JPH01131457A - 液体クロマトグラフ用オートサンプラによる試料注入方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明はオートサンプラを用いて試料を自動的に注入す
るようにした液体クロマトグラフにおける試料注入方法
に関するものである。

（従来の技術） 液体クロマトグラフで一連の試料を連続して測定する場
合、オートサンプラを用いて試料を自動的に注入する。

その注入動作は第５図に示されるように、前の分析が終
った時点で次の注入動作を行なう。試料の注入にはまず
、シリンジによって試料瓶から試料を吸引し、サンプル
ループへ試料を充填する。

その後サンプリングバルブを切り換えて試料をカラム流
路に導入する。試料導入後タイマーをリセットして時間
を計測し、一定の分析時間Ｔａが終了すると再び次の試
料注入を行なうというように、連続して測定を繰り返し
ていく。

（発明が解決しようとする問題） オートサンプラが試料を注入するのに要する時間は、試
料注入量の多少や試料瓶の位置によって異なってくる。

例えば試料注入量について言えば、試料吸引や試料をサ
ンプルループへ充填するためのシリンジのプランジャの
スピードは一定であるため（試料粘度のためあまり速く
できない）、例えば、１μΩの試料を吸引し充填する時
間が数秒であるのに対し、１５０μａの試料の場合は１
分ぐらいかかる。そのため、前の分析が終了した後、次
の試料が注入されるまでの時間は注入条件によって異な
る。

一方、グラジェント分析では、第６図に示されるように
、カラムの移動相組成を変化させ１分析が終了するごと
に移動相組成を初期濃度に戻す。

しかし、時間の経過とともにカラムの゛状態は少しずつ
変化しているため、オートサンプラによる試料導入のタ
イミングがずれるとピークの保持時間や高さが変化し、
再現性のよいデータを得ることができない。

本発明はグラジェント分析の場合のように移動相組成を
変化させる分析であっても、試料注入条件によらず再現
性のよいデータを得ることのできる試料注入方法を提供
することを目的とするものである。

（問題点を解決するための手段） 本発明では、オートサンプラを用いて試料を自動的に注
入するとともに、分析条件の設定された分析を連続して
行う液体クロマトグラフで、前の試料の分析中にオート
サンプラが次の試料をサンプルループに充填し、前の分
析終了後、一定のタイミングで試料をカラム流路に導入
する。

（実施例） 第１図に本発明が適用される液体クロマトグラフの流路
図を示し、第２図に第１図におけるオートサンプラを示
す。

第１図で２種類の移動相Ａ、ＢがそれぞれポンプＩａ、
ｌｂによって送られ混合される。ポンプｌａ、ｌｂはコ
ントローラ２によって制御され、移動相の組成が予め設
定されたプログラムに従って変化するように動作する。

３はオートサンプラであり、コントローラ２の制御によ
り自動的に試料を注入していく。４は試料を分離するカ
ラム、５は検出器であり、検出器を通った試料は移動相
とともにドレインへ排出されていく。

第２図にオートサンプラを示す。

ポンプにつながる流路６ａとカラム４につながる流路６
ｂの間には試料を導入するサンプリングバルブである六
方切換えバルブ７が設けられている。切換えバルブ７に
はサンプルループ８が設けられているとともに、試料を
注入するインジェクションポート９と、ドレインへつな
がる流路が設けられている。１０は切換えバルブ７の切
換えの際の流路６ａ、６ｂの圧力変化を小さくするため
の抵抗管である。

１１は試料瓶であり、複数の試料瓶１１がサンプルラッ
ク１２に装着されている。

１３は試料の注入を行なうノズルであり、配管１４を経
てシリンジ１５で吸引と注入動作が行なわれるようにな
っている。ノズル１３はサンプルラック１２の任意の試
料瓶１１の位置、インジェクションポート９の位置及び
洗浄ポート１６の位置の間を移動することができる。ノ
ズル１３につながる流路１４には更に電磁弁１７を介し
て洗浄用のシリンジ１８が設けられ、シリンジ１８には
電磁弁１９を介して洗浄液２０が供給されるようになっ
ている。２１は５μｍ以上のごみなどの吸引を防ぐサク
ションフィルタである。

サンプルループ８は内径が０．５ｍｍで長さが７５０ｍ
ｍ、流路１４は内径が１ｍｍで長さが１８００ｍｍ（容
量は約１４００μＱ）であり、サンプリング用のシリン
ジ１５の容積は２５０μＱ。

