JPH01230578A

JPH01230578A - プロリルエンドペプチダーゼ阻害剤

Info

Publication number: JPH01230578A
Application number: JP5399588A
Authority: JP
Inventors: Atsushi Furukawa; 淳古川; Tadashi Yoshimoto; 忠芳本; Yukiyoshi Ajisawa; 味澤　幸義; Seiichi Ikeguchi; 池口　聖一; Yukihiko Kinoshita; 木下　幸彦
Original assignee: Kissei Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Kissei Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1987-11-30
Filing date: 1988-03-08
Publication date: 1989-09-14
Anticipated expiration: 2011-03-29
Also published as: JPH0832704B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は、一般式（式中の＾ｒはフェニル基またはナフチル基であり、Ｙ
は酸素原子を介することもある炭素数１〜４の項原子を
含むこともある５〜６員環の飽和異項環であり、Ｒは水
素原子または低級アルコキシカルボニル基である）で表
される化合物を有効成分として含有することを特徴とす
るプロリルエンドペプチダーゼ阻害剤に関するものであ
る。

〔従来の技術〕

人口の高齢化に伴って老人医療に関する問題が重要視さ
れてきている。なかでも老人性痴呆は社会的にも深刻な
問題であり、効果的な治療剤の早急な開発が望まれてい
る。

これまで、健忘症や痴呆の治療剤としては、脳血管拡張
などの作用による脳循環改善剤、酸素消費量亢進などの
作用による脳代謝賦活剤などが専ら用いられている。

また、近年、コリン作動系に作用する薬物、サイロトロ
ピン放出ホルモン（Ｔｈｙｒｏｔｒｏｐｉｎ−Ｒｅｌｅ
ａｓ−ｉｎｇ　Ｈｏｒｍｏｎｅ、以下ＴＲＨという）隨
作用物質など新しい作用による抗痴呆剤も種々見出され
てきている。

プロリルエンドペプチダーゼ（Ｐｒｏｌｙｌ　Ｅｎｄｏ
−ρｅｐｔｉｄａＳｅ、以下ＰＥＰという）はプロＩＪ
ンを含む生理活性ペプチドや合成基質に作用し、プロリ
ンのカルボキシル側を特異的に切断する酵素として知ら
れている。この酵素は記憶と関係があるとされているバ
ゾプＬ／　シン（Ｖａｓｏｐｒｅｓｓｉｎ）やＴＲＨな
どを分解することからこの酵素の阻害活性と抗健忘効果
の関連性について種々検討が行われ、その結果、ＰＥＰ
阻害剤は痴呆や健忘の治療剤となり得ることが示唆され
（生化学、５５巻、８号、８３１ページ、　１９８３年
）、注目を集めてきている。

これまで、ＰＥＰを阻害する化合物としては、Ｃ末端に
２−ホルミルピロリジン、２−クロロメチルカルボニル
ピロリジン、２−ジアゾメチルカルボニルピロリジンを
もつアミノ酸誘導体が知られているが、いずれも未だ実
用に供されるには至っていない。（日本特許公開公報昭
６０−、１８８３１７号、同６〇−１７２９２９号）。

一方、本発明のような化合物として、既に式などの化合
物が知られている。〔プレチン　オブザ　ケミカル　ソ
サイアティー　オブ　ジャパン（Ｂｕｌｌ、　　Ｃｈｅ
ｍ、　　Ｓａｃ、　　ｊａｐ、）、　　５１巻、　１号
、２０１ページ、　　１９７８年；　ポリ？　−（Ｐｏ
！ｙｍｅｒ）、　　１３巻、　　１２０８ページ、　１
９７７年〕しかしながら、これらはいずれも反応試剤の合成中間体
として製造されており、それ自体の薬理作用は何ら報告
されていない。

