JP2001097973A

JP2001097973A - 鏡像異性的に純粋なβ−Ｄ−（−）−ジオキソラン−ヌクレオシド

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Publication number: JP2001097973A
Application number: JP2000246125A
Authority: JP
Inventors: Chung K Chu; チュン，ケイ．チュウ; Raymond F Schinazi; レイモンド，エフ．シナッツィ
Original assignee: Emory University; University of Georgia Research Foundation Inc UGARF
Current assignee: Emory University; University of Georgia Research Foundation Inc UGARF
Priority date: 1990-12-05
Filing date: 2000-08-15
Publication date: 2001-04-10
Anticipated expiration: 2022-02-14
Also published as: EP0562009A4; JP3881165B2; JP2007008959A; CA2590125A1; JPH07502973A; JP4280276B2; ES2291268T3; EP1600448A3; CA2099589C; EP1164133B1; EP0562009A1; EP1164133A3; JP3421335B2; US5179104A; EP1164133A2; CA2099589A1; DE69133576T2; AU714646B2; AU1664097A; WO1992010497A1

Abstract

(57)【要約】（修正有）【課題】ＨＩＶ活性の高い化合物の製造方法の提供。【解決手段】式１で示される１，６−アンヒドロマン
ノースからジオキソラン環を調製する工程を含む、鏡像
異性的に純粋なβ−Ｄ−（−）−ジオキソラン−ヌクレ
オシド（例えば塩基としてチミンを用いる場合は、式２
で示される化合物）調製のためのプロセス。塩基として
はチミンの他に、アデニン、ヒポキサンチン、シトシ
ン、ウラシル等から選ばれる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、ヌクレオシドの有
機合成の分野に関し、特に、鏡像異性的に純粋なβ−Ｄ
−（−）−ジオキソランヌクレオシドの調製方法に関す
る。

【０００２】

【従来の技術】多数の２′，３′−ジデオキシヌクレオ
シドが、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）を引き起こ
す物質である、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）に対す
る強力な抗ウイルス剤であることが見い出されている。
鉛化合物ＡＺＴ(Mitsuya, H.;Broder, S. Proc. Natl.
Acad. Sci. U.S.A., 1986 83, 1911)は、ＡＩＤＳおよ
びＡＩＤＳに関連した複合疾患を有する患者への投与
が、米国食品薬物庁（ＦＤＡ）により認可されている。
他のいくつかの２′，３′−ジデオキシヌクレオシド
は、臨床試験の様々な段階にある。その例としては、
３′−アジド−２′，３′−ジデオキシウリジン（ＡＺ
ＤＵまたはＣＳ−８７、Chu, C.K,ら、J. Med. Chem.,
1989, 32, 612; および Eriksson, B.F.H.ら、Antimicr
ob. Agents Chemother., 1989, 33, 1927を参照のこ
と）、２′，３′−ジデオキシイノシン（ＤＤＩ）およ
び２′，３′−ジデオキシシチジン（ＤＤＣ）(Yarchoa
n, R.ら、Science, 1989, 245, 412）、３′−デオキシ
−２′，３′−ジデヒドロチミジン（D4T, Lin, T.S.
ら、Biochem. Pharmaco1., 1987, 36, 311; Hamamoto,
Y.ら、Antimicrob. Agents Chemother., 1987, 31, 90
7; Balzarini,J.ら、Biochem. Biophys. Res. Commun.,
1987, 140, 735）、および２′−フルオロ−アラビノ
フラノシルー２′−３′−ジデオキシシチジン（Marti
n, T.A.ら、J. Med. Chem., 1990, 33, 2137; Watanab
e, K.A.ら、J. Med.Chem., 1990, 33, 2145; Sterzyck
i, R.Z.ら、J. Med. Chem., 1990 33, 2150）が含まれ
る。

【０００３】５′−トリリン酸化形態では、これらのヌ
クレオシドは、増殖するウイルスＤＮＡ鎖の鎖停止を生
じさせると共に、ＨＩＶ逆転写酵素を阻害するすること
が知られている。Furman, P.A.ら、Proc. Natl. Acad.
Sci. U.S.A., 1986, 83, 8333; Cheng, Y.C.ら、J. Bio
l. Chem., 1987, 262, 2187; St. Clair, M.H.ら、Anti
microb. Agents Chemother., 1987, 31, 1972;およびSc
hinazi, R.F.ら、Antimicrob. Agents Chemother., 198
9 33, 115。

【０００４】ヌクレオシド誘導体の立体化学は、その生
物学的活性に重要な役割を果たす。ヌクレオシド中のリ
ボースのＣ１′（ヘテロ環式塩基の窒素に結合している
炭素）位置は、キラル中心である。なぜなら、炭素は４
つの異なる部分に結合しているからである。同様に、ヌ
クレオシドのＣ４′（ヌクレオチドにおいてリン酸化さ
れるヒドロキシメチル基に結合した環状炭素）に光学的
な活性中心がある。天然に存在するヌクレオシドでは、
Ｃ１′原子に結合した塩基およびＣ４′原子に結合した
ヒドロキシメチル基は、共に、炭水化物環の同一側に存
在する。

【０００５】Ｃ１′およびＣ４′−置換基が炭水化物面
の同一側に存在する（すなわち、置換基がシスである）
炭水化物立体配置は、「β−立体配置」と呼ばれる。Ｃ
１′およびＣ４′置換基が炭水化物面の反対側に存在す
る（すなわち、置換基がトランスである）炭水化物立体
配置は、「α−立体配置」と呼ばれる。図２の化合物１
を参照すると、Ｃ４′原子に結合した非水素置換基が炭
水化物環の面の上方に存在するならば、ヌクレオシド
は、Ｄ−ヌクレオシドと呼ばれる。Ｃ４′−原子に結合
した非水素置換基が、炭水化物環の下方に存在するなら
ば、ヌクレオシドは、Ｌ−ヌクレオシドと呼ばれる。

【０００６】ヌクレオシドの天然には存在しないα−異
性体（Ｃ１′またはＣ４′置換基が、炭水化物面の反対
側に存在する）が、生物学的に活性であることはめずら
しく、通常毒性である。

【０００７】近年、６つの活性および２つの不活性な抗
ＨＩＶヌクレオシド物質の固体立体配座の分析が、特定
の立体化学特性の有無を高ＨＩＶ活性と関連づけるため
に行われた。Van Roey, P.ら、J. Am. Chem. Soc., 198
8, 110, 2277;およびVan Roey, P.ら、Proc. Nat1. Aca
d. Sci. U.S.A., 1989, 86, 3929。Ｘ−線構造は、活性
抗ＨＩＶヌクレオシドがＣ３′−エキソまたは類似の炭
水化物立体配座をとるのに対して、不活性化合物は、Ｃ
３′−エンド立体配座をとることを示した（エンドおよ
びエクソは、原子が、塩基に対して、糖環の同一側また
は反対側に存在する立体配座を指す）。Ｃ３′−エキソ
およびＣ３′−エンド立体配座は、Ｃ５′原子を、アク
シャル（axial）およびエクァトリアル（equitorial）
位にそれぞれ配置する。Ｃ５′原子の位置は、塩基に対
する５′−ヒドロキシル基の位置に影響を与える。５′
−ヒドロキシル基は、ヌクレオシドのリン酸化部位であ
るため、ヌクレオシドの残りの部分に対するその位置
は、重要である。近年、ヌクレオシドの３′−炭素がヘ
テロ原子と置換された、ヌクレオシド誘導体の合成に関
心が寄せられている。Norbeck, D.W.ら、Tet. Lett., 1
989, 30,6263は、Ｃ４′原子に関してジアステレオマー
のラセミ混合物を形成する、（±）−１−〔２β，４
β〕−２−（ヒドロキシメチル）−４−ジオキソラニ
ル〕チミン（以下、（±）−ジオキソラン−Ｔと呼ぶ。
図１を参照のこと）の合成を報告した。生成物は、Ｃ
３′原子が０３′原子と置換された３′−デオキシチミ
ジンの誘導体である。生成物は、ベンジルオキシアルデ
ヒドジメチルアセタールおよび（±）−メチルグリセレ
ートから５工程を経て合成され、７９％収率の１：１ジ
アステレオマー混合物を生成する。この生成物をＸ−線
結晶学分析すると、ジオキンラン環が、エンド位に０
３′原子を有する、リボヌクレオシドにおいて通常観察
される³Ｔ₄立体配座をとることが示された。Norbeck
は、ジオキソラン−Ｔのラセミ混合物が、ＡＴＨ８細胞
中２０μMの抗ＨＩＶ活性を示し、ウイルスに対する低
効力が０３′原子のエンド立体配座の効力に起因するこ
とを示した。

