JP7094398B2 - 標本作製方法 - Google Patents

Description

本発明は、標本作製方法に関する。

顕微鏡観察等で用いられる観察標本は、一般に、スライドガラス（microscope slide）等とも称される光透過性のプレート上に組織片等の被観察物を載置することで作製される（特許文献１参照）。例えば、水等の液体をプレート上に滞留させて液体溜まりを形成した後、この液体溜まりに被観察物を載置することにより観察標本を作製することができる。

特開２００８－１５１６５７号公報

上記液体溜まりは、その流動に伴い被観察物を移動させてしまう可能性がある。そのため、観察標本の作製に際して上記液体溜まりに被観察物を載置した後においては、その被観察物をプレート表面に適切に定着させることが求められる。

本発明は、観察標本を確実かつ簡便に作製可能とすることを例示的目的とする。

本発明の一つの側面は標本作製方法に係り、前記標本作製方法は、
光透過性のプレート上に被観察物を載置することにより観察標本を作製する標本作製方法であって、
前記プレートをベースプレートの上に配置する配置工程と、
前記プレート上に滞留する液体溜まりの表面に前記被観察物を載置する載置工程と、
前記プレート上の前記液体溜まりの液体の量を前記プレートの一端部側において他端部側よりも多くし、前記被観察物を前記他端部の方から前記一端部の方に向かって順に前記プレートの表面に貼り付けて定着させる定着工程と、
を含み、
前記ベースプレートは、前記プレートが配置される部分の周縁部に第２の疎液部を備えており、
前記配置工程では、前記第２の疎液部に隣接するように前記プレートを配置し、
前記定着工程では、前記プレート上の前記液体溜まりの液体の前記一端部側への移動を前記第２の疎液部により規制しながら、該液体の液深が前記プレートの前記一端部側よりも前記他端部側の方が浅くなるように該液体を前記一端部側から排出して液位を低くする
ことを特徴とする。

本発明によれば、観察標本を確実に且つ簡便に作製可能となる。

ベースプレートの構成の上面模式図および断面模式図。 ベースプレート上にプレートを配置した構成の上面模式図および断面模式図。 標本作製方法の或る工程を説明するための上面模式図および断面模式図。 標本作製方法の或る工程を説明するための上面模式図および断面模式図。 標本作製方法の或る工程を説明するための上面模式図および断面模式図。 標本作製方法の或る工程を説明するための上面模式図および断面模式図。 標本作製方法の或る工程を説明するための上面模式図および断面模式図。 標本作製方法の或る工程を説明するための断面模式図。 ベースプレートに適用可能な疎液プレート部材の例および疎液プレート部材が適用された場合の被観察物の例を説明するための上面模式図。 ベースプレートに適用可能な疎液プレート部材の例および疎液プレート部材が適用された場合の被観察物の例を説明するための上面模式図。 ベースプレートに適用可能な疎液プレート部材の例疎液プレート部材が適用された場合の被観察物の例を説明するための上面模式図。 標本作製方法の或る工程を説明するための上面模式図および断面模式図。 標本作製方法の或る工程を説明するための上面模式図および断面模式図。 標本作製方法の或る工程を説明するための上面模式図および断面模式図。 標本作製方法の或る工程を説明するための上面模式図および断面模式図。 標本作製方法の或る工程を説明するための上面模式図および断面模式図。 標本作製方法の或る工程を説明するための断面模式図。 ベースプレートの構成の上面模式図および断面模式図。 標本作製方法の或る工程を説明するための上面模式図および断面模式図。 標本作製方法の或る工程を説明するための上面模式図および断面模式図。 ベースプレートの構成の上面模式図および断面模式図。 標本作製方法の或る工程を説明するための上面模式図および断面模式図。

以下、添付図面を参照して実施形態を詳しく説明する。尚、以下の実施形態は特許請求の範囲に係る発明を限定するものでなく、また実施形態で説明されている特徴の組み合わせの全てが発明に必須のものとは限らない。実施形態で説明されている複数の特徴うち二つ以上の特徴が任意に組み合わされてもよい。また、同一若しくは同様の構成には同一の参照番号を付し、重複した説明は省略する。

（第１実施形態）
図１Ａは、第１実施形態に係る標本作製方法に用いる工具の一つとして、ベースプレート３の構成を示す上面図（平面図）と、該上面図における線ｄ１－ｄ１での断面図（以下、単に「断面図」。本実施形態の他の断面図についても同様。）と、を並べて示す。ベースプレート３は、支持部３１および枠部３２を含む。支持部３１は、上面視において実質的に矩形形状を有しており、その一端部には孔３１１が設けられている。詳細については後述とするが、この孔３１１には、図１Ａに示されるように、液体排出用の排液機構４を設置可能であり、それにより支持部３１上の液体を排出可能となっている。

枠部３２は、支持部３１の上面から、ベースプレート３の三辺を取り囲むように設けられたＵ字形の壁体であり、支持部３１および枠部３２は一体に設けられる。枠部３２は、支持部３１の長手方向（図１Ａ中では左右方向）における一端部側（図１Ａ中では左側）の辺に位置する縁部３２Ｄと、縁部３２Ｄからそれぞれ延設される対向する縁部３２Ｓ１及び３２Ｓ２とを含む。支持部３１の長手方向における他端部側（図１Ａ中では右側）の辺には壁体は無く、枠部３２はこの部分において開放されている。また、縁部３２Ｄと支持部３１との境界部に、ベースプレート３を貫通する孔３１１が設けられる。孔３１１は、ベースプレート３の短手方向（図１Ａ中では上下方向）における縁部３２Ｄの中間位置に設けられることが好ましい。

