JPH02108697A - ジペプチド誘導体及びそれを含有するペプチド甘味剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、食品および飲料に使用されるペプチド甘味剤
に関する。さらに詳しくは、ジペプチド誘導体またはそ
の塩を有効成分として含有する、低カロリー合成甘味剤
に関する。

〔従来の技術〕

近年、糖分の摂取過多による肥満およびこれに伴う各種
の疾病が問題となっており、砂糖に代わる低カロリーま
たは無カロリー甘味剤の開発が望まれている。現在、こ
れらの要望を満たすものとして、サッカリン、ステビア
、アスパルテームなどが使用されているが、サッカリン
は、継続して摂取したばあい発癌性を示すなどの安全面
で問題とされており、ステビアをはじめとする天然甘味
料は、その味質、精製技術、価格などの面で問題を残す
ものが多いのが現状である。アスパルテームは、味質の
面ではかなり砂糖に近いとされているが、やはり後味に
苦味が混在し、さらに良質の甘味剤の開発が望まれてい
る。また、アスパルテームは安全性は確認されているも
のの、アスパルテームに含まれるＣ端メチルエステルは
、体内で分解され、メタノールとなって蓄積される恐れ
がある。

アスパルテームの甘味発現機構は、シャルレンベルガー
（Ｓｈａ　ｌ　ｌｅｎｂｅｒｇｅｒ）らにより提唱され
たエーエイチ・ビー（ＡＨ，Ｂ）システムにより説明さ
れた（シャルレンベルガーおよびアクレー（Ｓｈａｌｌ
ｅｎｂｅｒｇｅｒ　ａｎｄ　Ａｃｒｅｅ）、　、ネイチ
ャー（ロンドン）　（Ｎａｔｕｒｅ（Ｌｏｎｄｏｎ））
２１８巻−４８０頁（１９６７）参照）。その後、多く
のアスパルテームに関する合成的研究により、アミノ基
（ＡＩ）、カルボキシル基（Ｂ）に加え、疎水性基（Ｘ
）の甘味発現のための必要性が明らかにされ、これら三
者の立体的な位置関係により甘味が発現すると結論され
た（フジマキら、ケミカル・アンド番ファーマシューテ
イカルφブレティン（Ｃｈｅｓ　。

Ｐｈａｒｓ、Ｂｕｌｌ、）２４巻、２１１２頁（１９７
０）参照）。一方、有吉は、それに加え、メチルエステ
ルの関与についても検討し、疎水性基（Ｘ）との疎水性
の大きさの差と位置関係が甘味発現に重要であると報告
している（アリヨシ・ワイ（Ａｒ１ｙｏｓｈＩ　Ｙ、）
、アグリカルチュラル・アンドΦバイオロジカル・ケミ
ストリー（Ａｇｒｌｃ、　Ｂｌｏｌ、　Ｃｈｅｓ、）４
０巻、９８３頁（１９７Ｂ）参照）。

［発明が解決しようとする課題］ 本発明の目的は、体内でのメタノールの蓄積の恐れがあ
るメチルエステルを有さない新規なジペプチド誘導体ま
たはその塩を有効成分として含有してなる低カロリー甘
味剤を提供することであり、かつ、その甘味が後味に苦
味を含まず、甘味を感じた後すみやかに消えるさっばり
としたされやかな甘味剤を提供することにある。

本発明者らは、ＡＨ％ＢおよびＸの三成分が、立体的に
ある特定の位置関係に配置されれば甘味が発現すると考
え、鋭意研究を重ねた結果、＾１１．ＢおよびＸの成分
を有し、メチルエステルを有さないジペプチド誘導体お
よびその塩を合成し、それらが砂糖の１０倍の甘味を呈
することを報告した（特願昭６２−２６４５８６号明細
書参照）。

さらに、リジン誘導体においては、砂糖の１０〜５０倍
の甘味を呈することを見出した（特願昭８２−２８４５
８７号明細書参照）。

ここに、従来問題となっていた甘味剤の後味の悪さ、特
に苦味の混在については、一応の解決策をえたわけであ
るが、さらに望ましくは、甘味を感じた後すみやかにそ
の甘味が消える、さっばりとしたされやかな甘味を持つ
甘味剤の開発が待たれていた。

本発明者らは、ＡＨ，ＢおよびＸの三成分を持ち、かつ
、たとえばそのうちＡｌｌ成分を複数個持つ甘味物質は
、複数のＡＨ成分同士の競争反応のような形をとるため
甘味発現の効率が悪く弱い甘味が長く続き、また、質の
悪い他の混在味も増加する傾向にあることを見出した。

そこで、甘味を持つがその質が良質でなく、かつ、たと
えばＡＨ酸成分二つ有する化合物の一つの＾Ｈ酸成分ア
セチル基などでブロックすれば、より有効に甘味が発現
するようになり、したがって、強くしかも後味の良い甘
味剤を合成できるのではないかと考え鋭意研究を重ねた
結果、本発明を完成するに至った。

［課題を解決するための手段］ すなわち、本発明は、一般式（■）： （式中、Ｒ１は水素原子または水酸基を表わし、および
Ｒ２はアセチル基またはホルミル基を表わす）または一
般式（ＩＩ）　： （ＩＩ） （式中、Ｒ１およびＲ４は水素原子、アセチル基または
ホルミル基を表わし、Ｒ３がアセチル基またはホルミル
基のときＲ４は水素原子を表わし、またＲＪが水素原子
のときＲ４はアセチル基またはホルミル基を表わす）で
示されるジペプチド誘導体またはその塩およびそれを有
効成分として含有するペプチド甘味剤に関する。

