JPS63107936A - 後天性免疫不全症ａｉｄｓに対する医薬 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はヒトに於けるＨＩＶ−感染に対する医薬、その
製造方法及びその使用方法に関するものであり、本発明
の使用領域は医学又は薬学業界である。

ＡＩＤＳは数年前から有名な、ＨＩＶ（ＨＴＬＶ　ＩＩ
ｌ［／ＬＡＶ、ヒ）　Ｔ　−ＩＪンハ趨性ウつルスＷｍ
／！ＪンパによるＴ−ヘルパー細胞の破壊が原因である
とみなされている。これから生じる防御不全のために、
重い日和見感染、カボージ肉腫及びいわゆるＡＩＤＳ−
脳障害を生じる。従来、有効かつ相客な抗ウイルス性療
法は見い出されていない。

これに対する作用点はウィルス−コード化された逆転写
酵素であり、その阻害はそれ以上の細胞内ウィルス増殖
を妨害し、それと同時に体内でのその伝播を止めること
ができる酵素である。

最初に臨床実験された、ＨＩＶ　−＋）バターゼ阻害物
質、たとえばスラミン〔商品名ゲルマニン（Ｑｅｒｍａ
ｎｉｎ））及びＨＰＡ　２８は不可欠な相容性及び所望
の有効性をまだ達成していない。ただ３′−アジドチミ
ジン（Ｎ３ＴｄＲ）　（ドイツ特許出願公開ｉ　８，６
０８，６０６号明細書）がニューモジステイス症カリニ
肺炎のＡＩＤＳ−患者に明らかに延命効果を与えるにす
ぎない。この効果は臨床及び神経学の現状の改善並びに
特定の免疫学的機能の一時的な回復を伴っている（ミソ
ヤ等、ネイチャー−１１丘、７７８（１９８７）　）。

これに対して骨髄に於け“るｓ”、　ｆ４．、≠もトチ
ミジンの毒性副作用が治療された患者の約５０％で輸血
を必要とする。このことは特にＨＩＶ−逆転写酵素の選
択的阻害物質が不可欠であることを示し、一方その有効
性も増加しなければならない。

本発明の目的はＨＩＶ−感染に対する医薬を調製するこ
とにある。

本発明者は一般式（Ｉ） Ｐ゛ （式中 Ｒ１はチミン−１５−置換されたウラシル−、ウラシル
−、チトシンー、５−置換されたチトシン誘導体−１２
−フルオルアデニン−１２，６−ジアミツプリンー、２
−アミノ−プリン−１６−チオゲアニンー又は７−ゾア
ゼアデニン残基、 Ｒ２はＨ又はＯＨを、 Ｒ３はＯＨ，ｏ−アセチル基、０−バルミトイル基、ト
リホスフェート基（遊離の酸又はそのアルカリ−、アン
モニウムモジくハアルキルアンモニウム塩として） 又はヒドロキシ基に対する前駆基を示す。）なる置換さ
れたピリミジン−又はプリンヌクレオシド１又は数種が
、単独で又は薬学的に相客な担体と共にＨＩＶ−感染に
対する有効な剤であることを見い出した。したがって一
般式（Ｉ）なる化合物はヒトに於けるＡＩＤＳの治療又
は予防に使用される。

２？　３／−ジデソキシー３′−フルオルーチミジン（
８／−ＦＴｄＲ）が特に活性であることが明らかである
。その有効性は次の通りである： １、　ＨＩＶ連合された逆転写酵素の阻害先ず８／−Ｆ
ＴｄＲのトリホスファート（８′−ＦｄＴＴＰ）を、Ｈ
工ｖ連合された逆転写酵素によるｐｏｌｙＡ。

ｏ１ｉｇｏｄＴ鋳型の重合を阻害する能力について試験
する。その際このウィルス酵素の５０％ｉｌＫ必要であ
る濃度（ＩＤｓｏ）は０．０５μＭであること及び完全
な阻害はｏ、ｓ−ｉ、ｏμＭで得られることが分る（第
一図）。それ故に８’−ＦｄＴＴＰはＨＩＶ逆転写酵素
の最も強力な、従来見い出された阻害物質に属する。作
用機序に関する試験から次のことが分る：　ａ’−Ｆｄ
ＴＴＰが競合阻害物質として基質の結合位置をふさぎ、
一方ブライマー中へのその組み入れ及びこれに開運する
連鎖停止は大抵の場合その阻害に際して二次的な役割を
果す。

