JPH01502591A

JPH01502591A - ハゲの育毛法および育毛組成物

Info

Publication number: JPH01502591A
Application number: JP63501210A
Authority: JP
Inventors: ソロモン，ヘンリー; カトシンプーラス，ニコラス; クレイン，ジョナサン　ディー; カマレイ，アーマド　レザ; ミルスキー，ヤン; ビショップ，ミカエル　エイ; シン，ロバート
Original assignee: トラスティーズオブボストンユニバーシティ; アンジオ―メディカル　コーポレイション
Priority date: 1986-12-31
Filing date: 1987-12-23
Publication date: 1989-09-07
Also published as: IE873549L; NO883848L; DK482588A; DK482588D0; HUT48121A; FI883989A0; IL84864A0; NO883848D0; WO1988004931A1; KR890700029A; FI883989A; EP0296205A1; AU1100488A; EP0296205A4

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

発明の名称ハゲの育毛法および育毛組成物に　する相互　照本出願は１９８６年１２月３１日に出願され、現在放棄されているアメリカ特許Ｎｏ、９４８，０１７号“ハゲの育毛法及び育毛組成物”の一部継続出願である。ｌ見立１里本発明は哺乳動物の髪の成長を促進する方法と組成物に関する。とくに哺乳動物の大綱から単離した脂質を含む組成物は脱毛を防ぎ、ハゲ頭には新しい髪の成長を促す。見豆互！１禿頭症というのは哺乳動物では雌雄を問わない、多くの場合、ハゲになると脱毛を防止しようとしたり頭をカモフラーシュするのが常であった。特許文献には育毛作用を有する数多くの組成物例とクレームが含まれている。このうち１つはクリームの形で応用され、アメリカ特許４，５２０，０１２号（アルフオンシーに対して１９８５年５月２８日発行）に記載されているようにベルガモツトオイル、アルコール、オイル、イオウとともに牛骨髄のような骨髄を含んでいる。この特許ではこの組成物がおそらくベルガモツトオイルの作用もあって毛髪に栄養を供給すべく頭皮での血流を高めることを示している。しかしベルガモツトオイルは、皮膚刺激性であることが知られているほかアルフォンシーは組成物に５％以上のベルガモツトオイルがあると脱毛の原因になるとしている（アルフォンシー、第２欄第６〜１２行）。他の育毛組成物としてはバンフィに対して１９８５年３月５日発行されたアメリカ特許第４，５０３，０４７号がある。この組成物は西洋ワサビの抽出物と毛根の形成能を高めると考えられているフリル・イソチオシアネートを混ぜたものである。さらにこの組成物にはチオシアン酸イオン（ｒｈｏｄａｎｉｄｅｉｏｎ）、鋼イオン２いおう含有アミノ酸も含まれている。育毛作用を主張した薬品としての組成物はチドゼイに対して１９７９年２月１３日発行されたアメリカ特許第４，１３９，６１９号がある。これは−穀温ミノキシジルとしてアップジョンカンパニー（ミシガン州、カラマズー）によって上布されている。この標品は、末端の毛髪の成長を促す、ミノキシジルは、もともと降圧作用をもつ薬剤であり、これを１年以上経口投与された全患者の頭髪成長が著しいことかられかったものである。デ・フリース、Ｒ，Ｌ、アーカイフオブダーマトロジー（Ａｒｃｈ、Ｄｅｒｍａｔｏｌ、）　１２１　：　１９７−２０２（１９８７）。しかし、新しく生えてきた毛髪は４ケ月以内に抜は落ちた（同、１９７頁）。ミノキシジルを６４人の男性患者のハゲの部分に応用したところ、患者の脱毛はハミルトンのタイプ３〜タイプ６の範囲に入った（同１９）頁）。脱毛のパターンは、ジェームズハミルトンがア二二アルオブニューヨークアカデミーオブサイエンス（Ａｎｎａｌｓｏｆ　Ｎ、Ｙ、　Ａｃａｄ、　ｏｆ　Ｓｃｉ、）　５３ニア０８−６２８（１９５１）に示した分類法によるのが通常である。タイプ１〜ｍ明瞭なハゲ部は認めない、タイプ■〜Ｖわずかにハゲでいる。■ 〜■馬蹄形にハゲでいる。タイプ■と■は最も進行したハゲでミノキシジルの研究では含まれていないハゲである。研究した６４人の患者のうち、顕著な育毛作用を示したのはわずか３人であった（１９９ペ一ジ上部に記載、デフリース、）、この研究では、進行したハゲ即ちハゲの程度や期間の最も長いものには効果かうすいことを意味している。育毛に関するこのほかの研究ではビタミンＡ即ち全トランスーレチノイックアシッド（トレチノイン）の単独または０．５％ミノキシジルとの併用による育毛作用への効果がなされている。バラアノら、ジ　−　ルオブジア　！カンアカーミーオブダーマ　ロジー（Ｊ、　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｖｅｒ。Ａｃａｄ、　ｏｆ　Ｄｅｒ＋ｓ、）、１５　：　８８０−８９３（１９８６）、ビタミンＡ投与群でははえた毛のほとんどがうぶ毛様の毛であった。禿頭症の頭皮の軟毛の増殖は５％ミノキシジルで認められた（上記文献８８２頁）。発明者の初期の研究によるとビタミンＡ、Ｄ、Ｅを添加しなくとも発明の育毛組成物を使うと脱毛を防止するまたは新しい毛髪が生えるという効果は維持される。さらにビタンミＡ、Ｄ、ＥはＣＡＭアッセイで血管形成新しい毛髪の成長に若干マイナスの効果があられれることを示している。さらに発明の組成物からヒアルロン酸ナトリウムを除くとその組成物の効力が著しく低下することから育毛作用は入網抽出物とヒアルロン酸ナトリウムの協同作用によっていると考えられる。前述の分析から発明の組成物の活性は唯一の理論によると考えられるがこれはこの発明に限定されるものではない。従って、毛髪の末端に新しい毛髪を生じさせる刺激性のない組成物は、これまでに知られていなかったものである。単離した大綱の脂質とヒアルロン酸ナトリウムなどとを併用すると新しい毛髪が成長するというのは全く予期せぬ現象であった。 “毛髪新生”という用語はハゲだ部分に遺伝的にあった毛嚢に新しく毛髪を生じさせることをいう、またうぶ毛やこまかい色のない毛でなく、太く色のある毛を生えさせることもさす。このように本発明はハゲの部分に新しい毛髪を生えさせることができ、脱毛を防止できる組成物とその使用法に関する。ｍ乞

【約− 入網抽出物とヒアルロン酸ナトリウムを含む組成物の主効力は新しい毛髪を生じさせることだが同時に脱毛症の進行を防止することもできる。これにはさらにビタミンＡ、Ｄ、Ｅ、シリコーン、乳化剤、抗酸化剤、皮膚顔料（Ｓｋｉｎ　ｆｉｌｌｅｒｓ）、保湿剤、保存剤が含まれている。組成物はローション、軟こう、ゲル、スティック、クリームなどの形で用いられるがローションが望ましい、ハゲもしくはハゲの領域にこの組成物を適用すると、脱毛が止まり、新しい毛髪が生えてくる。顔や手など毛の生えていないところに適用しても毛は生えない。凰立叉星星１匪第１図は、ブタ入網ヘキサン抽出物の分画のフローチャートである。第２図は、下記実施例！のプロトコールに従ってハミルトンの分類で■〜■の男性にローション２−３６Ａで定めた発明の組成物を６週間適用したときの頭頂部の写真である。第３図は、上記患者にローション２−３６Ａで定めた発明の組成物をさらに２ケ月半適用したときの同一部分の写真である。第４図は、ローション２−３６Ａを５ケ月にわたって適用した後の写真で、第２図、第３図と比較するためのものである。１１し列ｉ鳳１１吸発明の組成物の主要成分は、好ましくは哺乳動物の大綱から単離した脂質である。大綱成分を化粧品の素材と混ぜ。軟こう、ローション、ペースト、ゲル、エア、ゾール、スティックなどの形態にして用いる。最も好ましいのはローションで入網抽出物を、乳化剤、抗酸化剤、保湿剤、キレート剤、皮膚顔料、シリコーン、保存剤と混ぜてつくる。遺伝学的に毛が生える領域に応用すると新しい毛髪が生え、脱毛の進行を防止する。大綱の抽出は、以下の文献に述べである。ゴールドスミスらジャーナルオブアメリカンメディカルアソシエーション（Ｊ、Ａｍｅｒ、Ｍｅｄ、Ａｓ５ｏｃ、）２５２　：　２０３４−３６（１９８４）−大綱のソースとしてはブタ、ウシ、ヒツジ、ネコなどである。大綱成分はキャットシンブーラスらが１９８５年１２月４日に出願したアメリカ特許出願Ｎｏ、８０５，２０６号に“哺乳動物の外傷の治療効果を高める方法” として記載されている。この大綱成分はまた、心筋梗塞、アンギナ、冠動脈移植。血管形成術などにも用いられることが、キャトシンプーラスらの１９８５年１２月２０日出願のアメリカ特許出願Ｎｏ、８１１，３７５号“大綱脂質によるアンギナ、心筋梗塞の治療法”として記載されている。さらにレインらの１９８５年１２月２０日出願のアメリカ特許出願Ｎｏ、８１１，８９４号は、大綱成分の骨治療について“骨障害の治療法と組成物”としても開示されている６（１ａ）　の　ｂｒｉｔｔｌｅ　ｒｉｎｄｉｎ　とヘキサン抽による日　抽出物の調製育毛作用をもつ組成物に用いる入網標品の調製法としては脆化破砕法（低温技術としてしられる）が好ましく得られた大綱パウダーの直接へキサン抽出とペアーで行なわれる。ブタの大綱が望ましいが、ウシ、ネコその他の哺乳動物の大綱でもよい。ブタの大綱を小片にきざむ、大綱の凍結は、カマレイらの１９８５年１２月２０日出願のアメリカ特許出願Ｎｏ、８１１，５０７号の“動植物由来の組織の脆化破砕と抽出”に従った。大綱をその経験的な臨界の″脆化温度”以下に下げると、砕けにくく粘性でかたい物質から極めて砕けやすくもろい物質に変化する。凍結は以下の種々の方法で行なわれる。１、空気凍結（ａ）突ｚ　（ｂｌａｓｔ）凍結（ｂ）流動床凍結２、プレート凍結３、液体浸種凍結４、低温凍結（凍結物は状態の変化がおこる）（ａ）液体窒素（ＬＮａ）、　− １９６℃（７７Ｋ）（ｂ）昇華性二酸化炭素（ドライアイス）、−７９℃（１９４Ｋ）（Ｃ）　Ｃｉ、Ｆ、（寒剤−１２）　−３０℃（２４３Ｋ）上記中液体窒素による凍結が最も望ましい。（１ｂ）孟棗藍免ゑ里組織の小片を得るには小スケールでは、　２２．００Ｏｒｐｍ希望の時間たとえば数分でホモゾナイズする。大スケールでは摩擦と衝撃破砕を伴うロールミルを用いて行なう。