JPH03120294A - 抗アレルギー性ペンタペプチドの製造法及び中間体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野コ 本発明は、抗アレルギー性ペンタペプチドの製造法及び
その中間体に関する。

［従来の技術］ 各種アレルギー疾患の予防及び治療のために種々の薬物
が提案され、開発が行われ、既にいくつかが市販に供さ
れている。

アレルギー症状のうち、即時型アレルギー反応である気
管支喘息、じん麻疹、アレルギー性鼻炎などは１型アレ
ルギー反応として分類される。このＩ型アレルギー反応
は、発症機序および抗アレルギー剤の作用機序から一般
に次の三段階から成るものと考えられている。すなわち
、最初体内に侵入した外来性抗原に対して、マクロファ
ージ、Ｔ細胞及びＢ細胞の相互作用によってｒｇＥ抗体
が産生され、このＩｇＥ抗体が組織の肥満細胞や血中の
好塩基球のＦｃレセプターに固着して感作が成立するこ
とになる。この過程が第１段階である。つぎに、再び外
来抗原が体内に侵入すると、細胞のＦｃレセプターに固
着したＩｇＥ抗体と外来性抗原が結合し、抗原抗体反応
が引き金となって細胞膜酵素の活性化、細胞内へのカル
シウムイオンの流入などが起こり、それによって酵素反
応などの生化学的変化、脱顆粒などの′Ｍｉｍ学的変化
が引き起こされる。その結果、ヒスタミンや５Ｒ３−Ａ
などのケミカルメデイエータ−（化学伝達物質）が細胞
外へ遊離される。この過程が第２段階である。上記、第
２段階で細胞外に遊離したケミカルメデイエータ−は、
平滑筋の収縮、毛細血管透過性の亢進及び粘液の分泌を
促進し、種々のアレルギー症状を惹起する。この過程が
第３段階である。

従来から知られている抗アレルギー剤のうち、非特異的
減感作療法剤及び抗体産生抑制剤は第１段階に作用する
薬物である。しかし、この第１段階のみに特異的に作用
する薬物は市販されていない。第２段階に作用する薬物
としては、クロモグリク酸ナトリウム（以下、ＤＳＣＧ
と略す）、トラニラストなどのケミカルメデイエータ−
抑制剤がある。また抗ヒスタミン剤及び気管支拡張剤は
第３段階に作用する薬物である。更に特公昭６０−２３
１８号公報には抗アレルギー性ペプチドについての開示
がなされている。

上記公報によればこのペプチドは下記の一次構造式 ％式％ によって示されるように、ＩｇＥ抗体のＦｃ領域のアミ
ノ酸残基５個から成るＩｇＥ抗体由来のペンタペプチド
である。

このペプチドは第１段階のＩｇＥ抗体産生を抑制する作
用は確認されていないが、第２段階の最初に起こる肥満
細胞へのＩｇＥ抗体の結合を阻止すると共に、第２段階
の既に結合したＩｇＥ抗体をこのペプチドで置換するこ
とによって、アレルギーを遮断する性質をもつものと考
えられる。

［発明が解決しようとする課題］ 従来の抗アレルギー剤の開発は、上記のアレルギー症状
発症の３つの段階のうちの１つの段階に作用する薬物の
開発に向けられ、この３つの段階の連鎖をいずれかの段
階で遮断することによってアレルギー症状発症を予防し
、又は治療する療法の研究が行われてきた。そしてこの
ような研究によるアレルギー症状発症の３つの段階のう
ちの１つの段階に作用する薬物の開発によって一応の効
果が期待される療法が開発されている。

しかしながら、既知のこうした化学療法剤は上記の３つ
の段階の連鎖を完全に遮断するものではない。そのため
、３つの段階の１つに作用する薬剤と他の１つに作用す
る薬剤とを組み合わせて用いることによって、連鎖の遮
断を完全なものとする発想のものに複数個の薬剤を組み
合わせて使用することも行われているが、その効果は必
ずしも期待通りのものではない。

そこで、単一の薬剤で上記のアレルギー症状発症の３つ
の段階のうちの複数の段階に作用しうる薬剤が開発され
た場合には、抗アレルギー剤としての効果が飛躍的に増
大されうろことが期待され、このような薬剤の開発が望
まれているのである。

また上記のアレルギー症状発症のメカニズムから、Ｉｇ
Ｅ抗体のＦｃ領域由来のペプチド又はそれと類似するペ
プチドを開発することによって優れたアレルギー剤が入
手できる可能性も考えられ、このようなアプローチから
の新規なペプチドの開発も期待されていたのである。

本発明は、ＩｇＥ抗体のＦｃ領域のペプチド部分又はそ
の類似ペプチドを種々合成し、優れた薬理活性をもつ抗
アレルギー性ペプチドを提供することを目的とする。

［課題を解決するための手段］ 上記目的を達成するため、本発明者らはＩｇＥ抗体のＦ
ｃ領域にみられるペプチドに着目し、先にＨ−Ａｓｐ−
Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨで表される新規
なペンタペプチド、その塩及びペプチド性抗アレルギー
剤を提案した（特願昭６３−７２０１１号公報）。

本発明は先のＨ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌ
ｙｓ−ＯＨで表わされるペンタペプチドを液相法で容易
に製造する方法及びその中間体を提供するものである。

