JPH01125382A - 含フツ素プロトポルフイリン誘導体及びその塩 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は倣小癩の早期発見のだめの診断薬として有用な
貧フッ素ゾロト？ルフイリン訪尋体およびその塩に関す
る。

〔従来の技術およびその問題点〕

ポルフィリン化合物が癌に集積するという事実は、古く
から数多く報告されている。

一方、近年グラスファイバーを用いて、レーザー光線を
生体内の組織に照射できるようになった。この技術を応
用して、あらかじめポルフィリン化合物を癌に集積させ
ておき、レーザー光線を照射して癌を破壊する光化学治
療の研究が注目を集めている。

この光化学治療は、癌に乗積したポルフィリンがレーザ
ー光線の照射によって励起され、この励起によって生じ
た活性酸素が癌細胞を攻撃することにより、癌が消滅す
ると言われる方法である。この光化学治療は、治療と共
に、癌に集積したポルフィリンが４ＱＱｎｍ付近の光を
照射すると赤色螢光を発することから、癌の診断にも応
用可能であると期待され、実際にヘマ）ｙｌＰルフイリ
ン訪導体を用いて、診断及び治療を行う研究が活発に行
われている。しかし、現在用いられているヘマトポルフ
ィリン誘導体は数棟類のポルフィリン化合物の混合物で
あり、医薬品として用いるには問題があり未だ実用化し
ていない。

また、この光化学治療を実際に応用可能にし、更に癌治
療の一手段として実施するには、次に述べる短所を改善
しなければならない。この短所とは、診断又は治療がグ
ラスファイバーが挿入可能な部位に限定されることであ
る。

仮に挿入可能な部位であっても、レーザー光線を照射で
きるのは表層癌のみであり深部の癌には光が到達しない
ため治療効果を上けることもできなければ、診断するこ
ともできない。

このようにポルフィリン化合物を用いたレーザー照射に
よる癌の診断方法には限界があると考えられる。

ところで、現代の医療において、癌の治療は放射線療法
を含めて外科的にも内科的にも、数多くの手段があり、
癌を早期に発見できれば、癌の治癒率は、飛躍的に向上
すると言われている。

時に前癌症状を含む微小癌の早期発見が、現代の癌治療
の最大のテーマと言っても過言ではない。

一方、核磁気共鳴（ｍ）を応用した各種＝　４− 疾患の診断は、生体をそのままの状態で観察できる方法
として、最近注目を集めている。

特に最近、超伝導磁石の開発が長足の進歩をとげている
ことと相まって、将来の各種疾患の診断法として期待さ
れている。

この生体魅の検出は、現在１Ｈ核について行われている
が、ＩＨ核は生体の大部分を占める水に貧まれているた
め、生体組祇の形状を知るのが精−杯で、微小癌の発見
は不可１１ニと考えられる。畠電スペクトルを横出し得
る核種としては、ＩＨの他に、１３ｃ　、　１５Ｎ　、
　３１ｐ　、　１９　Ｆ等があるが　１３（：％ｌｐは
ｌＨ同様、生体組織に常任するため、検出精度としては
ＩＨと同等と考えられる。

そこで不発明者らは、このＭｖｌｇを恢出し得る核種と
して生体内にほとんど存在しない１９Ｆに着目し、？ル
フィリン誘導体にフッ素を導入することを考えた。すな
わち、フッ素を含む？ルフイリンを投与し、これが癌組
織に集積すれば、他の核種を用いた場合に比べて格段に
バックグランドの少ないｍが得られ、微小癌の早期診断
が可能になると考えられる。

Ｃ問題点を解決するための手段〕 本発明はかかる知見と発想に基づいてなされたものであ
シ、癌組織に特異的に集積する特性を有し、微小癌の診
断薬として有用な次の式（Ｉ） 以下余白 〔式中、Ｒ１及びＲ２は、一方が−ＣＨ＝　ＣＦ２のと
き他方が−ｃＨ＝　ｃＨ２であるか又は両刀とも−ＣＨ
＝　ＣＦ２である〕 で表わされる含フッ累ゾロト？ルフイリン誘導体及びそ
の塩を提供するものである。

