JPH0153876B2 - - Google Patents
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Description
本発明は新抗生物質6270物質又はその塩、その
製造法、抗コクシジウム剤及び飼料効率改善剤に
関するものである。 本発明者らは、新規な抗生物質の探索を目的と
して多数の微生物を土壌より分離し、その産生す
る抗生物質を分離探索した。その結果北海道網走
市にて採取した土壌より単離したノカルデイオプ
シス属に属する微生物を適宜の培地で培養する
と、グラム陽性菌に高い抗菌力を示す抗生物質が
培地中に蓄積されることを見出した。そこでこの
抗生物質を単離し、その理化学的性質及び生物学
的性質を検討したところ、新規な抗生物質である
ことを認め、これを抗生物質6270物質と命名し
た。 本発明はこの知見に基づくもので抗生物質6270
物質又はその塩、抗生物質6270物質を生産する能
力を有するノカルデイオプシス属菌を培養し、そ
の培養物から抗生物質6270物質を採取することを
特徴とする抗生物質6270物質又はその塩の製造
法、抗生物質6270物質又はその塩を有効成分とす
る抗コクシジウム剤及び抗生物質6270物質又はそ
の塩を有効成分とする飼料効率改善剤である。 抗生物質6270物質の製造に用いられる微生物と
しては、抗生物質6270物質の産生能を有する限り
すべてのノカルデイオプシス属に属する微生物を
用いることができるが、例えば本発明者らが新た
に分離したノカルデイオプシス エス ピー
6270号株(受託番号:微工研条寄第717号)が好
ましい。 本発明に用いられるノカルデイオプシス エス
ピー6270号株は、分岐する真正の菌糸を有し空
中にのびる気菌糸は分断して長い胞子の連鎖とな
る。 全細胞の加水分解物からはメソジアミノピメリ
ン酸と、糖成分としてガラクトースとリボースが
検出されるがアラビノースとマジユロースは検出
されない。またミコール酸も検出されない。メナ
キノン組成はMK−9(H6)および(H8)が主
で、微量成分としてMK−9(H4)が検出され
た。基生菌糸の巾は0.5μm内外であり、以上の性
質から6270号株は放線菌類中ノカルデイオプシス
属に属する一菌株であると認められる。ノカルデ
イオプシス エス ピー6270号株は下記の菌学的
性質を有する。 形態学的性質 基生菌糸はよく発達し分岐し、菌糸の巾はほ
ぼ0.4μmである。数種の培地例えばシユークロ
ース・硝酸塩寒天培地(デイフコ・ツアペツク
ソリーシヨン アガー)、スターチ寒天培地
(ISP−4、デイフコ・無機塩スターチ アガ
ー)オートミール寒天培地(ISP−8)やグル
コース・アスパラギン寒天培地などでは良好に
気菌糸を着生する。気菌糸は直線状または曲線
状で全体としてくもの巣状である。成熟すると
気菌糸は巾0.4μm〜0.6μmとなる。 培養後10日目には適当な寒天培地上では気菌
糸は分断して10個以上の長い胞子の連鎖とな
る。胞子の連鎖はらせん状とはならない。胞子
の表面は平滑で、形状は円筒形である。大きさ
はほぼ0.4×1.2μmである。胞子のう、菌核、
束菌糸などは観察されない。 培養上の諸性質 実験の方法はイー・ビー・シヤーリングらの
報告(インターナシヨナル・ジヤーナル・オ
ブ・システマチツク・バクテリオロジー16巻、
313〜340頁、1966年)に準じ、その他付加的に
公知の培地及び実験方法を併用した。色調の決
定にはキセノンランプを光源とする標準光源下
で標準色票としてカラー・ハーモニー・マニユ
アル第4版を用い、一致する色票があれば初め
に一般名を示し、次いで括弧内に色票コードを
併記した。繰返し同色が現われた場合は色票コ
ードのみを示した。以下特記しないかぎり、28
℃、3週目の生育の状態であり、寒天平板培養
であり、a欄には生育、b欄には気菌糸の状
態、c欄には溶性色素及びd欄にはその他の性
質を記載した。 (1) シユクロース・硝酸塩培地(デイフコ・ツ
アペツク ソリーシヨン アガー) a:良好、ニア グレー(2ba) b:白色、粉状 c:作らない (2) グルコース・アスパラギン培地 a:良好、ライト アムバー(3ic)〜ベー