本発明のＨ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ
−ＯＨで表されるペンタペプチドの薬学的に許容される
塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金
属塩及びカルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土
類金属塩のような金属塩、アンモニウム塩、有機塩基類
、有機酸塩、無機酸塩等が挙げられる。

本発明のＺ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｓｅｒ−Ａｓｐ（Ｏ
Ｂｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌで表される
Ｌ−アスパラギン酸−Ｌ−セリン−Ｌ−アスパラギン酸
−グリシン−Ｌ−リジン誘導体はＨ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−
Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨで一表されるペンタペプ
チドの中間体である。

本発明のＢｏｃ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ　（ＯＢｚｌ）−Ｇｌ
ｙ−Ｌｙｓ　（Ｚ）　−ＯＢｚｌで表されるＬ−セリン
ーＬ−アスパラギン酸−グリシン−Ｌ−リジン誘導体は
Ｚ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｓｅｒ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）
−Ｇ１ｙ＝Ｌｙｓ　（Ｚ）−ＯＢｚｌの中間体である。

本発明の式〔Ｉ〕で表されるペンタペプチドＨ−Ａｓｐ
−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨは下記の第１
〜８の工程を経て製造することができる。

第１の工程： 第２の工程： Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ　（Ｚ）　−ＯＢｚｌ　−Ｈ−
Ｇｌｙ−Ｌｙｓ　（Ｚ）　−ＯＢｚｌ第３の工程： 第４の工程： Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−
ＯＢｚｌ−”Ｈ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ
（Ｚ）−ＯＢｚｌ第５の工程： →Ｂｏｃ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙ
ｓ（Ｚ）ＯＢｚｌ第６の工程： Ｂｏｃ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ　（ＯＢｚｌ　）−Ｇｌｙ−Ｌ
ｙｓ　（Ｚ）　−ＯＢｚｌ−Ｈ−８ｅｔ−Ａｓｐ　（Ｏ
Ｂｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ　（Ｚ）　−ＯＢｚｌ第７の
工程 →Ｚ−Ａｓｐ　（ＯＢｚ　１　）＝Ｓｅｒ−Ａｓｐ　（
ＯＢｚ　１）　−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ　（Ｚ）　−ＯＢｚｌ
第８の工程 Ｚ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｓｅｒ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）
−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌ→Ｈ−Ａｓｐ−Ｓｅ
ｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨただしＳｅｒ、　Ａ
ｓｐ、　Ｇｌ−セリン、ＡｓｐＬｙｓ、′Ｂｏｅ、　Ｚ
及びＢｚｌは上記と同じで次の意味を表わす。

Ｓｅｒ　：　Ｌ−セリン残基 Ａｓｐ　：　Ｌ−アスパラギン酸残基 Ｇｌｙニゲリシン残基 Ｌｙｓ：Ｌ−リジン残基 Ｂｏｃ　：　ｔ−ブチルオキシカルボニルＺ：ベンジル
オキシ力ルボニル Ｂｚｌ　：ベンジル 第１の工程で用いるα−アミノ基をＢｏｃ基で保護した
グリシン誘導体Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ１及びα−カルボ
キシル基はＢｚｌ基で保護し、β−カルボキシル基はＺ
基で保護したリジン誘導体Ｈ−Ｌｙｓ　（Ｚ）　−０Ｂ
ｚ　１はＬ体のものを用いる。これらは遊離形又は塩の
形のものが市販されており、容易に入手できる。

Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨとＨ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌの
脱水縮合反応は次のようにして行なうことができる。Ｂ
ｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨをジメチルホルムアミド、テトラヒ
ドロフラン、塩化メチレン、アセトニトリル等から選ば
れる溶媒（混合溶媒でもよい）に溶かし、０°Ｃ以下、
好ましくは一８℃以下、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨに対しモ
ル比で１．０〜１．４倍量のジシクロへキシルカルボジ
イミド（以下ＤＣＣと略す）及び１−ヒドロキシベンツ
トリアゾール（以下ＨＯＢｔと略す）を加えて撹拌し、
Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨに対して等モルのＨ−Ｌｙｓ　（
Ｚ）−ＯＢｚｌを加え、０℃以下、好ましくは一８℃以
下、１〜１０時間、好ましくは４〜６時間撹拌する。引
き続き室温で１〜１０時間、好ましくは４〜６時間撹拌
する。この段階で温度を初めに０°Ｃ以下とするのは副
生物（アシルイソ尿素）の生成を抑えるためであり、次
いで温度を室温とするのはペプチド結合の形成を促進さ
せるためである。

反応により生成する副生物及び未反応の原料は濾過、ア
ルカリ洗浄等の適当な方法で除き、溶媒は減圧蒸発等の
方法で除いたのち、再結晶等により、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−
Ｌｙｓ　（Ｚ）−ＯＢｚｌを得る。

第２の工程で、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚ
ｌから、Ｂｏｃ基を外すために用いる酸としてはトリフ
ルオロ酢酸Ｃ以下、ＴＦＡと略す）、塩酸、酢酸、臭化
水素酸、ギ酸等がある。これらの酸と共に、アニソール
、チオアニソール、フェノール、メタクレゾール等のカ
チオン除去剤を加えてもよい。Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ
　（Ｚ）−ＯＢｚｌの１０〜３０倍量（モル比）のＴＦ
Ａ等の酸と１〜１．３倍量（モル比）のアニソール等の
カチオン除去剤を加え、Ｂｏｃ基が外れるまで撹拌する
。

