20,8
4’-алил Б4Т >100 > 100
4’-циано Б4Т 7,0 ±2,6 > 100
а
Ь с
б
Эффективная концентрация необходимая для достижения 50% защиты от ВИЧ в клетках МТ-2. Концентрация необходимая для ингибирования роста клеток МТ-2 на 50%.
Максимальная испытанная концентрация.
ЕС50 описанный ранее (17).
Для определения того, действует ли 4'-этинил Ό4Τ как аналог 6Τ116 против ВИЧ, было изучено воздействие добавки 6ΤΜ или бСуб на противовирусную активность 4'-этинил Ό4Τ. С целью предотвращения возможности того, чтобы бСуб не мог быть дезаминирован до бИгб в клетках, также добавляли ингибитор цитидиндиаминазы, тетранидроуридин, на нетоксичном уровне. Было обнаружено, что 6Τ1ι6 снижал противовирусное воздействие 4'-этинил Ό4Τ в зависимости от концентрации. Тем не менее, бСуб не оказал существенного воздействия на активность 4'-этинил Ό4Τ против ВИЧ (фиг. 9).
С целью оценки взаимодействия 4'-этинил Ό4Τ с другими противовирусными нуклеозидными группами были созданы его изоболограммы в сочетании с 3ТС, ЬРб4С, бб1 и ΑΖΤ. Было продемонстрировано, что 4'-этинил Ό4Τ синергетически взаимодействует с 3ТС и ЬРб4С против ВИЧ (фиг. 10) и индекс синергизма был определен путем измерения относительно расстояния от линии, указывающей на аддитивное воздействие лекарственного препарата. Тем не менее, противовирусное воздействие 4'этинил Ό4Τ с бб1 и ΑΖΤ носило только аддитивный характер (данные не приведены).
Клеточная токсичность.
Воздействие 4'-замещенных Ό4Τ аналогов на рост клеток и содержание мтДНК определяли в клетках СЕМ (см. нижеприведенную табл. 2а). Ни один из этих аналогов за исключением 4'-этиленхлоро Ό4Τ не мог замедлить четырехдневный рост клеток с Ш50 менее чем 100 мкМ. Результаты 72-часового исследования токсичности в клетках НерС2 также показали, что ГО50 для Ό4Τ, 4'-винил Ό4Τ и 4'-этинил Ό4Τ был выше чем 100 мкМ. 4'-Этинил Ό4Τ смог снизить внутриклеточную митохондриальную ДНК с ГО50 100 мкМ, что в 10 раз превышает концентрацию Ό4Τ. Ввиду синергетического взаимодействия 4'-этинил Ό4Τ с 3ТС и ЬРб4С против ВИЧ, также была проведена оценка эффекта взаимодействия указанных соединений на рост клеток. В ходе 48-часового анализа не наблюдалось значительного повышения токсических взаимодействий в клетках Н9 (табл. 2а)
- 22 012844
Таблица 2а
Токсичность аналогов нуклеозидов в клетках СЕМ
Соединение Клеточный8 Содержание митохондриальной ДНК“ мкМ)
Б4Т 60,0 ±18,0 9,3 ±1,4
4’-метил Б4Т > 100 (114 ± 2) -
4’-винил Б4Т >100 (78 ±21) -
4’-этинил Б4Т >100(771 16) > 100 (94 ±4)
4'-этинилметил Б4Т >100 (94 ±20) > 100 (116 ±26)
4''ЭтинилхлороЭ4Т 62,6 ±10,0 -
4’-алии ϋ4Τ > 100 -
4'-циано Б4Т >100 (60 ±1) >100 (264 ±23)
сМС 5,511,8 0,15 ±0,12
ЗТС >200 (77 ± 28) >200 (114 ±2)
Процедуры, описанные в способах и методах.
a) Токсичность, определенная подсчетом клеток, в сравнении с необработанными контрольными образцами.
b) Содержание митохондриальной ДНК, определенное на основе анализа 8ои1Негп В1о! и по показаниям денситометра в сравнении с содержанием необработанных контрольных клеток СЕМ.
Величины являются средними значениями концентраций мкМ и стандартных отклонений, вызывающих 50% ингибирование контрольных клеток. Значения в скобках представляют средние и стандартные отклонения процента необработанных контрольных клеток СЕМ при указанных концентрациях.
Таблица 2Ь
Токсичность 4'-этинил И4Т в клетках Н-9 в отдельности и в сочетании с другими противовирусными соединениями как процент от необработанных контрольных клеток*
Концентрация 4'-этинил Б4Т (мкМ)
0 25 50
Без добавок 10015 97 + 7 10216
Плюс ЬЕс14С (мкМ) 5 7319 6213 72 ±5
10 5614 58 ±4 64 ±5
Плюс ЗТС (мкМ) 5 99 ±3 9812 99110
20 9413 8813 8716
100 108112 8513 8416
*Клетки Н-9 выращивали в соответствии с процедурой, описанной в разделе «Материалы и способы» в течение 48 ч в присутствии одного соединения или в сочетании с другими. Три или более ячейки были подсчитаны в двух экземплярах для каждого состояния с использованием счетчика Сои1!ег. Значения представляют средние и стандартные отклонения.
Взаимодействие аналогов 4'-замещенного И4Т с ТК-1.
Была проведена оценка потенциала этих соединений к фосфорилированию очищенным ТК-1 человека (табл. 3а ниже). А2Т был преобразован в монофосфатную форму в два раза быстрее, чем 6ТМ, в то время как скорость 4'-метил И4Т и 4'-винил И4Т является аналогичной И4Т (приблизительно 2% от 6Т116). Скорость преобразования 4'-этинил И4Т была выше, чем скорость И4Т с уровнем достоверности 0,06.
Между скоростями фосфорилирования 4'-этинил И4Т и 4'-этинилхлоро И4Т не было существенной разницы при уровне достоверности 0,91 с использованием критерия на основе двойной выборки. Кт 4'этинил И4Т оценивали в размере 52 мкм, что ниже, чем 133 мкм для И4Т, но выше, чем 6Т116. Для получения гарантии того, что ни один из этих аналогов 6ТМ не выступает в качестве сильнодействующего ингибитора Т1С-1, даже если они не являются субстратами, 6ТМ, А2Т, И4Т и аналоги 4'-замещенного И4Т добавляли к пробе тимидинкиназы при концентрации в 10 раз превышающей концентрацию [14С]6ТМ, затем количество преобразования в [14С]-бТМР сравнивали с реакциями без добавок (табл. 3Ь ниже). Соединения, эффективно фосфорилируемые ТК-1, например А2Т, могут оказать негативное влияние на количество фосфорилированного 6ТМ. Добавка И4Т или его слабо фосфорилируемых аналогов, даже при 10-кратном избытке, оказывают меньшее воздействие на фосфорилирование [14С]-бТМ ТК-1, чем А2Т.
- 23 012844
Таблица 3а
Фосфорилирование цитоплазматической тимидинкиназой человека
Соединение Кт (мкМ) Относительный Х/тах
атм 2,6* 100
ΑΖΤ - 55,5 ± 9,7
Б4Т 133 2,1 ±0,7
4’-метил 04Т - 1,6 ±0,5
4’-винил Б4Т - 1,8 ±0,5
4’-этинил Б4Т 52 3,8 ±0,8
4’-этинилметил Б4Т - 2,5 ±0,9
4’-этинилхлоро Б4Т - 3,9 ±1,0
4’-алил Б4Т - 0,4 ± 0,2
4’-циано Б4Т - 1,1 ±0,2
250 мкМ бТНб или аналог и 2,4 мМ АТР инкубировали с 0,07 единиц ТК-1 при 37°С в течение 285 мин. Значения были опубликованы ранее (21).
Таблица 3Ь
Воздействие добавки аналогов тимидина на пробу тимидинкиназы*
Добавление нуклеозида Процент активности
- 100
άΤΜ 9,1 ± 3,2
ΑΖΤ 5,4 ± 2,3
ϋ4Τ 106,3 ±7,7
4’-метил Б4Т 103,8 ±9,9
4’-винил ϋ4Τ 99,5 ± 6,9
4'-этинил ϋ4Τ 83,9 ± 6,1
4’-этинилметил Б4Т 74,0 ± 7,9
4’-этинилхлороБ4Т 53,2 ± 9,2
4’-алил О4Т 110,8 ±9,0
4’-циано Б4Т 71,8 ±8,2
* Анализы были проведены в целом в соответствии с описанием в разделе «Материалы и способы», за тем исключением, что концентрация [14С]-бТНб в пробе была снижена до 25 мкМ, и концентрация добавленного нуклеозида составляла 250 мкМ.
Взаимодействие с тимидинфосфорилазой и кислотостойкость 4'-этинил Э4Т.
Для проведения этих исследований использовали частично очищенный препарат тимидинфосфорилазы (ТР) из печени человека. бТНб распался исключительно быстро, в то время как распад Э4Т происходил в 10 раз медленнее. Распад 4'-этинил Э4Т был ниже уровня обнаружения в течение всего исследуемого инкубационного периода (фиг. 11). Стабильность Э4Т и 4'-этинил Э4Т при рН 1 и при 37°С изучалась в течение 2,5 ч. Не было обнаружено заметного распада любого из двух соединений.
Подробное обсуждение вопроса.
