JPH01305069A - ベンゾトリアゾール誘導体およびそれを含有する発螢光試薬 - Google Patents

ベンゾトリアゾール誘導体およびそれを含有する発螢光試薬

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JPH01305069A
JPH01305069A JP63134835A JP13483588A JPH01305069A JP H01305069 A JPH01305069 A JP H01305069A JP 63134835 A JP63134835 A JP 63134835A JP 13483588 A JP13483588 A JP 13483588A JP H01305069 A JPH01305069 A JP H01305069A
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Shigeru Narita
成田　滋
Takayasu Kitagawa
北川　隆康
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Shionogi and Co Ltd
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 支呈上二上月±１ 本発明は、薬物と蛋白の結合力評価、とりわけ塩基性薬
物とα、−Ｓ性糖蛋白糖蛋白、α、−Ａ　Ｇと言う）の
結合力を評価するのに最適な蛋白結合測定用試薬に関す
る。
更困弦オ 薬物と血清タンパクとの結合を定量的に評価することは
、薬物の生体内挙動を解明する上で重要である。近年、
塩基性薬物の血中における結合蛋白としてα、−Ａ　Ｇ
が重要視され、種々の薬物との相互作用に関する報告が
増えつつある。薬物の蛋白結合力評価法のひとつである
螢光プローブ法は高感度かつ簡便性などの利点を有して
いるが、現在知られている螢光プローブはα、−Ａ　Ｇ
に対する結合力評価に適しているとは言えない０例えば
、オーラミンＯ（Ａｕｒａｍｉｎ　Ｏ）やフエンプロク
モン（Ｐｈｅｎｐｒｏｃｏｕｍｏｎ　）が知られ、ａ　
、−Ａ　Ｇに対する螢光プローブとしての研究報告があ
る。前者は、杉山等によりバイオケミカル・ファーマコ
ロジー第３４巻６号第８２１−８２９頁、　１９８５年
（Ｙ、Ｓｕｇｉｙａｍａ　ｅｔａｌ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ
、Ｐｈａｒｍｃｏｌ、　３４（６）、　８２１−８２９
（１９８５））に報告されているが、α、−ＡＧとの結
合力が弱く微量の蛋白定量の際、測定感度が低いという
欠点がある。また、後者はオタギリ等によりジャーナル
・才ブ・ファーマシューティカル・サイエンス第７６巻
８号第６４６−６４９頁、１９８７年（Ｍ、　Ｏｔａｇ
ｉｒｉ　ａｔａｌ、Ｊ、　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ
ｉｃａｌ　５ｃｉｅｎｃｅｓ　７６（８）、　６４６−
６４９（１９８７＞　）に報告されているが、測定波長
が短波長側にあり、蛋白自体の螢光による影響を受は易
い等の欠点がある。
明が　決しようとする課 本発明者等は以上の点に鑑み、蛋白、特にα、−ＡＧに
高い親和性を有し、かつ、長波長側で測定可能な螢光プ
ローブの開発を目指して、本発明を完成した。
本発明が提供する次式： （式中、Ｒ１は水素、低級アルキル、ハロゲン、シアン
、または低級アルキルオキシカルボニルを表わし、Ｒ２
およびＲ３は各々、水素、低級アルキル、Ｃ３〜Ｃ，シ
クロアルキルもしくはアリールを意味するか、または−
緒になってＣ１〜Ｃ，アルキレンを表わすか、あるいは
隣接窒素原子と一緒になってピペラジノもしくはモルホ
リノを形成する。）で示されるベンゾトリアゾール誘導
体またはその塩（以下、単に本発明化合物という）は、
単独では水溶液中で殆ど無螢光性であるが、α、−ＡＧ
等の蛋白の存在下ではこれと結合して強い螢光を示す、