いずれの場合も破砕中組織をその脆化温度以下に保つことが大切である。脆化温度以下での破砕は、極めて小さな粒子をつくるために必要な方法である。このため、必要に応じ破砕装置に液体窒素を添加できるように、発生する変素ガスの排気口がついている装置もある。この工程により極めて細かく、流動性の低温粉状組織（組織パウダー）が得られる。このパウダーには細がい密着した粒子とともにいくかの粒状の塊りも含まれている。表面積が著しく大きくなる（即ち容積と表面積の比）のに伴って密度も減少する１例えば大綱パウダーの密度は０．４４（±５％）ｇ／ｒｎΩでありこれは大綱から抽出された脂質の密度のほぼ半分である。（ＩＣ）　パウダーの低゛篩　け得られた低温破砕組織パウダーは極めて細かいが大きさは“均一”でない、そのため、大きさの均一性が次のステップに必要なときは１組織パウダーを脆化温度以下でふるい分けする。このために表１に示すような標準篩を用いる。大綱パウダーを均一な画分にする最もよい篩は１５０〜εｏ。 μｌ（μ■＝マイクロメータ）である。均一な組織パウダーは、さらに凍結温度（−１８℃＝Ｏ’Ｆ）で加工したり、移送したり、あるいは保存したりする。しかし、この温度では若干の化学変化〔例えば不飽和脂肪酸の酸化（とくに低温破砕で表面積が大きくなっているため）、タンパクの不溶化や不安定化５色素、ビタミンおよび生物分子の分解〕がゆっくりおこる可能性がある。（以下余白）表　１標準篩の公称寸法１１．２　ｍｍ　３／４ｉｎ　０．４３ｇ　２，４５９．５ｍ■　３／８ｉｎ　Ｏ，３７５２，２７８，０ｍ論　３．１４ｉｎ　Ｏ，３１２２，０７６，７ｍｍ　０．２６５ｉｎ　Ｏ，２６５１，８７５，６ｍｍ　Ｎｏ、３１／２　０．２３３　１，６８４．７５ｍｍ　Ｎｏ、４　０．ＨＩ３　１．５４４．００ｍｍ　Ｎｏ、５　０．１５７　１．３７３．３５ｍｍ　Ｎｏ、６　０．１３２　１．２３２．８０ｍｍ　Ｎｏ、７　０．１１１　１．１０２．３８ｍｍ　Ｎｏ、８　０．０９３７　１．００２．００ｍｍ　Ｎｏ、１０　０．０７８７　０．９００１．７０ｍｍ　Ｎｏ、１２　０．０６６１　０．８１０１．４０ｍｍ　Ｎｏ、１４　０．０５５５　０．７２５１．１８ｍｍ　Ｎｏ、１６　Ｇ、０４６９　０．６５０１．００ｍｍ　Ｎｏ、１８　０．０３９４　０．５８０７］Ｏｕｍ　〜ｏ、２５　０．０２７８　０．４５０６００　ｕｍ　Ｎｏ、３０　０．０２３４　０．３９０５００　ｕｓ　Ｎｏ、３５　０．０１９７　０．３４０４２５　ｕｓ　Ｎｏ、４０　０．０１６５　０．２９０３５５　ｕｉ　Ｎｏ、４５　０．０１３９　０．２４７３００　ｕｓ　Ｎｏ、５０　０．０１１７　０．２１５２５０　ｕｍ　Ｎｏ、６０　０．００９８　０．１８０２１２　ｕｓ　Ｎｏ、７０　０．００８３　０．１５２１８０　ｕｓ　Ｎｏ、８０　０°、００７０　０．１３１１５０　ｕｍ　Ｎｏ、１００　０．００５９　０．１１０１２５　ｕ＋＋＋　Ｎｏ、１２０　０．００４９　０．０９１１０６　ｕｓ　Ｎｏ、］４０　０．００４１　０．０７６９０　ｕｍ　Ｎｏ、１７０　０．００３５　０．０６４７５　ｕｓ　Ｎｏ、２００　０．００２９　０．０５３６３　ｕｎ　Ｎｏ、２３０　０．００２５　０．０４４５３　ｕｓ　Ｎｏ、２７０　０．００２１　０．０３７ａ、これらの標準の定義は国際標準機構、ジェノバ、スイスにより推奨のもの。ｂ、この篩は標準ではないが一般的に用いられているので加えた。ｃ、　１０００μ！＝１腸閣。拳、公的分析化学者協会（ＡＯＡＣ）第１４版、アーリングトン。バージニアより抜粋。凍結温度を下げると上記の反応速度を減じることになろう。従って、保存期間が長い場合は、減圧下又は不活性ガス雰囲気下、暗所（光反応を避けるため）で− ４０℃で保存するのがよい１種々の組織パウダーを上記の条件で２ケ月保存した場合何ら物理的変化（テクスチャー、色、においなど）は認められなかった。均一な低温破砕産物を用いるために組織パウダーをとかす、液体でない組織を凍結するときよりゆっくりとかすため、かなりの温度差が必要である（氷と水の熱的性質の違いによる）。従って組織パウダーは化学的または物理的手段（微生物的、酵素的には少ない）によるダメージをうけやすい、このことから融解工程は注意深く行なわねばならない。（１ｄ）大シバウダーのヘキサンブタ大綱均−パウダー５００ｇを室温まであたため、グラスブレングー中で１０回ヘキサン抽出を行った（２２，０００ｒｐｍ。３０秒）。得られたピンク色の溶液を２　、０００ｒｐｉ２０分遠心分離した。遠心分離を室温で行なうと、ピンク色の沈殿物のみがベレットとして得られる。しかし、冷却下（例えば５℃）で行なうと、ヘキサンの溶解能が低下するので脂質の白い層がタンパク性のピンク色のベレットの上に：Ｉｊ、Ｒシてくる。しかし、ヘキサンを室温好ましくは３７℃にすると白い層はまた液化する。ヘキサン抽出物を真空下３７℃でロータリーエバポレータで濃縮した。ブタ大綱パウダーの直接ヘキサン抽出の収量は３６１．５ｇ（７２，３％）であった。（ｌｅ）、！パウダーのクロロホルム／メタノール抽出ブタ大綱パウター５００ｇを室温まであたため、グラスブレングー中でクロロホルムｌメタノール（２：　ｌ　、　Ｖ／Ｖ）で１０回抽出した（２２．ＯＯＯｒｐｍ、　３０秒）、溶媒抽出物を遠心分離しく２，００Ｏｒｐｍ、２０分）、ロータリーエバポレーターで（減圧下、３７℃）乾固するまで即ち溶媒がなくなるか溶媒臭がしなくなるまで溶媒をとばした。白色のクロロホルムｌメタノール画分（ＣＭ　Ｆ　ｒ　）３８８ｇ（７７，６％）が得られた。ＣＭＦｒをさらにヘキサン／エタノール分画に供した。（ｉｆ）Ｊ　パウダーの　臨　酸ガス　８均−なブタ入網パウター１９０５．４ｇを４回の回分式で超臨界炭酸ガス抽出した。溶媒比は３００（１ポンド／分）で行った。各抽出からトータル１２の抽出画分を集めた。抽出器は３７℃、３，５００ｐｓｉｇで、第１のセパレータは４０’Ｃ，１，５００ｐｓｉＥ、第２のセパレータは２９〜３０℃、約１　、０００ｐｓｉｇで行ない抽出物を集めた。第２のセパレータの溶媒を１，５００ｐｓｉｇでノックアウトベッセルに導き循環した。抽出器中の残渣はフィード量の８−１７％であった。超臨界炭酸ガス抽出物はファード量の８２−９２％でこれはクロロホルム／メタノール抽出（伝統的なホモゲナイズ方式）より高いことは興味深い、このことは抽出前に冷却破砕をすることが効果大であることを示唆している。（１ｇ）大綱パウダーの温和な熱抽出大組や他の脂肪組織から脂質を熱抽出するためには（１）脂質が溶融又は液化すること、（２）組織から溶は出した脂質を分離できること、（３）得られた油又は脂質を組織とび別できることが必要である。上記ステップすべてを“一段階” にまとめて次のように行なう。均一化したブタ大綱パウダーを２つのステンレス製篩（１５０μ膠）にのせる。この篩を３８μｍｇ！（＄４００）上にとりつけ、受皿もとりつける。これを７０℃のオーブンに入れる。大綱パウダーは徐々に融解し、脂質はだんだんと溶けてくるがタンパク性の物質は変性していく。この結果大綱パウダーの粉状の構造は縮んで崩壊していく、シかし溶けた脂質は１５０μ功の篩を通過し３８μ菖の篩上に落ちていき、ここで小さな粒子と炉別されて最終的に透明なオイルが受皿にたまる。加熱抽出時間は３時間である。収量は７０９．５ｇ（７３，６％）であった。この回収率は一番上の篩に残った油状物質は含まれていないことに注目すべきである。（１ｈ）育毛組　物に用いるブタ、網、のブタ大綱の２サンプルを脆化破砕次いで上記（１ｄ）に示したヘキサン抽出を行った。マックルーアら、ユ旦−ドー（Ｌｉｐｉｄｓ）　（１９８７年５月）に示されたネコ大綱抽出物の特徴づけ法をこのブタ大組脂質にも改変して適用した。２種のブタヘキサン抽出物（ＨｘＦｒ　ＩおよびＨｘＦｒ　ｍとして示す）を第１図に示した方法で分画した。それは以下の通りである。 ′　各ヘキサン標品（ＨｘＦｒ　Ｉ　、　ＨｘＦｒｎ［）　１０ｇをヘキサンおよび９３％エタノールで分配し、各層をそれぞれ新しい反対の層で洗浄した。洗液を互いに平衡化し第１回に示すように同様の層を合せた。ヘキサン層を蒸発させて得られる中性脂質を次にユニシルカラムのようなシリカゲルカラムで分画を行ない、ベンゼンを用いて、ベンゼン／酢酸エチル／酢酸で溶出された微量の中性脂質から大部分を占めるトリグリセリドを溶出により除去した。トリグリセリド中の脂肪酸はアルカリメタツリシスによって得たメチルエステルとしてガスクロマトグラフィ（ＧＣ）、マススペクトロメトリー（ＭＳ）で分析した。エタノール層から得られる極性の脂質を、フオルヒら、乏ヤーナルオブ　バイオケミスト１−（Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、）２２６４９７−５０９（１９５７）に従って分配した。またこの方法はキャットシンプニラスらにより１９８５年１２月２０日に出願されたアメリカ特許出願Ｎｏ、８１１，５０５号、１大網由来の脂質と化粧品への応用”にも述べられており、そこでは両分をクロロホルムｌメタノール（２：ｌ、２０倍量、ｖ／ｖ）と０．２倍量の水を加え充分混合後分離している。クロロホルム、メタノール、水を上層、下層に分けるため用いた。上層の脂質をＣ−１８逆層カートリッジに吸着させ。メタノールで溶出した。ｍ性の脂質（たとえばガングリオシド）や中性の脂質（たとえばコンプレックス糖脂質）はＤＥＡＥ−セファデクスカラムで分離した。フォルヒ下層の脂質はユニジルクロマトグラフィカラムにかけ次の３つの画分を得た。（１）　クロロホルムで溶出される微量の中性脂質（２）　アセトンとメタノールで溶出される糖脂質（３）　メタノールで溶出されるリン脂質名画分を乾燥し、重量を測定して薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）で分析した。最初のヘキサン抽出物（ＨｘＦｒＩ）の９７％がベンゼンで溶出されたトリグリセリド画分に相当した。トリグリセリド画分の脂肪酸をＧＣおよびＧＣ−ＭＳで分析したところ主要成分の組成は次の通りであっり。１６：ｌ（２％）ユ６：Ｏ（２４％）１８：２　（１０％）１８：ｌ　（３０％）１８：ｏ　（１６％）残りの１０％は１４：０とトータルの１％未満の脂肪酸であった・ベンゼンおよび　エチルの微量の中性脂質は調製用薄層クロマトグラフィ　（Ｔ　Ｌ　Ｃ）でさらに１３成分に分画した。