JP7376510B2 - シート状物貼付デバイス - Google Patents

Description

本発明は、シート状物を目的部位に貼付するためのデバイスおよび当該デバイスを用いたシート状物を貼付するための方法に関する。

近年、損傷した組織等の修復のために、種々の細胞を移植する試みが行われている。例えば、狭心症、心筋梗塞などの虚血性心疾患により損傷した心筋組織の修復のために、胎児心筋細胞、骨格筋芽細胞、間葉系幹細胞、心臓幹細胞、ＥＳ細胞、ｉＰＳ細胞等の利用が試みられている（非特許文献１）。

このような試みの一環として、スキャフォールドを利用して形成した細胞構造物や、細胞をシート状に形成したシート状細胞培養物が開発されてきた（非特許文献２）。
シート状細胞培養物の治療への応用については、火傷などによる皮膚損傷に対する培養表皮シートの利用、角膜損傷に対する角膜上皮シート状細胞培養物の利用、食道がん内視鏡的切除に対する口腔粘膜シート状細胞培養物の利用などの検討が進められており、その一部は臨床応用の段階に入っている。

シート状細胞培養物を目的部位に投与する手術方法に関して、人体に対する低侵襲な手術方法として内視鏡下手術が広く用いられており、シート状細胞培養物を目的部位に送達して投与するための様々な器具が提案されている。
例えば、特許文献１に記載された運搬投与器具は、シート支持部材を筒状にして外筒内に格納することにより、人体に対する侵襲の度合いを低くして、移植部位までシート状の治療用物質を運搬することができる。

特許文献２に記載されたシート貼付装置は、シート支持部の表面に沿って配置された棒状部材を、シート支持部の表面に沿って移動させることにより剥離させて、シート状の物質を目的部位に貼付することができる。
特許文献３に記載された運搬投与具は、シート支持体に、シート状治療用物質を吸着保持させる陰圧と、シート支持体からシート状治療用物質を離脱させる陽圧を付与可能なシート脱着手段で、シートを投与することができる。
特許文献４に記載された搬送器具は、シート状治療用物質を保持したヘッドの表面に設けられた複数の通気孔から流体を噴出させることで、シート状治療用物質を貼付することができる。

特開２００９－５１１号公報 特開２０１６－１８７６０１号公報 特開２００８－１７３３３３号公報 国際公開第２０１４／０６９２９２号

Haraguchi et al., Stem Cells Transl Med. 2012 Feb;1(2):136-41 Sawa et al., Surg Today. 2012 Jan;42(2):181-4

このような中、本発明者らは、シート状物を効率よく目的部位に貼付するための手段を開発するにあたり、損傷や皺を発生させることなく、シート状物を効率よく迅速にデバイスから剥離させることは困難であるなど問題に直面した。したがって、本発明の目的は、そのような問題を解決し、単純な構成でかつ合理的なデバイスを実現することを目的とする。

本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を進める中で、シート状物を段階的に剥離することにより、シート状物の形状を保持しながら、効率よく目的部位に貼付できることを初めて見出し、かかる知見に基づいてさらに研究を続けた結果、本発明を完成させるに至った。

すなわち本発明は、以下に関する。
［１］シート状物貼付デバイスであって、シート状物を支持するための支持体と、支持体に係止された線条体とを含み、支持体に支持されたシート状物を体腔内の目的部位近傍に放出し、線条体を引っ張ることで支持体を回収することができる、前記デバイス。
［２］支持体が、少なくとも１つの孔を有する、［１］に記載のデバイス。
［３］支持体の一面を保護するための摩擦係数の低い保護部材をさらに含む、［１］または［２］に記載のデバイス。
［４］保護部材に係止された線条体をさらに含む、［３］に記載のデバイス。
［５］シート状物を目的部位に貼付するための方法であって、シート状物を支持するための支持体と支持体に係止された線条体とを含むシート状物貼付デバイスを目的部位に送達するステップ、シート状物を支持体から剥離して目的部位に貼付するステップ、を含む前記方法。
［６］支持体が複数の孔を有し、シート状物の支持体からの剥離が、放出位置を移動させながら複数の孔から流体を放出することにより行われる、［５］に記載の方法。
［７］シート状物の支持体からの剥離が、支持体に係止された線条体を段階的に引っ張ることで段階的に行われる、［５］または［６］に記載の方法。
［８］シート状物貼付デバイスであって、シート状物を支持するための支持体と、支持体の一面を保護するための摩擦係数の低い保護部材とを含み、シート状物を支持した支持体を保護部材で保護して丸め、筒状体内に挿通することができる、前記デバイス。
［９］支持体が、シート状物を支持する面上に凹凸構造を有する、［８］に記載のデバイス。
［１０］支持体が、少なくとも１つの孔を有する、［８］または［９］に記載のデバイス。
［１１］シート状物、支持体および保護部材が円形形状を有する、［８］～［１０］のいずれか１つに記載のデバイス。

［１２］シート状物を目的部位に貼付するための方法であって、シート状物を支持した支持体を保護部材で保護して丸めて鉗子で把持し、筒状体に挿通させるステップ、筒状体を介してシート状物貼付デバイスを目的部位に送達するステップ、支持体を展開してシート状物を支持体から剥離して目的部位に貼付するステップ、を含む前記方法。
［１３］鉗子による把持が、シート状物が存在しない２点を重ねた部分に対して行われる、［１２］に記載の方法。
［１４］支持体の展開が、鉗子による把持を解放することにより行われる、［１２］または［１３］に記載の方法。
［１５］支持体の展開が、支持体の裏表を反転することを含む、［１２］～［１４］のいずれか１つに記載の方法。
［１６］シート状物の支持体からの剥離が、支持体の端部を鉗子で段階的に引っ張ることで段階的に行われる、［１２］～［１５］のいずれか１つに記載の方法。
［１７］支持体が複数の孔を有し、シート状物の支持体からの剥離が、放出位置を移動させながら複数の孔から流体を放出することにより行われる、［１２］～［１６］のいずれか１つに記載の方法。
［１８］シート状物を筒状体を介して体腔内に経腹腔的に挿入して目的部位に貼付するための［１２］～［１７］のいずれか１つに記載の方法。
［１９］目的部位が臓器であり、シート状物が臓器の創傷治癒を促進させるためのシート状細胞培養物であり、目的部位への貼付が、シート状細胞培養物の細胞マトリックス側が臓器側になるように行われる、［１２］～［１８］のいずれか１つに記載の方法。