ジユ(3ge) b:ニア グレー(3ba) c:作らない (3) グリセロール・アスパラギン培地 a:不良、2ba b:僅かに着生する c:作らない (4) スターチ寒天培地 a:旺盛、3ic〜シエル(3ca) b:粉状、白色 c:作らない d:スターチの加水分解は陰性 (5) チロシン寒天培地 a:不良、3ge b:作らない c:作らない (6) 栄養寒天培地(デイフコ・バクト・ヌート
リエント アガー) a:不良、ライト ホイート(2ea) b:作らない c:作らない (7) イースト・麦芽エキス培地 a:旺盛、ひび状、トパーズ(3ne) b:白色 c:作らない (8) オートミール培地 a:良好、シエル(2ca) b:2ba c:作らない 生理学的性質 (1) 生育温度範囲(スターチ寒天培地斜面、温
度勾配装置:6.5℃〜38℃(5℃以下および
39.5℃以上では生育しない) 適温:27℃〜38℃ (2) グルコース・ペプトン・ゼラチン培地穿刺
培養の液化:陽性 (3) スターチの加水分解:陰性 (4) 脱脂乳の凝固・ペプトン化:凝固せずペプ
トン化する(37℃) (5) メラニンの生成 ISP・チロシン寒天培地:陰性 ISP・トリプトン・イーストエキス液体培
地:陰性 ISP・ペプトン・イースト鉄寒天培地:陰
性 (6) 耐塩性:4%では生育しない (7) キサンチン、ヒポキサンチン、アデニンの
溶解性:陰性 炭素源の利用能(プリドハム、ゴドリーブ基
礎培地) 利用陽性:D−グルコース、L−アラビノー
ス、D−キシロース、サリシン 利用疑陽性:D−フラクトース、シユクロー
ス 利用陰性:イノシトール、L−ラムノース、
ラフイノース、D−マンニトール 以上の諸性質中、6270号菌は放線菌中、気菌糸
上に長い胞子の連鎖を作り、全菌体加水分解物中
にメソジアノピメリン酸とガラクトースを含有す
るが、アラビノースおよびマジユロースを含有せ
ずまたミコール酸が検出されない点からノカルデ
イオプシス(ブロツクー ルーソー 1904)メー
ヤー1976の一菌株と同定された。 ノカルデイオプシス属に分類される在来の類似
種としてはノカルデイオプシス・ムタビリス
(Nocardiopsis mutabilis)〔エム・シー・シエー
ラーらの報告。インターナシヨナル・ジヤーナ
ル・オブ・システマチツク・バクテリオロジー33
巻、369〜374頁、1983年〕及びノカルデイオプシ
ス ダツソンヴイレイ アイエムアールユウ
509(Nocardiopsis dassonvillae IMRU 509)
〔ジエイ・メイヤーの報告。同上 26巻、487〜
493頁、1976年〕があり、これらの菌学的、生理
学的性状及び各種培地における生育状態を比較
し、その差異を第1表に示す。
製造法、抗コクシジウム剤及び飼料効率改善剤に
関するものである。 本発明者らは、新規な抗生物質の探索を目的と
して多数の微生物を土壌より分離し、その産生す
る抗生物質を分離探索した。その結果北海道網走
市にて採取した土壌より単離したノカルデイオプ
シス属に属する微生物を適宜の培地で培養する
と、グラム陽性菌に高い抗菌力を示す抗生物質が
培地中に蓄積されることを見出した。そこでこの
抗生物質を単離し、その理化学的性質及び生物学
的性質を検討したところ、新規な抗生物質である
ことを認め、これを抗生物質6270物質と命名し
た。 本発明はこの知見に基づくもので抗生物質6270
物質又はその塩、抗生物質6270物質を生産する能
力を有するノカルデイオプシス属菌を培養し、そ
の培養物から抗生物質6270物質を採取することを
特徴とする抗生物質6270物質又はその塩の製造
法、抗生物質6270物質又はその塩を有効成分とす
る抗コクシジウム剤及び抗生物質6270物質又はそ
の塩を有効成分とする飼料効率改善剤である。 抗生物質6270物質の製造に用いられる微生物と
しては、抗生物質6270物質の産生能を有する限り
すべてのノカルデイオプシス属に属する微生物を
用いることができるが、例えば本発明者らが新た
に分離したノカルデイオプシス エス ピー
