JP7233556B2 - 皮膚美白外用剤におけるサリドロシド誘導体の使用 - Google Patents

Description

本出願は、２０１９年１２月２６日に中国国家知識産権局に出願された特許出願（出願番号：２０１９１１３６７０３２４、発明の名称：サリドロシド誘導体、製造方法及び美白化粧品における使用）の優先権を主張し、その全ての内容が参照により本明細書に組み込まれる。

本発明は、スキンケアの技術分野に関し、具体的には、皮膚美白外用剤におけるサリドロシド誘導体の使用に関する。

皮膚におけるメラニンの含有量と分布は人間の皮膚の色を決定する。メラニンの産生には、チロシン、チロシナーゼ、活性酸素及びメラニン体が不可欠である。外部刺激、例えば、紫外線照射等によりチロシナーゼは活性化され、チロシンはチロシナーゼの作用下でドーパに酸化され、さらにメラニンに酸化され、皮膚の表面に移動し、肌がくすみ、局所的にシミが発生し、最後に、皮膚の異常な代謝により永久的な色斑を引き起こす。そのため、皮膚美白は紫外線遮断、酸素ラジカルの除去、チロシナーゼの抑制、メラニンの移動遮断等の流れで実現することができる。しかし、メラニンの合成を抑制しすぎると、既存のメラノサイトがひどく破壊されて足りなくなることで、皮膚の色は異常に白くなり、白斑が発生する恐れがある。もちろん、メラニンを科学的に抑制しても、健康を害することがない。

現在、人々の高美人度に対する追求はますます顕著になっている。「色の白いは七難隠す」との意識は、人々の心に深く根ざしており、多くの人が皮膚を白皙に保ちたいと思っている。そのため、美白やシミの除去が人気になっており、美白化粧品の種類も増えている。現在市販されている美白製品には、クリーム、エマルション、ゲル、フェイシャルマスク等がある。しかし、これらの製品の多くは、皮膚を異常に白皙にするか又は不快を感じさせる白皙にする問題がある。これは明らかに人々の本来の美白の意図に反している。そのため、肌の健康的な美白を前提とし、皮膚の正常な新陳代謝を破壊することなく、過度に沈着して色斑を形成しないようにメラノサイトの代謝を促進できる新しい成分を開発する必要がある。

本発明の目的は、メラニン生成を抑制し、肌の色を明るくするサリドロシド誘導体、製造方法及びその美白化粧品における使用を提供することである。

サリドロシドは、糖環を含むポリフェノール化合物であり、免疫調節、抗低酸素症、抗老化の作用を有するとともに、文献によるとある程度の美白の効果を有する。本発明では、サリドロシドはそのフェノール残基により美白作用を発揮することが推測される。

本発明の一態様によれば、式（Ｉ）で表される化合物が提供される。

Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４及びＲ_５は水素原子又はヒドロキシル基であり、ｎは１－３個の炭素原子を含むアルキル基である。

さらに、ｎが１、Ｒ_１が水素原子、Ｒ_２がヒドロキシル基、Ｒ_３が水素原子、Ｒ_４がヒドロキシル基、Ｒ_５が水素原子である場合、上記化合物は１－（３，５－ジヒドロキシフェニル）エチル－β－Ｄ－グルコシドであり、化学式はＣ_１３Ｈ_１８Ｏ_８であり、構造式は下式（Ｉ－１）である。

本発明の他の態様によれば、以下のステップ１からステップ４を含む式（Ｉ－１）で表される化合物の製造方法が提供される。

３，５－ジヒドロキシフェニル酢酸とボランテトラヒドロフランとをモル比１：（１．１－１．３）でテトラヒドロフランに溶解し、室温１５－２５℃の条件下で４－６時間反応させ、反応終了後、回転蒸発により溶媒を除去することで粗生成物が得られ、カラムクロマトグラフィーによって精製することにより、中間体２が得られる。

ステップ１で得られた中間体２と塩化ベンジルとをアセトン中で撹拌して溶解する。中間体２と塩化ベンジルとのモル比は１：（１－１．２）であり、撹拌速度は２００－３００ｒｐｍである。溶解終了後、中間体２と炭酸カリウムとのモル比が１：（１－１．２）、中間体２とヨウ化カリウムとのモル比が１：（０．１－０．２）であるように炭酸カリウム及びヨウ化カリウムを加え、還流下で１８－２０時間反応させ、溶媒を蒸発除去した後、残留物を水に入れ、塩酸を滴下してｐＨ７に調整し、酢酸エチルで抽出し、有機相から溶媒を蒸発除去した後、無水エタノールで再結晶化することにより、白色固体として中間体３が得られる。

