JP7471269B2 - 唾液試料中の分析物を検出するための試験装置および使用方法 - Google Patents
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Description
本出願は、2015年4月6日に出願された米国仮出願第62/143,792号の優先権を主張するものであり、その内容は、あらゆる目的のためにその全体が参照により組み込まれる。
本開示は、試料中の1つ以上の分析物を定量的に検出するための装置、キット、機器および方法に関する。より具体的には、本開示は、被験体からの唾液試料などの唾液試料中の分析物を定量的に検出するための側方流動試験装置と、試験装置を含むキットまたは器具と、試験装置、キットまたは器具を使用する方法とに関し、これらは、例えばユーザの1種以上のホルモン、排卵、妊娠、および/または妊孕性の評価のために構成され、例えばユーザのホルモン、排卵、妊娠、妊孕性の状態、時間窓、傾向、または治療の監視または指導のために構成される。
以下の説明では、特定の物品および方法が背景および導入のために記載されている。本明細書に含まれるものは、先行技術の「自認」と解釈されるべきものではない。出願人は、本明細書で参照されている物品および方法が適用される法律規定の下で先行技術を構成していないことを、必要に応じて明示する権利を明確に留保している。
必要とする。また、試験の結果を読み取るまでには長い待機時間があった。
一態様において、例えば被験体からの唾液試料などの唾液試料中の分析物を定量的に検出するための側方流動試験装置が本明細書に開示されており、この装置は、自身の上に第1の試験位置を含む第1の多孔質マトリックスを含み、前記第1の試験位置が、分析物に結合するか、または前記分析物に結合する他の結合試薬に結合するか、あるいは、前記分析物の結合試薬に結合するために前記試料中の分析物と競合する分析物または分析物類似体である第1の試験試薬を含み、液体試料は、前記試験装置に沿って側方に流動し、前記第1の試験位置を通過して第1の検出可能な信号を形成し、1)前記装置は、自身の上に第2の試験位置を含む第2の多孔質マトリックスをさらに含み、前記第2の試験位置は、前記唾液試料中の正常化物質に結合するか、または前記正常化物質に結合する他の結合試薬に結合するか、あるいは、前記正常化物質の結合試薬に結合するために前記唾液試料中の正常化物質と競合する正常化物質または正常化物質類似体である第2の試験試薬を含み、液体試料は、前記試験装置に沿って側方に流動し、前記第2の試験位置を通過して第2の検出可能な信号を形成し、前記第1の検出可能な信号および前記第2の検出可能な信号は、前記唾液試料中の前記分析物の量を評価するために比較されるように構成され、および/または、2)前記装置は、前記装置が前記被験体の口に挿入されている間に、被験体の体温を測定するように構成された温度センサをさらに含む。
成し、前記第1の検出可能な信号および前記第2の検出可能な信号は、前記唾液試料中の前記分析物の量を評価するために比較されるように構成される。
るために唾液試料中の正常化物質と競合する正常化物質または正常化物質類似体であってもよい。
なくとも一部分を、固体の裏打材によって支持することができる。
先の実施形態のいずれかにおいて、筐体はマトリックスまたは試料塗布要素の試料受容部分の少なくとも一部分を覆うことができず、試料または緩衝希釈剤を、筐体の外側のマトリックスまたは試料塗布要素の試料受容部分の一部分に塗布し、次いで試験位置へ輸送することができる。
先の実施形態のいずれかにおいて、試験装置は、例えばバーコードなどの機械可読情報をさらに含むことができる。一実施形態において、バーコードは、例えば試験装置のロット番号などの試験装置のロット特有の情報を含む。別の実施形態において、機械可読情報は、例えばRFID装置などの記憶媒体に含まれる。さらに別の実施形態において、RFID装置は、ロット特有の情報、液体制御に関する情報、または品質管理の目的で使用される情報を含む。
使用することができる。
が、数式、アルゴリズム、ソフトウェアおよび/またはコンピュータを使用して比較されるように構成することができる。