本発明のデバイスによれば、簡便な機構と、簡単な作業で効率よくシート状物を目的部位に貼付することができるため、作業性や製造コストの点において大きなメリットがある。
そして、シート状物を段階的に剥離できるため、シート状物の一部を剥離して目的部位へ位置決めして貼付した後に、その他の部分を段階的に剥離することで、皺などの発生を防止することができる。特に、シート状物を流体で剥離することにより、欠損などの発生を防止することができ、シート状物の形状を保持しながら、効率よく貼付することができる。

図１は、第１実施態様に係るデバイス１の概念図である。 図２は、図１のデバイス１の使用例の概念図である。 図３は、支持体２の一態様を示す概念図である。 図４は、第２実施態様に係るデバイス１’の概念図である。 図５は、本発明のデバイスを使用した実施例１を示す。 図６は、本発明のデバイスを使用した実施例２を示す。 図７は、移植後３日目に術後穿孔／腹膜炎が起こっていないことを示す。 図８は、シート状細胞培養物の貼付部位の肉眼的・組織学的評価を示す。

本発明における「シート状物」とは、物理的強度が低く、デバイスからの剥離などによって、破れ、破損、変形などが生じ得るシート状の物体をいう。かかるシート状物としては、とくに限定されないが、シート状構造物、例えば、シート状細胞培養物などの、生体由来材料からなる平膜状の膜組織や、プラスチック、紙、織布、不織布、金属、高分子、脂質といった種々の材質のフィルム等が含まれる。シート状構造物は、多角形や円形などであってもよく、幅、厚み、直径などは一様であってもなくてもよい。本発明におけるシート状構造物は、１枚のみを単層の状態で使用してもよいし、２枚以上を重ねた積層体の状態で使用してもよい。後者の場合、積層体の各層は互いに連結していても、連結していなくてもよく、連結している場合は、重なり合っている部分が全て連結していても、部分的に連結していてもよい。

本発明において「シート状細胞培養物」とは、細胞が互いに連結してシート状になったものをいう。細胞同士は、直接（接着分子などの細胞要素を介するものを含む）および／または介在物質を介して、互いに連結していてもよい。介在物質としては、細胞同士を少なくとも物理的（機械的）に連結し得る物質であれば特に限定されないが、例えば、細胞外マトリックスなどが挙げられる。介在物質は、好ましくは細胞由来のもの、特に、細胞培養物を構成する細胞に由来するものである。細胞は少なくとも物理的（機械的）に連結されるが、さらに機能的、例えば、化学的、電気的に連結されてもよい。シート状細胞培養物は、１の細胞層から構成されるもの（単層）であっても、２以上の細胞層から構成されるもの（積層（多層）体、例えば、２層、３層、４層、５層、６層など）であってもよい。また、シート状細胞培養物は、細胞が明確な層構造を示すことなく、細胞１個分の厚みを超える厚みを有する３次元構造を有してもよい。例えば、シート状細胞培養物の垂直断面において、細胞が水平方向に均一に整列することなく、不均一に（例えば、モザイク状に）配置された状態で存在していてもよい。

シート状細胞培養物は、好ましくはスキャフォールド（支持体）を含まない。スキャフォールドは、その表面上および／またはその内部に細胞を付着させ、シート状細胞培養物の物理的一体性を維持するために当該技術分野において用いられることがあり、例えば、ポリビニリデンジフルオリド（ＰＶＤＦ）製の膜等が知られているが、本発明のシート状細胞培養物は、かかるスキャフォールドがなくともその物理的一体性を維持することができる。また、本発明のシート状細胞培養物は、好ましくは、シート状細胞培養物を構成する細胞由来の物質のみからなり、それら以外の物質を含まない。

シート状細胞培養物を構成する細胞は、シート状細胞培養物を形成し得るものであれば特に限定されず、例えば、接着細胞（付着性細胞）を含む。接着細胞は、例えば、接着性の体細胞（例えば、心筋細胞、線維芽細胞、上皮細胞、内皮細胞、肝細胞、膵細胞、腎細胞、副腎細胞、歯根膜細胞、歯肉細胞、骨膜細胞、皮膚細胞、滑膜細胞、軟骨細胞など）および幹細胞（例えば、筋芽細胞、心臓幹細胞などの組織幹細胞、胚性幹細胞、ｉＰＳ（induced pluripotent stem）細胞などの多能性幹細胞、間葉系幹細胞等）などを含む。体細胞は、幹細胞、特にｉＰＳ細胞から分化させたもの（ｉＰＳ細胞由来接着細胞）であってもよい。シート状細胞培養物を構成する細胞の非限定例としては、例えば、筋芽細胞（例えば、骨格筋芽細胞など）、間葉系幹細胞（例えば、骨髄、脂肪組織、末梢血、皮膚、毛根、筋組織、子宮内膜、胎盤、臍帯血由来のものなど）、心筋細胞、線維芽細胞、心臓幹細胞、胚性幹細胞、ｉＰＳ細胞、滑膜細胞、軟骨細胞、上皮細胞（例えば、口腔粘膜上皮細胞、網膜色素上皮細胞、鼻粘膜上皮細胞など）、内皮細胞（例えば、血管内皮細胞など）、肝細胞（例えば、肝実質細胞など）、膵細胞（例えば、膵島細胞など）、腎細胞、副腎細胞、歯根膜細胞、歯肉細胞、骨膜細胞、皮膚細胞等が挙げられる。ｉＰＳ細胞由来接着細胞の非限定例としては、ｉＰＳ細胞由来の心筋細胞、線維芽細胞、上皮細胞、内皮細胞、肝細胞、膵細胞、腎細胞、副腎細胞、歯根膜細胞、歯肉細胞、骨膜細胞、皮膚細胞、滑膜細胞、軟骨細胞などが挙げられる。