ステップ２で得られた中間体３をジクロロメタンに溶解し、２００－３００ｒｐｍで中間体４、分子篩及び乾燥炭酸銀をこの順で加え、室温１５－２５℃、暗所で２４－３６時間反応させる。中間体３と中間体４とのモル比は１：（１．２－１．４）、分子篩は２－３ｇ、中間体３と乾燥炭酸銀とのモル比は１：（０．６－０．７）である。反応終了後に濾過し、濾過ケーキをジクロロメタンで洗浄し、濾液を濃縮することにより、中間体５が得られる。

ステップ３で得られた中間体５を無水メタノールに溶解し、ナトリウムメトキシドを加え、室温１５－２５℃、２００－３００ｒｐｍで６－８ｈ撹拌し、酢酸でｐＨ６に調整した後に濾過し、濾液を減圧濃縮することにより、粘稠状物質が得られ、粘稠状物質にさらにメタノール、パラジウム炭素を加え、水素加圧の雰囲気で撹拌しながら４－６時間反応させ、最後にカラムクロマトグラフィーで精製することにより、式（Ｉ－１）の構造を有する最終製品６が得られる。

本発明の他の態様によれば、皮膚美白外用剤の製造における式（Ｉ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩の使用がさらに提供される。

さらに、上記外用剤は、酸化防止剤、着色剤、脱色素剤、エモリエント、乳化剤、角質除去剤、香料、保湿剤、潤滑剤、薬品活性化剤、増湿剤、光安定剤、防腐剤、スキンケア剤、皮膚浸透促進剤、日焼け止め、安定剤、界面活性剤、増粘剤、又は化粧品であってもよい。

さらに、上記スキンケア剤は、化粧水、エマルション、クリーム、美容液、フェイシャルマスク等であってもよい。

さらに、上記化合物又はその薬学的に許容される塩は、皮膚美白外用剤における質量百分率が０．５％－３０％である。

具体的には、式（Ｉ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩は、水含有洗液、油中水型又は水中油型エマルション、オイル又はオレイルアルコール洗液、ゲル等の形態で存在してもよい。

本発明は以下の有益な効果を有する。
本発明では、サリドロシドの美白活性を増強させるとともに、サリドロシドの糖環の保護作用を十分に利用し、サリドロシドのフェノール残基を修飾してサリドロシド－ｐｌｕｓ（ＳＰ－０３７）、即ち１－（３，５－ジヒドロキシフェニル）エチル－β－Ｄ－グルコシド及び／又はその塩を取得し、一連の実験によりその美白効果を評価した。

実施例１で製造された１－（３，５－ジヒドロキシフェニル）エチル－β－Ｄ－グルコシドのＨ^１－ＮＭＲスペクトルである。 実施例１で製造された１－（３，５－ジヒドロキシフェニル）エチル－β－Ｄ－グルコシドのＣ^１３－ＮＭＲスペクトルである。 実施例１で製造された１－（３，５－ジヒドロキシフェニル）エチル－β－Ｄ－グルコシドのＭＳマススペクトルである。 メラニン含有量に対するβ－Ｄ－グルコシド誘導体の影響（ｍｅａｎ±ＳＤ；ｎ＝３；＊＊Ｐ＜０．０１）を示す。 メラニン含有量に対するＳＰ－０３７の影響（ｍｅａｎ±ＳＤ；ｎ＝５；＊＊Ｐ＜０．０１）を示す。 ＳＰ－０３７と美白陽性薬の脱メラニン効果の比較（ｍｅａｎ±ＳＤ；ｎ＝５；＊＊Ｐ＜０．０１）を示す。 マウスの体重変化（対照：生理食塩水塗布群；２．５％：２．５％ ＳＰ－０３７の生理食塩水塗布群；５％：５％ ＳＰ－０３７の生理食塩水塗布群；１０％：１０％ ＳＰ－０３７の生理食塩水塗布群）を示す。 マウス皮膚監視（対照：生理食塩水塗布群；２．５％：２．５％ ＳＰ－０３７の生理食塩水塗布群；５％：５％ ＳＰ－０３７の生理食塩水塗布群；１０％：１０％ ＳＰ－０３７の生理食塩水塗布群）である。 ＳＰ－０３７のパッチテストを示す。 皮膚メラニン含有量に対するＳＰ－０３７の影響の評価（ｍｅａｎ±ＳＤ；＊＊Ｐ＜０．０１）を示す。 皮膚明度に対するＳＰ－０３７の影響の評価（ｍｅａｎ±ＳＤ；＊Ｐ＜０．０５，＊＊Ｐ＜０．０１）を示す。

