JPH02283290A - 発酵法によるｌ―オルニチンの製造法 - Google Patents
発酵法によるｌ―オルニチンの製造法Info
- Publication number
- JPH02283290A JPH02283290A JP1101011A JP10101189A JPH02283290A JP H02283290 A JPH02283290 A JP H02283290A JP 1101011 A JP1101011 A JP 1101011A JP 10101189 A JP10101189 A JP 10101189A JP H02283290 A JPH02283290 A JP H02283290A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- ornithine
- corynebacterium
- arginine
- arthrobacter
- brevibacterium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 title claims abstract description 44
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract description 10
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title abstract description 6
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title abstract description 6
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 claims abstract description 24
- HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N micophenolic acid Natural products OC1=C(CC=C(C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N mycophenolic acid Chemical compound OC1=C(C\C=C(/C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 229960000951 mycophenolic acid Drugs 0.000 claims abstract description 13
- 241000186146 Brevibacterium Species 0.000 claims abstract description 11
- 241000186216 Corynebacterium Species 0.000 claims abstract description 10
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims abstract description 9
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 241000186063 Arthrobacter Species 0.000 claims abstract description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 11
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 5
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 5
- 241000186226 Corynebacterium glutamicum Species 0.000 abstract description 4
- 241000185996 Arthrobacter citreus Species 0.000 abstract description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 abstract description 3
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 abstract description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 abstract description 2
- 230000003908 liver function Effects 0.000 abstract description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 2
- UHHATRNUKJGRBN-YFKPBYRVSA-N (2s)-2,5-diaminopentan-1-ol Chemical compound NCCC[C@H](N)CO UHHATRNUKJGRBN-YFKPBYRVSA-N 0.000 abstract 1
- 241001517047 Corynebacterium acetoacidophilum Species 0.000 abstract 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 abstract 1
- RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N L-citrulline Chemical compound NC(=O)NCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N 0.000 abstract 1
- RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N Ndelta-carbamoyl-DL-ornithine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=O RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 abstract 1
- 235000013477 citrulline Nutrition 0.000 abstract 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract 1
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 7
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N ammonia Natural products N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 2
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 150000001483 arginine derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IKGXIBQEEMLURG-NVPNHPEKSA-N rutin Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-NVPNHPEKSA-N 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M thiamine hydrochloride Chemical compound Cl.[Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229960000344 thiamine hydrochloride Drugs 0.000 description 2
- 235000019190 thiamine hydrochloride Nutrition 0.000 description 2
- 239000011747 thiamine hydrochloride Substances 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HMVYERAUBSAVAX-UHFFFAOYSA-N 1-nitro-1-nitrosoguanidine Chemical compound NC(=N)N(N=O)[N+]([O-])=O HMVYERAUBSAVAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YYAYLSOQGBAUHK-UHFFFAOYSA-N 2-(1,3-thiazol-2-ylamino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)C(C)NC1=NC=CS1 YYAYLSOQGBAUHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001185311 Lyticum Species 0.000 description 1
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- -1 acetic acid Chemical compound 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 229910001410 inorganic ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000357 manganese(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000013028 medium composition Substances 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019710 soybean protein Nutrition 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- BRBKOPJOKNSWSG-UHFFFAOYSA-N sulfaguanidine Chemical compound NC(=N)NS(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 BRBKOPJOKNSWSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004257 sulfaguanidine Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
- C12P13/10—Citrulline; Arginine; Ornithine
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/83—Arthrobacter