また、本発明化合物は各種の塩基性薬物と蛋白の同一結
合サイトにおいて競合し、その際、螢光強度の変化が観
測される。この螢光強度の変化より、当該薬物の蛋白と
の結合力を評価するものであるが、公知の螢光プローブ
法によって高精度でかつ簡便に測定可能である。
本発明化合物は先にも述べた様に、蛋白との結合親和性
が非常に高いので、血中微量蛋白量、特にα、−ＡＧｉ
の定量も容易に行なう事ができる。
本発明の提供するベンゾトリアゾール誘導体は有機化学
の公知の反応を用いて容易に製造可能である。例えば、
以下に示すように、５−置換−メタフェニレンジアミン
（ａ）とバラフェニレンジアミン誘導体（ｂ）とを公知
のジアゾカップリング反応（第１工程）、続いて閉環反
応（第２工程）に付して本発明化合物を得る事ができる
。
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は前記と同意義である。
） 以下に各工程の説明をする。
（第１工程） 本反応は通常、水冷下〜１５°Ｃにて水溶液中で行なう
、化合物（ｂ）を無機酸に溶解または懸濁し、亜硝酸ナ
トリウム等の亜硝酸と反応させて反応性に富んだジアゾ
化合物を得る。過剰の亜硝酸を除去するため、スルファ
ミン酸や尿素を添加してこれを分解する。
次いで、化合物（ａ）を添加すれば容易にジアゾ化合物
とカップリングを起こして化合物（ｃ）を与える。反応
は数分〜数時間で完了する。
（第２工程） 化合物（ｃ）のアゾ基は隣接するアミンと容易に反応を
起こして閉環し、本発明化合物（Ｉ）を与える１反応は
銅・アンモニア錯体の存在下、含水有機溶媒中で行なえ
ば、室温〜加熱下、数分〜数十時間で完了する。
本発明において、ハロゲンとはフルオロ、クロルまたは
ブロモを意味する。低級アルキルとは直鎖状または分枝
状Ｃ１〜Ｃ，アルキルを意味し、具体的にはメチル、エ
チル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、５Ｑ
Ｃ−ブチル、ｔａｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、インペ
ンチル、ネオペンチルまたはｔａｒｔ−ペンチル等が例
示きれる。
Ｃ８〜Ｃ，シクロアルキルとはシクロプロピル、シクロ
ブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロへブ
チルを意味し、これらは１〜２個のハロゲン、低級アル
キル、低級アルキルオキシ等の置換基を有しても良い。
アリールとは１〜２個の置換基を有しても良いフェニル
基を意味し、例えば、フェニル、トリル、キシリル、ク
メニル、ｏ−、ｍ−、ｐ−クロロフェニル等が例示され
る。
Ｃ１〜Ｃ，アルキレンとは具体的にはプロピレン、ブチ
レン、ペンチレン、ヘキシレン、ヘブチレン等が例示で
きる。
以下に本発明化合物の代表例を列挙するが、本発明はこ
れらに限定されるものではない。
（１）　　７−’）ロロ−２−（ｐ−ジエチルアミノフ
ェニル）−２Ｈ−ベンゾトリアゾリル−５−アミン、（
り　７−クロロ−２−（ｐ−メチルアミノフェニル）−
２Ｈ−ベンゾトリアゾリル−５−アミン、０）７−クロ
ロ−２−（ｐ−アニリノフェニル）−２Ｈ−ベンゾトリ
アゾリル−５−アミン、 （４）７−クロロ−２−（ｐ−モルホリノフェニル）−
２Ｈ−ベンゾトリアゾリル−５−アミン、 （９６−アミノ−２−（ｐ−ジエチルアミノフェニル）
−２Ｈ−ベンゾトリアゾール−４−カルボン酸・エチル
エステル。
（６）　　２−（ｐ−シクロへキシルアミノフェニル）
−２Ｈ−ベンゾトリアゾリル−５−アミン、 （７）７−ジアツー２−（ｐ−ピペリジノフェニル）−
２Ｈ−ベンゾトリアゾリル−５−アミン、 （８）７−ブロモ−２−（ｐ−シクロプロピルアミノフ
ェニル）−２Ｈ−ベンゾトリアゾリル−５−アミン、（
ｇ）７−クロロ−２−（ｐ−ピペラジノフェニル）−２
Ｈ−ペンゾトリアゾリル−５−アミン、および■　６−
アミノ−２−（ｐ−ジイソペンチルアミノフェニル）−