本発明において、「線条体」とは、支持体に係止したときに、シート状物に過度の損傷を与えない線状の物体であれば特に限定されず、例えば、既知の任意の糸、細径の線材などを用いることができる。線条体は、天然素材（例えば、絹、綿、金属など）でできていても、合成素材（例えば、ナイロン、ポリエステル、ポリプロピレン、炭素繊維など）でできていてもよく、軟性であっても、硬性であってもよい。線条体を支持体に係止するとは、線条体を支持体に接続して引っ張ることができる状態を意味し、例えば、支持体に線条体を貫通させる、支持体に線条体を係合させるなどにより達成することができる。

本発明において、「支持体」とは、シート状物をその形状を維持した状態で支持することができる平面を有する板状体をいう。支持体は可撓性と適度な柔軟性を有し、シート状物を支持した状態で湾曲させて、筒状体の内側などに沿って格納することができ、筒状体から露出させるとその復元性で平面状に展開させることができる。支持体の材料としては、特に限定されず、各種公知の材料を単独でまたは複数組み合わせて用いることができる。このような材料としては、例えば、金属、軟質塩化ビニル樹脂、ポリウレタン樹脂、シリコーンゴム、天然ゴム、合成ゴム、スチレンーエチレンーブチレンースチレン共重合体（ＳＥＢＳ）、スチレンーエチレンープロピレンースチレン共重合体（ＳＥＰＳ）、エチレン酢酸ビニル共重合体（ＥＶＡ）、ナイロンなどのポリアミド樹脂及びポリアミドエラストマー、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）などのポリエステル樹脂及びポリエステルエラストマー、ポリエチレンなどのオレフィン系樹脂、フッ素ゴム、フッ素樹脂等が挙げられ、これらのうち１種または２種以上を組み合わせて用いることができる。

本発明において、「複数の孔」とは、支持体に設けられた２以上の貫通孔をいい、支持体のシート状物を支持している面と反対の面から流体を送り込み、孔を通して流体を吐出することで、シート状物を支持面から剥離させて貼付することができる。孔は、流体を吐出できればよく、支持体に少なくとも１つ設けられていればよい。

複数の孔は、シート状物の剥離位置を調節できるように、支持体のシート支持面に離散的に配置されることが好ましい。例えば、複数の孔の少なくとも１つを支持体の縁部付近に設けることで、シート状物の剥離をその縁部付近から行えるように構成することもできる。複数の孔の配置は、例えば、２×２～４０×４０、５×５～２０×２０など、行×列のマトリックス配置とすることができ、孔同士の間隔は、例えば、０．０５ｍｍ～１０ｍｍ、０．５ｍｍ～２ｍｍとすることができ、孔の径は、例えば、０．０５ｍｍ～１０ｍｍ、０．３～０．６ｍｍとすることができるが、これらに限定されず、当業者であればシート状物のサイズ、シート状物と支持体との接着度合いなどに合わせて自由に選択することができる。支持体の構造を網目構造とすることで、複数の孔のマトリックス配置を達成することもできる。

本発明において、「流体」とは、シート状物を傷つけることなく押し出して剥離することができる、気体と液体の総称をいう。液体は、少なくとも１種の成分から構成され、その成分としてはとくに限定されないが、例えば、水、水溶液、非水溶液、懸濁液、乳液などの液体から構成される。液体を構成する成分は、シート状物に与える影響が少ないものであればとくに限定されない。シート状物が生体由来材料からなる膜である場合、液体を構成する成分は、生体適合性のもの、すなわち、生体組織や細胞に対して炎症反応、免疫反応、中毒反応などの望まない作用を起こさないか、少なくともかかる作用が小さいものが好ましい。

本発明において、「目的部位」とは、シート状物を適用（貼付）する部分をいう。目的部位としては、例えば、管腔臓器における、損傷（創傷）が存在する部位や、損傷が存在する部位に対応する管腔壁の反対側などが挙げられる。「管腔臓器」は、体腔に収納されている内腔を有する臓器、すなわち管状または袋状の構造を有する臓器を意味し、例えば消化管系、循環器系、尿路系、呼吸器系、女性生殖器系の臓器などが挙げられる。典型的には消化管系の臓器である。また、「管腔壁」とは、管腔臓器の管または袋を構成する臓器壁を意味する。管腔壁には内腔に面した内側部と臓器の外表面を形成する外側部とがあり、「管腔壁の片側」という場合、管腔壁の内側または外側のいずれかを意味し、内側に対する外側または外側に対する内側を「反対側」という。また、片側のある領域に対して、管腔壁のちょうど反対側に位置する領域を「対応する反対側」という。
ある態様においては、管腔壁の少なくとも片側に損傷を有する管腔組織において、損傷が存在する部位に対応する反対側にシート状細胞培養物を移植することにより、組織の治癒を促進することができる。特に、内視鏡的粘膜下層剥離術（以下、ＥＳＤ）などの施術によって形成された損傷であっても効果があるため、これらの施術後の合併症を予防し、予後を向上させることが可能となる。