本発明の含フッ素ゾロトホルフイリン誘導体（Ｉ）は、
例えば次の反応式に従って製造される。

〔式中、Ｒ３及びＲ４は一方がホルミル基、他方が一〇
Ｈ＝　Ｃｆｆ２であるか又は両方ともホルミル基であり
、Ｒ５はエステル残基であり、Ｒ１およびＲ２は前記と
同じ〕 すなわち、３位および８位のいずれか一方、又は両方が
ホルミル基であるゾロトボルフイリンエステル誘導体（
■）（以下、アルデヒド体と略記する）をウイツテツヒ
反応に付して当該ホルミル基がゾフロロビニル基に変涙
せしめ、次いでこのゾフロロビニル基金ゼするプロト昶
ルフイリンエステル誘導体伽υ（以−［、ゾフロロビニ
ルーエステル体と略記する）を加水分解することにより
、本発明化合物（Ｉ）ｔたはその塩が製造される。

アルデヒド体（ＩＩ）は、例えばＨ，Ｈ，Ｉｎｈｏｆｆ
ｅｎら、　Ｊｕｓｔｕｓ　Ｌｉｅｂｉｇｓ　Ａｎｎ、　
Ｃｈｅｍ、　７３０　。

１７３（１９６９）に記載されているように、ゾロトー
ルフィリンエステルを出発原料として、光酸化または過
ヨード酸、四酸化オスミウム等で酸化することによシ得
られる。

アルデヒド体（ＩＩ）からゾフロロピニルーエステル体
（ホ）を製造する反応は、ウイッテッヒ反応であり、ア
ルデヒド体（１１）、ゾフロロモノクロロ酢酸ナトリウ
ムおよびトリフェニルフォスフインを１００〜２００℃
に３０分〜ｌＯ時間程１を加熱することにより行なわれ
る。

得られたゾフロロビニルーエステル体（ホ）の加水分解
は、例えばトルエン等の溶媒中で水酸化ナトリウム等の
塩基を用いて行なわれる。

〔作用並びに発明の効果〕

本発明化合切（Ｉ）、符に３２−ゾフロロビニルゾロト
ボルフイリンナトリウムは、これを生体内に投与すると
選択的に癌組織に乗積するため、幅徂を利用した微小癌
の早期診断薬として有用である。

〔実施例」 次に実地例を挙げて本発明の詳細な説明する。

実施例１ （１）　　３２−ゾフロロビニルゾロトボルフイリン（
３−ＦＰＰ）ジメチルエステルの合成シムロートを付け
た５０−の２１」フラスコに、スピログラフイス？ルフ
イリンゾメチルエステル（３−アルデヒド体）　７０　
ｍ９及びトリフェニルフォスフイン７８６Ｍ９に入れ、
こ−１１＝ の容器内の空気をアルゴンで置換した後、Ｎ−メチル−
２−ピロリシン（ＮＭＰ　）　ｌ　Ｑ−を加え、これを
１６０℃に加熱した。この加熱溶液にゾフロロモノクロ
ロ酢酸ナトリウム４５６　Ｑ　（Ｄ　ＮＭＰ　（７ｍｌ
　）　ｍ　？ｆＥ　ヲ４７　分間テア１１１え、同温度
で３０分間反応後冷却し、反応溶液を氷水中に注ぎ反応
を終了した。得られた水溶液から反応生成物をメチレン
クロライドで抽出し、抽出液を水洗後メチレンクロライ
ドＪ−を硫酸マグネシウムで乾燥し、メチレンクロライ
ドを減圧で留去し反応生成物を得た。

得られた反応生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフ
ィーで分離精製すると、３−ＦＰＰＰＰジメチルエステ
ル　１７Ｍｇ　（４２％）得た。

融点；　２０３．５−２０５．５℃ ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｒｎ−’　　：　３３２４＜Ｎ−Ｈ＞
、１７３８＜−ｒ−ステルカルボニル＞　、　１１９８
．１１７６＜Ｃ−Ｆ＞”Ｈ−ＮＭＲ（４００Ｍ）ｆｚ　
、　ＣＬ）Ｃ１１３）　Ｐｐｒｌ’ｌ　：９．９９（ｓ
）、　９．８９（ｓ）、　９．８７（ｓ）、　９．６６
（ｓ）＜−Ｃ１−ｉ　＝＞。