このように、ベースプレート３において、Ｕ字形の枠部３２で囲まれた部分が載置面３１ｆとなる。言い換えると、載置面３１ｆは、縁部３２Ｄ、３２Ｓ１及び３２Ｓ２で形成される三方が枠部３２で閉塞され、それ以外の一方の部分はベースプレート３の外部に臨んでいる。尚、本実施形態においては、枠部３２と支持部３１とは一体成形されているものとするが、他の実施形態として、枠部３２の少なくとも一部は支持部３１とは別部材として構成されても良い。また、別部材を支持部３１に対して着脱自在に構成させてもよい。

詳細については後述とするが、枠部３２は、少なくとも表面が所定の液体と馴染み難い材料（疎液性ないし撥液性の材料）で構成されていればよく、本実施形態においては、枠部３２の表面は疎液性を有する材料で処理（例えば、コーティング処理）されている。例えば、上記液体として水を用いる場合には、枠部３２には、疎水性ないし撥水性を有するようにシリコン樹脂、フッ素樹脂等を用いたコーティングが施されればよい。上述の縁部３２Ｄ、３２Ｓ１及び３２Ｓ２は、それぞれ、疎液部３２Ｄ、３２Ｓ１及び３２Ｓ２とも表現可能である。なお、枠部３２を含むベースプレート３の全体を、疎液性を有する材料で構成し、載置面３１ｆに親液性を有する材料でコーティングを施すようにしてもよい。

尚、疎液性とは、或る上面における液体に対する性質を示す相対的なものであるが、典型的には、該上面における液滴の接触角が所定の条件を満たすか否かに基づいて決められうる。例えば、液滴の接触角をθ_Ｗとしたときに、例えば４５°＜θ_Ｗ、好適には６０°＜θ_Ｗを満たす場合に、疎液性を有するものと決められてもよい。

ベースプレート３は、このような構成により後述の所定のプレートを配置可能となっており、載置台、設置台、支持台あるいは標本作製用治具等とも表現可能である。

図１Ｂは、上記ベースプレート３の支持部３１における載置面３１ｆ上にプレート１を配置した態様を示す上面図、及び、その断面図である。プレート１は、上面視において実質的に矩形形状を有しており、ガラス等の光透過性の材料で構成される。詳細については後述とするが、このプレート１上に観察対象である被観察物を載置することにより所定の観察標本が作製される。本実施形態においては、プレート１は、被観察物を載置するための載置部１１と、識別情報等の所定情報を印字可能なフロスト部１２とを含む。

尚、被観察物は、典型的には、患者等の被検者から採取された組織片をパラフィン等で固形化し、その固形組織ブロックを薄くスライスすることで切り出された組織片の薄切等である。また、プレート１は、スライドガラス（microscope slide）、或いは、標本用プレート、被観察物載置用プレート、光学観察用プレート等とも表現可能である。

説明の容易化のため、図１Ｂに示されるように、プレート１のうち、ベースプレート３における排液機構４が設けられた側の一端部を部分Ｐ１とし、その反対側の他端部を部分Ｐ２とする。言い換えると、部分Ｐ１は、後述する排液の際に液体の流れる方向の下流側となる端部（排液下流側端部）であり、部分Ｐ２は、排液の際に液体の流れる方向の上流側となる端部（排液上流側端部）である。

図２Ａ～２Ｆは、本実施形態に係る標本作製方法における各工程の様子を示す。本方法は、ベースプレート３上にプレート１を配置する工程、プレート１上に液体溜まりを形成する工程、液体溜まり上に被観察物を載置する工程、及び、液体溜まりを除去しながら被観察物をプレート１に定着させる工程、に大きく分けられる。

図２Ａは、ベースプレート３を準備する工程の様子を示す上面図、及び、その断面図である。図２Ａの工程では、ベースプレート３に、排液機構４として吸引ノズル４１を設置する。吸引ノズル４１に設けられる不図示の吸引駆動機構が動作することで、後に形成される液体溜まりの液体が流路４２を介して吸引排出され、これにより吸引ノズル４１は該液体溜まりを除去することが可能である。尚、吸引ノズル４１の吸引駆動機構は、ユーザ（標本を作製する作業者）による操作入力により所望のタイミングでその動作が開始され、それにより吸引ノズル４１を介して液体の吸引が開始されるように構成される。

尚、支持部３１と枠部３２とが別部材として構成される場合には、この工程において、上記吸引ノズル４１の設置前または後に、枠部３２は外付け用の疎液プレート部材として支持部３１に対して配置されればよい。

図２Ｂは、図２Ａの工程で準備されたベースプレート３上にプレート１を配置する工程を示す上面図、及び、その断面図である。プレート１を載置面３１ｆに載せるとともに、プレート１を部分Ｐ１が縁部３２Ｄに近接するまでスライドさせ、これにより、ベースプレート３に対するプレート１のセットが完了する。このとき、流路４２は、プレート１上の空間と連通しており、これにより、吸引ノズル４１は、後に形成される液体溜まりの液体を吸引して該液体溜まりを除去可能となっている。尚、ここでは、フロスト部１２が排液上流側になるようにプレート１を配置するが、フロスト部１２を排液下流側としてもよい。

図２Ｃは、図２Ｂの工程で配置されたプレート１をベースプレート３と共に傾斜させてから該プレート１上に液体を供給する工程を示す上面図、及び、その断面図である。先ず、水平姿勢にあるベースプレート３およびプレート１を、図２Ｃに矢印で示す方向に傾ける（第１傾斜ステップ）。これにより、プレート１の端部Ｐ１の位置が、端部Ｐ２の位置よりも低くなる。この第１傾斜ステップにより、先ず、水平姿勢のプレート１が所定の傾斜角度（傾斜角θ１）で傾いた傾斜姿勢Ａ１とされる。このときのプレート１の傾斜角（プレート１表面（上面）と水平面とが成す角：θ１）は、例えば０．５～５［度］程度とすればよく、本実施形態では１［度］程度とする。ここで、第１傾斜ステップにおいてプレート１を傾けることは、端部Ｐ１側のみを下げること、端部Ｐ２側のみを上げること、及び、端部Ｐ１側を下げるとともに端部Ｐ２側を上げること、のいずれによって為されてもよい。

