JPH01316398A - 新規ペプチド、その塩及びペプチド性抗アレルギー剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野１ 本発明は、新規な生理活性ペプチド又はその塩、及びこ
れを有効成分とする抗アレルギー剤に関する。

［従来の技術１ 各種アレルギー疾患の予防及び治僚のために種々の薬物
が提案され、開発が行なわれ、既にいくつかが市販に供
されている。

アレルギー症状のうち、即時型アレルギー反応である気
管支喘息、じん麻疹、アレルギー性鼻炎などは■型アレ
ルギー反応として分類される。この■型アレルギー反応
は、発症機序および抗アレルギー剤の作用機序から一般
に次の三段階から成るものと考えられている。すなわち
、最初体内に侵入した外来性抗原に対して、マクロファ
ージ、Ｔ細胞及びＢ細胞の相互作用によってＩｇＥ抗体
が産生され、このＩｇＥ抗体が組織の肥満細胞や血中の
好塩基球のＦｃレセプターに固着して感作が成立するこ
とになる。この過程が第１段階である。つぎに、再び外
来抗原が体内に侵入すると、細胞のＦｃレセプターに固
着したＩｇＥ抗体と外来性抗原が結合し、抗原抗体反応
が引き金となって細胞膜酵素の活性化、細胞内へのカル
シウムイオンの流入などが起こり、それによって酵素反
応などの生化学的変化、脱顆粒などの組織学的変化が引
き起こされる。その結果、ヒスタミンや５Ｒ５−Ａなど
のケミカルメデイエータ−が細胞外へ遊離される。この
過程が第２段階である。上記、第２段階で細胞外に遊離
したケミカルメデイエータ−は、平滑筋の収縮、毛細血
管透過性の充進及び分泌促進の作用を有し、種々のアレ
ルギー症状を惹起する。

この過程が第３段階である。

従来から知られている抗アレルギー剤のうち、非特異的
減感作療法剤及び抗体産生抑制剤は第１段階に作用する
薬物であるが、この第１段階に特異的に作用する薬物は
市販されていない。

第２段階に作用する薬物としては、ＤＳＣＧ、　　トラ
ニラストなどの化学伝達物質抑制剤がある。また抗ヒス
タミン剤及び気管支拡張剤は第３段階に作用する薬物で
ある。さらに市販されていないが、特公昭６０−２３１
８号公報にはペプチド性抗アレルギー剤についての開示
がなされている。

このペプチドには第１段階のＩｇＥ抗体抗体全土制する
作用は確認されていないが、第２段階の最初に起こるＩ
ｇＥ抗体が肥満細胞へ結合するのを阻止すると同時に、
第２段階のすでに結合し　゛たＩｇＥ抗体を置換するこ
とによって、アレルギーを遮断する性質をもつもので、
ＩｇＥ抗体のＦｃ領域のアミノ酸残基５個からなり、下
記の一次構造式 ％式％ によって示されるごとく、ＩｇＥ抗体由来のペンタペプ
チドである。現在、医薬品として開発、研究されている
が、活性の強さは明確ではない。

〔発明が解決しようとする課題］ 上記した■をアレルギー反応の発症機序から従来の抗ア
レルギー剤の開発の動向は、アレルギー症状発症の３つ
の段階のうちの１つの段階に作用する薬物の開発に向け
られ、この３つの段階の連鎖をいずれかの段階で遮断す
ることによってアレルギー症状発症を予防し、または治
療する療法の研究が行われてきた。そしてこのような研
究によるアレルギー症状発症の３つの段階のうちの１つ
の段階に作用する薬物の開発によって一応の効果が期待
される療法が開発されている。

しかしながら、既知のこうした化学療法剤は上記の３つ
の段階の連鎖の遮断には完全に作用するものではない。

かがる状況に鑑み、３つの段階の１つに作用する薬剤と
、他の１つに作用する薬剤とを組み合わせて用いること
によって連鎖の遮断を完全なものとする発想のもとに複
数個の薬剤を組み合わせて使用することも行われている
が、その効果は必ずしも期待通りのものではない。