本発明において、「放出位置を選択」するとは、複数の孔の内のどの位置にある孔から流体を放出するかを選択することをいう。かかる選択は、例えば、複数の孔の開閉を制御し、選択された特定の位置の孔は開け、それ以外の孔は閉じた状態で流体を放出したり、流体を送達する場所と、複数の孔との位置関係を変えながら流体を放出したりすることで、行うことができる。
本発明において、「段階的に剥離」するとは、シート状物の剥離を部分段階的に行うことをいう。例えば、シート状物の一部（縁部など）を部分的に剥離させ、かかる一部を目的部位に貼付した後にデバイスを引くことで、シート状物に生じ得る皺などを伸展させながらシート状物を剥離することができる。また、剥離した一部に加えて、残りの部分も段階的に剥離することで、シート状物に生じ得る皺などの有無を確認しながら、シート状物を慎重かつ確実に剥離することもできる。
シート状物を支持している面をシート状物を適用する目的部位に対して空間的に離間させた状態で放出位置を選択し、段階的に支持体からシート状物を剥離することにより、シート状物を目的部位（シート状物適用部位）にシート状物の一部（縁部など）を部分的に接触させて配置することができる。そして、シート状物の残りの部分も段階的に剥離することで、デバイスを目的部位に接触させることなく、シート状物を慎重かつ確実に目的部位に配置することができるため、目的部位を不用意に傷つけるなどの問題を防止することができる。

本発明において、「筒状体」とは、内部に空間を有するパイプ状の長尺物をいう。筒状体は、その両端に開口部を有し、かかる開口部および内部空間を通して、流体、支持体、線条体などを筒状体の先端側に送達することができる。筒状体としては、流体が漏出しないものであればとくに限定されず、市販の筒状体を含む任意のものを用いることができる。筒状体の材料としては、例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、テフロン（登録商標）、ポリエチレンテレフタレート、ポリメチルメタクリレート、ナイロン６，６、ポリビニルアルコール、セルロース、シリコン、ポリスチレン、ガラス、ポリアクリルアミド、ポリジメチルアクリルアミド、金属（例えば、鉄、ステンレス、アルミニウム、銅、真鍮）等が挙げられるがこれに限定されない。
筒状体は、可撓性を有する材料により構成してもよく、その場合は、腹腔鏡下手術や胸腔鏡下手術などに際して体内に挿入するための通路が湾曲していても、その通路の形態に合わせて湾曲させたり、筒状体と目的部位との相対的な角度を調節するために屈曲させたりすることができる。筒状体の外径は、特に限定されないが、例えば、２．２～２５ｍｍ、好ましくは、５～１５ｍｍとすることができる。筒状体の内径は、特に限定されないが、例えば、２～２０ｍｍ、好ましくは、３～１５ｍｍとすることができる。

ある態様においては、本発明のシート状細胞培養物は、非常に脆弱であり、取り扱いが困難である場合がある。したがって本発明のシート状細胞培養物は、取り扱いを簡便にし、破損のリスクを低減する目的で、さらに補強層を有していてよい。補強層としては、本開示のシート状細胞培養物の機能を損なわず、構造を補強できるものであればいかなるものであってもよく、例えばゲルおよび／またはポリマーを含む補強層であってよいが、生体内に移植するものであるため、好ましくは、例えば生体適合性ゲルやポリマーなどを含む、生体適合性の補強層である。
本開示の補強層に用い得るゲル、好ましくは生体適合性ゲルとしては、生体内に導入した際に生体に悪影響を及ぼさないゲルであればいかなるものであってもよく、これに限定するものではないが、例えばフィブリンゲル、フィブリノーゲンゲル、ゼラチンゲル、コラーゲンゲルなどが挙げられる。

本開示の補強層に用い得るポリマー、好ましくは生体適合性ポリマーとしては、生体内に導入した際に生体に悪影響を及ぼさないポリマーであればいかなるものであってもよく、これに限定するものではないが、例えばポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリジオキサノ、ポリグリカプロ、コラーゲンなどが挙げられる。
生体適合性ゲルを含む補強層の形成方法は、当該技術分野において公知の方法を用いることができる。かかる方法としては、これに限定するものではないが、例えばシート状細胞培養物上に生体適合性ゲルやポリマーまたはその材料となる成分を噴霧する方法、シート状細胞培養物上にゾル状の生体適合性物質を積層してゲル化する方法、液状のゲルに浸漬したのちゲルを固形化させる方法などのほか、特開２０１６－５２２７１号公報等に記載の方法などが挙げられる。
一態様において、本発明のシート状細胞培養物は、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）を含む。
本発明において、シート状細胞培養物を構成する細胞により産生された細胞外マトリックスは、種々の条件によるが、例えば、細胞の培養基材への播種後、２４時間以上、例えば、２４時間、３０時間、３６時間、４２時間、４８時間、５４時間、６０時間、６６時間、７２時間、培養することにより、シート状細胞培養物の培養基材側に形成される。培養基材として温度応答性の基材を使用することで、細胞外マトリックスを含むシート状細胞培養物を簡単に剥離させることもできる。
細胞外マトリックスは、シート状細胞培養物が移植部位に接着することに寄与し、シート状細胞培養物を移植する際に、例えば縫合などの、移植部位にシート状細胞培養物を接着するステップを簡略化することができる。また細胞外マトリックスは細胞由来成分であるため、本発明に係るシート状細胞培養物と共に移植に供することにおいてなんら問題はない。
また、細胞外マトリックスが形成されたシート状細胞培養物を培養基材から剥離し、細胞外マトリックスの反対側にフィブリンゲルなどを噴霧して上記のような補強層を形成し、フィブリンゲル（補強層）、シート状細胞培養物、細胞外マトリックスの順に積層されたシート状細胞培養物（積層体）を作成することもできる。

本発明において、「保護部材」とは、支持体を筒状体内で移動させる際に、支持体を包み込むように保護するシート状の部材をいう。保護部材は、摩擦係数の低い（例：０．５以下、０．３以下、０．１以下、０．０５以下など）材料で作製することが好ましく、それにより、支持体を保護しながら筒状体の内面上でスムーズに滑動させることができる。