次に、給液ユニット９１を用いて傾斜姿勢Ａ１のプレート１上に液体を供給する。前述のとおり、ベースプレート３は疎液性の枠部３２を含むため、上記プレート１上に供給された液体は、枠部３２（の壁体の内周面）により供給された液体が堰き止められ、プレート１上の所望の領域に適切に滞留することとなり、上記プレート１上には液体溜まりＷ１が形成される。具体的には、供給された液体は、枠部３２の疎液効果によってはじかれてプレート１上に滞留し、滞留した液体の表面（被観察物が載置される面）が枠部３２の面部３２ｆの面より上方の位置になるように液体溜まりＷ１が形成される。プレート１が傾斜姿勢Ａ１であるため、液体溜まりＷ１の液体の深さ（液深）は、端部Ｐ１側よりも端部Ｐ２側において浅くなっている。液体には、後述の被観察物に対して実質的な化学的影響のない溶液ないし薬液が用いられればよく、本実施形態では純水が用いられるものとするが、他の実施形態として生理食塩水等が用いられてもよい。

図２Ｄは、図２Ｃの工程で形成された液体溜まりＷ１上に被観察物２を載置する工程を示す上面図、及び、その断面図である。ユーザは、所定の器具９２を用いて被観察物２を液体溜まりＷ１上（かつ載置部１１上方）に載置する。器具９２には、例えばピンセット等、被観察物２を取扱い可能なものが用いられればよい。このとき、上述のとおり、液体溜まりＷ１の液深は端部Ｐ１側よりも端部Ｐ２側において浅くなっているため、被観察物２は、少なくとも端部Ｐ２側においては傾斜姿勢Ａ１のプレート１表面に近接して配置される。或いは、被観察物２は液体溜まりＷ１に部分的に沈みうるため、被観察物２は、端部Ｐ２側の一部において傾斜姿勢Ａ１のプレート１表面に直接的に接触してもよい。

図２Ｅは、図２Ｄの工程で液体溜まりＷ１上に被観察物２が載置されたプレート１を更に傾斜させると共に該プレート１上の液体溜まりＷ１の液体の排出を開始する工程を示す上面図、及び、その断面図である。即ち、ユーザは、所望のタイミングでプレート１の傾斜角度を傾斜姿勢Ａ１よりも大きくし、プレート１は傾斜角度θ２（＞θ１）の傾斜姿勢Ａ２となる。これにより、液体溜まりＷ１の液体を排液機構４に導くと共に吸引ノズル４１の吸引駆動機構を動作制御し、吸引ノズル４１を介して該液体の吸引（排液）を開始する。

プレート１を傾斜姿勢Ａ１から傾斜姿勢Ａ２に傾ける動作と、吸引ノズル４１を介して液体を排出する動作とは、略同時に開始されてもよいが、開始のタイミングは必ずしも一致している必要はなく、少なくとも部分的に重複して実行されればよい。典型的には、液体溜まりＷ１の液体がベースプレート３の枠部３２上方から流出することがないように、プレート１を傾斜姿勢Ａ１から傾斜姿勢Ａ２に傾ける動作は、吸引ノズル４１からの液体の排出動作の開始後、所定時間が経過してから開始されてもよい。

ここで、プレート１を傾斜姿勢Ａ１から傾斜姿勢Ａ２に傾ける際、プレート１表面と平行な直線を軸心としてプレート１を回動させるとよい。本実施形態においては、図２Ｅの断面図に示されるように、側面視において、矩形形状のプレート１の短辺と平行な直線を回動軸心ＡＸ１としてプレート１を回動させる。プレート１の回動軸心ＡＸ１は、プレート１を傾斜させ液体を排出させる際にプレート１の表面に滞留する液体が排出口（本実施形態においては吸引ノズル４１）に向かって連続して移動可能となるように設定される。これにより、液体を吸引ノズル４１側へ連続して滞留させることが可能となり、更に、排液の量が少なくなっても排出口へ効率よく液体を案内することができ、排液処理を効率よく行うことができる。より好適には、側面視において、プレート１の回動軸心ＡＸ１をプレート１表面と同一平面上とし且つ流路４２（孔３１１）の中心を通る直線と直交する直線と平行に設定することにより、排液処理を更に効率よく行うことが可能となる。

図２Ｆは、図２Ｅの工程からプレート１を更に傾斜させて該プレート１上の液体溜まりＷ１の液体の排出を促進し完了させる迄の工程を示す断面図である。プレート１の傾斜角度を傾斜姿勢Ａ２よりも大きくし、プレート１は傾斜角度θ３（＞θ２）の傾斜姿勢Ａ３となる。この傾斜姿勢Ａ３の状態ＳＴ１１では、傾斜角度の増大及び／又は液体溜まりＷ１の液体の排出に伴い、該液体の液位は下がっていく（該液体が端部Ｐ２側から端部Ｐ１側へ移動していく）こととなる。これにより、液体溜まりＷ１上の被観察物２が端部Ｐ２側において傾斜姿勢Ａ３のプレート１表面に直接的に接触し、及び／又は、該接触している面積が大きくなっていくこととなる。一方、端部Ｐ１側においては、被観察物２は依然として液体溜まりＷ１上に位置する。

その後、プレート１の傾斜角度を傾斜姿勢Ａ３よりも大きくし、プレート１は傾斜角度θ４（＞θ３）の傾斜姿勢Ａ４となる。この傾斜姿勢Ａ４の状態ＳＴ１２においては、液体溜まりＷ１上の被観察物２が傾斜姿勢Ａ４のプレート１表面に接触している面積が更に大きくなる。それに伴い、該被観察物２にシワ、ヨレ等を生じさせることなく該被観察物２を該プレート１表面に貼り付けさせることができる。