【０００８】１９９０年６月４日から９日までの、カナ
ダのモントリオールでのＡＩＤＳに関する第５回国際会
議の論文番号Ｔ．Ｃ．０．１．において、Belleauら
は、３′−位に酸素またはイオウを含有するシチジンヌ
クレオシドの合成方法を報告した。ジオキンラン環は、
ＲＣＯ₂ＣＨ₂ＣＨＯとグリセリンを縮合することによっ
て調製された。Norbeckの合成と同様に、Belleauの合成
においても、ヌクレオシドのＣ４′炭素に関するジアス
テレオマーのラセミ混合物が形成された。Belleauは、
ＮＧＢＰ−２１または（±）ＢＣＨ−１８９（図１を参
照のこと）と呼ばれるイオウアナログが、高い抗ＨＩＶ
活性を有していることを報告した。（±）ＢＣＨ−１８
９については、現在、臨床前の毒性学が研究されてい
る。

【０００９】今日まで、天然に見いだされるヌクレオシ
ドと同一の立体化学（β立体異性体）を有する鏡像異性
的に純粋なジオキソランヌクレオシドを生じる、３′−
位における酸素を有するヌクレオシドアナログの合成方
法は報告されていない。ヌクレオシド誘導体の抗ウイル
ス活性に関する立体化学の影響に関するさらなる情報を
提供し、新規な抗ＨＩＶ物質を提供するためには、研究
の道具としてこのような合成が必要である。

【００１０】

【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は、鏡像異性的に純粋なジオキソランヌクレオシドの合
成方法を提供することである。本発明の他の目的は、鏡
像異性的に純粋な、顕著な抗ＨＩＶ活性を有するジオキ
ソランヌクレオシドを提供することである。

【００１１】

【課題を解決するための手段】開示される本発明は、鏡
像異性的に純粋なβ−Ｄ−（−）−ジオキソラン−ヌク
レオシドの不斉調製方法である。この方法は、鏡像異性
的に純粋な最終産物に必要な立体化学のすべてを含む糖
分で、その糖分の１位（後に形成されるヌクレオシドに
おいて４′−位となる）に関して正しいジアステレオ異
性体立体配置を有する、１，６−アンヒドロマンノース
から、（２Ｒ，４Ｒ）−および（２Ｒ，４Ｓ）−４−ア
セトキシ−２−（保護−オキシメチル）−ジオキソラン
をまず調製する。

【００１２】（２Ｒ，４Ｒ）−および（２Ｒ，４Ｓ）−
４−アセトキシ−２−（保護オキシメチル）−ジオキン
ランは、ジクロロエタン、アセトニトリル、または塩化
メチレンのような有機溶媒中で、ＳｎＣｌ₄、他のルイ
ス酸、またはトリメチルシリルトリフレートの存在下
で、所望のヘテロ環式塩基と縮合され、立体化学的に純
粋なジオキソラン−ヌクレオシドを提供する。

【００１３】鏡像異性的に純粋なジオキソランヌクレオ
シドは、従来調製された、化合物のラセミ混合物よりも
はるかに有効な活性ＨＩＶ物質である。化合物の抗ウイ
ルス活性は、これらのジオキソランを含むエンド立体配
座中の部分が有効な抗ウイルス物質ではないという、一
般的に許容された理論を考慮すると驚くべきものであ
る。さらに、鏡像異性的に純粋なジオキソランヌクレオ
シドは、ヌクレオシドのラセミ混合物ほど毒性が高くな
い。なぜなら、天然に存在しない異性体が除去されてい
るからである。

【００１４】生成物は、インビトロにおけるＨＩＶの阻
害を研究するための道具として使用され、または薬学組
成物中に含有されて投与され得、インビボにおけるＨＩ
Ｖの増殖を阻害する。

【発明の実施の形態】

【００１５】本明細書で使用されるように、用語「保
護」は、分子の官能基上に置かれ、分子の他の部分が誘
導体化の間に、前記部分がさらに反応するのを防ぐ部分
を指す。特に酸素および窒素の保護基は、有機化学の当
業者に公知である。

【００１６】本明細書で使用される用語「１，３−ジオ
キソランヌクレオシド」は、図１および２に示されるよ
うにヌクレオシド誘導体を指し、ここで、１，３−ジオ
キソランは、オキサチオランＣ５炭素（ヌクレオシドに
おいてＣ１′−炭素となる）を通じて、ヘテロ環式塩
基、通常はプリンまたはピリミジン塩基に結合する。

【００１７】Ｉ．鏡像異性的に純粋なジオキソランヌク
レオシドの調整鏡像異性的に純粋なジオキソランヌクレオシドの調整を
行う際には、ジオキソラン環を開裂し得るような強酸条
件を避けるように注意せねばならない。反応は、できる
だけ塩基性または中性条件で行うべきであり、酸性条件
が必要な場合には、反応時間を最短に抑えるべきであ
る。

【００１８】Ａ．ジオキソラン誘導体の調製鏡像異性的に純粋なβ−Ｄ−（−）ジオキソラン−ヌク
レオシドの合成の主要出発物質は、１，６−アンヒドロ
マンノース（化合物１、図２）である。この糖類は、
（後に形成されるヌクレオシドでは４′位となる）この
糖類の１位についてのジアステレオマーの正しい立体配
置を含めて、鏡像異性的に純粋な最終生成物に必要なす
べての立体化学を含有している（たとえば、化合物１
１、図２参照）。１，６−アンヒドロマンノースは、Kn
auf, A.E.; Hann, R.M.; Hudson, C.S. J. Am. Chem. S
oc., 1941, 63, 1447;およびZottola, M.A.; Alonso,
R.; Vite, G.D.; Fraser-Reid, B. J. Org. Chem., 198
9, 54, 6123に記載の工程に従って調製し得る。ジオキ
ソランヌクレオシドの前合成では、リボース部分の調製
のために出発物質のラセミ混合物を用いてきた。試薬の
ラセミ混合物によって合成を始めると、鏡像異性のヌク
レオシド生成物の、望ましくないラセミ混合物が生成さ
れる。この混合物を分離することは非常に難しく、最終
生成物のコストが大きく上がる。さらに、天然に由来し
ない異性体を含有することによって、生成物の毒性が上
がる。

【００１９】１，６−アンヒドロマンノースは、ジメト
キシプロパンとｐ−トルエンスルホン酸によってイソプ
ロピリデン誘導体に変換され、この誘導体を、単離せず
に、４位をベンゾイル化して、化合物２が得られる（図
２参照）。４位を保護するにはアシル基を用いることも
できる。そして、約０から５０℃の範囲の温度で、６０
％ジオキサン水溶液またはその他の適切な有機溶媒内
で、硫酸、塩酸、蟻酸、トリフルオロ酢酸、スルファミ
ン酸等の触媒量の酸によって、化合物２のイソプロピリ
デン基を除去し、白色固体状の（−）−１，６−アンヒ
ドロ−４−０−ベンゾイル−β−Ｄ−マンノピラノース
が高収率で得られる。

【００２０】次の工程では、（−）−１，６−アンヒド
ロ−４−０−ベンゾイル−β−Ｄ−マンノピラノースの
グリコールを、およそ室温で１時間、Ｈ₂Ｏ／ＥｔＯＨ
（１：１）内のＮａＩＯ₄で処理することによって酸化
開裂し、対応するジアルデヒドを生成する。この反応の
酸化試薬として、テトラ酢酸鉛も用いることができる。
ＮａＢＨ₄、水素化ジイソブチルアルミニウム（ＤＩＢ
ＡＬ−Ｈ）、水素化ホウ素リチウム（ＬｉＢＨ₄）また
は水素化ビス（２−メトキシエトキシ）−アルミニウム
ナトリウム（Ｒｅｄ−Ａｌ）を含む適切な還元剤を用い
て、およそ室温あるいはそれ以下で、このジアルデヒド
を即座に原位置で還元する。この反応条件で、化合物４
を二級の位置から一級の位置へのベンゾイル移動によっ
て異性体化することによって、（−）−（２Ｒ，４Ｒ）
−４−（２−ベンゾキシ−１−ヒドロキシエチル）−２
−（ヒドロキシメチル）−ジオキソラン（化合物５、図
２）を生成する。

