JP7467423B2 - 亜鉛結合部分を有するホスホイノシチド３－キナーゼ阻害剤との併用療法 - Google Patents

Description

関連出願
本出願は、２０１８年９月１１日出願の米国仮出願第６２／７２９，６４８号の利益を主張する。先の出願の教示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。

癌の処置のための治療投与計画は、しばしば、２つ以上の薬剤との併用療法を包含する。特に、標的療法を組み合わせて、さまざまな種類の癌をより有効に処置し、療法に耐性のある癌細胞の発生を阻害することができる。癌の薬物開発の分野では、特定の種類の癌の処置のための薬物の特に有効な組み合わせが必要とされている。

本発明は、式Ｉの化合物

またはその医薬として許容され得る塩との併用療法であって、式中、Ｒが水素またはアシル基である、併用療法に関する。アシル基は好ましくは、Ｒ_１Ｃ（Ｏ）－であり、式中、Ｒ_１は、置換または非置換Ｃ_１～Ｃ_２４－アルキル、好ましくはＣ_１～Ｃ_１０－アルキル、より好ましくはＣ_１～Ｃ_６－アルキル、置換もしくは非置換Ｃ_２～Ｃ_２４－アルケニル、好ましくはＣ_２～Ｃ_１０－アルケニル、より好ましくはＣ_２～Ｃ_６－アルケニル、置換もしくは非置換Ｃ_２～Ｃ_２４－アルキニル、好ましくはＣ_２～Ｃ_１０－アルキニル、およびより好ましくはＣ_２～Ｃ_６－アルキニル、置換もしくは非置換アリール、好ましくは置換もしくは非置換フェニル、または置換もしくは非置換ヘテロアリールであり、Ａは場合により置換フェニルであり、場合により置換ピリジルもしくは場合により置換ピリミジルであり、癌の処置のためのＰＤ－１シグナル伝達阻害剤である。例えば、一実施形態では、本発明は、癌の予防または治療を必要とする対象における癌を予防または治療する方法を提供する。この方法は、対象に、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩、およびＰＤ－１シグナル伝達阻害剤を投与することを含み、式Ｉの化合物およびＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、併用の治療有効量で投与される。好ましくは、式Ｉの化合物またはその塩およびＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、相乗的である量で対象に投与される。

本発明はまた、式Ｉの化合物、またはその医薬として許容され得る塩を、ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤および医薬として許容され得る賦形剤または担体と組み合わせて含む医薬組成物にも関する。

式Ｉの化合物、特に、Ｒが水素であり、Ａが２－メトキシ－５－ピリジルである、本明細書で化合物１とも称される式Ｉの化合物は、癌ならびにＰＩ３キナーゼ活性および／またはＨＤＡＣ活性と関係する他の疾患および障害の処置のためなどの治療薬としての使用のための有利な特性を有する。例えば、化合物１は、分子標的ＰＩ３ＫおよびＨＤＡＣに対して強力な阻害活性と、インビトロでさまざまな癌細胞株に対して強力な抗増殖活性とを有する。化合物１は、動物モデルで観察されるような経口での有意な生物学的利用能を有している。異種移植腫瘍担持マウスに経口または静脈内のいずれかで投与すると、この化合物は、腫瘍組織による有意な取り込みおよび腫瘍組織における薬力学的活性を示す。化合物１はまた、経口または静脈内のいずれかで投与後のマウス異種移植腫瘍モデルにおいて多大な抗腫瘍活性も示す。この化合物はまた、例えば、エイムス試験を使用した遺伝毒性試験によって示されるように、好ましい安全性特性も有している。

本発明の上述および他の目的、特徴および利点は、添付の図面に示されるように、本発明の好ましい実施形態に関する以下のより詳細な説明から明らかになるであろう。

例１１に説明されているようなマウスＣＴ２６．ＷＴ異種移植モデルにおける腫瘍体積対時間のグラフである。 例１２に説明されているようなマウスＡ２０異種移植モデルにおける腫瘍体積対時間のグラフである。

本発明は、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩と、ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤と、を含む、癌のための併用療法のための方法および組成物に関する。式Ｉの化合物の好ましい実施形態において、Ａは、メトキシ、アミノまたはＮ－メチルアミノで置換されたフェニル、ピリジルまたはピリミジルである。より好ましくは、Ａは、以下に明らかにされる基のうちの１つである。

式Ｉの化合物のある特定の実施形態では、Ａは先に示した基の１つであり、Ｒは水素である。

好ましい実施形態において、式Ｉの化合物は、以下の化合物１、２および３ならびにそれらの医薬として許容され得る塩から選択される。

本発明は、癌を予防または処置することを必要とする対象における癌を予防または処置するための方法を提供する。この方法は、対象に、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩、およびＰＤ－１シグナル伝達阻害剤を投与することを含み、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩およびＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、併用の治療有効量で投与される。

ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、ＰＤ－１シグナル伝達を阻害する何らかの化合物である可能性がある。例えば、ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、ＰＤ－１、および／またはＰＤ－Ｌ１もしくはＰＤ－Ｌ２など、ＰＤ－１の活性化リガンドを阻害することができる。ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、小分子、ポリヌクレオチド、または抗体などのタンパク質である可能性がある。好ましくは、ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、モノクローナル抗体、より好ましくは、ヒト化または完全ヒトモノクローナル抗体である。一実施形態では、ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、抗ＰＤ－１モノクローナル抗体である。別の実施形態では、ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、抗ＰＤ－Ｌ１モノクローナル抗体である。別の実施形態では、ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、抗ＰＤ－Ｌ２モノクローナル抗体である。適切なＰＤ－１シグナル伝達阻害剤には、それらの各々が全体として本明細書に組み込まれる米国特許第８，００８，４４９号、ＷＯ第２００６／１２１１６８号、ＷＯ第２００９／１１４３３５号、米国特許第８，３５４，５０９号、米国特許第８，６０９，０８９号、ＵＳ２０１０／００２８３３０、ＵＳ２０１２／０１１４６４９、ＷＯ第２００７／００５８７４号、ＷＯ第２０１０／０７７６３４号、米国特許第７，９４３，７４３号、ＵＳ２０１２／００３９９０６、およびＷＯ第２０１１／０６６３４２号において説明されているＰＤ－１シグナル伝達阻害剤が含まれるが、これらに限定されない。適切なＰＤ－１シグナル伝達阻害剤の例としては、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ－４７３６、ＭＳＢ－００１０７１８Ｃ、ＭＤＸ－１１０５、およびＡＭＰ－２２４が挙げられる。好ましいＰＤ－１シグナル伝達阻害剤には、ペンブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ（商標））、ニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯ（商標））、アテロリズマブ（ＴＥＣＥＮＴＲＩＱ（商標））、アベルマブ（ＢＡＶＥＮＣＩＯ（商標））、デュルバルマブ（ＩＭＦＩＮＺＩ（商標））、およびピジリズマブが含まれる。

本発明の方法および組成物の特に好ましい実施形態では、式Ｉの化合物は化合物１である。

本発明の特に好ましい実施形態では、ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、ペンブロリズマブまたはニボルマブである。

本発明の方法のある特定の実施形態では、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩およびＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、別個の組成物として対象に同時に投与される。ある特定の実施形態では、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩およびＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、同じかまたは異なる投与経路を介して対象に同時に投与される。

ある特定の実施形態では、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩およびＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、別個の組成物として対象に逐次投与される。ある特定の実施形態では、式Ｉの化合物およびＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、同じかまたは異なる投与経路を介して対象に逐次投与される。一実施形態では、ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩を対象に投与した後で対象に投与される。別の実施形態では、ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩を対象に投与する前に対象に投与される。

式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩およびＰＤ－１シグナル伝達阻害剤が別個の組成物として投与されるある実施形態では、各組成物は独立して、経粘膜、経口、直腸、膣、舌下、静脈内、筋肉内、皮下、頬側、鼻腔内、槽内、腹腔内、または耳内にである。ある特定の実施形態では、一方または両方の組成物は、坐剤またはヒドロゲル剤で投与される。好ましい実施形態では、両方の組成物は経口投与される。

式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩およびＰＤ－１シグナル伝達阻害剤が別個の組成物として投与されるある特定の実施形態では、それらの投与のタイミングは、薬剤の薬理学的活性が時間的に重複するようになっており、それにより、組み合わされた治療効果を発揮する。例えば、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩およびＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、約６０分を超える時間間隔で逐次投与することができる。例えば、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩とＰＤ－１シグナル伝達阻害剤との逐次投与の間の時間は、６０分を超えて、２時間を超えて、５時間を超えて、１０時間を超えて、１日を超えて、２日を超えて、３日を超えて、または１週間を超えて離れていることができる。最適な投与時間は、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩およびＰＤ－１シグナル伝達阻害剤の吸収、分布、代謝および／または排泄の速度に依存するであろう。

式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩またはＰＤ－１シグナル伝達阻害剤のいずれかを最初に投与することができる。例えば、ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩が投与された後で対象に投与することができる。この場合、式Ｉの化合物の約５０％（例えば、約４０％、約３０％、約２０％、約１０％、または約５％）が対象によって代謝または排泄される前に、ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤を投与することが望ましい可能性がある。別の例では、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩の初回用量が対象に投与され、続いてＰＤ－１シグナル伝達阻害剤の単回用量の後に続いて、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩の追加用量が投与される。

ある特定の実施形態では、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩およびＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、単一剤形で投与され、該単一剤形は、経粘膜、経口、直腸、膣、舌下、静脈内、筋肉内、皮下、頬側、鼻腔内、槽内、腹腔内、または耳内に投与される。好ましくは、単一剤形は経口投与される。

式Ｉの化合物は、約１週間に１回、約１日１回、または１日１回を超えて投与することができる。一実施形態では、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩は経口投与される。別の実施形態では、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩は、非経口的に、例えば、静脈内に投与される。式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩は、約１ｍｇ～約１，５００ｍｇの日用量で投与することができる。例えば、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩は、約２００ｍｇの日用量で投与することができる。一実施形態では、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩は、体重１ｋｇあたり約１ｍｇ～約２５０ｍｇの薬用量で投与される。

しかしながら、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩およびＰＤ－１シグナル伝達阻害剤の投薬頻度および総日用量は、当業者によって、例えば、主治医によって健全な医学的判断の範囲内で個々の患者について決定することができることは理解されるであろう。いかなる特定の患者についての具体的な用量も、処置中の障害および障害の重症度；採用される具体的な化合物の活性；採用される具体的な組成物；患者の齢、体重、全身レベルの健康状態、性別および食事の種類；投与時刻、投与経路、および採用される具体的な化合物の排泄速度；処置の持続期間；採用される具体的な化合物と組み合わせてまたは同時に使用される薬物；；医学分野で周知の同様の因子を含む、さまざまな因子によるであろう。

「癌」という用語は、腫瘍、新生物、癌腫、肉腫、白血病、リンパ腫などの悪性腫瘍細胞の増殖によって引き起こされる何らかの癌を指す。例えば、癌には、中皮腫、白血病、および皮膚Ｔ細胞リンパ腫（ＣＴＣＬ）などのリンパ腫、非皮膚末梢Ｔ細胞リンパ腫、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫（ＡＴＬＬ）などのヒトＴ細胞リンパ栄養性（ｌｙｍｐｈｏｔｒｏｐｈｉｃ）ウイルス（ＨＴＬＶ）と関係するリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）などのＢ細胞リンパ腫、急性非リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、急性骨髄性白血病、リンパ腫、および多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、成人Ｔ細胞白血病リンパ腫、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、または肝細胞癌が含まれるが、これらに限定されない。さらなる例としては、骨髄異形成症候群、脳腫瘍などの小児固形腫瘍、神経芽腫、網膜芽細胞腫、ウィルムス腫瘍、骨腫瘍、ならびに軟部組織肉腫などの小児固形腫瘍、頭頸部癌（例えば、口腔、喉頭、鼻咽頭、および食道）、腎尿路生殖器の癌（例、前立腺、膀胱、腎臓、子宮、卵巣、精巣）、肺癌（例えば、小細胞および非小細胞）、乳癌、膵癌、黒色腫および他の皮膚癌、胃癌、脳腫瘍、ゴーリン症候群に関する腫瘍（例えば、髄芽腫、髄膜腫など）、ならびに肝癌などの成人の一般的な固形腫瘍が挙げられる。対象の化合物によって処置されることができる癌の追加の例示的な形態には、骨格筋または平滑筋の癌、胃癌、小腸の癌、直腸癌、唾液腺の癌、子宮内膜癌、副腎癌、肛門癌、直腸癌、副甲状腺癌、および下垂体癌が含まれるが、これらに限定されない。