反応後、酸及びカチオン除去剤を除くためエーテル、石
油エーテル等の溶媒を加える。沈殿物をとり、真空乾燥
等の適当な方法で乾燥し、Ｈ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ　（Ｚ）
−ＯＢｚｌを得る。

第３の工程で、反応に用いる原料の一つ、α−アミノ基
をＢｏｃで保護し、β−カルボキシル基をＢｚｌで保護
したアスパラギン酸誘導体Ｂｏｃ−Ａｓｐ　（ＯＢｚｌ
）−ＯＨはＬ体のものを用いる。これらは遊離形又は塩
の形のものが市販されており、容易に入手できる。

Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨとＨ−Ｇｌｙ−Ｌｙ
ｓ　（Ｚ）−ＯＢｚｌの脱水縮合反応は次のようにして
行なうことができる。

Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨをジメチルホルムア
ミド等の極性の大きい溶媒に溶かし、０℃以下、好まし
くは一８℃以下、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨに
対しモル比で１．０〜１．４倍量のＤＣＣ及びＨＯＢｔ
を加え、１〜ｌＯ時間、好ましくは４〜６時間撹拌する
。次いで、第２の工程で得たＨ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）
−ＯＢｚｌをＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨに対し
て等モルとり、ジメチルホルムアミド等の溶媒に溶かし
て加え、更に１０℃以下で１〜２４時間撹拌する。この
反応を１０℃以下で行うのはＡｓｐ−Ｇｌｙのあいだで
起こる副反応（イミド体の生成）を抑えるためである。

反応終了後、副生物及び未反応の原料の除去は第１の工
程と同様に行い、再結晶等によりＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢ
ｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌを得る。

第４の工程では、第３の工程で得たＢｏｃ−Ａｓｐ（Ｏ
Ｂｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌを、第２の
工程と同様な条件で、酸によりＢｏｃ基を外す。

第５の工程で、反応に用いる原料の一つ、α−アミノ基
をＢｏｃ基で保護したセリン誘導体、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ−
ＯＨはＬ体のものを用いる。これは、遊離形のものが市
販されており、容易に入手できる。

Ｂｏｃ−Ｓｅｒ−ＯＲとＨ−Ａｓｐ　（ＯＢｚｌ）　−
Ｇｌｙ−Ｌｙｓ　（Ｚ）−ＯＢｚｌの脱水縮合反応は第
１の工程の脱水縮合反応の場合と同様に行なう。

第６の工程では、第５の工程で得たＢｏｃ−Ｓｅｒ−Ａ
ｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌを
第２の工程と同様な条件で、酸によりＢｏｃ基を外す。

第７の工程で、反応に用いる原料の一つ、α−アミノ基
をＺ基で、β−カルボキシル基をＢｚｌ基で保護したア
スパラギン酸誘導体、Ｚ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨは
Ｌ体のものを用いる。これは、遊離形又は塩の形のもの
が市販されており、容易に入手できる。

Ｚ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨとＨ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ（
ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌの脱水縮
合反応は、第３の工程と同様な条件で行なう。

第８の工程では、第７の工程で得たＺ−Ａｓｐ（ＯＢｚ
ｌ）−Ｓｅｒ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（
Ｚ）−ＯＢｚｌを接触還元により、保護基を外して、目
的とするペンタペプチドＨ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−
Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨを得る。触媒として、Ｐｄ黒や炭
素粉末を担体としたＰｄ炭素触媒等を用い、Ｚ−Ａｓｐ
（ＯＢｚｌ）−Ｓｅｒ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−
Ｌｓｙ（Ｚ）−ＯＢｚｌを、例えばメタノール、酢酸、
水の混液等の溶媒に溶かし、水素ガスを通じ撹拌すれば
よい。

反応終了後、触媒をろ過により除く。ろ液は液が少量に
なるまで減圧濃縮し、エーテル等の有機溶媒を加えて振
り混ぜ、未反応の原料及び不純物等を除く。水層から、
ゲルクロマトグラフィー等の通常の精製手段により、精
製されたＨ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ
−ＯＲを得る。

式〔Ｉ〕で表されるペンタペプチドの薬学的に許容され
る塩は、上記第８の工程において保護基を外したのちに
、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の塩基又は塩酸
、酢酸等の酸を加え、相当する塩とすることもできるし
、式〔Ｉ〕で表されるペンタペプチドを単離したのち、
上記と同様に塩基又は酸を加えて塩とすることもできる
。

本発明物質の構造、純度の確認は高速液体クロマトグラ
フィー、元素分析、アミノ酸分析等により行う。

本発明の抗アレルギー剤は製薬的に許容される担体又は
希釈剤と本化合物又は医薬品として許容されるその塩か
らなる製剤を包含する。塩の好ましい例はナトリウム塩
、カリウム塩等のアルカリ金属塩及びカルシウム塩、マ
グネシウム塩等のアルカリ土類金属塩のような金属塩、
アンモニウム塩、有機塩基類、有機酸塩、無機酸塩等が
挙げられる。本製剤は、患者への投薬後、活性成分が迅
速に、持続的にまたは遅延的に遊離するように製剤化す
ることができる。