また、日本特許公開公報昭４８１０７８号には、式を含
むアミノ酸誘導体が抗アレルギー作用、抗アセチルコリ
ン作用を示すことが記載されているが、ＰＥＰ阻害作用
に関しては全（確認されていない。

〔発明が解決しようとする課題′〕

従来ＰＥＰ阻害活性を有する化合物はほとんどＣ末端に
２−ホルミルピロリジン、２−クロロメチルカルボニル
ピロリジン、２−ジアソ′メチルカルボニルピロリジン
などを有するアミノ酸誘導体であり、これらは安全性の
面で実用に供され難いものであった。

このため、より安全なＰＥＰ阻害剤の開発が望まれてい
た。

〔課題を解決するための手段〕

本発明者らはより安全で阻害作用の強いＰＥＰ阻害剤を
見出すべく検討した結果、ある種のプロＩＪンの環状ア
ミド誘導体がＰＥＰ阻害活性を有し、目的が達成できる
ことを見出した。本発明はこのような知見に基づくもの
である。

本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合物は牛脳由来
のＰＥＰに対する阻害活性を示し、毒性も表される飽和
異項環としては、ピロリジン、チアゾリジン、ピペリジ
ン、モルホリン、チオモルホリン等のような５〜６員環
の飽和異項環をあげることができる。これらの異項環の
中で５員環の異項環が好ましく、その中でも特にチアゾ
リジンが好ましい。

さらに、本発明の前記一般式式（１）の化合物における
アシル基としては、フェニルアセチル基、２−フェニル
プロピオニル基、３−フェニルプロピオニル基、４−フ
ェニルブタノイル基、シンナモイル基、フェナシル基、
フェノキシアセチル基、２−フェノキシプロピオニル基
、３−フェノキシプロピオニル基、ベンジルオキシカル
ボニル基などの基をあげることができる。これらのアシ
ル基のなかで最も好ましいものは、ベンジルオキシカル
ボニル基である。

本発明の前記一般式（１）の化合物には一部新規化合物
も含まれるが、前記文献（Ｂｕｌｌ、Ｃｈｅｍ。

５ＯＣ１Ｊａｐ、５１巻、　１号、２０１ページ、　　
１９７８年；Ｐｏｌｙｍｅｒ　１８巻、　１２０８ペー
ジ、　１９７７年；　日本特許公開公報昭４８−１０７
８号）記載の方法あるいはそれらの類似方法により製造
することができる。

例えば、式（式中の＾ｒ、　Ｙおよびｎは前記と同じ意味をもつ）
で表されるＮ−アシルプロリンまたはその反応性官能的
誘導体と、一般式より製造することができる。

また、一般式％式％）（式中の后、Ｙおよびｎは前記と同じ意味をもつ）で表
されるカルボン酸またはその反応性官能的誘導体と、一
般式でも製造することができる。

本発明の製造方法において出発原料として用いられる一
般式（ＩＩ）、（［［）、（ＩＶ）および（Ｖ）の化合
物はいずれも公知化合物であり、市販品として人手でき
るか、あるいは文献記載の方法により容易に製造するこ
とができる。　・本発明の一般式（Ｉ）の化合物を一般式（Ｉ［）または
（ｒＶ）のカルボン酸と一般式（ＩＩＩ）または（Ｖ）
の化合物と物を用いて製造する場合は、概ね縮合剤の存
在下に反応を行うが、このような縮合剤としてはペプチ
ド合成において一般に用いられる縮合剤、例えば、Ｎ、
　Ｎ’−ジシクロへキシルカルボジイミドなどが用いら
れる。

また、本発明の一般式（１）の化合物を一般式（ＩＩ）
または（ｒＶ）の化合物の反応性骨脂的誘導体を用いて
製、造する場合、そのような誘導体としては、酸ハロゲ
ン化物、酸無水物、混合酸無水物、活性エステルなどを
あげることができる。