本明細書に説明する化合物が予防、処置および研究に有用である可能性がある追加の癌は、例えば、結腸癌、家族性腺腫性ポリポーシス癌および遺伝性非ポリポーシス大腸癌、または黒色腫である。さらに、癌には、外陰癌、喉頭癌、下咽頭癌、舌癌、唾液腺癌、胃癌、腺癌、甲状腺癌（髄様癌および乳頭状甲状腺癌）、腎癌、腎実質癌、子宮頚癌、子宮体癌、子宮内膜癌、絨毛癌、精巣癌、尿癌（ｕｒｉｎａｒｙ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、黒色腫、膠芽腫、星状細胞腫、髄膜腫、髄芽腫および末梢神経外胚葉性腫瘍などの脳腫瘍、胆嚢癌、気管支癌、多発性骨髄腫、基底細胞腫、奇形腫、網膜芽細胞腫、脈絡膜黒色腫、精上皮腫、横紋筋肉腫、頭蓋咽頭腫、骨肉腫、軟骨肉腫、筋肉腫、脂肪肉腫、線維肉腫、ユーイング肉腫、および形質細胞腫が含まれる、これらに限定されない。本発明の一態様では、本発明は、癌の処置のための薬剤の製造における本発明の１つ以上の化合物の使用を準備する。

一実施形態では、処置される癌は血液癌である。血液癌には、白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫などがある。例としては、Ｂ前駆細胞急性リンパ芽球性白血病。Ｔ前駆細胞急性リンパ芽球性白血病、バーキット白血病、および急性混合型白血病を含む急性リンパ性白血病、ならびにＢ細胞前リンパ球性白血病を含む慢性リンパ性白血病などのリンパ性白血病；ならびに急性前骨髄球性白血病、急性骨髄芽球性白血病および急性巨核芽球性白血病を含む、急性骨髄性白血病などの骨髄性白血病；ならびに慢性単球性白血病を含む慢性骨髄性白血病；急性単球性白血病が挙げられる。他の白血病には、有毛細胞白血病、Ｔ細胞性前リンパ性白血病、大顆粒リンパ球性白血病、および成人Ｔ細胞白血病が含まれる。

リンパ腫には、Ｂ細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、ＮＫ細胞リンパ腫、およびリンパ系腫瘍前駆体（ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ ｌｙｍｐｈｏｉｄ ｎｅｏｐｌａｓｍ）を含むホジキンリンパ腫および非ホジキンリンパ腫が含まれる。Ｂ細胞リンパ腫には、バーキットリンパ腫／白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞性慢性リンパ性白血病／小細胞リンパ腫、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫（ワルデンシュトレーム・マクログロブリン血症など）、脾臓辺縁帯リンパ腫、有毛細胞白血病、形質細胞腫、形質細胞骨髄腫（多発性骨髄腫としても公知）、形質細胞腫、単クローン免疫グロブリン沈着症、重鎖病、ＭＡＬＴリンパ腫とも呼ばれる節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、結節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、原発性皮膚濾胞中心リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、リンパ腫様肉芽腫症、原発性縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫、ＡＬＫ＋大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、形質芽細胞性リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、ＨＨＶ８関連多中心性キャッスルマン病において発症する大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、リンパ腫様肉芽腫症、原発性縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、ＡＬＫ＋大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、形質芽細胞性リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、およびＨＨＶ８関連多中心性キャッスルマン病において発症する大細胞型Ｂ細胞リンパ腫が含まれる。

Ｔ細胞およびＮＫ細胞リンパ腫には、皮膚Ｔ細胞、Ｔ細胞前リンパ球性白血病、Ｔ細胞大顆粒リンパ球性白血病、侵襲性ＮＫ細胞白血病、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、節外性ＮＫ／Ｔ細胞リンパ腫、鼻型、腸症型Ｔ細胞リンパ腫、肝脾性Ｔ細胞リンパ腫、芽球性ＮＫ細胞性リンパ腫、菌状息肉症／セザリー症候群、原発性皮膚未分化大細胞リンパ腫などの原発性皮膚ＣＤ３０陽性Ｔ細胞リンパ増殖性疾患、リンパ腫様丘疹症、分類不能な末梢性Ｔ細胞リンパ腫、免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫、および未分化大細胞リンパ腫が含まれる。

好ましい実施形態では、処置される癌は非ホジキンリンパ腫であり、より好ましくは、Ｂ細胞リンパ腫である。特に好ましい実施形態では、処置される癌はびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、例えば、ＡＢＣ亜型のＤＬＢＣＬ、ＧＣＢ亜型のＤＬＢＣＬ、ダブルヒットＤＬＢＣＬまたはダブルエクスプレッサーＤＬＢＣＬである（Ｑｕｉｎｔａｎｉｌｌａ－Ｍａｒｔｉｎｅｚ，Ｌ．，Ｈｅｍａｔｏｌ．Ｏｎｃｏｌ．２０１５，３３：５０－５５）。ある特定の実施形態では、癌は再発性または難治性のＤＬＢＣＬである。

一実施形態では、本発明は、ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤と組み合わせた癌の処置のための薬剤の製造における式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩の使用を提供する。別の実施形態では、本発明は、癌を処置するための薬剤の製造における、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩およびＰＤ－１シグナル伝達阻害剤の使用を提供する。好ましい実施形態では、式Ｉの化合物は、化合物１またはその医薬として許容され得る塩であり、ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、ペンブロリズマブまたはニボルマブである。

本発明はさらに、式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩と、ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤とを含む医薬組成物を包含する。一実施形態では、式Ｉの化合物は、化合物１、化合物２または化合物３であり、ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、ペンブロリズマブまたはニボルマブである。

式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩およびＰＤ－１シグナル伝達阻害剤は、非経口、静脈内、筋肉内、皮下、植え込み、経口、舌下、頬側、鼻腔、肺、経皮、局所、膣、直腸、および経粘膜投与などを含むがこれらに限定されない何らかの適切な手段によって投与することができる。局所投与はまた、経皮パッチまたはイオン泳動装置などの経皮投与の使用も包含することができる。医薬調製物には、式Ｉの化合物もしくはその医薬として許容され得る塩、ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤、または選択した投与様式に適した両方を含有する固体、半固体、または液体の調製物（錠剤、ペレット剤、トローチ剤、カプセル剤、坐剤、クリーム剤、軟膏、エアロゾル剤、散剤、液剤、エマルション、懸濁剤、シロップ剤、注射剤など）が含まれる。一実施形態では、医薬組成物は経口投与され、したがって、経口投与に適した形態で、すなわち、固体または液体の調製物として製剤される。適切な固形経口製剤には、錠剤、カプセル剤、丸剤、顆粒剤、ペレット剤、サシェ剤および沸騰剤、散剤などが含まれる。適切な液体経口製剤には、液剤、懸濁剤、分散剤、エマルション、油などが含まれる。本発明の一実施形態では、組成物はカプセル内に製剤される。この実施形態に従って、本発明の組成物は、活性化合物および不活性担体もしくは希釈剤に加えて、硬質ゼラチンカプセルを含む。

担体または希釈剤として一般的に使用される何らかの不活性賦形剤、例えば、ガム、デンプン、糖、セルロース材料、アクリラート、またはこれらの混合物などは、本発明の製剤に使用することができる。好ましい希釈剤は微結晶性セルロースである。組成物はさらに、崩壊剤（例えば、クロスカルメロースナトリウム）および潤滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム）を含むことができ、加えて、結合剤、緩衝剤、プロテアーゼ阻害剤、界面活性剤、可溶化剤、可塑剤、乳化剤、安定剤、増粘剤、甘味料、皮膜形成剤、またはこれらの何らかの組み合わせから選択される１つ以上の添加剤を含むことができる。さらに、本発明の組成物は、放出制御製剤または即時放出製剤の形態であってよい。

液体製剤については、医薬として許容され得る担体は、水溶性または非水溶性の液体、懸濁液、乳濁液または油であってよい。非水性溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、およびオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルである。水性担体には、水、アルコール／水溶液、エマルション、または生理塩類溶液および緩衝培地を含む懸濁液が含まれる。油の例は、石油、動物、植物、または合成起源の油、例えば、ラッカセイ油、ダイズ油、鉱油、オリーブ油、ヒマワリ油、および魚肝油である。溶液または懸濁液はまた、以下の成分、すなわち、注射用水、塩類溶液、不揮発性油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒などの無菌の希釈剤、ベンジルアルコールまたはメチルパラベンなどの抗菌剤、アスコルビン酸または重亜硫酸ナトリウムなどの抗酸化剤、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）などのキレート剤、酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩などの緩衝液、および塩化ナトリウムまたはデキストロースなどの張性を調整するための薬剤も含むことができる。ｐＨは、塩酸および水酸化ナトリウムなどの酸または塩基で調整することができる。

加えて、組成物はさらに、結合剤（例えば、アカシア、トウモロコシデンプン、ゼラチン、カルボマー、エチルセルロース、グアーガム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポビドン）、崩壊剤（例えば、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、アルギン酸、二酸化ケイ素、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、グアーガム、デンプングリコール酸ナトリウム、プリモゲル）、さまざまなｐＨおよびイオン強度の緩衝液（例えば、トリスＨＣＩ、酢酸塩、リン酸塩）、表面への吸収を防ぐためのアルブミンまたはゼラチンなどの添加剤、洗浄剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ２０、Ｔｗｅｅｎ８０、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ６８、胆汁酸塩）、プロテアーゼ阻害剤、界面活性剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）、浸透促進剤、可溶化剤（例えば、グリセロール、ポリエチレングリセロール、ポリエチレングリコール）、流動促進剤（例えば、、コロイド状二酸化ケイ素）、酸化防止剤（例えば、アスコルビン酸、メタ重亜硫酸ナトリウム、ブチル化ヒドロキシアニソール）、安定剤（例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、増粘剤（例えば、カルボマー、コロイド状二酸化ケイ素、エチルセルロース、グアーガム）、甘味料（例、スクロース、アスパルタム、クエン酸）、着香料（例、ペパーミント、サリチル酸メチル、またはオレンジ着香料）、防腐剤（例、チメロサル、ベンジルアルコール、パラベン）、潤滑剤（例、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム）、流動添加剤（例、コロイド状二酸化ケイ素）、可塑剤（例、フタル酸ジエチル、クエン酸トリエチル）、乳化剤（例、カルボマー、ヒドロキシプロピルセルロース）、ラウリル硫酸ナトリウム）、ポリマーコーティング（例えば、ポロキサマーまたはポロキサミン）、コーティングおよびフィルム形成剤（例えば、エチルセルロース、アクリラート、ポリメタクリラート）、ならびに／あるいはアジュバントをさらに含むことができる。

一実施形態では、活性化合物は、インプラントおよびマイクロカプセル化送達システムを含む放出制御製剤など、身体からの急速な排除から化合物を保護する担体を用いて調製される。エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸などの生分解性、生体適合性ポリマーを使用することができる。このような製剤を調製するための方法は、当業者には明らかであろう。これらの材料はまた、Ａｌｚａ ＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎおよびＮｏｖａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．から商業的に入手することもできる。リポソーム懸濁液はまた、医薬として許容され得る担体として使用することもできる。これらは、例えば、米国特許第４，５２２，８１１号において説明されているように、当業者に公知の方法によって調製することができる。

投与の容易さおよび薬用量の均一性のために、単位剤形で経口組成物を製剤することは特に有利である。「単位剤形」は、本明細書で使用される場合、処置される対象の単一の薬用量として適した物理的に別個の単位を指し、各単位は、必要な医薬担体と関連して所望の治療効果を生み出すように計算された所定量の活性化合物を含有している。本発明の単位剤形についての仕様は、活性化合物の固有の特徴および達成されるべき特定の治療効果、ならびに個体の処置のためにこのような活性化合物を配合する技術において固有の制限によって決定され、直接依存する。

経口投与を意図した本発明の製剤は、長鎖脂肪酸またはその塩、例えばデカン酸およびデカン酸ナトリウムを含む、１つ以上の浸透増強剤を含むことができる。

１つの好ましい実施形態では、化合物は、静脈内注射用の水溶液中で製剤することができる。一実施形態では、可溶化剤を適切に採用することができる。特に好ましい可溶化剤には、ＣｙＤｅｘ，Ｉｎｃ．によって商品名ＣＡＰＴＩＳＯＬ（登録商標）の下で販売されているスルホブチルエーテル－７－β－シクロデキストリンなど、スルホブチル誘導体化β－シクロデキストリンを含む、スルホン酸置換β－シクロデキストリンまたはその塩などの、シクロデキストリンおよび改質シクロデキストリンが含まれる

医薬組成物は、投与ための取扱説明書と一緒に、容器、パック、またはディスペンサーに含めることができる。

毎日の投与は、数日から数年の期間に継続的に繰り返されることがある。経口処置は、１週間から患者の生涯までの間継続することがある。好ましくは、投与は５連続日の間行うことができ、その後、患者は、さらなる投与が必要かどうかを決定するために評価されることができる。投与は、継続的または断続的であることができ、例えば、連続した数日間の処置に続いて休薬期があってよい。本発明の化合物は、処置の初日に静脈内投与されることができ、２日目およびその後のすべての連続した日に経口投与されることができる。

有効成分を含有する医薬組成物の調製は、当技術分野で十分に理解されており、例えば、混合、造粒、または錠剤形成のプロセスによる。有効治療成分は、医薬として許容され得かつ有効成分と適合性のある賦形剤としばしば混合される。経口投与については、活性剤は、ビヒクル、安定剤、または不活性希釈剤など、この目的に慣例的な添加剤と混合され、慣例的な方法によって、錠剤、コーティング錠、硬質もしくは軟質ゼラチンカプセル、水溶液、アルコール溶液または油性溶液、および先に詳述された類似物など、投与に適した形態へと変換される。