そこで、単一の薬剤であるが、上記のアレルギー症状発
症の３つの段階のうちの複数の段階に作用しうる薬剤が
開発された場合には抗アレルギー剤としての効果が飛躍
的に増大されうることが期待され、かかる薬剤の開発が
望まれているのである。

また上記のアレルギー症状発症のメカニズムから、Ｉｇ
Ｅ抗体のＦｃ領域由来のペプチドまたはかかるペプチド
と類似するペプチドを開発することによってすぐれた抗
アレルギー剤が入手できる可能性も考えられ、かがるア
プローチからの新規なペプチドの開発も期待されていた
のである。

［課題を解決するための手段］ このような状況から、本発明者等は、ＩｇＥ抗体由来ペ
ンタペプチドよりも強い活性を有するペンタペプチドの
開発のために、関連誘導体の新規デザインを試みｔ；。

すなわち、本発明者等は、次の一次構造式％式％ で示されるペンタペプチドを新たにデザインし、このも
のの化学伝達物質遊離抑制作用活性の探索を重ねた結果
、このペンタペプチドは、ＩｇＥ抗体由来ペンタペプチ
ドよりも強い活性作用を、ＩｇＥ抗体の関与するヒスタ
ミン遊離抑制作用において特異的に示すことを見出した
のである。

そして驚くべきことには、この新規なペンタペプチドは
、更に上記のヒスタミン遊離抑制作用の他に、新たな活
性作用としてＩｇＥ抗体産生抑制作用をも有するもので
あることを見出したのである。

従って、本発明はヒスタミン遊離抑制作用と共にＩｇＥ
抗体産生抑制作用をも有する次の一次構造式 ％式％ で示される新規な生理活性ペプチド又はその薬学的に許
容される塩及び、これを有効成分とする抗アレルギー剤
に関するものである。

本発明は製薬的に許容される担体又は希釈剤と本化合物
又は医薬品として許容されるその塩からなる製剤を包含
する。塩の好ましい例はナトリウム塩、カリウム塩等の
アルカリ金属塩及びカルシウム塩、マグネシウム塩等の
アルカリ土類金属塩のような金属塩、アンモニウム塩、
有機塩基類、有機酸塩、無機酸塩等が挙げられる。本製
剤は、患者への投薬後、活性成分が迅速に、持続的にま
たは遅延的に遊離するように製剤化することができる。

本発明の抗アレルギー剤は経口的又は非経口的に投与す
るための形態を適宜に採り得る。代表的な投与方法とし
ては経口、直腸、皮膚透過、皮下、静脈内、筋肉内、吸
入または鼻腔内経路を含む種々の経路により投与するこ
とができる。

これらの投与方法では、本発明の抗アレルギー剤は種々
の薬学的製剤の形態で投与されうる。

これらの薬学的製剤の形態としては、錠剤、硬カプセル
剤、軟カプセル剤、顆粒剤、散剤、トローチ剤、坐剤、
シロップ剤、クリーム剤、軟責剤、ハツプ剤、注射剤、
懸濁剤、吸入剤、エアロゾール剤などがある。また他の
抗アレルギー剤、その他の医薬と共に二重層錠、多重層
錠などとすることもできる。さらに錠剤の場合には必要
に応じて通常の剤皮を施し、例えば糖衣錠、腸溶被錠と
することもできる。

錠剤、顆粒剤、散剤などの固体製剤とする場合は、製剤
化に当って公知の添加剤、例えば乳糖、ショ糖、ブドウ
糖、結晶セルロース、コーンスターチ、リン酸カルシウ
ム、ソルビトール、グリシン、カルボキシメチルセルロ
ース、ヒドロキシプロピルセルロース、アラビアゴム、
ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ステ
アリン酸マグネシウム、タルク、などを添加することが
できる。

半固体製剤とする場合は、植物性ワックス、ミクロクリ
スタリンワックス、脂肪例えばタロー、ラノリンなどの
材料を添加することができる。

液体製剤とする場合は、添加剤、例えば塩化ナトリウム
、ソルビトール、グリセリン、オリーブ油、アーモンド
油、プロピレングリコール、エチレングリコール、エチ
ルアルコールなどの材料を添加することができる。