更にその後、プレート１の傾斜角度を傾斜姿勢Ａ４よりも大きくし、プレート１は傾斜角度θ５（＞θ４）の傾斜姿勢Ａ５となる。この傾斜姿勢Ａ５の状態ＳＴ１３において、プレート１上の液体溜まりＷ１は適切に除去され、即ち、液体溜まりＷ１の液体の排出が完了し、観察標本ＳＰが作製されることとなる。液体の排出完了時のプレート１の傾斜角θ５は、例えば４０～６０［度］程度であり、本実施形態では４５［度］程度とする。

小括すると、図２Ｅ～図２Ｆの工程では、被観察物２が、端部Ｐ２の方から端部Ｐ１の方に向かって連続的にプレート１表面に貼り付いていく。これによって、最終的に、被観察物２を該プレート１表面に定着させることが可能となる。よって、上記標本作成方法によれば、プレート１上から不要な液体を排出させると共にプレート１表面に被観察物２を適切に定着可能となる。これにより、被観察物２のシワ、ヨレが解消された状態でプレート１の載置面に載置保持され、観察に最適な観察標本ＳＰの作製が可能となる。

また、本実施形態の排液動作として、第１傾斜ステップにおいて、ベースプレート３の姿勢を傾斜姿勢Ａ１から傾斜姿勢Ａ５にすることで行ったが、標本作成方法は、これに限定されるものではない。例えば、ベースプレート３の姿勢を傾斜姿勢Ａ１の状態に維持したまま、吸引ノズル４１の吸引力を徐々に大きくしつつ排液を行うことで同様の排液動作を行うこともできる。

以上の標本作成方法は、プレート１上の液体溜まりＷ１の表面に被観察物２を載置すること（図２Ｄの工程）と、この液体溜まりＷ１の液体の量を端部Ｐ１側において端部Ｐ２側よりも多くして被観察物２を端部Ｐ２の方から端部Ｐ１の方に向かって順にプレート１表面に貼り付けて定着させること（図２Ｅ～２Ｆの工程）と、を含む。このような標本作成方法によれば、排液上流側で被観察物２を部分的にプレート１表面に接触させた後、該被観察物２は排液上流側から排液下流側まで順にプレート表面に接触することとなる。その結果、被観察物２にシワ、ヨレ等を生じさせることなく被観察物２をプレート１上に定着させることが可能となり、即ち、観察標本ＳＰを確実に且つ簡便に作製可能となる。

本実施形態では、図２Ｅ～２Ｆの工程において、プレート１を傾斜させて液体溜まりＷ１の液体を端部Ｐ１側から排出し、それにより、被観察物２のシワ、ヨレ等を適切に解消することとした。そして、プレート１上の液体溜まりＷ１の液深が端部Ｐ１側よりも端部Ｐ２側の方が浅くなるように液体の排出を促進して液体溜まりＷ１の液位を低くする。この観点で、図２Ｅの工程におけるプレート１を更に傾斜させることは、液体溜まりＷ１の液体の量の変動開始（液体の排出開始）を要求することとも云える。このような手順によれば、被観察物２は、排液上流側から排液下流側に向かって連続的にプレート表面に接触することとなる。

本実施形態ではプレート１は長辺および短辺を有する矩形形状であり、プレート１を傾斜させる際、プレート１の短辺と平行な直線を回動軸としてプレート１を回動させることとしたが、長辺と平行な直線を回動軸としてもよい。即ち、液体の排出方向は、本実施形態ではプレート１の長辺方向と平行としたが、他の実施形態としてプレート１の短辺方向と平行であってもよく、換言すると、液体の排出方向が対辺方向となるように回動軸を設定してもよい。或いは、孔３１１の位置を縁部３２Ｓ１（又は３２Ｓ２）側に偏心させ、液体の排出方向が対角方向となるように回動軸を設定してもよい。

また、液体の排出には、本実施形態においては吸引ノズル４１を用いたが、代替的に、流路４２に設置可能な公知の弁の開閉操作により液体の排出を行うことも可能である。これにより、排液機構４の簡素化が可能となる場合がある。

（第１実施形態の変形例）
実施形態に係る標本作成方法を行うのに際して、ベースプレート３には外付け用の部材が付随的に適用されてもよい。図３Ａは、その一例として疎液プレート部材５をベースプレート３に適用した場合の構成を示す上面図である。疎液プレート部材５は、一定の厚みを有する板材であり、そのウラ面（ベースプレート３側の面）は支持部３１及び枠部３２に係合する形状に成形されており、即ち、枠部３２と対向する部分は、支持部３１と対向する部分に対して陥凹して肉薄となっている。疎液プレート部材５は、枠部３２同様、少なくとも一部が疎液性の材料で構成される。本実施形態においては、疎液プレート部材５は、上面視においてほぼ正方形状の板材であり、少なくともオモテ面およびウラ面、並びに、先端側面５１１（図３Ａ中では右端側面）の全面が疎液性を有する疎液部５１とされる。疎液プレート部材５は、先端側面５１１から基端側面（図３Ａ中では左端側面）に向かって延びる切り込み部５３を有する。この切り込み部５３は、その先端において排液機構４が設置される孔３１１を露出させるべく、所定の長さの切り込みに形成される。切り込み部５３の壁面５３１も疎液部５１とされる。

疎液プレート部材５は、上記構成により、観察標本ＳＰの作製の間、被観察物２の移動を規制する。これによって、被液体溜まりＷ１の液体の排出過程において、被観察物２はプレート１の長手方向における中央部に留まり続けることになる。その結果、被観察物２はプレート１の該中央部に定着される。なお、疎液プレート部材５の全体を疎液性の材料で構成しても良いことは言うまでもない。