患者に投与される化合物の量は、患者に毒性を引き起こす量よりも少ない。ある特定の実施形態では、患者に投与される化合物の量は、患者の血漿中の化合物の濃度を化合物の毒性レベル以上にする量よりも少ない。好ましくは、患者の血漿中の化合物の濃度は、約１０ｎＭに維持される。一実施形態では、患者の血漿中の化合物の濃度は、約２５ｎＭに維持される。一実施形態では、患者の血漿中の化合物の濃度は、約５０ｎＭに維持される。一実施形態では、患者の血漿中の化合物の濃度は、約１００ｎＭに維持される。一実施形態では、患者の血漿中の化合物の濃度は、約５００ｎＭに維持される。一実施形態では、患者の血漿中の化合物の濃度は、約１０００ｎＭに維持される。一実施形態では、患者の血漿中の化合物の濃度は、約２５００ｎＭに維持される。一実施形態では、患者の血漿中の化合物の濃度は、約５０００ｎＭに維持される。本発明の実施において患者に投与されるものとする化合物の最適量は、使用される特定の化合物および処置される癌の種類に依存するであろう。

定義
本発明を説明するために使用されるさまざまな用語の定義を以下に列挙する。これらの定義は、具体的な場合に別段の制限がない限り、個別にまたはより大きな群の一部として、本明細書および特許請求の範囲の随所で使用される用語に適用される。

「アシル」という用語は、水素、アルキル、部分的に飽和または完全に飽和したシクロアルキル、部分的に飽和または完全に飽和した複素環、アリール、およびヘテロアリール置換カルボニル基を指す。例えば、アシルは、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルカノイル（例えば、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、バレリル、カプロイル、ｔ－ブチルアセチルなど）、（Ｃ_３～Ｃ_６）シクロアルキルカルボニル（例えば、シクロプロピルカルボニル、シクロブチルカルボニル、シクロペンチルカルボニル、シクロヘキシルカルボニルなど）、複素環式カルボニル（例えば、ピロリジニルカルボニル、ピロリド－２－オン－５－カルボニル、ピペリジニルカルボニル、ピペラジニルカルボニル、テトラヒドロフラニルカルボニルなど）、アロイル（例えば、ベンゾイル）およびヘテロアロイル（例えば、チオフェニル－２－カルボニル、チオフェニル－３－カルボニル、フラニル－２－カルボニル、フラニル－３－カルボニル、１Ｈ－ピロイル－２－カルボニル、１Ｈ－ピロイル－３－カルボニル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル－２－カルボニルなど）などの基が含まれる。加えて、アシル基のアルキル、シクロアルキル、複素環、アリールおよびヘテロアリール部分は、個々の定義において説明されている基のうちのいずれか１つであってよい。「場合により置換された」として示されているとき、アシル基は、非置換であるか、あるいは「置換された」についての定義において以下の列挙される置換基の群から独立して選択される１以上の置換基（通常、１～３の置換基）、またはアシル基のアルキル、シクロアルキル、アリールおよびシクロアリール部分はそれぞれ、置換基の好ましいおよびより好ましいリストにおいて先に説明したように置換されることができる。

「アルキル」という用語は、１～約２０個の炭素原子、または好ましくは１～約１２個の炭素原子を有する線状または分枝状ラジカルを包含する。より好ましいアルキルラジカルは、１～約１０個の炭素原子を有する「低級アルキル」ラジカルである。最も好ましいのは、１～約８個の炭素原子を有する低級アルキルラジカルである。このようなラジカルの例としては、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ペンチル、イソアミル、ヘキシルなどが挙げられる。

「アルケニル」という用語は、２～約２０個の炭素原子、または好ましくは２～約１２個の炭素原子からなる少なくとも１つの炭素間二重結合を有する線状または分枝状ラジカルを包含する。より好ましいアルケニルラジカルは、２～約１０個の炭素原子、より好ましくは約２～約８個の炭素原子を有する「低級アルケニル」ラジカルである。アルケニルラジカルの例としては、エテニル、アリル、プロペニル、ブテニルおよび４－メチルブテニルが挙げられる。「アルケニル」および「低級アルケニル」という用語は、「シス」および「トランス」配向、またはそれに代わるものとして「Ｅ」および「Ｚ」配向を有するラジカルを包含する。

「アルキニル」という用語は、２～約２０個の炭素原子、または好ましくは２～約１２個の炭素原子からなる少なくとも１つの炭素間三重結合を有する線状または分枝状ラジカルを包含する。より好ましいアルキニルラジカルは、２～約１０個の炭素原子、より好ましくは約２～約８個の炭素原子を有する「低級アルキニル」ラジカルである。アルキニルラジカルの例としては、プロパルギル、１－プロピニル、２－プロピニル、１－ブチン、２－ブチニルおよび１－ペンチニルが挙げられる。

「アリール」という用語は、１、２、または３個の環を含有する炭素環式芳香族系を意味し、この中で、このような環は、ぶら下がっている様式で一緒に結合することができるか、または融合することができる。「アリール」という用語は、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダンおよびビフェニルなどの芳香族ラジカルを包含する。

「ヘテロアリール」という用語は、不飽和ヘテロシクリルラジカルを包含する。ヘテロアリールラジカルの例としては、１～４個の窒素原子を含有する不飽和３～６員、好ましくは５員または６員のヘテロ単環式基、例えば、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、ピリジル、ピリミジル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル（例えば、４Ｈ－１，２，４－トリアゾリル、１Ｈ－１，２，３－トリアゾリル、２Ｈ－１，２，３－トリアゾリルなど）テトラゾリル（例えば、１Ｈ－テトラゾリル、２Ｈ－テトラゾリルなど）、など；１～５個の窒素原子を含有する不飽和縮合ヘテロシクリル基、例えば、インドリル、イソインドリル、インドリジニル、ベンズイミダゾリル、キノリル、イソキノリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、テトラゾロピリダジニル（例えば、テトラゾロ［１，５－ｂ］ピリダジニルなど）、など；酸素原子を含有する不飽和３～６員、好ましくは５員または６員複素単環式基、例えば、ピラニル、フリル、など；硫黄原子を含有する不飽和３～６員複素単環式基、例えば、チエニル、など；１～２個の酸素原子と１～３個の窒素原子とを含有する不飽和３～６員、好ましくは５員または６員複素単環式基、例えば、オキサゾリル、イソキサゾリル、オキサジアゾリル（例えば、１，２，４－オキサジアゾリル、１，３，４－オキサジアゾリル、１，２，５－オキサジアゾリル、など）など；１～２個の酸素原子と１～３個の窒素原子とを含有する不飽和縮合ヘテロシクリル基（例えば、ベンゾキサゾリル、ベンゾキサジアゾリル、など）；１～２個の硫黄基と１～３個の窒素原子とを含有する不飽和３～６員、好ましくは５員または６員複素単環式基、例えば、チアゾリル、チアジアゾリル（例えば、１，２，４－チアジアゾリル、１，３，４－チアジアゾリル、１，２，５－チアジアゾリル、など）など；１～２個の硫黄原子と１～３個の窒素原子とを含有する不飽和縮合ヘテロシクリル基（例えば、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、など）などが挙げられる。

「置換された」という用語は、所与の構造中の１つ以上の水素ラジカルを、ハロ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロシクリル、チオール、アルキルチオ、アリールチオ、アルキルチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルスルホニル、アルキルスルホニルアルキル、アリールスルホニルアルキル、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アリールアミノカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ハロアルキル、アミノ、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アルキルアミノアルキル、アリールアミノアルキル、アミノアルキルアミノ、ヒドロキシ、アルコキシアルキル、カルボキシアルキル、アルコキシカルボニルアルキル、アミノカルボニルアルキル、アシル、アラルコキシカルボニル、カルボン酸、スルホン酸、スルホニル、ホスホン酸、アリール、ヘテロアリール、複素環式、および脂肪族を含むがこれらに限定されない特定の置換基のラジカルで置換することを指す。置換基がさらに置換されることができることは理解される。

新生物、腫瘍の成長または腫瘍細胞の増殖の文脈における「阻害」という用語は、とりわけ、原発腫瘍または続発性腫瘍の出現の遅延、原発腫瘍または続発性腫瘍の発達の遅延、原発腫瘍または続発性腫瘍の発生の低下、疾患の二次作用の重症度の遅延または低下、腫瘍の成長の抑止および腫瘍の退縮によって評価することができる。極端な場合、完全な阻害は、本明細書では予防または化学的予防と称される。

本明細書で使用される「転移」という用語は、元の腫瘍部位から血管およびリンパ管を経て癌細胞が移動して他の組織内に癌を生成することを指す。転移はまた、遠隔部位で成長する二次癌について使用される用語でもある。

本明細書で使用される「新生物」という用語は、過剰な細胞分裂に起因する組織の異常な塊を指す。新生物は良性（癌性ではない）または悪性（癌性）であることがあり、腫瘍と呼ばれることもある。「新生物」という用語は、腫瘍形成をもたらす病理学的プロセスである。

本明細書で使用される場合、「前癌性」という用語は、悪性ではないが、処置せずに放置すると悪性になる可能性がある容態を指す。

「増殖」という用語は、有糸分裂を起こしている細胞を指す。

「処置」という用語は、ヒトを含む哺乳動物が、直接的または間接的に哺乳動物の容態を改善する目的で医療上の助力を受ける、何らかのプロセス、作用、適用、療法などを指す。

本明細書で使用される場合、「医薬として許容され得る塩」という用語は、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応などなしにヒトおよび下等動物の組織と接触して使用するのに適している塩を指し、合理的な損益比に見合ったものである。医薬として許容され得る塩は当技術分野で周知である。例えば、Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅらは、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，６６：１－１９（１９７７）において、医薬として許容され得る塩を詳細に説明している。塩は、本発明の化合物の最終的な単離および精製中にその場で、または遊離塩基官能基を適切な有機酸もしくは無機酸と反応させることによって別々に調製することができる。医薬として許容され得る非毒性酸付加塩の例としては、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸および過塩素酸などの無機酸もしくは酢酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸ラクトビオン酸もしくはマロン酸などの有機酸で、またはイオン交換などの当技術分野で使用される他の方法を使用することによって形成されるアミノ基の塩が挙げられるが、これらに限定されない。他の医薬として許容され得る塩には、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、カンファスルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２－ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３－フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸、吉草酸塩などが含まれるが、これらに限定されない。代表的なアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩には、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどが含まれる。さらなる医薬として許容され得る塩には、適宜、非毒性アンモニウム、第四級アンモニウム、ならびに、ハロゲン化物、水酸化物、カルボン酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、１～６個の炭素原子を有するスルホン酸アルキル、スルホン酸塩およびスルホン酸アリールなどの対イオンを使用して形成されるアミンカチオンが含まれる。ナトリウム、カリウムおよびコリン塩基塩などのある特定の塩、ならびに硫酸塩およびメタンスルホン酸塩などの酸性塩は、医薬として許容され得る水性媒体中で式Ｉの化合物の溶解度を改善することがわかった。一実施形態では、化合物１の医薬として許容され得る塩はコリン塩である。化合物１の好ましい塩には、ナトリウム塩およびカリウム塩が含まれる。他の好ましい塩には、硫酸塩およびメタンスルホン酸塩が含まれる。化合物１の特に好ましい塩は、メタンスルホン酸塩およびベンゼンスルホン酸塩である。化合物２の特に好ましい塩は塩酸塩である。

本明細書で使用される場合、「医薬として許容され得る担体」は、無菌の発熱物質非含有水など、医薬投与と適合性の、あるありとあらゆる溶媒、分散媒体、コーティング、抗菌薬および抗真菌薬、等張剤および吸収遅延剤などを含むことを意図する。適切な担体は、本分野における標準的な参考図書であるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓの最新版において説明されており、これは参照により本明細書に組み込まれる。このような担体または希釈剤の好ましい例としては、水、塩類溶液、リンゲル液、デキストロース溶液、および５％ヒト血清アルブミンが挙げられるが、これらに限定されない。リポソームおよび不揮発性油などの非水性ビヒクルもまた使用することができる。医薬として活性のある物質のためのこのような媒体および薬剤の使用は、当技術分野で周知である。何らかの従来の媒体または薬剤が活性化合物と適合しない場合を除いて、組成物におけるこれらの使用が企図されている。補足的な活性化合物もまた、組成物に組み込むことができる。

本明細書で使用される場合、「前癌性」という用語は、悪性ではないが、処置せずに放置すると悪性になる可能性がある容態を指す。

本明細書で使用される「対象」という用語は、動物を指す。好ましくは、動物は哺乳動物である。より好ましくは、哺乳動物はヒトである。対象はまた、例えば、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ブタ、モルモット、魚塁、鳥塁などを指す。

本発明の化合物は、選択的な生物学的特性を増強するために適切な官能基を付加することによって修飾することができる。このような修飾は当技術分野で公知であり、所与の生物学的な系（例えば、血液、リンパ系、中枢神経系）への生物学的浸透を高め、経口利用可能性を高め、溶解度を上昇させて注射による投与を可能にし、代謝を変化させ、排泄速度を変化させるものを含むことができる。