第１実施態様
以下、本発明の好適な実施態様１に係るデバイスついて、図面を参照しつつ詳細に説明する。
図１に示すように、本発明の第１実施態様に係るデバイス１は、シート状物Ｓを支持するための支持体２と、支持体２に係止される線条体３（便宜上、点線で表示）とを含む。支持体２は、複数の孔２１がマトリックス状に設けられた網目構造２４を有し、これを取り囲むように縁部２３が設けられている。支持体２は可撓性と適度な柔軟性を有し、シート状物Ｓを支持した状態で湾曲させて、筒状体５などに挿通（格納）することができる。支持体２の輪郭の一部が凸形状を有するように成型し、かかる凸形状部分の頂部を筒状体５の開口部に当接させて押し付けることで湾曲させて、支持体２を筒状体５などに押し込みやすいように構成することもできる。支持体２を筒状体５から押し出す（または引き出す）と、支持体２はその復元性で平面状に展開できるように構成されている。

支持体２の縁部２３には、線条体３を係止するための係止部２２が設けられており、支持体２に係止された線条体３を引っ張ることで支持体２を動かし、支持体２を筒状体５から引き出したり、支持体２を筒状体５に引き込んだりすることができる。係止部２２は、縁部２３上の複数箇所に設けてもよいが、複数の孔２１を係止部２２として利用してもよい。複数本の線条体３を支持体２に係止させてもよい。支持体２は、鉗子６などで把持して動かすことで、支持体２を筒状体５内に押し込んだり、支持体２を筒状体５から押し出したりすることもできる。また、支持体２の一面を摩擦係数の低い保護部材４で保護し、保護部材４が筒状体５の内面上を滑動するように配置することで、支持体２を簡単に挿通できるようにすることもできる。すなわち、デバイス１は、保護部材４、筒状体５、鉗子６の少なくとも１つをさらに含むことができる。

図２に示すように、デバイス１を使用する際は、シート状物Ｓを支持した支持体２を筒状体５内に挿通させる（図２Ａ）。次に、支持体２を目的部位Ａ近傍に配置してシート状物Ｓを剥離する（図２Ｂ）。そして、支持体２を線条体３で回収する（図２Ｃ）。シート状物Ｓの剥離は、シート状物Ｓを支持した支持体２を目的部位Ａに載置して、支持体２を取り除くことで行うこともできる（図２Ｄ）。

図２Ａに示すように、シート状物Ｓは、支持体２上に水などの粘着性のある液体を介在させて設置し、支持体２を湾曲させて（丸めて）筒状体５に挿入（格納）する。この際に、シート状物Ｓが支持体２の内側に配置されるようにすることで、シート状物Ｓを保護することができる。筒状体５の代わりに、内視鏡外科手術などで使用するポートを使用してもよい。さらに、支持体２が保護部材４（図示せず）の内側に配置されるようにすることで、保護部材４の低い摩擦係数を利用して、支持体２を筒状体５内で容易に動かすこともできる。この場合は、線条体３を保護部材４に係止させておくことで、保護部材４の回収を容易にすることもできる。保護部材４としては、φ８０μｍのナイロンメッシュなどを用いることができる。

支持体２を筒状体５内に湾曲させて（丸めて）挿入する際は、支持体２を手で丸めて挿入してもよいし、支持体２を線条体３（図示せず）で引っ張り筒状体５の開口部に当接させて押し付けることで湾曲させて挿入してもよいし、支持体２を鉗子６で把持して筒状体５の開口部に押し付けることで湾曲させて挿入してもよい。この際に、支持体２の凸形状部分の頂部を筒状体５に押し付けることで、より簡単に湾曲させることができる。保護部材４を使用する場合は、保護部材４の輪郭の一部が凸形状を有するように成型し、かかる凸形状部分の頂部を筒状体５に押し付けることで、保護部材４と共に支持体２を湾曲させることもできる。

筒状体５が、体腔内に既に挿入されている場合は、デバイス１を筒状体５の基端側から挿通して筒状体５の先端側に押し出すことで、体腔内に送達することができる。筒状体５の先端側が体腔の外側にある場合は、デバイス１を筒状体５の先端側から挿通させて格納した上で、筒状体５を体腔内に挿入し、デバイス１を先端側に押し出すことで、体腔内に送達することもできる。後者の場合は、デバイス１の移動距離が短くなるため手技が簡単になる上に、支持体２を筒状体５内で長い距離移動させることにより、支持体２が不用意に鉗子６から外れるなどの問題を低減させることができる。

図２Ｂに示されるように、シート状物Ｓを目的部位Ａに貼付する際は、支持体２を格納した筒状体５の先端を目的部位Ａに近接させて位置決めを行う。この際に、筒状体５と目的部位Ａとの間に、ある程度の距離を持たせることで、筒状体５や支持体２が目的部位Ａを傷つけるなどの問題を防止することができる。次に、鉗子６などで支持体２を把持して筒状体５の先端側へ押し出し、支持体２を平面状に展開させる。この際、保護部材４を使用している場合は、保護部材４に線条体３を係止させて引っ張ることで、保護部材４を支持体２から取り外して筒状体５内に回収することもできる。また、筒状体５内に挿通された鉗子６とは別の鉗子（図示せず）を使用して、支持体２を把持したり、保護部材４を回収したりしてもよい。

そして、次に、支持体２のシート状物Ｓを支持している面とは反対側の面から流体を吹き付けることで、複数の孔２１から矢印方向に流体を放出し、シート状物Ｓを支持体２から剥離する。この際に、流体を吹き付ける位置（流体の放出位置）を、支持体２の一端から他端へ移動させることで、シート状物Ｓを段階的に剥離させることもできる。例えば、シート状物Ｓの一部（例えば、縁部など）を部分的に剥離させ、かかる一部を目的部位に貼付し、残りの部分を段階的に剥離することで、シート状物Ｓに生じ得る皺などの有無を確認しながら、シート状物Ｓを慎重かつ確実に剥離して、目的部位Ａに貼付することもできる。