本発明の抗アレルギー剤は経口的又は非経口的に投与す
るための形態を適宜に採り得る。代表的な投与方法とし
ては経口、直腸、皮膚透過、皮下、静脈内、筋肉内、吸
入または鼻腔内経路を含む種々の経路により投与するこ
とができる。

これらの投与方法では、本発明の抗アレルギー剤は種々
の薬学的製剤の形態で投与されうる。これらの薬学的製
剤の形態としては、錠剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤
、顆粒剤、散剤、トローチ剤、坐剤、シロップ剤、り・
リーム剤、軟膏剤、ハツプ剤、注射剤、懸濁剤、吸入剤
、エアロゾール剤などがある。また他の抗アレルギー剤
、その他の医薬と共に二重層錠、多重層錠などとするこ
ともできる。さらに錠剤の場合には必要に応じて通常の
剤皮を施し、例えば糖衣錠、腸溶被錠とすることもでき
る。

錠剤、顆粒剤、散剤などの固体製剤とする場合は、製剤
化に当って公知の添加剤、例えば乳糖、ショ糖、ブドウ
糖、結晶セルロース、コーンスターチ、リン酸カルシウ
ム、ソルビトール、グリシン、カルボキシメチルセルロ
ース、ヒドロキシプロピルセルロース、アラビアゴム、
ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ステ
アリン酸マグネシウム、タルク等を添加することができ
る。

半固体製剤とする場合は、植物性ワックス、ミクロクリ
スタリンワックス、脂肪例えばタローラノリンなどの材
料を添加することができる。

液体製剤とする場合は、添加剤、例えば塩化ナトリウム
、ソルビトール、グリセリン、オリーブ油、アーモンド
油、プロピレングリコール、エチレングリコール、エチ
ルアルコールなどの材料を添加することができる。

式ＣＩ）で表されるペプチドの投与量は、患者の年令、
体重、症状などにより適宜増減することができるが、経
口投与の場合の投与量は１日当たり０．０１〜１０ｍｇ
／ｋｇ、鼻腔内では１回の投与量は０．１〜１００ｍｇ
である。非経口投与の場合の量は１日当たり１０〜１，
０００μｇ／ｋｇである。

［実施例］ 以下に記載する実施例によって本発明を具体的に説明す
る。

実施例Ｉ Ｂｏｃ−３ｅｔ−Ａｓ　（ＯＢｚｌ　−Ｇｌ　−Ｌ　ｓ
　Ｚ）−ＯＢｚｌの　゛告Ｈ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌ
−ＨＣｌ　（国産化学製）　２０．３５ｇをジメチルホ
ルムアミド（以下、ＤＭＦと略す）　３５ｍ１に溶解し
、水冷下トリエチルアミン７ｍｌを加え中和したのち、
Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（国産化学製）　８．７６ｇ。

ＨＯＢｔ　（国産化学製）　７．４３ｇ及びＤＣＣ（国
産化学製）！１．３５ｇを加えて３時間、更に４℃で１
６時間撹拌した。副生物のジシクロヘキシル尿素をろ過
により除去後、酢酸エチル３ＱＯｍｌを加え、順次飽和
食塩水、８ｗｔ％炭酸テトリウム、飽和食塩水、８ｗｔ
％クエン酸、そして飽和食塩水で洗浄した。酢酸エチル
層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去し、再び
少量の酢酸エチルに溶かし、ろ過したのち、溶媒を完全
に留去し、オイル状物質（Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ
）−ＯＢｚｌ）　２１．１ｇ　（収率８０％）を得た。

上記のＢｏｃ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌ　１３
．９８ｇにアニソール２ｍｌ及びＴＦＡ２０ｍｌを加え
て溶かし、室温で１時間撹拌しＢｏｃ基を切断した。エ
ーテル／石油エーテル混合溶液（容量比１　：　１）　
８０ｍ１を加え沈澱させたのち、残渣［Ｈ−Ｇｌｙ−Ｌ
ｙｓ（Ｚ）−０Ｂｚ１４ＦＡ］を水酸化ナトリウムを含
むデシケータ−で吸引乾燥した。

別にＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨ（国産化学製）
　８．４１ｇ。

ＨＯＢｔ　３．９２ｇ及びＤＣＣ５，９８ｇをとり、Ｄ
ＭＦ２０ｍｌに溶解し、水冷下３時間撹拌し、次いで先
のＨ−Ｇ１７−Ｌｙｓ　（Ｚ）　−ＯＢｚｌ　４ＦＡの
トリエチルアミン３．６４ｍ１を含むＤＭＦ　（１５ｍ
ｌ）溶液を加え、４℃で一晩撹拌した。

ジシクロヘキシル尿素をろ過で除去後、酢酸エチル４０
０ｍ１を加え、次いで飽和食塩水、８ｗｔ％ＮａｚＣＯ
ｓ、飽和食塩水、８ｗｔ％クエン酸、飽和食塩水及び水
で順次洗浄した。酢酸エチル層を無水流酸ナトリウムで
乾燥し、溶媒を留去し７た。石油エーテルで沈澱させ、
更に酢酸エチル／石油エーテルで再沈澱させＢｏｃ−Ａ
ｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇ１．ｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−０Ｂｚ１
１４．７５ｇ　（収率７６．９％）を得た。