本発明の一般式（Ｉ）の化合物は常法に従い、種々の医
薬品製剤とすることができる。すなわち、必要に応じて
賦形剤、崩壊剤、縮合剤、滑沢剤等の医薬品添加物を加
え、常法に従って調剤することにより、種々の製剤、例
えば錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤等とすることがで
きる。

本発明の前記一般式（１）の化合物を健忘症等の治療に
用いる場合、その投与潰は患者の年令、体重、性別、症
状の度合等により適宜決定されるが、概ね成人１日当た
り経口投与の場合５０〜１０００■、非経口投与の場合
１〜５００ｍｇの範囲内で使用される。

〔発明の効果〕

本発明の前記一般式（Ｉ）の化合物はＮ−カルボベンゾ
キシ−し−グリシル−Ｌ−プロリル−β−ナフチルアミ
ド（以下７：−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−β−Ｎ＾という）を基
質とした牛脳由来プロリルエンドペプチダーゼに対する
阻害活性測定試験において、概ね、５×１０−５〜５Ｘ
１０−’モル濃度で５０％阻害活性を示す。

例えば、３−（Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｌ−プロリル）
チアゾリジンのＩＣ６゜値は４．５７Ｘ１０−９モルで
ある。

このように、本発明の前記一般式Ｎ）の化合物は強いＰ
ＩＥＰ阻害活性を示し、しかも毒性も低いので、安全で
優れた健忘症治療剤として有用である。

〔実施例〕

本発明を以下の参考例および実施例を用いてさらに詳細
に説明する。なお、各参考例および実施例中の化合物の
融点はすべて未補正である。

参考例　ＩＮ−（３−フェニルプロピオニル）−し−プロリンし一
プロリン酸２．３０ｇを２Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液
ＩＱｍｊ！に溶解し、水冷下撹拌しつつ、３−フェニル
プロピオニルクロリド５．５ｇと２Ｎ−水酸化ナトリウ
ム水溶液１５ｍＮとを同時に滴下した。滴下後さらに室
温で２時間撹拌したのち、ジエチルエーテルで洗い、水
冷下に濃塩酸を加えて酸性とした。

３０分間放置したのち酢酸エチルで抽出し、有機層を飽
和食塩水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧
下に溶媒を留去し、酢酸エチルで再結晶Ｌテ、Ｎ−（３
−フェニルプロピオニル）−Ｌ−ゾロリン３．８５　ｇ
　（７７，９％）を得た。

融　点二８３〜８５℃　　（酢酸エチル）ＩＲ（ＫＢｒ
）：　　νｃｏ　　１７５８．１６１０　　ｃｍ−’〔
α］＝−１９２°　（Ｃ・０．５．塩化メチレン）口ＭＳ　（Ｂｌ）：　Ｃ１，Ｈ，？０３Ｎ　＝　２４７．
２８ｍ／ｚ　　２４７　（Ｍ”）、　２０３．１０５．
９１．７０元素分析値’　　（Ｃ＋４Ｈ＋ｔＯＪ　とし
て）６％　　８％　　Ｎ％計算値　　６７．９９　　６．９３　　５．６６実測値
　　６８．０２　　６．９１　　５．６１参考例　２対応する原料を用い、参考例１と同様に反応を行って下
記の化合物を合成した。