Э4Т является эффективным Ό-дидезокситимидиновым аналогом против ВИЧ. Его ограниченная клиническая токсичность при длительном сроке лечения представляет собой периферийную невропатиею, связанную с его действием по сокращению содержания митохондриальной ДНК периферийных нейронов (4, 5, 33, 34). Биохимические детерминанты действия Э4Т отличаются от биохимических детерминант 3ТС, бб1 или ббС. Аналог Э4Т. характеризующийся более сильным действием против ВИЧ и меньшим воздействием на ядерный или митохондриальный ДНК синтез, мог бы иметь более высокий терапевтический эффект, чем Э4Т и мог бы заменить Э4Т в комбинированной терапии против ВИЧ. Таким образом, синтез аналогов Э4Т с более высокими фармакологическими свойствами является направлением, по которому идут при разработке лекарственных препаратов против ВИЧ. Среди всех аналогов 4'замещенных Э4Т, синтезированных нами и другими изобретателями, 4'-этинил Э4Т является наиболее активным аналогом против ВИЧ в культуре клеток. Маад е1 а1. описал 4'-азидо Э4Т, не проявляющий действие против ВИЧ на нетоксичных уровнях (29) и Θ-Уапд е1 а1. описал три аналога 4'-замещенных Э4Т, являвшихся нетоксичными и пассивными по отношению к ВИЧ (32).
Э4Т достаточно быстро катаболизируется, в бета-аминоизомасляную кислоту и тимин гепатоцитом печени (38). Фермент, ответственный за этот распад, является ТР, который в присутствии фосфата расщепляет бТНб на тимин и 2-дезокси-О-рибоза-1-фосфат. Путем инкубирования 4'-этинил Э4Т и Э4Т час
- 24 012844 тично очищенным препаратом ТР печени человека было продемонстрировано, что 4'-этинил Ό4Τ проявлял более высокую сопротивляемость к ТР, чем Ό4Τ. Это указывает на то, что 4'-этинил обладает дополнительными преимуществами над Ό4Τ с фармакокинетической точки зрения. Более того, 4'-этинил Ό4Τ характеризуется аналогичной стабильностью, как и Ό4Τ в кислотных условиях, имитирующих условия желудка (данные не приведены). Это указывает на то, что 4'-этинил Ό4Τ мог бы быть орально активным агентом, как и Ό4Τ. В перспективе предусматривается проведение детального фармакокинетического исследования. Так как 4'-этинил Ό4Τ является более сильнодействующим, чем Ό4Τ, следует полагать, что 4'-этинил Ό4Τ мог бы характеризоваться меньшей устойчивостью вирусов к этому препарату. При приеме пациентом 4'-этинил Ό4Τ при той же дозировке, как и Ό4Τ, вирусная нагрузка будет намного ниже, благодаря чему снижается вероятность появления резистентных штаммов. Также существует возможность давать 4'-этинил Ό4Τ при более высоких дозировках, чем Ό4Τ, так как 4'-этинил Ό4Τ в меньшей степени угнетает рост клеток и вызывает меньшее снижение митохондральной ДНК по сравнению с Ό4Τ. Тем не менее, требуется проведение дальнейших исследований с целью определения количества 4'этинил Ό4Τ, которое явилось бы безопасным для использования.
Монотерапия в большей степени способствует развитию и появлению резистентных штаммов вирусов, чем комбинированная терапия. Таким образом, необходимо, чтобы противовирусные соединения действовали совместно с другими одобренными противовирусными лекарственными препаратами, имеющими различные биохимические детерминанты лекарственной устойчивости. Если соединения являются синергическими или, по крайней мере, аддитивными по отношению к их противовирусной активности, но не по отношению к их цитотоксическому воздействию на клетку-хозяина, можно было бы достичь более эффективного лечения. Несомненно, комбинированная терапия ВИЧ достигла огромного прогресса в борьбе против СПИДа, и Ό4Τ часто используется в качестве одного из лекарственных препаратов в комбинированных протоколах. Для оценки потенциального использования 4'-этинил Ό4Τ в комбинированной терапии нами было исследовано взаимодействие этого соединения с четырьмя противовирусными нуклеозидными аналогами. 4'-этинил Ό4Τ является синергическим с 3ТС и ЬЕ64С (фиг. 9) и аддитивным с ΑΖΤ и άάΐ (данные не приведены) по отношению к активности против ВИЧ, но не к цитотоксичности (табл. 2Ь). Это указывает на то, что 4'-этинил Ό4Τ мог бы явиться полезным соединением для комбинированной терапии и мог бы явиться эффективным против вируса, резистентного в настоящее время к нуклеозидам, благодаря повышению их эффективности через синергическую реакцию. В настоящее время исследуется активность 4'-этинил Ό4Τ против вируса, резистентного к другим аналогам нуклеозидов. Исследуемый механизм, лежащий в основе более высокой активности 4'-этинил Ό4Τ по сравнению с другими аналогами 4'-замещенных Ό4Τ против ВИЧ, является неясным. Дезоксинуклеозидные аналоги обычно преобразуются в 5'-трифосфатметаболиты, являющиеся субстратами для вирусных ДНК полимераз. Трифосфатные метаболиты известных против ВИЧ дидезоксинуклеозидов взаимодействуют избирательно с вирусной обратной транскриптазой и действуют в качестве терминаторов при их включении в нить ДНК. Формирование монофосфатного метаболита является первым шагом в процессе преобразования в трифосфатный метаболит. Соединения 4'-замещенного Ό4Τ, например Ό4Τ, являются аналогами 6ΤΜ, в результате был использован очищенный ТК-1 для определения того, мог ли он фосфорилировать эти аналоги до их соответствующих монофосфатных форм. Результаты показали, что 4'этинил Ό4Τ фосфорилировался в два раза быстрее, чем Ό4Τ, хотя более медленными темпами, чем 6ΤΜ или ΑΖΤ. Следует отметить, что 4'-метил Ό4Τ и 4'-винил Ό4Τ аналоги фосфорилировались с той же скоростью, что и Ό4Τ, но ни один из них не проявлял значительную активность против ВИЧ. Таким образом, можно сделать вывод, что отсутствие активности некоторых из этих аналогов 4'-замещенного Ό4Τ против ВИЧ не обусловлено неспособностью фосфорилировать ТК-1. Фосфорилирование 4'-этинил Ό4Τ ТК-1 является важным шагом, но недостаточным для обладания противовирусной активностью. Так как его противовирусное воздействие могло бы быть нейтрализовано 6ΤΜ, но не бСуб. 4'-этинил Ό4Τ, например Ό4Τ, действует как аналог 6ΤΜ, но противовирусный механизм действия 4'-этинил Ό4Τ мог бы быть до сих пор крайне отличным от механизма действия Ό4Τ. Наши неопубликованные материалы указывают, что Ό4Τ мог бы быть более эффективно фосфорилирован в трифосфатный метаболит, чем 4'этинил Ό4Τ с использованием СЕМ клеточного экстракта, дополненного частично очищенным ТК-1 и рекомбинантной 6ΤΜΡ киназой человека. Это вызывает вопрос относительно того, является ли 4'-этинил Ό4ΤΜΡ активным метаболитом вместо 4'-этинил Ό4ΤΤΡ и требуется ли дальнейшее исследование.
В заключение следует отметить, что 4'-этинил Ό4Τ является более сильно действующим средством против ВИЧ и менее токсичным, чем Ό4Τ в культуре клеток. Предполагается, что он будет иметь фармакокинетические преимущества перед Ό4Τ, так как он не является субстратом тимидинфосфорилазы. Таким образом, 4'-этинил Ό4Τ проявляет высокий потенциал как новый лекарственный препарат против ВИЧ.
Специалистам в данной области должно быть понятно, что вышеприведенное описание и примеры являются иллюстративными для практического использования настоящего изобретения, ни в коей мере не ограничивающими его.
Могут быть предложены и другие варианты данного изобретение, не выходящие за пределы его существа и объема, определенного прилагаемой формулой изобретения.
- 25 012844
Список литературы
1. Е.М. Аидикб, М.Е. Матопдби, Т.8. Ьт, апб \У.Н. РгикоГГ. 1988. Ιηίιίαΐ кбиббек оп бНе се11и1аг рНагтасо1оду оГ 3-беохубНутбббп-2'-епе (б4Т): а робепб апб ке1есббуе бпНбЬббог оГ Нитам бттипобеГбсбепсу убгик. ВбосНет. РНагтасо1. 37:4419-22.
2. Е.С. Вгббдек, С.Е. Оийсйтап, Е.А. Си11еп, апб У.С СНепд. 1996. РауогаЫе бпбетасббоп оГ Ьеба-Ь(-) пис1еокббе апа1одиек \νί(1ι с1бшса11у арртоуеб апбб-Н1У пис1еокббе апа1одиек Гог (Не бгеабтепб оГ Нитап бттипобеГбсбепсу убгик. ВбосНет. РНагтасо1. 51:731-6.
3. К. Вгбпктап, Н.Р бег НоГкбебе, И.М. Вигдег, РА. 8тебббпк, апб Р.Р. Коортапк. 1998. Абуегке еГГесбк оГ геуегке бтапкстбрбаке бпНбЬбботк: тббосНопбтба1 бохбсббу ак соттоп рабНгау. Аббк 12:1735-44.