２Ｈ−ベンゾトリアゾール−４−カルボン酸・メチルエ
ステル。
これら本発明化合物を用いて、（１）薬物と蛋白の結合
力、および（２）血中蛋白量を容易にかつ正確に測定で
きる。以下に例を示して、測定方法を簡単に説明する。
（１）薬物と蛋白の結合力の測定 （塩基性薬物とα、−Ａ　Ｇの結合力）α、−Ａ　Ｇと
先に示した本発明化合物を含む溶液、ならびにα、−Ａ
Ｇ、化合物および薬物を含む溶液の２種類を調製して、
表２に示した励起・螢光波長における螢光強度を測定す
る。別途作成した検量線よりそれぞれの溶液中における
化合物のα、−Ａ　Ｇに対する結合率を測定し、薬物共
存下および非共存下での結合率の違いから薬物のα＋−
ＡＧに対する結合定数を算出する。
（２１土亙亘［１（Ｉｌｌ且 （アルブミンの定量） アルブミンを含む試料溶液に化合物を含む試料溶液を加
え、表２に示した励起・螢光波長における螢光強度を測
定する。アルブミン標準溶液にて作成した検量線より試
料中のアルブミン濃度を求める。
（αＩ−Ａ　Ｇの定量） α、−Ａ　Ｇを含む試料溶液にスルホサリチル酸を加え
て共存する他の蛋白を除去する０次いで化合物を含む試
料溶液を加えて、表２に示した励起・螢光波長における
螢光強度を測定する。α、−Ａ　Ｇ標準溶液にて作成し
た検量線より、試料中のα８−ＡＧ濃度を求める。
以下に実施例を示し、本発明を更に詳しく説明するが、
これらは本発明を同等限定するものではない。
東ｌ璽 以下に示す実施例１〜５で本発明化合物１〜５を製造し
た。物理恒数を表１に示す。
実施例Ｉ Ｎ、Ｎ−ジエチル−ｐ−フェニレンジアミン２塩酸塩（
１０ｍｍｏｌ）を１０％塩酸５０ｍ１に溶かして、水冷
下、攪拌しながら１０％亜硝酸ナトリウム水溶液（７ｍ
ｌ）を加えた。１５分後、１０％スルファミン酸アンモ
ニウム水溶液（１５ｍｌ）を加え、さらに１５分間攪拌
した。酢酸ナトリウムにて反応液の液性を約ｐＩ（５と
した後、５−クロロ−ｍ−フェニレンジアミン（１０ｍ
ｍｏｌ）を加え、２時間攪拌した。
反応液をＩＮ−水酸化ナトリウム水溶液にて約ｐＨ９と
した後、酢酸エチルにて抽出した。酢酸エチル層を減圧
下で濃縮した後、残渣をピリジン（４０ｍｌ）に溶かし
た。この溶液にアンモニア性硫酸鋼溶液（硫酸鋼・５水
和物１０ｇを１４％アンモニア水６０ｍ１に溶かしたも
の）を加え、４時間還流した０次に、反応液を冷却後、
酢酸エチルにて抽出した。酢酸エチル層を無水硫酸ナト
リウムにて乾燥させた後、減圧下で濃縮し、残渣を酢酸
エチル（５ｍｌ）に溶かした後、シリカゲルクロマトグ
ラフィー（酢酸エチル）にて精製し、化合物１を得た。
実施例２ ７−クロロ−２−（−メチルアミノフェニル）−２１（
−ベンゾトリアゾリル−５−アミン（２）の　造Ｎ、Ｎ
−ジエチルーｐ−フふエレンジアミン２塩酸塩をＮ−メ
チル−ｐ−フェニレンジアミン２塩酸塩に代える以外は
実施例１と同様の操作を行ない、化合物２を得た。
実施例３ Ｎ、Ｎ−ジエチル−ｐ−フェニレンジアミン２塩酸塩を
Ｎ−フェニル−ｐ−フェニレンジアミン２塩酸塩に代え
る以外は実施例１と同様の操作を行ない、化合物３を得
た。
実施例４ Ｎ、Ｎ−ジエチル−ｐ−フェニレンジアミン２塩酸塩を
ｐ−モルホリノアニリンに代える以外は実施例１と同様
の操作を行ない、化合物４を得た。
実施例５ ６−アミノ−２−（−ジエチルアミノフェニル）−２Ｈ
−ベンゾトリアゾール−４−カルボン　エチルエラーク
ロロ−ｍ−フェニレンジアミンを３．５−ジアミノ安息
香酸エチルエステル２塩酸塩に代える以外は実施例１と
同様の操作を行ない、化合物５を得た。
以下の実施例６〜１０で本発明測定用試薬の調製例を示
す。
実施例６（ＩＸＩＯづＭ水溶液） 化合物１を３１．６ｍｇ秤量し、０．ＩＮ塩酸１０ｍ１
に溶解した後、水を加えて全量を１０ｊ！とする。この
溶液を５ｍｌずつ褐色バイアル瓶に分注・密栓して測定
用試薬を得る。
実施例７（ＩＸｌｏ−’Ｍメタノール溶液）化合物２を
２７．４ｍｇ秤量し、メタノールに溶解して全量を１０