【００２１】その後、このジオキソランの２位を、たと
えば、トリメチルシリル、ジメチルヘキシルシリル、ｔ
−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル
などのトリ置換シリル基、トリチル、アルキル基、アセ
チル、プロピオニル、ベンゾイル、ｐ−ＮＯ₂ベンゾイ
ル、またはトルイルなどのアシル基、メチルスルホニ
ル、またはｐ−トルイルスルホニルなどの適切な酸素保
護基で保護する。好ましい保護基はｔ−ブチルジフェニ
ルシリルである。ジオキソランの２位を保護した後、メ
タノール中のナトリウムメトキシドまたはアンモニアな
どの強塩基で、およそ０から５０℃で、ベンゾイル基を
２−ヒドロキシエチル位置から除去し、（−）−（２
Ｒ，４Ｒ）−２−（保護−０−メチル）−４−（１，２
−ジヒドロキシエチル）−ジオキンラン（化合物６、図
２）を高収率で生成する。

【００２２】次の工程では、このジオキンランの４位の
１，２一ジヒドロキシエチル基を、ＮａＩＯ₄／ＲｕＯ₂
またはテトラ酢酸鉛などの酸化剤によって、およそ０か
ら５０℃で、カルボン酸に変換することによって、
（＋）−（２Ｒ，４Ｒ）−２−（保護−オキシメチル）
−４−カルボキシルジオキソラン（化合物７、図２参
照）を生成する。

【００２３】その後、改変フンスジーカー反応（Dhaval
e, D.;ら、Tetrahedron Lett., 1988, 29, 6163)を、Ｐ
ｂ（ＯＡｃ)₄によって酢酸エチル中で行い、（＋）−
（２Ｒ，４Ｒ）−２−（保護一オキシメチル）−４−カ
ルボキシルジオキソランを、対応する主要中間体である
（２Ｒ，４Ｒ）−および（２Ｒ，４Ｓ）−４−アセトキ
シ−２−（保護−オキシメチル）ジオキソラン（化合物
８、図２参照）に高収率で変換する。

【００２４】Ｂ．ジオキンラン誘導体によるヘテロ環式
塩基の縮合この反応スキームの次の工程において、Ａ項で説明した
ように調製された鏡像異性的に純粋なジオキソランを、
乾燥有機溶媒中のトリメチルシリルトリフレート（トリ
メチルシリルトリフルオロメタンスルホネート）または
ルイス酸の存在下で、保護された塩基と縮合する。

【００２５】電子不足中心と反応し得る窒素を含有する
あらゆる化合物を、この縮合反応で用い得る。プリン塩
基には、アデニン、ヒポキサンチン、Ｎ⁶−アルキルプ
リン類、Ｎ⁶−ベンジルプリン、Ｎ⁶−ハロプリンおよび
グアニンが含まれる。ピリミジン塩基には、チミン、シ
トシン、６−アザピリミジン、２−メルカプトピリミジ
ンおよびウラシルが含まれる。ジオキソラン誘導体によ
って行われる縮合反応ではチミン塩基が好ましく、１，
３−チオキソランによって行われる縮合反応ではシトシ
ン塩基が好ましい。

【００２６】ヘテロ環式塩基の官能酸素および窒素基
は、縮合の前に糖類で保護しなければならない。保護基
は当業者には公知であり、トリメチルシリル、ジメチル
ヘキシルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、およびｔ
−ブチルジフェニルシリル、トリチルメチル、アルキル
基、アセチルおよびプロピオニルなどのアシル基（低級
アルキル−Ｃ（Ｏ））、メチルスルホニル、およびｐ−
トルイルスルホニルなどが含まれる。

【００２７】この縮合反応で用い得るフリーデル−クラ
フツ触媒（ルイス酸）には、ＳｎＣｌ₄、ＺｎＣｌ₄、Ｔ
ｉＣｌ₄、ＡｌＣｌ₃、ＦｅＣｌ₃、ＢＦ₃−ジエチルエー
テルおよびＢＣｌ₃が含まれる。これらの触媒は、水の
存在によってその活性が抑えられるため、無水条件が必
要である。また、これらの触媒は、アルコール類および
有機酸類などの、活性水素を有する有機溶媒が存在する
と不活性となる。これらの触媒は、一般に、二硫化炭
素、塩化メチレン、ニトロメタン、１，２−ジクロロエ
タン、ニトロベンゼン、テトラクロロエタン、クロロベ
ンゼン、ベンゼン、トルエン、ジメチルホルムアミド、
テトラヒドロフラン、ジオキサンまたはアセトニトリル
などの溶媒中で用いられる。無水塩化アルミニウムは、
二硫化炭素には可溶ではない。Niedballa，ら、J.org.
Chem. 39, 25 (1974)。好ましい触媒はＳｎＣｌ₄であ
る。好ましい溶媒は１，２−ジクロロエタンである。ト
リメチルシリルトリフレートは、フリーデル−クラフツ
触媒について上述したのと同様の条件で用い得る。反応
は、−１０℃から２００℃の温度範囲で進行する。

【００２８】縮合のための触媒の選択によって、αヌク
レオシド生成物のβヌクレオシド生成物に対する最終生
成比率は影響を受ける。たとえば、中間体である（２
Ｒ，４Ｒ）−および（２Ｒ，４Ｓ）−４−アセトキシ−
２−（ｔ−ブチルジフェニルシリオキシメチル）ジオキ
ソラン（化合物８、図２）を、ＣＨ₂Ｃｌ₂中、トリメチ
ルシリルトリフレートの存在下で、シリル化チミジンと
縮合すると、（−）−１−〔（２Ｒ、４Ｒ）−２−（ｔ
−ブチルジフェニルシリルオキシメチル）−４−ジオキ
ソラニル〕チミン９‐β（４５％）と、（＋）−１−
〔（２Ｒ，４Ｓ）−２−（ｔ−ブチルジフェニルシリル
オキシメチル）−４−ジオキソラニル〕チミン１０−α
（２９％）との混合物が得られた。しかし、ＳｎＣｌ₄
で反応させると、主にβ−異性体９が生成され、ＴＬＣ
で検出可能な微量のα−異性体１０が共存した。

【００２９】この鏡像異性的に純粋な（−）−β−Ｄ−
ジオキソラン−ヌクレオシドの調製方法の最終工程で
は、ヌクレオシドの５′−０−位置が脱保護される。脱
シリル化は、酢酸、トリフルオロ酢酸、フッ化水素、フ
ッ化ｎ−テトラブチルアンモニウム、フッ化カルシウム
および塩酸ピリジニウムを含む様々な試薬によって行い
得る。たとえば、化合物９および１０をフッ化テトラブ
チルアンモニウムで脱シリル化すると、所望の遊離ヌク
レオシド１１および１２がそれぞれ得られる（図２）。
商業的規模で用いるには、酢酸が安価であるため好まし
い。脱シリル化のためのその他の試薬は当業者に公知で
ある。脱アシル化は、酸または塩基中で行われる。５−
０−エーテルは、ＢＣｌ₃またはヨウ化トリメチルシリ
ルで開裂され得る。

【００３０】鏡像異性的に純粋な（−）−β−Ｄ−ジオ
キソラン−ヌクレオシドの調製方法は、（−）−β−Ｄ
−ジオキソラン−Ｔと示される、（−）−１〔（２β，
４β）−２−（ヒドロキシメチル）−４−ジオキソラニ
ル〕チミンの調製に関して、以下の実用的実施例でさら
に詳しく説明する。実用実施例に列挙した化合物は、図
２に示した構造に当てはまる。

【００３１】

【実施例】（−）−１，６−アンヒドロ−２，３−イソ
プロピリデン−４−０−ベンゾイル−β−Ｄ−マンノピ
ラノース１，６−アンヒドロ−β−Ｄ−マンノピラノース（化合
物１）を、アセトン（８００ml）およびメタノール（３
００ml）と混合し、自由に浮遊する固体のみが残るまで
約３０分間撹拌した。ジメトキシプロパン（３００ml）
およびｐ−トルエンスルホン酸（５ｇ）を加え、この混
合物を２時間撹拌した。

【００３２】この反応混合物を、トリエチルアミン（pH
８）で塩基性にし、濾過して白色固体物質を除去した。
溶媒を蒸発させ、残渣を取り出し、酢酸エチルで結晶さ
せて、透明な針状の２，３−イソプロピリデン化生成物
４ｇを得た。