4. Мб. Вго^пе, К.Н. Мауег, 8.В. СНаГее, М.Ы. Оиб1еу, М.В. Рокпег, 8.М. 8бебпЬетд, К.К. СгаНат, 8.М. Се1ебко, 8.Н. Ζίπι-ΚΓ 8.Ь. Иептап, апб еб а1. 1993. 2',3'-дббеНубго-3'-беохубНутбббпе (б4Т) бп раббепбк ууббН АГО8 ог АГО8-ге1абеб сотр1ех: а рНаке I бгба1. I. 1пГесб. Ибк. 167:21-9.
5. С.Н. СНеп, апб У.С. СНепд. 1989. Ие1ауеб субобохбсббу апб ке1есббуе 1окк оГ тббосНопбтба1 ΌΝΛ бп се11к бгеабеб νίΐΠ бНе апбб-Нитап бттипобейсбепсу убгик сотроипб 2',3'-бббеохусуббббпе. б. Вбо1. СНет. 264:11934-7.
6. С.Н. СНеп, М. Уахдиех-Рабиа, апб У.С. СНепд. 1991. ЕГГесб оГ апбб-Нитап бттипобейсбепсу убтк пис1еокббе апа1одк оп тббосНопбгба1 ^NΛ апб ббк бтрйсаббоп Гог бе1ауеб бохбсббу. Мо1. РНагтасо1. 39:625-8.
7. СНепд, У.С. 1978. ТНутбббпе Кбпаке Ггот В1акб Се11к оГ Муе1осуббс Ьеикетба, р. 365-371, МебНобк бп Епхуто1оцу, уо1. Ьб. Асабетбс Ргекк, №\ν Уогк.
8. РА. Соабек, Ν. Саттаск, Н.Р бепкбпкоп, А.Р бо^ебб, М.1. бо^ебб, В.А. Реагкоп, С.В. Регт, Р.Ь. Воике, К.С. Убпег, апб РМ. Сатегоп. 1992. (-)-2'-беоху-3'-бНбасуббббпе бк а робепб, НбдНбу ке1есббуе бпНбЬббог оГ Нитап бттипобейсбепсу убгик буре 1 апб буре 2 герНсаббоп бп уббто. АпббтбстоЬ Адепбк СНетобНег 36:733-9.
9. РА. Соабек, Ν. Саттаск, Н.Р .бепкбпкоп, 1.М. Миббоп, В.А. Реагкоп, В. 8богег, РМ. Сатегоп, апб С.В. Регт. 1992. ТНе керагабеб епапбботегк оГ 2'-беоху-3'-бНбасуббббпе (ВСН 189) ЬобН бпНбЬбб Нитап бттипобейсбепсу убгик герйсаббоп бп уббто. АпббтбстоЬ Адепбк СНетобНег 36:202-5.
10. Эе С1етсц, Е. 1994. Н1У текбкбапсе бо геуегке бтапкстбрбаке бпНбЬбботк. ВбосНет. РНагтасо1. 47:155-69.
11. 8.Ь. Иоопд, С.Н. Ткаб, В.Р. 8сНбпахб, И.С. Ьбобба, апб У.С. СНепд. 1991. 1пНбЬбббоп оГ бНе герйсаббоп оГ Нераббббк В убгик бп уббто Ьу 2',3'-бббеоху-3'-бНбасуббббпе апб ге1абеб апа1одиек. Ргос. Асаб. 8сб. И8А 88:8495-9.
12. С.К ИибксНтап, Е.С. Вгббдек, 8.Н. Ьби, Е. Си11еп, X. Сио, М. КикНапоуа, апб У.С. СНепд. 1998. МебаЬо1бкт оГ 2',3'-бббеоху-2',3'-бббеНубго-Ьеба-Ь(-)-5-Йиогосуббббпе апб ббк асббуббу бп сотЬбпаббоп теббН с1бпбса11у арргоуеб апбб-Нитап бттипобейсбепсу убгик Ьеба-Э(+) пис1еокббе апа1одк бп уббто. АпббтбстоЬ Адепбк СНетобНег 42:1799-804.
13. РУ. Репд, А.А. боНпкоп, К.А. боНпкоп, апб К.8. Апбегкоп. 2001. 1пкбдНбк бпбо бНе то1еси1аг тесНапбкт оГ тббосНопбгбаб бохбсббу Ьу АГО8 бгидк. б. Вбо1. СНет. 276:23832-7.
14. К. Се1топ, 6.8. Мопбапег, М. Раппбпд, б.В. 8тббН, б. Еа1ибх, С. Ткоикак, б. С611, С. ^е11к, М. О'8НаидНпекку, М. ^абпЬегд, апб еб а1. 1989. №бпге, ббте соигке апб боке берепбепсе оГ хббоуиббпе-ге1абеб кббе еГГесбк: геки1бк Ггот бНе МиНбсепбег Сапаббап АхббобНутбббпе Тгба1. Аббк 3:555-61.
15. С. Сокке1бп, В.Р. 8сНбпахб, б.Р. 8оттабоккб, С. МабНе, М.С. Вегдодпе, А.М. АиЬегббп, А. Кбтп, апб
б.Ь. 1тЬасН. 1994. Апбб-Нитап бттипобейсбепсу убгик асббубббек оГ бНе Ьеба-Ь епапбботег оГ 2',3'бббеохусуббббпе апб ббк 5-Йиото бетбуаббуе бп уббто. АпббтбстоЬ Адепбк СНетобНег 38:1292-7.
16. У. Нататобо, Н. NакакНбта, Т. Мабкиб, А. Мабкиба, Т. Иеба, апб Ν. Уататобо. 1987. 1пНбЬббогу еГГесб оГ 2',3'-бббсНубго-2')3'-бббеохупис1еокббек оп бпРесббуббу, суборабНбс еГГесбк, апб герйсаббоп оГ Нитап бттипобейсбепсу убгик. АпббтбстоЬ Адепбк СНетобНег 31:907-10.
17. К. НагадисНб, 8. Такеба, Н. Тапака, Т. Шамба, М. ВаЬа, С.Е. ЭибксРтап, апб У.С. СНепд. 2003. 8упбНекбк оГ а НбдНбу Асббуе №\ν Апбб-Н1У Адепб 2',3'-ЭббеНубго-3'беоху-4'-ебНупу1бНутбббпе. ВбоогдМеб СНет 8еббег 13:3775-3777.
18. А.А. боНпкоп, А.8. Вау, Р Напек, Ζ. 8ио, РМ. Со1асбпо, К.8. Апбегкоп, апб К.А. боНпкоп. 2001. Тохбсббу оГ апббубга1 пис1еокббе апа1одк апб бНе Нитап тббосНопбгба1 ^NΛ ро1утегаке. Р Вбо1. СНет. 276:40847-57.
19. Ьатбег, В.А. 1995. Убта1 текбкбапсе апб бНе ке1есббоп оГ апббгебтоубта1 сотЬбпаббопк. Р Асцибг 1ттипе ИеГбс 8упбг Нит Вебгоубго1 10 8ирр1 1:828-33.
20. В.А. Ьатбег, В. СНекеЬго, апб Ό.Ό. ВбсНтап. 1990. 8иксерббЬб1бббек оГ хббоупббпе-киксерббЫе апб гекбкбапб Нитап бттипобейсбепсу убгик бко1абек бо апббубга1 адепбк бебеттбпеб Ьу икбпд а циапбббаббуе р1ацие гебисббоп аккау. АпббтбстоЬ Адепбк СНетобНег 34:436-41.
21. Ь.8. Ьее, апб У.С. СНепд. 1976. Нитап беохубНутбббпе кбпаке. РРитбйсаббоп апб депега1 ргорегббек оГ бНе субор1актбс апб тббосНопбтба1 бкохутек бегбуеб Ггот Ь1акб се11к оГ асибе туе1осуббс 1еикетба. б. Вбо1. СНет. 251:2600-2604.
22. Ье^бк, апб М.С. Иа1акак. 1995. МббосНопбгба1 бохбсббу оГ апббубта1 бгидк. №1б Меб 1:417-22.
23. Т.8. Ьбп, М^. Ьио, М.С. Ьби, 8.В. Раб, С.Е. ПибксНтап, апб У.С. СНепд. 1994. Апббубта1 асббуббу оГ 2',3'-бббеоху-Ьеба-Ь-5-Гбиотосубббгпе (Ьеба-Ь-РббС) апб 2',3'-бббеоху-Ьеба-Ь-суббббпе (Ьеба-Ь-ббС) адабпкб Нераббббк В убгик апб Нитап бттипобейсбепсу убгик буре 1 бп уббто. ВбосНет. РНаппасо1. 47:171-4.
- 26 012844
24. Τ.8. Ып, М.2. Ьио, М.С. Ьт, 8.В. Ра1, О.Е. Ои15сйтап, апб У.С. Сйепд. 1994. 8уп!йе515 апб Ью1од1са1 еуа1иайоп оП 2',3'-б1беоху-Ь-рупт1бте пис1ео51бе5 а§ ро!епйа1 апйуйа1 адепй адатй йитап 1ттипобейаепсу νίπ.15 (Н1У) апб йераййк В νίπ.15 (НВУ). I. Меб. Сйет. 37:798-803.