３’−ＦｄＴＴＰに相反して２；　３　／−ジデソキシ
ー３′−クロルーチミジントリホスファートハ、ＨＩＶ
一連合逆転写酵素に比して同一の濃度範囲で全く効果が
ないことが明らかである。このことは、このヌクレオチ
ド同族体の３′−置換体が酵素の特異的機能を満たし、
かつ高い有効性を維持しなければならない場合に、任意
に置換され得ないことを示す。

ＨＩＶ逆転写酵素に対する８’−ＦｄＴＴＰＯ強い阻害
作用は、細胞ＤＮＡポリメラーゼ、特に細胞ＤＮＡの複
製に”対して特有のＤＮＡポリメラーゼαが著しく影響
を受けない場合にしか利用することができない。ＤＮＡ
ポリメラーゼαに該当する試験を示す（第二図）。この
細胞性酵素の５０％阻害は２００μＭ　８’−ＦｄＴＴ
Ｐでもまだ得られない。すなわちＤＮＡポリメラーゼα
はＨＩＶ逆転写酵素よシ４０００倍以上感受性が低い。

細胞性ＤＮＡ修復の原因となるＤＮＡポリメラーゼβに
関しては、より５ｏは約２．２μＭである。すなわちこ
の酵素の５０％阻害に関してＨＩＶに対するよシも４４
倍高い濃度が必要である。

８、　８’　ＦＴｄＲの細胞内リン酸化ヌクレオシドと
してしか使用されない物質をリン酸化してトリホスファ
ートとなす感染された細胞の能力が、８’−ＦＴｄＲの
有効性を決定する。

３′−変性されたデソキシヌクレオシドノ種−依存性リ
ン酸化は、全＜２，７３′−ジデンキシチミジンの場合
と同様にＨＩＶ　−ＩＪバターゼーテストで極めて有効
な化合物の作用を著しく低下することができる。したが
って３’−ＦＴｄＲのリン酸化を種々の種の細胞で試験
する。表１に示した様に試験される細胞の１μＭＦＴｄ
Ｒを４時間培養して極めて種々の有効性と共にトリホス
ファートに変換する。定量的比較に関して、種々の細胞
周期一時間も考慮しなければならず、そして細胞周期の
０１−又はＳ−相中で４時間の培養の間に存在する細胞
の割合のみをリン酸化しなければならないとはいえ、ヒ
トの細胞系ＢＥＨ及びＭＴ−４に対して見い出されるチ
オホスファートーｆ　１−２　ｐｍｏｌｅ／１０６細胞
は極めて十分であるとみなすことができる。非感染の又
はＨＴＬＶ−ｍ、感染されたＮ９−細胞及びＬＡＶ　−
ｎ感染されたＣＥＭ−細胞に関しても検出された８’−
ｄＦＴＴＰ濃度はこの範囲内にあるので、Ｔ−細胞のＡ
ＩＤＳ　−ウィルス−感染は８’−ＦＴｄＲのリン酸化
可能性を変えないことが明白である。これと比較して５
０μＭＮ３−　ＴｄＲ−溶液のチオポスファートへのリ
ン酸化は、ＨＴＬＶ−ｍＢ感染されたＮ９−細胞によっ
て２４時間培養して０．９　ｐｍｏｌｅ／　１０　　細
胞しか認められない〔バーマン（ｐｕｒｍａｎ）等、ｐ
ｒｏｃ。

Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、米国８８　、８３８
８（１９８６））。同時にＮ３−　ＴｄＲ−モノホス７
アートの著しい変換物が生じる（４６０　ｐｍｏｌｅ／
１０６細胞）。コノコトハチミシラートーキナーゼの著
しい阻害を示し、細胞ＤＮＡ−合成を著しく妨害する、
デンキシヌクレオシドトリホスファートー基質プール（
Ｐｏｏｌ）の変化に更に及ぶ（バーマン等、上記参照）
。

８／−ＦＴｄＲはこの重要な作用をチミジラートーキナ
ーゼに対して生じるので（表１参照）、著しい細胞のプ
ール（Ｐｏｏｌ）変化は８／−ＦＴｄＲがＮ５−ＴｄＲ
に比して明らかにより良好にリン酸化されるとはいえ、
予期することができない。