【００３３】１，６−アンヒドロ−２，３−イソプロピ
リデン−β−Ｄ−マンノピラノース（５．０１ｇ、０．
０２５モル）のピリジン（４０ml）溶液に、０℃で、塩
化ベンゾイル（３．７４ml、０．０６２モル）を滴下し
た。この混合物を０℃で４５分間撹拌した。その後反応
混合物に氷を加え、過剰の塩化ベンゾイルを除去した。
減圧下で溶媒を蒸発させ、残漬を酢酸エチル（２００m
l）に溶解した。有機層を水、飽和ＮａＨＣＯ₃および食
塩水で洗浄した。得られた物質を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥
し、濾過し、その後蒸発させて、黄色の固体状の（−）
−１，６−アンヒドロ−２，３−イソプロピリデン−４
−０−ベンゾイル−β−Ｄ−マンノピラノース粗生成物
（化合物２、８．７ｇ）を得た。

【００３４】（−）−１，６−アンヒドロ−４−０−ベ
ンゾイル−β−Ｄ−マンノピラノース（３）６０％ジオキサン水溶液（８２０ml）中の１，６−アン
ヒドロ−４−０−ベンゾイル−２，３−イソプロピリデ
ン−β−Ｄ−マンノピラノース２（１０．０ｇ、３２．
６ミリモル）に、濃Ｈ₂ＳＯ₄（３．３６ml）を加えた。
この混合物を７０〜８０℃で１５時間撹拌し、そして氷
浴内で冷却し、ＮａＨＣＯ₃で中和して、当初の体積の
半分になるまで濃縮した。その後、この溶液を酢酸エチ
ルで抽出し、合わせた有機層を飽和ＮａＨＣＯ₃溶液お
よび水で洗浄し、乾燥し、蒸発させて、白色固体状の３
を得た。この固体をＣＨ₂Ｃｌ₂−ｎ−ヘキサンから結晶
することによって、白色固体の３（７．４ｇ、８５．３
％）を得た：

【００３５】〔α〕²⁵Ｄ−１５４．７°（C, 0.21 MeO
H); ¹H NMR(DMSO-d₆): δ3.56 - 4.61(m, 5H, 2, 3, 5,
6-H), 4.82 (d, J=8.1Hz. 1H, OH D₂O 交換可能）, 5.
02 (s,1H, 4-H), 5.09 (d, J=3.7 Hz, 1H, OH, D₂O 交
換可能）, 5.28(s, 1H, 1-H), 7.46 - 8.05(m, 5H, Ar-
H); IR (KBr) 3410, 1710cm-¹; 分析C₁₃H₁₄O₆として計
算値: C, 58.64; H, 5.31. 実測値: C, 58.51; H, 5.3
4.

【００３６】（−）−（２Ｒ、４Ｒ）−４−（２−ベン
ゾキシ−１−ヒドロキシエチル）−２−（ヒドロキシメ
チル）ジオキソラン（５）

【００３７】３（７．４ｇ、２７．８ミリモル）の９５
％エタノール（２００ml）溶液に、ＮａＩＯ₄（６．５
４ｇ、３０．７ミリモル）の水（２００ml）溶液を加え
た。この混合物を室温で１時間撹拌した。薄層クロマト
グラフィーによってジオールが完全にジアルデヒドに変
換されたことを確認した後、反応混合物を当初の体積の
半分に濃縮した。メタノール（２００ml）を残渣に加
え、混合物を５０℃に冷却した。水素化ホウ素ナトリウ
ム（４．２ｇ、１１１．０ミリモル）を少しずつ混合物
に５分間にわたって加え、この混合物を５０℃で１０分
間撹拌し、氷酢酸で中和して、濃縮することによって、
黄色油状の粗生成物３を得た。この油をシリカゲルによ
るカラムクロマトグラフィで精製して、無色油状の純粋
な生成物３を得、これをジエチルエーテル／ｎ−ヘキサ
ンから結晶することによって白色固体状の５（６．１２
ｇ、８２％）を得た：

【００３８】〔α〕²⁵Ｄ−18.5°(C 0.20, メタノー
ル); ¹H NMR(DMSO-d₆): δ3.47(dd, J =5.9, 3.7Hz, 2
H, CH₂OH), 3.72 - 4.14 (m, 4H, 4, 5-Hおよび CHOH),
4.27-4.95(m, 2H, CH₂OBz), 4.81 - 4.95(m, 2-H およ
び pri OH), 5.43(d, J = 5.5Hz,1H, Sec OH, D₂O 交換
可能）, 7.43 - 8.09(m, 5H, Ar-H), 分析C₁₃H₁₆O₆とし
て計算値:C, 58.19; H, 6.02. 実測値: C, 58.09; H,
6.01.

【００３９】（−）−（２Ｒ，４Ｒ）−４−（２−ベン
ゾキシ−１−ヒドロキシエチル）−２−（ｔ−ブチルジ
フェニルシリルオキシ−メチル）−ジオキソラン

【００４０】３（２．８ｇ、１０．４ミリモル）とイミ
ダゾール（２．０４ｇ、３０．０ミリモル）とのジメチ
ルホルムアミド（４０ml）溶液に、塩化ｔ−ブチルジフ
ェニルシリル（３ml、１１．５ミリモル）を加えた。こ
の混合物を室温で２時間撹拌した。この反応混合物を蒸
発させることによって、黄色の油を生成し、これをシリ
カゲルによるカラムクロマトグラフィで精製することに
よって、無色油状の４（４．４８ｇ、８５％）を得た；

【００４１】〔α〕²⁵D-14.2°(C 0.26,メタノール）,
¹H NMR(DMSO-d₆): δ 1.00 (s, 9H, t-Bu), 3.68 - 3.8
7(m, 3H, CH₂OTBDPSおよび CHOH), 3.98-4.16 (m, 3H,
4,5-H), 4.20 - 4.55(m, 2H, CH₂OBz), 5.07(t, J = 3.
3Hz, 1H, 2-H), 5.47(d, J-5.7Hz, 1H, OH, D₂O 交換可
能）, 7.40 - 8.33(m, 1OH, Ar-H); 分析C₂₉H₃₄O₆Si.と
して計算値: C, 68.73; H, 6.79. 実測値: C, 68.86;
H, 6.83.

【００４２】（−）−（２Ｒ，４Ｒ）−２−（ｔ−ブチ
ルジフェニルシリルオキシメチル）−４−（１，２−ジ
ヒドロキシエチル）−ジオキソラン（６）（−）−（２Ｒ，４Ｒ）−４−（２−ベンゾキシ−１−
ヒドロキシエチル）−２−（ｔ−ブチルジフェニルシリ
ルオキシ−メチル）−ジオキソラン（２．５２ｇ、５．
０ミリモル）のメタノール（４０ml）溶液に、ナトリウ
ムメトキシド（７．３ml）の０．０７８Mメタノール溶
液を加えた。この混合物を室温で２時間撹拌した。この
混合物を酢酸で中和し濃縮した。残渣を酢酸エチルと水
とで分離し、水層を酢酸エチルで抽出した。合わせた有
機層を、飽和ＮａＨＣＯ₃溶液と水とで洗浄し、その後
乾燥し、蒸発させ、シリカゲルによるカラムクロマトグ
ラフィで精製することによって、無色油状の６（１．９
ｇ、９５％）を得た：

【００４３】〔α〕²⁵D-2°(C 0.25, MeOH), ¹H NMR(DM
SO-d₆) δ1.00(s, 9H, t-Bu), 3.40 -3.52 (m, 3H, CH₂
OH および CHOH), 3.64(d, J = 3.7 Hx, 2H,CH₂OTBDP
S), 3.82-3.95(m, 3H, 4.5-H), 4.49(t, J = 5.3 Hz, 1
H, pri OH, D₂O 交換可能）, 4.82(d, J = 5.1Hz, 1H,
sec OH, D₂O 交換可能）, 5.O1(t, J = 3.7 Hz, 1H, 2-
H), 7.36 - 7.71(m, 10H, Ar-H); 分析C₂₂H₃₃O₅Siとし
て計算値: C, 65.63, H, 7.53. 実測値: C, 65.72; H,
7.52.

