JPH02104288A - アミノデオキシマンニトールの製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 【産業上の利用分野】

本発明は、以下に述べる特異かつ有用な作用を有する２
−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−マンニトールの製造法に
関する。 更に詳しくは、本発明は、ストレプトミセス属に属し２
−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−マンニトール産生能を有
する微生物を培地中で培養し、これにより得られた培養
液から２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−マンニトールを
採取することを特徴とする２−アミノ−２−デオキシ−
Ｄ−マンニトールの製造法に関するものである。 本発明に係る２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−マンニト
ールは、それ自体、配合化粧料として（特開昭５９−２
１２４２１号公報）、Ｘ線造影剤の製造原料として（特
開昭５２−１２８３４６号公報）有用であるが、それば
かりではな（、食後の血糖上昇抑制作用を有し糖尿病治
療薬として期待されているモラノリン（特公昭５６−０
０９９１９号公報）のストレプトミセス属微生物による
製造において、モラノリンの産生量を高めるという特異
な作用を有する有用な物質である。

【従来の技術】

２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−マンニトールはこれま
で、Ｎ−アセチルアミノ−２−デオキシ−Ｄ−マンノー
スを水素化ホウ素ナトリウム等で還元してＮ−アセチル
アミノ−２−デオキシ−Ｄ−マンニトールとした後、ア
ルカリ又は酸で加水分解して製造されていた既知化合物
である。

【発明が解決しようとする課題】

しかしながら、上記の製造法では、原料であるＮ−アセ
チルアミノ−２−デオキシ−Ｄ−マンノースが高価なこ
と、資源性に乏しいこと、また合成単離という煩雑な工
程が必要なこと、等の欠点を有していた。

【課題を解決するための手段】

本発明者らは、２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−マンニ
トールの醗酵法による製造法について広く研究を続けた
結果、ストレプトミセス属に属する微生物が、２−アミ
ノ−２−デオキシ−Ｄ−マンニトールを遊離の形でしか
も多量に産生ずる事実を見出し、本発明を完成するに至
った。 本発明に係る微生物として代表的なものは、本発明者ら
が札幌市内の土壌より分離したストレプトミセス　ラベ
ンデュレ５ＥＮ−１５８（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｌ
ａｖｅｎｄｕｌａｅ　５ＥＮ−１５８ｏ以下ｒＳＥＮ−
１５８株」という。）を挙げることができる。 ５ＥＮ−１５８株は、工業技術院微生物工業技術研究所
に微工研菌寄第４３０１号（ＦＥＲＩＩ　Ｐ−４３０１
）として寄託され、その菌学的性質については特開昭５
４−０８４０９４号公報に記載されている。また、アメ
リカンタイプ　カルチャー　コレクション（Ａｍｅｒｉ
ｃａｎＴｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅ　　Ｃｏ１１ｅｃｔｉ
ｏｎ、　Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、　Ｍｄ、、）にＡＴＣＣ
３１４３４として寄託されている。 本発明においては、５ＥＮ−１５８株以外のストレプト
ミセス属に属する菌株であっても、２−アミノ−２−デ
オキシ−Ｄ−マンニトールを産生ずる菌株はすべて用い
ることができる。また、これらの菌株に紫外線若しくは
ｂ　ＯＣＯ等の照射処理、ナイトロジエンマスタード、
アザセリン、亜硝酸、ニトロソグアニジン若しくは２−
アミノプリン等の変異誘起剤による変異処理、形質導入
、形質転換１、又は細胞融合等の通常用いられる変異処
理手段によって得られた人工的突然変異株、及び自然発
生した変異株も、本発明の目的に適うものである。 本発明は、２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−マンニトー
ル産生菌を用い通常の放線菌の培養方法により培養する
ことにより実施することができる。 培地は液体であっても固体であってもよいが、通常は液
体培地による振盪培養又は通気攪拌培養を用いることが
できる。 培地は、放線菌の生育に適し、２−アミノ−２−デオキ
シ−Ｄ−マンニトールを産生ずることができるものであ
れば、どのようなものであってもよい。 炭素源としては、グルコース、ガラクトース、マンニト
ール、シュクロース、マルトース、グリセリン、デキス
トリン、デンプン等を単独又は混合した状態で用いるこ
とができる。 窒素源としては、大豆粉、ペプトン、酵母エキス、肉エ
キス、コーン・ステイープ・リカーζ塩化アンモニウム
、硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、尿素等を用い
ることができる。 その他、塩化ナトリウム、塩化カリウム、炭酸カルシウ
ム、各種リン酸塩等を適量加えると良好な結果を得るこ
とができる。また、更に適量の鉄、マグネ・シウム等を
加えてもよい。 必要に応じて、使用菌の生育や２−゛アミノー２−デオ
キシーＤ−マンニトールの産生を促進する有機物、無機
物、ビタミン類等を加えることができる。 また、醗酵中の発泡が著しいときには、消泡剤を適宜加
えることができる。 培地のｐＨ１培養培養環の培養条件は、２−アミノ−２
−デオキシ−Ｄ−マンニトールを産生ずる範囲内で適宜
変更することができるが、例えば、液体の振盪又は通気
攪拌培養の場合には、ｐＨ６〜９、培養温度は２０〜３
５°Ｃ程度でよく、好ましくは２５〜３０°Ｃで行うこ
とが望ましい。 培養時間は培養の規模及びその他の条件によって異なる
が、通常は２〜２０日間で充分である。 培養後は菌体を分離し、得られた培養液から目的物を精
製し、単離する。 培養液から本発明物質を精製し単離するには、一般に微
生物代謝産生物をその培養液から単離精製するときに使
用される方法を用いることができる。 例えば、各種の吸着剤（例、シリカゲル、アルミナ、活
性炭、イオン交換樹脂等）による脱吸着、クロマト法、
分配クロマト法、分別結晶法、再結品性等を、単独又は
適宜組み合わせて用いることができる。