２とする。この溶液を５ｍｌずつ褐色バイアル瓶に分注
・密栓して測定用試薬を得る。
実施例８（ＩＸｌｏ−５Ｍエタノール溶液）化合物３を
３３．６ｍｇとエタノールを用いた以外は実施例７と同
様にして測定用試薬を得る。
実施例９（ＩＸＩＯ−’Ｍ水溶液） 化合物４を３３．０ｍｇ用いた以外は実施例６と同様に
して測定用試薬を得る。
実施例１０（ＩＸｌｏ”Ｍメタノール溶液）化合物５を
３５．３ｍｇ用いた以外は実施例７と同様にして測定用
試薬を得る。
（以下余白） 実施例１１ クロルプロマジンの結合　　のｔｊｌ （実験１） α、−Ａ　Ｃの濃度Ｉ　Ｘ　１０”Ｍ、　ｐ）１７．４
の０．１Ｍリン酸緩衝液溶液２ｍｌを石英製栓付螢光セ
ルにとり、これに化合物１の５Ｘ１０−’Ｍ＊溶液（化
合物１約３ｍｇをＩＮ塩酸１ｍｌに溶かした後、永にて
２００倍希釈したもの）をマイクロシリンジにて２ＰＱ
ずつ添加し、十分に混ぜた後、５０８ｎｍの螢光強度（
励起波長４１８ｎｍ）を測定した。この場合、化合物１
はすべてα、−Ａ　Ｇと結合し、濃度二螢光強度の関係
は図面に示す直線１の様になっｔ。
二実験２） α＋−ＡＣの濃度３Ｘ１０−’Ｍ、ｐＨ７，４の０．１
４リン酸緩衝液溶液２ｍｌにつき、実験１と同様の巣作
を行なった。この場合、化合物１とα、−Ａ　Ｇつ結合
は平衡状態にあり、濃度と螢光強度の関係士図面に示す
曲線２の様になった。
二実験３） クロルプロマジンｌＸｌ０−’Ｍを含むα、−Ａ　Ｇの
濃度３Ｘ１０−’Ｍ、ｐＨ７，４の０．１Ｍリン酸緩衝
液溶液２ｍｌにつき、実験１と同様の操作を行なった。
この場合、化合物１とα、−Ａ　Ｇの結合はクロルプロ
マジンにより阻害され、濃度と螢光強度の関係は図面に
示す曲線３の様になった。
（計算方法） 化合物１のα、−Ａ　Ｇに対する結合率（Ｘ）は下式（
１）により求めた。
ここで、　Ｆｂは実験１により得た化合物１のある濃度
における螢光強度であり、Ｆｐは実験２により得た化合
物１の同濃度における螢光強度であり、Ｆｏはブランク
値である。
化合物１の各濃度における結合率から得た値を５ｃａｔ
ｃｈａｒｄの式（２）に従ってプロットすることにより
、化合物１のα＋”’ＡＧに対する結合パラメータを得
た。
ｒ／Ｄｆ　＝　　ｎＫａ　−ｒＫａ　　（２）ここで、
ｒはα、−Ａ　Ｇ　１モル当りの化合物１の結合量、ｎ
は結合サイト数、Ｋａは化合物１の結合定数、Ｄｆは遊
離型の化合物１の濃度である。
化合物１のα、−Ａ　Ｇに対する結合パラメータは、Ｋ
　ａ−１，４６Ｘ　１０−’Ｍ−’、ｎｍ０．４０だっ
た。
クロルプロマジンの結合定数は以下のＫｌｏｔｚらの式
により求めた。
ここで、ＫａおよびＫｂは、それぞれ、化合物１および
クロルプロマジンの結合定数であり、ＰｔおよびＢｔは
α＋−ＡＧおよびクロルプロマジンの総濃度であり、ｎ
は結合サイト数である。ＤｆおよびＤｂは、それぞれ、
実験３により求めたクロルプロマジン添加時の化合物１
の遊離型および結合型の濃度である。
クロルプロマジンの結合定数を表３に示す。
実施例１２ 表３に示すその他の塩基性薬物について、実施例１１と
同様の方法で結合定数を求めた。結果を表３に合わせて
示す。
（以下余白）
【図面の簡単な説明】
図面は化合物１の濃度と螢光強度の関係を示す図であり
、横軸は化合物１の濃度（Ｘ１０”Ｍ）を、縦軸は螢光
強度（％）を示す。 特許出願人：塩野義製薬株式会社 図　　　面 Ｕｌ　２３４５

Claims (2)

    【特許請求の範囲】
  1. （１）次式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾１は水素、低級アルキル、ハロゲン、シア
    ノまたは低級アルキルオキシカルボニルを表わし、Ｒ＾
    ２およびＲ＾３は各々、水素、低級アルキル、Ｃ＿３〜
    Ｃ＿７シクロアルキルもしくはアリールを意味するか、
    または一緒になってＣ＿３〜Ｃ＿７アルキレンを表わす
    か、あるいは隣接窒素原子と一緒になってピペラジノも
    しくはモルホリノを形成する。）で表わされる化合物ま