図２Ｂにおいて、支持体２は、鉗子６で把持することで目的部位との間にある程度の距離を保持しているが、これを鉗子６ではなく線条体３を使用することで達成することもできる。すなわち、支持体２に複数（２以上）の係止部を設けて複数の線条体３を係止し、かかる複数の線条体３を引っ張ることで、支持体２を中空に浮かせた状態、すなわち、目的部位との間にある程度の距離を保持した状態で、剥離作業を行うこともできる。例えば、線条体３が２本である場合は、かかる２本の線条体３を反対方向に引っ張ることで、支持体２を中空に浮かせることができる。また、線条体３が３本以上である場合は、かかる３本以上の線条体３を放射状に引っ張ることで、支持体２を中空に浮かせることができる。したがって、支持体２の少なくとも縁部２３は、線条体３による引っ張り応力に耐え得るだけの強度を有することが好ましい。

図２Ｃに示されるように、シート状物Ｓを目的部位Ａに貼付した後は、支持体２に係止された線条体３を引っ張って筒状体５内に引き込むことで、支持体２を回収することができる。この際にも、支持体２を筒状体５の開口部に押し付けて丸めて格納する。したがって、支持体２の輪郭は、筒状体５に押し込む側と、筒状体５に引き込む側との両方が凸形状を有するように（例えば、図１の支持体２で示されるような円形でもよい）成型することもできる。支持体２を筒状体５内に回収（格納）することにより、筒状体５を引き抜くだけで体腔の外側に取り出すことができ、展開された支持体２が体腔内の他の部位を傷つけるなどの問題が起きにくい。また、支持体２が回収時に脱落しても、線条体３を引っ張ることで回収することもできる。このように、シート状物Ｓを支持するための支持体２と、支持体２に係止される線条体３とを含むデバイス１を、保護部材４、筒状体５、鉗子６などと組み合わせて好適に使用することで、シート状物Ｓの貼付作業を効率的に行うことができる。

図２Ｄに示されるように、シート状物Ｓを支持した支持体２を目的部位Ａに載置、すなわち、シート状物Ｓを支持体２と共に目的部位Ａに貼付して、支持体２に係止された線条体３を段階的に引っ張ることで、支持体２をシート状物Ｓから段階的に取り除くこと、すなわち、シート状物Ｓを支持体２から段階的に剥離（放出）して目的部位Ａに貼付することもできる。本発明のデバイス１は、線条体３を引っ張る方向、速度、角度などを調節することで、シート状物Ｓの剥離（放出）位置や速度を調節することがきるため、シート状物に生じ得る皺などの有無を確認しながら、シート状物を慎重かつ確実に剥離することができる。この場合は、支持体２の先端側（図中、左側）に係止させた線条体３を支持体２の基端側（図中、右側）に引っ張り、支持体２の折れ曲がり角度が鋭角になるようにして取り除くことで、シート状物Ｓが支持体２に追従しないようにすることもできる。また、複数の孔２１から流体を放出しながら、支持体２をシート状物Ｓから取り除くことで、シート状物Ｓが支持体２に追従しないようにすることもできるが、線条体３を引っ張ることでこの機能を達成することができるので、支持体２の複数の孔２１は省略することもできる。

図３Ａ～図３Ｃは、支持体２の一態様を示す。図示されるように、支持体２は複数の孔２１がマトリックス状に配置された網目構造２４を有しており、この網目構造を取り囲むように縁部２３が設けられている（図３Ａ）。図３Ｂに示されるように、孔２１’、２１’’は、３００μｍ×１０００μｍの方形を有しており、孔２１’と孔２１’’との間の距離は、５００μｍである。図３Ｃに示されるように、支持体２の縁部２３の寸法は、２ｍｍ×５００μｍであり、支持体２の網目構造２４の格子部分の寸法は、５００μｍ×５００μｍである。図示されるように、縁部２３は、網目構造２４より厚みを有するため、例えば、線条体３を縁部２３と網目構造２４との間の孔２１に挿通することで、孔２１を係止部２２として利用することもできる。すなわち、孔２１に線条体３を挿通して係止部２２として利用し、線条体３を支持体２の水平方向に引っ張る場合、線条体３が縁部２３に引っかかるため、支持体２が破断するなどの問題が起きにくい。また、支持体２の表面は、網目構造２４の網目部分と複数の孔２１とが交互に配置されることで凸凹形状が形成されるため、シート状物Ｓが支持体２に水平にズレることを防止する摩擦力を発揮することができ、接触面積が小さいためシート状物Ｓから剥がしやすい。したがって、上記の様に、支持体２の複数の孔２１を省略する場合は、支持体２が表面に凹凸形状を有するように成型することで、摩擦力を発揮させることもできる。

以上から明らかなように、デバイス１は、シート状物Ｓを支持するための支持体２と、支持体２に係止された線条体３とを少なくとも含んでいればよい。また、シート状物Ｓを支持した支持体２を目的部位Ａに載置し、上記のように支持体２を線条体３で引っ張りながら段階的に取り除くことで、図２Ｂで説明したような、シート状物Ｓの段階的な剥離を行うこと、すなわち、シート状物に生じ得る皺などの有無を確認しながら、シート状物を慎重かつ確実に剥離することもできる。支持体２は、腹腔鏡手術用摘出物バッグ（ＩＮＺＩＩ（登録商標）など）を使用して回収することもできる。

以上、本発明の第１実施態様に係るデバイス１によれば、簡便な機構と、簡単な作業で効率よくシート状物を目的部位に貼付することができるため、作業性や製造コストの点において大きなメリットがある。
そして、シート状物を段階的に剥離できるため、シート状物の一部を剥離して目的部位へ位置決めして貼付した後に、その他の部分を段階的に剥離することで、皺などの発生を防止することができる。特に、シート状物を流体で剥離することにより、欠損などの発生を防止することができ、シート状物の形状を保持しながら、効率よく貼付することができる。