（１）　　Ｎ−（４−フェニルブタノイル）−シープロ
リン融　点：８３〜８４℃　（ジエチルエーテル）ＩＲ
（ＫＢｒ）：　　ｖｃｏ　　１７１５．１５９０　　ｃ
ｍ−’〔α〕　・−９５，６°　（Ｃ・０．６．酢酸エ
チル）ＩＡｓ　（Ｅｌ）：　Ｃ，５ｔ（１９０３〜　−
２６１，３１ｍ／ｚ　　２６１　（Ｍ”）、　２１７．
１５７．１１３．９１．７０元素分析値：　　（Ｃ，，
１１１９０３Ｎ　として）０％　　８％　　Ｎ％計算値　　６８．９４　　７．３３　　５．３６実測値
　　６８．９０　　７．２９　　５．２７（２）Ｎ−シ
ンナモイル−し−プロリン酸　　点　；　　　１８０〜
１８２℃ ”　（酢酸エチル−メタノール）ＩＲ（ＫＢｒ）：　　ｖｃａ　　１７４０．１６５０　
　ｃｍ−１〔α）　　＝　　−６４，０°　（Ｃ＝１．
０．　　メタノール）ＭＳ　　（ＦＡＢ）：　　Ｃ，４
）１．５０：ＩＮ　　・　２４５．２７ｍ／ｚ　　２４
６　　（！Ｊ”＋１）元禦分析値：　（ε＋４ｔｌ＋５０３Ｎ　　として）０
％　　　８％　　　Ｎ％計算値　　６ｇ、５５　　６，１６　　５．７１実測値
　　６８．６７　　６．２３　　５．７１（３）　　Ｎ
−（１−ナフチルアセチル）−Ｌ−プロリン酸　点；１
８０〜１８２℃　　（酢酸エチル）ＩＲ（ＫＢｒ）：　
　ｖｃａ　　１７３０．　１６００　　ｃｎｒ’〔α）
　　＝　　−４４，７゜（ｃｍ０．７７、ジメチルスルホキシド）ＭＳ　（Ｂｌ
）：　　Ｃ，、Ｈ，１０３Ｎ　　＝　　２８３．３１ｍ
／ｚ　　２８３　（Ｍ”）、　２３９．１６８．１４１
．１１４．７０元素分析値：　　（Ｃ，、Ｈ，０，Ｎ　
　として）０％　　８％　　Ｎ％計算値　　？０．０６　　６．０５　　４．９４実測値
　　７１．７５　　６．１３　　４．８９実施例　ｌＳ−カルボベンゾキシ−し−プロリン２．４９ｇとＮ−
ヒドロキンコハク酸イミド１．１５ｇとをジオキサン２
〇−に溶解し、冷却下に撹拌しつつ、Ｎ、　Ｎ’−ジシ
クロへキシルカルボジイミド２．０６ｇ　とジオキサン
５ＩＴＬｉ２の溶液を滴下した。冷所に一夜放置したの
ち、析出した結晶をろ去し、ろ液を減圧下に濃縮した。

残留油状物をジメトキシエタン１５　ｍｌに溶解し、水
冷下に撹拌しつつ、チアゾリジン０．８９ｇを滴下した
。−夜装置したのち減圧下に溶媒を留去し、残留物に水
５Ｉｎｌを加え、３０分間かきまぜたのち、酢酸エチル
で抽出した。有機層をＩＮ−塩酸、５％炭酸水素ナトリ
ウム水溶液および飽和食塩水で順次洗い、無水硫酸す）
　ＩＪウムで乾燥後減圧下に溶媒を留去した。残留物を
シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：酢酸
エチル／ベンゼン＝６／４）で精製して無色針状結晶の
３−（Ｎ−カルボベンゾキシ−し−プロリル）チアゾリ
ジンを得た。

融　　点　：　　１１２〜１１４℃ ＩＲ（ＫＢｒ）　：　　νｃ。　１７００．　１６５０
　　ｃｍ−’〔α）　　＝−１５，’３０°（ｃｍｏ、
　５．　　メタノール）ＭＳ　　（εＩ）：　　ＣＩｅ
Ｈ２ｏＯｙＮｚＳ　　□　３２０Ｊ９ｍ／ｚ　　３２０
　　（Ｍ”）、　　２０４．　１６０．　９１元素分析
値’　　（Ｃ＋５ＨｚｏＯＪ２Ｓ　として）０％　　８
％　　Ｎ％　　８％計算値　　５９．９９　　６．２９　　　ｇ、７５　　
９．９９実測値　　５９．９３　　６．２７　　８ｊ２
　１０．０ｇ実施例　２対応する原料を用い、実施例１と同様に反応を行って下
記の化合物を合成した。