微量の中性脂質の主成分は、遊離脂肪酸、コレステロール、ジグリセリドで存在比はＴＬＣチャーリングで評価すると、それぞれ１　：　１　：　０．５であった、その他の成分はダイレクトプローブマススペクトロメトリー及び脂肪酸分析により種々のジグリセリドが微量室まれていることがわかった。エタノール層に分配されたモノグリセリドの殆どはクロロホルム画分にも認められ、そして、これはユニシルカラムから溶出された。エタノール　日　、フォルヒ　のユニシル　およびクロロホルム　の全ＨｘＦｒｌの重量で約０．４４％のクロロホルム画分が得られ。ＴＬＣで分析した。この画分は上記で述べたヘキサン層でみられたのと同じ中性脂質が含まれていることがわかった。コレステロール、遊離脂肪酸はこの両分の約５１％、モノグリセリドが１２％、ジグリセリドは４％、トリグリセリドは２６％であった。ヱｉΣｌ亀立アセトン画分中の中性糖脂質をＴＬＣ分析したところＨｘＦｒＩ抽出物の０．００１％以下であった。糖脂質の約５０％はモノグリコジルセラミド、３０％がジグリコシルセラミド、２０％がトリグリコジルセラミドであった。この両分中の糖脂質は全画分の重量のわずか０．０５％であった。この両分の主要成分である非極性成分がいくつかみつかった。 Σ久２二止亀立Ｈｙ：Ｆｒｌのリン脂質含量は約０．０１％であつた。この両分の主要成分は２つで、フォスファチジルコリン（約８０％）とスフィンゴミエリン（約２０％）であった。フォルヒ上　のＤＥＡＥ画　、中性面ＨｘＦｒｌ抽出物の中性画分は全ＨｘＦｒｌの０．００１％以下でありグロボシドと３つの他のポリグリコジルセラミドを含んでいる。ＴＬＣの移動度はアシアロ−ＧＭｌ、フォルスマン糖脂質、５ＳＥＡ−１抗原と似ている。この中性画分の糖脂質は重量で約１６％である。このパーセンテージの大部分はリン脂質によっており、これはガングリオシドやポリグリコジルセラミックとともに上層に分配される。皇ｍ北ガングリオシドはＴＬＣによる分析の結果この両分中の全）（ｘＦｒｌ抽出物の０．００１％以下であった。この両分は４つの主なガングリオシドを含んでいる。約３３％がＧＭ３．３３％がＧＤＩａ、２５％がＧＭＩ、８％がＧＤ３であった。上」二り工１」礪１滅。第２のヘキサン抽出試料（ＨｘＦｒＩＯ）の組成は最初の試料とほぼ同様であったが揮発成分おそらくは水分に違いがみられた。トリグリセリド画分（５％）中の１８：２Ｆｉ肪酸量は減少し、ＴＬＣ分析により両分重量から測定した結果極性のある脂質（たとえばリン脂質、糖脂質）の量は、はぼ２倍であった。ＨｘＦｒｌ［ｌがガングリオシド量は０．００１％であった。ＨｘＦｒｌ、ＨｘＦｒｍの重量、％を下記表２に示す。表　２Ｈｘ　Ｆ　ｒ　ＩおよびＨｘＦｒｍの分画中に認められた成分の重量とパーセント（同一画分について第１図参照）Ｈｘ　Ｆ　ｒ　９．９９　１００　１０．３４　１００トリグリセリド　９．７８　９７．８　９．２５　８９．４フオルヒ上層　０．００４　０．０４　０．００７　０．０７複雑なＧＳＬｓ　Ｏ，００４０，０４複雑な中性ＧＳＬｓ　Ｏ，００２０，０２ガングリオシド　０．００２　０．０２フオルヒ下層　０．０６０　０．６０　０．０５３　０．５１微量中性脂質　０．０４４　０．４４　０．０３９　０．３８Ｇ　Ｓ　Ｌ　ｓ　Ｏ，００７０，０７０，００２０，０２リン脂質　０．００４　０．０４　０．００５　０．０５−０．００１グラム以下（２ａ）ブチ　びウシＣＭＦｒの署製ブタ及びウシのクロロホルムメタノール画分（ＣＭＦｒ）調製のために、新鮮なおよび／または凍結大組を地方のと殺場から入手した。大網組織を、最少限の水で洗い、重量を測定し１〜２ｇの小片にする。この小片を集め５００ｇずつ分ける。余りは一２５℃で凍結しておく、各５００ｇをグラスブレンダーでリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中２２，０００ｒｐｔ、２分間ホモゲナイズした。得られたホモジェネートを遠心分離（４０００ｒｐｌ！、　１０分、５℃）し、脂質ケーキを集めた（大綱重量の９８％）溶媒抽出（クロロホルム：メタノール＝２：１．１０回）をグラスブレンダー（２２，ＯＯＯｒｐｍ、　３０秒）中で行った。脂質を含んだ溶媒を遠心分離（２，０００ｒｐｍ、　２０分、５℃）した組織残渣の殆どはペレットとして沈澱したが、微細な粒子はまだ浮遊していた。そのため、微細粒子が最小限になるように溶媒を集めた６次に溶媒を減圧下３７ ℃のローダリー二バボレーシ＝ンによりとばした。これは溶媒がないか溶媒臭がなくなるまで行った。白色のＣＭ　Ｆ　ｒが大綱重量の７０±２％の収率で得られた。（２ｂ）ブタ　びウシＨｘＣＭＦｒの調製クロロホルム／メタノール画分を３７ ℃にあたためた。９５％エタノール（無水エタノールから調製）で４回、ヘキサンを６回ＣＭＦｒに加え２０分間混合する。混合物を分液ロートに移すと約２０分間でエタノール層とヘキサン層が分れる。ヘキサン層とエタノール層をそれぞれ集めた。エタノール層はヘキサンで６回洗浄した。またヘキサン層は９５％エタノールで４回洗浄した０分離を促進するためにさらにヘキサンが必要ならば加えた。集めたエタノール層、ヘキサン層は一層からなっている。しかし低温におくと（たとえば４℃）各層は新たにエタノール層とヘキサン層に分れるので、再び別々にあつめた。全ヘキサン層をロータリーエバポレータにかけると（減圧下、３７℃）半透明なＣＭＦｒのヘキサン抽出物（Ｈｘ　ＣＭＦｒ）が得られる。この層の回収率はＣＭ　Ｆ　ｒの約８２±３％であった。この他の溶媒も大綱の抽出に用いることができる０本発明は上記の溶媒抽出に限定するものではない。（２ｃ）　臨　ガス　出による　網　の我々は大綱画分を以下に示す超臨界ガス抽出を行った。この方法はカマレイらによる１９８５年１０月３１日に出願されたアメリカ特許８願Ｎｏ、７９３，６２２号の“動物由来物質の超臨界液体抽出 ”に示されている。この方法では超臨界炭酸ガスのような超臨界液体が大綱の抽出に用いられる。超臨界液体は臨界圧力（Ｐｃ）及び臨界温度（Ｔｃ）以上の温度で溶解力が増す。ガングリオシドのような極性物質は残渣に残りトリグリセリドのようなより極性のない脂質が抽出される０例えば温度３８−３９℃、抽出器圧力的３５００Ｐｓｉｇの条件で使用される。このように以上の条件では毒性の物質を用いずに抽出でき高値で時間のかかる抽出をしなくてすむ。以下に記載の例ではブタの均一化した大綱、ブタ大綱ＣＭＦｒの超臨界ガス抽畠について述べる。五−−１工程進行ユニット（ＰＤＵ）を用いる。即ち、ＰＤＵは抽出器と３つの分離器からなり、予め設定された温度のオーブン中にとりつけられている。この場合の超臨界溶媒である炭酸ガスをポンプで抽出器に入れつづいて分離器と“ノックアウト”ベッセルに流す。圧はバックプレッシャーレギュレーターにより維持する。抽出が終ればガスたとえばＣＯ２を常圧で排気する（２ｄ）ブタ、　の　臨　ガス　” 入網試料を約４０℃で窒素ガスをふきつけながらとかし抽出。器にみれた。ベッセルに低圧の炭酸ガスを導入し温度と圧力を表２〜３に記したように設定した。炭酸ガスを０．３ポンド／分の速度で試料重量の約２００倍になるまで系に導入した。圧を抜きベッセルと抽出器の試料をとり出し重量を測って分析した。この実験では用いる炭酸ガスの臨界点付近及びそれ以上では一定の密度では温度が上がると溶解力が増し、また、一定の温度では密度が上ると溶解力が増すことがわかった。例えば、　３，５００Ｐｓｉｇで抽出器でとけている試料の一部を最初の分離器で１５００Ｐｓｉｇで沈澱させる。さらに圧力ｌ密度を下げるとさらに沈澱してくる両分が出てくる。常圧では超臨界ガスは可溶性物質を含んでいない。抽出器から得られる残渣は炭酸ガス中にはとけないことがわかった、ガングリオシドのような物質の極性部分が画分中に残っていると期待されるが抽出画分には中性の非極性成分が多く含まれていると考えられる。不溶性の残渣にはガングリオシドのような極性物質を含んでいるが、トリグリセリドのような非極性物質は抽出物中に認められた。抽出器１個１分離器と受器各３個、ノックアウトベッセル１個を用いたがこの技術の経験のある人はこれらの各々に種々の工夫や別法があることを知っているだろう。（以下余白）入−一一一１供試試料重量　１０６．５グラム超臨界溶媒　ＣＯ。溶媒循１ｊ　４６．９ポンド溶媒フイード率　２００／１溶媒流速　０．３ボンド／分温度（”Ｃ）　３ｇ−３９４０３７３３−圧力（Ｐｓｉｇ）　３５００　１５００　１３００　１１００　５密度　０．８７　０．６９　０，６２　０．２６曳 −１−１御！収量（ｇ）　８１．６回収率（％）　７６、ｅＶ９　Ｖ８　Ｖ７　１１Ｖ６　ｍＶ５重量（ｇ）　１１，４　５８．５　１０．０　０．７　１．０本性：ｖ９は極めて粘性で灰色ががった色Ｉヘキサンでベッセルを洗い蒸発させたが若干残っているがもじれない勇−一一一支物　質　ブタの均一化した大綱ゑ一一一作供試試料重量　１０９．６グラム超臨界溶媒　Ｃｏよ溶媒循＠　４８．３ポンド溶媒フイード率　２００／１溶媒流速　０．３ポンド／分温度（”Ｃ）　３８−３９　４０　３７　３４　−圧力（Ｐｓｉｇ）　３５００　１５００　１３００　１１００　５密度（ｇ／ｍり　０．８７　０．６９　０，６２　０．２６立−！−腹−文収量（ｇ）　８２．３回収率（％）　７５．１ｖ９　Ｖ８　ｖ７　１１ｖ６　１１Ｖ５重量（ｇ　）　３６．７（ｆ体）３８．６　１．２？　４．１　１．７重量　３３．５　３５．２　１．１　３．７　１．６＄注：ｖ９は固い組織様ｖ８はきれいな白い固体で４５℃でとける傘ヘキサンでベッセルを洗い蒸発させたが若干残っているかもしれない（２ｅ）　単　のための　面活性剤の　用ホモゲナイズした細胞膜やタンパクを含む複合物（コンプレックス）から脂質をとり出すため両親媒性の界面活性剤を用いた。この界面活性剤は蛋白質を水性媒体に可溶化することができる。遊離した脂質は遠心分離後浮上させて回収される。使用可能な界面活性剤のリストを表４（ａ）と（ｂ）に示した。これは０．１〜２．０％（ｗ／ｖ）濃度で、　Ｐ　）！７．０〜８．０で用ＬＮられる。（以下余白）表　５　（ａ）表　５　（ｂ）柔軟性のない疎水領域をもつ界面活性剤界面活性剤のタイプ　構　造　式　正式名（慣用温室）ａ３−（（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオツー１− プロパンスルフォネート、カルビオケムーベーリング、サーバで市販大綱“パウダー”を用いた場合（伝統的な細胞破砕法でなく）、出発物質の取扱いは次の抽出ステップがどんなものでもやりやすいだけでなく脂質の回収率も伝統的な細胞破砕法（例えばＰＢＳ、経由）較べて高い。