［実施例］ 一般式（Ｉ）： で示される本発明のジペプチド誘導体の具体例としては
、例えば以下のものがあげられる。

アセチルフェニルアラニルリジン（以下、Ａｃ−Ｐｈｅ
−Ｌｙｓという）。アセチルチロシルリジン（以下、Ａ
ｃ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓという）。

また、一般式（■）： υ υ で示される本発明のジペプチド誘導体の具体例としては
、例えば以下のものがあげられる。

α−アセチルオルニチルーβ−アラニン（以下、Ａｃ−
０ｒｎ−β−Ａｌａという）、δ−アセチルオルニチル
ーβ−アラニン（以下、０ｒｎ（Ａｃ）−β−＾１ａと
いう）。

上記４ＰＪのジペプチド誘導体の各アミノ酸は、Ｌ一体
、Ｄ一体、ＤＬ−体のいずれでもよいが、好ましくは、
Ｌ一体が良い。

本発明の甘味剤の有効成分としてのジペプチド誘導体は
、二つのアミノ基のうち一つをブロックされていること
に意味があり、したがってアミノ基保護基としては、ア
セチル基またはホルミル基があげられるが、他の一般に
用いられている保護基を用いても、合成品が苦味を示さ
ない限り有効である。

本発明のジペプチド誘導体の塩としては、たとえば塩酸
、硫酸、リン酸などの無機酸との塩、酢酸、ギ酸、プロ
ピオン酸、スルファミン酸、アスコルビン酸、桂皮酸、
シュウ酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、リンゴ酸、マロン
酸、マレイン酸、コハク酸などの有機酸との塩、ならび
にナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属、カルシウ
ム、マグネシウムなどのアルカリ土類金属、およびモノ
エタノールアミンなどのアミン類との塩があげられる。

本発明のジペプチド誘導体は通常のペプチド合成の手法
にもとづき合成される。たとえば、α　−アミノ基およ
び必要に応じて側鎖を適当な保護基（たとえばベンジル
オキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル
基）で保護されたアミノ酸と、α−カルボキシル基を適
当な保護基（たとえば、ベンジルエステル）および必要
に応じて側鎖を上記と同様適当な保護基で保護されたア
ミノ酸とをアセトニトリル等の溶媒中で混合酸無水物法
（ＨＡ法）によって縮合し、ついで酸処理、接触還元等
により保護基を除去、必要に応じて無水酢酸で処理する
操作を入れることにより本発明の化合物またはその塩を
うろことができる。この際に使用する保護基、縮合法、
保護基の除去法は上記方法に限定されるものではなく、
他の公知の方法を使用してもよいことはもちろんである
。

本発明の化合物は、遊離もしくは塩の形態でえられるが
、これらはたとえば合成の最終段階でメタノール溶媒中
で塩酸の濃度を変えることにより塩酸塩の当量を任意に
変えることができ、またイオン交換カラム等を用いる公
知の方法により遊離のものにも容易に交換することがで
きる。

本発明のジペプチド誘導体およびその塩の単離精製は通
常の方法で行なうことができる。すなわち、適当な溶媒
を用いて再結晶、再沈殿、クロマトグラフィーなどによ
って目的を達成することができる。また、えられた化合
物は、ＮＭＲスペクトル、薄層クロマトグラフィー（Ｔ
ＬＣ）などにより同定を行なうことができる。

なお、本発明のジペプチド誘導体またはその塩を甘味剤
の有効成分として使用するばあい、各単独で使用しても
、あるいは２Ｆｆｉ以上組合せてもよく、また特別の支
障のない限り、他の甘味料と併用してもよいことはもち
ろんである。

他の甘味料としてはたとえば、ズルチン、サッカリン、
グリチルリチン、ステビオシト、ネオヘスベリジンジヒ
ドロカルコン、モネリン、砂糖、アスパルテーム、ステ
ビア、異性化糖、蜂蜜、各種シロップ類などがあげられ
る。また、その調剤の方法としてはたとえば直接混合す
るかあるいはシクロデキストリン等に包接させて混合す
る方法等がある。

以下、実施例を用いて本発明をさらに詳細に説明するが
本発明はもとよりこれら実施例のみに限定されるもので
はない。なお、実施例における略号は、以下の通りであ
る。また、本明細書に記載されているアミノ酸記号は特
別の表示がない限り、Ｌ体を表わす。