【００４４】（＋）−（２Ｒ、４Ｒ）２−（ｔ−ブチル
ジフェニルシリルオキシメチル）−４−カルボキシルジ
オキソラン（７）ＣＨ₃ＣＮ（８ml）とＣＣｌ₄（８ml）とＨ₂Ｏ（１２m
l）との中の６（１．６ｇ、４．０ミリモル）の二相の
溶液に、ＮａＩＯ₄（３．５９ｇ、１６．８ミリモル）
と水和ＲｕＯ₂（８．５ml）を加えた。この混合物を室
温で５時間激しく撹拌した。塩化メチレン（４０ml）を
この混合物に加えた。有機層を分取した。水層をＣＨ₂
Ｃｌ₂で抽出した。合わせた有機層を水で洗浄し、セラ
イトパッドを通して濾過し、その後濃縮することによっ
て、黒色油状の粗生成物７（１．２ｇ、７７．４％）を
得、これをさらに精製せずに次の反応に用いた。分析の
ために、粗生成物７をシリカゲルによるカラムクロマト
グラフィで精製して、白色泡状の７を得た：

【００４５】〔α〕²⁵D + 15.7°(C O.28, MeOH); ¹H N
MR(DMSO-d₆) δ O.99(s, 9H.t-Bu), 3.43 - 4.05 (m, 4
H, 5-H および CH₂OTBDPS), 4.25(t, J = 6.8 Hz, 1H,
4-H),5.04(dd, J=5.1, 3.7 Hz, 1H, 2-H), 7.38-7.72
(m, 10H, Ar-H).

【００４６】（２Ｒ，４Ｒ）−および（２Ｒ，４Ｓ）−
４−アセトキシ−２−（ｔ−ブチルジフェニルシリオキ
シ（ｓｉｌｙｏｘｙ）メチル）ジオキソラン（８）７（０．４６ｇ、１．１４ミリモル）の酢酸エチル（１
０ml）溶液に、ピリジン（０．０９ml、１．２５ミリモ
ル）とＰｂ（ＯＡｃ)₄（０．６６ｇ、１．４９ミリモ
ル）とを加えた。この混合物を室温、Ｎ₂雰囲気で１５
時間撹拌し、セライトパッドを通して濾過し、その後濃
縮して、シリカゲルによるカラムクロマトグラフィで精
製することによって、無色油状の８（０．２９ｇ、６
３．５％）を得た：

【００４７】¹H NMR(CDCl₃) δ 1.06 および 1.10(s, 9
H, t-Bu), 1.92 および 2.06(s, 1H,CH₃), 3.71-4.24
(m, 4H, 5-H および CH₂OTBDPS), 5.25 および 5.38(t,
それぞれ J = 4.3 および 3.3Hz, 1H, 2-H), 6.27-6.4
1(m, 1H, 4-H), 7.20-7.72(m, 10H, Ar-H), IR(KBr) 34
00, 1620 cm^-1.

【００４８】（−）−１−〔（２Ｒ，４Ｒ）−２−（ｔ
−ブチルジフェニルシリルオキシメチル）−４−ジオキ
ソラニル〕チミン（９）および（＋）−１−〔（２Ｒ，
４Ｓ）−２−（ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシメチ
ル）−４−ジオキソラニル〕チミン（１０）

【００４９】チミン（０．１５ｇ、１．２ミリモル）の
ヘキサメチルジシラザン（１０ml）懸濁液に、触媒量の
（ＮＨ₄）₂ＳＯ₄を加え、この混合物を３時間還流し
た。得られた透明な溶液を濃縮して、無色油状のシリル
化チミンを生成した。８（０．２４ｇ、０．６ミリモ
ル）のＣＨ₂Ｃｌ₂（５ml）溶液を、シリル化チミンのＣ
Ｈ ₂Ｃｌ₂（５ml）溶液に加え、この混合物を５℃まで冷
却した。この冷却した混合物に、トリメチルシリルトリ
フレート（０．２３ml、１．２ミリモル）を加え、この
混合物を室温、Ｎ₂雰囲気で１時間撹拌した。飽和Ｎａ
ＨＣＯ₃溶液（２０ml）をこの混合物に加え、混合物を
再び室温で３０分間撹拌した。有機層を分取し、水層を
ＣＨ₂Ｃｌ₂で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＨＣ
Ｏ₃溶液と水とで洗浄し、乾燥し、濃縮し、シリカゲル
によるカラムクロマトグラフィで精製することによっ
て、白色泡状の９（０．１２５ｇ、４４．６％）と白色
泡状の１０（０．０８ｇ、２８．６％）とを得た：

【００５０】9(β- 形態);〔α〕²⁵D-6.98°(C O.43,
MeOH), ¹H NMR(CDCL³)δ 1.08(s, 9H, t-Bu), 1.67(s,
3H, CH₃), 3.92(d, J=3.2 Hz, 2H, CH₂OTBDPS), 4.14
(d, J=4.O Hz, 2H, 5-H), 5.06(t, J=3.2 Hz, 1H, 2-
H), 6.36(t, J+4.0 Hz, 1H, 4-H),7.26-7.75(m, 10H, A
r-H), 9.51(bnrs, 1H, H=NH): UV(MeOH)λ_max 265.0(pH
2), 264.4 nm(pH 11), 分析C₂₅H₃₀O₅N₂Siとして計算
値: C, 64.34; H, 6.49; N,6.00. 実測値 C, 64.28; H,
6.51; N, 5.98:10 (α-形態）;〔α〕²⁵ D + 11.3°(C 0.23, MeOH); ¹H
NMR(CDCl₃) δ 1.08(s, 9H, t-Bu), 1.94(d, J = 1.2
Hz, 3H, CH₃), 3.70(d, J=3.2Hz, 2H, CH₂OTBDPS), 4.O
1(dd, J=9.5, 2.3 Hz, 1H, 5H), 4.35(dd, J=9.5, 5.3
Hz, 1H, 5-H),5.55(t, J=3.2 Hz, 1H, 2-H), 6.32(dd,
J=5.3, 2.3 Hz, 1H, 4-H), 7.17(d, J=1.2 Hz, 1H, 6′
-H), 7.37-7.74(m, 10H, Ar-H), 9.57(br s, 1H, NH);
UV (MeOH)λ_max 265.O; (pH 2); 264.5nm (pH 11), 分
析C₂₅H₃₀O₅N₂Siとして計算値: C, 64.34; H, 6.49; N,
6.00. 実測値 C,64.23; H, 6.51; N, 5.93.

【００５１】（−）−１−〔（２Ｒ，４Ｒ）−２−（ヒ
ドロキシメチル）−４−ジオキソラニル〕チミン（１
１）

【００５２】９（９３．３mg，０．２ミリモル）のテト
ラヒドロフラン（ＴＨＦ）（３ml）溶液に、テトラ−ｎ
−ブチルアンモニウムフルオライドのＴＨＦ１．０M溶
液（０．２４ml，０．２４ミリモル）を加え、この混合
物を室温で１時間撹拌した。次いで、この混合物を濃縮
し、そしてシリカゲルのカラムクロマトグラフィーによ
り精製して１１（４２mg，９２．１％）を白色の固形物
として得た。

【００５３】〔α〕²⁵D-18.8°(C 0.17, MeOH), ¹H NM
R (DMSO-d₆) δ 1.75(d, J=1.2 Hz, 3H, CH₃), 3.63(d
d, J+6.0, 2.6 Hz, 2H, CH₂OH), 4.03(dd, J=9.9, 5.5
Hz, 1H,5-H), 4.22(dd, J=9.9, 2.0 Hz, 1H, 5-H), 4.9
0(t, J=2.6 Hz, 1H, 2-H), 5.16(t, J-t.0 Hz, 1H, O
H), 6.21(dd, J=5.5, 2.0 Hz, 1H, 4-H), 7.67(d, J=1.
2Hz, 1H, 6′-H), 11.27(br s, 1H NH), UV(H₂) max 26
6.O(ε 10757), 266.5(ε9894)(pH 2), 266.3(ε 8397)
(pH 11); 分析C₉H₁₂O₅N₂として計算値: C, 47.36; H,
5.31; N, 12.28. 実測値: C, 47.28; H, 5.34; N, 12.2
9.

【００５４】（＋）−１−〔（２Ｒ，４Ｓ）−２−（ヒ
ドロキシメチル）−４−ジオキソラニル〕チミン（１
２）１１について上で述べられた方法と同様の方法に従って
１０（６０mg，０１３ミリモル）を脱保護することによ
り、１２（２６mg，８７．６％）を白色の泡状物として
得た。

【００５５】〔α〕²⁵ D + 1O.7°(C 0.15, MeOH), ¹H
NMR(DMSO-d₆) δ 1.79(s, 3H, CH₃),3.43(dd, J = 6.0,
3.7 Hz, 2H, CH₂OH), 4.02(dd, J=9.5, 3.3 Hz, 1H, 5
-H),4.28(dd, J=9.5, 5.6 Hz, 1H, 5-H), 5.00(t, J=6.
O Hz, 1H, OH), 5.47(t, J=3.7 Hz, 1H, 2-H), 6.17(d
d, J=5.6, 3.3 Hz, 1H, 4-H), 7.43(d, J=1.2 Hz, 1H,
6′-H), 11.32(br s, 1H NH), UV(H₂O)λ_max266.5(ε
9454); 266.5(ε 9199)(pH2), 266.3(ε 6925)(pH=11);
分析 C₉H₁₂O₅N₂として計算値；C,47.36; H, 5.31; N,
12.28. 実測値：C, 47.22; H.5.32; N, 12.16.