6270号株(受託番号:微工研条寄第717号)が好
ましい。 本発明に用いられるノカルデイオプシス エス
ピー6270号株は、分岐する真正の菌糸を有し空
中にのびる気菌糸は分断して長い胞子の連鎖とな
る。 全細胞の加水分解物からはメソジアミノピメリ
ン酸と、糖成分としてガラクトースとリボースが
検出されるがアラビノースとマジユロースは検出
されない。またミコール酸も検出されない。メナ
キノン組成はMK−9(H6)および(H8)が主
で、微量成分としてMK−9(H4)が検出され
た。基生菌糸の巾は0.5μm内外であり、以上の性
質から6270号株は放線菌類中ノカルデイオプシス
属に属する一菌株であると認められる。ノカルデ
イオプシス エス ピー6270号株は下記の菌学的
性質を有する。 形態学的性質 基生菌糸はよく発達し分岐し、菌糸の巾はほ
ぼ0.4μmである。数種の培地例えばシユークロ
ース・硝酸塩寒天培地(デイフコ・ツアペツク
ソリーシヨン アガー)、スターチ寒天培地
(ISP−4、デイフコ・無機塩スターチ アガ
ー)オートミール寒天培地(ISP−8)やグル
コース・アスパラギン寒天培地などでは良好に
気菌糸を着生する。気菌糸は直線状または曲線
状で全体としてくもの巣状である。成熟すると
気菌糸は巾0.4μm〜0.6μmとなる。 培養後10日目には適当な寒天培地上では気菌
糸は分断して10個以上の長い胞子の連鎖とな
る。胞子の連鎖はらせん状とはならない。胞子
の表面は平滑で、形状は円筒形である。大きさ
はほぼ0.4×1.2μmである。胞子のう、菌核、
束菌糸などは観察されない。 培養上の諸性質 実験の方法はイー・ビー・シヤーリングらの
報告(インターナシヨナル・ジヤーナル・オ
ブ・システマチツク・バクテリオロジー16巻、
313〜340頁、1966年)に準じ、その他付加的に
公知の培地及び実験方法を併用した。色調の決
定にはキセノンランプを光源とする標準光源下
で標準色票としてカラー・ハーモニー・マニユ
アル第4版を用い、一致する色票があれば初め
に一般名を示し、次いで括弧内に色票コードを
併記した。繰返し同色が現われた場合は色票コ
ードのみを示した。以下特記しないかぎり、28
℃、3週目の生育の状態であり、寒天平板培養
であり、a欄には生育、b欄には気菌糸の状
態、c欄には溶性色素及びd欄にはその他の性
質を記載した。 (1) シユクロース・硝酸塩培地(デイフコ・ツ
アペツク ソリーシヨン アガー) a:良好、ニア グレー(2ba) b:白色、粉状 c:作らない (2) グルコース・アスパラギン培地 a:良好、ライト アムバー(3ic)〜ベー
ジユ(3ge) b:ニア グレー(3ba) c:作らない (3) グリセロール・アスパラギン培地 a:不良、2ba b:僅かに着生する c:作らない (4) スターチ寒天培地 a:旺盛、3ic〜シエル(3ca) b:粉状、白色 c:作らない d:スターチの加水分解は陰性 (5) チロシン寒天培地 a:不良、3ge b:作らない c:作らない (6) 栄養寒天培地(デイフコ・バクト・ヌート
リエント アガー) a:不良、ライト ホイート(2ea) b:作らない c:作らない (7) イースト・麦芽エキス培地 a:旺盛、ひび状、トパーズ(3ne) b:白色 c:作らない (8) オートミール培地 a:良好、シエル(2ca) b:2ba c:作らない 生理学的性質 (1) 生育温度範囲(スターチ寒天培地斜面、温
度勾配装置:6.5℃〜38℃(5℃以下および
39.5℃以上では生育しない) 適温:27℃〜38℃ (2) グルコース・ペプトン・ゼラチン培地穿刺
培養の液化:陽性 (3) スターチの加水分解:陰性 (4) 脱脂乳の凝固・ペプトン化:凝固せずペプ
トン化する(37℃) (5) メラニンの生成 ISP・チロシン寒天培地:陰性 ISP・トリプトン・イーストエキス液体培
地:陰性 ISP・ペプトン・イースト鉄寒天培地:陰
性 (6) 耐塩性:4%では生育しない (7) キサンチン、ヒポキサンチン、アデニンの
溶解性:陰性 炭素源の利用能(プリドハム、ゴドリーブ基
礎培地) 利用陽性:D−グルコース、L−アラビノー