融　　点　＝　　１２９〜１３１℃ ＩＲ（ＫＢｒ）：　　”Ｃｏ　　１７０１．１６４０　
　ｃｍ−’〔α］　　＝−１３，７０’（ｃｍ０．３．
　　メタノール）！、ｌＳ　　（Ｅｌ）：　　Ｃ，、Ｎ
２゜０３Ｎ２　　＝３０２．３６ｍ／ｚ　　３０２　　
（Ｍ”）、　　２０４．　１６０．　９１元素分析社’
　　（ＣＩ７Ｈ２２０３Ｎ２として）０％　　　　　８
％　　　　　８％計算１直　　６７．５２　　　７．３３　　　９．２７
実測１直　　６７．０５　　　７．３２　　　９．１７
融　　点　：　　１４８〜１５０℃ ＩＲ（ＫＢｒ）：　　ｖｃｏ　　１６９０．　１６３９
　　ｃｍ−’〔α〕　・−２４，９０°（ｃｍ１．　　
メタノール）ＭＳ　　（Ｅｌ）：　　Ｃ，、Ｎ２□０．
Ｎ２　　＝３１８．３６ｍ／ｚ　　３１８　　（Ｍ”）
、　　２０４．　１６０．　９１元素分析値：（Ｃ１□
Ｈ２□０．Ｎ２として）０％　　　８％　　　Ｎ％計算値　　６４．１３　　　６．９７　　　８．８０実
測値　　６４．００　　　６．９８　　　８．８１リジ
ン　（化合物Ｄ）融　　点二　　８８〜９０℃ ＩＲ（ＫＢｒ）：　　νＣｏ　　１７００．１６４０　
　ｃｍ　’〔α〕＝−２０．６０°（Ｃ＝１．　　メタ
ノール）ＭＳ　（Ｂｌ）　：　Ｃ＋ｓＨ２＜０３Ｎｚ　
　＝　３１６．３９ｍ／ｚ　　３１６　（Ｍ”）、　２
０４．１６０．９１元素分析値’　　（Ｃ１ｌ１８２４
０３Ｎ２として）０％　　　８％　　　Ｎ％計算値　　６８．３３　　　７．６５　　　８．８５実
測値　　６８．４１　　　　？、６７　　　８．８６融
　点：１５０〜１５２℃　　（酢酸エチル）ＩＲ（ＫＢ
ｒ）’　　νＣｏ　　１６５０　　ｃｍ−’〔α）　　
＝＋１６．９８°　（Ｃ＝１．０．　　メタノール）Ｍ
Ｓ　（ＦＡＢ）：　Ｃ，、Ｎ２Ｑ０２Ｎ２Ｓ　　＝　３
１６．３５ｍ／ｚ　　３１７　（１４”＋１）、　２２
８．１８５．１３１元素分析値：　　（ＣＩ７Ｈ２（１
口、Ｎ２Ｓ　として）０％　　　８％　　　Ｎ％　　　
８％計算値　　６４．５４　　６．３７　　８．８６　１０
．１２実測値　　６５．４３　　６．３８　　８．９０
　１０．０６１ｆｉ　　点：　　７０〜７１℃　（ジエ
チルエーテル）ＩＲ（ＫＢｒ）：　　νＣｏ　　１６５
０．　１６４０　　ｃｍ−’［α］　　−＋６．８°　
　（ｃｍ０．５．　　酢酸エチル）ＭＳ　（Ｅｌ）　：
　Ｃ３ａＨ２４０□Ｎ、　　＝３００．３９ｍ／ｚ　　
３００　（Ｍ”）、　２２９．２０２．１６７、　１０
５゜９１、７０元素分析値：　　（Ｃ３ａＮ２４０□Ｎ２として）０％
　　８％　　Ｎ％計算値　　７１．９７　　８．０５　　９．３３実測値
　　７１．２３　　７．９４　　９．２０ＩＲ（ｎｅａ
ｔ）：　　　ｖｃｏ　　１６５０　　ｃｍ−’　　（Ｂ
ｒ）〔α〕“・＋４．１”　　　（Ｃ＝０．６３．　　
酢酸エチル）ＭＳ　　（Ｅｌ）：　　Ｃ１？Ｌ□０□Ｎ
２Ｓ　　＝　　３１８．３８ｍ／ｚ　　３１８　　（Ｍ
”）、　　２３０．　２０２．　１０５．　９１．　７
０元素分析値：　（Ｃ＋Ｊｚ２０ＪｚＳ−％ＨｚＯとし
て〉０％　　　８％　　　Ｎ％　　　　８％計算値　　
６２．３６　　７．０３　　８．５５　　９．７８実測
値　　６２．４１　　７．０３　　　ｇ、２０　　９．
４２融　　点　：　　　ｉｉｏ　　〜　１１１℃ＩＲ（
ＫＢｒ）：　　ｖｃｏ　　１７４０．　１６６０．　１
