JPH01230525A - 抗潰瘍剤の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野〕 本発明はマメ科植物を利用する抗潰瘍剤の製造法に関す
る。

（従来の技１） マメ科の植物としては１例えばクララ（Ｓｏｐｈｏｒａ
ｆｌａｖｅｓｃｇｎｓ、）　；ｈるいはンフオーラ　サ
ググロストラータ（Ｓ　ｏｐｈｏｒａ　　ｇｕｂｐｒｏ
ｓｔｒａｔａ　）がある。

前者は生薬名ｔ−ｒ苦疹」と称し、苦味健冑薬。

利尿薬として用いられ、後者は生薬名を「山豆根」と称
し２鎮痛薬として特に咽喉の痛み一？腫れに用いられて
きた。

そして、最近、これら植物から抽出されるエキスニハマ
トリン（ｍａｔｒｉｎｅ　）お工び／ｌｙｔはオキシマ
トリン（ｏｘｙｍａｔｒｉｎｅ　）が含まれ、潰蕩抑闇
ノ作用を示すことが判明＆病態生理Ｖｏｌ、　５　　％
　９　　ｐ、　７４８−７５３（１９８６））。

（発明が解決しようとする問題点） しかしながら、クラ２．ソフオーラ　テプブロストラー
タはいずれも、ａ国ｌｃ′Ｊ？いては裁培されておらず
、山野に（値かに自生しているにすぎず。

上記有用な効能が確認されているにも拘らず、エキス剤
の供給は末だなされていない。

従って１本発明は抗潰瘍作用を示すマトリンおよび／オ
キシマトリンを含むエキス剤を安定して生産し得る方法
を提供することを目的とする。

（課題を解決するための手段） 本発明に係る抗潰瘍剤の製造法は、マメ科植物の組織を
培養する工程、ｐよび該工程によって得られる組織培養
物から抗潰瘍成分を含むエキス得る工程、を包含するこ
とを特徴とするものである。

本発明の方法においては、先ず、マメ科植物の組織が培
養される。この組織培養工程はカルスの透導とこれによ
って得られるカルスの培［ｔ−８ｔｒものである。

カルスを誘導するには、マメ科植物の茅生え（幼植物）
の根、胚軸、子葉あるいは成熟植物の根、茎２葉、花、
花粉などの細胞＃ま之は組織片全採取して、カルス誘導
に供する。これらの細胞群または組織片を適当な培地を
用いて無菌的に培養することによりカルスが生じる。使
用される培地としては、植物の組織培養に便用される培
地がいずれも使用され得る。これには例えば、ムラシゲ
ースクーズ（Ｍｕｒａｓｈｉｇａ　　Ｓｋｏｏｇ）の培
地、ホワイト（ｗｈｔｔｅ）の培地、ガンボーグ（Ｇａ
ｍｂｏｒｇ）の培地。

ヘラ−（Ｈｅｉｆｅｒ）の培地、ニラチューニラチエ（
Ｎ　１ｔｃｈ　−Ｎ　ｉ　ｔｃｈ　）の培地などがある
。固体培地、液体培地のいずれもが利用されるが１通常
、＊天を含む固体培地が好適に用いられる。

と肥培地中には１通常、カルスの誘導を促進する之めに
植物ホルモン、特にオーキシンが含有される。オーキシ
ン類としては、２，４−ジクロロフェノキシ酢酸（２，
４−Ｄ）＆ナフタレン酢酸（ＮＡＡ）、２．　４．　５
−　トリクロロ７二／ヤ７酢酸（２，４，５−Ｔ　）　
、インドール酢酸（ＩＡＡ）などがある、、植物ホルモ
ンとして、サイトカイニン類が含有されていてもよく、
それには、ゼアチン。

６−ベンジルアデニン、カイネチン、リボシルゼアチン
、イソペンテニルアデニンなどがある。植物ホルモンは
、上記オーキシン類が１０”−’Ｍ以ド。

通常、　１０−’〜１０−’Ｍの割合で、サイトカイニ
ン類が＞ｏ−’Ｍ以Ｆ、ｉｎ常、　ｔｏ−”−ｔｏ−’
　Ｍ　ｏ　割＆　テ培地中に含有される。例えば、オー
キシン類とサイトカイニン類とを含む寒天培地とで、２
０〜３Ｕ’Ｃの暗所にてｌＯ〜３０日間培＃を行うとカ
ルスが形成される。

このようにして誘導され之カルスは、固体もしくは液体
培地を用いて継代培養（通常、２〜３週間に１固の割合
で新しい培地に植え継ぐ）がなされる。液体培地を用い
た振盪培養が有利である。

例えば、上記組成の液体培地にカルスｆｔ加え、２０〜
３０℃、好ましくは２７　”Ｃ：前後で５ｔｌ　〜１５
０ｒｐｍ、好ましくにｌ　ｌ　ＯｒＰｍ前後の割合で振
盪培養が行われる。元は照射してもしなくてもよい。

本発明においては上記工程によって得られる組　１織培
養物、即ちカルスから抗ＩＩ蕩成分を含むエキ　１スが
得られるうカルスは生のままエキスを得る工　１程に供
してもよく、マた適当な手段で乾燥して用いてもよい。