    たはその塩。
  2. （２）次式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾１は水素、低級アルキル、ハロゲン、シア
    ノまたは低級アルキルオキシカルボニルを意味し、Ｒ＾
    ２およびＲ＾３は各々、水素、低級アルキル、Ｃ＿３〜
    Ｃ＿７シクロアルキルもしくはアリールを意味するか、
    または一緒になってＣ＿３〜Ｃ＿７アルキレンを表わす
    か、あるいは隣接窒素原子と一緒になってピペラジノも
    しくはモルホリノを形成する。）で表わされる化合物ま
    たはその塩を含有する事を特徴とする蛋白結合測定用ま
    たは蛋白定量用試薬。
JP63134835A 1988-05-31 1988-05-31 ベンゾトリアゾール誘導体およびそれを含有する発螢光試薬 Pending JPH01305069A (ja)

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DE (1) DE68921338T2 (ja)
WO (1) WO1989012044A1 (ja)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0572131A (ja) * 1991-09-18 1993-03-23 Kurita Water Ind Ltd アゾール類の濃度管理方法
CN115058245A (zh) * 2022-07-29 2022-09-16 扬州大学 一种绿色荧光碳量子点及其在快速检测诱惑红方面的应用

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH01305069A (ja) * 1988-05-31 1989-12-08 Shionogi & Co Ltd ベンゾトリアゾール誘導体およびそれを含有する発螢光試薬
JP2681369B2 (ja) * 1988-06-03 1997-11-26 塩野義製薬株式会社 ベンゾトリアゾール誘導体およびそれを含有するカルボン酸類分析用試薬
DE4317093A1 (de) * 1993-05-21 1994-11-24 Basf Ag Niedermolekulare und polymere flüssigkristalline Benztriazole und deren Verwendung
US5786141A (en) * 1994-08-26 1998-07-28 Bard; Allen J. Electrogenerated chemiluminescence labels for analysis and/or referencing
ZA200407802B (en) * 2002-03-20 2006-11-29 Metabolex Inc Substituted phenylacetic acids
US7199259B2 (en) * 2003-06-20 2007-04-03 Metabolex, Inc. Resolution of α-(phenoxy)phenylacetic acid derivatives
RU2006145872A (ru) * 2004-05-25 2008-06-27 Метаболекс, Инк. (Us) Замещенные триазолы в качестве модуляторов ppar и способы их получения
WO2005115384A2 (en) * 2004-05-25 2005-12-08 Metabolex, Inc. Bicyclic, substituted triazoles as modulators of ppar and methods of their preparation