６４０　　ｃｍ−’〔α）　　＝　　−８２，０°　（
ｃｍ０．５．　　酢酸エチル）ＭＳ　　（巳１）：Ｃ，
。Ｎ２６０４Ｎ２　　　＝　　３５８．４２ｍ／ｚ　　
３５８　　（Ｍ”）、　　２３０．　２０２．　１２８
．　１０５．　９１元素分析値：（Ｃ２゜ＬｇＯＪｚと
して）０％　　８％　　Ｎ％計算値　　６７．０２　　７．３１　　７．８１実測値
　　６７．０２　　７，２５　　７．７４（８）１−［
Ｎ〜（４−フェニルブタノイル）−Ｌ−ブロワＩＲ（ｎ
ｅａｔ）：　　ｖｃｏ　　１６４０　　ｃ＋＋ｒ’　（
ｂｒ）〔α）　　＝　　＋２０．５°　（ｃｍ０．８．
　　酢酸エチル）１すＳ（εＩ＞：　Ｃ，９）１２６０
２Ｌ　　＝　３１４．４１ｍ／ｚ　　３１４　（Ｍ”）
、　２１６．１４７．９１．７０元素分析値：　　（Ｃ
２１Ｎ２４０□Ｎ２・’Ａ　Ｈ２０として）６％　　８
％　　Ｎ％計算値　　７０．５６　　８．３５　　８．６６実測値
　　７０．２７　　８．３５　　８．４５融　　点　：
　　５１〜５３℃ ＩＲ（ｎｅａｔ）：　　ｖｃｏ　　１６５０　　ｃｍ−
’　（ｂｒ）〔α〕　・　＋２３．６°　（Ｃ＝０．５
．　　酢酸エチル）ＭＳ（日＋＞、Ｃ，。１２，０゜Ｌ
’ｌ：　＝　’Ｊ２！！、Ａ１ｍ／ｚ　　３３２　　（
Ｍ＝）、２１６．　１４７，９１．７０元素分析値：　
　（Ｃ，、ｌ＋□、Ｏ□Ｎ、Ｓ　として）６％　　８％
　　Ｎ％　　８％計算値　　６５．０４　　７．２８　　８．４３　　９
．６２実測値　　６４．７０　　　？、２０　　８Ｊ３
　　９．３４ＩＲ（ｎｅａｔ）：　　Ｌ’ＣＯ１７４０
，１６６０，１６４０ｃｍ−’〔α：］　　＝　　−６
４，０°　（Ｃ・０．５．酢酸エチル）ＭＳ　（Ｅｌ）
：　Ｃｚ＋Ｈ２ｓＯ４Ｎｚ　　＝　３７２．４５ｍ／ｚ
　　３７２　（Ｍ”）、　３４１．２６８．２４４．２
１６゜１２８、９１．７０元素分析値：　　（Ｃ，、Ｎ２．Ｏ，Ｎ２・各Ｈ２０と
して）６％　　８％　　Ｎ％計算値　　６６．１２　　７．６０　　７Ｊ４実測値　
　６５，７３　　７，５２　　７．１８ピロリジン　　
（化合物Ｌ）ＩＲ（ｎｅａｔ）　：　　ｖｃｏ　　１６５０　　ｃｍ
−’〔αＥ　　＝　　−９，２°　（ｃｍ０．５２．　
　酢酸エチル）ＭＳ　（Ｅｌ）　：　Ｃ２１８２４０□
Ｎ２＝３３６．４２ｍ／ｚ　　３３６　（Ｍ”）、　２
６５．２３８．１６８．１４１．７０元素分析値：　　
（Ｃ２１Ｈ２４０□Ｎ２　　・’Ａ　Ｈ２０として）６
％　　８％　　Ｎ％計算値　　７３．０１　　７．２４　　８．１０実測値
　　７３．００　　７．２２　　７．９２ＩＲ（ｎｅａ
ｔ）：　　　ｖｃｏ　、　１７４０．　１６５８　　ｃ
ｍ−’〔α〕　・　−１２，３°　（ｃｍ０．６０．　
　酢酸エチル）ＭＳ　（旧）：　Ｃ２ｏｔｌｚ２０２Ｎ
ｚＳ　＝　３５４．４０ｍ／ｚ　　３５４　（Ｍ”）、
　２７９．２３９．１６８．１４１．７０元素分析値’
　　（Ｃ２ｏｆ１２ｚＯＪｚＳ−１／３ＬＯとして）６
％　　　　８％　　　　Ｎ％　　　　８％計算値　　６
６．６５　　６．１９　　７．７７　８．８８実測値　
　６６．７６　　６．４５　　７．５２　８．５０実施
例　３ＰＥＰ阻害活性測定実験Ｚ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−β−ＮＡを基質として用い、牛脳
由来ＰＵＰに対する阻害活性を測定した。