【００５６】II．ジオキソランヌクレオシドの抗ＨＩＶ
活性 β−Ｄ−（±）−ジオキソラン−チミンがＡＴＨ８細胞
においてＨＩＶに対する効果が低いという前述の報告と
対照的に、鏡像異性的に純粋なβ型１１は、強い抗ＨＩ
Ｖ活性（ＥＣ₅₀＝０．３μM）を示した。驚くべきこと
に、鏡像異性的に純粋なβ−Ｄ−（−）−ジオキソラン
−Ｔは、この化合物のラセミ混合物と比べて有意に高い
抗ＨＩＶ活性を有することを発見した。この違いはこれ
らの系における１１のリン酸化の割合に基づいて説明さ
れ得る。予測されたように、α−異性体１２は、有意な
抗ＨＩＶ活性を示さなかった。

【００５７】β−Ｄ−（−）−ジオキソランヌクレオシ
ドは、インビトロでＨＩＶの増殖を阻害するための研究
手段として用いられ得る。あるいは、インビボでＨＩＶ
の増殖を阻害するために薬学的に投与され得る。

【００５８】ＨＩＶを阻害するためのβ−Ｄ−（−）−
ジオキソラン−ヌクレオシドの能力は、種々の実験方法
によって測定され得る。本発明書で用いられ、そして以
下で詳細に述べられる方法は、ＨＩＶ−１（ＬＡＶ株）
に感染した、フィトヘムアグルチニン（ＰＨＡ）で刺激
されたヒト末梢血単核（ＰＢＭ）細胞におけるウイルス
の複製の阻害を測定する。ウイルスでコードされた逆転
写酵素を測定することにより、生成したウイルスの量を
決定する。生成した酵素の量をＨＩＶの対照物と比較す
る。この方法を以下で詳細に述べる。

【００５９】ヒト末梢血単核細胞における抗ウイルスお
よび細胞毒性のアッセイＡ．Ｂ型肝炎およびＨＩＶ−１について血清陰性（sero
negative）の健康なドナー由来の３日齢のフィトヘムア
グルチニンで刺激されたＰＢＭ細胞（１０⁶細胞／ml）
を、１ml当り５０％組織培養感染用量（ＴＩＣＤ５
０）の約１００倍の濃度のＨＩＶ−１（ＬＡＶ株）で感
染させ、そして種々の濃度の抗ウイルス性化合物の存在
下または非存在下で培養した。

【００６０】Ｂ．感染させて、およそ４５分後に、この
培地を、試験されるべき化合物（培地中に最終濃度の２
倍の濃度）とともに、または化合物なしで、フラスコに
加えた（５ml；最終容量１０ml）。ＡＺＴを陽性の対照
として用いた。

【００６１】Ｃ．これらの細胞をウイルス（約２×１０
⁵dpm/ml，逆転写酵素アッセイにより測定された）に晒
し、次いでＣＯ₂インキュベーター中に置いた。ＨＩＶ
−１（ＬＡＶ株）はCenter for Disease Control（アト
ランタ、ジョージア州）から得た。ＰＢＭ細胞の培養
の、ウイルスの採収、および逆転写酵素活性の測定に用
いられた方法は、フンギゾン（fungizone）を培地に含
めないこと（Schinaziら、Antimicrob. Aents Chemothe
r. 32, 1784-1787(1988）参照）以外は、McDougalら(J.
Immun. Meth. 76, 171-183, 1985)および Spiraら(J.
Clin. Meth. 25, 97-99, 1987）に記載の方法であっ
た。ウイルス感染した対照における逆転写酵素活性は、
約２×１０⁵dpm/mlであった。ブランクおよび非感染細
胞の対照の値は、それぞれ約３００dpmおよび１，００
０dpmであった。工程Ｂの前に工程Ｃを行った場合に
も、同様の結果が得られる。

【００６２】Ｄ．６日目に、これらの細胞および上清液
を１５mlの試験管に移し、そして約９００ｇで１０分間
遠心分離した。５mlの上清液を除去し、そしてウイルス
を４０，０００rpmで３０分間遠心分離（Beckman 70.1
Tiローター）することによって濃縮した。溶解したウイ
ルスのペレットを作製して、逆転写酵素のレベルを測定
した。結果をサンプルした上清液の ml当りのdpmで表
す。（−）−１−〔（２β，４β）−２−（ヒドロキシ
メチル）−４−ジオキソラニル〕チミンの５０％有効濃
度（ＥＣ₅₀）を、５０％効果方法（median effectmetho
d）（antimicrob. Agents Chemother. 30, 491-498(198
6)によって測定した。簡単にいうと、逆転写酵素の測定
から決定されたウイルスの阻害の割合を、化合物のマイ
クロモル濃度に対してプロットする。ＥＣ₅₀は、ウイル
スの増殖を５０％阻害する化合物の濃度である。ＰＢＭ
細胞における（−）−１〔（２β，４β．）−２−（ヒ
ドロキシメチル）−４−ジオキソラニル〕チミンのＥＣ
₅₀は、０．２μMと測定された。この活性は、２′,３′
−ジデオキシアデノシン（ＤＤＡ，ＥＣ₅₀＝０．９１μ
M）、３′−アジド−２′,３′−ジデオキシウリジン
（ＡＺＤＵ，ＥＣ₅₀＝０．１８−０．４６μM）、およ
び３′−ジデオキシチミジン（ＤＤＴ，ＥＣ₅₀＝０．１
７μM）にまさるとも劣らない。これらは、ＦＤＡで臨
床段階の試験を行っている構造が類似した化合物であ
る。

【００６３】III．ジオキソランヌクレオシドの毒性ミトゲンで刺激された非感染のヒトＰＢＭ細胞（３．８
×１０⁵細胞／ml）を、上述の抗ウイルスアッセイに用
いた条件と同様の条件で、薬物の存在下および非存在下
で培養した。血球計、およびSchinaziらの Antimicrobi
al Agents andChemotherapy, 22(3), 499(1982）に記載
のトリパンブルー排除法を用いて、これらの細胞を６日
後に数えた。ＩＣ₅₀は、通常の細胞増殖の５０％を阻害
する化合物の濃度である。

【００６４】（−）−１−〔（２β，４β）−２−（ヒ
ドロキシメチル）−４−ジオキソラニル〕チミンを１０
０μMまでにわたって測定したところ、この化合物は評
価された非感染のＰＢＭ細胞中では１００μMまで毒性
がないことを示した。

【００６５】IV．薬学組成物の調製ＨＩＶの感染により引き起こされる疾病にかかった患者
は、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤の存在下
においてβ−Ｄ−（−）−ジオキソラン−ヌクレオシド
またはその塩の効果的な量を投与することにより処置さ
れ得る。活性物質は、任意の適切なルート、たとえば、
経口、腸管外、静脈、皮内、皮下、または局所的に、液
体または固体形態で投与され得る。

【００６６】活性化合物は、治療上効果的な量の化合物
を患者に送達するために充分な量で、薬学的に受容可能
なキャリアまたは希釈剤中に含まれる。これによって、
処置される患者に深刻な毒性の影響を与えることなく、
インビボでＨＩＶの複製が阻害される。「ＨＩＶ阻害
量」は、ＨＩＶ阻害効果をもたらすために十分な活性成
分の量を意味する。この効果は、たとえば、本明細書に
記載するようなアッセイにより測定される。

【００６７】これらの調製物は、活性成分の血清中濃度
を約０．２から４０μMとする。好適な濃度範囲は、
０．２から２０μMであり、最も好適には約１から１０
μMである。