ス、D−キシロース、サリシン 利用疑陽性:D−フラクトース、シユクロー
ス 利用陰性:イノシトール、L−ラムノース、
ラフイノース、D−マンニトール 以上の諸性質中、6270号菌は放線菌中、気菌糸
上に長い胞子の連鎖を作り、全菌体加水分解物中
にメソジアノピメリン酸とガラクトースを含有す
るが、アラビノースおよびマジユロースを含有せ
ずまたミコール酸が検出されない点からノカルデ
イオプシス(ブロツクー ルーソー 1904)メー
ヤー1976の一菌株と同定された。 ノカルデイオプシス属に分類される在来の類似
種としてはノカルデイオプシス・ムタビリス
(Nocardiopsis mutabilis)〔エム・シー・シエー
ラーらの報告。インターナシヨナル・ジヤーナ
ル・オブ・システマチツク・バクテリオロジー33
巻、369〜374頁、1983年〕及びノカルデイオプシ
ス ダツソンヴイレイ アイエムアールユウ
509(Nocardiopsis dassonvillae IMRU 509)
〔ジエイ・メイヤーの報告。同上 26巻、487〜
493頁、1976年〕があり、これらの菌学的、生理
学的性状及び各種培地における生育状態を比較
し、その差異を第1表に示す。
【表】
【表】
本発明を実施するにあたつては、抗生物質6270
物質生産菌を公知の放線菌の培養法により行なう
ことができるが、工業的には通気撹拌培養するこ
とが好適である。生産培地としては、放線菌の培
養に用いられる通常の原料が使用され、すなわち
各種の炭素源、窒素源及び有機又は無機塩類並び
に場合により消泡剤などを適宜に組合せて用いる
ことができる。一般には炭素源としてはグルコー
ス、澱粉、グリセリン、デキストリン、シユクロ
ース、動植物油等、窒素源としては大豆粉、コー
ンスチープリカー、小麦はい芽、アンモニア等を
使用することができる。その他必要に応じ、炭酸
カルシウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、リ
ン酸塩等の無機塩を添加し、また菌の発育を助け
て抗生物質6270物質の生産を促進する作用を有す
る有機又は無機塩を適宜に添加することもでき
る。 培養温度は一般に25〜35℃の範囲であるが30℃
付近が好ましい。培養時間は種々の条件により異
なるが通常は72〜148時間にて抗生物質6270物質
の産生蓄積量は最大となる。 培養物から抗生物質6270物質を単離、精製する
ためには、本物質の理化学的性質を利用し、公知
の手段、例えば不純物との溶解度の差を利用する
手段、イオン交換樹脂又は各種吸着剤に対する吸
着力の差を利用する手段、水と混和しない有機溶
媒による抽出手段、あるいは沈殿、不純物の除
去、透析、乾燥、再結晶などの手段を適宜選択し
組合わせて行うことができる。 培養物中の生産された抗生物質6270物質は、例
えば次のようにして摂取することが好ましい。培
養液に濾過助剤、例えば珪藻土、ラジオライト
700等を加えて培養液を濾過し、濾液及び菌体を
夫々適当な培養、例えば酢酸エチル、アセトン等
で抽出する。次いで、菌体抽出液と濾液抽出液を
合わせ、この抽出液から溶媒を留去すると抗生物
質6270物質の粗結晶から抗生物質6270物質を単離
するためにま、例えばクロマトグラフイーに付
す。溶出液を減圧濃縮したのち、残渣を適当な溶
媒例えば酢酸エチルに溶かし、希塩酸溶液で処理
し、溶媒層を濃縮すると抗生物質6270物質が遊離
酸として結晶する。 ナトリウム塩として得るためには前記希塩酸溶
液で処理した溶媒層を次に希炭酸ナトリウム溶液
で処理し、溶媒層を濃縮すると抗生物質6270物質
がナトリウム塩として得られる。ここに得た遊離
酸型及びナトリウム塩型の抗生物質6270物質は適
当な溶媒例えばn−ヘキサン−酢酸エチル等で再
結晶することにより純粋な結晶として得ることが
出来る。こうして得られた遊離酸型の抗生物質
6270物質の性状は次のとおりである。 (1) 無色針状結晶、酸性物質 (2) 融点 115〜118℃ (3) 元素分析値(実測値 %) C 62.72%、H 9.49%、O 27.78% (4) 比旋光度 〔α〕20 D=−11.5゜(c1.0、メタノー