上記のＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（
Ｚ）−ＯＢｚｌ　１０．Ｏｇにアニソール２ｍｌ及びＴ
ＦＡ２０ｍｌを加えて溶かし、室温で１時間撹拌しＢｏ
ｃ基を切断した。エーテル／石油エーテル混合溶液（容
量比１　：　２　）　１５０ｍ１を加え沈澱させたのち
、残渣［Ｈ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ　（
Ｚ）−ＯＢｚｌ・ＴＦＡ］を水酸化ナトリウムを含むデ
シケータ−で吸引乾燥した。

別にＢｏｃ−Ｓｅｒ−ＯＨ（国産化学製）　２．８７ｇ
、　ＨＯＢｔ２．１６ｇ及びＤＣＣ３，３０ｇをとり、
ＤＭＦ２０ｍｌに溶解し、水冷下３時間撹拌し、次いで
先のＨ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−
ＯＢｚｌ・ＴＦＡのトリエチルアミン１．９６ｍ１を含
むＤＭＦ　（２０ｍｌ）溶液を加え、４℃で一晩撹拌し
た。

ジシクロヘキシル尿素をろ過で除去後、酢酸エチル３０
０ｍ１を加え、飽和食塩水、８ｗｔ％Ｎａ２ＣＯ３、飽
和食塩水、８ｗｔ％クエン酸、飽和食塩水で順次洗浄し
た。酢酸エチル層を無水流酸ナトリウムで乾燥し、溶媒
を留去した。石油エーテルで沈澱させ、更に酢酸エチル
／石油エーテルで再沈澱させＢｏｃ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ（
ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌ　５．８
３ｇ　（収率５２％）を得た。

融点：５７〜６０”Ｃ ［α］　”　：　−２３゜５°　（ｃ＝０．５４、ＤＭ
Ｆ）薄層クロマトグラフィーのＲｆ値：　０．８３元素
分析値：　　（Ｃ４２Ｈ５３Ｎ５０ｔ２・３／２Ｈ２０
として）（％） ＣＨＮ 理論値：　　５９．５６　　６．６６　　８．２７実測
値：　　５９．５６　　６．６６　　８．２７酸分解後
のアミノ酸分析値：　（モル比）アスパラギン酸　　０
，８ セリン　　　　　１．１ グリシン　　　　　０．８ リジン　　　　　　１．０ なお、薄層クロマトグラフィーはプレートとしてシリカ
ゲル６０（メルク社製）を用い、展開溶媒はクロロホル
ム／メタノール／水（容量比で８＝３＝１）混液で行っ
た。

実施例２ 実施例１で得たＢｏｃ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ　（ＯＢｚｌ）
　−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ　（Ｚ）−ＯＢｚｌ　２．１７ｇに
アニソール１．５ｍｌ及びＴＦＡ１５ｍｌを加えて溶か
し、室温で１時間撹拌しＢｏｃ基を切断した。エーテル
／石油エーテル混合溶液（容量比１：１　）　８０ｍ１
を加え沈澱させたのち、残渣［Ｈ−５ｅｔ−Ａｓｐ（Ｏ
Ｂｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−０Ｂｚ１４ＦＡ］を
水酸化ナトリウムを含むデシケータ−で吸引乾燥した。

別にＺ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨ（国産化学制）　１
．０４ｇ。

ＨＯＢｔ　Ｏ，４３ｇ及びＤＣＣＯ，６６ｇをとり、Ｄ
ＭＦｌＯｍｌに溶解し、水冷下３時間撹拌し、次いで先
のＨ−３ｅｔ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（
Ｚ）−ＯＢｚｌ−ＴＦＡのトリエチルアミン０．４１ｍ
１を含むＤＭＦ　（ｌｏｍｌ）溶液を加え、４°Ｃで一
晩撹拌した。

ジシクロヘキシル尿素をろ過で除去後、酢酸エチル３０
０ｍ１を加え、飽和食塩水、８ｗｔ％Ｎａｚ　ＣＯ３、
飽和食塩水、０．１Ｎ　ＨＣＩ及び水で順次洗浄した。

酢酸エチル層を無水流酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を留
去した。石油エーテルで沈澱させ、更に酢酸エチル／石
油エーテルで再沈澱させＺ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｓｅ
ｒ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢ
ｚｌ　Ｏ，８５ｇ　（収率３１％）を得た。

融点：５８℃ ［α］　’、’　ニー２０．５°（ｃ＝０．９０、ＤＭ
Ｆ）薄層クロマトグラフィーのＲｆ値：　０．６３元素
分析値：　　（Ｃ５６Ｈ６２Ｈ６０１５・８２０として
）（％） ＣＨＮ 理論値：　　６２．４４　　５，９９　　７．８０実測
値：　　６２．０１　　５．６９　　７．８１酸分解後
のアミノ酸分析値：　（モル比）アスパラギン酸　　２
．１ セリン　　　　　１．０ グリシン　　　　　０．７ リジン　　　　　　０．９ 実施例３ Ｈ−Ａｓ　−Ｓｅｒ−Ａｓ　−Ｇｌ　−Ｌ’　５−ＯＲ
の実施例２で得たＺ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｓｅｒ−Ａ
ｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌ　
４００ｍｇにメタノール２０ｍ１、酢酸８ｍｌ及び水１
２ｍ１を加えて溶かし、５％Ｐｄ−炭素６００ｍｇを加
え、水素ガスを６時間通じ、すべての保護基を切断した
。Ｐｄ−炭素をろ過により除去し、ろ液に水を加え、溶
媒を減圧下で留去し、エーテルで洗浄した。再び水を加
え、約２ｍｌに減圧濃縮したのち、セファデックスＧ−
１０（ファルマシア社製、２．５Ｘ４２ｃｍ）カラムに
かけ、０．５ｗｔ％酢酸水溶液で展開し、フラクション
４ｍｌずつ分取した。２０〜２６番目のフラクションに
単一性のピークを認め、この部分を集め凍結乾燥し、ペ
ンタペプチドＨ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌ
ｙｓ−ＯＨ１０３，６ｍｇ　（収率５２．３％）を得た
。