医薬組成物
本発明の医薬組成物は、１つ以上の医薬として許容され得る担体または賦形剤と一緒に製剤された、治療有効量の化合物１などの式Ｉの化合物、またはその医薬として許容され得る塩を、ＰＤ－１シグナル伝達阻害剤と組み合わせて含む。

好ましくは、医薬として許容され得る担体または賦形剤は、何らかの種類の非毒性、不活性、不活性の固体、半固体または液体の充填剤、希釈剤、封入材料、または製剤添加剤である。医薬として許容され得る担体として機能することができる材料のいくつかの例は、ラクトース、グルコース、およびスクロースなどの糖；アルファ－（α）、ベータ－（β）およびガンマ－（γ）シクロデキストリンなどのシクロデキストリン；トウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプンなどのデンプン；セルロースならびにナトリウムカルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、および酢酸セルロースなどのその誘導体；トラガカント末；麦芽；ゼラチン；タルク；ココアバターおよび坐剤用蝋などの賦形剤；ラッカセイ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、およびダイズ油などの油；プロピレングリコールなどのグリコール；オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなどのエステル；アガー；水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなどの緩衝剤；アルギン酸；発熱物質非含有水；等張性塩類溶液；リンゲル液；エチルアルコール、およびリン酸緩衝液、ならびにラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムなどの他の非毒性の適合性潤滑剤、ならびに着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味料、着香料、香料、防腐剤、および酸化防止剤もまた、製剤者の判断によって、組成物中に存在することもできる。

本発明の医薬組成物は、経口で、非経口で、吸入スプレーによって、局所的に、直腸で、鼻腔で、頬側で、膣で、または移植されたリザーバーを介して、好ましくは経口投与もしくは注射による投与によって投与することができる。本発明の医薬組成物は、何らかの従来の非毒性の医薬として許容され得る担体、アジュバントまたはビヒクルを含むことができる。いくつかの場合では、製剤のｐＨを、医薬として許容され得る酸、塩基、または緩衝液で調整して、製剤された化合物または該化合物の送達形態の安定性を高めることができる。本明細書で使用される非経口という用語は、皮下、皮内、静脈内、筋肉内、関節内、動脈内、滑液内、胸骨内、髄腔内、病変内および頭蓋内の注射または注入の技術を含む。

経口投与用の液体剤形には、医薬として許容され得るエマルション、マイクロエマルション、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシルが含まれる。活性化合物に加えて、液体剤形は、例えば、水または他の溶媒、可溶化剤、ならびにエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３－ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、ゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、およびソルビタンの脂肪酸エステルなどの乳化剤、ならびにこれらの混合物など、当技術分野で通常使用される不活性希釈剤を含有することができる。不活性希釈剤に加えて、経口組成物はまた、湿潤剤、乳化剤および懸濁剤などのアジュバント、甘味料、着香料、および香料なども含むことができる。

注射可能な調製物、例えば、無菌の注射可能な水性または油性の懸濁液は、適切な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を使用して、公知の技術によって製剤してよい。無菌の注射可能な調製物はまた、例えば、１，３－ブタンジオールの溶液として、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の無菌の注射可能な溶液、懸濁液または乳濁液であってよい。採用することができる許容可能なビヒクルおよび溶媒の中には、水、リンゲル液、米国薬局方および等張性塩化ナトリウム溶液がある。加えて、無菌の不揮発油は、従来より、溶媒または懸濁媒体として採用されている。この目的のために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む何らかの刺激の少ない不揮発性油を採用することができる。加えて、オレイン酸などの脂肪酸は注射剤の調製に使用される。

注射可能な製剤は、例えば、細菌保持フィルターを経た濾過によって、または使用前に滅菌水もしくは他の無菌注射媒体の中に溶解または分散させることができる無菌固体組成物の形態で無菌剤を組み込むことによって無菌にすることができる。

薬物の効果を延長させるために、皮下注射または筋肉内注射からの薬物の吸収を遅延させることがしばしば望ましい。これは、水中溶解度の低い結晶性または非晶質の材料の液体懸濁液を使用することによって達成することができる。次に、薬物の吸収速度はその溶解速度に依存しており、それは次に、結晶の大きさおよび結晶形態に依存する可能性がある。あるいは、非経口投与された剤形の吸収遅延は、薬物を油性ビヒクル中に溶解または懸濁することによって達成される。注射可能なデポー形態は、ポリラクチド－ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー内で薬物のマイクロカプセルマトリックスを形成することによって作製される。ポリマーに対する薬物の比率および採用される特定のポリマーの性質に応じて、薬物放出の速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が挙げられる。デポー注射用製剤はまた、体組織と適合性のあるリポソームまたはマイクロエマルションの中に薬物を封入することによっても調製される。

直腸または膣への投与用の組成物は、好ましくは、本発明の化合物を、周囲温度では固体であるが体温では液体であり、それゆえ直腸または膣腔の中で融解し、活性化合物を放出する、カカオバター、ポリエチレングリコールまたは坐剤蝋などの適切な非刺激性賦形剤または担体と混合することによって調製することができる坐剤である。

経口投与用の固形剤形には、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、および顆粒剤が含まれる。このような固体剤形では、活性化合物は、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムなどの少なくとも１つの不活性で医薬として許容され得る賦形剤もしくは担体、ならびに／または：ａ）デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、およびケイ酸などの充填剤もしくは増量剤、およびｂ）例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、スクロース、およびアカシアなどの結合剤、ｃ）グリセロールなどの保湿剤、ｄ）アガー－アガー、炭酸カルシウム、ジャガイモもしくはタピオカのデンプン、アルギン酸、ある特定のケイ酸塩、および炭酸ナトリウムなどの崩壊剤、ｅ）パラフィンなどの溶液遅滞剤、ｆ）第四級アンモニウム化合物などの吸収促進剤、ｇ）例えば、セチルアルコールおよびグリセロールモノステアラートなどの湿潤剤、ｈ）カオリンおよびベントナイト粘土などの吸収剤、ｉ）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムなどの潤滑剤、ならびにこれらの混合物と混合される。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合では、剤形はまた、緩衝剤を含んでもよい。

同様の種類の固体組成物はまた、ラクトースまたは乳糖、および高分子量ポリエチレングリコールなどのような賦形剤を使用して、軟質および硬質充填ゼラチンカプセルの充填剤として使用することもできる。

錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤、および顆粒剤の固形剤形は、腸溶コーティングおよび医薬製剤分野で周知の他のコーティングなどのコーティングおよびシェルを用いて調製することができる。それらは、場合により、乳白剤を含有してもよく、それらがまた有効成分（複数可）のみ、または優先的に、腸管のある特定の部分において、場合により、遅延した様式で放出する組成物であることもできる。使用することができる植え込み組成物の例としては、高分子物質および蝋が含まれる。

本発明の化合物の局所または経皮投与のための剤形には、軟膏、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ジェル剤、散剤、液剤、スプレー剤、吸入剤またはパッチ剤が含まれる。有効成分は、無菌条件下で、医薬として許容され得る担体および必要とされる可能性がある場合、何らかの必要な防腐剤または緩衝剤と混合される。眼科用製剤、点耳薬、眼軟膏、散剤および液剤もまた、本発明の範囲内であると考えられる。

軟膏、ペースト剤、クリーム剤およびジェル剤は、本発明の活性化合物に加えて、動植物脂肪、油、蝋、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルクおよび酸化亜鉛、またはそれらの混合物などの賦形剤を含有することができる。

散剤およびスプレー剤は、本発明の化合物に加えて、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウムおよびポリアミド末、またはこれらの物質の混合物などの賦形剤を含有することができる。スプレー剤には、クロロフルオロ炭化水素などの通常の推進薬を追加で含有することができる。

経皮パッチは、化合物の身体への制御された送達を提供するという追加の利点を有する。このような剤形は、化合物を適切な培地中に溶解または分配することによって作製することができる。吸収促進剤を使用して、皮膚を横切る化合物の流れを増大させることもできる。速度は、速度制御膜を提供することによって、または化合物をポリマーマトリックスもしくはゲルの中に分散させることによってのいずれかで制御することができる。

肺送達のために、本発明の治療用組成物は、直接投与（例えば、呼吸器系への吸入）によって、固体または液体の粒子状形態で製剤され、患者に投与される。本発明を実施するために調製された活性化合物の固体または液体の粒子状形態は、呼吸可能な大きさの粒子、すなわち、吸入時に口および喉頭を通過して肺の気管支および肺胞へと入るのに十分小さな大きさの粒子を含む。エアロゾル化された治療薬、特にエアロゾル化された抗生物質の送達は当技術分野で公知である（例えば、Ｖａｎ Ｄｅｖａｎｔｅｒらに対する米国特許第５，７６７，０６８号、Ｓｍｉｔｈらに対する米国特許第５，５０８，２６９号、およびＭｏｎｔｇｏｍｅｒｙによるＷＯ第９８／４３６５０号を参照されたく、これらはすべて参照により本明細書に組み込まれる）。抗生物質の肺送達に関する論議はまた、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６，０１４，９６９号においても見られる。

式Ｉの化合物とＰＤ－１シグナル伝達阻害剤との組み合わせの「治療有効量」とは、何らかの医学的処置に対して適用可能な合理的な損益比で、組み合わせて処置対象に治療効果を与える各化合物の量を意味する。治療効果は、客観的（すなわち、何らかの試験またはマーカーによって測定可能）または主観的（すなわち、対象が効果の兆候を示すか、または効果を感じる）である可能性がある。有効量はまた、投与経路および他の薬剤との併用の可能性によっても異なる。しかしながら、本発明の化合物および組成物の毎日の総使用量は、健全な医学的判断の範囲内で主治医によって決定されることが理解されよう。いかなる特定の患者についての具体的な治療有効量も、処置中の障害および障害の重症度；採用される具体的な化合物の活性；採用される具体的な組成物；患者の齢、体重、全身レベルの健康状態、性別および食事の種類；投与時刻、投与経路、および採用される具体的な化合物の排泄速度；処置の持続期間；採用される具体的な化合物と組み合わせてまたは同時に使用される薬物；；医学分野で周知の同様の因子を含む、さまざまな因子によるであろう。好ましい実施形態では、治療有効量の式Ｉの化合物またはその医薬として許容され得る塩とＰＤ－１シグナル伝達阻害剤との組み合わせは、処置される癌の種類において相乗作用を呈する。

ヒトまたは他の動物に単回または分割用量で投与される本発明の併用療法における各化合物の総日用量は、例えば、０．０１～５０ｍｇ／ｋｇ体重、またはより通常では０．１～２５ｍｇ／ｋｇ体重の量であってよい。単回用量組成物は、このような量またはその約数を含有して、日用量を構成することができる。概して、本発明による処置投与計画は、このような処置を必要とする患者への、単回または複数回の用量における本発明の化合物（複数可）の約１０ｍｇ～約１０００ｍｇの１日あたりの投与を含む。

本発明の併用療法における各化合物は、例えば、注射によって、静脈内に、動脈内に、表皮下に、腹腔内に、筋肉内に、もしくは皮下に、または経口で、頬側に、鼻腔内に、経粘膜的に、局所的に、眼科用製剤において、または吸入により、約０．１～約５００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の薬用量、または１ｍｇ～１０００ｍｇ／用量の薬用量で４～１２０時間ごとに、または特定の薬の必要条件によって投与することができる。本明細書の方法は、所望のまたは記載された効果を達成するために、有効量の化合物または化合物組成物の投与を企図する。通常、本発明の医薬組成物は、１日あたり約１～約６回、またはそれに代わるものとして、継続注入として投与されるであろう。このような投与は、長期的なまたは一過性の療法として使用することができる。単一の剤形を生成するために医薬賦形剤または担体と組み合わせることができる有効成分の量は、処置される宿主および特定の投与様式に応じて変化するであろう。通常の調製物は、約５％～約９５％の活性化合物（ｗ／ｗ）を含有する。あるいは、通常の調製物は、約２０％～約８０％の活性化合物を含有することができる。

先に列挙されたものよりも低用量または高用量が必要とされることがある。何らかの特定の患者に対する具体的な薬用量および処置投与計画は、採用される具体的な化合物の活性、齢、体重、全身レベルの健康状態、性別、食事、投与時刻、排泄速度、薬物の組み合わせ、疾患の重症度および経過、容態または症状、患者の疾患、容態、または症状に対する傾向、ならびに処置する医師の判断が挙げられる。

患者の容態が改善すると、必要な場合、本発明の化合物、組成物、または組み合わせの維持用量を投与してよい。続いて、薬用量もしくは投与頻度、またはその両方を、症状の関数として、改善された容態が所望のレベルまで緩和されたときに改善された容態が保持されるレベルまで低減させることができる。しかしながら、患者は、疾患の症状の何らかの再発の際には、長期的に断続的な処置を必要とすることがある。