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/84—Brevibacterium
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/843—Corynebacterium
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
Ｌ−オルニチンは肝機能促進薬、総合アミノ酸製剤等の
重要な成分である。本発明はこのＬ−オルニチンを発酵
法で製造する方法を改良するものである。
重要な成分である。本発明はこのＬ−オルニチンを発酵
法で製造する方法を改良するものである。
Ｌ−オルニチン生産能を有するブレビバクテリウム属及
びコリネバクテリウム属の微生物については、ブレビバ
クテリウム属のチトルリン又はアルギニン要求株（特公
昭４３−８７１２号公報）、バチルス属のチトルリン又
はアルギニン要求株（特公昭４３−１０９９６号公報）
、アースロバフタ−属のチトルリン又はアルギニン要求
株（特公昭４４−２４３０３号公報）、コリネバクテリ
ウム属のアルギニンアナログに耐性を有する変異株（特
開昭５３−２４０９６号公報）、あるいはコリネバクテ
リウム属の２−チアゾールアラニン、サルファグアニジ
ン又は２−フルオロピルビン酸に耐性を有する変異株（
特開昭６１−１１９１９４号公報）が知られている。
びコリネバクテリウム属の微生物については、ブレビバ
クテリウム属のチトルリン又はアルギニン要求株（特公
昭４３−８７１２号公報）、バチルス属のチトルリン又
はアルギニン要求株（特公昭４３−１０９９６号公報）
、アースロバフタ−属のチトルリン又はアルギニン要求
株（特公昭４４−２４３０３号公報）、コリネバクテリ
ウム属のアルギニンアナログに耐性を有する変異株（特
開昭５３−２４０９６号公報）、あるいはコリネバクテ
リウム属の２−チアゾールアラニン、サルファグアニジ
ン又は２−フルオロピルビン酸に耐性を有する変異株（
特開昭６１−１１９１９４号公報）が知られている。
Ｌ−オルニチンの製造コストを低下させるために菌株を
育種して発酵収率を向上させることは、工業生産のうえ
で、大切な課題である。
育種して発酵収率を向上させることは、工業生産のうえ
で、大切な課題である。
本発明は上記問題点を解決するためになされたものであ
り、従来より知られているブレビバクテリウム属、コリ
ネバクテリウム属及びアルスロバクタ−属に属するＬ−
オルニチン生産能を有する微生物を改良して、更に発酵
収率の向上した優良菌株を見いだすべく研究した結果、
アルギニン又はチトルリン要求性を有し、且つミコフェ
ノール酸耐性又はオルニチノール耐性を付与した菌株の
中に、従来のＬ−オルニチン生産菌よりも高収率でＬ−
オルニチンを生産する菌株が存在する事を発見した。
り、従来より知られているブレビバクテリウム属、コリ
ネバクテリウム属及びアルスロバクタ−属に属するＬ−
オルニチン生産能を有する微生物を改良して、更に発酵
収率の向上した優良菌株を見いだすべく研究した結果、
アルギニン又はチトルリン要求性を有し、且つミコフェ
ノール酸耐性又はオルニチノール耐性を付与した菌株の
中に、従来のＬ−オルニチン生産菌よりも高収率でＬ−
オルニチンを生産する菌株が存在する事を発見した。
即ち、本発明はブレビバクテリウム属、コリネバクテリ
ウム属又はアルスロバクタ−属に属し、ミコフェノール
酸耐性又はオルニチノール耐性を有し、かつＬ−オルニ
チン生産能を有する微生物を液体培地中で培養し、培地
中に生成蓄積したし−オルニチンを採取することを特徴
とするＬ−オルニチンの！！！！遣法に関する。
ウム属又はアルスロバクタ−属に属し、ミコフェノール
酸耐性又はオルニチノール耐性を有し、かつＬ−オルニ
チン生産能を有する微生物を液体培地中で培養し、培地
中に生成蓄積したし−オルニチンを採取することを特徴
とするＬ−オルニチンの！！！！遣法に関する。
本発明において用いられる微生物は、ブレビバクテリウ
ム属、コリネバクテリウム属又はアルスロバクタ−属に
属し、ミコフェノール酸耐性又はオルニチノール耐性を
有し、かつＬ−オルニチン生産能を有する変異株である
。耐性はミコフェノール酸耐性及びオルニチノール耐性
の一方でもよ（、両方を有していてもよい。本発明の変
異株を得るには、下記の野生株に、先にＬ−オルニチン
生産能を付与し、次いでミコフェノール酸耐性又はオル
ニチノール耐性を付与してもよいし、又先にミコフェノ
ール酸耐性又はオルニチノール耐性を付与し、次いでア
ルギニン要求又はチトルリン要求等のＬ−オルニチン生
産能を付与してもよい。
ム属、コリネバクテリウム属又はアルスロバクタ−属に
属し、ミコフェノール酸耐性又はオルニチノール耐性を
有し、かつＬ−オルニチン生産能を有する変異株である
。耐性はミコフェノール酸耐性及びオルニチノール耐性
の一方でもよ（、両方を有していてもよい。本発明の変
異株を得るには、下記の野生株に、先にＬ−オルニチン
生産能を付与し、次いでミコフェノール酸耐性又はオル
ニチノール耐性を付与してもよいし、又先にミコフェノ
ール酸耐性又はオルニチノール耐性を付与し、次いでア
ルギニン要求又はチトルリン要求等のＬ−オルニチン生
産能を付与してもよい。
本変異株の親株となる野生株は、ブレビバクテリウム属
、コリネバクテリウム属又はアルスロバクタ−属の特に
Ｌ−グルタミン酸生産性細菌として知られているもので
よく、例えば、以下のものがある。
、コリネバクテリウム属又はアルスロバクタ−属の特に
Ｌ−グルタミン酸生産性細菌として知られているもので
よく、例えば、以下のものがある。