［α］　２’　：　−１８，６°　（ｃ＝０．１６、Ｈ
２０）薄層クロマトグラフィーのＲｆ値二０．４９高速
液体クロマトグラフィー２第１図 元素分析値： （Ｃ１９Ｈ３２Ｈ６０ｔｔ・、１／２　ＣＨ３ＣＯＯＨ
・３Ｈ２０として）（％） Ｈ 理論値：　　３８．７１　　６．６９ 実測値：　　３９．３２　　６．２６ 酸分解後のアミノ酸分析値： アスパラギン酸　　２．２ セリン　　　　　１．０ グリシン　　　　　０，７ リジン　　　　　　０．９ １３．９５ １３　、５０ （モル比） なお、薄層クロマトグラフィーは、展開溶媒をｎ−ブタ
ノール／ピリジン／酢酸／水（容量比で１：１　：　１
　：　１）混液としたほかは実施例１と同様に行った。

また高速液体クロマトグラフィーはウォーターズ社の高
速液体クロマトグラフィー装置Ｍ６００型で、カラムと
してＹＭＣパックＡ−３０２０ＤＳ（山村化学研究所源
、４　、６　Ｘ　１５０ｍｍ）を用い、溶媒は０．０５
％ＴＦＡを含む水溶液と０，０５％ＴＦＡを含むアセト
ニトリルの９５：５　（容量比）混合液、続いて７０：
３０　（容量比）混合液を段階的に用い、流速は０．５
ｍｌ／ｍｉｎ。

検出波長２２０ｍｍで行った。

次に式ＣＩ〕で表されるペンタペプチドＨ−Ａｓｐ−Ｓ
ｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−（、ｙｓ−ＯＨの薬理活性試験
の結果を示す。

体重３００〜３５０ｇの雄性ウィスター系ラットを受動
感作し、その腹腔内肥満細胞を用いて試験を行った。受
動感作に用いるラット抗血清はＭｏｔａの方法［１ｍｍ
ｕｎｏｌｏｇｙ、二Ｌ　Ｐ、６８１　（１９６４）］お
よびＨａｍａｏｋａの方法　［Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇ
ｙ、　１１３　．９５８　（１９７４）］に準じて作製
した。すなわち、卵白アルブミン（１０ｍｇ／ｋｇ）を
ウィスター系雄ラット（体重２００〜２５０ｇ）の両大
腿部筋肉内に５ｍｌ／ｋｇを注射し、同時に２　Ｘｌｏ
ＩＯ個の百日咳死菌（Ｋｉｌｌｅｄ　Ｂｏｒｄｅｔｅｌ
ｌａＰｅｒｔｕｓｓｉｓ　）を腹腔内に投与して免疫し
た。初回感作から１２日目にエーテル麻酔下に腹部大動
脈から採血し、抗血清を分離した。抗血清は一２０℃で
凍結保存した。抗血清の力価は４８ｈｒラットＰＣＡ反
応により測定し、その力価が１２８〜２５６倍のものを
実験に供した。得られた卵白アルブミンラットＩｇＥ血
清を２倍希釈し、その１ｍｌを腹腔内に投与して感作し
た。感作４８ｈｒ後にラットを出血致死させ、腹腔内に
リン酸緩衝化液（ＮａＣ１ｇｇ、ＫＣＩ　Ｏ，２ｇＮａ
２ＨＰＯ４４２ＨｚＯ２，８８ｇ、　ＫＨ２ＰＯ４０，
２ｇ、　ＥＤＴＡ・２ＮａＯ１２ｇ及びウシ血清アルブ
ミン１ｇを精製水に溶かして１リツトルとした溶液、ｐ
Ｈ７、４、以下ＰＢＳＣ−）と略記する）１５ｍｌを注
入し、約２分間軽く腹部をマツサージ後、開腹して腹腔
内細胞を採取した。