洗浄用シリンジ１８の容量は２．５ｍＩ２である。

このオートサンプラにおける試料注入動作を説明する。

ノズル１３を所定の試料瓶に挿入し、シリンジ１５のプ
ランジャを引いて試料を流路１４に吸引する。切換えバ
ルブ７を破線で示されるロード側に切り換えておき、流
路６ａ、６ｂには移動相を流しておく。その後ノズル１
３をインジェクショボート９に挿入し、試料をサンプル
ループ８に注入する。その後、切換えバルブ７を実線で
示されるインジェクション側に切り換えると流路６ａか
ら切換えバルブ７を経てサンプルループ８中の試料が切
換えバルブ７を経て流路６ｂへ送り出され、カラムへ導
入される。

次の試料を注入する前にノズル１３と流路１４を洗浄す
る。電磁弁１７を閉じたままで電磁弁１９をあけてシリ
ンジ１８に洗浄液２０を吸引する。

ノズル１３を洗浄ポート１６に挿入し、電磁弁１７．１
９を切り換え、シリンジ１８から洗浄液を押し出して流
路１４とノズル１３を通って洗浄ポート１６へ排出する
。

次に一実施例の動作を第３図と第４図を参照して説明す
る。

コントローラ２には注入条件として、試料が導入（分析
開始）された後、次の試料の注入動作を行なうまでの時
間ｔｏを設定しておく。この時間ｔｏは、試料注入量や
試料瓶の位置などから求まる最大注入時間を分析時間Ｔ
Ｏから引いて算出しておく。

最初の試料をサンプリング用シリンジ１５によって吸引
し、サンプルループ８へ充填する。そして切換えバルブ
７をインジェクション側（実線側）に切り換えることに
より試料導入を行い、タイマーをリセットする。ノズル
１３の洗浄を行なっておく。

注入条件として設定された時間ｔｏが経過すると、次の
試料をシリンジ１５によって吸引し、切換えバルブ７を
破線で示されるロード側に切り換えてサンプルループ８
へ試料を充填し、その状態で待機する。

分析時間Ｔｏが経過すると前の試料の分析が終了したこ
とになり、その時点で切換えバルブ７をインジェクショ
ン側（実線側）に切り換え、試料導入を行なって次の試
料の分析を始める。その後は同様にして分析が終了する
前に次の試料のサンプルループ８への充填を行なってお
く。

このように前の試料の分析中にサンプルループ８へ次の
試料が充填されているので、一定周期Ｔｏのグラジェン
ト分析サイクルの開始時点で正確に同期して試料を導入
することができるようになる。

上記の実施例では、前の試料の分析中に次の試料の注入
動作を始めるタイミングは、前の試料導入から一定時間
ｔｏ後になるように設定しているが、各試料ごとの注入
量や試料瓶の位置をそれぞれコントローラ２に設定して
おき、コントローラ２で各試料について試料注入動作を
開始する時間を設定するようにしてもよい。その場合に
は待機時間ｔｅｌ、ｔＷ２ｊ　　ｔＷ３１・・・・・・
を０にすることができる。

このように、待機時間をＯにする場合は、第３図に示さ
れるフローチャートでは試料を導入してタイマーをリセ
ットした後１次の試料の注入条件を読み込み、試料注入
動作開始時間ｔｏを算出するプログラムを追加すればよ
い。

コントローラ２としてはマイクロコンピュータを用いる
ことができる。

（発明の効果） 本発明では前の試料の分析中にオートサンプラが次の試
料をサンプルループに充填し、前の分析終了後、一定の
タイミングで試料を導入するようにしたので、グラジェ
ント分析時のようにカラム内の移動相濃度を変化させる
ような分析でも、試料導入時のカラムの状態をオートサ
ンプラの注入条件によらず一定にすることができ、再現
性のよい分析を行なうことができる。

また、前の試料の分析中に次の試料をサンプルループに
充填しておくので、分析サイクルを短縮することができ
、また移動相を節約することもできる。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明が適用される液体クロマトグラフの一例
を示す流路図、第２図はオートサンプラの一例を示す構
成図、第３図は一実施例の動作を示すブローチヤード、
第４図は同実施例の動作を示すタイミング図、第５図は
従来のオートサンプラの動作を示すフローチャート、第
６図は同従来例の動作を示すタイミング図である。 ｌａ、ｌｂ・・・・・・ポンプ、　　２・・・・・・コ
ントローラ、３・・・・・・オートサンプラ、　４・・
・・・・カラム、７・・・・・・切換えバルブ、　８・
・・・・・サンプルループ、１１・・・・・・試料瓶、
　　１２・・・・・・サンプルラック、１３・・・・・
・ノズル、　　１５・・・・・・シリンジ。 特許出願人　株式会社島津製作所

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. オートサンプラを用いて試料を自動的に注入するととも
   に、分析条件の設定された分析を連続して行う液体クロ
   マトグラフで、前の試料の分析中にオートサンプラが次
   の試料をサンプルループに充填し、前の分析終了後、一
   定のタイミングで試料をカラム流路に導入するオートサ
   ンプラによる試料注入方法。