ブレビバクテリウム ・ ヂイバリ力タム
ＡＴＣＣ１４０２０九ビバクテリウム ・ フラバム
八ＴＣＣ１４０６７プレビバクテリウ
ム ・ ラクトフェルメンタム ＡＴＣＣ１３８６
９ブレビバクテリウム ・ サフｔＩｒ１リティカム
ＡＴＣＣ１４０６６コリネバクテリウム ・ ア
セトアシドフィラム ＡＴＣＣ１３８７０プリネバ
クテリウム ・ グルタミクム 八ＴＣＣ
１３０３２フルスロバクター ・ シトレウム
ＡＴＣＣ１７７７５これらの親株より本発
明の変異株を変異誘導する方法は、Ｎ−メチル−Ｎ”−
ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジンに接触せしめる等の通
常の変異誘導方法が適用できる。
ＡＴＣＣ１４０２０九ビバクテリウム ・ フラバム
八ＴＣＣ１４０６７プレビバクテリウ
ム ・ ラクトフェルメンタム ＡＴＣＣ１３８６
９ブレビバクテリウム ・ サフｔＩｒ１リティカム
ＡＴＣＣ１４０６６コリネバクテリウム ・ ア
セトアシドフィラム ＡＴＣＣ１３８７０プリネバ
クテリウム ・ グルタミクム 八ＴＣＣ
１３０３２フルスロバクター ・ シトレウム
ＡＴＣＣ１７７７５これらの親株より本発
明の変異株を変異誘導する方法は、Ｎ−メチル−Ｎ”−
ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジンに接触せしめる等の通
常の変異誘導方法が適用できる。
本発明の変異株の具体的な変異誘導方法の例と、ミコフ
ェノール酸又はオルニチノール濃度と菌株の生育度の関
係を以下に示す。
ェノール酸又はオルニチノール濃度と菌株の生育度の関
係を以下に示す。
変異誘導法
ブイヨン寒天スラント上に３０℃で２４時間生育させた
アルギニン要求性のアルスロバクタ−・シトレウスＡＪ
１２４４１（ＦＥＲＭ ＢＰ−２３４１）の菌体をＭ
／３０リン酸緩衝液にけん濁し、これに１００ｘ／ｍの
Ｎ−メチル−Ｎｏ−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジンを
加え、３０°Ｃ１３０分静置反応した。次いで集苗しＭ
／３０１Ｊン酸緩衝液でよく洗浄後、下記の培地組成を
有するプレート上に塗抹し、３１．５°Ｃで５日間培養
した。培地上に生育した菌株のうち、コロニーの大きな
ものを主に釣菌した。釣菌した菌株のほとんどが高いＬ
−オルニチン生産能を有していた。
アルギニン要求性のアルスロバクタ−・シトレウスＡＪ
１２４４１（ＦＥＲＭ ＢＰ−２３４１）の菌体をＭ
／３０リン酸緩衝液にけん濁し、これに１００ｘ／ｍの
Ｎ−メチル−Ｎｏ−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジンを
加え、３０°Ｃ１３０分静置反応した。次いで集苗しＭ
／３０１Ｊン酸緩衝液でよく洗浄後、下記の培地組成を
有するプレート上に塗抹し、３１．５°Ｃで５日間培養
した。培地上に生育した菌株のうち、コロニーの大きな
ものを主に釣菌した。釣菌した菌株のほとんどが高いＬ
−オルニチン生産能を有していた。
捜】ｌ１父
ＫＨ，ＰＯ。
ＭｇＳＯ４・７Ｈ，０
ＦｅＳＯａ ＋ ＩＨｚＯ
０，１〃
０．１ 〃
０．００２ 〃
ｐＨ７，２
寒天培地に生育した菌株の中から、Ｌ−オルニチン生産
能の高い菌株として、アルスロバクタ−・シトレウスへ
Ｊ １２４４２（ＦＥＲＭ ＢＰ−２３４２；アルギニ
ン要求性又はチトルリン要求性かつミコフェノール酸耐
性）を得た。
能の高い菌株として、アルスロバクタ−・シトレウスへ
Ｊ １２４４２（ＦＥＲＭ ＢＰ−２３４２；アルギニ
ン要求性又はチトルリン要求性かつミコフェノール酸耐
性）を得た。
上記の培地のうちＬ−アルギニン及びミコフェノール酸
をそれぞれの要求するあるいは耐性を付与する薬剤に変
えたほかは上記と同様の育種方法によりブレビバクテリ
ウム・ラクトフェルメンタムＡＪ １２４４３（ＦＥＲ
Ｍ ＢＰ−２３４３；アルギニン又は千トルリン要求性
）から、オルニチノール耐性のブレビバクテリウム・ラ
クトフェルメンタムへＪ １２４４４（ＦＥＲＭ ＢＰ
−２３４４）を育種し、コリネバクテリウム・グルタミ
クムＡＪ １１５８９ （ＦＥＲＭ Ｐ−５６４４；ア
ルギニン又はチトルリン要求性且つビタミンＰ耐性）か
ら、２回の育種法によってコリネバクテリウム・グルタ
ミクムＡＪ １２４４５（ＦＥＲＭ ＢＰ−２３４５；
アルギニン又はチトルリン要求性かつビタミンＰ耐性、
ミコフェノール酸耐性、オルニチノール耐性）ヲ採取し
た。
をそれぞれの要求するあるいは耐性を付与する薬剤に変
えたほかは上記と同様の育種方法によりブレビバクテリ
ウム・ラクトフェルメンタムＡＪ １２４４３（ＦＥＲ
Ｍ ＢＰ−２３４３；アルギニン又は千トルリン要求性
）から、オルニチノール耐性のブレビバクテリウム・ラ
クトフェルメンタムへＪ １２４４４（ＦＥＲＭ ＢＰ
−２３４４）を育種し、コリネバクテリウム・グルタミ
クムＡＪ １１５８９ （ＦＥＲＭ Ｐ−５６４４；ア
ルギニン又はチトルリン要求性且つビタミンＰ耐性）か
ら、２回の育種法によってコリネバクテリウム・グルタ
ミクムＡＪ １２４４５（ＦＥＲＭ ＢＰ−２３４５；
アルギニン又はチトルリン要求性かつビタミンＰ耐性、
ミコフェノール酸耐性、オルニチノール耐性）ヲ採取し
た。
このようにして得られた変異株のミコフェノール酸又は
オルニチノール耐性度を親株と比較した。
オルニチノール耐性度を親株と比較した。
グルコース ０．５ｇ／ｄｉ、尿素０．１５ｇ／ｄ１、
硫安０、１５ｇ／ｄｉ、ＫＨｚＰＯ４０，３ｇ７ｄｌ、
ＫｚｌｌＰＯｎ ０．１ｇ／ｄ１、ＭｇＳＯ４・７１
１ｚＯＯ，０１ｇ／ｄ、ＣａＣＩｚ ・２ＦＩＺ８０．
１ｇ／ｄ１、ビオチン１００河／ｌ、サイアミン塩酸塩