25. Τ.8. Ьт, М.2. Ьио, М.С. Ьш, У.Ь. 2йи, Е. Ои11еп, О.Е. Пи!8сйтап, апб У.С. Сйепд. 1996. Ье51дп апб 5уп1йе515 оП 2',3'-б1беоху-2',3'-б1бейубго-Ье!а-Ь-суйбте (Ье!а-Ь-б4С) апб 2,3'-б1беоху 2',3'-б1бейубгоЬе!а-Ь-5-Пиогосуйбте (Ье!а-Ь- Рб4С), 1тео ехсерйопа11у ро1еп1 1пй1Ьйогу оП йитап йераййк В νίπ.15 (НВУ) апб ро1еп1 тЫЬйош оП йитап 1ттипобейс1епсу νίπ.15 (НГУ) ш уйго. I. Меб. Сйет. 39:1757-9.
26. Τ.8. Ьт, К.Е. 8сйтахк М.8. Сйеп, Е. Шипеу-Шота^, апб \У.Н. РгивоПП. 1987. Апйу1га1 асйуйу оП 2',3'-б1беохусуйбт-2'-епе(2',3'-б1беоху-2',3'-б1бейубгосуйбте) адатй йитап 1ттипобейс1епсу νίπ.15 т νίйо. Вюсйет. Рйаппасо1. 36:311-6.
27. Τ.8. Ьт, К.Е. 8сйта/1, апб XV.Н. РгивоПП. 1987. Ро1еп1 апб §е1есйуе т νίΙΐΌ асйуйу оП 3'беоху1йуш1бт-2'-епе (3'-беоху-2',3'-б1бейубго1йут1бте) адатй йитап 1ттипобейс1епсу νίπΐδ, Вюсйет. Рйаппасо1. 36:2713-8.
28. ΖΉ. Ьи, Р. 2йапд, апб Р.В. Ь|а5Ю. 1993. СотрагЬоп оП б1йубгорупт1бте бейубгодепаке Пгот йитап, га!, р1д апб соте 1теег. Вюсйетюа1 апб 1ттипо1одюа1 ргорегйек. Вюсйет. Рйагтасо1. 46:945-52.
29. Г.Ь. Маад, Р.М. Вуб/етехкк М.1. МсКоЬегй, Ό. СгатеПогб-Ки!й, ЬР. Уегйеубеп, апб ЕЛ. РгЬЬе. 1992. 8уп1йе5Ь апб апй-НГУ асйуйу оП 4'-а/|бо- апб 4'-те!йоху пис1ео81бе8. I. Меб. Сйет. 35:1440-51.
30. ИЛ. Мебта, С.Н. Лак 6.Ό. Нзтпд, апб У.С. Сйепд. 1994. СотрагЬоп оП Мйосйопбпа1 Могрйо1оду, Мйосйопбпа1 ΟΝΛ Соп!еп!, апб Се11 У1аЫ1йу т СиЙигеб Се11§ Τιόπ^6 тейй Лиге Апй-Нитап Гттипобейаепсу У1ги8 П1беохупис1ео81бе8. АпйтюгоЬ Адепй Сйето!йег 38:1824-1828.
31. IV. Ме11ог8, О.Е. Лийсйтап, 6.1. Гт, Е. Латоп!апе, 8.Р. νίπ^Γ, апб У.С. Сйепд. 1992. Гп уйго §е1есйоп апб то1еси1аг сйагасЮпхайоп оП йитап 1ттипобейс1епсу νίπ.ΐ5-1 ге^МагИ!о поп-пис1ео81бе тй1Ь11ог5 оП гетегее 1гап5спр1а5е. Мо1. Рйагтасо1. 41:446-51.
32. С. О-Уапд, Н.У. Χνι.ι, В. Ега§ег-8тйй, апб 1<.А.М. ΧνηΠ^Γ. 1992. 8уп1йе5Ь оП 4'-Суапо!йут1бте апб Апа1од§ а§ Ро1еп1 ГпЫЬйош оП НГУ. Τе!^айеб^оп Ьейегз 33:37-40.
33. XV.В. Рагкег, апб У.С. Сйепд. 1995. П18гирйоп оП Епегду Ме!аЬой§т апб Мйосйопбпа1 Рипсйоп, р. 483-490, №иго!охюо1оду: Арргоасйез апб Ме!йоб§. Асабетю Рге§8 Гпс., №те Уогк.
34. XV.В. Рагкег, апб У.С. Сйепд. 1994. Мйосйопбпа1 Шх^йу оП Ап!Мга1 №с1еоыбе Апа1од§. Л1е 1оита1 оП НГНКеазеагсй 6:57-61.
35. Кюйтап, Ό.Ό. 1993. Ре5151апсе оП сйшса1 1<о1а(е8 оП йитап 1ттипобейс1епсу νίπ.15 !о апйгейоуйа1 адепК Апйт1сгоЬ Адепй Сйето!йег 37:1207-13.
36. Ό.Ό. Кюйтап, М.А. ЕЬсйк М.Н. Опесо, М.8. ОоййеЬ, Р.А. Уо1Ьегбтд, О.Ь. Ьазкт, ЬМ. Ьеебот, ЬЕ. Огоортап, Ό. Мйбуап, М.8. Нйъсй, апб е! а1. 1987. Л1е !охюйу оП а/|бо1йут1бте ^ΖΤ) т !йе 1геа1теп1 оП райепй тейй АЮ8 апб АГЛ8-ге1а!еб сотр1ех. А боиЬ1е-Ьйпб, р1асеЬо-соп!го11еб 1г1а1. N Епд1 I. Меб 317:192-7.
37. К.Г.8сйтаг1, 6Κ. Сйи, А. Реск, А. МсМШап, Р. Ма1йИ, Ό. Саппоп, Ь.8. 1еопд, IV. Веасй, νΒ. Сйо1, 8. Уео1а, апб е! а1. 1992. Асйуйкез оП !йе Поиг орйса1 Ьотеге оП 2',3'-б1беоху-3'-!й1асуйбте (ВСН-189) адатй йитап 1ттипобейс1епсу νίπ.15 !уре 1 т йитап 1утрйосу!е§. АпйтюгоЬ Адеп!§ Сйето!йег 36:672-6.
38. ЬР.8оттабо581, Ζ. Ζ^υ М.1. Нйсйсоск, Н.М. МсС1иге, М. е1 1<оипк апб Е. Сге!!оп. 1992. Са!аЬойкт оП 2',3'-^^бейуб^о-2',3-^^беоxуΤйут^б^пе (Ό4Τ) т Г§о1а!еб Нера!осу!е§ апб т Рйекик Мопкеук. Ргос.Аппи. Меейпд Атепсап Сапсег Резеагсй 33:А3253. Ипку. оП А1аЬата.
39. Р.Уагсйоап, ЬМ. Р1иба, Р.У. Лютах, Н. Мйшуа, Р. Вгоитееш, Κ.Χ1. Χν^τ-ΠΕ Ν. Найтап, Ό.6. 1ойп§, апб 8. Вгобег. 1990. Ьопд-!егт !ох1сйу/асйуйу ргой1е оП 2',3'-б1беохуто8те т АЮ8 ог АГЛ8-ге1а!еб сотр1ех. Ьапсе! 336:526-9.

Claims (41)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение в соответствии с формулой в которой В обозначает или
    - 27 012844
    К1 обозначает Н, ацильную группу, С1-С20алкильную или эфирную группу;
    К2 обозначает Н, ацильную группу, С1-С20алкильную или эфирную группу, фосфатную, дифосфатную, трифосфатную, фосфодиэфирную группу либо группу
    Р—
    I
    ОК8
    ОР.’ или
    N1.1 обозначает радикал биологически активного противовирусного соединения, таким образом, чтобы аминогруппа или гидроксильная группа из указанного биологически активного противовирусного соединения образовывала фосфатную, фосфорамидатную, карбонатную или уретановую группу с соседней частью;
    К8 обозначает Н или С1-С20алкильную или эфирную группу;
    К3 обозначает С3 или С4алкильную группу; -(СН2)и-С^С-Ка, К3а и К3Ь, каждый независимо, обозначают Н, Е, С1, Вг или I;
    Ка обозначает Н, Е, С1, Вг, I или -С1-С4алкил;
    Υ обозначает Н, Е, С1, Вг, I или -С1-С4алкил;
    к составляет 0, 1 или 2 и и составляет 0, 1, 2, 3, 4 или 5, либо их аномеры, фармацевтически приемлемые соли, полиморфы или их сольваты.
  2. 2. Соединение по п.1, в котором В обозначает или
  3. 3. Соединение по п.1 или 2, в котором К3 обозначает -(СН2)и-С=С-Ка, или
  4. 4. Соединение по любому из пп.1-3, в котором К обозначает Е, С1, Вг, I, С1-С3алкил, -С^С-Ка, \ /* \ /н х или хи X обозначает Н, С1-С4алкил, Е, С1, Вг или I.
  5. 5. Соединение по п.1, в котором К обозначает СН3, К3 обозначает -(СН2)и-С=С-Ка, и составляет 0 и Ка обозначает Н.
  6. 6. Соединение по любому из пп.1-5, в котором К3а и К3Ь оба обозначают Н.
  7. 7. Соединение по любому из пп.1-6, в котором К2 обозначает Н.