八Ｃニアセチル基 Ｐｈｏ　：フェニルアラニン Ｌｙｓ　：リジン Ｏｒｎ　：オルニチン β−Ａｌａ　：β　−アラニン Ｃ１１３ＣＮ　ニアセトニトリル ｚ−：ベンジルオキシカルボニル基 Ｂｏｃ−：ｔ−ブチルオキシカルボニル基−０Ｂｚｌ　
　：ベンジルエステル Ａｃ０Ｅｔ　二酢酸エチル ＥＤＣ：１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピ
ル）−カルボジイミド ＋１０Ｂｔ　　：　ｌ−ヒドロキシベンゾトリアゾール
Ｅｔ３Ｎ：）リエチルアミン ｐ−Ｔｓｏｌｌ　：バラトルエンスルホニウムＭｅＯＩ
Ｉ　　：メタノール ＴＬＣｎ薄層クロマトグラフィー ＋１．　Ｐ、　　：融点 （ＡＣＯ）２０　：無水酢酸 １１ＯＮｓｕ　　；　Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド−
０ＮＳｕ　：　Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル ＤＭＰ　　ニジメチルホルムアミド ＤＣＣニジシクロへキシル力ルポジイミドＤＣＵｒｅａ
　ニジシクロへキシルウレアＴＨＦ　　；テトラヒドロ
フラン ＲＩ’＋　　　：ｎ−ブタノール：酢酸：ピリジン：水
〜４：１：１：２　（容量比） 展開溶媒によるＲｆ値 Ｒ「２：クロロホルム：メタノール−５：１（容量比）
展開溶媒によるＲｆ’値 Ｒｆ３　　：クロロホルム：メタノール−９：１（容量
比）展開溶媒によるＲｆ’値 Ｌｙｓ（Ｚ）　：側鎖をベンジルオキシカルボニル基で
保護したリジン ０ｒｎ（Ａｃ）　　：側鎖をアセチル基で保護したオル
ニチン ０ｒｎ（ＢｏＣ）　二側鎖をｔ−ブチルオキシカルボニ
ル基で保護したオルニチン 実施例Ｉ Ａｃ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓの合成 （１）＾ｃ−Ｐｈｅ−ＯＮＳｕの合成 Ａｃ−Ｐｈｅ　（バチエム（ＢＡＣＨＥＭ）社製試薬）
　０．８３ｇ（４ｍｍｏｌ）　と）ｌＯＮｓｕ　（１，
４８ｇ（４＋ｕｉｃ＞１）をＤＭＦ　１０！Ｏ１に溶解
し、水冷下ＤＣＣ０，８２ｇ（４ｍｍｏｌ）を加え室温
で一晩撹拌した。析出したＤｃｕｒｅａを濾去し濾液を
減圧下濃縮しエーテルで希釈し、結晶化し、結晶を濾取
、乾燥し吸湿性のＡｃ−Ｐｈａ−ＯＮＳｕをえた。

以下、えられたＡｃ−Ｐｈｅ−ＯＮＳｕの収量（収率）
およびＴＬＣによるＲｆ値を示す。

収量　０．９９ｇ　（８１％） Ｒｒ＋　　：　　０．７５　　　Ｒｆ’２　　；　　０
．４０（２）　Ａｃ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ　（Ｚ）の合成Ｌ
ｙｓ（Ｚ）　（バチエム社製試薬）　　０．４２ｇ（１
，５ＩＩＩｍｏｌ）をＤＭＦ６ｍｌとＥｔ３　Ｎ　Ｏ，
４２０１１（３ｍ１ＩＩｏｌ）に懸濁し、室温で撹拌し
ながら（１）でえられたＡｃ−Ｐｈｅ−ＯＮＳｕＱ、４
８ｇ　（１，５ｗｗｏｌ）を添加し、室温で一晩撹拌し
た。その後、Ａｃ０Ｅｔ　、　ツいで０．５Ｎ　ｌｌＣ
ｌで洗浄したのち、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、この
溶液を濾過して濾液を減圧下濃縮し、エーテルで希釈し
て冷却放置し、結晶化したのち、Ａｃ０Ｅｔで再結晶し
、上澄み液を濾去、結晶を乾燥し、Ａｃ−Ｐｈｅ−Ｌｙ
ｓ　（Ｚ）をえた。

以下に、えられたＡｃ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ　（Ｚ）の収量
（収率）、融点、比旋光度、ＴＬＣによるＲｆ値、およ
び元素分析値を示す。

収量　０．３２ｇ　（４５％） １１、　ｐ、　　［２２〜１２５℃ ［α］　”　：　＋　１．０（ｃ−１、ＤＭＦ）Ｒ「＋
　　：　　０．７５　　　Ｒｒｚ　：　　０．３８元素
分析（Ｇ３　Ｎ３１０ｓ　Ｎ３） 理論値（駕）　　：　ＣＧ３．９５　１１８．８８　　
Ｎ　８．９５実測値（％）　　：　ＣＧ３．８８　１１
８．［１５Ｎ　８．８９（３）八ｃ−Ｐｈθ−Ｌｙｓの
合成 （′２ＪでえられたＡｃ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ（Ｚ）　　０
．１５ｇ（０，３３ＩＩＩｏｌ）を酢酸５　ｍｌに溶解
し、パラジウム黒０．５ｇを加えて室温で２４時間撹拌
して接触還元した。

ＴＬＣで反応終了を確認し、濾過によりパラジウム黒を
除去、濾液を減圧下濃縮し、エーテルで希釈して冷却放
置し結晶化したのち、上澄液を濾去し、結晶を乾燥し、
Ａｃ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓをえた。

以下に、えられたＡｃ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓの収量（収率）
、融点、比旋光度、ＴＬＣによるＲｆ＋およびＲｒｚ値
、元素分析値ならびにアミノ酸分析データを示す。

なお、アミノ酸分析は、サンプルをＯＮ　ＩＩ（Ｊで封
管中、１１０℃、７２時間加水分解を行ない、ＪＡＳＣ
ＯＴＲＩＲＯＴＡＲＹ−Ｖ　、　ＵＶＩＤｌＥＣ−１０
０Ｖ装置（日本分光工業■製）にて分析を行なった。以
下の実施例においても同様である。