本発明のデバイスの使用は、例えば以下の工程によって順次行うことができる。
（１）シート状物を設置した支持体を目的部位に近接させる。
（２）複数の孔の一部の孔から流体を放出する。
（３）剥離した部分を目的部位に貼付する。
（４）放出位置を移動して、別の孔から流体を放出する。
（５）剥離した部分を目的部位に貼付する。
シート状物を設置した支持体を目的部位に対して空間的に離間した状態で配置するには、シート状物を設置した支持体を目的部位に近接させればよい。このときシート状物は目的部位と接触しないように線条体を利用して中空に浮かせることができる。シート状物をシート支持体から剥離した後もシート状物を目的部位に貼付するまでシート状物が目的部位と接触しない状態を保持することができる。シート状物の剥離と貼付とは別々でも、同時でもよい。また、シート状物の貼付を行った後に、貼付したシート状物の上から流体を噴射する工程を加えてもよい。これにより、シート状物をより確実に目的部位に接着させることができる。このときもシート支持体は目的部位と接触しない状態でシート状物を目的部位に接着させることができる。また、流体として、ゲルおよび／またはポリマーを噴射することで、シート状物を補強する補強層を形成するようにしてもよい。

以上、本発明を図示の実施態様について説明したが、本発明はこれに限定されるものではない。
本発明においては、各構成は、同様の機能を発揮し得る任意のものと置換することができ、あるいは、任意の構成を付加することもできる。
例えば、上記のように、支持体２は線条体３を引っ張ることで回収することができるが、かかる回収を鉗子６で行うことで、線条体３を省略することもできる。以下、線条体３を省略した、本発明のデバイスについて説明する。

第２実施態様
以下、本発明の好適な実施態様２に係るデバイスついて、図面を参照しつつ詳細に説明する。本実施態様において、デバイスは、線条体３を含まず、シート状物Ｓは、フィブリンゲル（補強層）、シート状細胞培養物、細胞外マトリックスの順に積層されたシート状細胞培養物（積層体）であるものとして説明する。

図４に示すように、本発明の第２実施態様に係るデバイス１’は、シート状物Ｓを支持するための支持体２’と、支持体２’の一面を保護するための摩擦係数の低い保護部材４’とを含む。本実施態様において、支持体２’は、表面に凹凸形状を有するように成型されており、シート状物Ｓが支持体２’に対して水平方向にズレることを防止する摩擦力を発揮することができる。また、凹凸形状により、シート状物Ｓとの接触面積が小さくなるためシート状物Ｓを支持体２’から剥離しやすい。

支持体２’および保護部材４’は円形形状を有している。すなわち、シート状物Ｓ（シート状細胞培養物）は、一般的に円形形状を有しているため、支持体２’でシート状物Ｓを適切に保護することができ、かつ、保護部材４’が無駄な面積を有しないため、筒状体５の内面上を滑動させる際の摩擦を最小限に抑えることができる。また、支持体２’および保護部材４’を共に円形に形成することで、上記のように、円形の頂部（凸部）を筒状体５の開口部に当接させて押し付けるだけで、デバイス１’を容易に湾曲させて筒状体５内に押し込むこともできる。

シート状物Ｓを目的部位Ａ（図示せず）に貼付する際は、まず、シート状細胞培養物（積層体）を細胞外マトリックス側が上になるように支持体２’上に載置し、支持体２’のシート状物Ｓを載置した側とは逆側の面を保護部材４’で覆い、シート状物Ｓが内側になるようにデバイス１’を丸めて、シート状物Ｓが存在しない２点（例えば、支持体２’の両端部、保護部材４’の両端部など）を重ねる。次に、重なった部分を鉗子６で押さえて（把持して）筒状体５（例えば、腹腔鏡用ポート）内に挿入する。この際、丸められた状態のデバイス１’の先端側（筒状体５側）は、（その円形形状により）針の先端のように細くなっているため、筒状体５に容易に挿通させることができる。筒状体５を目的部位Ａ（例えば、臓器）まで移動し、デバイス１’を筒状体５から押し出して鉗子６の押さえを解放すると、上記のように支持体２’はその復元性で平面状に展開されるため、シート状物Ｓを皺などを生じさせることなく適切に目的部位Ａまで送達することができる。

次に、シート状細胞培養物が目的部位Ａ側に向くように、すなわち、シート状細胞培養物の細胞外マトリックス（ＥＣＭ）側が目的部位Ａ側に向くように、支持体２’の裏表を上下反転させて（ひっくり返して）、シート状物Ｓを支持したデバイス１’（支持体２’および保護部材４’）を目的部位Ａに載置する。そして、鉗子６（または、別の鉗子）を使用して保護部材４’、支持体２’の順番で取り除く。この際に、支持体２’の端部を鉗子６で把持して段階的に引っ張ることで、図２Ｄで説明したような、シート状物Ｓの段階的な剥離を行うこと、すなわち、シート状物Ｓに生じ得る皺などの有無を確認しながら、シート状物Ｓを慎重かつ確実に剥離することもできる。また、この際に、放出位置を移動させながら複数の孔から流体を吐出することで、シート状物Ｓを支持体２’から確実に剥離させて目的部位Ａ上に貼付することもできる。また、支持体２’の凹凸形状により、シート状物Ｓを支持体２’から容易に剥離させることができる。

支持体２’および／または保護部材４’を筒状体５内に回収することもできる。この際、支持体２’および保護部材４’は円形形状を有するため、鉗子６で円形形状の端部の任意の部分を掴んで筒状体５内に回収することができる。すなわち、円形形状の端部のどの部分も上記のような凸形状部分の頂部を掴むこととなり、この頂部を筒状体５に押し付けることで簡単に湾曲させて回収することができる。したがって、筒状体５や鉗子６の向き、鉗子６の支持体２’および／または保護部材４’に対する位置決めなどを精密に調整することなく、回収作業を効率化することができる。

以上、本発明の第２実施態様に係るデバイス１’によれば、簡便な機構と、簡単な作業で効率よくシート状物を目的部位に貼付することができるため、作業性や製造コストの点において大きなメリットがある。
そして、シート状物を段階的に剥離できるため、シート状物の一部を剥離して目的部位へ位置決めして貼付した後に、その他の部分を段階的に剥離することで、皺などの発生を防止することができる。特に、シート状物を流体で剥離することにより、欠損などの発生を防止することができ、シート状物の形状を保持しながら、効率よく貼付することができる。