当業者は創造的な努力なしに、上記の図面に基づいて他の関連する図面を得ることができる。

当業者が本発明をよりよく理解できるようにするために、以下、実施例により本発明の技術的解決策をさらに説明する。

実施例１：１－（３，５－ジヒドロキシフェニル）エチル－β－Ｄ－グルコシドの製造

１．１８ｇの３，５－ジヒドロキシフェニル酢酸と８．４ｍｌのＢＨ３．ＴＨＦ（ＴＨＦ中で１．０Ｍ）とを２０ｍｌのＴＨＦに溶解し、室温で４時間反応させた。反応終了後、回転蒸発で溶媒を除去することにより粗生成物が得られた。カラムクロマトグラフィーで精製することにより１．０５ｇの製品が得られた（収率９７％）。

反応フラスコに１６．９ｇ中間体２、塩化ベンジル６．９ｍＬ及びアセトン２００ｍＬをこの順で加え、撹拌して溶解し、炭酸カリウム８．３ｇ及びヨウ化カリウム０．８ｇを加え、ＴＬＣで監視しながら、還流下で１８ｈ反応させた。溶媒を蒸発除去し、残留物を２００ｍＬ水中に入れ、塩酸を滴下してｐＨ７に調整し、酢酸エチルで抽出し、有機相から溶媒を蒸発除去した後、無水エタノールで再結晶化することにより、色固体２１０．７ｇが得られた。回収率は８８．６％であった。

ステップ２で得られた生成物（中間体３）２７．３ｇを２００ｍＬのＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解し、撹拌しながら、１４．８ｇの中間体４、２ｇの分子篩及び５５ｇの乾燥炭酸銀をこの順で加え、室温、暗所で１日反応させた。濾過し、濾過ケーキを適量のＣＨ_２Ｃｌ_２で洗浄し、濾液を濃縮することにより、中間体５が得られた。

ステップ３で得られた中間体５を無水メタノール１５０ｍＬに溶解し、ナトリウムメトキシド１．６ｇを加え、室温で６ｈ撹拌し、酢酸でｐＨ６に調整し、濾過し、濾液を減圧濃縮することにより、粘稠状物質が得られた。粘稠状物質にさらに１５０ｍｌメタノール、０．１６ｇパラジウム炭素を加え、水素ガス雰囲気で撹拌しながら４ｈ反応させた。カラムクロマトグラフィーで精製することにより、最終製品５．６ｇが得られた。

特性データ
図１：Ｈ^１－ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，４００ＭＨｚ）δ：７．０６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），６．６９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，），４．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），４．０２（１Ｈ，ｍ），３．８６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．６，１２．４Ｈｚ），３．６８（２Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），３．２３－３．３７（３Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），３．１８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），２．８３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）。

図２：Ｃ^１３－ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，１００ＭＨｚ）δ：１５５．４，１２９．６，１２９．４，１１４．７，１０３．０，７６．７，７６．６，７３．７，７０．７，７０．３，６１．４，３５．０。
図３：ＨＲＥＳＩ－ＭＳｍ／ｚ［Ｍ＋Ｎａ］＋：３６５．０９２９。