収量　０．０９ｇ　（８２％） 讃、ｐ、７１〜７４℃（分解） ［ａ　］　”　；　＋１２．０（ｃ　−１、Ｍｅｏｌｌ
）Ｒｒ＋　　：　　０．５０　　　Ｒｒｚ　：　　０．
００元素分析（Ｃｌ７　Ｎ２５０４　Ｎ３）理論値（％
）　　：　Ｃ６Ｇ、８８　　ＩＩ　７．５１　　Ｎ　　
１２．５３実測値（％）　　：　Ｃ８０，８９１＋　７
．５０　　Ｎ　　１２．５０アミノ酸分析データ Ｐｈｅ　：　　１．００　　　Ｌｙｓ　　：　　０．９
２実施例２ Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓの合成 （１）　Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＮＳｕの合成Ａｃ−Ｄ−
Ｐｈｅ　（バチエム社製試薬）　　０．８３ｇ　（４ｏ
ｖａｌ）とＨＯＮＳｕ　Ｏ，４８ｇ（４■ｏｌ）をＤＭ
Ｆ　１０ｍ１に溶解し、水冷下ＤＣＣ０，８２ｇ　　（
４ｇａｏｌ）を加え室温で一晩撹拌した。析出したＤＣ
Ｕｒｅａを濾去し濾液を減圧下濃縮しエーテルで希釈し
、結晶化し、結晶を濾取、乾燥し吸湿性の＾ｅ−Ｄ−Ｐ
ｈｅ−ＯＮＳｕをえた。

以下、えられたＡｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＮＳｕの収量（収
率）およびＴＬＣによるＲｒ値を示す。

収量　１．１８ｇ　（９５％） Ｈｒｔ　　：　　０．８１　　　Ｒｆ’２　　：　　０
．４５（２）　Ａｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ　（Ｚ）の合
成Ｌｙｓ（Ｚ）　（バチエム社製試薬）　０．４２ｇ（
１，５１ｍｏｌ）をＤＭＰ８ｍｌとＥｔｘ　Ｎ　Ｏ，４
２ｍ１　（３ｍｍｏｌ）に懸濁し、室温で撹拌しながら
（１）でえられたＡｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＮＳｕ　０．４
８ｇ　（０，５ａｖｏｌ）を添加し、室温で一晩撹拌し
た。その後、Ａｃ０Ｅｔ　、ついで０．５Ｎ　ＨＣＩで
洗浄したのち、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、この溶液
を濾過して濾液を減圧下濃縮し、エーテルで希釈して冷
却放置し、結晶化したのち、Ａｃ０Ｅｔで再結晶し、上
澄み岐を濾去、結晶を乾燥し、Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙ
ｓ（Ｚ）をえた。

以下に、えられたＡｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ　（Ｚ）の
収量（収率）、融点、比旋光度、ＴＬＣによるＲｒ値、
および元素分析値を示す。

収量　０．３０ｇ　（４１％） １．１３．１１９〜１２３℃ ［ｃｒ　］　’　：　＋　７．０（ｃ　−１、ＤＭＦ）
Ｒｆ＋　　：　　Ｑ、８３　　　Ｒｒ２　：　　０．１
８元素分析（Ｃ３Ｎ３１０６　Ｎ３） 理論値（％）　　：　Ｃ６３，９５Ｈ６，８［ｉ　　Ｎ
　８．９５実■１値（％’）　　：　Ｃｌ１３．９２　
　Ｈ６，６３Ｎ　８．９８（３）＾ｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌ
ｙｓの合成（２）でえられたＡｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ
（Ｚ）　０．Ｌ５ｇ（０，３３ｉｓｏｌ）を酢酸５　ｍ
ｌに溶解し、パラジウム黒０．５ｇを加えて室温で２４
時間撹拌して接触還元した。

ＴＬＣで反応終了を確認し、濾過によりパラジウム黒を
除去、濾液を減圧下濃縮し、エーテルで希釈して冷却放
置し結晶化したのち、上澄液を濾去し、結晶を乾燥し、
＾ｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓをえた。

以下に、えられたＡｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓの収量（収
率）、融点、比旋光度、ＴＬＣによるＲｆ＋およびＲ「
２、元素分析値ならびにアミノ酸分析データを示す。

収量　０．０８ｇ　（７２％） 脂、ｐ、１３０〜１３４℃（分解） ［ａ　］　　？Ｉｌ：　＋　１１．０（ｃ−１、Ｍｏ０
Ｈ）Ｒｆ＋　　：　　０．５１　　　Ｒｒ２　　：　　
０．００元素分析（Ｃ１０Ｎ２５０４　Ｎ３） 理論値（％）　：Ｃ８０，８８Ｈ７，５１Ｎ　　１２．
５３実測値（％）　　：Ｃ６０，ｌ１９　　Ｎ７．５３
　　Ｎ　　１２．５０アミノ酸分析データ Ｄ−Ｐｈｅ　：　　１．００　　　Ｌｙｓ　　：　０．
８９実施例３ ０「ｎ（ＡＣ）−β−Ａｌａの合成 （１）Ｚ−Ｏｒｎ（Ｂｏｃ）−β−＾１ａ−ＯＢｚｌの
合成Ｃｌｌ３ＣＮ　４０ｍ１中にＺ−Ｏｒｎ（Ｂｏｃ）
　（バチエム社製試薬）　　　２．２０ｇ　　（６ｇ−
ｏｌ）　　、　β−＾１ａ−ＯＢｚｌ　　＃　ｐ−Ｔｓ
ｏｌｌ（バチエム社製試薬）　　２．１１ｇ　（６＋＋
ｖｏｌ）およびＥｔｓ　Ｎ　Ｏ，８４ｍ１　（６■ｏｌ
）を溶解して、冷却下ＥＤＣ−［ＩＣＩ　　１．２７ｇ
　　　（６，６ｍｍｏｌ）　　とＨＯＢｔ　　０．９７
ｇ（７，２−ｓ＋ｏｌ）を加えて室温で一晩撹拌した。