本化合物の投与量は、患者の年令、体重、症状などによ
り適宜増減することができるが、経口投与の場合の投与
量は１日当たり０．０１〜１０ｍｙ／ｋｇ、鼻腔内では
１回の投与量は０．１−１００＋ＩＩｇである。非経口
投与の場合の量は１日当たり１０〜１．０００μｇ／ｋ
ｇである。

本発明物質は一次構造式が Ａｓｐ−３ｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓによって示さ
れる新規ペプチドであるが、本発明における新規デザイ
ンは次のような理由で行った。まず、前記したＡｓｐ−
Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−ＡｒｇのＣ端のＰｒｏ−Ａｒ
ｇについてＰｒｏを同じ中性アミノ酸であるＧｌｙにし
、塩基性アミノ酸のＡｒｇをホモロジーの最も近いＬｙ
ｓに置換するデザインを行った。

本発明物質は逆相ＨＰＬＣ（ＯＤＳカラム、ＹＭＣ−Ｄ
−ＯＤＳ、　２Ｑｍｍ　Ｘ　２５Ｑｍｉ）　、溶媒は０
．１％ＴＦＡ−７０％ＣＨ、ＣＮのグラジェントにより
単一ピークを示し、酵素分解後のペプチドマツプおよび
加水分解後のアミノ酸分析値によって確認される。

本発明物質は公知の固相法あるいは液相法を使用して合
成することができる。従って例えば一般にメリフィール
ド法と呼ばれる固相法によりＢｅｃｋｍａｎ社製合成機
Ｍｏｄｅ１９９０Ｂを使用して以下のように合成すれば
よい。

まずＮ端をターシャリ−ブトキシカルボニル基（Ｂｏｃ
と略記）で保護した本発明物質に係るＣ端アミノ酸をク
ロロメチル樹脂担体にアミド結合あるいはエステル結合
させる。具体的には例えばクロロメチル樹脂にＢＯＣ−
ＬＹＳ（２Ｃ（２−Ｚ）、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ、　Ｂｏｃ−
Ａｓｐ（Ｂ−ＯＢｚｌ）あるいはＢｃｃ−Ｓｅｒ（０−
Ｂｚ　ｌ）を結合させる。次いでＢｏｃを酸で脱離し、
あらかじめＮ端および必要ならば側鎖の官能基を保護し
たＣ端より２番目のアミノ酸を縮合させてペプチドを形
成させる。この際３〜５倍量の保護アミノ酸を用い、縮
合剤にはジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣと略
記）を用いる。また反応の終末はニンヒドリンでアミノ
基の反応が陰性になる点によって確認する。このように
Ｎ端および必要ならば側鎖の官能基を保護したアミノ酸
を本発明物質の一次構造式におけるアミノ酸分析の順序
に従って順次縮合させ、最終的に官能基およびＮ末端が
保護された本発明物質を得る。最後に本発明物質を保護
基並びに樹脂より脱離するために弗化水素で処理する。

この際副反応を防止するためにはアニソールを添加する
。弗化水素を除いて得られる粗合成物はイオン交換クロ
マトグラフィーで精製すればよい。

高速液体クロマトグラフィーで純度を確認し、必要があ
れば分収用高速液体クロマトグラフィーを用いてさらに
精製すれば純粋な本発明物質を得ることができる。本発
明物質の純度と構造の確認は高速液体クロマトグラフィ
ー、ペプチドマツプ、アミノ酸分析等を行えばよい。

［作　用］ 本発明はＩｇＥ抗体のＦｃ領域にあるペンタペプチドか
ら見出された新規ペンタペプチドであり、ＩｇＥ抗体に
基づくヒスタミン遊離を特異的に抑制する。またこの新
規ペンタペプチドはアレルギーの厚刃となる［ｇＥ抗体
の産生をも抑制する。