ル) (5) 紫外線吸収スペクトル:メタノール溶液中で
測定すると、210nm以上に吸収極大を示さな
い。 (6) 赤外線吸収スペクトル(臭化カリウム錠で測
定)における特性吸収(cm-1): 3470、2980、2945、2890、1735、1460、
1380、1315、1165、1102、1075、987、980 吸収スペクトルを第1図に示す。 (7) 溶解性: メタノール、エタノール、酢酸エチル、クロ
ロホルム、エーテル、アセトン、ベンゼン等に
可溶、水に不溶。 (8) 呈色反応: バニリン−硫酸反応、ドラーゲンドルフ反応
陽性。ニンヒドリン反応に陰性。I2気体で着
色。 (9) 薄層クロマトグラフイー(メルク社製キーゼ
ルゲルGF254使用):
物質生産菌を公知の放線菌の培養法により行なう
ことができるが、工業的には通気撹拌培養するこ
とが好適である。生産培地としては、放線菌の培
養に用いられる通常の原料が使用され、すなわち
各種の炭素源、窒素源及び有機又は無機塩類並び
に場合により消泡剤などを適宜に組合せて用いる
ことができる。一般には炭素源としてはグルコー
ス、澱粉、グリセリン、デキストリン、シユクロ
ース、動植物油等、窒素源としては大豆粉、コー
ンスチープリカー、小麦はい芽、アンモニア等を
使用することができる。その他必要に応じ、炭酸
カルシウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、リ
ン酸塩等の無機塩を添加し、また菌の発育を助け
て抗生物質6270物質の生産を促進する作用を有す
る有機又は無機塩を適宜に添加することもでき
る。 培養温度は一般に25〜35℃の範囲であるが30℃
付近が好ましい。培養時間は種々の条件により異
なるが通常は72〜148時間にて抗生物質6270物質
の産生蓄積量は最大となる。 培養物から抗生物質6270物質を単離、精製する
ためには、本物質の理化学的性質を利用し、公知
の手段、例えば不純物との溶解度の差を利用する
手段、イオン交換樹脂又は各種吸着剤に対する吸
着力の差を利用する手段、水と混和しない有機溶
媒による抽出手段、あるいは沈殿、不純物の除
去、透析、乾燥、再結晶などの手段を適宜選択し
組合わせて行うことができる。 培養物中の生産された抗生物質6270物質は、例
えば次のようにして摂取することが好ましい。培
養液に濾過助剤、例えば珪藻土、ラジオライト
700等を加えて培養液を濾過し、濾液及び菌体を
夫々適当な培養、例えば酢酸エチル、アセトン等
で抽出する。次いで、菌体抽出液と濾液抽出液を
合わせ、この抽出液から溶媒を留去すると抗生物
質6270物質の粗結晶から抗生物質6270物質を単離
するためにま、例えばクロマトグラフイーに付
す。溶出液を減圧濃縮したのち、残渣を適当な溶
媒例えば酢酸エチルに溶かし、希塩酸溶液で処理
し、溶媒層を濃縮すると抗生物質6270物質が遊離
酸として結晶する。 ナトリウム塩として得るためには前記希塩酸溶
液で処理した溶媒層を次に希炭酸ナトリウム溶液
で処理し、溶媒層を濃縮すると抗生物質6270物質
がナトリウム塩として得られる。ここに得た遊離
酸型及びナトリウム塩型の抗生物質6270物質は適
当な溶媒例えばn−ヘキサン−酢酸エチル等で再
結晶することにより純粋な結晶として得ることが
出来る。こうして得られた遊離酸型の抗生物質
6270物質の性状は次のとおりである。 (1) 無色針状結晶、酸性物質 (2) 融点 115〜118℃ (3) 元素分析値(実測値 %) C 62.72%、H 9.49%、O 27.78% (4) 比旋光度 〔α〕20 D=−11.5゜(c1.0、メタノー
ル) (5) 紫外線吸収スペクトル:メタノール溶液中で
測定すると、210nm以上に吸収極大を示さな
い。 (6) 赤外線吸収スペクトル(臭化カリウム錠で測
定)における特性吸収(cm-1): 3470、2980、2945、2890、1735、1460、
1380、1315、1165、1102、1075、987、980 吸収スペクトルを第1図に示す。 (7) 溶解性: メタノール、エタノール、酢酸エチル、クロ
ロホルム、エーテル、アセトン、ベンゼン等に