図３Ａには、矢印で示されるように、その後の状態として、疎液プレート部材５が配置された上記ベースプレート３上にプレート１が載置され且つ該プレート１上の所定位置に被観察物２が載置された状態を更に示す。このようなベースプレート３を用いた場合、図２Ｅ～図２Ｆの工程においては、液体溜まりＷ１の液体の排出に伴う被観察物２の移動を適切に規制することが可能となる。

疎液プレート部材５は、観察標本ＳＰの作製の間における被観察物２の移動を規制可能に構成されればよい。よって、疎液プレート部材５に代替して、疎液プレート部材５’が用いられてもよい。疎液プレート部材５’は、上面の縁部の一部を疎液性とする疎液部５１と、疎液部５１以外の本体部５２とを含む。具体的には、本体部５２は、先端側面（図３Ａ中では右端側面）から基端側面（図３Ａ中では左端側面）に向かって延びる切り込み部５３を有する。切り込み部５３は、その先端において排液機構４が設置される孔３１１を露出させるべく、所定の長さの切り込みに形成される。疎液プレート部材５’は、先端側面、該先端側面周辺の表面および裏面、切り込み部５３の壁面５３１、並びに、壁面５３１周辺の表面および裏面が、疎液部５１とされる。本体部５２の構成材は、疎液部５１よりも疎液性が低い材料であればよく、疎液性が無い材料、親水性を有する材料等であってもよい。

図３Ｂは、他の例に係る疎液プレート部材５ｂがベースプレート３に配置された場合の構成を示す。疎液プレート部材５ｂは、上記疎液プレート部材５よりも長手方向に長く設けられると共に短手方向への被観察物（被観察物２ｂとする。）の移動を規制する切り込み拡幅部５４を有する。切り込み拡幅部５４は、切り込み部５３の途中から幅広に形成されたものである。このような形状によれば、切り込み部５３と切り込み拡幅部５４との間の段差部５５に被観察物２ｂが当接するとともに、切り込み拡幅部５４内に被観察物２ｂの一部が収容される。このように、切り込み拡幅部５４によって被観察物２ｂの一部がガイドされているため、被観察物２ｂの矢印Ａｙ方向の回転が抑制される。この回転抑制効果は、切り込み拡幅部５４の切り込み長さが長いほど高くなる。図３Ｂには、矢印で示されるように、その後の状態として、疎液プレート部材５ｂが配置された上記ベースプレート３上にプレート１が載置され且つ該プレート１上に比較的幅狭の被観察物２ｂが載置された状態を更に示す。即ち、図３Ｂの例によれば、枠部３２の縁部３２Ｓ１及び３２Ｓ２では対応できなかった被観察物２ｂの短手方向への移動を規制可能となる。

図３Ｃは、更に他の例に係る疎液プレート部材５ｃがベースプレート３に配置された場合の構成を示す。疎液プレート部材５ｃは、被観察物（被観察物２ｃとする。）の長手方向および短手方向における移動を完全に規制する拘束部５６を有する。拘束部５６は、疎液プレート部材５ｃのほぼ中央部に形成された開口であり、被観察物２ｃとほぼ同形状、同サイズに形成される。また、疎液プレート部材５ｃは、この拘束部５６の基端側面（図３Ｃ中では左端側面）から孔３１１に向かって延びる切り込み部５７を更に有する。切り込み部５７は、その先端において排液機構４が設置される孔３１１を露出させるべく、所定の長さの切り込みに形成される。図３Ｃには、矢印で示されるように、その後の状態として、疎液プレート部材５ｃが配置された上記ベースプレート３上にプレート１が載置され且つ該プレート１上に被観察物２および被観察物２ｂより小サイズの被観察物２ｃが載置された状態を示す。即ち、図３Ｃの例によれば、被観察物２ｃの何れの方向への移動も規制可能となる。尚、図３Ｃの例においては、被観察物２ｃは全周において疎液プレート部材５ｃに取り囲まれる形となるため、ベースプレート３の枠部３２は疎液性でなくてもよい。

このように、ベースプレート３に適用可能な外付け用の部材は疎液プレート部材５（又は５’）に限られるものではなく、複数の多様な形状の部材から被観察物２のサイズに応じた一つを選択的にベースプレート３に適用可能である。これにより、プレート１上の所望の領域に液体を滞留させることが可能となると共に、液体を排出する際に被観察物２等が所定位置から移動することを防止し、プレート１の表面の所望の位置に被観察物を最適に載置させることが可能となる。

被観察物２の移動を規制するという観点では、前述の枠部３２の一部／全部は、上記疎液プレート部材５等と一体に設けられてもよい。即ち、図２Ａの工程（ベースプレート３を準備する工程）においては、支持部３１に対して、被観察物２のサイズに応じた枠部３２を疎液プレート部材５等と共に配置してベースプレート３としてもよい。

（第２実施形態）
前述の第１実施形態に係る標本作製方法は、ベースプレート３とは異なる構成のベースプレートを用いることによっても実現可能である。図４Ａは、第２実施形態に係る標本作成方法に用いるベースプレート６を準備する工程の様子を示す上面図、及び、該上面図における線ｄ２－ｄ２での断面図（以下、単に「断面図」。本実施形態の他の断面図についても同様。）である。

ベースプレート６は、支持部６１および枠部６２を含む。第１実施形態（図１Ａ等参照）との関係では、支持部６１は、孔３１１が設けられていないことを除いて支持部３１同様とする。枠部６２は、支持部６１の上面からベースプレート６の三辺を取り囲むように（本実施形態では、排液下流側が開放された側となるように）設けられたＵ字形の壁体である。支持部６１および枠部６２は一体に設けられる。枠部６２は、縁部６２Ｕ、６２Ｓ１及び６２Ｓ２を含む。第１実施形態（図１Ａ等参照）との関係では、縁部６２Ｕは、縁部３２Ｄとは反対側に設けられ、一方、縁部６２Ｓ１及び６２Ｓ２は、縁部３２Ｓ１及び３２Ｓ２とそれぞれ同様とする。