従って、この新規ペンタペプチドはヒスタミン等の化学
伝達物質の遊離によって起こるアレルギー疾患を予防ま
たは治療するための治療剤としての有用性が期待される
のみならず、ＩｇＥ抗体産土産生加することによって起
こるアレルギー疾患を予防または治療するための治療剤
としての有用性も期待され、この新規ペンタペプチドが
有する上記した２つの作用効果により、上記した■型ア
レルギー反応の発症の３つの段階の連鎖を２つの段階に
おいて遮断しうろことになり、複数の薬剤を併用するこ
となく連鎖を２つの段階で遮断しうる効果を有すること
になる。

しかしてこの新規ペンタペプチドを構成する成分は天然
のアミノ酸であるから、生体内で容易に代謝され安全性
も高い。

［実施例］ 以下に記載する実施例によって本発明を具体的に説明す
る。

実施例 ベックマン社製ペプチド合成ｉｌｌ　Ｍｏｄｅ　１９９
０Ｂの反応漕に１．５ｈのＢｏｃ−Ｌｙｓ（２Ｇ＋２−
ｚ）−Ｃｈｌｏｒｏｍｅｔｙｌｒｅｓ　１ｎＣＢｏａ−
Ｌｙｓ（２ＣＩ２−ｚ）含有０．３３ｍｍｏ４／　ｇ、
ＶａｇａＢｉｏｃｈｅｍ、製〕をまず入れＣＨ２Ｃｌ２
２中にて２時間撹拌し膨潤させる。

次に以下に示す５ｔｅｐの手順により次のＢｏｃ−ｃｔ
ｙを反応させる。

（１）　　ＣＨｚＣＱｚ　２０ｍＱテ２分／３回洗浄。

（２）　　ＭｅＯＨ２０ｍ（ｌで２分／３回洗浄。

（３）　　ＣＨｚＣＱ２２０ｍＱで２分／３回洗浄。

（４）　　４５％ＴＦＡおよびＣＨ２（４２２０ｍＱで
５分／１回洗浄。

（５）　　４５％ＴＦＡおよびＣＨｚＣＱｚ　　２０ｍ
Ｑで１５分／１回洗浄。

（６）　　ＣＨｚＣＱ２２０ｍＱで２分／３回洗浄。

（７）　　ＭｅＯＨ２０ｍＱで２分／３回洗浄。

（８）　　ＣＨ２Ｃｌ２２２０ｍＱで２分／３回洗浄。

ここでニンヒドリンでアミン基の反応が陽性になること
を確認する。

（９）　　１０％ＴＦＡおよびＣＨ２Ｃｌ２２２０ｍＱ
で２分／１回洗浄。

（１０）　ＣＨ２ＣＱｚ　２０ｍ（ｌで２分／３回洗浄
する。

（１１）　Ｂｏａ保護アミノ酸４当量とＣＨＩＣＱｔ　
　ｌＯｍＱをＤＣＣ２当量とＣＪＣｎｚ　５　ｍ（ｌ混
合液に溶解し、添加後氷水中で２０分間振りまぜて反応
させる。

生じた沈澱を乾燥させガラスフィルターで吸引濾過し、
Ｂｏｃ−アミノ酸無水物を得る。

（１２）　ＣＨｚＣＱｚ　２０ｍＱで２分／３回洗浄し
、ニンヒドリンでアミノ基の反応が陰性になる点を確認
する。

（１３）　ＭｅＯＨ２０ｍＱで２分／３回洗浄。

（１４）　ＣＨｚＣＱｚ　２０ｍＱで２分／３回洗浄。

以上によってＢｏａ−Ｇｌｙの導入が終了する。

以下類火ｃｒｙよりＮ端へ５ｔｅｐ（１）より（１４）
を繰り返す。加える保護アミノ酸は以下の順序である。

ＢＯＣ−ＡＳＩ）（Ｂ−ＯＢＺＩ）　　１．５０ｇ、Ｂ
ｏａ−３ｅｒ（０−Ｂｚｌ）　　　１．５０ｇ、Ｂｏａ
−Ａｓｐ（Ｂ−ＯＢｚｌ）　　１．５０ｇ以上の操作が
すべて終了すると樹脂上に次の保護ペプチドが合成され
る。

