JP7292246B2 - ミズゴケ培養用の培地、ミズゴケの培養方法 - Google Patents
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- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
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Description
[1]
ミズゴケ培養用の培地であって、
ショ糖、ブドウ糖、果糖、麦芽糖およびデンプンからなる群から選択される糖類と、リン酸二水素ナトリウムと、硝酸カリウムと、硫酸アンモニウムと、硫酸マグネシウムと、塩化カルシウムと、エチレンジアミン四酢酸鉄(III)と、硫酸マンガンとを含有し、
リン酸二水素ナトリウムの含有量が0.4~200 mg/L、硝酸カリウムの含有量が1~3000 mg/L、硫酸アンモニウムの含有量が0.1~300 mg/L、硫酸マグネシウムの含有量が0.1~300mg/L、塩化カルシウムの含有量が0.1~300 mg/L、エチレンジアミン四酢酸鉄(III)の含有量が0.1~300 mg/L、および硫酸マンガンの含有量が0.01~30 mg/Lである、培地。
[2]
2~100 mg/Lであるリン酸二水素ナトリウム、30~1500 mg/Lである硝酸カリウム、1~100 mg/Lである硫酸アンモニウム、3~150 mg/Lである硫酸マグネシウム、1~100 mg/Lである塩化カルシウム、0.5~50 mg/Lであるエチレンジアミン四酢酸鉄(III)、および0.1~10 mg/Lである硫酸マンガンを含有する、[1]に記載の培地。
[3]
ミズゴケの全部または一部を[1]または[2]に記載の培地と接触あるいは浸漬させてミズゴケを増殖させることを含む、ミズゴケの培養方法。
[4]
生長ミズゴケの茎部および/または枝部を前記培地と接触あるいは浸漬させる、[3]に記載の培養方法。
本実施形態において、培養に使用するミズゴケは生きている状態でも、仮死または休眠している状態でもよく、特に限定されない。また、培地で増殖させるために接触あるいは浸漬させるのはミズゴケの全部でもよく、あるいは一部でもよい。具体的には、植物体全体のほか、茎部、枝部のいずれかでもよく、また、芽、頭状体、胞子や胞子体、原子体でもよい。このうち、生長ミズゴケの茎部および枝部のうち少なくともいずれか一つを含む態様で培地に接触あるいは浸漬させることが、再分化能がより高いため好ましい。なお、該好ましい態様には、茎部または枝部の全部を用いる場合のほか、茎部または枝部の一部が用いられる場合も含まれる。また、枝部を用いる場合、先端生長部位は含んでも、また含まれなくともよく、特に限定されない。
これらのミズゴケの中でも、オオミズゴケは、大型であり、商業的価値も高く、また他のミズゴケと比較して本実施形態の培地を用いることで生長をより促進できるため、培養するのに好適なミズゴケといえ、好ましい。
これら成分を含む培地のpHは特に限定されず、当業者が適宜設定できるが、ミズゴケの生育をさらに改善できるため、pH3.0~8.0程度が好ましく、より好ましくはpH3.5~7.0である。
また、糖類については、ショ糖、ブドウ糖、果糖、麦芽糖およびデンプンのうち少なくとも1種含有されていればよいが、ミズゴケの生長をより促進できる観点から、ショ糖が含有されることが好ましい。糖類の含有量についても当業者が適宜設定でき、特に限定されないが、ショ糖の場合は、ミズゴケの生長のさらなる改善の観点から、1~50000 mg/Lが好ましく、より好ましくは500~30000 mg/Lである。
上記好ましい態様の組成はコケ植物で従来から用いられている培地(MS培地、Knop培地、M51C培地等)とは組成が大きく異なる。例えば、MS培地とは、共通する成分について本実施形態の培地のほうが5倍以上濃度が低い。
またエアレーションを用いての培養を行っても静置状態で増殖をさせてもよい。
[試験例1]
ヤマト電機資産管理株式会社の植物組織培養実験室(東京都中野区)において、液体培地を用いての幼植物体断片からのオオミズゴケの培養を行った。
幼植物体断片は、オオミズゴケの新芽(枝部および葉部を含む植物体全体)を先端成長部位から5mmの部位でカットした断片として調製した(図2)。
実施例の培地を100ml入れた、直径7cmのプラスチック製フタ付きの密閉可能なねじ口ガラス製容器(以降単にビンという)内に、幼植物体断片5本を入れた。光90PPFD(植物培養用蛍光灯: Toshiba、FL40SS・W/37)、温度25℃との条件で2か月間養生した結果、1ビンあたり500本の新芽を得た(図3)。
リン酸二水素ナトリウム:4.25
硝酸カリウム:62.5
硫酸アンモニウム:3.35
硫酸マグネシウム:6.15
塩化カルシウム:3.75
Fe(III)EDTA:1.0
硫酸マンガン:0.35
ショ糖:1000
実施例1の培地について、ショ糖の濃度を1000 mg/Lとしたままで他の成分については濃度の変更を行った培地を調製した。具体的には、実施例2(実施例1からみて4倍の濃度)、実施例3(実施例1からみて2倍の濃度)、実施例4(実施例1からみて1/2倍の濃度)、実施例5(実施例1からみて1/4倍の濃度)および実施例6(実施例1からみて1/8倍の濃度)の各培地を調製した。
幼植物体断片を15本としたほかは試験例1と同様の条件で試験を実施例1~6の培地を用いて行った。
実施例2~6についても実施例1と同様に増殖した各個体が自然界あるいは屋外栽培と同等の葉の形態を示すことを、生物顕微鏡を用いての観察によって確認した。
また、実施例1~6の培地を用いたときの新芽の数、生重量、乾燥重量を測定した。結果を図5に示す。
Claims (3)
- ミズゴケ培養用の培地(土壌を除く)であって、
ショ糖、ブドウ糖、果糖、麦芽糖およびデンプンからなる群から選択される糖類と、リン酸二水素ナトリウムと、硝酸カリウムと、硫酸アンモニウムと、硫酸マグネシウムと、塩化カルシウムと、エチレンジアミン四酢酸鉄(III)と、硫酸マンガンとを含有し、
リン酸二水素ナトリウムの含有量が0.4~17 mg/L、硝酸カリウムの含有量が1~250 mg/L、硫酸アンモニウムの含有量が0.1~13.4 mg/L、硫酸マグネシウムの含有量が0.1~24.6 mg/L、塩化カルシウムの含有量が0.1~15 mg/L、エチレンジアミン四酢酸鉄(III)の含有量が0.1~4 mg/L、および硫酸マンガンの含有量が0.01~1.4 mg/Lである、培地。 - ミズゴケの全部または一部を請求項1に記載の培地と接触あるいは浸漬させてミズゴケを増殖させることを含む、ミズゴケの培養方法。
- 生長ミズゴケの茎部および/または枝部を前記培地と接触あるいは浸漬させる、請求項2に記載の培養方法。
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