１１００ｊｔ／ｌ、Ｆｅ５Ｏｎ ・７８ｚ００．００２
ｇ／ｄ１、ＭｎＳＯ４・７ＨｚＯＯ，００２ｇ／ｄ１、
Ｌ−アルギニン１５ｍｇ／ｄＩｌおよび表に示す量のミ
コフェノール酸又はオルニチノールを含み、ｐＨ７，０
に調節した培地に、天然培地（ポリペプトンＩｇ／面、
酵母エキスＩｇ／ｄ１、ＮａＣｌ ０．５ｇ／ｄ１、ｐ
Ｈ７，０）スラントで２４時間、３１．５°Ｃで培養し
た菌体を殺菌水に懸濁して接種し、２４時間試験管にて
振盪培養して生育度を濁度で測定した。
硫安０、１５ｇ／ｄｉ、ＫＨｚＰＯ４０，３ｇ７ｄｌ、
ＫｚｌｌＰＯｎ ０．１ｇ／ｄ１、ＭｇＳＯ４・７１
１ｚＯＯ，０１ｇ／ｄ、ＣａＣＩｚ ・２ＦＩＺ８０．
１ｇ／ｄ１、ビオチン１００河／ｌ、サイアミン塩酸塩
１１００ｊｔ／ｌ、Ｆｅ５Ｏｎ ・７８ｚ００．００２
ｇ／ｄ１、ＭｎＳＯ４・７ＨｚＯＯ，００２ｇ／ｄ１、
Ｌ−アルギニン１５ｍｇ／ｄＩｌおよび表に示す量のミ
コフェノール酸又はオルニチノールを含み、ｐＨ７，０
に調節した培地に、天然培地（ポリペプトンＩｇ／面、
酵母エキスＩｇ／ｄ１、ＮａＣｌ ０．５ｇ／ｄ１、ｐ
Ｈ７，０）スラントで２４時間、３１．５°Ｃで培養し
た菌体を殺菌水に懸濁して接種し、２４時間試験管にて
振盪培養して生育度を濁度で測定した。
ブレビバクテリウム属、コリネバクテリウム属又はアル
スロバクタ−属の本発明の方法を適用しうる他の微生物
も上記と同様にして取得できる。
スロバクタ−属の本発明の方法を適用しうる他の微生物
も上記と同様にして取得できる。
このような変異株を培養する際に用いる培地は、炭Ｘ源
、窒素源、無機イオン、上記要求性を満足させるべき物
質及び必要に応じビタミン等その他の有機微量栄養素を
含有する通常の培地でよい。
、窒素源、無機イオン、上記要求性を満足させるべき物
質及び必要に応じビタミン等その他の有機微量栄養素を
含有する通常の培地でよい。
すなわち、炭素源としては、グルコース、シュクロース
等の炭水化物、酢酸等の有機酸等が、窒素源としてはア
ンモニア水、アンモニアガス、アンモニア塩等が好適で
ある。無機イオンとしてはカリウムイオン、ナトリウム
イオン、マグネシウムイオン、リン酸イオンその他が必
要に応じ適宜培地に添加される。
等の炭水化物、酢酸等の有機酸等が、窒素源としてはア
ンモニア水、アンモニアガス、アンモニア塩等が好適で
ある。無機イオンとしてはカリウムイオン、ナトリウム
イオン、マグネシウムイオン、リン酸イオンその他が必
要に応じ適宜培地に添加される。
培養は好気的条件で行ない、培養の間培地のρ１］を４
ないし８に温度を２５°Ｃないし３７°Ｃに調節しつつ
行えばより好ましい結果が得られる。かくして１ないし
７日間も培養すれば培地中に著量のＬオルニチンが生成
ＭＭＪされる。
ないし８に温度を２５°Ｃないし３７°Ｃに調節しつつ
行えばより好ましい結果が得られる。かくして１ないし
７日間も培養すれば培地中に著量のＬオルニチンが生成
ＭＭＪされる。
培養液よりＬ−オルニチンを採取する方法は、イオン交
換樹脂による方法等通常の方法で採取できる。
換樹脂による方法等通常の方法で採取できる。
以下実施例にて説明する。
グルコースＬｏｇ／ｄｌ、（Ｎｌ１４） ２５０４７ｇ
／ｄｉ、ＫＩ１２ＰＯ４０，１５ｇ／ｄｆ！、、ＭｇＳ
Ｏ４・７１１ｚ００．０４ｇ／ｄｉ、Ｆｅ５０． ・７
１１．０１ ｍｇ／ｄｌ、 ＭｎＳＯ４−７８ｚ０１１
１ｔｇ／ｄ、サイアミン・塩酸塩１１００Ｉ１／ｊ２、
ビオチン１００ｉ＃！、大豆蛋白酸加水分解液６０■／
ｄ１（全窒素として）、Ｌ−アルギニン１５■／ｄ１．
、炭酸カルシウム５ｇ／ｄ１（別殺菌）を含む培地をｐ
１１７．２に調節し、その２５瀬を５００ｍｎ容肩付フ
ラスコに入れ加熱殺菌した。これに第２表に示す菌株を
一白金耳接種し、３１．５°Ｃに保ちつつ４日間振盪し
た。各菌株の培養液中には、第２表に示す量のＬ−オル
ニチンがそれぞれ生成蓄積していた。
／ｄｉ、ＫＩ１２ＰＯ４０，１５ｇ／ｄｆ！、、ＭｇＳ
Ｏ４・７１１ｚ００．０４ｇ／ｄｉ、Ｆｅ５０． ・７
１１．０１ ｍｇ／ｄｌ、 ＭｎＳＯ４−７８ｚ０１１
１ｔｇ／ｄ、サイアミン・塩酸塩１１００Ｉ１／ｊ２、
ビオチン１００ｉ＃！、大豆蛋白酸加水分解液６０■／
ｄ１（全窒素として）、Ｌ−アルギニン１５■／ｄ１．
、炭酸カルシウム５ｇ／ｄ１（別殺菌）を含む培地をｐ
１１７．２に調節し、その２５瀬を５００ｍｎ容肩付フ
ラスコに入れ加熱殺菌した。これに第２表に示す菌株を
一白金耳接種し、３１．５°Ｃに保ちつつ４日間振盪し
た。各菌株の培養液中には、第２表に示す量のＬ−オル
ニチンがそれぞれ生成蓄積していた。
本発明の方法によってＬ−オルニチンの発酵収率を向上
させ、製造コストを低下させることができる。
させ、製造コストを低下させることができる。
Claims (1)
- ブレビバクテリウム属、コリネバクテリウム属又はアル
スロバクター属に属し、アルギニン又はチトルリン要求
性であり、ミコフェノール酸又はオルニチノールに耐性
を有するＬ−オルニチン生産能を有する微生物を液体培
地中で培養し、培地中に生成・蓄積したＬ−オルニチン
を採取することを特徴とするＬ−オルニチンの製造法
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1101011A JP2817185B2 (ja) | 1989-04-20 | 1989-04-20 | 発酵法によるｌ―オルニチンの製造法 |
| EP90107555A EP0393708B1 (en) | 1989-04-20 | 1990-04-20 | Process for producing L-ornithine by fermentation |