溶液を減圧濃縮したのちに、Ａｃ０Ｅｔで抽出を行なっ
た。有機層を４％（重量％、以下同様）クエン酸水溶液
および４％炭酸水素ナトリウム（ＮａｌｌＣＯｘ）水溶
液で順次、酸、塩基洗いしたのちに無水硫酸ガドリウム
で乾燥させた。を機層を減圧濃縮し、エーテル−石油エ
ーテルで結晶化させた。

以下に、えられたＺ−Ｏｒｎ（Ｂｏｃ）−β−Ａｌａ−
ＯＢｚｌの収量（収率）、融点、比旋光度、ＴＬＣによ
るＲｒ２およびＲｒ３ならびに元素分析値を示す。

収量　３．０４ｇ　（９１３％） ｉ、ｐ、　　８４〜８５℃ ［ａ　］　’　：　−Ｂ（Ｃ−１％　ＭｅＯＨ）Ｒｒ２
　：　　０．９４　　　Ｒｒ、　：　　０．８２元素分
析（Ｃ２８Ｈｒｔ　０７　Ｎり 理論値（Ｘ）　　：　Ｃ６３，７４Ｈ７，０７Ｎ　７．
９０実測値（％）　　：　Ｃ８３，７１Ｈ７，１０Ｎ　
７．９２（２）Ｚ−Ｏｒｎ−β−Ａｌａ−ＯＢｚｌ　　
・ＨＣＩの合成（１）でえられたＺ−Ｏｒｎ　（Ｂｏｃ
）−β−Ａｌａ−ＯＢｚ１１．９９ｇ　（４ｍ１ｏｌ）
を４Ｎ　ＨＣＩ／　Ａｃ０Ｅｔ　１５ｍ１に溶解させ、
ＴＬＣにより反応が終了したことを確認し減圧濃縮、Ａ
ｃ０Ｂｔを加えて加圧濃縮して過剰の１１０１を除去す
る操作を３回繰返したのち、エーテルを加え油状の目的
物をえた。

以下に、えられたＺ−Ｏｒｎ−β−Ａｌａ−ＯＢｚｌ　
　−ＨＣｌの収量（収率）、比旋光度、ならびにＴＬＣ
によるＲｆ２およびＲｆ’Ｊの値を示す。

収量　　１．６８ｇ　（９８％） Ｅａ　］　’　：　−１０（ｃ＝ｌ　、Ｎｅｏｎ）Ｒｒ
ｚ　　：　　０．６９　　　Ｒｆ、　：　　０．３０（
３）　Ｚ−Ｏｒｎ　（Ａｃ）−β−Ａｌａ−ＯＩ］ｚｌ
の合成（２）でえられたＺ−Ｏｒｎ−β−Ａｌａ−ＯＢ
ｚｌ　　・ｌＩｃ１１．６８ｇ　（３，９０ｇａｏｌ）
とＥｔｚＮ　Ｏ，５５ｍｌ　（Ｌ９Ｇｓｓｏｌ）をＡｃ
０Ｅｔ　４Ｇｍｌに溶解し冷却下＜ＡＣＯ）２００．４
４　ｍｌ　（４，８８ｓｍｏｌ）を加え一晩反応させた
。

反応溶液を減圧濃縮したのち、残渣をＡｃ０Ｂｔに溶か
し、４％クエン酸水溶液および４％炭酸水素ナトリウム
（ＮａＨＣＯｓ）水溶液で順次、酸、塩基洗いを行ない
無水硫酸ナトリウムで有機層を乾燥させた。減圧濃縮し
たのち、残渣にエーテルを加え吸湿性結晶の目的物をえ
た。

以下に、えられたＺ−Ｏｒｎ（Ａｃ）−β−＾１ａ−Ｏ
Ｂｚｌの収量（収率）、比旋光度、ＴＬＣによるＲｆ２
およびＲｆ３の値、ならびに元素分析の値を示す。

収量　１．５３ｇ　（８９％） ［ａ　　］　　’　　：　　−Ｂ（ｃ−１、ＭｅＯＨ）
Ｒｆ２　：　　０．７５　　　Ｒｆｓ　：　　０．５１
元素分析（Ｃ２５Ｎ３１０６　ＮＪ　　　Ｇ、２Ｈ２０
）理論値（％）　　：　Ｃ８３，４０Ｈ８，８９Ｎ　８
．８８実測値（％）　　：　Ｃ０３，５５Ｈ８，７１Ｎ
　８．８０（４）Ｏｒｎ（Ａｃ）−β−Ａｌａの合成（
３）でえられたＺ−Ｏｒｎ（Ａｃ）−β−Ａｌａ−ＯＢ
ｚｌ　０．８８ｇ（２ｓｍｏｌ）をＭｅＯＨ１５ｍｌに
溶解し、Ｐｄ黒を加えて、水素気流下において脱保護を
行なった。ＴＬＣにより反応が終了したことを確認し、
Ｐｄ黒を濾去し反応溶液を減圧濃縮、残渣をアセトンで
結晶化させ吸湿性の目的物をえた。