（３ａ）ネコ、からのム　のゴールドスミスらの方法、ジャーナル　アメリカン　オブメーイカル　アソシエーション　Ｊ、ムｍｅｒ、Ｍｅｄ、Ａｓ５ｏｃ、２５２：２０３４−３６（１９８４）を用いた。これはまたキャットシンブーラスらが１９８４年８月２０日に出願したアメリカ特許出！ｉＮｏ、６４２，６２４号、′血管形成因子と血管形成法”としても示されている。さらにキャットシンブーラスらが１９８５年１０月１日に出願したアメリカ特許出願Ｎｏ、　７８２．７２４号、′血管形成を促進する脂質分子を含む組成物”にも１種々の大綱抽出物を分析しその成分について記載されている。超臨界ガス抽出も入網脂質の抽出に用いられる。これはカマレイの１９８５年１０月３１日に出願されたアメリカ特許出願Ｎｏ、７９３，６２２号に“動物由来の物質の超臨界液体抽出”として記載されている。大綱の重量を測定しプラスチック板上に広げ手術用ハサミで約４ｃｍの小片に切った。大綱小片（１匹のネコから３３〜６０ｇ）をＰ　Ｂ　５３００ｍＱとともにワーリングブレンダーに入れた。ホモジネーシ１ンは２０，５００ｒｐｍ５分で行った。得られたホモジェネートを４℃２０分間、　１６００ｇの条件で２５０１のプラスチックチューブ中で遠心分離した。遠心分離後、３つの画分が詔められた。即ちペレット、濁ったホモジニネート、浮上するクリーム色のケーキである。全脂質を抽出するためホモジェネートをデカンテート後ケーキをとり重さを測った。溶液とブレンブーは予め４℃で１時間予冷した。ケーキ１ｇに対し溶媒（クロロホルム／メタノール＝２：１、ｖ　／　ｖ　）を１０ｍｆｌの割合で入れ室温２分間ワーリングブレングー中でホモゲナイズした。沈澱物を室温。１０分間、２０００ｇの条件で遠心分離して除去した。透明な上溝を３７℃で減圧下口−タリーエバポレータにかけクロロホルム／メタノール混合物を除去した。脂肪性の物質の重さをはかり、これを“全脂質抽出物”とした、これは脂質抽出物および／またはクロロホルム−メタノール抽出物またはＣＭＥ、及び大綱のＣＭＦｒまたはクロロホルム−メタノール抽出画分としても知られる。（３ｂ）ネコ　中　の　製全脂質抽出物、ＣＭＦｒ２３ｇを１２０ｍｎのヘキサンに溶かした。９５％エタノール８０ｍ１！を加え充分に混和した９層を分離し下層を除去し上層（ヘキサン層）を新たに８０ｍＱの９５％エタノールで再抽呂した。下層を合せ８０１１Ｅｌのヘキサンで洗浄したヘキサン層は合せてロータリーエバポレータで乾固した。中性脂質（殆どトリグリセリド）の重量は２２．８ｇで収率は９８．２％であった。このヘキサン画分は、大綱からの中性脂質画分またはＨｘＣＭＦ　ｒ　（ＣＭＦ　ｒの９５％エタノール−ヘキサン分配で得られるヘキサン層の物質）としても知られる。ヘキサンの代りに他の炭化水素（例えばペンタン、シクロヘキサン、シクロペンタン、ベンゼンなど）を用いてもよい、メタノール、ｎ−プロパツール、アセトニトリルをエタノールの代りに用いてもよい、Ｍ、ケートの技術として“脂質学の技術：脂質の単離・分析・同定″　（北オランダニルゼビア、２６９−６１０頁）にも示されているような他の方法も使用できる。その他の方法としてはアセトン沈澱、向流分配を使用した溶剤分配、刀ラムクロマトグラフィ、および／または高圧液体クロマトグラフィなどが含まれる。例えば窒素ガス雰囲気は抽出時の酸化を防止できる２（３Ｃ）、亮；し木１１久庄」１片　由来の脂肪酸の、析この分析のため全天ｍ脂質抽出物（ＣＭ　Ｆ　ｒ　）　２００ｍｇをクロロホルムに溶かし、ｌｏｇのシリカゲルカラムにかけ、カラムの２５倍量のクロロホルムで溶出し中性脂質画分を得た。この両分の脂肪酸含量をガスクロマトグラフィーマススペクトロメトリー（ＧＣ−ＭＳ）で分析した。脂肪酸を遊離させ。メチルエステルにするため、中性脂質画分の一部（２，５Ｂ）をクロロホルム０．６７ｍＱに溶かし０．５Ｎのメタノール性水酸化ナトリウム０．３３ｍＥＩを加えた。試料を６０℃で１時間加熱後冷却し、０．２ｍＱの水を加えて２層に分けた。上層を除去し捨てた。下層に窒素ガスを流して乾燥させた。脂肪酸のメチルエステル（ＦＡＭＥ）をｎ−ヘキサンにとかしＧＣ−ＭＳで分析した。ＦＡＭＥの分析にはフィンニガン４５００型ＧＣ−ＭＳを使用した。ガスクロマトグラフィは、メチルシリコーン結合層をもつ溶融シリカを充填した３０ｍＸ０．２５＋＋ｍのキャピラリー力ラアーガスとしてヘリウムを１２ｐｓｉで用いた。カラム温度はマススペクトロメーターのイオンソースに直接結合している巳口末端部が２０５℃から３００℃になるまで２℃／分で昇温させた。マススペクトロメトリーは陽イオン検出のために電子衝突モード（７０ｅ〜′）で行った。スペクトルは０．５秒間隔でかかせた。標準のＦＡＭＥでは用いた条件下で炭素数１２から２７の脂肪酸が検出できた。試料から得られたピークは１４：Ｏが０．７％。１６：１が０．２％、１６：０が１９．５％、１６：１が０．６％、１７：Ｏが１゜１％、１８：２が９．８％、１８：１が４４．２％、１８：○が２４％で１５二〇と１７：２が微量含まれていた。ＦＡＭＥビークの同定はクロマトグラフ溶呂物の性質とマススペクトルを標準物質のそれらと比較することによって行った。各ピークの組成比（各スペクトルの全イオン電流がらプロットされるクロマトグラムにより計算した）はすべてのＦＡＭＥビークの面積の和から計算した。（４）　組成比をめるのに用いた種々の大綱試料は以下のように調製した。試料１１　大関パウダー由来の４００ｇのブタ中性脂質（ＨｘＣＭＦｒ、バッチナンバーｔ３５及び３６−８５−Ｐ、０．）これは抽出物からエタノール抽出により極性の脂質を除去した最初のクロロホルム／メタノール抽出から得られた。試料ｔ２　大関パウダー由来の３０Ｄ＆のブタ中性脂質（ＨｘＦｒ、バッチナンバー＄３７−８５−Ｐ、Ｏ，）これは大綱パウダーのヘキサン直接抽出により得られた。試料ｔ３　ブタ大綱パウダーの超臨界炭酸ガス抽出物３００ｇ（試験３のｖ８とｖ９の抽出物の等景況合物）試料＃４　ブタ皮下の脂肪組織、即ちＰ、Ｓ、Ａ、丁、３００ｇ（バッチナンバー＃３４−８５）、これはヘキサンによる直接抽出である（ＨｘＦｒ）　ａ試料１５　アンジオ−メディカルのＰ、Ｓ、Ａ、７．５０ｇ（バッチナンバー１１５−８５−Ｆ、Ｂ、）これは試料４と同様のサンプルを超臨界炭酸ガス（ｖ８）により抽出したものである。試料＃６　ブタ大綱パウダー（バッチナンバー＄３９−８５−Ｐ、Ｏ，）の加熱抽出物５００ｇ星處豊立五ｉ二！育毛組成物をローション、クリーム、軟こう、エアゾール、スティック、ゲルなどすでに知られた形につくった。好ましくはローションタイプで哺乳動物の大綱由来物質を重量パーセントで約５〜２０％、好ましくは約１５〜２０％含むものがよい。以下に記載の例ではローションタイプの組成物の製造及び使用の方法を述べたもので、独創性のある方法を考案した発明者によって考えａされた最もよいものであるがこの組成に限定されるものではない。例■ 坐該ローシ＝ン（２−３６Ａまたはアクティバ（トレードマークローション化学名　商品名　メーカー寥　量（５）大綱（ブタ１ｈＦｒ）　アシジオーメヂヵル　１５．００ニルゴ力ルシフニロールソルビタンステアレート　スパン６０　ＩＣＩ　、　３．０５プロピルパラベン　プロピルパラベン　マリンクロット　０．１０ポリソルベート６０　ツイーン６０　ＩＣＩ　２．２グリセリルステアレート　ミベロール１８−０７　イーストマンコダック　１．１３トコフエリルアセテート　ビタミン斗市詮ＬＩＳＡエーザイ　１．０ジメチコン　ダウコーニング２００，３５０ｃｐｓ　ダウコーニング　３．０力ルポメーノＬ７ｇ４０（＃リ　カルポボーノｖ４区３褌隋り　Ｂ、Ｆ、グツトリッチ　５．０水　精製水　４８．４ブチレングリコール　１，３−ブチレングリコール　ユニオンカーバイド　５．００メチルパラベン　メチルパラベン　マリンクロット　０．３０ＥＩＩＴだ三ナトリウム　印丁に三ナトリウム　ダウ　０．１０フエノキシエタノール　エマレセンス１１６０　エマリ−０，５０傘　マリンクロット　ケミカル、セントルイスＩＣＩ／二二コードバイク／ニニーマーフィ、ウィルミングトンイーストマンコダック、ロチェスターエーザイ℃ＳＡ　ロサンゼルスホフマン　テロシュ／キングスラント／ナツトレイダウコーニング／ミツドランドＢＦグツドリッチ／クリーブランドユニオンカーバイド／ダンバリーダウケミカルシミツドランドニマリー／シンシナティアクティブ　オルガニジス／パン　ナイス　カリフ別タイプローションの組成は以下の通りローションの　２−１７Ｃ化学名　商品名　メーカーｔ　量（１）大綱（ブタ）ｌＸＦｒ）　アシジオーメヂカル　２０．ＯＤソルビタンステアレート　スパン６０　ＩＣＩ４．０６プロビルパラベン　プロピルパラベン　マリンクロット　０．１０ポリソルベート６０　ツイーン印　ＩＣＩ　２．９４グリセリルステアレート　ミベロール１８− ０７　イーストマンコダック　１．５０トコフエリルアセテート　酢酸ビタミンＥ　エーザイＬ’ＳＡ　０．２０ジメチコン　ダウコーニング２００，３５Ｑｃｐｓ　ダウコーニング　５．００カルボメール９４０（２ｍリ　カルボボーノン発０（２％揮隋り　Ｂ、Ｆ、グツトリッチ　０．０７水　精製水　４０．１６ブチレングリコール　１，３−ブチレングリコール　ユニオンカーバイド　５．００メチルパラベン　メチルパラベン　マリンクロット　０．３０Ｄ丁に三ナトリウム　ＥＤＴＡ三ナトリウム　ダウ　０．１０　。フニノキシエタノール　ニマレセンス１１６０　ニマリ−０，５０１００，００拳　マリンクロット　ケミカル、セントルイスＩＣＩ／コンコード　パイク／ニューマーフィ、ウィルミングトンイーストマンコダック／ロチェスターエーザイＵＳＡ／ロサンゼルスダウコーニング／ミツドランドＢＦグツドリッチ／クリーブランドユニオンカーバイド／ダンバリーダウケミカル／ミツドランドエマジー／シンシナティアクティブ　オルガエクス／パン　ナイス　カリフましいローション　物ヒアルロン　ソーダ（Ｓｏｄｉｕｍ　Ｈｙａｌｕｒｏｎａｔｅ）この添加物はカリホルニア州パン・ヌイ市の７クテブ・オーガニクス社のＡＣτＩＭＯＩＳＴ＠という商標で売られている。