| DE69010256T DE69010256T2 (de) | 1989-04-20 | 1990-04-20 | Verfahren zur Herstellung von L-Ornithin durch Fermentation. |
| US07/512,108 US5188947A (en) | 1989-04-20 | 1990-04-20 | Process and microorganism for producing l-ornithine by corynebacterium, brevibacterium, or athrobacter |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1101011A JP2817185B2 (ja) | 1989-04-20 | 1989-04-20 | 発酵法によるｌ―オルニチンの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH02283290A true JPH02283290A (ja) | 1990-11-20 |
| JP2817185B2 JP2817185B2 (ja) | 1998-10-27 |
Family
ID=14289293
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1101011A Expired - Lifetime JP2817185B2 (ja) | 1989-04-20 | 1989-04-20 | 発酵法によるｌ―オルニチンの製造法 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5188947A (ja) |
| EP (1) | EP0393708B1 (ja) |
| JP (1) | JP2817185B2 (ja) |
| DE (1) | DE69010256T2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2009112205A (ja) * | 2007-11-02 | 2009-05-28 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | Ｌ−オルニチン含有物の製造方法 |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE102005017508A1 (de) * | 2005-04-15 | 2006-10-19 | Basf Ag | Verfahren zur Gewinnung einer basischen Aminosäure aus einer Fermentationsbrühe II |
| CN101691555B (zh) * | 2009-09-17 | 2011-11-09 | 北京化工大学 | 游离细胞或固定化细胞微生物转化生产l-鸟氨酸的方法 |
| KR101174267B1 (ko) | 2010-01-06 | 2012-08-14 | 씨제이제일제당 (주) | Ｌ-오르니틴 또는 ｌ-아르기닌 생산 변이주 및 이의 제조방법 |
| DE102010003419B4 (de) | 2010-03-30 | 2019-09-12 | Evonik Degussa Gmbh | Verfahren zur fermentativen Herstellung von L-Ornithin |
| RU2496867C2 (ru) | 2011-04-25 | 2013-10-27 | Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО "АГРИ") | Способ получения l-аминокислоты семейства глутамата с использованием коринеформной бактерии |
| DE102011118019A1 (de) | 2011-06-28 | 2013-01-03 | Evonik Degussa Gmbh | Varianten des Promotors des für die Glyzerinaldehyd-3-phosphat-Dehydrogenase kodierenden gap-Gens |
| CN102433288B (zh) * | 2012-01-16 | 2013-01-02 | 江南大学 | 一种产鸟氨酸的菌株及用该菌株生物合成鸟氨酸的方法 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2988489A (en) * | 1957-09-19 | 1961-06-13 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Method of producing l-ornithine by fermentation |
| DE1642678A1 (de) * | 1966-02-19 | 1971-06-03 | Ajinomoto Kk | Verfahren zur Herstellung von L-Ornithin und gegebenenfalls L-Isoleucin auf biologischem Wege |
| GB1140827A (en) * | 1966-10-06 | 1969-01-22 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Fermentative preparation of l-ornithine |