８．１８（ｄｄ、Ｈａ、Ｊａｂ＝ｌＩＨｚ、Ｊａｃ＝１
７Ｈｚ）　。

６．４７　（ｄ　、Ｈｄ　、　Ｊａｂ’＝２５Ｈｚ　）
　、　６．３３　（ｄｄ　、Ｈｃ　。

Ｊｂｃ＝１．４Ｈｚ　、　Ｊａｃ＝１７Ｈｚ）　、　６
．１７　（ｄｄ　、Ｈｂ　。

Ｊ　ｂ　ｃ＝１．４Ｈｚ　、　Ｊａ　ｂ＝１１Ｈｚ　）
　、　４．４５０ｉ＜　−ＣＨ２−＞　。

３．６６（ｓ）、　３．６５（ｓ）、　３．５５（ｓ）
、　３．５２（ｓ）、　３．４６（ｄ　、　Ｊ＝２．４
Ｈｚ　）　、　３．２３（ホ）＜−ＣＨ２＞　、　　４
．０９（ｂ）＜＝ＮＨ，＞ １９ｐ　−、ＮＩＭＲ（９Ｑ　ＩＶＩ）Ｉｚ　、　ＣＩ
）０７３　、　ＣＦＣＡ！３　）　ｐｐｍ　ニー８２．
１４　（ｄｄ　、Ｆｂ’、　Ｊｂ’ｄ＝２５．Ｈｚ　、
　Ｊａ’ｂ’＝２６Ｈｚ）　、−８３，７６（ｄ　、Ｆ
ａ’、　Ｊａ’ｂ’＝２６Ｈｚ）ＭＳ；ｍ／ｅ＝６２６
　（ＩＶｆ＋） Ｈｉｇｈ　　ＭＳ；０ｂｓｃｌ　　６２６．２７０１７
Ｃ，６Ｈ３６Ｎ、０．Ｆ２　；Ｅｒｒｏｒ、　　０．１
（２）　８−　ＰＰＰＰＰジメチルエステル成ツムロー
トを付けた５０−の２日フラスコにインスピログラフイ
ス緻ルフイリンゾメチルエステル（８−アルデヒド体）
７ｏｍｙ及びトリフェニルフォスフイン７４６嘘を入れ
、この容器内の空気をアルゴンで置換した後、ＮＩＶＩ
Ｐ　１０−を加え、これを１６０℃に加熱した。この加
熱溶液にゾフロロモノクロロ酢酸ナトリウム４３６肩ｇ
のＮＭＰ（７ｄ）溶液を４７分間で加え、同温度で３０
分間反応後冷却し、反応溶液を氷水中に注ぎ反応を終了
した。得られた水溶液から反応生成物をメチレンクロラ
イドで抽出し、抽出液を水洗後メチレンクロライド増を
硫酸マグネシウムで乾燥し、メチレンクロライドを減圧
で留去し反応生成物を得た。得られた反応生成物をシリ
カゲルカラムクロマトグラフィーで分離精製すると、８
−　ＰＰＰＰＰジメチルエステル１諺ｇ（５５％）得た
。

融点；　２０４−２０５．５’Ｃ ＩＲ（ＫＢｒ）Ｃｊｎ−’　；３３２４＜Ｎ−ｆ（＞、
　１７３８＜−ｒ−ステルカルボニル＞　、１１９４．
１１７０＜Ｃ−Ｊ’＞ｒＨ−ＮＭＲ（４００■（ｚ　、
　ＣＬＣ１３）　ｐｐｍ　；９．９８（ｓ）　、　９．
８７（ｓ）　、　９．８５（ｓ）　、　９．６３（ｓ）
＜−ＣＨ＝＞　。

８．１７　（ｄｄ　、Ｈａ　、　Ｊａｂ＝１１Ｈｚ　、
　Ｊａｃ−＝１６Ｈｚ）　。

６．４４　（ｄ　、Ｈｄ　、　Ｊｄａ’＝２５Ｈｚ　）
　、　６．３２　（ｄ　、Ｈｅ　。

Ｊａｂ　＝１６Ｈｚ　）　、　６．１６（ｄ、ｆ（ｂ、
Ｊａｂ＝１１Ｈｚ）　。

４．３１（ｍ）＜−ＣＨ２−＞　、　３．６６（ｓ）　
、　３．６５（ｓ）　、　３．５５（８）、　３．５４
（１１）、　３．５１（８）、　３．４５　（ｄ　、Ｊ
＝２Ｌ４Ｈｚ）　。