２−３のチミジン−代謝拮抗物質、たとえばヨードデン
キシウリジン、プロムデノキシウリジン又はプロムビニ
ルデソキシウリジンはヒトのチミジン−ホスホリラーゼ
によって広い範囲で分解して有効でないピリミジン塩基
及び糖ホスファートとなるので、その系統的使用が問題
となシうる。したがって３’−ＦＴｄＲをチミジン−ホ
スホリラーゼによるその分解性についてヒトの肺臓から
試験する。その際１　ｍＭ　３’−ＦＴｄＲ−溶液を３
時間以内で約３−５％にしか分解せず、それによってチ
ミジンと比較して（２時間で９０％分解）この酵素に対
してほぼ耐性であるとみなす。

５、　　ＭＴ−４−細胞に於けるＨＩＶの細胞病原作用
の阻害 ８′−ＦＴｄＲの実際の細胞有効性を検出するために、
８’−ＦＴｄＲがどの程度でＨＩＶの細胞病原作用を無
効にすること力；できるが試験する。これに約４０．Ｏ
ＯＯＭＴ　−４−細胞（ハラダ等、サイエン、１．２２
９　、５６８　、　（１９８５））をＲＰＭＩ−培地２
００ｐｌ及び１０％胎児子件血清中にＨＩＶと共に接種
しく力価＋０．０１８モル）、５日間培養後、生細胞を
死亡細胞からトリバンプルー染色可能性によって区別し
、数をかぞえる。ウィルスの細胞死滅効果の５０％阻害
に必要である濃度（ＥＤ、ｏ）は８’　ＦＴｄＲに関し
て８．８１Ｍであシ、比較としてＮ３−　ＴｄＲに関し
て６．４ｎＭである。２．′３′−ジデヒドロー２：　
ａ／−ジデノキシチミジンに関しては１０　ｎＭのＥＤ
５ｏ及び２．／　３／−ジデンキシチジンに関しては６
　Ｑ　ｎＭのＥＤ５Ｑを示す（Ｍ、ババ等、Ｂｔｏｃｈ
ｅｍ。

Ｂｉｏｐｈｙｓ、　Ｒｅｓ、　Ｃｏｍｍｕｎ、　１４２
　＋　１２８　（１９８７））。　したがって３’−Ｆ
ＴｄＲは記載されたＨＴ　−４−細胞系中で現在有効な
化合物とみなされる。

６、　ヒトの細胞培養中で８’−ＦＴｄＲの細胞毒性８
ｌ−ＦＴｄＲは主に細胞性塞栓剤として発展しく１９６
９））、したがって広汎な研究で細胞性塞栓作用に基づ
いて試験されている。しかしく９種類の動物腫瘍に対す
る）　ＵＳＡのＮＣｌ−プログラムに於ける２−３の調
査及び試験は３’−ＦＴｄＲに関してほんの僅か々細胞
性塞栓作用を生じるにすぎない。例外はエーリッヒーマ
ウスー腹水−腫瘍細胞である。このことは恐ら＜　８’
−ＦＴｄＲに対するその高いリン酸化能力と関係する（
ヒトの細胞に於けるよシも１０倍高い）。その際ＦＭＡ
Ｃ−細胞での細胞性塞栓作用の急速な可逆性は、この化
合物の特殊性として記録されている（Ｐ、ランダン等、
Ｅｕｒｏｐ、　Ｊ、　Ｃａｎｃｅｒ　１４　＋　８４９
（１９７８））。ヒトにこの化合物を使用できるという
ことから８’−ＦＴｄＲの抗増殖性作用及びＮ５−Ｔｄ
Ｒとの比較をヒトの細胞で試験する。表２は■Ｄ５゜−
値をもとにして８’−ＦＴｄＲの及びＮ３−　ＴｄＲの
種々の細胞の細胞増殖性への影響は、極めてさまざまで
あることを示す。８’−ＦＴｄＲとＮ３−　ＴｄＲとを
比較した場合、その作用は極めて類似し、しかしＮ５Ｔ
ｄＲに関しては夫々の場合にＦＴｄＲにょるよシ常に若
干少ない。