Ｂｏａ−Ａｓｐ（Ｂ−ＯＢｚｌ）−Ｓｅｒ（０−Ｂｚｌ
）−Ａｓｐ（Ｂ−ＯＢｚｌｌＧｌｙ−Ｌｙｓ（２ＣＱ−
ｚ）−樹脂 この樹脂上に結合した保護ペプチドは前述の５　ｔｅｐ
（１）〜（１４）を実施後戸数しデシケータ中で一晩乾
燥する。乾燥した保護ペプチド樹脂、１．９４９が得ら
れる。これを取り、アニソール２ｍＱ％ＤＭＳ　Ｏ，５
ｍ＋２存在下弗化水素３０ｍ＜１で０°Ｃ１時間処理す
る。弗化水素を留去し、無水エーテルｎ−ヘキサン（１
：　ｌ）混液で洗浄し、無水エーテルのみで洗浄し、十
分乾燥させた後１０％酢酸５０ｍαにペプチドを溶解さ
せ、不溶樹脂を枦去する。

得られた溶液はＤｏｖｅｘ　ｌＸ−２カラム（１，０１
Ｘ１５ｈ　ｃｍ）にかけ、２Ｎ酢酸で溶出させ、得られ
た溶液は０．２２μミリポアフィルタ−にて濾過後、凍
結乾燥する。３６０ｍｇの粗ペプチドが得られる。

これをさらに以下に示す条件にて高速液体クロマトグラ
フィーにかける。

カラム：　ＹＭＣ−Ｄ−ＯＤＳ　２０ｍｍＸ　２５０ｍ
ｍ溶　媒：０．１％ＴＦＡにＡｃＣＮが０％から７０％
の混液に至るまでの直線勾配をもった溶媒 流　　速　：　　１．ＯｍＱ／ｍｉｎ 当該高速液体クロマトグラフィーにより純度９７％の純
粋ペプチドが４６．８ｍｇ得られる。この場合に、収率
は１３％となる。得られる純粋ペプチドにつきペプチド
マツプおよびアミノ酸分析値を求め、本発明物質である
ことを確認した。なお、記載中の略号は次のごとくであ
る。

２ＣＱ−ｚ　：　２−Ｃｈｌｏｒｏｂｅｎｚｙｌｏｘｙ
ｃａｒｂｏｎｙｌＢｚｌ　　：　Ｂｅｎｚｙｌ 本発明の新規ペプチドは、高速液体クロマトグラフィー
による以下の記載の分離条件溶出液：０，１％ＴＦＡ−
Ｈ２０ 流　　速　：　　ｌ　ｍＱ／ｍｉｎ 検　　出　：　　２１０ｎｍ カラム：　ＹＭＣＲ−ＯＤＳ（４，６ｍｍＸ　２５０ｍ
ｍ）で分析した結果を第１図に示し、赤外線吸収スペク
トルを第２図に示す。

また、本発明の新規ペプチドは特性として疎水性塵（Ｈ
Ｉ）：　　ｔ−ｓａ 分　　子　　量　　　　：　　５２０．６等　　電　　
点　　　　：３．７ の物性値を示す。

本発明者が本実施例によって得た物質について行ったア
ミノ酸分析の結果を参考までに次に示す。

６ＮＨＣα（０，１％フェノール含有）中で１１０°Ｃ
１２４時間の加水分解反応を行った後に、日立アミノ酸
分析計８３５型によって分析した。下記のごとく実験値
は理論値によく一致し、本発明の目的物質であることを
確立した。

アミノ酸　　理論値　　実験値 Ａｓｐ　　　　　２．０　　　２．０ Ｓｅｒ　　　　　１．０　　　１．０ Ｇｌｙ　　　　　１．０　　　１．Ｉ Ｌｙｓ　　　　　１．０　　　１．０ ［発明の効果１ 以下の実験例によって本発明の効果を示す。