例
本発明の化合物およびプロセスは、本発明の範囲を限定するものではなく、例示としてのみ意図されている以下の例に関連してよりよく理解されるであろう。開示された実施形態に対するさまざまな変更および修正は当業者には明らかであり、本発明の化学構造、置換基、誘導体、製剤および／または方法に関するものを含むがこれらに限定されないこのような変更および修正は、本発明の趣旨および添付の特許請求の範囲から逸脱することなく行うことができる。

化合物１ならびにそのメタンスルホン酸塩、ナトリウム塩、カリウム塩、およびコリン塩の合成を以下のスキームにおいて示す。

中間体１０７－１または１０７－２は、１０６をそれぞれＲ－２－１またはＲ－２－２のいずれかと反応させることによって調製することができる。Ｒ－２－１およびＲ－２－２を合成するための合成スキームを以下に

または別の方法によって示す。

中間体１０８－１および１０８－２は、１０７－１または１０７－２とＲ－３－１またはＲ－３－２のいずれかとのカップリング反応によって調製することができ、ここで、Ｒ－３－１およびＲ－３－２は次のスキームによって調製することができる。

例１：Ｎ－ヒドロキシ－２－（（（２－（６－メトキシピリジン－３－イル）－４－モルホリノチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イル）メチル）（メチル）アミノ）ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物１）の調製
ステップａ：（Ｚ）－エチル－２－（エトキシメチル）－３－メトキシアクリラート（化合物２０２）
ナトリウム（４０．９ｇ、１．７８ｍｏｌ）をエタノール（７５０ｍＬ）に少量ずつ注意深く添加し、ナトリウム金属がすべて消失した後、溶液を濃縮してＮａＯＥｔ粉末を得た。撹拌しながら、ヘキサン（１．０Ｌ）を添加し、この混合物を氷水浴で冷却した。２０１（１３０ｇ、０．８９ｍｏｌ）およびギ酸エチル（１３１ｇ、１．７８ｍｏｌ）の混合物を０～５℃で滴下して添加した。この反応混合物を室温で一晩撹拌した。氷水浴で冷却しながら硫酸ジメチル（２２４ｇ、１．７８ｍｏｌ）を滴下して添加した。得られた混合物を５０℃で２時間加熱した。この混合物に塩化トリエチルアンモニウム（１２２ｇ）および水酸化ナトリウム（２０ｇ）を添加した。次に、この混合物を室温で４時間撹拌し、濾過した。濾液を水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させた。これを濃縮して、表題化合物（１４０ｇ、３７％）を無色の油として得、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。

ステップｂ：エチル２－オキソ－１，２，３，４－テトラヒドロピリミジン－５－カルボキシラート（化合物２０３）
エタノール（５００ｍＬ）中の化合物２０２（１４０ｇ、０．７４５ｍｏｌ）、尿素（４０．０ｇ、０．６９７ｍｏｌ）および濃塩酸（３４ｍＬ）の混合物を一晩加熱還流した。反応物の体積の約５０％を蒸発させた後、得られた懸濁液を濾過し、少量のエタノールで洗浄し、乾燥させて、化合物２０３（４７ｇ、３７％）を白色の固形物として得た。

ステップｃ：エチル２－オキソ－１，２－－ジヒドロピリミジン－５－カルボキシラート（化合物２０４）
酢酸（５００ｍＬ）中の化合物２０３（４７ｇ、２８０ｍｍｏｌ）の溶液に、臭素（４９．０ｇ、３０７ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を２時間加熱還流し、室温に冷却し、さらに０～５℃に冷却し、濾過して、表題化合物２０４を黄色の固形物（３８ｇ、５４％）として得た。

ステップｄ：エチル２－クロロピリミジン－５－カルボキシラート（化合物Ｒ－２－１）
化合物２０４（３８．０ｇ、１５３ｍｍｏｌ）および三塩化ホスホリル（３００ｍＬ）およびＮ，Ｎ－ジメチルアニリン（３ｍＬ）の混合物を２時間加熱還流し、室温に冷却し、濃縮した。残分を氷水で注意深くクエンチし、炭酸ナトリウムでｐＨを７～８に調整し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機物を氷水および鹹水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、蒸発させ、カラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１０％で溶離）により精製して、化合物Ｒ－２－１（１５ｇ、５２％）を白色の固形物として得た。

ステップｅ：ナトリウム（Ｚ）－２－（ジメトキシメチル）－３－メトキシ－３－オキソプロパ－１－エン－１－オラート（化合物２０６）
無水１，２－ジメトキシエタン（３００ｍＬ）中のＮａＨ（２７ｇ、鉱油中６０％、０．６７５ｍｏｌ）の混合物を４０～５０℃まで加熱し、メチル３，３－ジメトキシプロピオナート（２０５）（１００ｇ、０．６７５ｍｏｌ）を滴下して添加した。得られた混合物を０．５時間撹拌し、無水ギ酸メチル（８１ｇ、１．３５ｍｏｌ）を４０～５０℃で滴下して添加した。得られた混合物を４０～５０℃（内部温度）で２時間撹拌した後、０℃まで冷却した。この反応混合物を緩徐に２５℃まで加温させておき、一晩撹拌した。Ｅｔ_２Ｏ（１５０ｍＬ）を添加し、３０分間撹拌した。得られた懸濁液を濾過した。固形物をＥｔ_２Ｏ（１００ｍＬ）で洗浄し、収集し、乾燥させて、表題化合物２０６（８２ｇ、６１％）をオフホワイトの固形物として得た。

ステップｆ：２－アミノ－ピリミジン－５－カルボン酸メチルエステル（化合物２０７）
ＤＭＦ（３００ｍＬ）中の塩酸グアニジン（４２．２ｇ、０．４４ｍｏｌ）の混合物に、化合物２０６（８０ｇ、０．４０ｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を１００℃で１時間加熱した。この反応混合物を濾過した後に冷却した。過ケークを５０ｍＬのＤＭＦで洗浄し、合わせた濾液を濃縮して残分を残し、これを冷ＥｔＯＨ中に懸濁し、冷ＥｔＯＨ（５０ｍＬ）で洗浄して、化合物２０７（３８ｇ、６１．５％）を黄色の固形物として得た。

ステップｇ：メチル２－クロロピリミジン－５－カルボキシラート（化合物Ｒ－２－２）
化合物２０７（７ｇ、０．０４６ｍｏｌ）を濃塩酸（１５．２ｍＬ）およびＣＨ_２Ｃｌ_２（６０ｍＬ）の混合物に添加した。冷却後、１５～２０℃でＺｎＣｌ_２（１８．６ｇ、０．１３８ｍｏｌ）を添加した。この混合物を１５～２０℃で０．５時間撹拌し、５～１０℃まで冷却した。内部温度を５～１０℃に維持しながら、ＮａＮＯ_２（９．５ｇ、０．１３８ｍｏｌ）を少量ずつ添加した。反応を約２時間継続した。この反応混合物を氷水（５０ｍＬ）に注いだ。有機層を分離し、水相をＣＨ_２Ｃｌ_２（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機抽出物を濃縮して、粗生成物（４．２ｇ）を得た。粗化合物をヘキサン（２０ｍＬ）中に懸濁し、６０℃で３０分間加熱し、濾過した。濾液を濃縮して、表題化合物Ｒ－２－２（３．５ｇ、４４．４％）をオフホワイト色の固形物として得た。

ステップｈ：５－ブロモ－２－メトキシピリジン（化合物３０３）
アセトニトリル（１．０Ｌ）中の２－メトキシ－ピリジン（１００ｇ、０．９２モル）、ＮＢＳ（１８０ｇ、１．０モル）の溶液を２１時間還流撹拌した。ＴＬＣは反応が完了したことを示した。この反応混合物を室温まで冷却し、濃縮した。約９００ｍｌの溶媒を収集した。得られた懸濁液を濾過し、ｎ－ヘキサン（約４００ｍＬ）で洗浄した。濾液を再び濃縮して、粗生成物を得た。粗生成物を減圧（３０℃／約０．３ｍｍＨｇ）で蒸留して、表題化合物を透明な油（１４６ｇ、８４％）として得た。

ステップｉ：６－メトキシピリジン－３－イルボロン酸（Ｒ－３－１）：
無水ＴＨＦ（１８０ｍｌ）中の化合物３０３（２０ｇ、０．１１モル）の溶液に、－７８℃でｎ－ＢｕＬｉ（５９ｍＬ、ＴＨＦ中２Ｍ）を滴下して添加し、得られた混合物を１時間撹拌した。ホウ酸トリイソプロピル（３７ｍＬ）を－７８℃で加え、この反応混合物を室温まで加温し、一晩撹拌し続けた。ＴＬＣ（ヘキサン／酢酸エチル＝５：１）は反応が完了したことを示した。この混合物を４ＮのＨＣｌ（９０ｍｌ）でｐＨを３～４に調整した。沈殿物を濾過により収集して、粗化合物Ｒ－３－１（２１ｇ、１２８％）を得た。粗化合物Ｒ－３－１（２１ｇ）を水（２００ｍｌ）中に溶解し、濃アンモニア溶液で溶液のｐＨを８～９に調整し、沈殿物を濾過により収集して、純粋な表題化合物Ｒ－３－１を白色の固形物（１１ｇ、６７％）として得た。

ステップｊ：２－メトキシ－５－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（化合物Ｒ－３－２）
無水ジオキサン（５００ｍＬ）化合物３０３（５５ｇ、０．２９ｍｏｌ）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’－オクタメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボロラン）の混合物（９０ｇ、０．３５ｍｏｌ）、酢酸カリウム（５７ｇ、０．５８ｍｏｌ）およびビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（２．２ｇ、３ｍｍｏｌ）をＮ_２雰囲気下で１０８℃で一晩加熱した。この反応混合物を濃縮し、ヘキサン／酢酸エチルで溶離するカラムクロマトグラフィーにより精製して、表題化合物Ｒ－３－２（５８ｇ、８４％）を得た。

ステップｋ：チエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（化合物１０２）
尿素法：メチル３－アミノチオフェン－２－カルボキシラート（１０１）（９０．０ｇ、５７３ｍｍｏｌ、１．０当量）および尿素（２７７．６ｇ、４．６ｍｏｌ、８．０当量）の混合物を１９０℃で３～４時間加熱し、室温まで冷却した。この反応混合物にＮａＯＨ水溶液（１０％、８００ｍＬ）を添加した。周囲温度で１時間撹拌した後、固形物を濾過により除去した。濾液をＨＣｌでｐＨ３～４まで酸性化し、沈殿した固形物を濾過により収集し、水で洗浄し、真空中で乾燥させて、所望の生成物である化合物１０２をオフホワイト色の固形物（８７ｇ、８９％）として得た。

ＫＯＣＮ法：３－アミノチオフェン－２－カルボキシラート（１０１）（１００．０ｇ、６３６．９ｍｍｏｌ、１．０当量）、酢酸（７０５ｍＬ）および水（６００ｍＬ）の混合物に水（３２６ｍＬ）中のシアン酸カリウム（１５４．８ｇ、１．９１ｍｏｌ、３．０当量）の溶液を緩徐に１時間かけて添加した。得られた混合物を室温で２０時間撹拌し、濾過し、水（５００ｍＬ）ですすいだ。このケークを適切な大きさの反応器に入れ、２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１．６５Ｌ）を添加し、スラリーを２時間撹拌し、ＬＣＭＳにより所望の生成物の形成を確認した。この混合物を１０℃まで冷却し、３Ｍ塩酸水溶液（１．２９Ｌ）をｐＨ＝５．０～６．０になるまで添加した。このスラリーを濾過し、水（７００ｍＬ）ですすぎ、真空オーブン内で５０℃で２４時間乾燥させて、化合物１０２（１００ｇ、９４％）をオフホワイト色の固形物として得た。

ステップｌ：２，４－ジクロロチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン（化合物１０３）
オキシ塩化リン（１５２ｍＬ、１．６７ｍｏｌ、７．０当量）を、アセトニトリル（２５０ｍＬ）中の化合物１０２（４０ｇ、２３８ｍｍｏｌ、１．０当量）およびＮ，Ｎ－ジメチルアニリン（２２．５ｍＬ、１７９ｍｍｏｌ、０．７５当量）の冷溶液に緩徐に添加し、その間、温度を２０℃未満に維持した。次に、この混合物を８５℃まで加熱し、２４時間撹拌した。この反応混合物を１５℃まで冷却し、次に氷および冷水の混合物（３６０ｍＬ）へと緩徐に注いだ。得られたスラリーを濾過し、冷水（２００ｍＬ）ですすいだ。ケークを真空オーブン内で４０℃で２４時間乾燥させて、化合物１０３（４０．５ｇ、８３％）をオフホワイト色の固形物として得た。

ステップｍ：２－クロロ－４－モルホリノチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン（化合物１０４）
化合物１０３（３４．２ｇ、１６７ｍｍｏｌ、１．０当量）とメタノール（５００ｍＬ）の混合物に、モルホリン（３１．２ｍＬ、３６７ｍｍｏｌ、２．２当量）を緩徐に添加した。この反応混合物を室温で一晩撹拌した。この沈殿物を濾過により収集し、メタノールで洗浄し、真空で乾燥させて、所望の生成物である化合物１０４を淡黄色の固形物（３９ｇ、９１％）として得た。