８−　ＦＴｄＲの利点は次の通ｂｔとめることができる
。

１、細胞テストでＮ５ＴｄＨに比して２倍の有効性。

２、　ヒトのＴ−細胞系によってＮ５ＴｄＲに比してよ
り良好なリン酸化。

３、　　ＴｄＲ−ホスホリラーゼに対する耐性。

４、　　Ｎ５ＴｄＲに比してＩ−キナーゼ及びｄＮＴＰ
−基質プールへのより僅かな作用。

５、代替可能な特別の可逆性細胞毒性。

他の有効化合物は特に次のものである：２、／　ａ／−
ジデソキシー３′−フルオルー５−ブロムウリジン、２
ζ３７−ジデソキシー３′−フルオルシチジン、２．／
８／−ジデンキシー３７−フルオルー５−エチルウリジ
ン、３′−デツキシー３′−フルオルアラビノシルシト
シン　２ｊＢ／−ジデンキシー３７−フルオルー２−フ
ルオルアデノシン　２：Ｂｌ−ジデソキシー３／−フル
オル−６−チオグアノシン、２．／　８／−ジデソキシ
ー３１−フルオル−２，６−ジアミツプリンリボシド　
２ｊ　Ｂｌ−ジデソキシー３／−フルオルー２−アミノ
プリンリボシド、３１−デツキシー３１−フルオルアラ
ビノジルアデニン。

本発明の実施形態に於て一般式（Ｉ）なる化合物を、ヒ
トに於てＨＩＶ−感染の治療又は予防のための医薬を製
造するために使用する。

更に人間の患者に於けるＡＩＤＳの治療又は予防方法も
包含する。この方法は本発明による化合物１又は数種の
有効量を人間の患者に投与することである。

本発明による剤は一般式（Ｉ）に対応する有効成分１又
は数種をこれに相客な担体１又は数種と共に及び場合に
よシその他の治療剤と共に含有する。この剤を有効成分
の単位薬用量で製造する又はその数倍を含有する様に製
造する。夫々の担体は相容性であり、剤のその他の成分
と調和しなければならず、かつ患者に有害であってはな
らない。

医薬は経口、直腸、鼻、局所、膣又は腸管外（皮下、筋
肉内、静脈内、腹腔内も含めて）投与に適するものであ
る。有効成分１又は数種を随伴成分１又は数種から成る
担体と接触させ、必要な場合対応する形で使用する。

本発明による経口投与用薬剤は糖衣丸錠剤、カプセルの
形で、粉末又は顆粒として調製される。これらは夫々活
性成分の特定量を含有する。

同様にこれを溶液として又は懸濁液として調製すること
もできる。場合にょシ風味剤又はその他の通常の剤を加
える。

直腸投与用薬剤を適する塩基との坐剤として調製する。

膣投与用薬剤をペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル
、ペースト、フオーム又ハスプレー製品として調製する
。

腸管外投与用剤を有効成分の単位薬用量として又は数倍
の薬用量として調製することができる。

このためにアンプル、長頚フラスコの形で又は凍結乾燥
状態で貯蔵することができる。直ちに調製された注射溶
液及び懸濁液を無菌粉末、顆粒及び錠剤から得ることが
できる。これはたとえば物質を生理食塩水、グルコース
又は静脈内注射又は注入に適するその他の媒体中に溶解
して行われる。ＡＩＤＳ−患者の治療のためにａ′−Ｆ
ＴｄＲ及び生理食塩水から０．３％溶液の必要量を製造
し、これを滅菌し、患者に１時間以内で静脈内に注入す
る。注入を全部で４−８時間くシ返し、少なくとも８−
１ｏ日間続ける。

実施例 注射溶液 ８′−ＦＴｄＲ及び生理食塩溶液からｏ、３％溶液の必
要量を調製する。

例２ 錠剤又は糖衣丸 粉末化された８’　ＦＴｄＲを通常の担体１又は数種、
たとえばでんぷん、メルク、ステアリン酸マグネシウム
、ステアリン酸カリウム、ステアリン酸、ハラフィン、
セチルアルコール、ペタｌチン、ショ糖、アラビアゴム
、デキストリンと共に加工して錠剤又は糖衣丸となす。