  8. 8. Соединение по п.1, которое обозначает
  9. 9. Соединение по п.8, в котором К2 обозначает Н, ацильную группу, фосфатную, дифосфатную,
    - 28 012844 трифосфатную или фосфодиэфирную группу.
  10. 10. Соединение по п.8, в котором Я2 обозначает Н.
  11. 11. Соединение по п.1, в котором В обозначает и
    \=Ζ
  12. 12. Соединение по п.11, в котором Я3 обозначает -(СН2)п-С=С-Яа, к или п составляет 0.
  13. 13. Соединение по любому из пп.11 или 12, в котором Я обозначает Н, Р, С1, Вг, I, СН3, -С=С-Яа, \ /Н нч /Н хБ х или хи X обозначает Н, С1-С4алкил, Р, С1, Вг или I.
  14. 14. Соединение по п.11 или 12, в котором Я обозначает СН3, Я3 обозначает -(СН2)п-С=С-Яа, п составляет 0 и Яа обозначает Н.
  15. 15. Соединение по любому из пп.11-14, в котором Я3а и Я3Ь оба обозначают Н.
  16. 16. Соединение по любому из пп.11-15, в котором Я2 обозначает Н.
  17. 17. Фармацевтический состав, включающий эффективное количество соединения по п.1 в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем, добавкой или наполнителем.
  18. 18. Состав по п.17, в котором В обозначает
  19. 19. Состав по п.17 или 18, в котором Я3 обозначает -(СН2)п-С=С-Яа, или
  20. 20. Состав по любому из пп.17-19, в котором Я обозначает Р, С1, Вг, I, С1-С3алкил, -С=С-Яа, \ /« х или
  21. 21. Состав по п.17, в котором Я обозначает СН3, Я3 обозначает -(СН2)п-С=С-Яа, п составляет 0 и Яа обозначает Н.
  22. 22. Состав по любому из пп.17-21, в котором Я3а и Я3Ь оба обозначают Н.
  23. 23. Состав по любому из пп.17-22, в котором Я2 обозначает Н.
  24. 24. Состав по п.17, в котором указанное соединение обозначает \ /« и X обозначает Н, С1-С4алкил, Р, С1, Вг или I.
  25. 25. Состав по п.24, в котором Я2 обозначает Н, ацильную группу, фосфатную, дифосфатную, трифосфатную или фосфодиэфирную группу.
  26. 26. Состав по любому из пп.24 или 25, в котором Я2 обозначает Н.
  27. 27. Состав по п.17, в котором В обозначает
  28. 28. Состав по п.27, в котором Я3 обозначает -(СН2)п-С=С-Яа, ί составляет 0.
    или и п \ /н
  29. 29. Состав по п.27 или 28, в котором Я обозначает Н, Р, С1, Вг, I, СН3, -С=С-Яа, X или
    - 29 012844
    ΖΑ X ; X обозначает Н, С1-С4алкил, Р, С1, Вг или I.
  30. 30. Состав по любому из пп.27-29, в котором В обозначает СН3, В3 обозначает -(СН2)и-СТС-Ва, и составляет 0 и в, обозначает Н.
  31. 31. Состав по любому из пп.27-30, в котором В3а и В3Ь оба обозначают Н.
  32. 32. Состав по любому из пп.27-31, в котором В2 обозначает Н.
  33. 33. Состав по п.27, в котором указанное соединение обозначает
    К.2О
    ΙΗ
    О где В1 обозначает Н или ацильную группу, В2 обозначает Н, ацильную группу, фосфатную, дифосфатную, трифосфатную или фосфодиэфирную группу.
  34. 34. Состав по п.33, в котором В1 обозначает Н и В2 обозначает Н.
  35. 35. Состав по любому из пп.17-34, дополнительно включающий по меньшей мере одно дополнительное средство против ВИЧ.
  36. 36. Состав по п.35, в котором указанное дополнительное средство против ВИЧ выбирают из груп- пы, состоящей из ббС, абакавира, 661, ббА, 3ТС, ΑΖΤ, Ό4Τ, РТС, РббС, Рб4С, Атазанавира, Адефовир дипивоксила, Тенофовир дизопроксила, Этекавира, Индинавира, КН1-227, 2-[3-[3-(8)[(тетрагидрофуранилокси)карбонил]амино]-4-фенил-2(В)-гидроксибутил]-И-(1,1 -диметилэтил)декагидро-3-изохинолинкарбоксамида,УВ-11,328, КИ1-174, Уа1-Уа1-81а, СРС53820, бис-Уа1 НОЕ1-И2 азапептид изостера, производного С2-8ут Фосфиникамида, 2,5-Диамино-И,И'-бис-(И-бензилоксикарбонилуэлил)1,6-дифенил-3(8),4(8)-гексанедиол ВхОСУа1РНе|б|СНОН(88)|РНеУа1ВхОС. 2,5-Диамино-И,И'-бис-(Ибензилоксикарбонилуэлил)-1,6-дифенил-3(В),4(В)-гексанедиол В7ОСУа1Рйе[б1СНОН(ВВ)]РйеУа1В7ОС, бис-(8ΑΤΕ)ббΑМР, В1РА2186В8, Агенеразы, А-98881, А-83962, А-80987, (2-Нафталкарбонил)Ази[декарбонилфегидроксиэтил]ПроОтертБутила, производного 2-Аминобензилстатина валила СЬх, производного 10Н-2(СЬ7-Уа1ИН)3РЬРг[14] парациклофана, производного 10Н-2(СЬ/-Уа1ИН)3РйРг[ 13] парациклофана, производного 10Н-2(СЬ/-Уа1ИН)3РйРг[13] метациклофана, производного 14] парациклофана, 1-(20НРг)-4-замещенного пиперазина (сциклопропила), производного тиенилкарбамата, 1(20НРг)-4-замещенного пиперазина (циклобутила), производного тиенилкарбамата, 1-(20НРг)-4замещенного пиперазина (3-пентила), производного тиенилкарбамата, производного 10Н-2(СЬхУа1ИН)3РЬРг[17] парациклофана, А-81525, ХМ323, Типранавира, производных Тиенопирида-СОИ тиенилуретана, 8ΌΖ РВ1 053, 8Ό146, Телинавира, (В)2^и^иСΟΑ8ηРйе[СΗΟΗСΗ2]Р^рСΟNΗίВи, Сахинавира, производного Сахинавира/Мелфинавира, аналога Изохин-СОИ Τ11Γ-Τ11Γ уретана, аналога Изохин-СОИ тиенилуретана, В-87366, ДМФ 460, Ь685,434, производного Ь685,434-6-гидроксила, Ь685,434-ОЕ1ИМе2, производного Ь685,434-Орг-Морф, Ь689,502, Лазинавира, Алувирана, аналога Нельфинавир-октагидротиенопиридина, Р9941, Палинавира и Пенициллина, аналога 2-Изохин-ОНРгИН2 и их смесей.
  37. 37. Состав по п.35, в котором указанное дополнительное средство против ВИЧ выбирают из группы, состоящей из ббС, абакавира, 661, 66α, 3ТС, ΑΖΤ, Ό4Τ, РТС, РббС и рб4С.
  38. 38. Применение состава по любому из пп.17-37 при производстве лекарственного препарата для лечения вирусной инфекции, вызванной вирусом, выбранным из группы, состоящей из вирусов 1 и 2 иммунодефицита человека (ВИЧ-1 и ВИЧ-2), вирусов 1 и 2 Т-клеточного лейкоза человека (НТСУ-1 и НТСУ-2), респираторного синтициального вируса (В8У), вируса папилломы человека (НРУ), аденовируса, вируса гепатита В (НВУ), вируса гепатита С (НСУ), вируса Эпштейна-Барра (ЕВУ), вируса ветряной оспы-опоясывающего герпеса (νΖν), цитомегаловируса (СМУ), вирусов 1 и 2 простого герпеса (Н8У-1 и Н8У-2), вируса 8 герпеса человека (ННУ-8, также известного как вирус, сопутствующий саркоме Капоши) и флавивирусов, включающих вирус желтой лихорадки, вирус лихорадки денге, вирусы японского энцефалита и вирусы лихорадки Западного Нила.
  39. 39. Применение по п.38, в котором указанный вирус является ВИЧ-1 или 2.
  40. 40. Применение состава по любому из пп.17-37 при производстве лекарственного препарата для снижения вероятности либо для замедления наступления состояния, являющегося вторичным от вирусной инфекции у пациента при риске развития указанного состояния.
  41. 41. Применение по п.40, в котором указанное состояние является СПИДом, а указанная вирусная инфекция является ВИЧ-1 или 2.