以下に、えられた０ｒｎ（ＡＣ）−β−Ａｌａの収量（
収率）、比旋光度、ＴＬＣによるＲ１＋およびＲ１’２
の値ならびにアミノ酸分析データを示す。

収量　０．４８１ｇ　　（８８％）吸湿性［ａ　］　　
”　　：　”１（ｃ−１ｓ　　ＭｅＯＨ）Ｒｈ　　：　
　０．３３　　　　　Ｒｆ２　　：　　０．００アミノ
酸分析データ Ｏｒｎ　！１．２０　　　β−Ａｌａ　：　　１．００
実施例４ Ａｃ−Ｏｒｎ−β−Ａｌａの合成 （１１Ｂｏｃ−Ｏｒｎ　（Ｚ）−β−Ａｌａ−０［３ｚ
ｌの合成Ｃ１１３ＣＮ　４０ｍ１中にＢｏｃ−Ｏｒｎ（
Ｚ）　（バチエム社製試薬）　　２．（１２ｇ（４，７
８ｍ１ｏｌ）とβ−Ａｌａ−ＯＢｚｌ　　−ｐ−ＴｓＯ
Ｈ（バチエム社製試薬）　１．６８ｇ（４，７８ｍｍｏ
ｌ）およびＥｔ３Ｎ　Ｏ，６７ｍｌ　（４，７８ｍｍｏ
ｌ）を溶解し、冷却下、ＥＤＣ・ｌＩＣ１１，０１ｇ（
５，２８ｓｖｏｌ）と１ｌＯＢｔ　Ｏ，７７ｇ（５，７
４ｍｍｏｌ）を加えて室温で一晩撹拌した。溶液を減圧
濃縮したのち、Ａｃ０Ｅｔで抽出を行なりた。有機層を
４％クエン酸水溶液および４％炭酸水素ナトリウム（Ｎ
ａＨＣＯｓ）水溶液で順次、酸、塩基洗いしたのちに無
水硫酸ナトリウムで乾燥させた。有機層を減圧濃縮し、
エーテル−石油エーテルで結晶化させた。

以下に、えられたＢｏｃ−Ｏｒｎ　（Ｚ）−β−Ａｌａ
−ＯＩ３ｚｌの収量（収率）、融点、比旋光度、ＴＬＣ
によるＲｆ値および元素分析の値を示す。

収Ｑ　　２．３４ｇ　（９８％） ｍ、ｐ、　　８１〜８２℃ ［α］２・；　−８（ｃ−１，ＭｅＯＨ）Ｒｆ２　　：
　　０．７４　　　Ｒｒｓ　：　　０．８５元素分析（
Ｃ２［Ｉ　Ｎ３７０ｙ　Ｎ３）理論値（％）　　：　Ｃ
６３，７４Ｈ７，０７Ｎ　７．９６実測値（％）　　；
　Ｃ８３，７１Ｈ７，ＯＢ　　Ｎ　７．９１（２）Ｏｒ
ｎ（Ｚ）−β−Ａｌａ−ＯＢｚｌ　＃）ＩＣ１の合成（
１）でえられたＢｏａ−Ｏｒｎ　（Ｚ）−β−Ａｌａ−
ＯＢｚ１１．９９ｇ　（４ｍ５ｏｌ）を４Ｎ　）ＩＣＩ
／＾ｃＯＥｔ　１５ｍ１に溶解させ、ＴＬＣにより反応
が終了したことを確認し減圧濃縮、Ａｃ０Ｅｔを加えて
減圧濃縮して過剰の１１ＣＩを除去する操作を３回繰返
したのち、エーテルを加え油状の目的物をえた。

以下に、えられた０ｒｎ（Ｚ）−β−Ａｌａ−ＯＢｚｌ
）ＩＣＩの収量（収率）、比旋光度およびＴＬＣによる
Ｒ１’値を示す。

収Ｑ　　１．［ｉ４ｇ　（９５％） ［ａ　］　　”　　：　１ｌ（ｃ−１，ＭｅＯＨ）Ｒｒ
２　　Ｆ　　０．７８　　　　　Ｒｒ、　　：　　０．
３６（３）＾ｃ−Ｏｒｎ　（Ｚ）−β−Ａｌａ−ＯＢｚ
ｌの合成（２）でえられた０ｒｎ（Ｚ）−β−＾１ａ−
ＯＢｚｌ　　−ＨＣｌｌ、６４ｇ　（３，８ｓｖｏｌ）
とＥｔ３Ｎ　Ｏ，５３ｍｌ　（３，８０ａｖｏｌ）をＡ
ｃ０Ｅｔ　４０ｍ１に溶解し、冷却下（ＡｃＯ）２００
．３８　ｍｌ　（４，５６ｍｍｏｌ）を加え一晩反応さ
せた。

反応溶液を減圧濃縮したのち、残渣をＡｃ０Ｅｔに溶か
し、４％クエン酸水溶液および４％炭酸水素ナトリウム
（ＮａＨＣＯ３）水溶液で順次、酸、塩基洗いを行ない
無水硫酸ナトリウムで有機層を乾燥させた。減圧濃縮し
たのち、残渣をエーテルで結晶化した。