実施例２：インビトロメラノサイトを用いるメラニン合成のシミュレート過程に対するβ－Ｄ－グルコシド誘導体の影響の分析
ａ．メラニン生成に対するβ－Ｄ－グルコシド誘導体の抑制活性の測定
測定方法
本実験は、ヒト由来メラノサイト及びツールメラノサイトを用いて行われた。ヒト由来メラノサイト及びメラノサイトを５０００個の細胞／ウェルの密度で９６ウェルプレートに接種した。細胞が壁に付着した後、培地に神経栄養因子を添加して誘導するとともにＵＶで誘導することによりインビボメラニンの生成をシミュレートした。その後、測定されるβ－Ｄ－グルコシド誘導体を１００μＭの濃度で加えて細胞をインキュベートした。各群は、３回繰り返した。３７℃、５％ＣＯ_２恒温恒湿インキュベータで引き続き６０ｈ培養した。細胞を予冷したリン酸緩衝液で洗浄した後、トリプシンで細胞を消化し、ウェルプレートを遠心分離し、上清を捨てた。１０％ジメチルスルホキシドを含むＮａＯＨ（１ｍｏｌ／Ｌ）溶液で細胞を溶解し、６５℃水浴でメラニン粒子を完全に溶解し、マイクロプレートリーダにより４９０ｎｍでの吸光値を測定した。最後に、この値でメラニンの含有量をフィードバックした。

結果と考察
実験で測定されるβ－Ｄ－グルコシド誘導体は、以下の化学式で表される化合物から選択される。

上記式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４及びＲ_５は水素原子又はヒドロキシル基を示し、１－５個のヒドロキシル基を含み、ｎは１－３個の炭素原子を含むアルキル基を示す。
ＳＰ－００１からＳＰ－０３９を含む３９種のβ－Ｄ－グルコシド誘導体の化学式は以下の通りである。

図４に示すように、測定される３９種のβ－Ｄ－グルコシド誘導体は、いずれも細胞レベルで顕著なメラニン生成抑制効果を有する。そのうち、番号ＳＰ－０３７の１－（３，５－ジヒドロキシフェニル）エチル－β－Ｄ－グルコシドは効果が最も高い。以下、ＳＰ－０３７は１－（３，５－ジヒドロキシフェニル）エチル－β－Ｄ－グルコシドを指す。

ｂ．メラニン生成に対するＳＰ－０３７の抑制活性の測定
測定方法
本実験は、ヒト由来メラノサイト及びツールメラノサイトを用いて行われた。ヒト由来メラノサイト及びメラノサイトを５０００個の細胞／ウェルの密度で９６ウェルプレートに接種した。細胞が壁に付着した後、培地に神経栄養因子を添加して誘導するとともにＵＶで誘導することによりインビボメラニンの生成をシミュレートした。その後、ＳＰ－０３７を０、１２．５、２５、５０、１００、２００μＭの合計６つの濃度勾配で加えて細胞をインキュベートした。各群は、５回繰り返した。３７℃、５％ＣＯ_２恒温恒湿インキュベータで引き続き６０ｈ培養した。細胞を予冷したリン酸緩衝液で洗浄した後、トリプシンで細胞を消化し、ウェルプレートを遠心分離し、上清を捨てた。１０％ジメチルスルホキシドを含むＮａＯＨ（１ｍｏｌ／Ｌ）溶液で細胞を溶解し、６５℃水浴でメラニン粒子を完全に溶解し、マイクロプレートリーダにより４９０ｎｍでの吸光値を測定した。最後に、この値でメラニンの含有量をフィードバックした。

結果と考察
図５に示すように、ＳＰ－０３７は、細胞レベルで顕著なメラニン生成抑制効果を有し、５０μＭ濃度での効果が理想的であるため、この濃度で引き続き実験を行った。

ｃ．ＳＰ－０３７と美白陽性薬の脱メラニン効果の比較
測定方法
本実験は、ヒト由来メラノサイト及びツールメラノサイトを用いて行われた。ヒト由来メラノサイト及びメラノサイトを５０００個の細胞／ウェルの密度で９６ウェルプレートに接種した。細胞が壁に付着した後、培地に神経栄養因子を添加して誘導するとともにＵＶで誘導することによりインビボメラニンの生成をシミュレートした。その後、対照、ＳＰ－０３７、ＶＣ、コウジ酸及びヒドロキノンの５群を設けた。各群は、５回繰り返した。３７℃、５％ＣＯ_２恒温恒湿インキュベータで引き続き６０ｈ培養した。細胞を予冷したリン酸緩衝液で洗浄した後、トリプシンで細胞を消化し、ウェルプレートを遠心分離し、上清を捨てた。１０％ジメチルスルホキシドを含むＮａＯＨ（１ｍｏｌ／Ｌ）溶液で細胞を溶解し、６５℃水浴でメラニン粒子を完全に溶解し、マイクロプレートリーダにより４９０ｎｍでの吸光値を測定した。最後に、この値でメラニンの含有量をフィードバックした。