検出する方法が本明細書に開示されており、この方法は、a)唾液試料を先の実施形態のいずれかの試験装置と接触させることを含み、ここで、唾液試料は1つ以上の試験位置の上流の試験装置の部位に塗布され、この部位は例えば高分子材料および/またはセルロース系材料などの吸収材料を任意に含み、さらにこの方法は、b)唾液試料中に存在する場合、分析物と標識試薬とを1つ以上の試験位置に輸送することと、c)1つ以上の試験位置で1つ以上の第1の検出可能な信号を評価することを含み、ここで、1)1つ以上の第2の検出可能な信号が評価され、1つ以上の第1の検出可能な信号と比較されて、前記唾液試料中の前記分析物の量を評価し、および/または、2)前記方法は、装置が被験体の口に挿入されている間に被験体の体温を測定することをさらに含む。一実施形態において、1つ以上の分析物は、約1pg/ml~約1μg/mlの範囲の濃度を有し、その範囲には、例えば1pg/ml、10pg/ml、100pg/ml、約1ng/ml、2ng/ml、3ng/ml、3.5ng/ml、4ng/ml、5ng/ml、6ng/ml、7ng/ml、8ng/ml、9ng/ml、10ng/ml、100ng/ml、200ng/ml、300ng/ml、400ng/ml、500ng/ml、600ng/ml、700ng/ml、800ng/ml、900ng/ml、950ng/ml、またはそれ以上が含まれる。一態様において、1つ以上の試験位置の上流の試験装置の部位は、装置の唾液採取器部位である。一実施形態において、唾液採取器部位は、装置の別の部位、例えば装置の試験位置への唾液の一方向流動を促進するように設計される。
または、1つ以上の第1の検出可能な信号および1つ以上の第2の検出可能な信号の両方に任意に適用される。
量的に検出するためのキットが本明細書に開示され、このキットは、a)先の実施形態のいずれかの試験装置と、b)唾液試料中の分析物を定量的に検出するための試験装置の使用指示とを含む。
他に定義されない限り、本明細書中で使用される全ての技術用語および科学用語は、本開示が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。全ての特許、(公開されたかまたは非公開の)特許出願、および本明細書で言及される他の刊行物は、その全体が参照により組み込まれる。この節に記載されている定義が、特許、出願、公開された出願、および本明細書に参照により組み込まれる他の刊行物に記載されている定義に反していたり、そうでなければ矛盾している場合、この節に記載されている定義は、本明細書に参照により組み込まれる定義より優先される。
等価なステップおよび方法などへの言及を含む。
、60%、70%、80%、90%、95%、または全基準範囲を含み、および/または基準範囲の最高位よりも実質的に高い、所望のまたは必要なCVで分析物を定量化することが多くの場合望ましく、または重要である。
定された分析物レベルまたは濃度の値の範囲を指している。「正常範囲」を「基準範囲」として使用する場合、結果は、分析物レベルまたは濃度の値が正常範囲の下限値未満であるかまたは上限値を超える場合に異常であるとみなされる。「基準範囲」は、較正されたかまたは未較正の分析物のレベルまたは濃度に基づくことができる。
試薬の特異性を指す。結合試薬は、他の物質に結合するよりも高い親和性、結合活性でより容易に結合する場合に、および/または他の物質により長い持続時間で結合する場合に標的に「特異的に結合する」。例えば、標的に特異的に結合する結合試薬は、他の物質への結合と比較して少なくとも約10%、少なくとも約20%、少なくとも約30%、少なくとも約40%、少なくとも約50%、少なくとも約60%、少なくとも約70%、少なくとも約80%、少なくとも約90%またはそれ以上の大きな親和性で標的分析物と結合してもよく、または、他の物質への結合と比較して少なくとも約2倍、少なくとも約5倍、少なくとも約10倍またはそれ以上の標的分析物への結合に対する親和性で標的分析物と結合してもよい。他の潜在的な干渉物質の存在下での標的分析物の結合試薬による認識もまた、特異的に結合する特性の1つである。好ましくは、標的分析物に対して特異的であるかまたは標的分析物に特異的に結合する抗体またはアプタマーなどの結合試薬は、試験試料中に存在する非標的物質などの有意な割合の非標的物質への結合を回避する。いくつかの実施形態において、結合試薬は、約90%を超える非標的物質の結合を回避するが、より高い割合が明らかに考慮され、かつ好ましい。例えば、結合試薬は、約91%、約92%、約93%、約94%、約95%、約96%、約97%、約98%、約99%、約99%および約99.9%以上の非標的物質の結合を回避することができる。他の実施形態において、結合試薬は、約10%、20%、30%、40%、50%、60%、または70%を超え、または約75%を超え、または約80%を超え、または約85%を超える非標的物質の結合を回避することができる。