可溶、水に不溶。 (8) 呈色反応: バニリン−硫酸反応、ドラーゲンドルフ反応
陽性。ニンヒドリン反応に陰性。I2気体で着
色。 (9) 薄層クロマトグラフイー(メルク社製キーゼ
ルゲルGF254使用):
【表】
(10) 1H−NMRスペクトル:TMSを内部標準と
して、重クロロホルム中100MHzで測定した結
果を第2図に示す。δppm3.39(3H)、3.49(6H)
に3個のメトキシル基の存在を示す。 (11) 13C−NMRスペクトル:TMSを内部標準
として、重クロロホルム中25MHzで測定した結
果を第3図に示す。 (12) 構造式 (13) 抗菌スペクトルを第2表に示す。
して、重クロロホルム中100MHzで測定した結
果を第2図に示す。δppm3.39(3H)、3.49(6H)
に3個のメトキシル基の存在を示す。 (11) 13C−NMRスペクトル:TMSを内部標準
として、重クロロホルム中25MHzで測定した結
果を第3図に示す。 (12) 構造式 (13) 抗菌スペクトルを第2表に示す。
【表】
腸管内オーシスト数 オーシスト値
0.0〜0.1×106 0
0.0〜1.0×106 1
2.0〜5.0×106 10
6.0〜10.0×106 20
>11.0×106 40
(c) 腸管病変度
ひなは試験終了時(感染後8日目)に殺し
て、腸管を肉眼的に精査し、病変度を判定し
た。なお、病変度は次の如く定めた。 (−)0:盲腸は全く正常。出血斑があれば
+とする。 (+)1:盲腸の形は正常。内容物はやや流
動性を帯び色も黄色がかる。盲腸は部分的
に軽度の腫張があり、白つぽくなる。 (++)2:盲腸の形はほぼ正常。粘膜の腫
張は全面にみられる。内容に出血はなく、
粘液は黄色みをおび退色している。粘膜内
には小数の白色点壊死巣や出血斑が見られ
る。 (+++)3:盲腸の萎縮、変形は明瞭で直
腸よりもやや長い程度となる。正常な内容
物は全くなく、凝血又は灰白色チーズ状の
変性物が充満していることが多い。盲腸壁
の肥厚は顕著でもろくなり、点状出血斑が
まだのこつていることもある。病変は盲腸
基部にまで達するが盲腸にまで達しない。 (++++)4:盲腸の萎縮、変形は顕著。
一般にソーセージ状を呈し、その長さは直
腸と同じかまたは短かくなつている。病変
は直腸の1/3〜1/4位の所にまで達する。 第1〜3群はオーシスト接種2日前から所定の
濃度の抗生物質6270物質を含有する飼料で飼育
し、第4群は比較薬剤の抗生物質モネンシンを含
有する飼料で飼育し、第5群はオーシスト接種、
供試薬剤を含まない基礎飼料で飼育した感染無投
薬対照区、第6群は無感染、無投薬対照区であ
る。その結果を第3表に示す。
て、腸管を肉眼的に精査し、病変度を判定し
た。なお、病変度は次の如く定めた。 (−)0:盲腸は全く正常。出血斑があれば
+とする。 (+)1:盲腸の形は正常。内容物はやや流
動性を帯び色も黄色がかる。盲腸は部分的
に軽度の腫張があり、白つぽくなる。 (++)2:盲腸の形はほぼ正常。粘膜の腫
張は全面にみられる。内容に出血はなく、
粘液は黄色みをおび退色している。粘膜内
には小数の白色点壊死巣や出血斑が見られ
る。 (+++)3:盲腸の萎縮、変形は明瞭で直
腸よりもやや長い程度となる。正常な内容
物は全くなく、凝血又は灰白色チーズ状の
変性物が充満していることが多い。盲腸壁
の肥厚は顕著でもろくなり、点状出血斑が
まだのこつていることもある。病変は盲腸
基部にまで達するが盲腸にまで達しない。 (++++)4:盲腸の萎縮、変形は顕著。
一般にソーセージ状を呈し、その長さは直
腸と同じかまたは短かくなつている。病変
は直腸の1/3〜1/4位の所にまで達する。 第1〜3群はオーシスト接種2日前から所定の
濃度の抗生物質6270物質を含有する飼料で飼育
し、第4群は比較薬剤の抗生物質モネンシンを含
有する飼料で飼育し、第5群はオーシスト接種、
供試薬剤を含まない基礎飼料で飼育した感染無投
薬対照区、第6群は無感染、無投薬対照区であ
る。その結果を第3表に示す。
【表】
【表】
++++;過半数
この試験結果から抗生物質6270物質は抗コクシ