この細胞浮遊液を遠心分離（１，００Ｏｒｐｍ、　１０
分間）し、更にＰＢＳ（−）で再懸濁し、アラビアゴム
比重液（比重１．０７５）で重層し、遠心分離（２，５
００ｒｐｍ、　１０分間）した。沈殿した細胞をＰＢＳ
（−）で２回洗浄し、新たにＰＢＳ（＋）［：ＰＢＳ（
−）のうちＥＤＴＡ・２Ｎａに代えてＣａＣｌ２０．１
ｇを添加した溶液、ＰＢＳ（＋）と略記する］に浮遊さ
せ、ｌＸ１０５個／ｍｌに調整した後、シ、リコンで処
理した試験管にその細胞浮遊液を０．８ｍｌずつ分注し
、３７℃で１０分間ブレインキュベートした。細胞浮遊
液を入れた試験管にＰＢＳ（＋）で希釈した種々の溶液
の検体溶液を０．１ｍｌ添加し、３７°Ｃで１５分間イ
ンキュベート後、肥満細胞からヒスタミンを浮遊させる
ために抗原である卵白アルブミン（最終濃度１ｍｇ／ｍ
ｌ）とフォスフアジチル−し−セリン（最終濃度１００
μｇ／ｍｇ）の混合溶液０，１ｍｌを加え、さらに１５
分間インキュベートしてヒスタミンを遊離させた。ただ
し、比較薬剤の一つのＤＳＣＧは抗原添加３０秒前に加
え、抗原添加後火に１５分間インキュベートした。氷冷
したＰＢＳ（＋Ｈｍｌを加え反応を停止させ、２．５０
Ｏｒｐｍで１０分間遠心分離した。上清２ｍｌをとり、
４ｗｔ％過塩素酸溶液１ｍｌを加え、遊離ヒスタミン量
を定量する試料とした。

全ヒスタミン量を定量する試料は無処置の肥満細胞浮遊
液（ＩＸ１０５個／ｍｌ）　０．８ｍｌを１０分間沸騰
水中に置き、次いで４ｗｔ％過塩素酸を添加して、試料
とした。

各試料のヒスタミン量は蛍光法により測定し、次式によ
り、ヒスタミン遊離率（％）を算出した。

ヒスタミン遊離率（％）＝ （遊離ヒスタミン量／全ヒスタミンｉ）　Ｘ１００式［
Ｉ］で表わされるペプチドと比較薬剤のヒスタミン遊離
率（％）を第２図に示した。第２図から明らかなように
、式［■］で表わされるペプチドは１０−５Ｍ以上の濃
度で明らかにヒスタミン遊離抑制作用を示し、その作用
は比較薬剤のＨ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａ
ｒｇ−ＯＨより強＜、ＤＳＣＧと同程度又はそれ以上の
強さであった。

免疫動物は、１群５匹のＢＡＬＢ／ｃ雄マウス（６週令
）とし、抗原のジニトロフェニルアスカリス（ＤＮＰ−
Ａｓｃａｒｉｓ）　１０　ｐ　ｇを免疫増強剤の水酸化
アルミニウムゲル４ｍｇに吸着させて、下記に示す２通
りの実験を行った。

一方の実験では式［Ｉ］のペプチド１ｍｇを腹腔内に投
与し、３０分間後にＤＮＰ−Ａｓｃａｒｉｓと水酸化ア
ルミニウムゲルを腹腔内に投与し、その後１４日目に採
血して血清を得た。

他方の実験ではＤＮＰ−Ａｓｃａｒｉｓと水酸化アルミ
ニウムゲルを腹腔内に投与し、７日目、１４日目及び２
１日目の計３回、式ＣＩ］のペプチド１ｍｇを腹腔内に
投与し、２８日目に採血して血清を得た。

両実験で得られた血清はラットの４８時間ＰＣＡ反応を
行い、抗体価を測定した。

すなわち、Ｗｉｓｔａｒ系雄ラット（２００〜２５０ｇ
）の背部の皮内に血清を感作し、４８時間後に０　、５
ｗｔ％エバンスブルーを含むＤＮＰ−Ａｓｃａｒｉｓ溶
液を尾静脈内に注射し、現われる色素斑を３０分後に測
定してＩｇＥ抗体価を求めた。なお、ＰＣＡ反応で得ら
れた抗体価がＩｇＥ抗体であることを確認するために、
血清をあらかじめ５６℃で３時間加熱処置したもので感
作し、同様に操作して、ＰＣ’Ａ反応によって抗体価を
測定した。

式［Ｉ］のペプチドを１ｍｇ／ｋｇ投与したときのＩｇ
Ｅ抗体産生量をＰＣＡ反応で求めた抗体価で表わしたも
のが第３図及び第４図である。第３図及び第４図から明
らかなように、式〔Ｉ］のペプチドはＩｇＥ抗体産生を
強く抑制した。なお、加熱処理血清の抗体価は一方の実
験（第３図の斜線部分）ではほとんどＯであったが、他
方の実験（第４図の斜線部分）では、わずかに抗体価を
示した。

［発明の効果コ 式ＣＩ）で表されるペプチドはヒスタミン遊離抑制作用
とともにＩｇＥ抗体産生抑制作用を示す。

本発明により、抗アレルギー剤として優れた性質をもつ
ペンタペプチドＨ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−
Ｌｙｓ−ＯＨを容易に製造する方法を提供することがで
きた。