以上、本発明を図示の実施態様について説明したが、本発明はこれに限定されるものではない。
本発明においては、各構成は、同様の機能を発揮し得る任意のものと置換することができ、あるいは、任意の構成を付加することもできる。

実施例１：シート状細胞培養物の臓器への移植
上からフィブリンゲル、シート状細胞培養物、ＥＣＭの順番で積層されたシート状細胞培養物を、線条体が係止され複数の孔が設けられたＰＤＭＳ製の支持体上にＥＣＭ側が上になるように載置し、支持体の載置側とは逆側をナイロンメッシュ製の保護部材で覆い、シート状細胞培養物が内側になるように丸めた状態で腹腔鏡用の把持鉗子で把持し、体腔内に挿入されている腹腔鏡用ポートに近接させた（図５Ａ）。そして、丸めた状態の保護されたシート状細胞培養物を腹腔鏡用ポートの開口部（口径１２ｍｍ）から挿入して腹腔内に到達させた（図５Ｂ）。次に、シート状細胞培養物を目的臓器に近接させ（図５Ｃ）、把持鉗子による把持を解除して展開し、支持体の裏表を上下反転させ、シート状細胞培養物のＥＣＭ側を目的臓器上に配置した（図５Ｄ）。そして、保護部材を取り外し、支持体を取り外し（図５Ｅ）、シート状細胞培養物だけを目的臓器に貼付した（図５Ｆ）。支持体を取り外す際に、線条体を段階的に引っ張ることでシート状細胞培養物を適切に剥離させることができた。また、線条体を引っ張ることにより、適切に支持体と保護部材の回収を行うことができた。シート状細胞培養物の送達（運搬）、目的臓器への貼付、支持体の剥離をそれぞれ１０回行って、全てにおいて成功した。

実施例２：ブタ十二指腸ＥＳＤモデルに対してシート状細胞培養物の十二指腸への移植
ＥＳＤ後１００％遅発性穿孔を来すブタ十二指腸ＥＳＤモデルに対して、デバイスを用いて腹腔鏡下で十二指腸漿膜側に自家骨格筋芽細胞シートを移植し、有効性を評価した。上からフィブリンゲル、シート状細胞培養物、ＥＣＭの順番で積層されたシート状細胞培養物を、シリコーンフィルム（支持体）上にＥＣＭ側が上になるように載置し、支持体の載置側とは逆側をメッシュ（保護部材）で覆い、シート状細胞培養物が内側になるように丸め、シート状細胞培養物が載置されていない部分を鉗子で押さえ、体腔内に挿入されている腹腔鏡用ポートに近接させた。そして、丸めた状態の保護されたシート状細胞培養物を腹腔鏡用ポートの開口部（口径１２ｍｍ）から挿入して腹腔内に到達させた。次に、シート状細胞培養物を十二指腸内の目的部位（患部）に近接させ（図６Ａ）、把持鉗子による把持を解除して展開し、シート状細胞培養物のＥＣＭ側が目的部位に接着するように支持体の裏表を上下反転させ、その後、メッシュ（図６Ｂ）を剥がし、シリコーンフィルム（図６Ｃ）を剥がした。そして、シート状細胞培養物だけを目的部位上に配置（貼付）した（図６Ｄ）。支持体を剥がす際に、把持鉗子を用いてシリコーンフィルムとシート状細胞培養物を適切に剥離させることができた。そして、保護部材と支持体を鉗子で掴んで再び腹腔鏡用ポート内に格納（回収）して、シート状細胞培養物だけを目的部位に貼付できたことを確認した。その結果、本デバイスでのシート状細胞培養物の運搬、貼付、剥離の成功率は１００％であった。また、細胞シート移植後３日目に術後穿孔／腹膜炎（Postoperative perforation／peritonitis）が起こっていないこと（Ａ：なし、Ｂ：あり）（※１例はＥＳＤ時穿孔）を確認（図７）した後、標本摘出を行い、シート状細胞培養物の貼付部位の肉眼的・組織学的評価を行って移植部位における組織の増生を確認し、シート状細胞培養物の残存を確認できた（図８：病理組織所見 (十二指腸)）。

１、１’ デバイス
２、２’ 支持体
２１、２１’、２１’’ 孔
２２ 係止部
２３ 縁部
２４ 網目構造
３ 線条体
４、４’ 保護部材
５ 筒状体
６ 鉗子
Ｓ シート状物
Ａ 目的部位

Claims (8)

1. シート状物貼付デバイスであって、
   シート状物を支持するための支持体と、支持体に係止された糸状の線条体と、支持体の一面を保護するための摩擦係数が０．５以下の保護部材と、保護部材に係止された線条体とを含み、
   線条体を係止した係止部がシート状物を横断するように線条体を引っ張ることでシート状物を支持体から剥離することができる、
   前記デバイス。
2. 支持体が、少なくとも１つの孔を有する、請求項１に記載のデバイス。
3. シート状物を支持した支持体を保護部材で保護して丸め、筒状体内に挿通された状態、ならびに支持体および保護部材を一体的に展開させた状態をとることができる、請求項１または２に記載のデバイス。
4. 支持体が、シート状物を支持する面上に凹凸構造を有する、請求項１～３のいずれか一項に記載のデバイス。
5. シート状物貼付デバイスであって、
   シート状物を支持するためのシート状の支持体と、支持体の一面を保護するための摩擦係数が０．５以下のシート状の保護部材とを含み、
   シート状物を支持した支持体を保護部材で保護して丸め、筒状体内に挿通された状態、ならびに支持体および保護部材を一体的に展開させた状態をとることができる、前記デバイス。
6. 支持体が、シート状物を支持する面上に凹凸構造を有する、請求項５に記載のデバイス。
7. 支持体が、少なくとも１つの孔を有する、請求項５または６に記載のデバイス。
8. シート状物、支持体および保護部材が円形形状を有する、請求項５～７のいずれか一項に記載のデバイス。