３．２３（ホ）＜−ＣＨ２−ン、−４，１（ｂ）＜＝Ｎ
Ｈ＞１９Ｆ−ＮＭＲ（９０ＭＨｚ、Ｃ■］３．ＣＦ′Ｃ
Ｃ１３）ｐｐ；−８Ｚ）２（ｄｄ、Ｆ’ｂ、Ｊｄｂ’＝
２５Ｈｚ、Ｊａ’ｂ’＝２６Ｈｚ）、−８３，６４（ｄ
、Ｆａ’、Ｊａ’ｂ’＝２６Ｈｚ）ＭＳ：ｍ／ｅ＝６２
６　（Ｍ＋） Ｈｉｇｈ　ＭＳ；０ｂｓｄ、６２６．２７０１７０３６
Ｈ３６Ｎ４０４Ｆ２　；　Ｅｒｒｏｒ　、　０．２（３
）　　３　、８−ＰＰＰＰＰジメチルエステル成ツムロ
ートを付けた５０ＷＬｌの２日フラスコに、３．８−ジ
アルデヒド体４０　ＩＩＩ？及びトリフェニルフォスフ
イン７８８■を入れ、この各器内の空気をアルゴンで置
換した後、習１０−を加え、これを１６０℃に加熱した
。

この加熱溶液にゾフロロモノクロロ酢酸ナトー１６＝ ＋）　ｙ　ム４　ｓ　５ｍｙ　（７）　ＮＩＶＪＰ　（
７ｍｌ　）溶液を１５分間で加え、同温度で３０分間反
応後冷却し、反応溶液を氷水中に注ぎ反応を終了した。

得られた水溶液から反応生成物をメチレンクロライドで
抽出し、抽出液を水洗後メチレンクロライド層を硫ばマ
グネシウムで乾燥し、メチレンクロライドを減圧で留去
し反応生成物を得た。得られた反応生成りをシリカゲル
カラムクロマトグラフィーで分離精製すると、３．８−
ＦＰＰＰＰジメチルエステル　８　Ｉｔ？（４０％）得
た。

融点；２１２−２１９．５℃ ＩＲ（ｉ（Ｂｒ）ｃｒｎ−１；　３３２４＜Ｎ−１（＞
、１７３６＜エステルカルボニル＞　、１１９８．１１
７２＜Ｃ−Ｆ＞’Ｈ−ＮＭｌｔ（９０Ｎｉ１（ｚ　、　
ＣＩＪ）Ｃｔ！３　）　ｐｐｍ　；９．９２　（２Ｈ，
ｓ）、９．７６　（２Ｈ，ｓ）＜−ＣＨ＝＞。

６．５５（ｄ、２Ｈ，Ｊａｂ’＝２６Ｈｚ）、４３３（
ｄｄ、４Ｈ。

Ｊ＝７Ｈｚ　、Ｊ’−７Ｈｚ）＜−ＣＨ，−＞、　３．
６６　（ｓ　、６Ｈ）。

３．５４（ｓ、６Ｈ）、３．４８（ｓ、６Ｈ）、３．２
４（ｄａ、４Ｈ。

Ｊ＝７Ｈｚ、Ｊ’＝＝７Ｈｚ） ”Ｆ　−幅侃（Ｃ■Ｊｓ　＋　Ｃ’ｉ””：ｉｓ　）　
ｐＰｍ’−８１，８６（ｄｄ、Ｆｂ’、Ｊａｂ’＝２６
Ｈｚ、Ｊａ’ｂ’＝２６Ｈｚ）、−８３，３８（ｄ、Ｆ
ａ’、Ｊａ’ｂ’＝２６Ｈｚ）ＭＳ　；ｍ／ｅ＝６６２
　（Ｍ＋） ｊ（ｉｇｈ　　ＭＳ；０ｂｓｄ、６６２．２５２２８Ｃ
ＨＨ３４Ｎ４０４Ｆ４；Ｅｒｒｏｒ、０．７実施例２ （１）　　３−　Ｆ’ＰＰゾメチルエステルの加水分解
３−　ＰＰＰＰＰジメチルエステル４．３１ｇをトルエ
ン１０ｒｎｔに溶解し、これに１，８■の水酸化ナトリ
ウムを溶解したメタノール溶液０．１ｒｎｌ！を加え、
−時間煮沸還元後放冷し析出した黒色結晶をろ集し、減
圧乾燥し３−　ＰＰＰシナトリウム（３−ＦＰＰＮ　）
　　を１２．４ｍｇ得た。このナトリウム塩を１肩ｇと
シ、塩酸メタノール（１→１０）１−に溶解し６０℃で
３０分間加熱後放冷し炭酸アンモニアで中和しメチレン
クロライドで抽出した。この抽出液を薄層クロマトグラ
フィーで分析したところ、３−Ｆ’ＰＰゾメチルエステ
ルと同じＲｆ値にスポットを観察し他のスポットは見ら
れなかった。