ステップｎ：２－クロロ－４－モルホリノチエノ［３．２－ｄ］ピリミジン－６－カルボアルデヒド（化合物１０５）
－７８℃のＴＨＦ（無水、３２０ｍＬ）中の化合物１０４（２０ｇ、７８．４ｍｍｏｌ、１．０当量）の懸濁液に、ｎ－ＢｕＬｉ（ヘキサン中、２．４Ｍ、４０．８ｍＬ、１０２ｍｍｏｌ、１．３当量）を窒素下で緩徐に添加した。得られたスラリーを－６０℃まで加温させておき、透明な褐色の溶液に変えた。次に、反応混合物を再び－７８℃まで冷却し、ＤＭＦ（無水、９．１ｍＬ、１１８ｍｍｏｌ、１．５当量）を緩徐に添加した。得られた溶液を－７８℃で０．５時間撹拌し、１時間かけて０℃まで加温し、ＨＣｌ水溶液（０．２５Ｍ、６６０ｍＬ）および氷水（３２０ｍＬ）の混合物に緩徐に注いだ。得られたスラリーを０～１０℃で０．５時間撹拌し、濾過し、冷水で洗浄し、真空中で乾燥させて、化合物１０５を黄色の固体として得た（２２ｇ、９８％）。

ステップｏ：（２－クロロ－４－モルホリン－４－イル－チエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イルメチル）－メチル－アミン（化合物１０６）
メタノール（１２５ｍＬ）中の化合物１０５（２０．０ｇ、７０．４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、窒素雰囲気下でメタノール中のメチルアミン溶液（２７％ｖ／ｖ、７５ｍＬ、５６３．２ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温で一晩撹拌し、溶媒を真空で除去して粗固形物生成物を得、これを窒素下でメタノール（５５０ｍＬ）およびＴＨＦ（２２０ｍＬ）に溶解した。水素化ホウ素ナトリウム（８ｇ、２１１．２ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。この反応混合物を真空中で蒸発させ、水（３００ｍＬ）を添加した。水性混合物を塩化メチレンで抽出し、合わせた抽出物をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、濃縮した。残分を６Ｍ ＨＣｌ（２３０ｍＬ）中に溶解し、３０分間撹拌した。水溶液を塩化メチレンで数回洗浄し、ＮａＯＨ（４Ｎ）でｐＨ９～１０まで調整した。沈殿した固形物を濾過により収集し、乾燥させて（６０℃、６時間）、淡黄色の固形物（１８ｇ、８５％）を得た。

ステップｐ（ａ）：２－［（２－クロロ－４－モルホリン－４－イル－チエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イルメチル）－メチル－アミノ］－ピリミジン－５－カルボン酸エチルエステル（化合物１０７－１）
室温でＣＨ_３ＣＮ（４００ｍＬ）中の１０６（１０ｇ、３３．６ｍｍｏｌ）およびＲ－２－１（６．８ｇ、３６．４ｍｍｏｌ）の混合物に、ジイソプロピルエチルアミン（２２０ｍＬ、１．２６ｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で一晩撹拌した。次に、この混合物を蒸発させ、続いて塩化メチレン（３００ｍＬ）を添加した。有機相を水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、真空で濃縮して残分を残した。残分に酢酸エチルを添加し、得られた混合物を氷／水浴温度で５０分間撹拌した。得られた固形物を濾過により収集して、表題生成物１０７－１を白色の固形物（１０．６ｇ、７０％）として得た。

ステップｐ（ｂ）：２－［（２－クロロ－４－モルホリン－４－イル－チエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イルメチル）－メチル－アミノ］－ピリミジン－５－カルボン酸メチルエステル（化合物１０７－２）
化合物１０６（２５ｇ、８４ｍｍｏｌ）、ＣＨ_３ＣＮ（５００ｍＬ）およびＲ－２－２（１６ｇ、９２ｍｍｏｌ）の混合物を室温で撹拌した。ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）（５００ｍＬ、２．９ｍｏｌ）を添加した。この溶液を一晩撹拌し、蒸発させた。塩化メチレン（５００ｍＬ）を添加した後、有機相を水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、真空で濃縮した。この残分に酢酸エチル（２００ｍＬ）を添加し、この混合物を氷／水浴中で５０分間撹拌した。表題生成物を白色の固形物（２９．４ｇ、８１％）として収集した。

ステップｑ（ａ）：エチル－２－（（（２－（６－メトキシピリジン－３－イル）－４－モルホリノチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イル）メチル）（メチル）アミノ）ピリミジン－５－カルボキシラート（化合物１０８－１）
方法Ａ：トルエン（８０ｍｌ）、エタノール（５０ｍｌ）、および水（１０ｍｌ）の混合溶媒中の化合物１０７－１（１２ｇ、２６．７ｍｍｏｌ）、Ｒ－３－１（４．９ｇ、３２ｍｍｏｌ）、ＮａＨＣＯ_３（６．７ｇ、８０．１ｍｍｏｌ）およびビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（１８８ｍｇ、０．２６７ｍｍｏｌ）の混合物をＮ_２雰囲気下で１０８℃で４．５時間加熱した。ＴＬＣは反応が完了したことを示した。次に、この反応混合物を室温まで冷却し、水（２０ｍｌ）を添加した。得られた固形物を濾過により収集し、次にエタノール（１００ｍＬ）中に懸濁した。この懸濁液を室温で３０分間撹拌し、濾過した。収集した固形物をエタノールで洗浄し、真空で乾燥させて、表題化合物１０８－１を白色の固形物（１０ｇ、７２％）として得た。

方法Ｂ：トルエン（２４ｍｌ）、エタノール（１５ｍｌ）、および水（３ｍｌ）の混合溶媒中の化合物１０７－１（１．５ｇ、３．３４ｍｍｏｌ）、Ｒ－３－２（１．６ｇ、６．６８ｍｍｏｌ）、ＮａＨＣＯ_３（０．８４ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）およびビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（１１８ｍｇ、０．１６７ｍｍｏｌ）の混合物をＮ_２雰囲気下で１０８℃で一晩加熱した。この反応混合物をジクロロメタンと水との間に分画した。有機層を分離し、鹹水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、真空で蒸発させて残分を得、これをヘキサン／酢酸エチルで溶離するカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物１０８－１を白色の固形物（１．７ｇ、９８％）として得た。

ステップｑ（ｂ）：メチル－２－（（（２－（６－メトキシピリジン－３－イル）－４－モルホリノチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イル）メチル）（メチル）アミノ）ピリミジン－５－カルボキシラート（化合物１０８－２）
室温でジオキサン（５４０ｍＬ）中の化合物１０７－２（２０ｇ、４６．０ｍｍｏｌ）、Ｂ－３－１（９．２ｇ、６０．２ｍｍｏｌ、１．３当量）の混合物に、固形物のＮａＨＣＯ_３（１１．６ｇ、１３８．１ｍｍｏｌ、３当量）に続いて、水（４０ｍＬ）を添加した。Ｎ_２を溶液の表面に通過させることによって、得られた混合物を脱気した。次に、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（３２３ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ、０．０１当量）を添加し、得られた混合物を１０８℃で１５時間加熱した。ＴＬＣおよびＬＣＭＳは反応が完了したことを示した。この反応混合物を、それがまだ熱い（＞９０℃）間にセライトで濾過し、ジオキサン（７０ｍＬ）で洗浄した。この濾液を徐々に室温まで冷却し、冷却期間中に白色の微結晶が形成された。この懸濁液を濾過し、ジオキサン（８０ｍＬ）で洗浄して、表題化合物１０８－２を白色の固形物（１８ｇ、７８％）として得た。

ステップｒ：Ｎ－ヒドロキシ－２－（（（２－（６－メトキシピリジン－３－イル）－４－モルホリノチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イル）メチル）（メチル）アミノ）ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物１）の調製
ヒドロキシルアミンメタノール溶液の調製
ＭｅＯＨ（４００ｍＬ）中のＮＨ_２ＯＨ・ＨＣｌ（８０ｇ、１．１２ｍｏｌ）の混合物を６０～６５℃で１時間加熱して、透明な溶液を形成した。次に、これを氷水浴中で冷却した。反応温度を０～１０℃に維持しながら、この冷混合物に、ＭｅＯＨ（２４０ｍＬ）中のＫＯＨ（９６ｇ、１．６８ｍｏｌ）の溶液を滴下して添加した。得られた混合物を０℃で３０分間撹拌し、次に無水Ｎａ_２ＳＯ_４（７００ｇ）で満たされた定圧漏斗で濾過した。濾液を氷浴下で収集し、将来の使用のために冷蔵庫内に保存した。

化合物１０８－１からの化合物１の調製
化合物１０８－１（１０ｇ、１９ミリモル）を、先の新たに調製したヒドロキシルアミンメタノール溶液（１．７９Ｍ、３５０ｍｌ）中に懸濁した。この混合物にジクロロメタン（１００ｍＬ）を添加した。この反応フラスコを密閉し、混合物を室温で５時間撹拌した後、それは透明な溶液になった。この反応物をさらに９時間撹拌し、濾過していかなる不溶性の固形物も除去した。酢酸をの添加により、濾液をｐＨ６～７まで調整して固形物の沈殿物を形成した。固形物を濾過により収集し、水および最小量のメタノールで洗浄し、真空中で６０℃で５時間乾燥させて、化合物１を白色の固形物（９．２ｇ、９６％）として得た。

化合物１０８－２からの化合物１の調製
室温でジクロロメタン（３１０ｍＬ）中の化合物１０８－２（３１ｇ、６１．１ｍｍｏｌ）の懸濁液に、先に新たに調製したヒドロキシルアミンメタノール溶液（１．７９Ｍ、７４４ｍｌ）を添加した。この反応フラスコを密閉し、反応混合物を室温で５時間撹拌した、この反応混合物は透明な溶液になった。この反応溶液を濾過して、いかなる不溶性の固形物も除去した。次に、濾液に水（３１０ｍＬ）を添加したが、添加中に固形物は形成されなかった。撹拌しながら酢酸（１８．５ｍＬ）を添加してｐＨを１０．２０に調整した（ｐＨ計によって継続的にモニター）。酢酸添加中に内部温度の変化はなかった。得られた反応混合物をさらに４時間撹拌し続けた。白色の固形物が徐々に形成された。この懸濁液を濾過し、最小量のメタノール（１００ｍＬ×３）で洗浄した。収集した白色の固形物をメタノール（６２０ｍＬ）および水（１２４ｍＬ）に再懸濁して懸濁液を形成した。先の懸濁液に追加の酢酸（１１ｇ）を添加してｐＨを５～６まで調整した。固形物形態の変化が観察された。この懸濁液をさらに２時間撹拌し続け、濾紙で濾過し、最小量のメタノール（１００ｍＬ×３）で洗浄した。収集した白色の固形物をオーブン（５０℃）で１２時間乾燥させて、表題化合物１を白色の固形物（２３．６ｇ、７６．０％）として得た。

例２：Ｎ－ヒドロキシ－２－（（（２－（６－メトキシピリジン－３－イル）－４－モルホリノチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イル）メチル）（メチル）アミノ）ピリミジン－５－カルボキサミドメタンスルホナート（化合物１のメタンスルホン酸塩）の調製
方法Ａ：化合物１（３００ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）およびＭｅＯＨ／Ｅｔ_２Ｏ（３／１、４０ｍＬ）の混合物に、０℃のＭｅＯＨ（３ｍＬ）中のメタンスルホン酸（１１４ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。得られた混合物を０℃で３時間撹拌した。沈殿物を濾過により収集し、Ｅｔ_２Ｏで洗浄して、化合物２を白色の固形物（２６０ｍｇ、７３％）として得た。

方法Ｂ：ジクロロメタン／ＭｅＯＨ（４０ｍＬ／１０ｍＬ）中の化合物１（１．５ｇ、２．９５ｍｍｏｌ）の懸濁液に、室温（１５℃）で２ｍＬのＭｅＯＨ中のメタンスルホン酸（３４１ｍｇ、３．５５ｍｍｏｌ）を添加して、透明な溶液を形成した。この反応混合物を室温で一晩撹拌した。この反応混合物はまだ透明であった。酢酸エチル（４０ｍＬ）をこの混合物に添加し、室温で３時間撹拌し続けた。得られた沈殿物を濾過により収集して、化合物２を白色の固体（１．４５ｇ、８３％）として得た。

例３：Ｎ－ヒドロキシ－２－（（（２－（６－メトキシピリジン－３－イル）－４－モルホリノチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イル）メチル）（メチル）アミノ）ピリミジン－５－カルボキサミドナトリウム塩（化合物１のナトリウム塩）の調製
０℃のメタノール（３０ｍＬ）中の化合物１（３００ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ｔ－ＢｕＯＮａ（８５ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）を緩徐に添加した。得られた混合物を室温まで加温し、２時間撹拌し続けた。この反応物を濃縮し、残分を粉砕し、エタノールで洗浄し、続いて濾過して、化合物３を白色の固形物（２３０ｍｇ、７３％）として得た。