結果と考察
図６に示すように、ヒト由来メラノサイトでは、インビトロでのメラニン生成のシミュレート過程に対するＳＰ－０３７の抑制活性は、陽性薬ＶＣ、コウジ酸及びヒドロキノンよりも顕著に高い。ツールメラノサイトでは、メラニン生成に対するＳＰ－０３７の抑制活性は、ＶＣ及びコウジ酸よりも顕著に高いが、ヒドロキノンよりもやや低い。

実施例３：ＳＰ－０３７の安全性評価
ａ．マウスの皮膚に対する長期毒性試験
試験方法
本実験は、昆明マウスを用いて行われた。ＳＰ－０３７は生理食塩水を用いて調製され、濃度はそれぞれ２．５％（質量体積比）、５％（質量体積比）、１０％（質量体積比）であった。それぞれ対照群、２．５％用量群、５％用量群、１０％用量群を構築した。ブランク群に１匹のマウス、各実験群に２匹のマウスがあった。背部皮膚塗布処理を実施した。具体的には、まず、脱毛クリームを用いてマウスの背部を脱毛し、脱毛して露出した皮膚に対応濃度の薬剤を毎日塗布し、３ヶ月連続して処理し、試験期間において、定期的に写真を取り、マウスの体重を記録し、白斑、その他の皮膚刺激性損傷又は中毒現象を引き起こしたかを観察した。

結果と考察
図７、８に示すように、マウス皮膚長期毒性実験では、所定濃度のＳＰ－０３７を６か月間連続塗布した期間、マウスの体重と皮膚の状況の変化は正常なマウスの成長パターンと同じであり、いずれも白斑、赤い腫れ等の他の皮膚刺激性損傷、又は痙攣、尾立ち、足の突っ張り、仰向け、死亡等の中毒症状が発生しなかった。長期毒性実験は、ＳＰ－０３７が１０％（質量体積比）用量下で白斑を引き起こすことがなく、皮膚刺激性及び毒性を有しないことを示している。

ｂ．ヒト皮膚刺激性評価
スキンケア分野でのＳＰ－０３７の応用をさらに開発するために、ＳＰ－０３７の安全性を保証しなければならない。本実験では、まず主成分が１０％ ＳＰ－０３７のゲル（脱イオン水で調製された２％カルボキシメチルセルロースナトリウム）を調製し、さらにボランティアを募集し、腕の皮膚でパッチテストを行い、その安全性を評価した。

結果と考察
図９に示すように、パッチテストの結果から、ＳＰ－０３７が皮膚に対して感作性がないことが分かった。実験過程中、ボランティアが刺激的な痛み、痒み等を感じることがなく、ＳＰ－０３７は非常に高い安全性を有することを示している。

実施例４：皮膚美白に対するＳＰ－０３７の改善効果の分析
分析方法
肌の色が濃いボランティアを合計３３人募集した。そのうち、３３人の年齢分布は２２－３８歳の間であった。３３人のボランティアをランダムにブランク対照群３人、ＳＰ－０３７群５人、ＶＣ群５人、コウジ酸群５人、チアミドール（ｔｈｉａｍｉｄｏｌ）群５人、ヒドロキノン群５人、及び３７７群５人の７群に分けた。ブランクゲル、及び主成分がそれぞれＳＰ－０３７、ＶＣ、コウジ酸、アミドール、ヒドロキノン、３７７のゲルを用意した。各群のボランティアに対して、左腕の内側を洗った後、対応するゲルを均一に塗布し、日に一回で４週間連続した。Ｄｅｒｍａｌａｂ（ダーマラボ）機器を用いてそれぞれ０日目、１４日目及び２８日目に肌色テストプローブにより腕内側の皮膚の特徴を検出し、メラニン及びＬ＊ａ＊ｂ値を読み取り、最終的にはデータを統計し、各成分の美白効果を分析した。