育毛組成物の製造に使わける望ましいヒアルロン酸ソーダは次のような化学分析値をもっている。１、分子量□２，５００，０００以上２、　ヒアルロン酸ソーダ含量□９５％以上３、　蛋白□０．２％以下４、核酸□０．２％以下５、　コンドロイチン硫酸□検出せず６、水分□６．０％以下７、溶液の色と清澄度−無色で透明ビタミンＡとビタミンＤビタミンＡとＤは望ましくは夫々全部トランス型のビタミンＡのパルミチン酸塩とビタミンＤ、が重量で全液量の約０．１％に相当する１００万単位／ｇから２０万単位／ｇの比率で使われる。ローシヨン２−３６Ａの　ゞローションを作るに先立って組成処方の重量で２％となるカーボマ−９４０の溶液が用意される。この液を作るためには次の添加物が必要である。精製水　９７．７メチルパラベン　０．２０プロピルパラベン　０．１０カーボンマー９４０　２．０ばらばらに砕き（ｂｒｉｔｔｌｅ　ｇｒｉｎｄｉｎｇ）、直接ヘキサン抽出して得られたブタの大綱エキスをこのローションの製造に使った。ローション２−３６Ａを作るためにはメインの蒸気ジャケットのついた望ましくはアンカーミキサーのついたステンレススチールの煮釜に精製水を入れ、望ましくは８０〜８５℃に加熱する。それからブチレンゲリコールを加え、混合する。その中へメチルパラベンとトリソジウムＥ　Ｄ　Ｔ　Ａを搬入し、添加物が溶液状になるまで連続的に撹拌される。この時点でカーボマー９４０（２％溶液）が加えられる。温度を７５℃に保ち、釜は蒸発を防ぐためカバーされている。羽根のついたミキサーを備えた補助の蒸気ジャケットのついたステンレススチールの煮釜の中でオイル状の添加物を次のようなものとして加える。すなわち、大綱、ソルビタンステアレート、プロピルパラベン、ポリソルベート６０、グリセリルステアレート、トコフェリルアセテート（ビタミンＥ）。ビタミンＡ、ビタミンＤ、及びダウ・コーニング２００液である。この混合物は均一な液にするため混合中７０℃に加熱することが望ましい、決して過熱してはいけない。それからオイル相が混合しながらメインの煮釜に加えられる。＠度は７５℃にｍ１１ｉされるべきである。９９％のトリエタノールアミンとフニノキシエタノールを混合物中に加え、そしてジャケットのついた釜から熱水を流し出し、そのバッチを冷却しはじめる。そのバッチは連続的に混合し冷却し約４５℃でヒアルロン酸ソーダを加えられる。混合物を３５℃に冷やしたとき、ダウ・コーニング２００液を加える。この混合物は連続的に混合され、約３０℃にまで冷やされる。この好ましい温度で重力かまたは適当なポンプによってそのバッチを釜から取り出し、きれいに殺菌された容器に移す。ポンプで移す際バッチに空気をまきこませてはいけない、混合物を容器に入れたときは容器は蒸発を防ぐため、密閉されねばならない。叉」Ｌ亘ここで得られた革新的ローションを使うには、使用者は１日１回温和に働くシャンプー例えばベビーシャンプーで髪を洗うことが好ましい、髪が乾いたら、ローションを頭皮の禿げた部分にぬって約１０秒間穏やかにこするのがよい。望ましくはローション２−３６Ａ（ローションｌ）を１日１〜２回局所的に朝のシャワー後と夜寝る前に適用する。亙−一見２７から５９才の２２人の健康な男の被験者でハミルトンタイプの■〜■の人は選び、発明したローション２−３６Ａを少くとも１日１回上記のようにして用いた。使用後３日後に抜毛が止まったかどうか、新らたに発毛が促進されたかどうかを確めるため被験者にインタビューシた。２２人の中、８人から発毛が報告された。治療剪枝は毛を報告した１５被験者の中、１２人が抜は毛が少なくなったまたは止まったと報告している。２２人の被験者全てが頭髪が柔かく感じ脂っぽいといった不満はなかった。第２のグループの２５人の被験者がその頭皮の禿げた部分にローション２−３６Ａを１日１回２ケ月以上適用された。このグループは年令が２３から５９才で■ から■までのハミルトン型をもっている男性である。２５人の被験者の中、１７人が発毛が認められた。治療前に抜は毛が報告された１９人の中１５人がローション使用後接は毛の減少、または停止を報告した。被験者の１人は殆ど５ケ月このローションを使ってからインタビューした。彼は５６オの白人の男性で３０年間ハミルトンの■〜■型の男性タイプの禿に分類され男性ホルモン性脱毛症の家族歴をもっている。このローション２−３６Ａの局所適用の前に彼は約２０年前に頭頂に約７５片の毛髪移植をうけていた。この被験者における新たな発毛が第２〜４図を参照して説明されている。第２図がとられた時には被験者はローション２−３６Ａを６週間使用していた。明らかな新らしい頂主毛髪が移植された毛髪のある部分の下の頭頂部にみられる。第３図は禿げた部分にＡｃｔｉｖａＴＭローシ＝ンを２．５ケ月適用した患者の写真２枚であり、新たな発毛がみられている。第４図は治療約５ケ月後の患者の頭頂を撮った写真でさらに新しい発毛がみられている。第２〜４図を比べると、禿げた頭頂にローション２−３６Ａを局所的に適用してわずか５ケ月後に患者の頭頂の禿げた部分に発毛の増加がみられる、この新たな発毛の研究の全体の結果では、この研究に参画した患者の約８０％がたった３週間後にはこの発明した組成物で処置したあと脱毛が止まったと報告している。被験者の約３２％がわずか３週間の治療であらたな発毛を報告している。治療２ケ月後、２５人の被験者の７０％が、新たな発毛を報告し治療前に脱毛を報告していた１９人の巾約８０％がその脱毛が止まったかおくれだとしている０発毛のみられた１７人の被験者の中、３人はハミルトンタイプの■〜■型であり、１３人はＶ〜■型であった。これらの結果は、禿に対するミノキシジルの効果をテストした研究が進行した状態の禿、すなわち■〜■型に記述がない事実をみても有意な結果である。さらにミノキシジルの研究にある■型、■型でも、薬による治療に反応は低かった。（ｄｅ　Ｖｉｌｌｅｚ、　Ｒ，Ｌ、＋　Ａｒｃｈ　Ｄｅｒ＋ｎａｔｏ１．１２１巻、　１９７−２０２　（１９８５年）〕。１人の被験者はこのローション２−３６Ａを１日２〜４回その腕と顔に約１年間、適用したが彼の禿げた頭皮には発育はみられなかった。しかし、彼の頭皮の禿げた部分にローションをつけると適用後１ケ月ばかりで毛髪の密度が増えたことに気付いた。ローションを適用した腕や顔の部分には発毛はみられなかった。この結果はローションを局所的に適用することは遺伝的に毛髪嚢に対してプログラムされている皮膚の部分に毛髪の成長を刺激することを示している。さらにこのローションは全身的な作用よりむしろ局所的作用を示す。少くとも１人の婦人がその薄くなった頭皮にＡｃｔｉｖａＴＭローションを適用する研究に参加し、脱毛の減少と新たな発毛の促進がみられた。失−胤−ｔｊｌＬ養毛組成物中の分離した大綱の成分の効果とその他の添加物との相乗作用効果を示すために、発明者による研究が行われた。ローション２−３６Ａ　（ＡｃｔｉｖａＴＭローション）の９バツチが下記の変更を入れて前記の製造法で作られた：益り至Ｕ　Ｕ處血− １実施例■の製造法（前記）。２　実施例Ｉの製造法（前ｒり。３　ウシ脳のガングリオシドを添加した実施例Ｉの製造法（前記）。４　実施例１の製造法（前記）。５　ヒアルロン酸ソーダの添加をせずに実施例Ｉの製造法（前記）。６　ビタミンＡ、Ｄ、Ｅを除いた実施例Ｉの製造法（前記）。７　シリコーンを除いた実施例１の製造法（前記）。８　分離した大綱脂質成分を除いた実施例Ｉの製造法（前記）。９　ポリソルベート６０を除いた実施例１の製造法（前記）。５８人の年令が２４〜７２才でハミルトンタイプでは■〜■の範囲の男性の被験者を選び、９種のパッチのＡｃｔｉｖａＴＭローションの中の１つを頭皮の禿げた部分に前記実施例１のプロトコールに従って１日１〜２回つけるよう指示した。Ａｃｔｉ〜＋ａＴＭローションの適用後１〜４ケ月で被験者をインタビューした。その結果は大綱脂質成分の欠けたバッチ嵐８が望ましい組成のＡｃｔｉνａＴＭローション（バッチ＆１，２．４）の被験者と比べて新しい発毛の明らかな減少があったことを示していた。さらに、ヒアルロン酸ソーダを抜いたＡｃｔｉｖａＴＭローションをつけた患者も望ましい組成のＡｃｔｉｖａＴＭをつけた患者で得られる発毛と比べて明らかな発毛減少があった。バッチ宛６（ビタミンＡ、Ｄ、Ｅを抜いたＡｃｔｉｖａＴＭローション）をつけた患者は望ましい型のＡｃｔｉｖａＴＭローションを使ったものより若干高い割合で発毛がみられた。Ｃａｔｓｉｍｐｏｏｌａｓ等によって「大綱の脂質とその化粧品とじての使用法」というタイトルで、】９８５年１２月２０日に受理されたアメリカ特許出願＆８１１，５０５号に記載されたようにして（これを資料として提出する）ＣＡＭアッセイ法も行われた。その結果は入網成分を抜いたＡｃｔｉｖａ丁Ｍローシ＝ン（パッチ宛８）は陽性の血管造成活性を示さず分離したビタミンＡ、Ｄ、Ｅは血管造成活性を示した。これらの結果は、新しい毛髪成長活性はビタミンＡ、Ｄ。Ｅの存在には左右されることはなく、大綱の脂質含量がまたは入網成分とヒアルロン酸ソーダの相互効果によるものと思われる。この技術に精通する者にとってこの発明された組成物はこの技術において知られているいがなるタイプの脂質や油脂物質とヒアルロン酸ソーダを結合することによって作られることが明らかである。これらの脂質は暖乳動物の組織ばかりでなく、植物組織からもこの技術分野で既知の技術で分離されることができる。大−ｍＡｃｔｉｖａＴＭクリームとして知られるクリームの望ましい処方は次のとおりである。、ンーーＬｌ−二二二メら、ＯＳ≦９（Ａ　ｃ　ｔ　ｉ　ｖ　ａ　Ｔ　Ｍクリーム）ＣＴＦＡ名　商品名　供給業者参　量（γ）大綱（ブタの）ｔｘＦｒ）　アシジオーメヂカル　２５．００ソルビタンステアレート　スパン６０　ＩＣＩ　３．５７プロビルバラベン　プロピルパラベン　マリンクロット　０．１０ポリソルベート６０　ツイーン６０　ｒｃＩ　２．５グリセリルステアレート　ミベロール１８−０７　イーストマンコダック　２．１５トコフエリノ４制曖　ビタミンＥアセテート　ニーザイδＡ１．０ジメチ＝ン　ダウコーニング２００，３５Ｃｉｃｐｓ　ダウコーニング　Ｓ、ＯＯカーボマー９４０（δ４隋り　カーボボーノン響０（５４隋υ　Ｂ、Ｆ、グツドリッチ　１２．５０水　精製水　ＵＳＰ　１３．６９ブチレングリコール　１，３−ブチレングリニール　ユニオンカーバイド　５．００メチルパラベン　メチルパラベン　マリンクロット　０．