実験例　１ 本発明の抗アレルギー作用を調べるため肥満細胞からの
ヒスタミン遊離抑制作用試験を行った。

（方　法） 体重３００〜３５０ｇの雄性ウィスター系ラットを受動
感作した後、その腹腔的肥満細胞を用いた。

受動感作に用いるラット抗血清を得るためにＭｏＬａの
方法（Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、　７．　Ｐ、６８１　（
１９６４））およびＨａｍａｏｋａの方法（Ｊ、　Ｉｍ
ｍｕｎｏｌｏｇｙ、　１１３．Ｐ、９５８（１９７４）
）に準じて調整した。すなわち、卵白アルブミン（１０
１１９／　＆１？）をウィスター基地ラット（体重２０
０−２５０ｇ）の両大腿部筋肉内に５ｍ（２／ｋｇを注
射し、同時に２ＸＩＯ”個の百日咳死菌（Ｋｉｌｌｅｄ
　Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ　Ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）を腹腔
内投与して免疫した。初回感作より１２日目にエーテル
麻酔下に腹部大動脈より採血し、抗血清を分離した。抗
血清は一２０°Ｃで凍結保存した。抗血清の力価は４８
ｈ「ラットＰＣＡ反応より測定し、その力価が１２８〜
２５６倍のものを実験に供した。得られた卵白アルブミ
ンラットＩｇＥ血清を２倍希釈し、１ｍＱを腹腔内投与
して感作した。感作４８ｈｒ後ラツトを出血致死させた
後、腹腔内にリン酸緩衝塩溶液（ＮａＣＱ８　ｇ、Ｋ（
４０，２ｇ、Ｎａ、ＨＰＯ，・１２８ｚｏ　２．８８ｇ
、ＫＨ２ＰＯ４０−２９、ＥＤＴＡ・２Ｎａ　０．２ｉ
？、ウシ血清アルブミン１ｇを精製水に溶かしてＩＱと
した溶液、ｐＨ７，４、以下ＰＢＳ（−）と略記する）
１５ｍＱを注入し、約２分間、軽く腹部マツサージ後開
腹して腹腔内細胞を採取した。この細胞浮遊液を遠心分
離（１，ＯＯＯｒｐｍ、　１０分間）し、ざうにＰＢＳ
（−）で再懸濁させ、アラビアゴム比を液（比重１．０
７５）に重層し、遠心分離（２，５００ｒｐｍ。

１０分間）した。この沈渣した細胞をＰＢＳ（−）で２
回洗浄後、新たなＰＢＳ（ＰＢＳ（−）のうちＥＤＴＡ
　・２Ｎａに代えテｃａｃＪ　００ｌｆＦを添加した溶
液、ＰＢＳ（＋）と略記する〕に浮遊させ、ｌ　Ｘ　１
０’個／ｍＱに調整した後、シリコン処理した試験管に
０．８ｍＱずつ分注し、３７°Ｃで１０分間プレインキ
ュベニトシタ。

ＰＢＳ（＋）で濃度調整した検体溶液０．１ｍ（２を細
胞浮遊液を入れた試験管に添加し、３７°Ｃで１５分間
インキュベート後、肥満細胞からヒスタミンを浮遊させ
るために抗原である卵白アルブミン（最終濃度１　ｍｇ
／　ｍａ）とフォスフアジチル−し−セリン（最終濃度
１００μｇ／　ｍ（２）の混合溶液０　、１ｍＱ　ヲ加
え、さらに１５分間インキュベートしてヒスタミンを浮
遊させた。ＤＳＣＧは抗原添加３０秒前に加え、抗原添
加後頁に１５分間インキュベートした。

ついで氷冷したＰＢｓ（＋）１ｍαを加え反応を停止さ
せ、２　、５０Ｑｒｐｍで１０分間遠心分離した。上清
２ｒｍＱを取り、４％過塩素酸溶液ＩＩを加え、遊離ヒ
スタミン量を定量する試料とした。全ヒスタミン量は無
処置の肥満細胞浮遊液（１ｘ１０ｓ個／ｍ１２）　０．
８＋ｎＱを１０分間沸騰水中に置き、ついで４％過塩素
酸を添加した全ヒスタミン量を定量する試料とした。