以下に、えられた、Ａｃ−０ｒｎ（Ｚ）−β−Ａｌａ−
Ｏ１１ｚｌの収量（収率）、融点、比旋光度、ＴＬＣに
よるｌｉｆ値および元素分析値を示す。

収量　１．４２ｇ　Ｃ８５％） 虚、Ｌ１１２〜１１３℃ ［ａ　］　２１１：　−１３（ｃ”ｌ　、　ＭｅＯＨ）
Ｒｆ’２　　：　　０．７８　　　　　Ｒｆ’３　　：
　　０．５５元素分析（Ｃ２５Ｈ３１０６Ｎｓ　　　Ｏ
，１）１２０）理論値（Ｘ）　　：　Ｃ６３，７Ｌ　　
Ｈ８，０７Ｎ　８．９２実Ａｐｊ値（％）　　：　Ｃ６
３，７６Ｈ８，８３Ｎ　８．９３（４）Ａｃ−Ｏｒｎ−
β−＾１ａの合成（３）でえられたＡｃ−０ｒｎ（Ｚ）
−β−Ａｌａ−ＯＢｚｌ　　Ｏ，８８ｇ（２ｉｍｏｌ）
をＭｃＯＨ１５ｍ１に溶解し、Ｐｄ黒を加えて、水素気
流下において脱保護を行なった。

ＴＬＣにより反応が終了したことを確認し、Ｐｄ黒を濾
去し反応溶液を減圧濃縮、残渣をアセトンで結晶化させ
、吸湿性の目的物をえた。

以下に、えられた＾ｃ−Ｏｒｎ−β−Ａｌａの収量（収
率）、比旋光度、ＴＬＣによるＲｒ値およびアミノ酸分
析データを示す。

収量　０．４８１ｇ　　（８８％）吸湿性Ｃａ　］　”
　：　−１５（ｃ−１、ＭｅＯＨ）Ｒｒ＋　　　：　　
　［１，３０Ｒｒ２　　　：　　　０．００アミノ酸分
析データ Ｏｒｎ　：　１．０５　　　β−Ａｌａ　：　　ｉ、ｏ
。

実施例５ Ａｃ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓの合成 （１）Ｂｏａ−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｌｙｓ（ｚ）−０Ｂ
ｚｌの合成りｏｃ−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）　（バチエム社製
域Ｒ”）　０．７４ｇ（２ａｍｏｌ）をＴｔｌＰ　４　
ｍｌとＥｔ３　Ｎ　Ｏ，２８ｍ１　（２ｍｍｏｌ）に溶
解し、水溶下（−１５℃）で撹拌し、ＩＥＤＣ・　ＩＩ
　Ｃ１０，４２ｇ（２，２ｍｍｏｌ）を添加し、４分撹
拌後、Ｌｙｓ（ｚ）−０Ｂｚｌ　　−ｐ−ＴｓＯＩｌ　
１．０８ｇ　（２ｍｍｏｌ）をＴＨＰ　４ｍｌとＥｔ３
Ｎ　Ｏ，２８ｍ１　（２ｇ＋ａ＋ｏｌ）に溶解したもの
を添加し、−晩室温で撹拌した。反応液を減圧下濃縮し
、Ａｃ０Ｅｔで抽出、有機層を４％クエン酸水溶液およ
び４％炭酸水素ナトリウム（ＮａＨＣＯｘ）水溶液で順
次、酸洗い、塩基洗い、水洗いし、無水Ｎａ２　ＳＯ４
で乾燥後、減圧濃縮しエーテルで結晶化した。

以下に、えられたＢｏａ−Ｔｙｒ（１３ｚｌ）−Ｌｙｓ
（Ｚ）−０Ｄｚｌの収量（収率）およびＴＬＣによるＲ
ｒ値を示す。

収量０．９４　ｇ　（６４，９％） Ｒｆ’＋　　：　　０．９５　　　Ｒｆ’３　：　　０
．８０［２）Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）　−Ｌｙｓ（Ｚ）−０Ｂ
ｚｌ　　・ｌｌＣｌの合成（１）でえられたＢｏｃ−Ｔ
ｙｒ（Ｂｚｌ）−１ｙｓ（Ｚ）−０８ｚ１０．８５ｇ（
１，１５ｍｍｏｆ）を４Ｎ　ＩＩＣ’ｌ−ジオキサンに
溶解し、パラジウム黒０，５ｇを加えて室温で２４時間
撹拌して接触迎元した。ＴＬＣで反応終了を確認し、濾
過によりパラジウム黒を除去、濾液を減圧下濃縮し、エ
ーテルで希釈して冷却放置し結晶化したのち、上澄液を
濾去し、結晶を乾燥し、Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｌｙｓ（Ｚ
）−０Ｂｚｌ−１［Ｃ１をえた。

以下に、えられたＴｙｒ（１３ｚｌ）−Ｌｙｓ（Ｚ）−
０１３ｚｌ　・１１ｃＩ　１７＞収量（収率）、ならび
１．：、　ＴＬＣｌ：　ヨル！？ｆ’＋および旧°３を
示す。