例４：Ｎ－ヒドロキシ－２－（（（２－（６－メトキシピリジン－３－イル）－４－モルホリノチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イル）メチル）（メチル）アミノ）ピリミジン－５－カルボキサミドカリウム塩（化合物１のカリウム塩）の調製
メタノール（５０ｍＬ）中の化合物１（４００ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）の混合物に、ｔ－ＢｕＯｋ（１３２ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）を０℃、Ｎ_２下で添加した。この混合物を０℃で１時間撹拌し、室温で１．５時間撹拌し続けた。不溶性固形物を濾過により除去し、濾液を－２０℃まで冷却した。この濾液にＥｔ_２Ｏ（１００ｍＬ）を添加した。得られた混合物を－２０℃で１時間撹拌した。ヘキサン（７０ｍＬ）を添加し、この混合物を－２０℃で２時間撹拌し続けた。この固形物を濾過により収集し、真空で乾燥させて、化合物４を白色の固形物（１５０ｍｇ、３５％）として得た。

例５：Ｎ－ヒドロキシ－２－（（（２－（６－メトキシピリジン－３－イル）－４－モルホリノチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イル）メチル）（メチル）アミノ）ピリミジン－５－カルボキサミドコリン塩（化合物１のコリン塩）の調製
ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（６０ｍＬ／１２ｍＬ）中の化合物１（２００ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）の溶液に、水酸化コリン（１０６ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ、ＭｅＯＨ中４５％）を添加した。この混合物を室温で２時間撹拌し、次に濃縮して約３０ｍＬの溶媒を除去した。酢酸エチル（６０ｍＬ）を添加し、この混合物を室温で２時間撹拌した。少量の沈殿が生じた後、この混合物を濃縮して約４０ｍＬの溶媒を除去し、追加の酢酸エチル（６０ｍＬ）を添加した。この混合物を室温で２時間撹拌し、濾過して、化合物５を白色の固形物（１８０ｍｇ、７６％）として得た。

例６：Ｎ－ヒドロキシ－２－（（（２－（６－メトキシピリジン－３－イル）－４－モルホリノチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イル）メチル）（メチル）アミノ）ピリミジン－５－カルボキサミドスルファート（化合物１の硫酸塩）の調製
ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（３０ｍＬ／７．５ｍＬ）中の化合物１（２００ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）の懸濁液に、硫酸（１ｍＬ ＭｅＯＨ中の７７ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）を添加して、透明な溶液を形成した。この反応混合物を室温で一晩撹拌した。沈殿が生じ、次にｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル（６０ｍＬ）を添加した。得られた混合物を室温で１時間撹拌し続けた。この固形物を濾過により収集して、化合物６を白色の固形物（１８０ｍｇ、７６％）として得た。

例７：Ｎ－ヒドロキシ－２－（メチル（（２－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）－４－モルホリノチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イル）メチル）アミノ）ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物２）
ステップ７ａ：（２－クロロ－４－モルホリン－４－イル－チエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イルメチル）－メチル－アミン（化合物０５０３）
メタノール（１２５ｍＬ）中の０１１２（２０．０ｇ、７０．４ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素雰囲気下でメタノール中のメチルアミン溶液（２７％ｖ／ｖ、７５ｍＬ、５６３．２ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温で一晩撹拌し、溶媒を真空で除去して粗固形物生成物を得、これを窒素下でメタノール（５５０ｍＬ）およびＴＨＦ（２２０ｍＬ）に溶解した。水素化ホウ素ナトリウム（８ｇ、２１１．２ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。この反応混合物を真空中で蒸発させ、水（３００ｍＬ）を添加した。水性混合物を塩化メチレンで抽出し、合わせた抽出物をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、濃縮した。残分を６Ｍ ＨＣｌ（２３０ｍＬ）中に溶解し、３０分間撹拌した。水溶液を塩化メチレンで数回洗浄し、ＮａＯＨ（４Ｎ）でｐＨ９～１０まで調整した。沈殿した固形物を濾過により収集し、乾燥させて（６０℃、６時間）、淡黄色の固形物（１８ｇ、８５％）を得た。

ステップ７ｂ：２－［（２－クロロ－４－モルホリン－４－イル－チエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イルメチル）－メチル－アミノ］－ピリミジン－５－カルボン酸エチルエステル（化合物０５０４）
０５０３（１０ｇ、３３．６ｍｍｏｌ）、ＣＨ_３ＣＮ（４００ｍＬ）および０３０５（６．８ｇ、３６．４ｍｍｏｌ）の混合物を室温で撹拌した。次に、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）（２２０ｍＬ、１．２６ｍｏｌ）を添加し、この溶液を一晩撹拌し、蒸発させた。塩化メチレン（３００ｍＬ）を添加した後、有機相を水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、真空で濃縮して、残分を残した。この残分に酢酸エチルを添加し、この混合物を氷／水浴中で５０分間撹拌した。表題生成物０５０４を白色の固形物（１０．６ｇ、７０％）として収集した。

ステップ７ｃ：エチル２－（（２－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）－４－モルホリノチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イル）メチル）アミノ）ピリミジン－５－カルボキシラート（化合物０６０３－１１１）
Ｎ－メチル－５－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン－２－アミン（０６０２－２２７）（３５１ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、０５０４（３１４ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）、ＮａＨＣＯ_３（１７６ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＰＰｈ_３）_２Ｃｌ_２（２４．６ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ）を、トルエン／ＥｔＯＨ／Ｈ_２Ｏ（２．５ｍＬ／１．６ｍＬ／０．７ｍＬ）に溶解した。次に、この反応物を１２０℃、マイクロ波中で２時間撹拌した。水（８ｍＬ）をこの混合物に添加し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。有機層を乾燥させ、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン中のメタノール、５％ｖ／ｖ）により精製して、表題化合物０６０３－１１１（１５０ｍｇ、４１％）を白色の固形物として得た。

ステップ７ｄ：Ｎ－ヒドロキシ－２－（メチル（（２－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）－４－モルホリノチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イル）メチル）アミノ）ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物２）
化合物２を、０６０３－２３６（１５０ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）および新たに調製したヒドロキシルアミンメタノール溶液（６ｍＬ）から、例１において説明したのと同様の手順を用いて、褐色の固形物（２１ｍｇ、１４％）して調製した：

例８：２－（（（２－（４－アミノフェニル）－４－モルホリノチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イル）メチル）（メチル）アミノ）－Ｎ－ヒドロキシピリミジン－５－カルボキサミド（化合物３）
ステップ８ａ：Ｎ－（４－ブロモフェニル）アセトアミド（化合物０６０１－１５０）
ＣＨ_２Ｃｌ_２（５０ｍＬ）中の４－ブロモアニリン（６．３ｇ、６３．７ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で塩化アセチル（３．７５ｇ、４７．７ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（７．４ｇ、７３．４ｍｍｏｌ）を添加し、２時間撹拌した。この反応混合物を水、鹹水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、表題化合物０６０１－１５０（３．６ｇ、４６％）を褐色の固形物として得た。

ステップ８ｂ：Ｎ－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェニル）アセトアミド（化合物０６０２－１５０）
表題化合物０６０２－１５０を白色の固形物として、０６０１－１５０（２．０ｇ、９．３ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラート）ジボロン（４．４ｇ、１７．５ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（３．５ｇ、１４ｍｍｏｌ）、およびＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ）_２（７６ｍｇ、０．０８８ｍｍｏｌ）から、化合物０６０２－１０７（例３４）について説明したのと同様の手順を用いて調製した（２．３ｇ、９４％）。

ステップ８ｃ：エチル２－（（（２－（４－アミノフェニル）－４－モルホリノチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イル）メチル）（メチル）アミノ）ピリミジン－５－カルボキシラート（化合物０６０３－１５０）
トルエン（４ｍＬ）、エタノール（２ｍＬ）、および水（１ｍＬ）中の化合物０５０４－５４（２１０ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）、０６０２－１５０（１５９ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、重曹（１１８ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）、および塩化ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（１７ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）の混合物を窒素でフラッシュし、マイクロ波照射下で１２０℃で２時間加熱した。この反応混合物を酢酸エチルと水との間に分画し、有機層を鹹水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、真空中で蒸発させた。残分をジクロロメタンで洗浄して、エチル２－（（（２－（４－アセトアミドフェニル）－４－モルホリノチエノ－［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イル）メチル）（メチル）アミノ）ピリミジン－５－カルボキシラート（１３６ｍｇ、５３％）を白色の固形物として得た。

ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の先のエチルエステル（２８０ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の溶液に、４０℃のＨＣｌ水溶液（６Ｍ、１５ｍＬ）に添加し、２時間撹拌し、この反応混合物をＮａＨＣＯ_３で中和させ、ＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出し、有機層を水、鹹水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン中のメタノール、２％ｖ／ｖ）によって精製して、表題化合物０６０３－１５０（１８０ｍｇ、４８％）を白色の固形物として得た。

ステップ８ｄ：２－（（（２－（４－アミノフェニル）－４－モルホリノチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－６－イル）メチル）（メチル）アミノ）－Ｎ－ヒドロキシピリミジン－５－カルボキサミド（化合物３）
化合物３を、０６０３－１５０（１７０ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）および新たに調製したヒドロキシルアミンメタノール溶液（４ｍＬ）から、例１において説明したのと同様の手順を用いて、黄色の固形物として調製した（４３ｍｇ、２６％）。

例９：ＰＩ３キナーゼ活性アッセイ
以下のアッセイを使用して、ＰＩ３Ｋのさまざまなアイソフォームおよび突然変異体を阻害する化合物１の能力を決定した。

ＰＩ３Ｋα
ＰＩ３Ｋα活性を、ＡＤＰ－Ｇｌｏ発光キナーゼアッセイを使用して測定した。Ｎ末端ＧＳＴタグ付き組換え完全長ヒトｐ１１０αとタグなし組換え完全長ヒトｐ８５αの複合体であるＰ１３Ｋαとを、バキュロウイルスに感染したＳｆ９細胞発現系において共発現させた。（ｐ１１０α、Ｕ７９１４３についてはＧｅｎＢａｎｋ受入番号、ｐ８５αについてはＸＭ＿０４３８６５）。タンパク質を、グルタチオン－アガロースを使用したワンステップアフィニティークロマトグラフィーによって精製した。競合アッセイを行って、精製した組換えＰＩ３Ｋα（ｐ１１０α／ｐ８５α）およびＰＩＰ２の存在下で、ＡＴＰから生成したＡＤＰの量を測定した。ＰＩ３Ｋαを反応緩衝液（５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＭｇＣｌ２、３μＭオルトバナジン酸Ｎａ、１ｍＭ ＤＴＴ、１０μＭ超純ＡＴＰおよび０．５％ＤＭＳＯ）中で２０μＭのＰＩＰ２基質とともに３０℃で３０分インキュベートした。次に、この反応で生成されたＡＤＰをＡＤＰ－Ｇｌｏアッセイによって測定した。このアッセイは２つのステップで行った。まず、等量のＡＤＰ－ＧＬＯ（商標）Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を添加して、キナーゼ反応を終止させ、残存するＡＴＰを枯渇させた。第２のステップでは、キナーゼ検出試薬を添加したが、これは、ＡＤＰをＡＴＰへ同時に転換する。新たに合成されたＡＴＰを、カップリングされたルシフェラーゼ／ルシフェリン反応を使用して測定した。このアッセイにおける化合物１について決定されたＩＣ_５０は、１００ｎＭ未満であった。

化合物１がＰＩ３Ｋα突然変異体Ｈ１０４７ＲおよびＥ５４５Ｋを阻害する能力もまた、先に説明した一般的な手順を使用して決定した。両方の突然変異体について決定されたＩＣ_５０は、１００ｎｍ未満であった。

ＰＩ３Ｋβ
ＰＩ３Ｋβの活性を、均一時間分解蛍光（ＨＴＲＦ）技術を利用した時間分解蛍光共鳴エネルギー移動（ＴＲ－ＦＲＥＴ）アッセイを使用して測定した。Ｎ末端ヒスチジンタグ付き組換え完全長ヒトｐ１１０βとタグなし組換え完全長ヒトｐ８５αとの複合体であるＰ１３Ｋβを、バキュロウイルスに感染したＳｆ２１細胞発現系において共発現させた。（ｐ１１０β、ＮＭ＿００６２１９についてはＧｅｎＢａｎｋ受入番号、ｐ８５αについてはＸＭ＿０４３８６５）。タンパク質を、グルタチオン－アガロースを使用したワンステップアフィニティークロマトグラフィーによって精製する。競合アッセイを行って、精製した組換えＰＩ３Ｋベータ（ｐ１１０β／ｐ８５α）の存在下で、ＰＩＰ２から生成したＰＩＰ３の量を測定した。ＰＩ３Ｋβを反応緩衝液（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、１０ｍＭ ＮａＣｌ、４ｍＭ ＭｇＣｌ_２、２ｍＭ ＤＴＴ、１０μＭ ＡＴＰおよび１％ＤＭＳＯ）中で１０μＭのＰＩＰ２基質とともに３０℃で３０分インキュベートした。次に、この反応生成物を、ＰＩＰ３検出タンパク質、ユーロピウム標識抗体、ビオチン標識ＰＩＰ３プローブ、およびアロフィコシアニン標識ストレプトアビジンと混合した。センサー複合体を形成して、反応混合物中に安定したＴＲ－ＦＲＥＴシグナルを生成する。このシグナル強度は、ＰＩＰ３検出因子に結合するビオチン標識プローブが酵素活性によって生成されたＰＩＰ３によって置き換えられ、混合物中の非結合ビオチン標識ＰＩＰ３プローブの量が増加するにつれて低下する。ＴＲ－ＦＲＥＴシグナルを、背景の減算を備えたマイクロプレートリーダーを使用して決定した。