表１　：　５Ｈ−ＦＴｄＲから種々の種の細胞中で４時
細胞系　　　　ＦＴＭＰ　　　ＦＴＤＰ　　ＦＴＴＰＲ
ＥＨ８，５０，３５２，５ マウス　　ＨＭＡＣ１，２４，４１９，２表２　：　Ｆ
ＴｄＲ及びＮ５ＴｄＲによるヒト細胞系の貫性

【図面の簡単な説明】

第一図は本発明による８’−ＦｄＴＴＰのＨＩＶ連合さ
れた逆転写酵素５０％阻害（ＩＤ５．　）を示し、第二
図は本発明による３’　−ＦｄＴＴＰの細胞ＤＮＡポリ
メラーゼαへの作用を示す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）有効成分として一般式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中Ｒ＾１はチミン−、５−置換されたウラシル−、
   ウラシル−、チトシン−、５−置換されたチトシン誘導
   体−、２−フルオルアデニン−、２，６−ジアミノプリ
   ン−、２−アミノ−プリン−、６−チオグアニン−又は
   ７−デアザアデニン残基、 Ｒ＾２はＨ又はＯＨを、 Ｒ＾３はＯＨ、ｏ−アセチル基、ｏ−パルミトイル基、
   トリホスフェート基（遊離の酸又はそのアルカリ−、ア
   ンモニウムもしくはアルキルアンモニウム塩として）又
   はヒドロ キシ基に対する前駆基を示す。） なる置換されたピリミジン−又はプリンヌクレオシド１
   又は数種及び薬学的に妥当な担体を含有する、後天性免
   疫不全症ＡＩＤＳに対する医薬。 ２）注射による投与に適合した特許請求の範囲第１項記
   載の医薬。 ３）注入による投与に適合した特許請求の範囲第１項記
   載の医薬。 ４）経口投与に適合した特許請求の範囲第１項記載の医
   薬。 ５）糖衣丸、錠剤、カプセルの形で、粉末の形で又は顆
   粒の形である特許請求の範囲第１項又は第４項記載の医
   薬。 ６）場合により付加的に風味剤を含有する特許請求の範
   囲第１項、第４項又は第５項のいずれかに記載した医薬
   。 ７）坐剤の形である特許請求の範囲第１項記載の医薬。 ８）有効成分の単位薬用量又はその数倍を含有する特許
   請求の範囲第１項ないし第７項のいずれかに記載した医
   薬。 ９）有効成分は２′，３′−ジデソキシ−３′−フルオ
   ルチミジン（３＾ＬＦＴｄＲ）である特許請求の範囲第
   １項ないし第８項のいずれかに記載した医薬。 １０）有効成分は２′，３′−ジデソキシ−３′−フル
   オル−５−ブロム−ウリジンである特許請求の範囲第１
   項ないし第８項のいずれかに記載した医薬。 １１）有効成分は２′，３′−ジデソキシ−３′−フル
   オル−シチジンである特許請求の範囲第１項ないし第８
   項のいずれかに記載した医薬。 １２）有効成分は２′，３′−ジデソキシ−３′−フル
   オル−５−エチルウリジンである特許請求の範囲第１項
   ないし第８項のいずれかに記載した医薬。 １３）有効成分は２′，３′−ジデソキシ−３′−フル
   オル−２−フルオルアデノシンである特許請求の範囲第
   １項ないし第８項のいずれかに記載した医薬。 １４）有効成分は２′，３′−ジデソキシ−３′−フル
   オル−６−チオグアノシンである特許請求の範囲第１項
   ないし第８項のいずれかに記載した医薬。 １５）有効成分は２′，３′−ジデソキシ−３′−フル
   オル−２，６−ジアミノプリンリボシドである特許請求
   の範囲第１項ないし第８項のいずれかに記載した医薬。 １６）有効成分は２′，３′−ジデソキシ−３′−フル
   オル−２−アミノ−プリンリボシドである特許請求の範
   囲第１項ないし第８項のいずれかに記載した医薬。 １７）有効成分は３′−デソキシ−３′−フルオルアラ
   ビノシル−シトシンである特許請求の範囲第１項ないし
   第８項のいずれかに記載した医薬。 １８）有効成分は３′−デソキシ−３′−フルオルアラ
   ビノシル−アデニンである特許請求の範囲第１項ないし
   第８項のいずれかに記載した医薬。