| JPS5716696A (en) * | 1980-07-03 | 1982-01-28 | Ajinomoto Co Inc | Preparation of l-ornithine by fermentation method |
-
1989
- 1989-04-20 JP JP1101011A patent/JP2817185B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1990
- 1990-04-20 US US07/512,108 patent/US5188947A/en not_active Expired - Fee Related
- 1990-04-20 DE DE69010256T patent/DE69010256T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1990-04-20 EP EP90107555A patent/EP0393708B1/en not_active Expired - Lifetime
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2009112205A (ja) * | 2007-11-02 | 2009-05-28 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | Ｌ−オルニチン含有物の製造方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE69010256D1 (de) | 1994-08-04 |
| EP0393708A2 (en) | 1990-10-24 |
| EP0393708A3 (en) | 1991-01-16 |
| DE69010256T2 (de) | 1995-02-23 |
| US5188947A (en) | 1993-02-23 |
| JP2817185B2 (ja) | 1998-10-27 |
| EP0393708B1 (en) | 1994-06-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3151073B2 (ja) | 発酵法によるアミノ酸の製造法 | |
| US4656135A (en) | Process for producing L-isoleucine by fermentation | |
| US4411997A (en) | Method for producing L-lysine by fermentation | |
| JP2817155B2 (ja) | 発酵法によるｌ‐アルギニンの製造法 | |
| US5188948A (en) | Process for producing L-valine by fermentation | |
| JPH02186994A (ja) | 発酵法によるｌ‐アミノ酸の製造法 | |
| JPH0430275B2 (ja) | ||
| JP2810697B2 (ja) | 芳香族アミノ酸の製造法 | |
| JPS6321479B2 (ja) | ||
| JPH0362394B2 (ja) | ||
| JPH02283290A (ja) | 発酵法によるｌ―オルニチンの製造法 | |
| JPH0362395B2 (ja) | ||
| JPH08266295A (ja) | Ｌ−ロイシンの製造方法 | |
| JPH10248588A (ja) | 発酵法によるｌ−セリンの製造法 | |
| Su et al. | Studies on l-Glutamic Acid Fermentation: Part I. Isolation of a l-Glutamic Acid Producing Strain and its Taxonomical Studies | |
| JPS6224074B2 (ja) | ||
| JP3006929B2 (ja) | 発酵法によるｌ−バリンの製造法 | |
| JP2578474B2 (ja) | Ｌ−グルタミン酸の製造法 | |
| JP2877414B2 (ja) | 発酵法によるｌ―スレオニンの製造法 | |
| EP0287123A2 (en) | L-valine producing microorganism and a process for producing L-valine by fermentation | |
| KR910008636B1 (ko) | L-아르기닌의 제조방법 | |
| US5284757A (en) | Process for producing l-arginine by fermentation with brevibacterium or corynebacterium | |
| CA1192156A (en) | Fermentative preparation of l-leucine | |
| JPH0561914B2 (ja) | ||
| JP3100763B2 (ja) | 発酵法によるｌ−アルギニンの製造法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090821 Year of fee payment: 11 |
|
| EXPY | Cancellation because of completion of term | ||
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090821 Year of fee payment: 11 |