妊孕性関連ホルモンのレベルを測定するための市販の便利な検査はない。標準的なホルモン検査は、医師の診察室で採取した血液の試料に実施されるが、これらの検査では、エストロゲンおよびプロゲステロンの活性および不活性を区別しない。重要なことに、これらのホルモンの活性濃度は、その濃度が女性生殖器の機能(例えば、排卵)と直接相関するため、妊孕性の重要な指標であり、これらホルモンの不活性型の濃度は排卵と密接に相関しておらず、それにより分析が複雑になる。その月を通して活性型を正確かつ即時に追跡する機能は、妊娠しようとしている女性が現在入手することができない前例のない情報を提供するであろう。この機能は、不妊症の女性の診断および処置を促進するであろう。この装置を使用した1ヶ月間の日常的監視は、不妊症に関連する潜在的なホルモン不均衡を特定するのに必要な情報を医師に提供することができる。さらに、同じ装置を使用して、エストロゲンおよびテストステロンホルモン療法を含む他のホルモン不均衡障害の診断および処置に役立てることができる。
れる。いくつかの実施形態において、この方法は、ユーザの唾液試料を採取し、唾液試料の検定を行って生物利用可能なホルモンの化学的濃度を決定することを含む。いくつかの実施形態において、この方法は、ユーザの基礎体温を測定して、検定および基礎体温を分析して定量化された結果を生成することをさらに含む。いくつかの実施形態において、定量化された結果は、コンピュータ化された装置のソフトウェアプログラムに送信され、コンピュータ化された装置は、検定結果を表示するグラフィカルユーザインターフェースを有する。本発明の他の態様は、詳細な説明および添付の図面を考慮することによって明らかになるであろう。
た装置が本明細書に開示される。一実施形態において、本明細書に開示される装置は、(a)体液を採取する構成要素、(b)動物の基礎体温を測定する構成要素、(c)体液について行われた検定の結果を測定する構成要素、および、(d)読み取りの出力を分析して、その出力を他の電子記録に転送するコンピュータ化された装置を含む。
書、米国特許第7,256,053号明細書、米国特許第6,916,666号明細書、米国特許第6,812,038号明細書、米国特許第5,710,005号明細書、米国特許第6,140,134号明細書、米国特許出願公開第2010/0143941号明細書、米国特許第6,140,048号明細書、米国特許第6,756,202号明細書、米国特許第7,205,553号明細書、米国特許第7,679,745号明細書、米国特許出願公開第2010/0165338号明細書、米国特許出願公開第2010/0015611号明細書、米国特許第5,422,726号明細書、米国特許第5,596,414号明細書、米国特許第7,178,416号明細書、米国特許第7,784,678号明細書、米国特許出願公開第2010/094564号明細書、米国特許出願公開第2010/0173423号明細書、米国特許出願公開第2009/0157023号明細書、米国特許第7,785,899号明細書、米国特許第7,763,454号明細書、米国特許出願公開第2010/0239460号明細書、米国特許出願公開第2010/0240149号明細書、米国特許第7,796,266号明細書、米国特許第7,815,854号明細書、米国特許出願公開第2005/0244953号明細書、米国特許出願公開第2007/0121113号明細書、米国特許出願公開第2003/0119202号明細書、米国特許出願公開第2010/0311181号明細書、米国特許第6,707,554号明細書、米国特許第6,194,222号明細書、米国特許第7,713,703号明細書、欧州特許出願公開第0,149,168号明細書、欧州特許出願公開第0,323,605号明細書、欧州特許出願公開第0,250,137号明細書、英国特許出願公開第1,526,708号明細書、および国際公開第99/40438号パンフレットに開示されている。
は、電子スリーブを含むことができる。他の実施形態において、温度センサを、側方流動装置の任意の部分、例えば側方流動装置の膜上に一体化することができる。例えば定義された範囲の導電性材料抵抗の規定された構造を適用することによって、温度センサを装置上に一体化することができる。温度が変化すると、印刷された電子温度センサの抵抗が所定の方法で変化し、温度を測定することが可能になる。
たはラテックス粒子状標識などの視覚的な直接標識は、肉眼で検出することができる。例えば酵素標識などの間接的な標識は、検出可能な信号を生成するためのさらなるステップを必要とする。いくつかの実施形態において、標識は、比色標識、放射性標識、酵素標識、発光標識または蛍光標識などの可溶性標識である。例示的な蛍光標識には、Tide Fluor 5、および、Thermo Fisher Scientific社と共同でDyomics社によって製造されたDyLight Fluor系の蛍光色素、例えばDyLight 350、DyLight 405、DyLight 488、DyLight 550、DyLight 594、DyLight 633、DyLight