収量０．７５５ｇ（９９，５％） Ｒｒ＋　　：　０．７９　　　　ＲＩ’３　　：　０．
７４（３）Ａｃ−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｌｙｓ（Ｚ）−０
Ｂｚｌの合成（２１でえられたＴｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｌｙ
ｓ（Ｚ）−０Ｂｚｌ−ＨＣＩｏ、８４０ｇ　（１ｍｇｏ
ｌ）をＤＭＰ（１０ｍｌ　）　、Ｃ１１３ＣＮ（１０ｍ
ｌ　）中、Ｅｔ３Ｎ　Ｏ，１４ｍｌ　（１ｇａｏｌ）を
加え、冷却下１０分間撹拌し、（Ａｃ０ｈ００．１１　
ｍｌ　（１，２＋ａ＋ａｏｌ）を加えた。

室温で一晩反応させた後、反応溶液を減圧濃縮し残渣を
Ａｃ０Ｅｔに溶かし、４％クエン酸水溶液および４％炭
酸水素ナトリウム水溶液で順次、酸、塩基洗いを行ない
、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮し残渣をエー
テルで結晶化した。さらに熱Ｍ　ｅ　ＯＨより再結晶し
た。

以下に、えられたＡｃ−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）　・Ｌｙｓ（
Ｚ）−ＯＢｚｌの収量（収率）およびＴＬＣによるＲｒ
値を示す。

収量　０．３０６ｇ（４５，９％） Ｒｆ３：　　０．９１ ［４）Ａｃ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓの合成 （３）でえられた＾ｃ−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｌｙｓ（Ｚ
）−０Ｂｚ１０．３００ｇ（０，４５６ｌ１ａｏｌ）を
酢酸溶媒中、ｐｂ黒の存在下、接触還元した。Ｐｄ黒を
濾去し、濾液を減圧濃縮し、エーテルで結晶化した。

以下に、えられたＡｅ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓの収量（収率）
およびＴＬＣによるＲｆ値を示す。

収量　０．１５４ｇ（９６％） Ｒｆ’＋　　：　　０．３９ （呈味試験） 第１表に示す被験化合物について呈味試験を行なった。

その結果を第１表に示す。呈味試験は、１８〜５５才の
男女５０人のパネラ−の倍数希釈による官能検査法によ
る呈味を評価した。甘味強度は、シュークロースの甘味
強度を１としたときの閾値を比べたもので、シュークロ
ースの何倍強い甘味であるかを示す価である。また、後
味の評価は、各々シュークロース２０ｍＭ溶液に最も近
い濃度において下記のような５段階で評価した。

５：されやかな甘味を感じ、スッキリ と消える。

４：甘味が若干後をひく。

３：甘味が後をひき、若干苦味を感じる。

２：甘味が後をひき、かなり苦味を感じる。

１：甘味が後をひき、苦味を強く感じる。

［以下余白］ 第１表に示すように、Ａｃ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓはシューク
ロースの２０〜２５倍の甘味を持ち、後味においても、
されやかな良質の甘味をもっことが見出された。Ｐｈｅ
部分をＤ一体に変えたジアステレオマーは、Ｌ一体のも
のに比べ後味が悪かった。また、ｐｈθをＴｙｒに置換
したものについても全く同様である。

＾ｃ−Ｏｒｎ−β−Ａｌａ、　０ｒｎ（Ａｃ）−β−＾
ｉａについては、甘味の質、とくに後味については非常
にすっきりとした良質のものであったが、甘味強度はシ
ュークロースと同程度であった。

（塩酸による甘味強度の変化） Ａｃ−Ｏｒｎ−β−＾１ａｓ　０ｒｎ（Ａｃ）−β−Ａ
ｌａについて、その塩酸共存下での甘味強度の変化を見
るために、ツレぞれノ２０ａＭ水溶液１．：　ＨＣＮ　
Ｏ，２，０，４当量加えたものについて前記呈味試験を
行なった。

結果を第２表に示す。

第２表に示すように、塩酸濃度を上げると若干の酸味の
増加は見られるものの、甘味強度も向上することを見出
した。この酸味は、後味として悪い印象を与えるもので
はなく、むしろ、すっきりとしたもので、食品において
充分甘味剤として使用できえるものである。

［発明の効果〕 本発明のジペプチド誘導体およびその塩は、されやかな
甘味を発現するという効果を奏し、それを含有する甘味
剤は後味に苦味を残さないけ味剤として有用なものであ
る。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １　一般式（ I ）： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒ＾１は水素原子または水酸基を表わし、およ
   びＲ＾２はアセチル基またはホルミル基を表わす）また
   は一般式（II）： ▲数式、化学式、表等があります▼（II） （式中、Ｒ＾３およびＲ＾４は水素原子、アセチル基ま
   たはホルミル基を表わし、Ｒ＾３がアセチル基またはホ
   ルミル基のときＲ＾４は水素原子を表わし、またＲ＾３
   が水素原子のときＲ＾４はアセチル基またはホルミル基
   を表わす）で示されるジペプチド誘導体またはその塩。 ２　一般式（ I ）： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒ＾１は水素原子または水酸基を表わし、およ
   びＲ＾２はアセチル基またはホルミル基を表わす）また
   は一般式（II）： ▲数式、化学式、表等があります▼（II） （式中、Ｒ＾３およびＲ＾４は水素原子、アセチル基ま
   たはホルミル基を表わし、Ｒ＾３がアセチル基またはホ
   ルミル基のときＲ＾４は水素原子を表わし、またＲ＾３
   が水素原子のときＲ＾４はアセチル基またはホルミル基
   を表わす）で示されるジペプチド誘導体またはその塩を
   有効成分として含有するペプチド甘味剤。