即ち、支持部６１の長手方向における一端部側（図４Ａ中では左側）の辺に壁体は無く、枠部６２はこの部分において開放されている。また、本実施形態では、ベースプレート６においてＵ字形の枠部６２で囲まれた部分が載置面６１ｆとなる。言い換えると、支持部６１上において、縁部６２Ｕ、６２Ｓ１及び６２Ｓ２は相互に接してＵ字形の枠部６２を形成しており、枠部６２以外の部分が載置面６１ｆとなっている。その他、ここで省略される説明については第１実施形態の内容を援用可能とする。

図４Ｂは、図４Ａの工程で準備されたベースプレート６上にプレート１を配置する工程を示す上面図、及び、その断面図である。ここでは、フロスト部１２が排液下流側になるようにプレート１を配置するが、フロスト部１２を排液上流側としてもよい。第１実施形態同様、プレート１の一端部Ｐ１は排液下流側端部に対応し、その反対側（載置面６１ｆに対して端部Ｐ１の反対側）の他端部Ｐ２は排液上流側端部に対応する。

図４Ｃは、図４Ｂの工程で配置されたプレート１をベースプレート６と共に傾斜させて該プレート１上に液体を供給する工程を示す上面図、及び、その断面図である。先ず、水平姿勢にあるベースプレート６およびプレート１を、図４Ｃに矢印で示す方向に傾ける（第２傾斜ステップ）。これにより、プレート１の端部Ｐ１の位置が、端部Ｐ２の位置よりも高くなる。この第２傾斜ステップにより、先ず、水平姿勢のプレート１が所定の傾斜角度（傾斜角θ１１）で傾いた傾斜姿勢Ｂ１とされる。このときのプレート１の傾斜角θ１１は、例えば０．５～５［度］程度とすればよく、本実施形態では１［度］程度とする。ここで、第１傾斜ステップにおいてプレート１を傾けることは、端部Ｐ１側のみを上げること、端部Ｐ２側のみを下げること、及び、端部Ｐ１側を上げるとともに端部Ｐ２側を下げること、のいずれによって為されてもよい。

次に、給液ユニット９１を用いて傾斜姿勢Ｂ１のプレート１上に液体を供給する。これにより、プレート１上には液体溜まりＷ１が形成される。ここで、傾斜姿勢Ｂ１のプレート１においては、液体溜まりＷ１の液深は、端部Ｐ１側よりも端部Ｐ２側において深くなっている。

図４Ｄは、図４Ｃの工程で形成された上記液体溜まりＷ１上に被観察物２を載置する工程を示す上面図、及び、その断面図である。ユーザは、器具９２を用いて被観察物２を上記液体溜まりＷ１上（かつ載置部１１上方）に載置する。上述のとおり、液体溜まりＷ１の液深は端部Ｐ１側よりも端部Ｐ２側において深くなっているため、被観察物２は、端部Ｐ２側においては傾斜姿勢Ｂ１のプレート１表面から離間した状態と云える。

図４Ｅは、図４Ｄの工程で液体溜まりＷ１上に被観察物２が載置されたプレート１を傾斜させると共に該プレート１上の液体溜まりＷ１の液体の排出を開始する工程を示す上面図、及び、その断面図である。先ず、傾斜姿勢Ｂ１にあるベースプレート６およびプレート１を、図４Ｅに矢印で示す方向に傾ける（第３傾斜ステップ）。第３傾斜ステップでプレート１を傾ける方向は、第２傾斜ステップでプレート１を傾ける方向とは反対方向である。これにより、プレート１の端部Ｐ１の位置が、端部Ｐ２の位置よりも低くなる。この第３傾斜ステップにより、傾斜姿勢Ｂ１のプレート１が所定の傾斜角度（傾斜角θ１２）で傾いた傾斜姿勢Ｂ２とされる。

この工程においては、液体溜まりＷ１における端部Ｐ２の液深がほぼゼロになるまでは、作業者が器具９２を用いて被観察物２をプレート１側に向かって押圧（或いは固定）していてもよい。好適には、被観察物２が、端部Ｐ２側の一部においてプレート１表面に直接接触するまで、被観察物２をプレート１側に向かって押圧することが好ましい。

図４Ｆは、図４Ｅの工程からプレート１を更に傾斜させて該プレート１上の液体溜まりＷ１の液体の排出を促進し完了させる迄の工程を示す断面図である。プレート１の傾斜角度を傾斜姿勢Ｂ２よりも大きくし、プレート１は傾斜角度θ１３（＞θ１２）の傾斜姿勢Ｂ３となる。この傾斜姿勢Ｂ３の状態ＳＴ２１では、傾斜角度の増大及び／又は液体溜まりＷ１の液体の排出に伴い、該液体の液位は下がっていく（該液体が端部Ｐ２側から端部Ｐ１側へ移動していく）こととなる。これにより、液体溜まりＷ１上の被観察物２が端部Ｐ２側において傾斜姿勢Ｂ３のプレート１表面に直接的に接触し、及び／又は、該接触している面積が大きくなっていくこととなる。一方、端部Ｐ１側においては、被観察物２は依然として液体溜まりＷ１上に位置する。尚、この工程においては、被観察物２が少なくとも排液上流側において部分的にプレート表面に定着しているため、ユーザは被観察物２から器具９２を離してもよい。