650、DyLight 680、DyLight 755、およびDyLight 800が含まれる。他の実施形態において、標識は、微粒子状直接標識または着色粒子状標識などの粒子状または微粒子状の標識である。例示的な粒子または粒子状の標識には、金コロイド標識、ラテックス粒子状標識、電気化学的粒子状標識、磁性粒子状標識、ナノ粒子状標識および量子ドット標識が含まれる。特定の構成に応じて、比色標識、放射性標識、酵素標識、発光標識または蛍光標識などの標識は、可溶性標識または粒子状または微粒子状の標識のいずれかであってもよい。
的分析物ではない試験試料中の物質に結合する結合試薬を含む。
コードは、任意の適切な情報を含むことができる。いくつかの実施形態において、バーコードは、例えば試験装置のロット番号などの試験装置のロット特有の情報を含む。他の実施形態において、機械可読情報は、例えば(無線周波数識別)RFID装置などの記憶媒体に含まれる。RFID装置は、任意の適切な情報を含むことができる。例えば、RFID装置は、ロット特有の情報、液体制御に関する情報、または品質管理の目的で使用される情報を含む。
例としては、A型、B型またはZ型DNAなどのDNA、およびmRNA、tRNAおよびrRNAなどのRNAが挙げられる。
、複数の試験位置または全ての試験位置で同一の抗体を使用して複数の分析物に結合する。さらに別の実施例では、検定試料は、複数の試験位置または全ての試験位置で複数の抗体を使用し、各抗体は異なる分析物に結合している。特定の組み合わせを使用することもできる。例えば、検定試料は、同一の標識抗体を使用して複数の試験位置および全ての試験位置で複数の分析物および複数の抗体に結合し、試験位置の抗体の各々は異なる分析物に結合する。別の実施例では、検定試料は複数の標識抗体を使用し、標識抗体の各々は異なる分析物に結合し、試験位置の単一の抗体は複数の分析物に結合する。さらに別の実施例では、検定試料は、異なる標識抗体を使用して異なる分析物に結合し、かつ、試験位置で異なる抗体を使用して異なる分析物に結合する。
noassay 12、1991年、425-43、NelsonおよびGriswoldによる、Comput.Methods Programs Biomed.27、1988年、65-8を参照されたい。
よい。
2)アプリケーションは継続的な試験読み取りを制御し、表示灯は試験が進行中であることを示し、(13)完了すると、アプリケーションは適切なデータ/メッセージを表示して、試験カートリッジを破棄するようにユーザに促し、(14)表示灯は消灯され、次いで読取器は自動的に作動停止し、そして、(15)ユーザはアプリケーションを使用して結果に接する。
別の態様において、本発明は、例えば被験体からの唾液試料などの唾液試料中の分析物を定量的に検出する方法を提供し、この方法は、a)唾液試料を本明細書に開示の試験装置と接触させることを含み、ここで、唾液試料は1つ以上の試験位置の上流の試験装置の部位に塗布され、この部位は例えば高分子材料および/またはセルロース系材料などの吸収材料を任意に含み、さらにこの方法は、b)唾液試料中に存在する場合、分析物と標識試薬とを1つ以上の試験位置に輸送することと、c)1つ以上の試験位置で1つ以上の第1の検出可能な信号を評価することを含み、ここで、1)1つ以上の第2の検出可能な信号が評価され、1つ以上の第1の検出可能な信号と比較されて、前記唾液試料中の前記分析物の量を評価し、および/または、2)前記方法は、装置が被験体の口に挿入されている間に被験体の体温を測定することをさらに含む。一態様において、1つ以上の試験位置の上流の試験装置の部位は、装置の唾液採取器部位である。一実施形態において、唾液採取器部位は、装置の別の部位、例えば装置の試験位置への唾液の一方向流動を促進するように設計される。
溶化されるかまたは再懸濁されて、液体試料によって試験位置に輸送される。いくつかの実施形態において、乾燥した標識試薬は、試料塗布部位の下流に配置され、乾燥した標識試薬は可溶化されるかまたは再懸濁されて、液体試料によって試験位置に輸送される。他の実施形態において、乾燥した標識試薬は、試料塗布部位の上流に配置され、乾燥した標識試薬は可溶化されるかまたは再懸濁されて、他の液体によって試験位置に輸送される。さらに他の実施形態において、複数の分析物および/または1つ以上の標識試薬は可溶化されるかまたは再懸濁されて、液体試料単独によって試験位置に輸送される。さらに他の実施形態において、複数の分析物および/または1つ以上の標識試薬は可溶化されるかまたは再懸濁されて、別の液体によって、または試料液と例えば現像液などの他の液体との組み合わせによって試験位置に輸送される。
一態様において、例えば被験体からの唾液試料などの唾液試料中の分析物を定量的に検出するためのキットが本明細書に開示され、このキットは、a)先の実施形態のいずれかの試験装置と、b)唾液試料中の分析物を定量的に検出するための試験装置の使用指示とを含む。