EA200501325A 2003-02-19 2004-02-18 Аналоги противовирусных нуклеозидов и способы лечения вирусных инфекций, в частности вич-инфекций EA012844B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US44855403P 2003-02-19 2003-02-19
PCT/US2004/004713 WO2005011709A1 (en) 2003-02-19 2004-02-18 Anti-viral nucleoside analogs and methods for treating viral infections, especially hiv infections

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200501325A1 EA200501325A1 (ru) 2006-02-24
EA012844B1 true EA012844B1 (ru) 2009-12-30

Family

ID=34115263

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200501325A EA012844B1 (ru) 2003-02-19 2004-02-18 Аналоги противовирусных нуклеозидов и способы лечения вирусных инфекций, в частности вич-инфекций

Country Status (14)

Country Link
US (3) US7589078B2 (ru)
EP (2) EP2298783B1 (ru)
JP (1) JP4980059B2 (ru)
KR (2) KR101228503B1 (ru)
CN (2) CN102174038A (ru)
AU (1) AU2004260630B2 (ru)
BR (1) BRPI0407374A (ru)
CA (1) CA2514466C (ru)
EA (1) EA012844B1 (ru)
HK (1) HK1087341A1 (ru)
MX (1) MXPA05008736A (ru)
PL (2) PL219609B1 (ru)
WO (1) WO2005011709A1 (ru)
ZA (1) ZA200506630B (ru)

Families Citing this family (65)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1501841A2 (en) 2002-04-26 2005-02-02 Gilead Sciences, Inc. Non nucleoside reverse transcriptase inhibitors
JP4980059B2 (ja) 2003-02-19 2012-07-18 エール ユニヴァーシティ 抗ウイルスヌクレオシド類似体およびウイルス感染特にｈｉｖ感染の処置方法
WO2004096285A2 (en) 2003-04-25 2004-11-11 Gilead Sciences, Inc. Anti-infective phosphonate conjugates
KR20060022647A (ko) 2003-04-25 2006-03-10 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 키나아제 억제 포스포네이트 유사체
WO2005002626A2 (en) 2003-04-25 2005-01-13 Gilead Sciences, Inc. Therapeutic phosphonate compounds
US7407965B2 (en) 2003-04-25 2008-08-05 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate analogs for treating metabolic diseases
US20050261237A1 (en) * 2003-04-25 2005-11-24 Boojamra Constantine G Nucleoside phosphonate analogs
US7452901B2 (en) 2003-04-25 2008-11-18 Gilead Sciences, Inc. Anti-cancer phosphonate analogs
US7427636B2 (en) 2003-04-25 2008-09-23 Gilead Sciences, Inc. Inosine monophosphate dehydrogenase inhibitory phosphonate compounds
CN101410120A (zh) * 2003-04-25 2009-04-15 吉里德科学公司 抗炎的膦酸酯化合物
US7432261B2 (en) 2003-04-25 2008-10-07 Gilead Sciences, Inc. Anti-inflammatory phosphonate compounds
US7470724B2 (en) * 2003-04-25 2008-12-30 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate compounds having immuno-modulatory activity
PT1628685E (pt) 2003-04-25 2011-03-16 Gilead Sciences Inc Análogos de fosfonatos antivirais
GB0317009D0 (en) * 2003-07-21 2003-08-27 Univ Cardiff Chemical compounds
WO2005044279A1 (en) 2003-10-24 2005-05-19 Gilead Sciences, Inc. Purine nucleoside phosphonate conjugates
EP1678322A2 (en) 2003-10-24 2006-07-12 Gilead Sciences, Inc. Methods and compositions for identifying therapeutic compounds
WO2005044308A1 (en) 2003-10-24 2005-05-19 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate analogs of antimetabolites
BRPI0418031A (pt) * 2003-12-22 2007-04-17 Gilead Sciences Inc inibidores de quinase fosfonato-substituìdos
MXPA06006899A (es) * 2003-12-22 2006-09-04 Gilead Sciences Inc Derivados de carbovir y abacavir 4'-sustituidos asi como compuestos relacionados con actividad antiviral de virus de inmunodeficiencia humana y virus de la hepatitis c.
US20050153990A1 (en) * 2003-12-22 2005-07-14 Watkins William J. Phosphonate substituted kinase inhibitors
CA2502109C (en) 2004-03-24 2010-02-23 Yamasa Corporation 4'-c-substituted-2-haloadenosine derivative
ME01945B (me) 2004-07-27 2011-12-31 Gilead Sciences Inc Nukleozid-fosfonatni konjugati kao sredstva protiv hiv-a
US20060084628A1 (en) * 2004-10-19 2006-04-20 Achillion Pharmaceuticals Combination therapy for treating viral infections
CA2904692A1 (en) * 2005-09-26 2007-04-05 Gilead Pharmasset Llc Modified 4'-nucleosides as antiviral agents
WO2007067364A2 (en) * 2005-12-02 2007-06-14 Yale University Methods of treating cancer and other conditions or disease states using l-cytosine nucleoside analogs
WO2007065032A2 (en) * 2005-12-02 2007-06-07 The Regents Of The University Of California Compounds and methods for inhibiting viral entry
US20080078560A1 (en) * 2006-10-02 2008-04-03 Kevin Hall Motor seal
AR067412A1 (es) * 2007-07-06 2009-10-07 Gilead Sciences Inc Moduladores de propiedades farmaceuticas de productos terapeuticos
WO2009084655A1 (ja) 2007-12-27 2009-07-09 Oncolys Biopharma Inc. 4'-エチニルd4Tの製造方法
WO2009119785A1 (ja) * 2008-03-28 2009-10-01 浜理薬品工業株式会社 エチニルチミジン化合物の精製方法
WO2009125841A1 (ja) 2008-04-10 2009-10-15 浜理薬品工業株式会社 ５－メチルウリジンを出発原料とするエチニルチミジン化合物の製造方法
CN102089318B (zh) * 2008-07-08 2014-05-21 吉里德科学公司 Hiv抑制剂化合物的盐
PA8852101A1 (es) * 2008-12-08 2010-07-27 Medivir Ab Nucleótidos uracil ciclopropílicos
EP2385951A4 (en) * 2009-01-09 2013-05-29 Univ Cardiff PHOSPHORAMIDATE DERIVATIVES OF GUANOSINE NUCLEOSIDE COMPOUNDS FOR THE TREATMENT OF VIRAL INFECTIONS
MX2011008988A (es) 2009-02-27 2011-12-16 Siga Technologies Inc Derivados de tienopiridina para el tratamiento y prevencion de infecciones por el virus del dengue.
GB0907551D0 (en) 2009-05-01 2009-06-10 Univ Dundee Treatment or prophylaxis of proliferative conditions
US9212174B2 (en) 2010-02-15 2015-12-15 Nissan Chemical Industries, Ltd. Certain β-dihydrofuran derivatives
WO2011099442A1 (ja) 2010-02-15 2011-08-18 日産化学工業株式会社 β－グリコシド化合物の製造方法
EP2557177A4 (en) 2010-04-07 2013-09-25 Nissan Chemical Ind Ltd PROCESS FOR PRODUCING ACYLOXYPYRANONE COMPOUND, PROCESS FOR PRODUCING ALKYL COMPOUND, AND PROCESS FOR PRODUCING DIHYDROFURAN COMPOUND
WO2012048271A1 (en) * 2010-10-08 2012-04-12 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Phosphoramidate derivatization of inorganic polyphosphates and methods
WO2012166645A1 (en) * 2011-06-01 2012-12-06 Syndax Pharmaceuticals, Inc. Prodrugs of azacitidine 5' -diphosphate
WO2013066991A1 (en) * 2011-10-31 2013-05-10 Inhibitex, Inc. Crystalline solvates of nucleoside phosphoroamidates, their stereoselective preparation, novel intermediates thereof, and their use in the treatment of viral disease
BR112014014740B1 (pt) 2011-12-22 2021-08-24 Alios Biopharma, Inc Compostos de nucleosídeos, nucleotídeos e análogos destes, seu uso e composição farmacêutica
US9441007B2 (en) 2012-03-21 2016-09-13 Alios Biopharma, Inc. Substituted nucleosides, nucleotides and analogs thereof
USRE48171E1 (en) 2012-03-21 2020-08-25 Janssen Biopharma, Inc. Substituted nucleosides, nucleotides and analogs thereof
EP2852583A1 (en) 2012-05-23 2015-04-01 Bristol-Myers Squibb Company Sulfilimine and sulphoxide methods for producing festinavir
US20160060252A1 (en) 2013-04-16 2016-03-03 Bristol-Myers Squibb Company 5-methyluridine method for producing festinavir
GB201306947D0 (en) * 2013-04-17 2013-05-29 Univ Leuven Kath Novel antiviral compounds
US20160130260A1 (en) 2013-06-13 2016-05-12 Bristol-Myers Squibb Company Tert-butyl sulphoxide method for producing festinavir
WO2015095419A1 (en) * 2013-12-18 2015-06-25 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 4'-or nucleosides for the treatment of hcv
SG11201702430WA (en) * 2014-09-26 2017-04-27 Riboscience Llc 4'-vinyl substituted nucleoside derivatives as inhibitors of respiratory syncytial virus rna replication
KR20170073649A (ko) * 2014-10-28 2017-06-28 앨리오스 바이오파마 인크. 치환된 뉴클레오시드 유사체의 제조 방법
KR20180081598A (ko) 2015-11-20 2018-07-16 비브 헬스케어 유케이 (넘버4) 리미티드 Hiv 성숙 억제제 제형
JOP20170038B1 (ar) 2016-02-12 2021-08-17 Merck Sharp & Dohme مركبات للاستخدام لعلاج عدوى بفيروس hiv والوقاية منه
KR102456417B1 (ko) 2016-09-07 2022-10-19 아테아 파마슈티컬즈, 인크. Rna 바이러스 치료를 위한 2'-치환된-n6-치환된 퓨린 뉴클레오티드