ジウム作用を有することがわかる。 抗生物質6270物質を抗コクシジウム剤として使
用する際には、5〜30ppmの濃度にて飼料に加
え、経口投与することが好ましい。 試験例 2 豚の飼料効率試験 供試豚:ランドレース種 基礎飼料: (a) 試験開始〜4週間 穀類(とうもろこし、小麦、大麦)60%、大
豆油粕15%、動物質性飼料(脱脂粉乳、魚粉)
15%、その他(酵素、炭酸カルシウム、リン酸
カルシウム、食塩など)10% (b) 4〜12週間 穀類(とうもろこし、マイロ、小麦)78%、
大豆油粕13%、魚粉5%、その他(炭酸カルシ
ウム、リン酸カルシウム、食塩など)4% 方法: 平均35日令の子豚15頭を平均体重がほぼ等し
くなるよう1群5頭ずつ3群にわけ、基礎飼料
に抗生物質6270物質を0、12.5、25ppmの割合
で添加し、12週間給餌し、体重及び飼料摂取量
を測定した。 また試験開始から4週間の期間中に下痢をお
こした豚の延日数を調べた。その結果を第4表
に示す。
この試験結果から抗生物質6270物質は抗コクシ
ジウム作用を有することがわかる。 抗生物質6270物質を抗コクシジウム剤として使
用する際には、5〜30ppmの濃度にて飼料に加
え、経口投与することが好ましい。 試験例 2 豚の飼料効率試験 供試豚:ランドレース種 基礎飼料: (a) 試験開始〜4週間 穀類(とうもろこし、小麦、大麦)60%、大
豆油粕15%、動物質性飼料(脱脂粉乳、魚粉)
15%、その他(酵素、炭酸カルシウム、リン酸
カルシウム、食塩など)10% (b) 4〜12週間 穀類(とうもろこし、マイロ、小麦)78%、
大豆油粕13%、魚粉5%、その他(炭酸カルシ
ウム、リン酸カルシウム、食塩など)4% 方法: 平均35日令の子豚15頭を平均体重がほぼ等し
くなるよう1群5頭ずつ3群にわけ、基礎飼料
に抗生物質6270物質を0、12.5、25ppmの割合
で添加し、12週間給餌し、体重及び飼料摂取量
を測定した。 また試験開始から4週間の期間中に下痢をお
こした豚の延日数を調べた。その結果を第4表
に示す。
【表】
* 飼料要求率=期間中の平均飼料の摂取量/
期間中の平均増体量
** 飼料要求率の改善割合(%)=(1−添加時の
飼料要求率/無添加時の飼料要求率)
×100
本抗生物質6270物質添加飼料の給与により、飼
料の要求率は5〜8%改善され、増体量は5〜11
%の向上がみとめられた。また豚の下痢の発生が
著しく減少することも観察された。 試験例 3 反すう動物の飼料効率試験 試験牛:ホルスタイン種 濃厚飼料:穀類(とうもろこし、マイロ、大麦)
71.5%、そうこう類(コーングルテンフイー
ド、ふすま、米ぬか油かす)11.5%、植物性油
かす類(大豆油かす、あまに油かす)5.5%、
その他(アルフアルフアミール、糖蜜、リン酸
カルシウム、食塩)11.5% 方法: 8ケ月令の種去勢雄牛15頭を平均体重がほぼ
等しくなるよう1群5頭ずつ3群に分け、基礎
濃厚飼料に抗生物質6270物質を0、7.5、
15ppmの割合で添加し240日間給与した。なお、
粗飼料として稲わらを1頭あたり1Kg給餌し
た。その結果を第5表に示す。
期間中の平均増体量
** 飼料要求率の改善割合(%)=(1−添加時の
飼料要求率/無添加時の飼料要求率)
×100
本抗生物質6270物質添加飼料の給与により、飼
料の要求率は5〜8%改善され、増体量は5〜11
%の向上がみとめられた。また豚の下痢の発生が
著しく減少することも観察された。 試験例 3 反すう動物の飼料効率試験 試験牛:ホルスタイン種 濃厚飼料:穀類(とうもろこし、マイロ、大麦)
71.5%、そうこう類(コーングルテンフイー
ド、ふすま、米ぬか油かす)11.5%、植物性油
かす類(大豆油かす、あまに油かす)5.5%、
その他(アルフアルフアミール、糖蜜、リン酸
カルシウム、食塩)11.5% 方法: 8ケ月令の種去勢雄牛15頭を平均体重がほぼ
等しくなるよう1群5頭ずつ3群に分け、基礎
濃厚飼料に抗生物質6270物質を0、7.5、
15ppmの割合で添加し240日間給与した。なお、
粗飼料として稲わらを1頭あたり1Kg給餌し
た。その結果を第5表に示す。
【表】