また、式〔■〕及び式（ＩＩＩ）で表されるペプチド誘
導体は、式〔Ｉ〕で表されるペプチドを製造する際の中
間体として重要で、この化合物を経由することにより、
式（１）で表されるペプチドを容易に製造することがで
きた。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明のＨ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ
−Ｌｙｓ−ＯＨの高速液体クロマトグラムを示す。縦軸
は２２０止の紫外線吸収の強度、横軸は溶出時間（分）
である。 第２図は、本発明のＨ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌ
ｙ−Ｌｙｓ−ＯＨ及び比較薬剤（Ｈ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−
Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ＯＨ及びＤＳＣＧ）のヒスタ
ミン遊離率（％）を示したグラフである。縦軸はヒスタ
ミン遊離率（％）、横軸は化合物及び濃度（Ｍ）である
。 第３図は、本発明のＨ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌ
ｙ−Ｌｙｓ−ＯＨの前投与によって産生されたＩｇＥ抗
体価を示したグラフで、斜線の部分は加熱処理した血清
の抗体価である。 第４図は、ＩｇＥ抗体産生の持続期に本発明のＨ−Ａｓ
ｐ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨを投与した
場合に産生されたＩｇＥ抗体価を示したグラフで、斜線
の部分は加熱処理した血清の抗体価である。第３図及び
第４図はそれぞれ縦軸に抗体価、横軸に化合物及びその
投与ｆｆｉ（ｍｇ／ｋｇ）を示している。 第１図 ０ ０ ０ 時　　間　（分） 第 ２ 図 第 図 第 図 １■／に９

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（ただし、Ｇｌｙはグリシン
   残基、Ｂｏｃはｔ−ブチルオキシカルボニル基を示す）
   で表されるグリシン誘導体とＨ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚ
   ｌ（ただし、ＬｙｓはＬ−リジン残基、Ｚはベンジルオ
   キシカルボニル基、Ｂｚｌはベンジル基を示す）で表さ
   れるＬ−リジン誘導体を、脱水縮合させてＢｏｃ−Ｇｌ
   ｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌとし、酸でＢｏｃ基を外し
   、これにＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨで表される
   Ｌ−アスパラギン酸誘導体を加え、脱水縮合させてＢｏ
   ｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢ
   ｚｌとし、酸でＢｏｃ基を外し、これにＢｏｃ−Ｓｅｒ
   −ＯＨで表されるＬ−セリン誘導体を加え、脱水縮合さ
   せてＢｏｃ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌ
   ｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌとし、酸でＢｏｃ基を外し、Ｚ−
   Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨで表されるＬ−アスパラギン
   酸誘導体を加え、脱水縮合させたのち、接触還元するこ
   とを特徴とする次の式〔 I 〕Ｈ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ａ
   ｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨ〔 I 〕で表されるペンタ
   ペプチドの製造法。 ２、次の式〔II〕 Ｚ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｓｅｒ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）
   −Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌ〔II〕 （ただし、ＳｅｒはＬ−セリン残基、ＡｓｐはＬ−アス
   パラギン酸残基、Ｇｌｙはグリシン残基、ＬｙｓはＬ−
   リジン残基、Ｚはベンジルオキシカルボニル基、Ｂｚｌ
   はベンジル基を示す）で表されるＬ−アスパラギン酸−
   Ｌ−セリン−Ｌ−アスパラギン酸−グリシン−Ｌ−リジ
   ン誘導体。 ３、次の式〔III〕 Ｂｏｃ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ
   （Ｚ）−ＯＢｚｌ〔III〕（ただし、ＳｅｒはＬ−セリ
   ン、ＡｓｐはＬ−アスパラギン酸残基、Ｇｌｙはグリシ
   ン残基、ＬｙｓはＬ−リジン残基、Ｂｏｃはｔ−ブチル
   オキシカルボニル基、Ｂｚｌはベンジル基、Ｚはベンジ
   ルオキシカルボニル基を示す）で表されるＬ−セリン−
   Ｌ−アスパラギン酸−グリシン−Ｌ−リジン誘導体。 ４、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（ただし、Ｇｌｙはグリシン
   残基、Ｂｏｃはｔ−ブチルオキシカルボニル基を示す）
   で表されるグリシン誘導体とＨ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚ
   ｌ（ただし、ＬｙｓはＬ−リジン残基、Ｚはベンジルオ
   キシカルボニル基、Ｂｚｌはベンジル基を示す）で表さ
   れるＬ−リジン誘導体を、脱水縮合させてＢｏｃ−Ｇｌ
   ｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌとし、次いで酸でＢｏｃ基
   を外し、これにＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨで表
   されるＬ−アスパラギン酸誘導体を加え、脱水縮合させ
   てＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）
   −ＯＢｚｌとし、酸でＢｏｃ基を外し、これにＢｏｃ−
   Ｓｅｒ−ＯＨで表されるＬ−セリン誘導体を加え、脱水
   縮合させることを特徴とする請求項２記載のＺ−Ａｓｐ
   （ＯＢｚｌ）−Ｓｅｒ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−
   Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌの製造法。 ５、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（ただし、Ｇｌｙはグリシン
   残基、Ｂｏｃはｔ−ブチルオキシカルボニル基を示す）
   で表されるグリシン誘導体とＨ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚ
   ｌ（ただし、ＬｙｓはＬ−リジン残基、Ｚはベンジルオ
   キシカルボニル基、Ｂｚｌはベンジル基を示す）で表さ
   れるＬ−リジン誘導体を、脱水縮合させてＢｏｃ−Ｇｌ
   ｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌとし、酸でＢｏｃ基を外し
   、これにＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨで表される
   Ｌ−アスパラギン酸誘導体を加え、脱水縮合させてＢｏ
   ｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢ
   ｚｌとし、酸でＢｏｃ基を外し、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ−ＯＨ
   で表されるＬ−セリン誘導体を加え、脱水縮合させるこ
   とを特徴とする請求項３記載のＢｏｃ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ
   （ＯＢｚｌ）−Ｇｌ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌの製造法
   。