このアッセイにおいて化合物１について決定されたＩＣ_５０は、１００～１０００ｎＭであった。

ＰＩ３Ｋδ
ＰＩ３Ｋδの活性を、蛍光偏光アッセイを使用して測定した。Ｎ末端ヒスチジンタグ付き組換え完全長ヒトｐ１１０δとタグなし組換え完全長ヒトｐ８５αとの複合体であるＰ１３Ｋδを、バキュロウイルスに感染したＳｆ９細胞発現系において共発現させた。（ｐ１１０δ、ＮＭ＿００５０２６についてはＧｅｎＢａｎｋ受入番号）。タンパク質を、グルタチオン－アガロースを使用したワンステップアフィニティークロマトグラフィーによって精製する。競合アッセイを行って、精製した組換えＰＩ３Ｋδ（ｐ１１０δ／ｐ８５α）の存在下で、ＰＩＰ２から生成したＰＩＰ３の量を測定した。ＰＩ３Ｋδを反応緩衝液（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、１０ｍＭ ＮａＣｌ、４ｍＭ ＭｇＣｌ_２、２ｍＭ ＤＴＴ、１０μＭ ＡＴＰおよび１％ＤＭＳＯ）中で１０μＭのＰＩＰ２基質とともに３０℃で１時間インキュベートした。次に、反応生成物を、ＰＩＰ３検出タンパク質および蛍光ＰＩＰ３プローブと混合した。偏光（ｍＰ）値は、ＰＩＰ３検出因子に結合している蛍光プローブが、酵素活性によって生じるＰＩＰ３によって置き換えられ、混合物中の非結合蛍光プローブの量が増加するにつれ、低下する。偏光（ｍＰ）値は、背景の減算を備えたマイクロプレートリーダーを使用して決定した。

このアッセイにおける化合物１について決定されたＩＣ_５０は、１００ｎＭ未満であった。

ＰＩ３Ｋγ
ＰＩ３Ｋγの活性を、均一時間分解蛍光（ＨＴＲＦ）技術を利用した時間分解蛍光共鳴エネルギー移動（ＴＲ－ＦＲＥＴ）アッセイを使用して測定した。Ｎ末端ヒスチジンタグ付きヒトＰ１３Ｋδは、バキュロウイルスに感染したＳｆ９細胞発現系において発現した。（ＧｅｎＢａｎｋ受入番号ＡＦ３２７６５６）タンパク質を、グルタチオン－アガロースを使用したワンステップアフィニティークロマトグラフィーによって精製する。競合アッセイを行って、精製した組換えＰＩ３Ｋγ（ｐ１２０γ）の存在下で、ＰＩＰ２から生成したＰＩＰ３の量を測定した。ＰＩ３Ｋγ（２ｎＭ）を反応緩衝液（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、１０ｍＭ ＮａＣｌ、４ｍＭ ＭｇＣｌ_２、２ｍＭ ＤＴＴ、１０μＭ ＡＴＰおよび１％ＤＭＳＯ）中で１０μＭのＰＩＰ２基質とともに３０℃で３０分インキュベートした。次に、この反応生成物を、ＰＩＰ３検出タンパク質、ユーロピウム標識抗体、ビオチン標識ＰＩＰ３プローブ、およびアロフィコシアニン標識ストレプトアビジンと混合した。センサー複合体を形成して、反応混合物中に安定したＴＲ－ＦＲＥＴシグナルを生成する。このシグナル強度は、ＰＩＰ３検出因子に結合するビオチン標識プローブが酵素活性によって生成されたＰＩＰ３によって置き換えられ、混合物中の非結合ビオチン標識ＰＩＰ３プローブの量が増加するにつれて低下する。ＴＲ－ＦＲＥＴシグナルを、背景の減算を備えたマイクロプレートリーダーを使用して決定した。

このアッセイにおいて化合物１について決定されたＩＣ_５０は、１００～１０００ｎＭであった。

例１０：ＨＤＡＣ活性アッセイ
ＨＤＡＣ阻害活性を、Ｂｉｏｍｏｌ Ｃｏｌｏｒ ｄｅ Ｌｙｓシステム（ＡＫ－５００、Ｂｉｏｍｏｌ、Ｐｌｙｍｏｕｔｈ Ｍｅｅｔｉｎｇ、ＰＡ）を用いて評価した。簡単に説明すると、ＨｅＬａ細胞核抽出物をＨＤＡＣの供給源として使用した。異なる濃度の試験化合物をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の中で段階希釈し、比色人工基質の存在下でＨｅＬａ細胞核抽出物に添加した。最終的なアッセイ条件には、５０ｍＭトリス／Ｃｌ、ｐＨ８．０、１３７ｍＭ ＮａＣｌ、２．７ｍＭ ＫＣｌ、および１ｍＭ ＭｇＣｌ_２が含まれていた。反応を室温（２５℃）で１時間行った後、発色液を添加して停止させた。相対的な酵素活性は、ＷＡＬＬＡＣ Ｖｉｃｔｏｒ ＩＩ １４２０マイクロプレートリーダーにおいて蛍光強度として測定した（励起：３５０～３８０ｎｍ、発光：４４０～４６０ｎｍ）。データは、ＩＣ_５０計算のためのシグモイド用量応答曲線あてはめを備えたＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ（第４．０ａ版）を用いて解析した。このアッセイにおける化合物１について決定されたＩＣ_５０は、１００ｎＭ未満であった。

ＨＤＡＣアイソタイプに対する化合物１の活性も測定した。ＨＤＡＣ特異性アッセイは、ＢＰＳ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ（Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）で、標準的な操作手順に従って実施した。簡単に説明すると、精製されたフラグ－（ヒトＨＤＡＣ－１）、ＮＣＯＲ２－（ヒトＨＤＡＣ３）、ＧＳＴ－（ヒトＨＤＡＣ４、６、７、１０および１１）またはＨｉｓ－（ヒトＨＤＡＣ２、５、８および９）タグ付き酵素を、Ｓｆ９昆虫細胞において発現させ、精製した後に使用した。ＨＤＡＣ１、２、３、６、７、８、９および１１について使用した基質は、ＢＰＳ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅによって開発されたＨＤＡＣ基質３とした。他のＨＤＡＣ酵素については、ＨＤＡＣクラス２ａ基質を使用した。室温で３時間実施されたＨＤＡＣ１１酵素アッセイを除き、すべての酵素反応は３７℃で３０分間を２回実施した。

以下の表は、ＨＤＡＣ１～１１の各々についての結果を明らかにしており、ＩＣ５０値は次のように提供されていた：Ｉ＞１０００ｎＭ、１００ｎＭ＜ＩＩ＜１０００ｎＭ、１０ｎＭ＜ＩＩＩ＜１００ｎＭ、ＩＶ＜１０ｎＭ。

例１１：マウス異種移植モデル－ＣＴＷ２６．ＷＴマウス結腸癌細胞における化合物１および抗ＰＤ－１の研究
動物：雌のＢａｌｂ／ｃマウス、８週齢、高脂肪食を給餌

化合物：
化合物１：５０ｍｇ／ｋｇで経口投与、５日間投薬、２日間休薬のスケジュール（５＋２－）
アイソタイプ対照：ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ（商標）、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡから入手したＬＥＡＦ（商標）で精製したラットＩｇＧ２ａ、１００ｕｇ／マウス１匹で腹腔内投与、週２回。
ＰＤ－１抗体：ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ（商標）、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡから入手したＬＥＡＦ（商標）ラット抗マウスＣＤ２７９（ＰＤ－１）、クローン２９Ｆ．１Ａ１２；１００ｕｇ／マウス１匹で腹腔内投与、週２回。

細胞の投与：
ＣＴ２６．ＷＴ細胞をフラスコから収集し、添加物非含有のＲＰＭＩ１６４０の中で１回洗浄した。終濃度は、単純培地（ＲＰＭＩー１６４０）の中で到達し、マウスに投与するまで氷上で維持した。腫瘍がいったん７日後または８日後に触知可能になると、マウスを群分けし、体重によって無作為にした。抗体で処置を開始し、化合物１を直ちに開始した。

研究スケジュール：
投与が開始されるまで動物をモニターし、その後、腫瘍体積がプロトコル限界に達するか、潰瘍形成があまりにも重症になるまで、投与中に動物を週２回測定した。腫瘍組織および血液／血漿は、研究の終了時に収集した。

結果
この研究の結果は、以下の表および図１に提示されている。第１～３群には、評価可能な７匹のマウスがいた。第４～６群では、８匹のマウス全部が評価可能であった。５０ｍｇ／ｋｇでの化合物１単独では、腫瘍成長のわずかな阻害しか示さなかった。抗ＰＤ－１は、より大きな腫瘍成長阻害を示したが、それでも５０％未満であった。しかしながら、化合物１と抗ＰＤ－１との組み合わせは、腫瘍成長のほぼ完全な阻害を示した。

例１２：Ａ２０マウス異種移植モデルにおける化合物１および抗ＰＤ－１の研究
動物：通常の食餌を与えられた４～５週齢の雌のＢａｌｂ／ｃマウス

化合物：
化合物１：５０ｍｇ／ｋｇまたは１００ｍｇ／ｋｇで経口投与、５日間投薬、２日間休薬のスケジュール（５＋２－）。
アイソタイプ対照：ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ（商標）、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡから入手したＬＥＡＦ（商標）で精製したラットＩｇＧ２ａ、１００ｕｇ／マウス１匹で腹腔内投与、週２回、３週間。
抗ＰＤ－１抗体：ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ（商標）、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡから入手したＬＥＡＦ（商標）ラット抗マウスＣＤ２７９（ＰＤ－１）、クローン２９Ｆ．１Ａ１２；１００ｕｇ／マウス１匹で投与、週２回、３週間。
ビヒクル：化合物１ビヒクル－３０％Ｃａｐｔｉｓｏｌ（商標）、５＋２－投与、経口３週間。

細胞の投与：
Ａ２０同系細胞をフラスコから収集し、添加物非含有のＲＰＭＩ１６４０の中で１回洗浄した。終濃度は、単純培地（ＲＰＭＩー１６４０）の中で到達し、マウスに投与するまで氷上で維持した。動物の右脇腹に２×１０^５個の細胞を植えつけた。腫瘍が１００ｃｍ^３を超えたとき（１３日後頃）に投与を開始し、２１日間または腫瘍が２０００ｍｍ^３の限界に達するまで投与を継続した。

研究スケジュール：
動物は、腫瘍が完全に触知可能で測定される１３日後頃に投薬を開始した。腫瘍が屠殺を必要とする潰瘍形成を示し始めるまで、投薬は継続した。ＥＬＩＳＡおよびフロー分析を実行するために、広範囲の壊死の前に腫瘍を収集した。

結果
この研究の結果は、以下の表および図２に提示されている。１００ｍｇ／ｋｇの化合物１単独および抗ＰＤ－１単独の両方が有意な腫瘍成長阻害を示した。化合物１と抗ＰＤ－１との組み合わせは、いずれかの薬剤単独よりも大きな腫瘍成長阻害を示した。

本明細書で参照される特許および科学文献は、当業者が利用可能である知識を確立している。本明細書に引用されているすべての米国特許および公開済みまたは未公開の米国特許出願は、参照により組み込まれる。本明細書で引用されたすべての公開された外国特許および特許出願は、参照により本明細書に組み込まれる。本明細書で引用された他のすべての公表された参考文献、文書、原稿、および科学文献は、参照により本明細書に組み込まれる。

本発明は、その好ましい実施形態を参照して特に示され、説明されてきたが、当業者には、添付の特許請求の範囲によって包含される本発明の範囲から逸脱することなく、形態および詳細におけるさまざまな変更をそこで行うことができることが理解されるであろう。

Claims (6)

1. 式：
   
   によって表される化合物、またはその医薬として許容され得る塩を含む、結腸癌を処置するための医薬組成物であって、
   抗ＰＤ－１モノクロナール抗体と組み合わせて使用される、医薬組成物。
2. 前記抗ＰＤ－１モノクロナール抗体が、ペンブロリズマブ、ニボルマブ、またはピジリズマブである、請求項１に記載の医薬組成物。
3. 前記抗ＰＤ－１モノクロナール抗体が、ペンブロリズマブまたはニボルマブである、請求項２に記載の医薬組成物。
4. 前記医薬として許容され得る塩を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
5. 前記医薬として許容され得る塩は、ベンゼンスルホン酸塩またはメタンスルホン酸塩である、請求項４に記載の医薬組成物。
6. 錠剤またはカプセル剤の形態の、請求項１～５のいずれか一項に記載の医薬組成物。