３０トリソジウム −Ｄ丁Ａ　トリラジウム−０丁Ａ　ダウ　０．１０フエノキシエタノール　ニマーセンス１１６０　エマリー　０，５゜トリエタノールアミン　トリエタノールアミン　ユニオンカーバイド　０．２５ヒアルロン酸ソーダ　Ａｃｔｉｍｏｉｓｔ３　アクテイチブオーガニクス　２５．００セチルアルコール　セチルアルコール　０．２ｓステアリン酸　ステアリン酸３．０１００．００ −　マリンクロットケミカル社、Ｐ、Ｏ，Ｂｏｘ５４３９　セントルイス市ミズーリ　６３１４７　Ｉ　ＣＩ　／コンコード　パイク／ニューマーフィー街　ウィルミントン　Ｄ　Ｃ１９８１７イースマン・コダック７３４３　ステート通り／ロチニスター市　ニューヨーク州１４６５０　エーザイ　ＵＳＡ／ロスアンゼルス　カリフォルニア　ホフマンラロシニ／３４０　キックスラント通り／ナトレー市二ニーシャーシＨ０７１］Ｏダウコーニング／Ｐ、０．ＢＯＸ１７６７／ミドランド　ごシＩ　４８６４０　ＢＦグツドリッチ／６１００オークトリー街　クリーブランド市　オハイオ州　４４１３１　ユニオンカーバイト／オールドリッジベリー通　ダンペリー市コネチカット州　０６ｆｔ１７　ダウケミカル社／　２０２０　ダウセンター／ミツドランド　ミズーリ州　４８６４０　エマリー／１３００　カルータワー／シンシナチ　オハイオ州　４５２０２　アクチブ　オーガニラス／７７１５　デンスモア通／バンヌイ市カリフォルニア９１４０にの処方変更はローション処方について前記した過程で作られる。クリーム中の比率をかえたり、　５０℃で分離しないクリームを得たりするクリームの処方はこの技術に通じる者にとって明白であろう、ローションの局所適用とクリーム処方の間には何の治療上の差はない。失−１−銖−■ 、−り１−ム２−１９ｃもう一つの望ましいクリーム処方は次のような組成についてのものである。大綱クリーム２−１９Ｃ脱イオン水　１９．３３ブチレングリコール　５．００メチルパラベン　０．３０トリソジウムＥＤＴＡ　Ｏ，１０２％カーボポール９４０（２％溶液）　１２．５０大網　２５’、００スパン６０　３．５７プロビルバラベン　０．１０ツウイーン６０　２．５０ミベロール１Ｂ−０７２，１５トコフニリル酢酸　０．２０ダウコーニング２００液　１．００トリ工タノールアミン９９％　０．２５フニノキシエタノール　Ｏ，ＳＯ１％ＡＣＴＩＭＯＩＳＴ＠液　２５．００ダウコーニング２００液、３５０ｃｐｓ　２５０１００．００発明の組成はクリーム処方は頭皮部分に適用されたときベトベトしたり脂っぽい感触があることがわかったのでローションの形で使うことが望ましい、しかしながら、処方の比率をかえられることがこの技術に通じたものにとって明白であることは評価されよう、またいろいろな脂質性の大綱抽出物を画分て使うことや入網成分を軟膏、ゲル、エアロゾル、スティックタイプなどにすることができる。失−１−■−ヱ皮膚刺激性、変異原性、毒性試験の研究が以下にのべるようにして発明の組成物について行われた。テスト法はここに資料として提出されたカドシムブーラス（Ｃａｔｓｉｍｐｏｏｌａｓ）等によって「大綱の脂質と化粧品としての使用」として１９８５年１２月２０日に受理されたアメリカ特許出願＆８１１ｒ５０５号ですでに述べられている。アメス（Ａｗｅｓ）変異原性試験（Ａｗｅｓ等（１９７５年）、Ｍｕｔａｔｉｏｎ　Ｒｅ５−ｅａｒｃｈ　３１巻、３４７−３６４）が（［７２５Ｃｒａｎｂｅｒｙ　Ｒｄ、Ｅａｓｔ　Ｂｒｕｎｓｖｉｃｋ。Ｎｅｗ　Ｊｅｒｓｅｙ　０８８１６］ニューシャーシー州東プランズイック市クランベリー通り７２５番地、　０８８１６）の製品安全性研究所によってブタの大綱抽出物（ＰＯＣＭＦｒ）について行われた。検体の変異原性は〉くクチリアのＳａｌｍｏｎｅｌｌａ　ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍの特別に作られた株で逆の（「戻り」）変異をおこす能力で測定された。哺乳類の組織でみられる酵素による活性化を必要とする変異原は哺乳類のミクロソームを添加することによってバクテリアの検定で検出される。隻至亙反代謝性の活性化なしに、Ｎ−メチル−Ｎ−二トローＮ−ニトロソグアニジン（ＭＮＮＧ）、　９−アミノ−アクリジン（９ＡＡ）、　２−ニトロフルオレン（２ＮＦ）が適当な株とともに用いられた９代謝的活性化の存在下では２−アミノ− アントラセン（２ＡＡ）が全ての検定株に対する陽性対照として使われた。１１亙里代謝的活性化のあるときも、ないときも、各棟の自然におこる変異が測定された。溶媒対照がその実験での最大量で用いられた。アメス（Ａｌｌ＋ｅｓ）のサルモネラ（Ｓａｌ＋ｍｏｎｅｌｌａ）／　ｊ！乳動物のミクロソーム検定系は化学薬品の変異原性を検出するために特別に作られたバクテリア株ネズミチブスｉｉｉ　（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ　狂吐江−Ｉ」）を月いる。検定の合理性は変異原性や発ガン性やまた生殖異常や遺伝病などとも相・関が確立されている。遺伝子の（点）変異は通常フェノタイプの特性の変化として認められる。アメス（Ａｗｅｓ）法では、外来源のヒスチジンに対するサルモネラ検定菌の依存（生長依存性）がヒスチジン非依存にもどり変異によって変えられる。この特別な系では株によって塩基対の置換かあるいはフレームの移動変異かによって復帰が起こっている。いろいろな菌株が変異原に対するその感受性を高める遺伝的マーカーを他にももっている。その検定では、検定菌が毒性かまたは溶解度の限界内で最大の適用量までの濃度で一連の検定物量に１される。変異原性はヒスチジンのない状態で生育する変異したコロニーの数の増加を自然に起きた（バックグラウンドの）変異株数と比較することで表わされる。１’！乳動物の組織にある酵素で活性化が必要な変異原は哺乳動物のミクロソーム（Ｓ−９画分）を加えることによってバクテリア検定することで検定される。（Ａｗｅｓテストの千料バクテｉア指二一ブラウス・Ｎ・アメス（Ｂｒｕｃｅ　Ｎ　Ａｗｅｓ）博士（カリフォルニア州バークレー）からネズミチブス菌（Ｓａ１ｍｏＷｌｅｌｌａ証助違凹１■）ＴＡ１５３５．丁Ａ１５３７．　ＴＡ１５３ｇ、丁Ａ９８９丁Ａ１００の各棟を入手した。これらの菌は０．５％ＮａＣＱを含む栄養肉汁（ｎｕｔｒｉｅｎｔ　ｂｒｏｔｈ）で増殖させ、適当な遺伝マーカーをチェックして、そしてＤ？ｌ５Ｏ（ジメチルスルホ千シト）をおおよそ８％の最終濃度になるよう添加した後凍結保存（Ｒｅｖｃｏフリーザーで）した。蓋−一二之１、栄養肉汁（Ｄｉｆｃｏ）に０．５％ＮａＣＱを補填した。２、上層寒天は０．６％のＤｉｆｃｏ寒天、０．５％ＮａＣｎ　、　０．５ｍＭビオチン及び０．５１のし一ヒスチジンーＨＣΩを含んでいる。３、最少グルコース寒天借地はボーゲルーボンナー（Ｖｏｇｅｌ−Ｂ。 −ｎｎｅｒ）信地Ｅ（ｖｏｇａｌ　＆　Ｂｏｎｎｅｔ、１９５６年）に２ｘのグルコースと共に１．５％のバタトーディフコ（Ｂａｃｔｏ−Ｄｉｆｃｏ）寒天を含めた。４、トリプトン寒天。及進２」Ｕ１肚Ｎ−メチルートニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン（ＭＮＮＧ）、　９−アミノアクリジン（９−ＡＡ）、　２−ニトロフルオレン（２−ＮＦ）が付録１（後記）に示されるように指示菌株と共に直接変異原性試験に使われた。２−７ミノアントラセン（２−ＡＡ）は付録２（後記）に示されるように代謝的活性化についての検定に全ての菌株と共に使ゎアセトンを検体の溶媒として使った。１、Ｓ−９・　化゛合物Ｓ−９は試験の日に融解され、まず蛋白濃度で１０■／−となるようにトリス− ＥＣΩ緩衝液で稀釈し、それがら１ｏμΩＳ−９／−の終濃度になるようにＳ− ９緩衝液に加えた。出来上ったＳ−９混合物は除菌のため０．４５μ簡の使い捨てのナルゲン（Ｎａｌｇｅｎｅ）フィルターユニットを通し、同日の使用まで約４℃に保存した。次の成分とその最終濃度がＳ−９緩衝液に使われた。炭−立　最終濃度／ｍＱ　Ｓ−９混合物暦ｇｃＱｚ　８マイクロモルＫＣ０３３マイクロモルグルコースー６−燐酸　５マイクロモルＮＡＤＰ　４マイクロモルＮａ）ｌ、ＰＯ，・Ｈ，Ｏ，ＰＨ７，４１００？イタ０モ）Ｌｔアメス（Ａｎｓｓテストの　法へ孟二二二髪呈この検定で使われる株は０．５％ＮａＣＱの入った２１−の栄養肉汁に生やした凍結保存株から出発され、３７℃の振どう水浴で１２〜１６時間インキュベートされる。新しい培養物は適当な遺伝的マーカーのテストが行われる間、冷蔵庫に保管される。アメス（Ａｗｅｓ）等（１９７５年）によって記載されているようにして行われたこれらのテストではヒスチジンの欠乏状態では生育がみられず、クリスタルバイオレットの存在下では生育せず、あるいは紫外線の照射後でも生育しない、　ＴＡ１５３５．丁Ａ１５３７．　ＴＡ１５３８菌はアンピシリンに感受性で、一方丁Ａ９８や丁Ａ１００は耐性がある。土皇孜星！ｉＫ致バクテリア菌株の生存に及ぼす検体試験の影響を７メス（ム−５ｕｅｓ）の生物検定の前に行った。これは異なった濃度の検体と溶媒の０．１−を２．０−の上層用寒天（４５℃）と０．１−の検定菌の入った試験管に加えることによって行われる。混合後、試験管の内容をトリプトン寒天プレートの表面に注ぐ、このプレートを３７℃で４０〜４８時間培養し、検体の入ったプレートのバクテリアのバックグラウンドの状態を溶媒のみを入れたバクテリアの状態と比較した。トリプトン寒天プレートでの毒性はバクテリアのバックグラウンド状態が薄くなったか消失することによって検呂される。る　、の、山のためのプレート試験法試験はアメス（Ａｍｅｓ）等の方法（１９７５年）に従って行われた。検体を検定の日に溶媒（アセトン）に溶かし希釈した９次のものが溶かした上層用寒天２ｔｕ（４５℃）に加えられた。１、適当な指示菌株の培養物０．１− ２、適当な濃度の検体、対照検体、または溶媒だけの０．１−各試験管を個々に調製し、直ちに撹拌し、そして内容物を最少グルコース寒天プレートの表面上に注ぎこんだ、各プレートを固まる前に上層寒天が均一に広がるように回転させた。全プレートを３７℃で約４８時間インキュベートした。インキュベート後、プレートを復帰した菌のコロニーを観察し、数えて記録した。各菌株について検体の５段階の濃度で３点平行で試験した。