【００６８】薬学組成物は、１日体重１キログラムにつ
き、１から６０ミリグラムの化合物の投与量を提供す
る。薬物組成物中における活性化合物の濃度は、薬物の
吸収率、不活性率、および排出率、そして当業者に周知
の他の要素に依存する。投与量の値はまた、緩和すべき
症状の重篤さによっても変化することに注意されたい。
さらに、任意の特定の被験者について、特定の投与プロ
グラムは、個人の必要に応じて、および組成物を投与す
る者または投与の監督を行う者の専門家としての判断に
応じて、経時的に調節される。本明細書に記載の濃度範
囲は、例示にすぎず、本発明の組成物の範囲または使用
を制限するものではない。活性成分は、一度に投与され
得るし、また、少量ずつ分けて様々な時間的間隔をおい
て投与され得る。

【００６９】活性化合物の好適な投与方法は、経口であ
る。経口により投与する組成物は、一般に不活性な希釈
剤または食用のキャリアを含む。これらはゼラチンカプ
セルに封入され得、また、タブレット状に圧縮され得
る。経口治療投与のために、活性組成物は賦形剤と混合
され、タブレット、トローチ、またはカプセルという形
態で使用され得る。薬学的に適合性を有する結合剤およ
び／またはアジュバント物質が、組成物の一部として含
まれ得る。

【００７０】タブレット、ピル、カプセル、およびトロ
ーチ等は、以下の成分または同様の性質を有する化合物
を任意に含み得る：微結晶セルロース、トラガカントゴ
ム、またはゼラチンのようなバインダー；スターチまた
はラクトースのような賦形剤、アルギン酸、プリモゲル
（Primogel）、またはコーンスターチのような崩壊剤；
ステアリン酸マグネシウムまたはステロテス（Sterote
s）のような滑剤（lubricant）；コロイド状二酸化ケイ
素のような滑剤（glidant）；スクロースまたはサッカ
リンのような甘味料；または、ペパーミント、サリチル
酸メチル、またはオレンジ香味料のような香味料。

【００７１】投与単位形態がカプセルである場合、カプ
セルは、上記の種類の物質に加えて、脂肪油のような液
体キャリアを含み得る。さらに、投与単位形態は、投与
単位の物理的形態を改変する他の様々な物質、たとえ
ば、砂糖、シェラック、または他の腸剤のコーティング
を含み得る。

【００７２】β−Ｄ−（−）−ジオキソラン−ヌクレオ
シドまたはその塩は、エリキシル、懸濁液、シロップ、
オブラート、またはチューインガム等の成分として投与
され得る。シロップは、活性化合物に加えて、甘味料と
してのスクロース、および特定の防腐剤、染料および着
色料、そして香味料を含み得る。

【００７３】β−Ｄ−（−）−ジオキソラン−ヌクレオ
シドまたはその塩はまた、所望の作用をそこなわない他
の活性物質、または、所望の作用を補う物質、例えば抗
生物質、抗真菌剤、抗炎症剤、または他のヌクレオシド
抗ＨＩＶ化合物を含む他の抗ウイルス剤などと混合され
得る。

【００７４】腸管外、皮内、皮下、または局所的投与の
ための溶液または懸濁液は、以下の成分を含み得る：注
射用水、生理食塩水、不揮発性油、ポリエチレングリコ
ール、グリセリン、プロピレングリコール、または他の
合成溶媒のような無菌希釈液；ベンジルアルコールまた
はメチルパラベンのような抗菌剤；アスコルビン酸また
は重亜硫酸ナトリウムのような抗酸化剤；エチレンジア
ミン四酢酸のようなキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩、
またはリン酸塩のような緩衝剤および塩化ナトリウムま
たはデキストロースのような緊張性調整剤。腸管外投与
される調製物は、アンプル、使い捨て注射器、または、
ガラスまたはプラスチック製の複数投与量バイアル内に
封入され得る。

【００７５】静脈投与される場合、好適なキャリアは、
生理的食塩水または食塩加リン酸緩衝液（ＰＢＳ）であ
る。

【００７６】好適な実施態様において、活性化合物は、
化合物の体内からの急速な排出を防ぐキャリアと共に調
製される。上記キャリアの例は、インプラントおよびマ
イクロカプセル化送達システムを含む、制御型放出製剤
のようなものである。生物分解性を有し、かつ、生体適
合性であるポリマー、たとえば、エチレン酢酸ビニル、
ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオル
トエステル、およびポリ乳酸などが用いられ得る。この
ような製剤の調製方法は、当業者には明かである。これ
らの物質はまた、Alza Corporationおよび Nova Pharma
ceuticals, Inc. から市販されている。リポソーム懸濁
液（感染細胞を標的とすべく、ウイルス性抗原に対する
モノクローナル抗体を備えたリポソームを含む）もま
た、薬学的に受容可能なキャリアとして好適である。こ
れらは、当業者に周知の方法、たとえば、米国特許第
４，５２２，８１１号（参考のため全体的に本明細書に
援用される）に記載の方法により調製され得る。たとえ
ば、リポソーム製剤は、以下のように調製され得る。適
切な脂質または脂質群（ステアロイル（stearoyl）ホス
ファチジルエタノールアミン、ステアロイルホスファチ
ジルコリン、アラカドイル（arachadoyl）ホスファチジ
ルコリン、およびコレステロールなど）を、無機溶媒中
に溶解し、その後、エバポレートして、容器の表面上に
乾燥した脂質の薄膜を残す。活性化合物、またはそのモ
ノリン酸エステル、ジリン酸エステル、および／または
トリリン酸エステル誘導体の水溶液を、その後、容器に
導入する。容器をその後手で揺り動かして、脂質物質を
容器側壁から遊離させ、かつ、脂質凝集物を分散させ
て、それによりリボソーム懸濁液を調製する。

【００７７】Ｖ．β−Ｄ−（−）−ジオキソラン−ヌク
レオシドのリン酸エステル誘導体の調製 β−Ｄ−（−）−ジオキソラン−ヌクレオシドのモノ、
ジ、およびトリリン酸エステル誘導体は、以下に記載す
るように調製され得る。

【００７８】モノリン酸エステルは、Imaiら、J. Org.
Chem., 34(6), 1547-1550（1969年6月）の方法にしたが
って調製され得る。たとえば、約１００mgのβ−Ｄ−
（−）−ジオキソラン−ヌクレオシドおよび約２８０μ
ｌの塩化ホスホリルを、約０℃で約４時間、約８mlの乾
燥酢酸エチル中で撹拌することにより反応させる。反応
を、氷でクエンチする。水相を、活性炭カラムで精製
し、エタノールと水との１：１混合液中の５％水酸化ア
ンモニウムにより溶離させる。溶離液をエバポレートす
ることにより、アンモニウム−（β−Ｄ−（−）−ジオ
キソラン−ヌクレオシド）−５′−モノリン酸エステル
が得られる。

【００７９】ジリン酸エステルは、Davissonら、J. Or
g. Chem., 52(9), 1794-1801（1987）の方法にしたがっ
て調製され得る。β−Ｄ−（−）ジオキソラン−ヌクレ
オシドは、対応するトシレートから調製され得る。この
トシレートは、たとえばヌクレオシドを室温で約２４時
間ピリジン中の塩化トシルと反応させ、生成物を常法ど
おり後処理（たとえば、洗浄、乾燥、および結晶化）す
ることにより調製され得る。

【００８０】トリリン酸エステルは、Hoardら、J. Am.
Chem Soc., 87(8), 1785-1788 (1965）の方法にしたが
って調製され得る。たとえば、β−Ｄ−（−）−ジオキ
ソラン−ヌクレオシドを（当業者に周知の方法にしたが
ってイミダゾリドを生成することにより）活性化させ、
ＤＭＦ中のピロリン酸トリブチルアンモニウムにより処
理する。反応により、主にヌクレオシドのトリリン酸エ
ステルが生成され、同時に多少の未反応モノリン酸エス
テルおよびジリン酸エステルが得られる。ＤＥＡＥカラ
ムの陰イオン交換クロマトグラフィーによる精製に続い
て、トリリン酸エステルをたとえば四ナトリウム塩とし
て単離する。

【００８１】本発明を、好適な実施態様に基づいて説明
してきた。本発明による鏡像異性的に純粋なβ−Ｄ−
（−）−ジオキソラン−ヌクレオシドの変形および変更
は、当業者にとって、上記の発明の詳細な説明から明ら
かである。これらの変形および変更はすべて、添付の請
求の範囲に含まれるものとする。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は、（±）−１−〔（２β，４β）−２−
（ヒドロキシメチル）−４−ジオキソラニル〕チミン
（ジオキソラン−Ｔ）および（±）−１−〔２β，４
β〕−２−（ヒドロキシメチル）−４−（１，３−チオ
キソラン）〕チミン（ＢＣＨ−１８９）の化学構造を示
す図である。