（測定方法）１０　ｄ　のＩＥＤＴ＾と１０　ｍＭの２−メルカプト
エタノールを含む２０ｍＭトリス塩酸緩衝液（２０ｍＭ
−Ｔｒｉｓ　ＨＣＩＢｕｆｆｅｒ、　　ｐＨ＝７．０）
　０．７−１：　ＰｔＥＰ　（約０．１４　ｕ／ａｆ２
）１００通および各濃度（０，１０−’〜１０−’　Ｍ
）　　に調整した被験化合物の溶液１００通を加え、３
７℃で５分間ブレインキュベーション（Ｐｒｅｉｎｃｕ
ｂａｔｉｏｎ）　した。

次いでこれに１００４の４０％ジオキサンに溶かした各
々の濃度（５，０，２，５，１，２５，０，６２５，０
，３１２５ｍＭ）の基質を加え、再び３７℃で１５分間
インキュベーションを行い、酵素反応を進行させた。２
５％トリクロル酢酸で反応を停止させ、３０００　ｒ、
ｐ、ｍ、で１０分間遠心分離を行い、上清０．５ｎ＋ｊ
２を分取し、これに０．５−の０．１％亜硝酸を加え、
さらに、３分後、０．０５％のＮ−（１−ナフチル）エ
チレンジアミンジヒドロクロリドエタノール溶液を加え
た。混合液を３７℃で２５分放置した後、５７０　ｎｍ
での吸光度を測定し、次式によって各濃度での酸素活性
を試算し、それぞれの活性値から５０％阻害濃度（ＩＣ
５Ｏ値）を求めた。