各菌株について陽性対照検体と指示菌株と溶媒とからなる自然に起こる復帰菌のコントロールを同時に行った、溶媒のみと検体の最高濃度レベルについてテスト微生物を含まない上層用寒天２−にそれぞれ０．１−づつを加え、そして全量を最少グルコース寒天プレート上に注ぎこむことによって無菌状態であることの検査した。Ｓ−９を入れたプレート試験は上記と同様に行われたがただ攪拌、注ぎ込みの直前に上層用寒天の入った各試験管にＳ−９混合物０．５ｄを添加する修正を行った。各菌株に対する陽性対照物と指示菌株とＳ−９混合物とからなる自然発性復帰菌のコントロールを並行して行った。Ｓ−９混合物は検定菌なしの上層用寒天の２鶴に０．５−加え、その全量を最少グルコース寒天プレート上に注ぎ込むことによって無菌性をチェックした。プレートは全て約４８時間３７℃でインキュベートした。患−Σ区検定材料の変異原性の評価と報告には次のような判定項目が使われた。１、直接プレート検定法または活性化プレート検定法のいずれかに使われるとき各菌株の自然発生復帰株のレベルは付録３（後記）に示されている歴史的な数値の範囲から有意に違ってはいけない。２、無菌性のためのコントロールは全て陰性でなくてはならない。３、　陽性対照は全て自然発生の復帰コントロールより少くとも３倍の数の復帰コロニーの増加が証明されるような指示菌株が既知の変異原に対して機能的であることを示さねばならない。４、変異原活性に対して陽性と考えられるためには、検体は量に応じた効果（検体の量を増やせば復帰したコロニーの数も増す）を示さねばならない。５、ＴＡ１５３５．　ＴＡ１５３７．　ＴＡ１５３ｇ、丁Ａ９ｇの各棟に変異原性ありと考えられるためには、検体試料は適用可能なものとして溶媒対照の値またはＳ−９画分を入れた対照値の３倍より大きいかあるいは等しいプレート当りの復帰株について最低の増加がある。３水準の濃度でポジティブの応答を示す必要がある。６、　７１１００株について変異原性ありと考えられるためには。検体試料は適用可能なものとして溶媒対照の値またはＳ−９画分の添加した対照値の３．５倍より大きいかまたは等しいプレート当りの復帰株の数の増加を示す少くとも１水準の濃度を含む３混度水準でポジティブの濃度応答がある必要がある。有効な試料とは項目１，２．３が合致していることが必要である。変異原性があると考えられるためには項目４，５．６も合致しているべきである。ヱととｂ競と２上付録１直Ｊ　原−方法におする　屹対　゛吟指示菌株　陽性対照　゛　／プレート　′　、■Ａｌ５３５　ＭＮＮＧ　５．０　ＤＭＳＯ塩基対置検子Ａ１５３７　９−ＡＡ　２５０．ＯＤ！’、５０　７レ一ムシフト変異丁Ａ１５３８　２−！ｖＴ　０．５　Ｄ阿Ｓｏ　７１／−ムシ７ト変異ＴＡ９８　２−ＮＦ　０．５　ＤとＳＯフレームシフト変異ＴＡ１００　ＭＮＮＧ　５．０　ＤＭＳＯ塩基対置換ＭＮＮＧ、　Ｎ−メチル−Ｎ−ニトロ− Ｎ−二トロソグアニジン９−ムＡ、９−７ミノアクリジン２−ＮＦ、　２−ニトロフルオレンＤＭＳＯ、ジメチルスルホキシドＴＡ１５３５　２−ＡＡ　２．５　Ｄ！’、ＳＯ塩基対置換Ｔム１５３７　２− ＡＡ　２．５　Ｄ呵ＳＯフレームシフト変異丁Ａ１５３８　２−ＡＡ　２．５　Ｄ阿ＳＯフレームシフト変異ＴＡ９ｇ　２−ＡＡ　２．５　Ｄ慇Ｏフレームシフト変異丁Ａ１００　２−ＡＡ　２．５　Ｄ呵ＳＯ塩基対置換２−ムム、２−アミノアントラセンＤζＳＯ，ジメチルスルホキシド二とぢ知弘と２上付録３細菌−の指爪−株に封する自然　と′帰株レベルの　飲なバ・・タグランドＴＡ１５３５　１８．０９　ｇ、０４　２−４３丁Ａ１５３７　６．２９　２．４７　２−１５丁Ａ１５３８　１３．７２　４．４８　５−３２ＴＡ９８　２３．５４　９．０３　９−６０丁Ａ１００　１４４．９４　４１．８９　６６−３１８ＴＡ１５３５　１５．８６　５．９８　５−４０ＴＡ１５３７　８，１９　２．６７　２２−１５ＴＡ１５３　２６．２７　１０．２２　１２−６５ＴＡ９８　３９Ｊ５　１４．３１　１６−９０ＴＡ１００　１５６．５３　４４．６１　７３−４０７ス】１１■ ブタのＨｘＦｒ　（白いクリーム状）についての経口摂取毒性試験が０８９０１ニユ一シヤーシーＨニ二−ブランズウイツク市コマーシヤルアベニユー３４０番地の製品安全性研究所で行われたよ検体材料は液体化するまで水道水下で温められた。試験期間中、動物（ラット）は−頭一頭わかるように識別され１２時間の明暗サイクルをもった環境的にｍＢされたステンレススチールの針金の床をしたケージに別々に飼育した。餌と水は薬物投与後は自白摂取にした。笈−一亘急性経口毒性、　ＦＨ５ＬＡ、１６ＣＦＲ１５００，３、ラットを１８時間絶食させ、それから５．０ｇ／ｋｇ体重の検体を一匹一匹強制投与した８ラツトを個別にケージに入れ、死亡あるいはその他の全体の毒性の兆候を１４日聞観察した。餌と水を自白摂取させた。ブタのＨｘＦｒ検体の経口ＬＤ、。は５．Ｏｇ／ｋｇ以上である。剖検では、処置したラットの内臓のどこにも外観的変化はみられず、検体は１６ＣＦＲ１５００，３に定義されているように毒性はない。ヌ」ｕ１！品用Ａｃｔｉｖａ　７Ｍスーパーリッチ皮膚栄養剤（ローション）とＡｃｔｉｖａ　７Ｍスーパーリッチ皮膚栄養剤（クリーム）についてもレベルコ検査所（０７２０４ニユ一シヤーシー州ローゼルバーク市ホーソーン街１２３番地）で行われた。検体は各一群１５匹の雄と雌のラットに実施例■で既述したようにして５ｇ／瞳の量で経口投与した。剖検において、処理したラットの内臓のいずれにも外観的変化はみられず、検体は１６ＣＦＲ１５００，３で定義されるものとして毒性はない。災五五！ブタのＨｘＣＭＦｒとつ・シのＨｘＣＭＦｒ　（ウシの大綱のヘキサン抽出されたＣＭＦｒ）についてニューシャーシー州ニューブランズウィック市の製品安全性研究所によってウサギを使って眼刺激について研究された。試験の期間中６匹の動物は１２時間毎の明暗サイクルをもった環境的に調節された部屋で、針金で底を作ったケージに個別に飼育した。餌と水は薬物投与後、自由摂取とした。友−一茎はじめの眼刺激試験はＦＨＳＬム１６ＣＦＲ１５００，４２に従って行われた。６匹の若い一人前になったアルピノ種ウサギを夫々に識別できるようにした。検体の０．１ｄを各ウサギの片眼の反転した低い方のまぶた上に投与した。上側下側のマブタとも１秒間柔やかに保って検体のロスを防ぐ、各ウサギのもう一方の眼は無処理のまま対照として使われた。角膜の損瘍がドレーズ（Ｄｒａｉｚｅ）等［Ｊ、Ｐｈａｒｍａｃｏｊ２　、　Ｅｘｐ、丁ｈｅｒ、　８３．３３７−３９０（１９４４年）］の方法によって評価された。ドレーズの採点はケイ（Ｗａｙ）とカレンドラ（Ｃａｌｌａｎｄｒａ）によって分類された（ムシ阻■赳すニ」肚ユ亘肛、　８３．３３７−３９０（１９４４年）、損害の強さは２４、４８，７２時間で評価されている。（以下余白） ★ ＭＭＴＳ　クラスＩ　藍１０．０〜０．５　刺激なし　Ｎ０９６〜２．５　殆んど刺激なし　ＰＮ２．６〜１５．０　最少の刺激　Ｍ１１５．１〜２５．０　マイルドの刺激　Ｍ。２５．１〜５０．０　中位の刺激　Ｍ３５０．１〜８０．０　激しい刺激　８８０．１〜１００．０　極端な刺激　Ｅｌｏｏ、０〜１１０．０　最大級の刺激　Ｍス★最大の平均トータル点数ブタのＨｘＣＭＦｒのＭＭＴＳは１．００であった。その素材は実際上殆んど刺激なしくＰＮ）と考えられる。ウシのＨｘＣＭＦｒのＭＭＴＳＩ′！０．００であった。検体は刺激なしとみなされる。１１涯ｌ眼刺激試験はまた品用Ａｃｔｉｖａ　７Ｍスーパーリッチ皮膚栄養剤（ローション）とＡｃｔｉｖａ　７Ｍスーパーリッチ皮膚栄養剤（クリーム）について、ウサギで０７２０４二ニーシヤーシー州ローゼンパーク市ホーソーン街１２３にあるレベルコ検査会社によってなされている。６羽の健康なアルピノ種のウサギがこの試験に使われた。各動物は０．１−の検体試料を右眼に投与され洗眼しなかった。洗眼をしない左眼はそのコントロールとして使われた。処理した銀もコントロールの眼も２４時間毎に３日間ｍ祭され、その観察は「有害な物質による眼刺激を評価するための説明ガイド」に従って記録された。このテストはもし試験群の４ないしそれ以上の動物が陽性反応を示したならば陽性と考えられる。もし１羽だけが陽性反応を示したならば、このテストは陰性とみなされる。もしも２〜３の動物が陽性反応を示す場合にはこの試験は６羽の別の群の動物を使ってくり返される。ローションもクリームもいずれの処方も陽性反応を示さず。１６ＣＦＲ１５００，４２（ａ　＝　ｃ　）に規定されているように眼への刺激はないと考えられる。夫り立入 −・なバ・チースト検体を被験者の包帯の下の背中に適用し、４８時間そのままにする。試験部位は包帯をとったあと１５分後と２４時賢後に判定される。最初の適用後２週間でパッチを４８時間その場に残し、その後込の尺度に従って１５分後と２４時間後に判定される。 −足１坐ス二二Ｘ　パッチしない０　反応なし０．５　最少の反応１　１４定された発赤２　浮腫を伴う発赤３　発疹と浮腫を伴う発赤４　水泡を伴う著しい発赤Ｇ　光沢がみえるＳ　かさぶた形成笠−鼠二側１００人の健康で全身的または皮膚上の疾患のない成人、用いられる背中の部分はテスト部位を判定するのを妨げるキズはない。テストをはじめる前に書＝による同意書が被験者からとられている。予示的なパッチテストをローション（Ａｃｔｉｖａ　ＴＭ昼品用−パーリッチ及膚栄養剤）とクリーム（Ａｃｔｉｖａ　７Ｍスーパーリッチ皮膚栄養剤）についてデルマチスト研究所（１１１０１ニユ一ヨーク州ロングアイランド市４１番地２９−２８）により５０人づつの２群で行われた。　０．１５ｍＱの抽出物が使われている、バーク−デービス（Ｐａｒｋｅ−Ｄａｖｉｓ）パンチ剤を用いた１０２人の被験者には０．１５−のワセリンもテストされた。誘導期にパッチをとりのぞき、適用後４８時間と７２時間にその部位を評点した。全検体とも陰性であった。誘導期のパッチを除いたあと１２日目に感作パッチを適用し、４８時間と７２時間でａｍした。適月後全バッチ部位は陰性でどれも皮膚接触刺激または感受性のある兆候はみられない。ヌＪｌ星Ｃａｔｓｉｍｐｏｏｌａｓによる、１９８５年１２月２０日受理された審萱中のアメリカ特許出Ｊ［＆８１１，５０５号にも記されているように、ウィルスの存在についての試験がダモン（Ｄａｉｏｎ）　！１床研究所による包括的なウィルスについてのプロファイルに関してブタの大１ｐＡＣＭ　Ｆ　ｒについて実施されている。ブタのＨｆｒの４１シ国際調、斎報告１１１１ａＭ＃’１ｌＮｕ　ａ＝ｅｗａｗａ″”’　ＰＣＴ／：Ｓ　ε７．／Ｃ３４２９