その後、プレート１の傾斜角度を傾斜姿勢Ｂ３よりも大きくし、プレート１は傾斜角度θ１４（＞θ１３）の傾斜姿勢Ｂ４となる。この傾斜姿勢Ｂ４の状態ＳＴ２２においては、液体溜まりＷ１上の被観察物２が傾斜姿勢Ｂ４のプレート１表面に接触している面積が更に大きくなる。それに伴い、該被観察物２にシワ、ヨレ等を生じさせることなく該被観察物２を該プレート１表面に貼り付けさせることができる。

更にその後、プレート１の傾斜角度を傾斜姿勢Ｂ４よりも大きくし、プレート１は傾斜角度θ１５（＞θ１４）の傾斜姿勢Ｂ５となる。この傾斜姿勢Ｂ５の状態ＳＴ２３において、プレート１上の液体溜まりＷ１は適切に除去され、即ち、液体溜まりＷ１の液体の排出が完了し、観察標本ＳＰが作製されることとなる。液体の排出完了時のプレート１の傾斜角は、例えば４０～６０［度］程度であり、本実施形態では５５［度］程度とする。

小括すると、図４Ｅおよび図４Ｆの工程では、被観察物２が、端部Ｐ２の方から端部Ｐ１の方に向かって連続的にプレート１表面に貼り付いていく。これによって、最終的に、被観察物２を該プレート１表面に均一に、かつ、シワやヨレなどが無く密着させた状態で定着させることが可能となる。よって、上記標本作成方法によっても被観察物２のシワ、ヨレが解消された状態でプレート１の載置面に載置保持され、観察に最適な観察標本ＳＰの作製が可能であり、前述の第１実施形態同様の効果が得られる。尚、本実施形態においては、図４Ｅ～４Ｆの工程における上記傾斜姿勢のベースプレート６からプレート１が落下しないように、支持部６２表面にはプレート１が保持されるように表面加工が施されてもよく、または、不図示のプレート保持手段により保持されるようにしてもよい。

また、本実施形態では、第２傾斜ステップで端部Ｐ１が上方かつ端部Ｐ２が下方となるように傾斜させた後に、第３傾斜ステップで端部Ｐ１が下方かつ端部Ｐ２が上方となるように傾斜させる。これにより、液体が端部Ｐ２側に移動されてから端部Ｐ１側に移動される。その結果、被観察物２を確実に且つ簡便にプレート１に定着させることができる。

以上、本実施形態に係る標本作製方法によれば、第１実施形態と同様の効果が得られると共に、液体を端部Ｐ２側に移動させてから端部Ｐ１側に移動させることにより被観察物２を確実に且つ簡便にプレート１に定着させることができる。

（応用例）
上述の実施形態には多様な変更を加えることが可能であり、例えば、ベースプレート３又は６の構造に変更を加えることにより実施形態に係る標本作成方法を部分的に変更することも可能である。

図５Ａは、第１実施形態に係る標本作成方法に使用可能な他のベースプレートの一例として、ベースプレート３’の上面図、及び、該上面図における線ｄ１’－ｄ１’での断面図を示す。ベースプレート３’は、支持部３１に代替して、水平姿勢において上面が予め所定の傾斜角度（傾斜角θ３）で設けられた傾斜面となる支持部３１’を含んでいる、という点で、第１実施形態のベースプレート３（図１Ａ等参照）と異なる。即ち、ベースプレート３’は、排液機構４を設置可能な孔３１１側の一端部からその反対側（載置面３１’ｆに対して該一端部の反対側）の他端部に向かって支持部３１’が徐々に厚くなる（支持部３１’の厚みが大きくなる）ように、設けられている。支持部３１’の上面の傾斜角θ３は１度程度とすれればよい。尚、枠部３２についてはベースプレート３（図１Ａ等参照）同様とする。

図５Ｂは、上記ベースプレート３’に吸引ノズル４１を設置した状態を示す上面図、及び、その断面図である。ここでは、吸引ノズル４１は、水平姿勢のベースプレート３’に対して略直交する姿勢で孔３１１に挿入され固定されるものとして示したが、上記支持部３１’の傾斜した上面に対して略直交する姿勢で固定されてもよい。

図５Ｃは、吸引ノズル４１が設置された上記ベースプレート３’上にプレート１を配置した状態を示す上面図、及び、その断面図である。上記ベースプレート３’によれば、水平姿勢において支持部３１’上面が予め所定の角度（傾斜角θ３）で設けられた傾斜面となっているため、プレート１は傾斜姿勢Ｃ１で配置されることとなる。そのため、第１実施形態のベースプレート３に替えて上記ベースプレート３’を用いる場合には、給液ユニット９１によりプレート１上に液体を供給する際、上記ベースプレート３’を傾斜させることなく（傾斜姿勢Ａ１とすることなく）、プレート１のみを傾斜姿勢Ｃ１に傾けた状態でプレート１上に吸引ノズル４１側の液深が深くなるように液体溜まりＷ１の形成が可能となる。即ち、上記ベースプレート３’を用いる場合には、図２Ｃの工程におけるベースプレート３の傾斜姿勢Ａ１への移動動作を省略することが可能となる、と云える。

図６Ａは、第２実施形態に係る標本作成方法に使用可能な他のベースプレートの一例として、ベースプレート６’の上面図、及び、該上面図における線ｄ２’－ｄ２’での断面図を示す。ベースプレート６’は、支持部６１に代替して、水平姿勢において上面が予め所定の角度で設けられた傾斜面となる支持部６１’を含んでいる、という点で、第２実施形態のベースプレート６（図４Ａ等参照）と異なる。即ち、ベースプレート６’は、縁部６２Ｕ側の一端部からその反対側（載置面６１’ｆに対して該一端部の反対側）の他端部に向かって支持部６１’が徐々に厚くなる（支持部６１’の厚みが大きくなる）ように、設けられている。支持部６１’の上面の傾斜角θ４は１度程度とすればよい。尚、枠部６２についてはベースプレート６（図４Ａ等参照）同様とする。