各試料のヒスタミン量は蛍光法により測定し、次式によ
り、ヒスタミン遊離率（％）を算出しＩこ　。

（Ｍ　果） 本発明化合物の各濃度のヒスタミン遊離率（％）を添付
の第３図に示した。第３図から明らかなごとく、本発明
化合物は１０−’Ｍの濃度でヒスタミン遊離抑制作用を
示した。その作用の強さはＤＳＣＧと同程度又はそれ以
上であった。

実験例　２ 本発明の抗アレルギー作用を調べるために、マウスを用
いたＩｇＥ抗体産生抑制作用試験を行つ　ｌこ　。

（方　法） 免疫動物は１群５匹のＢＡＬＢ／ｃ雄マウス（２０〜２
５ｇ）とし、抗原のＩＯ＃　ＤＮＰ−ＢＳＡを免疫増強
剤の水酸化アルミニウムゲル４ｍｇに吸着させ、下記に
示す実験方法で行った。

実験２−１は本発明化合物ｌ及び１ｏｍｙを腹腔的投与
し、３０分後にＤＮＰ−ＢＳＡを腹腔的投与し、その後
１４日目に採血して血清を得る。

実験２−２はＤＮＰ−ＢＳＡを腹腔的投与し、１３日目
に本発明化合物Ｉｍｇ及び１０ｍ９を腹腔的投与する。

翌日、再度ＤＮＰ−ＢＳＡを同様に免疫し、その後１４
日目に採血して血清を得る。

実験２−１及び２−２で得られた血清はラットの４８時
間ＰＣＡ反応を行い、抗体価を測定した。

すなわち、Ｗｉｓｔａｒ系雄ラット基地００　＝　２５
０ｇ）の背部皮肉に血清を感作し、４８時間後に０．５
％Ｅｖａｎｓ　ｂｌｕｅを含むＤＮＰ−ＢＳＡ溶液を尾
静脈内注射し、３０分後に発現する色素斑によってＩｇ
Ｅ抗体価を測定した。なお、ＰＣＡ反応で得られた抗体
価がＩｇＥ抗体であることを確認するために、血清は無
処置の他にＳ６°ｃ、　３時間の加熱処置を行い、ＰＣ
Ａ反応によって抗体価を測定しｔ；。

（結　果） 本発明化合物の各濃度のｆｇＥ抗体産生量をＰＣＡ反応
で求めた抗体価で添付の第４図及び第５図に示した。第
４図及び第５図から明らかなごとく、本発明化合物はＬ
ａｇ及びｌｏｍｇの濃度でＩｇＥ抗体抗体全土く抑制し
た。なお、加熱処理血清の抗体価は実験２−１の血清（
第４図）では０であったが、実験２−２の血清は第５図
（斜線）に示したごとく、わずかではあるが抗体価を示
した。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明の新規ペプチドの高速液体クロマトグラ
フィーによる分析結果を示し、縦軸は２１０ｎｍの紫外
線吸収の強度、横軸は溶出時間（分）を示す。 第２図は赤外線吸収スペクトルを示す。 第３図は本化合物のヒスタミン遊離率（％）を示したグ
ラフである。縦軸にヒスタミン遊離率（％）、横軸に本
化合物濃度（Ｍ）と対照物質を示している。 第４図は本化合物の前投与によって産生されたＩｇＥ抗
価抗性活性したグラフである。 第５図はＩｇＥ抗体産生の持続期に投与した場合に産生
されたＩｇＥ抗体活性を示したグラフである。 なお、第５図の斜線の部分は加熱処理した血清の抗体価
を示したものである。第４図及び第５図はそれぞれ縦軸
に抗体価、横軸にコントロールと本化合物の投与ｆｋ　
Ｃｍｇ／ｋｇ）を示している。 特許出願人　日立化成工業株式会社 外２名 第５図

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）一次構造式Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙ
   ｓで表わされる新規ペプチド又はその薬学的に許容され
   る塩。 ２）請求項１に記載の新規ペプチド又はその薬学的に許
   容される塩を有効成分として含有する抗アレルギー剤。