Claims

【特許請求の範囲】

１．生えぎわの脱毛を減らすかまたは新しい発毛を促がすために禿げた皮膚に局所的に適用するための分離された大綱の脂質を含む組成物。
２．毛髪の成長のために遺伝的に準備されたヒトの皮膚に新たな育毛を促がす請求項１の組成物。
３．新たな育毛が生えぎわの毛髪を含む請求項２の組成物。
４．大網の脂質がブタ、ウシ、ヒツジ、ネコの大網脂質およびそれらの混合物よりなる群から選らばれる請求項１の組成物。
５．大網の脂質が低温技術によって分離された請求項１の組成物。
６．大網の脂質が少くとも１つの有機溶媒で抽出されることによって分離された請求項５の組成物。
７．抽出がヘキサン抽出である請求項６の組成物。
８．大網の脂質がクロロホルムーメタノール抽出で分離された請求項６の組成物。
９．大網の脂質が超臨界ガス抽出によって分離された請求項５の組成物。
１０．ガスがＣＯ２である請求項９の組成物。
１１．大網の脂質が表面活性剤で分離された請求項１の組成物。
１２．大網の脂質が熱抽出で分離された請求項１の組成物。
１３．ヒアルロン酸ソーダをさらに含む請求項１の組成物。
１４．シリコーンをさらに含む請求項１の組成物。
１５．ヒアルロン酸とシリコーンをさらに含む請求項１の組成物。
１６．乳化剤をさらに含む請求項１の組成物。
１７．乳化剤がグリセロールステアレート、ソルビタンステアレート、カルボマー、ポリソルベート６０、及びそれらの混合物からなる群から選ばれる請求項１６の組成物。
１８．抗酸化剤をさらに含む請求項１の組成物。
１９．抗酸化剤がＥＤＴＡ、ビタミンＥ、及びそれらの混合物からなる群から選ばれる請求項１８の組成物。
２０．ビタミンＡとビタミンＤをさらに含む請求項１の組成物。
２１．保存剤をさらに含む請求項１の組成物。
２２．保存剤がメチルパラベン、プロピルパラベン、フェノキシエタノール、ブチレングリコール、ＥＤＴＡ及びそれらの混合物からなる群から選ばれる請求項２１の組成物。
２３．保湿剤をさらに含む請求項１の組成。
２４．保湿剤がシリコーン化合物、ブチレングリコール、ヒアルロン酸塩化合物、水及びそれらの混合物からなる群から選ばれる請求項２３の組成物。
２５．シリコーン化合物がジメチコン、ジフェニコン、フェニルジメチコン、シクロメチコン、及びそれらの混合物からなる群から選ばれる請求項２４の組成物。
２６．金属キレート剤をさらに含む請求項１の組成物。
２７．キレート剤がＥＤＴＡである請求項２６の組成物。
２８．皮膚顔料をさらに含む請求項１の組成物。
２９．皮膚顔料がカーボマーである請求項２８の組成物。
３０．大網の脂質素材がローション、クリーム、ゲル、スプレーまたはステイックに入れられた請求項１の組成物。
３１．組成物がふつうの形の禿における脱毛を減らせる請求項１の組成物。
３２．組成物がふつうの形の禿における新しい発毛を促がす請求項３１の組成物。
３３．組成物がふつうの形の禿の男性の患者で脱毛を減らすかまたは新たな発毛を促がす請求項３２の組成物。
３４．ローション、軟膏、クリーム、ゲル、スプレー、またはスティックが、大網の脂質物質、ヒアルロン酸ソーダ、乳化剤、保湿剤、保存剤、皮膚質料、金属キレート剤およびそれらの混合物からなる群から選ばれた素材からなる混合物である請求項３０の組成物。
３５．ローション、クリーム、軟膏、ゲル、スプレー、またはスティックが大網の脂質物質、ヒアルロン酸ソーダ、ソルビタンステアレート、プロピルパラベン、ポリソルベート６０、グリセリルステアレート、トコフェリルアセテート、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ジメチコン、カーボマー９４０、水、ブチレングリコール、メチルパラベン、トリソジウムＥＤＴＡ、フェノキシエタノール、トリエタノールアミン、およびそれらの混合物からなる群から選ばれた素材を含む混合物からなる請求項３０の組成物。
３６．分離した大網脂質を含む組成物を毛のうの生育のために遺伝的にプログラムされた部分をもったヒトの皮膚部に局所的に適用することを含むヒトの新たな発毛の速度を速める方法。
３７．新しい発毛が着色した（Ｐｉｇｍｅｎｔｅｄ）はえぎわの毛を含む請求項３４の方法。
３８．分離した大網脂質を含む組成物を毛のうの生育のために遺伝的にプログラムされた部分をもったヒトの皮膚部位に局所的に適用することを含むヒトのはえぎわの脱毛の速度を最少にする方法。
３９．毛のうの生育のために遺伝的にプログラムされた部分をもったヒトの皮膚部位に少くとも１日１回組成物を適用することを含む局所適用ステップがある請求項３６または３８の方法。
４０．分離した大網脂質を含む組成物を重量で５から２０％の範囲で使うことを含む請求項３６または３８の方法。
４１．組成物の全重量の５から２０％の重量の分離した大網脂質をヒアルロン酸ソーダとともに局所的に使うことを含む請求項４０の方法。
４２．ローション、クリーム、スプレー、ゲルまたスティックに入れた分離した大網脂質をもった組成物を毛のうの生育のために遺伝的にプログラムされた部分に局所的に適用することを含む請求項４０の方法。
４３．分離した大網の脂質と、ヒアルロン酸ソーダ、乳化剤、保湿剤、保存剤、皮膚顔料、金属キレート剤及びそれらの混合物からなる群から選ばれた少くとも一員とを含む組成物を毛のうの生育のためにプログラムされたヒトの皮膚部分に局所的に適用することを含む請求項４２の方法。
４４．分離した大網の脂質と、ソルビタンステアレート、プロピルパラベン、ポリソルベート６０、グリセリルステアレート、トコフェリルアセテート、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ジメチコン、カーボマー９４０、水、ブチレングリコール、メチルパラベン、トリソジウムＥＤＴＡ、フェノキシエタノール、トリエタノールアミン、及びそれらの混合物からなる群から選らばれた少くとも一員とを含む組成物を毛のうの生育のためにプログラムされているヒトの皮膚部に局所的に適用することを含む請求項４２の方法。
４５．生えぎわの毛の脱毛を減らすか、または新しい発毛を促がすために禿げた皮膚に適用するための分離した脂質を含む組成物。
４６．毛のうの生育のために遺伝的にプログラムされている部分をもつヒトの皮膚部位に新たな発毛を促がす請求項４５の組成物。
４７．新たな発毛が生えぎわの毛を含む請求項４６の組成物。
４８．脂質が食物または動物の組織から由来される請求項４５の組成物。
４９．脂質が低温技術、少くとも一種の有機溶媒による抽出、超臨界ガス抽出、表面活性剤抽出及び加熱抽出よりなる群から選らばれた技術の一つによって分離された請求項４５または４８の組成物。
５０．ヒアルロン酸ソーダをさらに含む請求項４５の組成物。
５１．シリコーン、乳化剤、抗酸化剤、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、保存剤、保湿剤、金属キレート剤、皮膚顔料、およびそれらの混合物からなる群から選ばれた少くとも一員を含む請求項４５の組成物。
５２．ヒトのふつうの形の禿にみられるはえぎわの脱毛を減らす請求項４５の組成物。
５３．ヒトのふつうの形の禿にみられる新しい発毛を促がす請求項５２の組成物。
５４．ふつうの形の禿をした男性の患者に生えぎわの脱毛を減らすかまたは発毛を促がす請求項５３の組成物。
５５．脂質物質がローション、クリーム、ゲル、スプレー、またはスティックに入れられている請求項４５の組成物。
５６．ローション、クリーム、軟膏、ゲル、スプレー、またはステックが脂質物質、ヒアルロン酸ソーダ、ソルビタンステアレート、プロピルパラベン、ポリソルベート６０、グリセリルスチアレート、トコフェリルアセテート、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ジメチコン、カーボマー９４０、水、ブチレングリコール、メチルパラベン、トリソジウムＥＤＴＡ、フェノキシエタノール、トリエタノールアミン、およびそれらの混合物からなる群から選ばれた素材を含む混合物からなる請求項５５の組成物。
５７．分離した脂質を毛のうの生育のために遺伝的にプログラムされている部分をもったヒトの皮膚部位に局所的に適用することを含むヒトの発毛の速度を速めるための方法。
５８．新しい発毛が着色した（Ｐｉｇｍｅｎｔｅｄ）生えぎわの毛を含む請求項５７の方法。
５９．脂質を含む組成物を毛のうの生育のために遺伝的にプログラムされている部分のあるヒトの皮膚部位に局所的に適用することを含むヒトの生えぎわの脱毛速度を減らすための方法。
６０．その組成物を少くとも１回、毛のうの生育のために遺伝的にプログラムされている部分のあるヒトの皮膚部に適用することを含む局所適用ステップのある請求項５７または５９の方法。
６１．分離した脂質をその組成物に対して５〜２０重量％の範囲で含む組成物を使うことを含む請求項５７または５９の方法。
６２．ヒアルロン酸と共に分離した脂質をその組成物に対して５〜２０重量％の範囲で含む組成物を使った請求項６１の方法。
６３．ローション、クリーム、スプレー、ゲルまたはスティックにλれられた分離した脂質を含む組成物を毛のうの生育のために遺伝的にプログラムされた部位に局所的に適用することを含む請求項６１の方法。
６４．分離した脂質と、ヒアルロン酸ソーダ、乳化剤、保湿剤、保存剤、皮膚顔料、金属キレート剤、及びそれらの混合物からなる群から選らばれた少くとも一員とを含む組成物を毛のうの生育がプログラムされたヒトの皮膚の場所に局所的に適用することを含む請求項６３の方法。
６５．分離した脂質と、ソルビタンステアレート、プロピルパラベン、ポリソルベート６０、グリセリルステアレート、トコフェリルアセテート、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ジメチコン、カーボマー９４０、水、ブチレングリコール、メチルパラベン、トリソジウムＥＤＴＡ、フェノキシエタノール、トリエタノールアミン、およびそれらの混合物からなる群から選らばれた少くとも一員とをもつ組成物を毛のうの生育がプログラムされているヒトの皮膚部に局所的に適用することを含む請求項６３の方法。