図６Ｂは、上記ベースプレート６’上にプレート１を配置した状態を示す上面図、及び、その断面図である。上記ベースプレート６’によれば、水平姿勢において支持部６１’上面が予め所定の角度（傾斜角θ４）で設けられた傾斜面となっているため、プレート１は傾斜姿勢Ｄ１で配置されることとなる。そのため、第２実施形態のベースプレート６に替えて上記ベースプレート６’を用いる場合には、給液ユニット９１によりプレート１上に液体を供給する際、上記ベースプレート６’を傾斜させることなく（傾斜姿勢Ｂ１とすることなく）、プレート１のみを傾斜姿勢Ｄ１に傾けた状態でプレート１上に縁部６２Ｕ側の液深が深くなるように液体溜まりＷ１の形成が可能となる。即ち、上記ベースプレート６’を用いる場合には、図４Ｃの工程における傾斜姿勢Ｂ１への移動動作を省略することが可能となる、と云える。

以上の説明においては、理解の容易化のため、各要素をその機能面に関連する名称で示したが、各要素は、実施形態で説明された内容を主機能として備えるものに限られるものではなく、それを補助的に備えるものであってもよい。

以上、本発明の一つの側面は標本作成方法に係り、前記標本作成方法は、光透過性のプレート（例えば１）上に被観察物（例えば２）を載置することにより観察標本（例えばＳＰ）を作製する標本作製方法であって、前記プレート上に滞留する液体溜まり（例えばＷ１）の表面に前記被観察物を載置する載置工程（例えば図２Ｄ、図４Ｄの工程）と、前記プレート上の前記液体溜まりの液体の量を前記プレートの一端部（例えばＰ１）側において他端部（例えばＰ２）側よりも多くし、前記被観察物を前記他端部の方から前記一端部の方に向かって順に前記プレートの表面に貼り付けて定着させる定着工程（例えば図２Ｅ～２Ｆ、図４Ｅ～４Ｆの工程）と、を含む
ことを特徴とする。これにより、排液上流側で被観察物をプレート表面に接触させた後、該被観察物は排液上流側から排液下流側まで順にプレート表面に接触することとなる。その結果、被観察物にシワ、ヨレ等を生じさせることなく被観察物をプレート上に定着させることが可能となり、即ち、観察標本を適切に作製可能となる。

発明は上記の実施形態に制限されるものではなく、発明の要旨の範囲内で、種々の変形・変更が可能である。

１：プレート、２：被観察物、ＳＰ：観察標本、Ｗ１：液体溜まり、Ｐ１：一端部（排液下流側端部）、Ｐ２：他端部（排液上流側端部）。

Claims (9)

1. 光透過性のプレート上に被観察物を載置することにより観察標本を作製する標本作製方法であって、
   前記プレートをベースプレートの上に配置する配置工程と、
   前記プレート上に滞留する液体溜まりの表面に前記被観察物を載置する載置工程と、
   前記プレート上の前記液体溜まりの液体の量を前記プレートの一端部側において他端部側よりも多くし、前記被観察物を前記他端部の方から前記一端部の方に向かって順に前記プレートの表面に貼り付けて定着させる定着工程と、
   を含み、
   前記ベースプレートは、前記プレートが配置される部分の周縁部に第２の疎液部を備えており、
   前記配置工程では、前記第２の疎液部に隣接するように前記プレートを配置し、
   前記定着工程では、前記プレート上の前記液体溜まりの液体の前記一端部側への移動を前記第２の疎液部により規制しながら、該液体の液深が前記プレートの前記一端部側よりも前記他端部側の方が浅くなるように該液体を前記一端部側から排出して液位を低くする
   ことを特徴とする標本作製方法。
2. 前記定着工程では、前記プレートを傾斜させて前記液体溜まりの液体を前記プレートの前記一端部側から排出する
   ことを特徴とする請求項１記載の標本作製方法。
3. 前記定着工程では、前記プレートの表面と平行な直線を軸心に前記プレートを所定方向に傾斜させる
   ことを特徴とする請求項２記載の標本作製方法。
4. 前記プレートは、互いに交差する第一の辺および第二の辺を含む矩形形状を有しており、
   前記定着工程では、前記第一の辺または前記第二の辺と平行な直線を軸心に前記プレートを傾斜させる
   ことを特徴とする請求項２または請求項３に記載の標本作製方法。
5. 前記配置工程では、前記ベースプレートの上に、少なくとも縁部に第１の疎液部を備える疎液プレート部材を配置し、
   前記定着工程では、前記液体の移動を前記第１の疎液部により規制しながら前記一端部側に向けて前記液体の排出を行う
   ことを特徴とする請求項１から請求項４の何れか１項記載の標本作製方法。
6. 前記配置工程では、前記プレートの前記一端部と、前記プレートの前記一端部及び前記他端部とは異なる側縁部とに前記第１の疎液部を備える前記疎液プレート部材を、前記ベースプレートに配置する
   ことを特徴とする請求項５記載の標本作製方法。
7. 前記ベースプレートは、前記プレートの前記一端部側に排液機構を有しており、
   前記定着工程では、前記プレート上の前記液体溜まりの液体を前記排液機構に導く
   ことを特徴とする請求項１から請求項６の何れか１項記載の標本作製方法。
8. 前記載置工程の後に前記液体溜まりの液体の量の変動開始を要求する工程を更に含む
   ことを特徴とする請求項１から請求項７の何れか１項記載の標本作製方法。
9. 前記プレート上の所定領域に前記液体を供給し、前記液体溜まりを形成する工程を更に含む
   ことを特徴とする請求項１から請求項８の何れか１項記載の標本作製方法。
   

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