* 濃厚飼料要求率=期間中の平均濃厚飼
料の摂取量/期間中の平均増体量
** 濃厚飼料要求率の改善割合(%)=(1−
添加時の濃厚飼料要求率/無添加時
の濃厚飼料要求率)×100
本抗生物質6270物質添加飼料の給与により、濃
厚飼料の要求率は7〜10%改善され、増体量は9
〜11%の向上がみとめられた。 以上の結果より、抗生物質6270物質を豚や牛等
の家畜の飼料効率改善剤として使用する際には、
家畜の種類、年令にもよるが5〜30ppmの濃度に
て飼料に加え、経口投与することが好ましい。
料の摂取量/期間中の平均増体量
** 濃厚飼料要求率の改善割合(%)=(1−
添加時の濃厚飼料要求率/無添加時
の濃厚飼料要求率)×100
本抗生物質6270物質添加飼料の給与により、濃
厚飼料の要求率は7〜10%改善され、増体量は9
〜11%の向上がみとめられた。 以上の結果より、抗生物質6270物質を豚や牛等
の家畜の飼料効率改善剤として使用する際には、
家畜の種類、年令にもよるが5〜30ppmの濃度に
て飼料に加え、経口投与することが好ましい。
第1図は臭化カリウム錠で測定した抗生物質
6270物質の赤外線吸収スペクトル、第2図は
TMSを内部標準とし、重クロロホルム中で測定
した抗生物質6270物質の 1H−NMRスペクトル、
第3図はTMSを内部標準とし、重クロロホルム
中で測定した抗生物質6270物質の 13C−NMRス
ペクトルを示す。
6270物質の赤外線吸収スペクトル、第2図は
TMSを内部標準とし、重クロロホルム中で測定
した抗生物質6270物質の 1H−NMRスペクトル、
第3図はTMSを内部標準とし、重クロロホルム
中で測定した抗生物質6270物質の 13C−NMRス
ペクトルを示す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1 遊離酸として下記の性質を有することを特徴
とする新抗生物質6270物質又はその塩。 (1) 無色針状結晶、酸性物質。 (2) 融点 115〜118℃ (3) 元素分析値(実測値 %) C 62.72%、H 9.49%、O 27.78% (4) 比旋光度 〔α〕20 D=−11.5゜(c1.0、メタノー
ル) (5) 紫外線吸収スペクトル:メタノール溶液中で
測定すると、210nm以上に吸収極大を示さな
い。 (6) 赤外線吸収スペクトル(臭化カリウム錠で測
定)における特性吸収(cm-1): 3470、2980、2945、2890、1735、1460、
1380、1315、1165、1102、1075、987、980 (7) 溶解性: メタノール、エタノール、酢酸エチル、クロ
ロホルム、エーテル、アセトン、ベンゼン等に
可溶、水に不溶。 (8) 呈色反応: バニリン−硫酸反応、ドラーゲンドルフ反応
陽性。ニンヒドリン反応に陰性。I3気体で着
色。 (9) 薄層クロマトグラフイー(メルク社製キーゼ
ルゲルGF254使用): 【表】 (10) 1H−NMRスペクトル:TMSを内部標準と
して重クロロホルム中100MHzで測定した結果、
δppm3.39(3H)、3.49(6H)に3個のメトキシ
ル基の存在がみとめられる。 (11) 構造式 2 抗生物質6270物質を生産する能力を有するノ
カルデイオプシス属菌を培養し、その培養物から
抗生物質6270物質を採取することを特徴とする抗
生物質6270物質又はその塩の製造法。 3 生産菌が微工研条寄第717号であることを特
徴とする特許請求の範囲第2項記載の製造法。 4 抗生物質6270物質又はその塩を有効成分とす
る抗コクシジウム剤。 5 抗生物質6270物質又はその塩を有効成分とす
る飼料効率改善剤。
Priority Applications (14)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP59072912A JPS60217896A (ja) | 1984-04-13 | 1984-04-13 | 新抗生物質6270物質及びその製造法 |
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