US10851125B2 (en) 2017-08-01 2020-12-01 Gilead Sciences, Inc. Crystalline forms of ethyl ((S)-((((2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-yl)-4-fluoro-2,5-dihydrofuran-2-yl)oxy)methyl)(phenoxy)phosphoryl(-L-alaninate
KR20200056420A (ko) * 2017-09-21 2020-05-22 리보사이언스 엘엘씨 Hcv rna 복제의 억제제로서 4'-플루오로-2'-메틸 치환된 뉴클레오시드 유도체
EP3746134A1 (en) 2018-02-02 2020-12-09 Maverix Oncology, Inc. Small molecule drug conjugates of gemcitabine monophosphate
KR101893988B1 (ko) * 2018-05-16 2018-08-31 (주)에빅스젠 로다닌 유도체를 함유하는 aids 예방 또는 치료용 약학 조성물
CN112512529A (zh) * 2018-07-27 2021-03-16 富士胶片株式会社 环戊烯嘌呤衍生物或其盐
CN113631563A (zh) 2019-01-25 2021-11-09 布朗大学 用于治疗、预防或逆转年龄相关炎症和疾病的组合物和方法
CN109761842B (zh) * 2019-02-01 2021-11-30 浙江工业大学 α-F-β-NHAc-羰基化合物的合成方法
AU2021237718B2 (en) 2020-03-20 2023-09-21 Gilead Sciences, Inc. Prodrugs of 4'-C-substituted-2-halo-2'-deoxyadenosine nucleosides and methods of making and using the same
KR20230130898A (ko) 2022-03-04 2023-09-12 동아대학교 산학협력단 N4-이소부티릴옥시시티딘 모방체 합성과 이의 항바이러스 용도를 포함하는 바이러스 감염 치료용 조성물
WO2024015916A2 (en) * 2022-07-13 2024-01-18 Thomas Jefferson University 4'-alkyne-2'-deoxycytidine-based compounds and anti-cancer uses thereof

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH05230058A (ja) * 1992-02-24 1993-09-07 Yamasa Shoyu Co Ltd ４’−炭素置換ピリミジンヌクレオシド及びその製造法
JPH0680688A (ja) * 1992-09-03 1994-03-22 Asahi Breweries Ltd ４’−メチルヌクレオシド誘導体
US5739396A (en) * 1991-12-09 1998-04-14 Stanford University Asymmetric ligands useful for transition metal catalyzed bond forming reactions
US5763418A (en) * 1994-12-13 1998-06-09 Akira Matsuda 3'-substituted nucleoside derivatives
JPH10298194A (ja) * 1997-04-24 1998-11-10 Akira Matsuda ２−デオキシ−３−エチニル−β−Ｄ−リボフラノシル誘導体
US5880294A (en) * 1996-05-16 1999-03-09 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. D-pentofuranose derivatives and process for preparing the same
JPH11349596A (ja) * 1998-06-08 1999-12-21 Yamasa Shoyu Co Ltd ４’−メチルヌクレオシド化合物
WO2000069876A1 (en) * 1999-05-12 2000-11-23 Yamasa Corporation 4'-c-ethynyl pyrimidine nucleosides
WO2002100415A2 (en) * 2001-06-12 2002-12-19 F. Hoffmann-La Roche Ag 4'-substituted nucleosides for the treatment of diseases mediated by the hepatitis c virus

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4978655A (en) * 1986-12-17 1990-12-18 Yale University Use of 3'-deoxythymidin-2'-ene (3'deoxy-2',3'-didehydrothymidine) in treating patients infected with retroviruses
US4880784A (en) 1987-12-21 1989-11-14 Brigham Young University Antiviral methods utilizing ribofuranosylthiazolo[4,5-d]pyrimdine derivatives
US5179084A (en) 1989-04-10 1993-01-12 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Antiviral phosphoric acid esters of oxetanocins
US5192749A (en) * 1990-05-21 1993-03-09 Syntex (U.S.A.) Inc. 4'-substituted nucleosides
ZA931934B (en) 1992-03-18 1993-03-18 Us Bioscience Compostitions of N-(phosphonoacetyl)-L-aspartic acid and methods of their use as broad spectrum antivirals
US5376633A (en) 1992-09-30 1994-12-27 Lezdey; John Method for deactivating viruses in blood component containers
US5888767A (en) 1996-11-27 1999-03-30 The Johns Hopkins University School Of Medicine Method of using a conditionally replicating viral vector to express a gene
US5891874A (en) 1996-06-05 1999-04-06 Eli Lilly And Company Anti-viral compound
US5821242A (en) 1996-06-06 1998-10-13 Eli Lilly And Company Anti-viral compounds
US6180604B1 (en) 1996-08-21 2001-01-30 Micrologix Biotech Inc. Compositions and methods for treating infections using analogues of indolicidin
WO1998013069A2 (en) 1996-09-09 1998-04-02 Supratek Pharma, Inc. Fluorinated copolymeric pharmaceutical adjuncts
EP1001767A4 (en) 1997-06-04 2001-07-04 Lilly Co Eli ANTIVIRAL CONNECTIONS
KR20010079907A (ko) 1998-09-25 2001-08-22 비로파마 인코포레이티드 바이러스 감염 및 관련 질병의 치료 및 예방 방법
US6240690B1 (en) 2000-02-02 2001-06-05 Roof & Metal Systems, Inc. Vented metal roof
RU2182013C1 (ru) 2001-03-05 2002-05-10 Казанцева Наталья Вениаминовна Способ лечения нейродегенеративных заболеваний мозга
EP1438054A4 (en) * 2001-09-28 2006-07-26 Idenix Cayman Ltd METHODS AND COMPOSITIONS FOR TREATING FLAVIVIRUS AND PESTIVIRUS USING MODIFIED NUCLEOSIDE AT 4 'POSITION
EP1435974A4 (en) * 2001-09-28 2006-09-06 Idenix Cayman Ltd METHOD AND COMPOSITIONS FOR TREATING HEPATITIS C VIRUS WITH 4'-MODIFIED NUCLEOSIDES
US20070032448A1 (en) * 2002-01-17 2007-02-08 Zhi Hong Sugar modified nucleosides as viral replication inhibitors
JP4980059B2 (ja) * 2003-02-19 2012-07-18 エール ユニヴァーシティ 抗ウイルスヌクレオシド類似体およびウイルス感染特にｈｉｖ感染の処置方法

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5739396A (en) * 1991-12-09 1998-04-14 Stanford University Asymmetric ligands useful for transition metal catalyzed bond forming reactions
JPH05230058A (ja) * 1992-02-24 1993-09-07 Yamasa Shoyu Co Ltd ４’−炭素置換ピリミジンヌクレオシド及びその製造法
JPH0680688A (ja) * 1992-09-03 1994-03-22 Asahi Breweries Ltd ４’−メチルヌクレオシド誘導体
US5763418A (en) * 1994-12-13 1998-06-09 Akira Matsuda 3'-substituted nucleoside derivatives
US5880294A (en) * 1996-05-16 1999-03-09 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. D-pentofuranose derivatives and process for preparing the same
JPH10298194A (ja) * 1997-04-24 1998-11-10 Akira Matsuda ２−デオキシ−３−エチニル−β−Ｄ−リボフラノシル誘導体
JPH11349596A (ja) * 1998-06-08 1999-12-21 Yamasa Shoyu Co Ltd ４’−メチルヌクレオシド化合物
WO2000069876A1 (en) * 1999-05-12 2000-11-23 Yamasa Corporation 4'-c-ethynyl pyrimidine nucleosides
WO2002100415A2 (en) * 2001-06-12 2002-12-19 F. Hoffmann-La Roche Ag 4'-substituted nucleosides for the treatment of diseases mediated by the hepatitis c virus

Non-Patent Citations (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BEREZOVSKAYA YU.V. et al.: "Creating novel molecular transport systems: the synthesis and antiviral activity of mixed succinates of deoxynucleotides and hydrophobic molecules", Pharmaceutical Chemistry Journal (Translation of Khimiko-Farmatsevticheskii zhurnal), 35(3), 134-138 (English) 2001, [on-layn][Naydeno 2006-02-26]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 136:151384 *
CRAMER JANINA et al.: "Exploring the Effects of Active Site Constraints on HIV-1 Reverse Transcriptase DNA Polymerase Fidelity", Journal of Biological Chemistry (English) 2002, 277 (46), 43593-43598, [on-layn][Naydeno 2006-02-17]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 138:133038 *
DE ZWART MAARTEN et al.: "A functional screening of adenosine analogs at the adenosine A2B receptor: a search for potent agonists", Nucleosides & Nucleotides (English) 19, 17(6), 969-985 (English), 1998, [on-layn][Naydeno 2006-02-22]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 129:75990 *
ESTRADA ERNESTO et al.: "In Silico Studies toward the Discovery of New Anti-HIV Nucleoside Compounds with the Use of TOPS-MODE and 2D/3D Connectivity Indices. 1. Pyrimidyl Derivatives", Journal of Chemical Information and Computer Sciences (English) 2002, 42(5), 1194-1203, [on-layn][Naydeno 2006-02-17]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 137:257266 *
HAI TON T. et al.: "Species- or isozyme-specific enzyme inhibitors. 7. Selective effects in inhibitions of rat adenylate kinase isozymes by adenosine 5'-phosphate derivatives", Journal of Medicinal Chemistry (English) 1982, 25(7), 806-12, [on-layn][Naydeno 2006-02-22]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 97:2705 *
HAI TON T. et al.: "Species- or isozyme-specific enzyme inhibitors. 9. Selective effects in inhibitions of rat pyruvate kinase isozymes by adenosine 5'-diphosphate derivatives", Journal of Medicinal Chemistry (English) 1982, 25(10), 1184-8, [on-layn][Naydeno 2006-02-22]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 97:211265 *