【図２】図２は、鏡像異性的に純粋なβ−Ｄ−（−）−
ジオキソラン−チミンの合成方法を示す図である。

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 31/53 Ａ６１Ｋ 31/53 Ａ６１Ｐ 31/18 Ａ６１Ｐ 31/18 Ｃ０７Ｄ 473/18 Ｃ０７Ｄ 473/18 473/30 473/30 473/34 ３１１ 473/34 ３１１３５１３５１ 473/40 473/40 (71)出願人 592213741 エモリユニバーシティＥｍｏｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙアメリカ合衆国 30322 ジョージア州アトランタサウスオックスフォードロード 1380 (72)発明者チュン，ケイ．チュウアメリカ合衆国ジョージア 30605 アセンス，オーチャードノブレイン 120 (72)発明者レイモンド，エフ．シナッツィアメリカ合衆国ジョージア 30033 デカトゥー，リージェンシーウォークドライブ 1524

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】１，６−アンヒドロマンノースからジオ
キソラン環を調製する工程を包含する、鏡像異性的に純
粋なβ−Ｄ−（−）−ジオキソラン−ヌクレオシドの調
製方法。
【請求項２】前記１，６−アンヒドロマンノースをそ
の（２，３）−イソプロプリデン誘導体に変換する工程
をさらに包含する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】前記１，６−アンヒドロマンノースの
２，３−イソプロピリデン誘導体を、（−）−１，６−
アンヒドロ−４−０−ベンゾイル−２，３−イソプロピ
リデン−β‐Ｄ−マンノピラノースにベンゾイル化する
工程をさらに包含する、請求項２に記載の方法。
【請求項４】前記（−）−１，６−アンヒドロ−４−
０−ベンゾイル−２，３−イソプロピリデン−β−Ｄ−
マンノピラノースを、（−）−（２Ｒ，４Ｒ）−４−
（２−ベンゾキシ−１−ヒドロキシエチル）−２−（ヒ
ドロキシメチル）−ジオキソランに酸化する工程をさら
に包含する、請求項３に記載の方法。
【請求項５】前記ジオキソランの２−ヒドロキシ位を
酸素保護基で保護する工程をさらに包含する、請求項４
に記載の方法。
【請求項６】前記酸素保護基が、トリメチルシリル、
ジメチルヘキシルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、
ｔ−ブチルジフェニルシリル、トリチル、アルキル基、
アシル基、ベンゾイル、ｐ−ＮＯ₂ベンゾイル、トルイ
ル、メチルスルホニル、およびｐ−トルイルスルホニル
からなる群から選択される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】（−）−（２Ｒ，４Ｒ）−２−（保護−
０−メチル）−４−（１，２−ジヒドロキシエチル）−
ジオキソランを生成するために、前記ベンゾイル基を、
前記２−ヒドロキシエチル位から除去する工程をさらに
包含する、請求項５に記載の方法。
【請求項８】（２Ｒ，４Ｒ）−および（２Ｒ，４Ｓ）
−４−アセトキシ−２−（保護−オキシメチル）ジオキ
ソランからなる群から選択される化合物を形成するため
に、前記（＋）−（２Ｒ，４Ｒ）−２−（保護−オキシ
メチル）−４−カルボキシジオキソランを酸化する工程
をさらに包含する、請求項７に記載の方法。
【請求項９】（２Ｒ，４Ｒ）−および（２Ｒ，４Ｓ）
−４−アセトキシ−２−（保護−オキシメチル）−ジオ
キソランを、（２Ｒ，４Ｒ）−および（２Ｒ，４Ｓ）−
４−アセトキシ−２−（保護−オキシメチル）−ジオキ
ソランからなる群から選択される生成物に変換する工程
をさらに包含する、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】前記ジオキソラン環を、プリンおより
ピリミジン塩基からなる群から選択されたヘテロ環式塩
基と縮合する工程をさらに包含する、請求項１に記載の
方法。
【請求項１１】（２Ｒ，４Ｒ）−または（２Ｒ，４
Ｓ）−４−アセトキシ−２−（保護−オキシメチル）−
ジオキソランを、プリンおよびピリミジン塩基からなる
群から選択されるヘテロ環式塩基と縮合する工程をさら
に包含する、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】前記ヘテロ環式塩基が、アデニン、ヒ
ポキサンチン、Ｎ⁶−アルキルプリン、Ｎ⁶−ベンジルプ
リン、Ｎ⁶−ハロプリン、グアニン、チミン、シトシ
ン、６−アザピリミジン、２−メルカプトピリミジン、
およびウラシルからなる群から選択される、請求項１０
に記載の方法。
【請求項１３】前記ヘテロ環式塩基が、アデニン、ヒ
ポキサンチン、Ｎ⁶−アルキルプリン、Ｎ⁶−ベンジルプ
リン、Ｎ⁶−ハロプリン、グアニン、チミン、シトシ
ン、６−アザピリミジン、２−メルカプトピリミジン、
およびウラシルからなる群から選択される、請求項１１
に記載の方法。
【請求項１４】前記ジオキソランヌクレオシドが、
（−）−１−〔（２β，４β）−２−（ヒドロキシメチ
ル）−４−ジオキソラニル〕チミジンである、請求項１
に記載の方法。
【請求項１５】塩基がアデニン、ヒポキサンチン、Ｎ
⁶−アルキルプリン、Ｎ⁶−ベンジルプリン、Ｎ⁶−ハロ
プリン、チミン、シトシン、６−アザピリミジン、２−
メルカプトピリミジン、又はウラシルである、鏡像異性
的に純粋なβ−Ｄ−ジオキソランヌクレオシド又は薬学
的に許容可能なその塩。
【請求項１６】（−）−１−〔（２β，４β）−２−
（ヒドロキシメチル）−４−ジオキソラニル〕チミジン
である、請求項１５に記載の鏡像異性的に純粋なβ−Ｄ
−ジオキソランヌクレオシド。
【請求項１７】塩基がアデニン、ヒポキサンチン、Ｎ
⁶−アルキルプリン、Ｎ⁶−ベンジルプリン、Ｎ⁶−ハロ
プリン、チミン、シトシン、６−アザピリミジン、２−
メルカプトピリミジン、又はウラシルである、鏡像異性
的に純粋なβ−Ｄ−ジオキソランヌクレオシドのモノ
−、ジ−もしくはトリホスフェート、又は薬学的に許容
可能なその塩。
【請求項１８】塩基がアデニン、ヒポキサンチン、Ｎ
⁶−アルキルプリン、Ｎ⁶−ベンジルプリン、Ｎ⁶−ハロ
プリン、チミン、シトシン、６−アザピリミジン、２−
メルカプトピリミジン、又はウラシルである、鏡像異性
的に純粋なβ−Ｄ−ジオキソランヌクレオシドのモノホ
スフェート又は薬学的に許容可能なその塩。
【請求項１９】ＨＩＶを阻害するのに有効な量の、塩
基がアデニン、ヒポキサンチン、Ｎ⁶−アルキルプリ
ン、Ｎ⁶−ベンジルプリン、Ｎ⁶−ハロプリン、チミン、
シトシン、６−アザピリミジン、２−メルカプトピリミ
ジン、又はウラシルである、鏡像異性的に純粋なβ−Ｄ
−ジオキソランヌクレオシド及び薬学的に許容可能なキ
ャリア又は希釈剤を含む、ＨＩＶ阻害剤。
【請求項２０】前記鏡像異性的に純粋なβ−Ｄ−ジオ
キソランヌクレオシドが、（−）−１−〔（２β，４
β）−２−（ヒドロキシメチル）−４−ジオキソラニ
ル〕チミジンである、請求項１９に記載のＨＩＶ阻害
剤。
【請求項２１】ＨＩＶ感染患者を治療するための医薬
の製造における、塩基がアデニン、ヒポキサンチン、Ｎ
⁶−アルキルプリン、Ｎ⁶−ベンジルプリン、Ｎ⁶−ハロ
プリン、チミン、シトシン、６−アザピリミジン、２−
メルカプトピリミジン、又はウラシルである、鏡像異性
的に純粋なβ−Ｄ−ジオキソランヌクレオシドの使用。
【請求項２２】前記鏡像異性的に純粋なβ−Ｄ−ジオ
キソランヌクレオシドヌクレオシドが、（−）−１−
〔（２β，４β）−２−（ヒドロキシメチル）−４−ジ
オキソラニル〕チミジンである、請求項２１に記載の使
用。