US7714131B2 (en) * 2005-09-23 2010-05-11 Metabolex, Inc. Process for the stereoselective preparation of (−)-halofenate and derivatives thereof
KR102313854B1 (ko) 2014-04-04 2021-10-20 유디씨 아일랜드 리미티드 고효율의 형광 유기 발광 소자
CN116106282A (zh) * 2023-02-13 2023-05-12 上海淼清水处理有限公司 一种荧光检测循环水中阻垢缓蚀剂浓度的方法

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2136135A (en) * 1936-07-14 1938-11-08 Soc Of Chemical Ind Pseudo-azimido-benzene-amino-acyloacetic acid esters
CH579619A5 (ja) * 1972-12-05 1976-09-15 Ciba Geigy Ag
CH627775A5 (de) * 1977-02-03 1982-01-29 Ciba Geigy Ag Verfahren zur umwandlung eines pigments oder dispersionsfarbstoffs in eine andere modifikation.
DE2716503A1 (de) * 1977-04-14 1978-10-19 Bayer Ag Azofarbstoff-zwischenprodukt
US4533612A (en) * 1983-04-27 1985-08-06 Basf Aktiengesellschaft Electrophotographic recording materials containing special charge carrier-transporting compounds
DE3324641A1 (de) * 1983-07-08 1985-01-17 Basf Ag, 6700 Ludwigshafen Neue benztriazolverbindungen und deren verwendung
JPH01305069A (ja) * 1988-05-31 1989-12-08 Shionogi & Co Ltd ベンゾトリアゾール誘導体およびそれを含有する発螢光試薬
US5003076A (en) * 1988-10-12 1991-03-26 Shionogi & Co., Ltd. Benzotriazole derivatives and chiral derivatization reagents for carboxylic acids thereof

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
2H.ORG.KHIM.,=1972 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0572131A (ja) * 1991-09-18 1993-03-23 Kurita Water Ind Ltd アゾール類の濃度管理方法
CN115058245A (zh) * 2022-07-29 2022-09-16 扬州大学 一种绿色荧光碳量子点及其在快速检测诱惑红方面的应用
CN115058245B (zh) * 2022-07-29 2023-11-21 扬州大学 一种绿色荧光碳量子点及其在快速检测诱惑红方面的应用

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Publication number Publication date
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US5132429A (en) 1992-07-21

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