カルスを適当な溶媒を用いて抽出すると抗潰瘍成分であ
るマトリンおよび／またはオキシマトリンを含むエキス
が得られる。この溶媒としては。

水、エタノール、メタノールなどが用いられる。　　ｊ
これらのうち水−エタノール混合溶媒が好適に用いられ
る。抽出ｅ、、はそのままで抗潰瘍剤として用゛いられ
得るが、抗潰瘍成分が、主としてマトリン及びオキシマ
トリンであることが判明しているので、必要に応じ、ア
ルミナを用いたカラムクロマトグラフィーなどにより精
製される。得られた潰瘍抑制成分は、粗抽出液、粗抽液
濃縮物、精製物、′Ｈ４裂物金適当な溶媒に溶解させた
溶液など種々の形態で抗潰瘍剤として利用される。上記
粗抽出液ｆ精製物の潰瘍抑制作用は１例えば薄ノークロ
マトグラフィーなどでマトリンまたはオキシマトリンの
有無を測定することで確認される。マ）　ＩＪン及びオ
キシマトリンの量をチエツクし、その量の多いセルライ
ンを選抜することも０Ｔ能である。

（実施例） 以下、実施例により本発明を更に詳細に説明する。

実施例１゜ クラ’）　（Ｓｏｐｈｏｒａ　ｆｌａｖｅａｃｅｎｓ）
の根を採取し、常法に従って、エタノール及び次亜塩素
酸す）　ＩＪウムで滅菌後、５朋角に切断した。２．４
−Ｄを５．０ｘｔｏ”−’Ｍ、力（４チアｔ　５．０Ｘ
ｌＯ−’ＭＯ割合で含有するムラシゲ−スクーグの寒天
培地＆′ｃＪ：記根部切片を置床し、２５℃にて培養し
てカルスを誘導した。誘導されたカルスを同一組成の新
たな培地を用いて３回線代培養を行った。

続いて、　ＮＡＡ２．ＯＸ　ｌ　Ｏ−’ｌ！ｄ　、カイ
ネチン５．０ＸｌＯ−’Ｍの割合で含有するムラシゲ−
スクーグ液体培地２００ｍ１を入れ九５０ｔ）舅ｌ容マ
イヤーフラスコに、と記カル、Ｂｏｇ（湿Ｉｔｔ）を移
植し、２週間振盪培養を行った。得られたカルスを６０
℃にて２０時間乾燥し、乾燥カルス３．υＩを得た。

この乾燥カルス３．Ｏｉ　ｆｅ、　１２０Ｊｔｊ（Ｑ水
−エタノール混合溶媒（重量比でｌ：ｌ）’ｉ用い、４
０℃にて２４時間抽出し念。抽出後、吸引濾過した濾液
を、ロータリーエバポレーターで濃縮乾固し。

乾燥エキス０．９ｙを得た。

この乾燥エキスを用い以下の方法でマトリンとオキシマ
トリンが含有されていることを確認し比。

乾燥エキスにクロロホルム５０１１ｇを加え、不溶物を
濾過して除く。こ九［０，ＩＮ塩酸５０ｄを加え、クロ
ロホルムノ―を分取し濃縮する。−縮残渣にエーテル３
０ｘ／を加え、エーテル可溶部を、濃縮乾固する。続い
てメタノール１．０ｍ１ＶＣ浴解し。

薄ノー板（シリカゲル６０　Ｆ　、、４ＭＥＲＣＫ社）
に標品と共に５μ！スポツトする。俗媒系ブタノール：
塩酸：水（５：ｌ：１）で展開する。展開後、風乾しド
ラーゲンドルフ試薬を噴霧すると、マトリン及−し びオキシマトリンは黄色呈す。このとき薄ノー板上に検
出されるスポットはマトリンおよびオキシマトリンの標
品スポットと同じであり、このエキスにはマトリンおよ
びオキシマトリンが含有されていることが確認された。

実施例２゜ Ｓ　ｏｐｈｏｒａ　ａｕｂｐｒｏａｔｒａｔａの茎を採
取し、以Ｆは。

実施例１と同様にして、Ｉｌｉ、燥エキスｏ、ｇｇ２得
た。

゛この乾燥エキスにもマトリンおよびオキシマトリンが
含有されていることが確認された。

実施例、（。

クジラ（５ｏｐｈｏｒａ　ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ　）の
＆を採取し、実施例１と同様にしてカルスを誘導し、同
一組成の固形培地で３伏線代培養を行った。

続いて、　ＩＡＡ　５．ＯＸ　ｌ　Ｏ−’　Ｍ　、カイ
ネチン５．ＬＩＸＩＵ−７Ｍの割合で含有するガンボー
グの液体培地２Ｌ）ＯＪＥｊを入れた５　００　ｍｌ谷
マイヤー７ランコに上記カルス１０９（湿１ｔ１１）ｔ
−移植し、３週間振盪培養行った。

得られたカルスを６０℃にて２０時間乾燥し、乾燥カル
ス４．２ｇを得た。

この乾燥カルス３．Ｏｇに、水１２０　ｍｌを加え、還
流下、９０分、沸騰浴上で熱水抽出した。抽出機吸引濾
過し、水製エキスを含む濾液を得た、このエキスにもマ
トリンおよびオキシマトリンが含有されていることが確
認され７ｔ。

（発明の効果） 本発明の方法によれば、マトリン２工び／′！たけオキ
シマトリンを含むエキスを荏易に製造できる特徴がある
。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. マメ科植物の組織を培養する工程、および該工程によつ
   て得られる組織培養物から抗潰瘍成分を含むエキスを得
   る工程、を包含することを特徴とする抗潰瘍剤の製造法
   。