る。例えば、本システムは、2つ、3つ、4つ、5つ、6つ、7つ、8つ、9つ、10またはそれ以上の分析物を定量的に検出するために使用することができる。本システムは、任意の適切な目的のために使用することができる。例えば、本システムは、診断、予後、リスク評価、層別化および/または処置の監視の指標である複数の分析物を定量的に検出するために使用することができる。例えば、キットおよび/またはシステムは、1種以上のホルモン、排卵、妊娠、妊孕性の評価のために使用することができ、例えばホルモン、排卵、妊娠、妊孕性の状態、時間窓、傾向、または治療の監視または指導のために使用することができる。一実施形態において、この方法は、排卵を予測するために使用される。一実施形態において、この方法は、妊娠を確認するために使用される。一実施形態において、キットおよび/またはシステムは、家族計画のために、および/または受胎調節のために、全体的な妊孕性および/または妊娠可能性を評価するために使用することができる。
Claims (10)
- 唾液試料中の17-βエストラジオールおよびプロゲステロンを定量的に検出する側方流動試験装置であって、前記装置は、
2つの試験位置を含む多孔質マトリックスを含み、前記試験位置の1つは、17-βエストラジオールと特異的に結合する標識Fab断片と結合するために前記唾液試料中の標的分析物17-βエストラジオールと競合することができる試験試薬を含み、
前記試験位置の他の1つは、プロゲステロンと特異的に結合する標識Fab断片と結合するために前記唾液試料中の標的分析物プロゲステロンと競合することができる試験試薬を含み、
前記唾液試料は、前記試験装置に沿って側方に流動し、前記2つの試験位置を通過して2つの検出可能な信号を形成し、
a)前記装置は、対照位置を備え、前記対照位置は非特異的または意図しない特異的な結合を示す制御信号を生成する手段を含み、前記制御信号は前記唾液試料中の17-βエストラジオールおよびプロゲステロンの量の決定のために前記2つの検出可能な信号と比較され、前記制御信号を生成する手段は、標的分析物ではない前記唾液試料中の物質と結合する標識Fab断片を含み、
b)17-βエストラジオールに特異的に結合する標識Fab断片およびプロゲステロンに特異的に結合する標識Fab断片はそれぞれ前記試験装置上で乾燥される、
試験装置。 - 1pg/ml~30pg/mlの範囲の被験体からの前記唾液試料中の17-βエストラジオールを定量的に検出するように構成される、請求項1に記載の試験装置。
- 50pg/ml~500pg/mlの範囲の被験体からの前記唾液試料中のプロゲステロンを定量的に検出するように構成される、請求項1または請求項2に記載の試験装置。
- 排卵、妊娠、または妊孕性を評価するために構成される、請求項1から請求項3のいずれか1項に記載の試験装置。
- 妊孕性の状態、妊孕性の時間窓、妊孕性の傾向、または妊孕性の治療の監視を評価するために構成される、請求項1から請求項4のいずれか1項に記載の試験装置。
- 前記唾液試料によって可溶化されるかまたは再懸濁される前記標識Fab断片のために構成される、請求項1から請求項5のいずれか1項に記載の試験装置。
- 前記唾液試料によって可溶化されるかまたは再懸濁されて前記試験位置および前記対照位置に輸送される前記標識Fab断片のために構成される、請求項6に記載の試験装置。
- 機械可読情報をさらに含む、請求項1から請求項7のいずれか1項に記載の試験装置。
- 唾液試料中の17-βエストラジオールおよびプロゲステロンを定量的に検出する方法であって、この方法は、
a)前記唾液試料が前記試験位置の上流の前記試験装置の部位に塗布され、前記部位が吸収材料を任意に含む、
唾液試料を請求項1から請求項8のいずれか1項に記載の前記試験装置と接触させることと、
b)前記唾液試料中に存在する場合、17-βエストラジオールおよびプロゲステロンと、17-βエストラジオールと特異的に結合する前記標識Fab断片と、プロゲステロンと特異的に結合する前記標識Fab断片とを前記多孔質マトリックス上の前記2つの試験位置に輸送することと、
c)前記多孔質マトリックス上の前記2つの試験位置で前記検出可能な信号を評価することとを含み、
1)前記制御信号が生成され、;および
2)前記制御信号が前記2つの検出可能な信号と比較されて前記唾液試料中の17-βエストラジオールおよびプロゲステロンのレベルを検出する、方法。 - 乾燥された前記標識Fab断片は、前記唾液試料によって可溶化されるかまたは再懸濁されて前記多孔質マトリックス上の前記2つの試験位置および前記対照位置に輸送される、請求項9に記載の方法。
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