【実施例】

以下に、本発明の実施例及び試験例を掲げて本発明を更
に詳しく説明する。 実施例 ５０ｈＪ！容三角フラスコに培地（可溶性澱粉８％、大
豆粉１％、酵母エキス１％、塩化カリウム０．０５％、
硫酸マグネシウム０．０５％、塩化ナトリウム０．５％
、硝酸ナトリウム０．２％、ｐＨ７，２）　　１００ｒ
ｄを入れ、滅菌した。これに５ＥＮ−１５８株の数白金
耳をスラントより接種し、２７°Ｃで３日間振盪培養を
行い、前培養液を得た。この前培養液３００成を、１５
１の培養液（成分は前培養液と同じ）を入れた３０β容
ジヤーフアメンクーに接種し、２７°Ｃにて１１日間培
養をした。 消泡剤は、ニジサン　ディスホーム　ＣＢ−４４２を用
い、通気量は２０１／分、撹拌速度は３００ｒｐｍで行
らた。 得られた培養液１２．９　ｆｆｉを９００Ｏｒｐｍで２
０分遠心分離し、得た上澄液を強酸性イオン交換樹脂ダ
ウエックス５０Ｗｘ２　（Ｈｏ）（１１のカラムを通過
させ、充分に水洗後、ＩＮアンモニア水で溶出する。 溶出液を減圧下に濃縮し、強塩基性イオン交換樹脂ダイ
アイオン５Ａ−１１＾（ＯＨ−）（５００ｍ１＞を通過
させ、水洗する０通過液と洗液とを合わせ、減圧下に濃
縮し、５°Ｃに数日間放置する。生じた結晶を集め、２
０％含水エタノールより再結晶し、２−アミノ−２−デ
オキシ−Ｄ−マンニトールの結晶１ｇを得た６本品の物
性値は、以下のとおりであった。 融点１６１〜１６３°Ｃ０ 元素分析値（Ｃ＆　Ｈ＋５ＮＯｓ） 計算値（％）ＣＦ３９．７７　Ｈ：８．３４　　Ｎ　ニ
ア、７３実測値（％）　　Ｃ：３９．６２　Ｈ：８．１
７　　Ｎ　ニア、８１比旋光度〔α）＝＋４．Ｏ°（Ｃ
＝１％、水）”Ｃ−ＮＭＲｐｐｍ　；　（Ｄ２０＋　　
内部標準；メタノール４９．８ｐｐｍ） ５３．８４．６４．０５．６４．３１．７０．７３．　
７１．２９．７１．８５’Ｈ−ＮＭＲｐｐｍ　；　（１
）ｔＱ、　　内部標準；　ＤＳＳ）２．９８〜３．１２
（１）１．　　ｍ）　、　　３．５６〜３．９０（７１
１，ｍ）　。 なお本島の構造は、Ｎ−アセチルアミノ−２−デオキシ
−Ｄ−マンノースを水素化ホウ素ナトリウムで還元した
後、塩酸で加水分解して合成した合成品と完全に物性値
が一致したことにより確認した。 試験例 ストレプトミセス属に属する新規に分離されたモラノリ
ン産生菌ＭＢ−７３３株の変異株ＧＣ−１４８株をスラ
ントより次に示す培地に接種し、２７°Ｃで７日間振盪
培養後、培養液１０ｍ１を遠心分離して、その上清液を
強酸性イオン交換樹脂ダウエックス５０ＷＸ２　（Ｈ”
　）（１１）のカラムを通過させ、充分に水洗後、０．
５Ｎアンモニア水で溶出し、減圧下に濃縮乾固後、１　
ａｌｌの水に溶解し、高速液体クロマトグラフィーによ
りモラノリンを定量した。 高速液体クロマトグラフィーの条件は、カラム；　Ｎｕ
ｃｌｅｏｓｉｌ　５ＮＨ２、展開溶媒；アセトニトリル
−水＝７：３　、検出；示差屈折計、であった。 培地Ａ：可溶性澱粉２％、大豆粉１％、酵母エキス１％
、塩化カリウム０．０５％、硫酸マグネシウム水和物０
．０５％、塩化ナトリウム０．５％、硝酸ナトリウム０
．２％、炭酸カルシウム０．３５％、ｐＨ７，０゜ 培地Ｂ：培地Ａに１％の２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ
−マンニトールを添加したもの。 結果を下の表に示す。 これにより本発明に係る２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ
−マンニトールのモラノリン産生効果が明らかである。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）ストレプトミセス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ
   ）に属し、２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−マンニトー
   ル産生能を有する微生物を培地中で培養し、得られた培
   養液から２−アミノ−Ｚ−デオキシ−Ｄ−マンニトール
   を採取することを特徴とする、２−アミノ−２−デオキ
   シ−Ｄ−マンニトールの製造法。