HARAGUCHI KAZUHIRO et al.: "Allylic Substitution of 3',4'-Unsaturated Nucleosides: Organosilicon-Based Stereoselective Access to 4'-C-Branched 2',3'-Didehydro-2',3'-dideoxyribonucleosides", Journal of Organic Chemistry (English) 1996, 61(3), 851-8, [on-layn][Naydeno 2006-02-22]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 124:202920 *
KATO KEISUKE et al.: "Enantio- and diastereoselective synthesis of 4'-alpha-substituted carbocyclic nucleosides", Tetrahedron: Asymmetry, 9(6), 911-914 (English), 1998 [on-layn][Naydeno 2006-02-22]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 128:308693 *
KATO KEISUKE et al.: "Stereoselective synthesis of 4'-alpha-alkylcarbovir derivatives based on an asymmetric synthesis or chemo-enzymatic procedure", Chemical & Pharmaceutical Bulletin (English), 1999, 47(9), 1256-1264, [on-layn][Naydeno 2006-02-22]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN. CA 131:322858 *
KITANO KENJI et al.: "Synthesis of novel 4'-C-methyl-pyrimidine nucleosides and their biological activities", Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters (English), 9(6), 827-830 (English) 1999, [on-layn][Naydeno 2006-02-17]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 130:296946 *
KODAMA EI-ICHI et al.: "4'-Ethynyl nucleoside analogs: potent inhibitors of multidrug-resistant human immunodeficiency virus variants in vitro", Antimicrobial Agents and Chemotherapy, (English) 2001, 45(5), 1539-1546, [on-layn][Naydeno 2006-02-22]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 135:101929 *
KOHGO SATORU et al.: "Development of nucleosides highly potent against multidrug resistant HIV, Tennen Yuki Kagobutsu Toronkai Koen Yoshishu (Japanese), 2000, 42nd, 835-840, [on-layn][Naydeno 2006-02-17]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 135:282700 *
KOHGO SATORU et al.: "Synthesis of 4'-C-ethynyl-p-D-arabino- and 4'-C-ethynyl-2'-deoxy-beta-D-ribopentofuranosyl pyrirmidines, and their biological evaluation", Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry, 63(6), 1146-1149 (English) 1999 [on-layn][Naydeno 2006-02-17]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 131:116424 *
KOHGO SATORU et al.: "Synthesis of the L-enantiomer of 4'-C-ethynyl-2'-deoxycytidine". Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry (English) 2001, 65 (8), 1879-1882, [on-layn][Naydeno 2006-02-17]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 136:6252 *
MATSUDA AKIRA: "Development of novel radical cyclization-ring expansion reaction and its pharmacochemical development", Farumashia (Japanese) 2002, 38(4), 293-295, [on-layn][Naydeno 2006-02-17]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 136:369899 *
NOMURA MAKOTO et al.: "Nucleosides and Nucleotides. 185. Synthesis and Biological Activities of 4'a-C-Branched-Chain Sugar Pyrimidine Nucleosides", Journal of Medicinal Chemistry (English) 1999, 42(15), 2901-2908, [on-layn][Naydeno 2006-02-17]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 131:116420 *
OHRUI HIROSHI et al.: "Syntheses of 4'-C-Ethynyl-p-D-arabino- and 4'-C-Ethynyl-2'-deoxy-p-D-ribo-pentofuranosylpyrimidines and -purines and Evaluation of Their Anti-HIV Activity", Journal of Medicinal Chemistry (English) 2000, 43(23), 4516-4525, [on-layn][Naydeno 2006-02-17]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 134:29647 *
PALOMINO EDUARDO et al.: "A dihydropyridine carrier system for sustained delivery of 2',3'-dideoxynucleosides to the brain". Journal of Medicinal Chemistry (English), 1989, 32(3), 622-5 (English), [on-layn][Naydeno 2006-02-26]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 110:115257 *
RIEHOKAINEN ELENA et al.: "Stereoselective synthesis of 3'-fluoro- and 3'-azido-4'-methyl-2',3'-D-glycero-pentofuranoside-5-fluorouracils", Tetrahedron, 54(34), 10161-10166 (English) 1998 [on-layn][Naydeno 2006-02-17]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 129:260724 *
SEJINO KEIKO et al.: "Facile synthesis of 2',3'-unsaturated nucleosides from 2-deoxyribose", Tetrahedron Letters, 37(34), 6133-6136 (English) 1996, [on-layn][Naydeno 2006-02-26]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 125:301428 *
SUGIMOTO ISAMU et al.: "Nucleosides and nucleotides. 183. Synthesis of 4'alpha-branched thymidines as a new type of antiviral agent", Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, (English) 1999, 9(3), 385-388, [on-layn][Naydeno 2006-02-17]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 130:237795 *
SUMMERER DANIEL et al.: "DNA polymerase selectivity: sugar interactions monitored with high-fidelity nucleotides", Angewandte Chemie, International Edition, 40 (19), 3693-3695 (English), [on-layn][Naydeno 2006-02-17]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 136:118662 *
TABATA et al.: Anti-tumor Mechanisms of 3'-ethynyluridine and 3'-ethynylcytidine as RNA synthesis inhibitors: development and characterization of 3' ethynyluridine-resistant cells. Cancer Letters. 1997, Vol. 116, pp. 225-231 *
VODOVOZOVA E.L. i dr. "Novye fosfolipidy-ingibitory reproduktsii virusa immunodefitsita cheloveka. Sintez i protivovirusnaya aktivnost', Bioorganicheskaya khimiya, 1996, 22(6), 451-457 (s. 455, soed. II) *
WAGA TOSHIAKI et al.: "Synthesis and biological evaluation of 4'-C-methyl nucleosides", Nucleosides & Nucleotides (English), 1996, 15(1-3), 287-304, [on-layn][Naydeno 2006-02-22]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 124:290140 *
YAMAGUCHI TOYOFUMI et al.: "Antileukemic activities and mechanism of action of 2'-deoxy-4'-methylcytidine and related nucleosides", Nucleosides & Nucleotides, (English), 1997, 16(7-9), 1347-1350, [on-layn][Naydeno 2006-02-22]. Naydeno iz bazy dannykh ACS on STN, CA 128:97392 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN1777432A (zh) 2006-05-24
EP1653976A1 (en) 2006-05-10
PL378354A1 (pl) 2006-03-20
ZA200506630B (en) 2006-06-28
EP2298783B1 (en) 2017-12-06
KR20060026402A (ko) 2006-03-23
MXPA05008736A (es) 2005-10-05
US20040167096A1 (en) 2004-08-26
KR101228503B1 (ko) 2013-01-31
US20100048500A1 (en) 2010-02-25
HK1087341A1 (en) 2006-10-13
KR20110079783A (ko) 2011-07-07
BRPI0407374A (pt) 2006-01-10
AU2004260630A1 (en) 2005-02-10
AU2004260630B2 (en) 2009-12-10
PL219609B1 (pl) 2015-06-30
US20120252751A1 (en) 2012-10-04
CA2514466C (en) 2015-05-26
PL398295A1 (pl) 2012-05-21
US8193165B2 (en) 2012-06-05
JP4980059B2 (ja) 2012-07-18
CN102174038A (zh) 2011-09-07
US9126971B2 (en) 2015-09-08
US7589078B2 (en) 2009-09-15
WO2005011709A1 (en) 2005-02-10
JP2006528972A (ja) 2006-12-28
CN1777432B (zh) 2011-06-08
EA200501325A1 (ru) 2006-02-24
CA2514466A1 (en) 2005-02-10
EP1653976A4 (en) 2009-07-29
EP2298783A1 (en) 2011-03-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA012844B1 (ru) Аналоги противовирусных нуклеозидов и способы лечения вирусных инфекций, в частности вич-инфекций
AU2020233714B2 (en) Methods for treating Arenaviridae and Coronaviridae virus infections
US11266666B2 (en) Methods for treating Filoviridae virus infections
DE60217465T2 (de) Nukleosidderivate als inhibitoren von rna-abhängiger rna viralpolymerase
JPH08501071A (ja) １，５−アンヒドロヘキシトールヌクレオシド類似体および該類似体の医薬としての使用
JP2001097973A (ja) 鏡像異性的に純粋なβ−Ｄ−（−）−ジオキソラン−ヌクレオシド
Haraguchi et al. Next Generation Anti-HIV Agent 4’-Ethynylstavudine: From The Bench To The Clinic
NZ541594A (en) Anti-viral 4&#39;-substituted nucleoside analogs and methods for treating viral infections, especially HIV infections

Legal Events

Date Code Title Description
TK4A Corrections in published eurasian patents