酵素活性単位（μｍｏｌ／ｍｉｎ／屁）＝Δ００　Ｘｏ
、　４２　Ｘ希釈率（結　果）化合物　　　　　ＩＣ６゜値化合１０１１　　Ａ　　　　　４．５７ｎ１４化合物　
Ｂ　　　　　５４０　　ｎＭ化合物　Ｃ５６μＭ化合物　Ｅ　　　　　１．８μＭ実施例　４製剤以下のような処方に従い、各種製剤を製する。

なお、剤型の種類および処方は調剤例として挙げたもの
にかぎるものではない。

（Ａ）散剤処　　方化合物　Ａ　　　　　　　　２５　ｇ乳　　糖　　　　　　　　　　　　　９７５　ｇ全　　
　量　　　　　　　　　　　１０００　　ｇ以上をよく
混和し、散剤を製する。

（Ｂ）散剤処　　方化合物　Ａ　　　　　　　　５ｇ乳　　糖　　　　　　　　　　　　　４９５　ｇ以上を
よく混和し、散剤を製する。

（Ｃ）　　　錠　　剤処　　方化合物　Ａ　　　　　　　　２５　ｇ乳　　糖　　　　　　　　　　　　　１４０　　ｇ６％
ＮＰＣ乳糖　　　　　　１１０ｇパイレショデンブン　　　２０　ｇステアリン酸タルク　　　５ｇ以上をよく混和して打錠し、錠剤１０００個を製する。

（Ｄ）　　　錠　　剤処　　方化合物　Ａ　　　　　　　　５ｇ乳　　＠　　　　　　　　　　　　　　１５０　　ｇ６
％ＮＰＣ乳糖　　　　　　１２０ｇパイレショデンプン　　　２０　ｇステアリン酸タルク　　　５ｇ全　　　量　　　　　　　　　　　３００　ｇ以上をよ
く混和して打錠し、錠剤１０００個を製する。

（Ｅ）　　カプセル剤処　　方化合物　Ａ　　　　　　　　２５　ｇ乳　　糖　　　　　　　　　　　　　２２０　ｇパイレ
ショデンブン　　　５０　ｇステアリン酸タルク　　　５ｇ以上をよく混和し、硬カプセルに充填し、カプセル剤１
０００カプセルを製する。

（Ｅン　カプセル剤処　　方化合物　Ａ　　　　　　　　２５　ｇ乳　　糖　　　　　　　　　　　　　２３５　ｇパイレ
ショデンプン　　　５５　ｇステアリン酸タルク　　　５ｇ全　　　量　　　　　　　　　　　３００　ｇ以上をよ
く混和し、硬カプセルに充填し、カプセル剤１０００カ
プセルを製する。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＡｒはフェニル基またはナフチル基であり、Ｙ
は酸素原子を介することもある炭素数１〜４の飽和また
は不飽和アルキレン基であり、ｎは０または１であり、
▲数式、化学式、表等があります▼は結合窒素原子以外
の異項原子を含むこともある５〜６員環の飽和異項環で
あり、Ｒは水素原子または低級アルコキシカルボニル基
である）で表される化合物を有効成分として含有するこ
とを特徴とするプロリルエンドペプチダーゼ阻害剤。
（２）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中の▲数式、化学式、表等があります▼およびＲは
請求項第１項記載と同じ意味をもつ）で表される化合物
を有効成分として含有することを特徴とする請求項第１
項記載のプロリルエンドペプチダーゼ阻害剤。
（３）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＡｒ、Ｙおよびｎは第１項記載と同じ意味をも
つ）で表される化合物を有効成分として含有することを
特徴とする請求項第１項目記載のプロリルエンドペプチ
ダーゼ阻害剤。
（４）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＡｒはフェニル基またはナフチル基であり、Ｙ
は酸素原子を介することもある炭素数１〜４の飽和また
は不飽和アルキレン基であり、ｎは０または１である）
で表されるプロリルチアゾリジン誘導体。