（２）　　８−　ＰＰＰＰＰジメチルエステル水分解８
−　ＰＰＰＰＰジメチルエステル４．２　Ｔ１９をトル
エン１０−に溶解し、これに１．８　ｍｇの水酸化ナト
リウムを溶解したメタノール溶液ｏ、　ｉ　ｒＩＬｌを
加え、−時間煮沸還元後放冷し析出した黒色結晶をろ果
し、減圧乾燥し８−　ＰＰＰシナトリウム（８−ＦＰＰ
Ｎ　）を１３．１■得た。このナトリウム塩を１１１ｇ
とり、塩酸メタノール（１→１０）１−に溶解し６０℃
で３０分間加熱後放冷し炭酸アンモニアで中和しメチレ
ンクロライドで抽出した。この抽出液を薄層クロマトグ
ラフィーで分析したところ、８−ＦＰｐゾメチルエステ
ルと同じＲｆ値にスポットを観察し他のスポットは見ら
れなかった。

（３）　　３　、８−ＰＰＰＰＰジメチルエステル水分
解３．８−ＰＰＰＰＰジメチルエステル１９属ｇをトル
エン１０−に溶解し、これにＺ　１８１１の水酸化ナト
リウムを溶解したメタノール溶液０、１−を加え、−時
間煮沸還元後放冷し析出した黒色結晶をろ果し、減圧乾
燥し３，８−ＰＰＰシナトリウム（３、８−ＦＰＰＮ）
を１５，１ｍｇ得た。このナトリウム塩を１　ｍｌ？と
り、塩酸メタノール（１→１０）１−に溶解し６０℃で
３０分間加熱後放冷し炭酸アンモニアで中和しメチレン
クロライドで抽出した。この抽出液を薄層クロマトグラ
フィーで分析したところ、３．８−ＰＰＰＰＰジメチル
エステルじＲｆ値にスポットを観察し他のスポットは見
られなかった。

実施例３ ヒト前癌（１ＶＩｋｃＮ　−４５）を移植したヌードマ
ウスに３−　ＦＰＰＮ　２　ｔｒｙを生理食塩水２−に
溶解した液を１．２５−腹腔内投与し、投与２４時間後
に解剖し癌、肝臓及び胃を採取しすばやく凍結した。

凍結サンプルは凍結乾燥後、乳鉢で粉砕し　４゜各２５
１１ｇを量りと９蒸留水７５μｌを加え３０分間混和し
だ後更に２％ゾインゾロビルアミン含有メタノール９０
０μｊを加え３０分間混和した。この抽出液を３０００
　ｒｐｍで２０分間遠心分離し上清１００μｌを採取し
９００μｌのメタノールを加えて励起波長４００ｎｍに
おける螢光スペクトルを５７Ｑｎｍから７２０ｎｍまで
測定した。得られた結果を図１〜図３に示す。その結果
？ルフイリン由来の６３０画における螢光強度を計測し
たところ癌には１６００、肝臓には１４０、胃には１０
３３の値を得た。

すなわち、３−ＦＰＰＮは選択特異的に癌に集積するこ
とが判明した。

【図面の簡単な説明】

図１〜３は実施例３におけるそれぞれ癌、肝臓、胃抽出
液の螢光強度を示す図面である。 以上 出願人　株式会社佐藤薬学研究所 ｎ二、。 弁理士　高　野　登志雄：パ°・−

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、次の式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） 〔式中、Ｒ＿１及びＲ＿２は、一方が−ＣＨ＝ＣＦ＿２
   のとき他方が−ＣＨ＝ＣＨ＿２であるか又は両方とも−
   ＣＨ＝ＣＦ＿２である〕 で表わされる含フッ素プロトポルフイリン誘導体及びそ
   の塩。 ２、Ｒ＿１が−ＣＨ＝ＣＨ＿２であり、Ｒ＿２が−ＣＨ
   ＝ＣＦ＿２である特許請求の範囲第１項記載の含フッ素
   プロトポルフイリン誘導体およびその塩。 ３、Ｒ＿１が−ＣＨ＝ＣＦ＿２であり、Ｒ＿２が−ＣＨ
   ＝ＣＨ＿２である特許請求の範囲第１項記載の含フッ素
   プロトポルフィリン誘導体およびその塩。 ４、Ｒ＿１、Ｒ＿２ともに−ＣＨ＝ＣＦ＿２である特許
   請求の範囲第１項記載の含フッ素プロトポルフイリン誘
   導体およびその塩。