結果と考察
図１０及び図１１に示すように、皮膚測定試験の結果は、ＳＰ－０３７が皮膚へのメラニン沈着という問題を顕著に改善し、皮膚明度を向上できることを示している。その効果は、市販されている原料ＶＣ、コウジ酸、アミドール及びヒドロキノンよりも顕著に高かったが、３７７（フェニルエチルレゾルシノール）よりもやや低かった。ＳＰ－０３７は安全性が非常に高く、感作性及び刺激性がなく、誘導性メラニンの生成を細胞レベルで効果的に抑制することができる。さらなるボランティア測定実験の結果は、ＳＰ－０３７が皮膚へのメラニン沈着の改善及び皮膚明度の向上に対して理想的な効果を有することを示している。

以上、本発明を例示的に説明した。なお、本発明の趣旨から逸脱しない限り、いかなる簡単な変形、修正又は当業者が創造的な努力を費やす必要がない他の同等置換はいずれも本発明の保護範囲に含まれる。

Claims (6)

1. 皮膚美白外用剤の製造における式（Ｉ－１）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩の使用。
   
   

   
2. 前記化合物又はその薬学的に許容される塩は、皮膚美白外用剤に占める質量百分率が０．５％－３０％であることを特徴とする、請求項１に記載の使用。
3. 前記外用剤は、酸化防止剤、着色剤、脱色素剤、エモリエント、乳化剤、角質除去剤、香料、保湿剤、潤滑剤、薬品活性化剤、増湿剤、光安定剤、防腐剤、スキンケア剤、皮膚浸透促進剤、日焼け止め、安定剤、界面活性剤、又は増粘剤を含むことを特徴とする、請求項１に記載の使用。
4. 前記外用剤はスキンケア剤であり、前記スキンケア剤は、化粧水、エマルション、クリーム、美容液、又はフェイシャルマスクであることを特徴とする、請求項３に記載の使用。
5. 前記外用剤は、水含有洗液、油中水型又は水中油型エマルション、オイル又はオレイルアルコール洗液、又はゲルの形態で存在することを特徴とする、請求項３に記載の使用。
6. 式（Ｉ－１）で表される化合物は、
   ３，５－ジヒドロキシフェニル酢酸とボランテトラヒドロフランとをモル比１：（１．１－１．３）でテトラヒドロフランに溶解し、室温１５－２５℃の条件下で４－６時間反応させ、反応終了後、回転蒸発により溶媒を除去することで粗生成物が得られ、カラムクロマトグラフィーによって精製することにより、中間体２が得られるステップ１と、
   
   

   

   ステップ１で得られた中間体２と塩化ベンジルとを１：（１－１．２）のモル比でアセトン中で撹拌して溶解し、溶解終了後、中間体２と炭酸カリウムとのモル比が１：（１－１．２）、中間体２とヨウ化カリウムとのモル比が１：（０．１－０．２）であるように炭酸カリウム及びヨウ化カリウムを加え、還流下で１８－２０時間反応させ、溶媒を蒸発除去した後、残留物を水に入れ、塩酸を滴下してｐＨ７に調整し、酢酸エチルで抽出し、有機相から溶媒を蒸発除去した後、無水エタノールで再結晶化することにより、白色固体として中間体３が得られるステップ２と、
   
   

   

   ステップ２で得られた中間体３をジクロロメタンに溶解し、撹拌しながら、中間体３と中間体４とのモル比が１：（１．２－１．４）、中間体３と乾燥炭酸銀とのモル比が１：（０．６－０．７）であるように中間体４、分子篩２－３ｇ及び乾燥炭酸銀をこの順で加え、室温１５－２５℃の条件下で暗所で２４－３６時間反応させ、反応終了後に濾過し、濾過ケーキをジクロロメタンで洗浄し、濾液を濃縮することにより、中間体５が得られるステップ３と、
   
   

   

   ステップ３で得られた中間体５を無水メタノールに溶解し、ナトリウムメトキシドを加え、室温１５－２５℃で６－８時間撹拌し、酢酸でｐＨ６に調整した後に濾過し、濾液を減圧濃縮することにより、粘稠状物質が得られ、粘稠状物質にさらにメタノール、パラジウム炭素を加え、水素加圧の雰囲気で撹拌しながら４－６時間反応させ、最後にカラムクロマトグラフィーで精製することにより、式（Ｉ－１）の構造を有する最終製品が得られるステップ４と、
   
   

   

   を含む方法により製造されることを特徴とする、請求項１に記載の使用。

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